XV Jornadas de Divulgacin Tcnico Cientficas 2014 II Jornada Latinoamericana

Facultad de Ciencias Veterinarias Universidad Nacional de Rosario

Conservacin de Lactobacillus salivarius DSPV 001P de

origen aviar mediante liofilizacin
2

Blajman, Jesica Evelyn; Fusari, Marcia Luca; Astesana, Diego Martn;

1
1
Berisvil, Ayeln Patricia; Rossler, Eugenia; Zimmermann, Jorge Alberto;
1,2
1
1,2
Zbrun, Mara Virginia; Rosmini, Marcelo Ral;
Frizzo, Laureano
Sebastin
1
Departamento de Salud Pblica. Facultad de Ciencias Veterinarias,
2
Universidad Nacional del Litoral (UNL). Laboratorio de Anlisis de
Alimentos, Instituto de Ciencias Veterinarias del Litoral, Consejo Nacional
del
Investigaciones
Cientficas
y
Tcnicas
(ICIVET-CONICET).
jblajman@yahoo.com.ar
2

La propia definicin de probitico exige el mantenimiento de la viabilidad de

los microrganismos que lo integran durante todo el periodo de vida til del
3
producto, ya que esto condiciona su efectividad . Un mtodo de
conservacin a largo plazo de cepas probiticas es la liofilizacin, que
implica la remocin de agua de las clulas por sublimacin a baja presin.
Es importante evaluar el proceso de liofilizacin en cada cepa, ya que cada
microorganismo se comporta de manera diferente. La leche descremada es
comnmente utilizada como medio crioprotector porque previene el dao
celular estabilizando las biomolculas constituyentes de la membrana
celular, crea una estructura porosa en el producto liofilizado y contiene
1
protenas que proporcionan una cubierta protectora . El objetivo del
presente trabajo fue evaluar la conservacin de la cepa de origen aviar
2
potencialmente probitica Lactobacillus salivarius DSPV 001P durante 12
semanas a diferentes condiciones medio-ambientales (temperatura
ambiente, 4C y -20C) mediante el proceso de liofilizacin, con el fin de
asegurar la concentracin bacteriana ptima en el producto probitico final a
administrar a los pollos parrilleros. Un cultivo fresco puro crecido en caldo
MRS (de Man, Rogosa Sharpe) de la cepa L. salivarius DSPV 001P fue
o
centrifugado a 5.000g durante 10 min a 4 C. El sobrenadante fue
descartado y el sedimento bacteriano lavado dos veces con PBS. El
sedimento se resuspendi en leche descremada estril al 6%. La
suspensin se congel a -80C por 18 h y luego fue liofilizada. El lifilo
obtenido se dividi y almacen en tres tubos falcon estriles a temperatura
ambiente, 4C y -20C. Se realiz el recuento de clulas viables al da 0 y
cada 7 das durante un perodo de 12 semanas. Para ello se sembraron
diluciones decimales en Ringer en placas con agar MRS. Las mismas
fueron incubadas a 37C durante 72h. Todas las experiencias fueron
realizadas por triplicado. El anlisis estadstico fue ejecutado mediante el
programa SPSS, implementndose un ANOVA con medidas repetidas y
Test de Duncan. La concentracin de la cepa no se vio reducida tras el
proceso de liofilizacin. La viabilidad celular fue diferente en las distintas

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temperaturas evaluadas (P<0,001). La mayor viabilidad del lifilo se

present en muestras conservadas a -20C, con recuentos de 70,08 Log
UFC/ml a las 12 semanas. Estos valores estn por encima del nivel mnimo
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recomendado (6 LogUFC) para ser empleadas como cultivo en probiticos.
A 4C se observ una menor viabilidad, con recuentos de 5,20,17 Log
UFC/ml a las 12 semanas. Sin embargo, la concentracin celular
permaneci en valores superiores al NMR hasta las 11 semanas del
experimento. A temperatura ambiente la cepa registr la mayor prdida de
viabilidad, con recuentos de 3,60,25 Log UFC/ml el da 28 y prdida
absoluta de la viabilidad el da 35. Podemos concluir que las temperaturas
de almacenamiento ensayadas son un factor limitante en el mantenimiento
de la viabilidad de la cepa. La conservacin de la cepa liofilizada mediante
congelacin, fue la condicin que mostr mayor supervivencia del
microorganismo, superando el NMR hasta el final del estudio (12 semanas).
Este mtodo permitira asegurar una cantidad satisfactoria de
microorganismos en el producto probitico al momento de ser administrado
a los pollos parrilleros.
BIBLIOGRAFA
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Ciencias Biolgicas. Universidad Nacional del Litoral. Santa Fe, Argentina,
2010.
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