Crossma

tch
(Uji silang
serasi)

Usi
Sukorini
Departemen Patologi Klinik & Kedokteran
Laboratorium FK UGM
Instalasi Laboratorium Klinik RSUP Dr.
Sardjito
Yogyakar
ta
201
6

Sejara
h

Crossmatching (XM)
Tujuan
Memilih komponen darah yang paling

aman untuk
transfusi
Dengan survival eritrosit yang dapat
diterima
Tanpa destruksi eritrosit pasien

Compatibility testing
Mengkonfirmasi kompatibilitas ABO
Mendeteksi clinically significant

unexpected antibodies

Uji silang serasi:

Merupakan tahap akhir dari uji
kompatibilitas

2
fungsi

XM

Cek akhir
kompatibilitas
ABO donor dan
pasien

Deteksi Ab
pasien

yang
berea
ksi dg
Ag
d
o
n
o
r

DONOR

NRESIPIE

Introduction

Golda
r:

ABO
Rh

Skrini
ng
antibo
di

Uji
silang
serasi

 XM

MAYOR
Eritro
sit
donor

Seru
m

XM

MINOR
Serum
donor

pasien

Eritro
sir
pasie
n

XM minor perlu
dihilangkan?
Jika unit pelayanan transfusi
sdh rutin mengerjakan uji
skrining antibodi pd donor,
maka XM minor dapat
dihilangkan
Ab insidensi rendah dlm
plasma donor: kemungkinan
tdk menyebabkan reaksi
transfusi karena akan terdilusi
oleh plasma resipien

Tahapan dalam
XM
Fase I

Fase II

Fase III

Fase I

serum + suspensi sel dalam salin

RT 25C (suhu kamar)
Deteksi Ab komplet IgM - ABO
Autoantibodi dingin
Alloantibodi dingin
(anti A1, anti M, anti P1, anti Lewis)

Fase II

Inkubasi 37C dalam bovine albumin

Rh
Sensitisasi Ab inkomplet
Keseimbangan interaksi Ag-Ab:15-60 menit
Inkubasi lbh panjang: sensitisasi makin lemah
Inkubasi dg Bovine Albumin 22%: 15 menit
Kadang Ab inkomplet sistim Rh akan terdeteksi
(antiD, anti-C, anti-E)
Ab inkomplet lain (K, k, Fya, Fyb, Jka, Jkb) onlyhanya
tersensitisasi, akan aglutinasi dengan reagensia
AHG

Fase III

fase Antiglobulin
mendeteksi Ab inkomplet dalam serum pasien
patients serum
= Indirect Coombs test

Antiglobulin
crossmatch
Inkubasi 37C
diakhiri dgn tes antiglobulin
Beberapa metode utk meingkatkan

sensitivitas tes
(meningkatakan reaksi Ag-Ab):
Albumin (ditambahkan sebelum inkubasi

37C), untuk meningkatkan reaktivitas beb

Ab
LISS (low ionic strength solution)
PEG (polyethylene glycol)
Reagen AHG: mengandung anti-IgG & anti

komplemen
Polybrene (P-AHG) : teknik XM cepat &
sensitif; deteksi
inkompatibilitas ABO dg hasil skrining Ab
negatif

Interpretasi
hasil
Labeling harus BENAR !!
Setelah sentrifugasi, supernatan

harus diamati
adanya hemolisis/aglutinasi (hasil +)
atau tidak
Dibaca dg latar belakang bercahaya
atau putih
Jika perlu gunakan kaca pembesar
Diresuspensi: wiggle & tilt (ideal)

 Violent shaking & tapping: dpt

menyebabkan
negatif palsu, aglutinasi lemah dpt
rusak
Jagged button: positif

Preparasi sel donor utk

XM
Pilih unit darah yang sesuai
Cek:
o
o
o
o

ID donor
Golongan darah
Tgl kadaluwarsa
Cek hemolisis, kebocoran

Lepas segmen dr kantong darah, dipotong

dan
tuangkan ke tabung yg telah dilabel

 Cuci eritrosit dgn salin 3x dan buat

suspensi eritrosit
5%

Prosedur XM
XM harus dilakukan pada fase:
o
o

Fase Salin pd suhu kamar

Fase AHG

XM dpt dilakukan dengan metode

konvensional
atau metode lebih baru:
o
o
o

Column Agglutination Technology

Solid Phase Technology
Electro Magnetic (EM) Technology

Immediate Spin Technique

(IST)

Hanya mendeteksi AB IgM, bereaksi pada 22oC.

Ab IgG signifikan scr klinik yg bereaksi pd 37C tidak terdeteksi

2 drops

Patient serum

22oC
Immediate centrifuge
1 drop, 5%

ABO incompatibility

Donor RBC

XM konvensional-AHG
Mendeteksi IgG
2 drops AHG
Mix properly

2 drops

N agglutination =
compatible

3 washes

Patient serum

1 drop, 5%

Donor RBC

Incubation
37oC, 1 hr

Centrifuge

Agglutination =
incompatible

Serological cross match

Phase

Detects

IS phase

ABO incompatibilities

AHG phase

Rh, Duffy, Kidd, others

Points to remember:
Preserve recipients serum & donor red cell segment for a week.
However, fresh sample of the patient is needed after 48 hrs of
transfusion
Do not withdraw sample from the IV line
Infuse red blood cells within 4 hours

Type and
Screen
Request

"

ABO/D phenotype

ABO/D phenotype

ABO/D phenotype

determined

determined

determined

No alloantibodies
detected

Alloantibody
detected

Record of previous
alloantibody

No further testing
needed

Identify antibody

Rule out or identify

additional antibodies

Perform immediate
spin or computer
cross match if
units are ordered

Perform a complete
crossmatch (immediat e
spin and antiglobulin)
on units that are
antigen-negative
for antibody

Perform a complete
crossmatch (immediate
spin and antiglobulin) on
units that are antigennegative for prior and new
alloantibody

"

Prinsip metode gel

Materi gel: sephadex

Aglutinasi ukuran besar
akan tetap berada di atas
Aglutinasi kecil/lbh kecil
akan bergerak ke bawah
(tgt ukuran)
Sel yg tidak beraglutinasi
akan langsung mengendap
di dasar gel

XM metode gel
Masukkan suspensi eritrosit Donor (XM mayor)
Tambahkan serum/plasma resipien
Inkubasi - 15 menit
Sentrifus dan baca hasil
(tanpa pencucian,
tanpa CCC)

SERUMRBC

O.

r.
v

1) DISPENSING

3) CENTRIFUGATION

2) INCUBA TIO N

4a) POSITIVE REACTIO N

4b) NEGATIVE REACTION

Reaksi positif kuat)

Reaksi lemah

Reaksi negatif

Skorin
g

Indikasi penggunaan teknologi

gel
di Blood
Bank

Imunohematologi
Pem. golongan darah ABO/Rh
Pem. golongan darah non ABO
Skrining (deteksi) dan identifikasi Ab
Uji kompatibilitas: XM

Problem penggunaan
metode
konvensional

>> teknisi
Hasil tergantung ketrampilan dan pengalaman
operator
Hasil kurang stabil
Jika pencucian eritrosit kurang bersih hasil
negatif palsu
Membutuhkan mikroskop
Membutuhkan sel kontrol utk cek hasil negatif

Membutuhkan waktu panjang

Kelebihan metode gel

Terstandard, terukur
Sederhana, mudah dan cepat
Hasil reaksi: stabil, dpt disimpan, dicopy, difoto
dan di-scan
Tanpa pencucian
Sampel sedikit
Pembacaan secara makro
Masa kadaluwarsa panjang
Samaph sedikit
Keamanan meningkat

Materi
al

1. ID
Dispensor
2 Mikropip 5 25
. 50
et ul
, ,
3 Yellow
. tip
4 Tube
.

5. Working
table
6. Incubator
37oC
7. IDcentrifuge

8.

Marker

Reagents

1. LISS/Coombs card
2. ID Diluent 2 (LISS)

LISS/COOMBS CARD

ID DILUENT 2 (MODIFIED LISS)

UTK

PEMBUATAN SUSPENSI
ERITROSIT

DIAMBIL ID-DILUENT 2: 0.5 ML (500 UL) KE

DALAM TAB 1

AMBIL 5 UL (PACKED CELLS) ATAU 10 UL WB

KE TAB 1 (MENGANDUNG IDDILUENT 2)

CAMPUR DAN MASUKKAN 50 UL

SUSPENSI SEL KE DALAM
MICROTUBES

TAMBAHKAN 25 UL SERUM/PLASMA KE
MICROTUBE

INCUBATION - 37OC -15

MINUTES

AFTER INCUBATION, CENTRIFUGE (10

MINUTES)

Pembacaan hasil