Resumen

El presente informe presenta informacin detallada de los efectos genotxicos de efluentes

generados en la industria minera y agrcola; estos contaminantes se encuentran de manera
afectan la dinmica de crecimiento de meristemos radiculares, ndice mittico, micro
ncleos, roturas cromosmicas de cebolla.
La prueba del Allium test se utiliza para evaluar el dao toxico y genotxico causado por
diferentes concentraciones de sulfato de hierro y cianuro de potasio
Palabras claves
Abstract
Palabras claves

INTRODUCCION
El proceso utilizado para extraer oro usando cianuro se desarroll en Escocia en 1887, y fue
utilizado por primera vez en la minera a gran escala comercial por la Nueva Zelanda
Corona Mines Company en Karangahake en 1889. El proceso de lixiviacin con cianuro es
una alternativa mucho ms segura a la extraccin con mercurio lquido que anteriormente
era el principal mtodo de separacin de oro del mineral. (Barrick, 2012)
En el proceso de extraccin de oro por parte de la industria minera, se usa cantidades
significativas de cianuro a concentraciones de entre 200 a 600 ppm, por lo cual predomina
en los efluentes de este tipo de industria, por lo que se constituye como un elemento
altamente nocivo para la flora y fauna en grandes concentraciones. (Barrick, 2012)
El cianuro es txico en grandes dosis y est estrictamente regulado. El cianuro en grandes
cantidades impide que el cuerpo pueda aprovechar el oxgeno, causando una asfixia que
puede ser mortal para los seres humanos y animales sin un rpido tratamiento de primeros
auxilios. Sin embargo, las personas y animales pueden desintoxicarse rpidamente si
consumen cantidades no letales de cianuro sin efectos negativos. De hecho, todos nosotros
excretamos pequeas dosis de cianuro de manera natural al orinar pues consumimos frutas
y alimentos que contienen cianuro.
En el presente trabajo, se investig el efecto txico, agudo y genotxico en un indicador
biolgico. La evaluacin estuvo referida al efecto txico de dos concentraciones distintas
de cianuro de potasio (KCN) y el posible uso de la prueba Allium test en programas de
monitoreo de efluentes industriales.

OBJETIVOS GENERALES

Evaluar el efecto genotxico de efluentes generados en la industria minera y agrcola; sobre

la dinmica de crecimiento de meristemos radiculares, ndice mittico, micro ncleos,
roturas cromosmicas de cebolla (Allium cepa).
OBJETIVOS ESPECFICOS
1. Evaluar los efectos txicos de los efluentes a diferentes concentraciones.
HIPOTESIS PRESENTADO PARA EL ESTUDIO
La accin

de los efluentes provenientes de la minera y agricultura producen dao

genotxico sobre los meristemos radiculares de Allium cepa.

METODOLOGIA
En el presente trabajo se emple el Allium test para evaluar el dao toxico y genotxico
causado por diferentes concentraciones de sulfato de hierro y cianuro de potasio. Se trabaj
con cianuro de potasio considerando que bajo esta forma el cianuro causa un fuerte impacto
negativo en la flora e interfiere en el proceso de desarrollo biolgico de esta. Se trabaj con
sulfato de hierro a grandes concentraciones porque se sabe que a esta cantidad interfiere en
la formacin de la cebolla.
Indicador biolgico
Se seleccion la macrophyta Allium cepa L. cebolla recomendada por la experta en
estudios biolgicos, margot bracamonte, para realizar estudios de genotoxicidad (Fiskejo,
1994; Shandu, 1991; Grand, 1982).
En la prueba se usaron bulbos de Allium cepa L por presentar un crecimiento rpido de la
raz, por tener una tasa cclica de reproduccin celular constante y porque sus clulas
meristemticas presentan cromosomas de gran tamao que permiten apreciar fcilmente las
alteraciones cromosmicas, lo cual favorece la observacin de los efectos genotxicos.

Agente qumico

En las pruebas se us sulfato de hierro y cianuro de potasio (KCN; para anlisis) como
agente txico. Las concentraciones de cianuro usadas en las pruebas simularon las
concentraciones que se presentan en los efluentes de minera, y fueron los siguientes: 40 y
200mg/L.
Desarrollo del bioensayo
El Allium test consiste en exponer los bulbos de cebolla frente a las concentraciones
evaluadas del agente qumico. Los efectos que se producen en las races del Allium cepa L,
son dos tipos:
-

Efectos txicos que impiden el crecimiento o producen la muerte de las clulas

meristemticas. Para observar el efecto txico macroscpico se us como indicador

el crecimiento de la raz, comparndolo con las races de las pruebas de control.

Efectos genotoxicos, que pueden producir efectos dainos en las siguientes
generaciones de clulas. Para estimar el grado y tipo de dao genotxico se estudi
el ndice mittico adems se observ el nmero y tipo de aberraciones
cromosmicas; comparndolos con los valores obtenidos en las pruebas de control.
Para observar el efecto genotxico se us microscopio ptico.

MATERIALES

7 cebollas con races largas

3 litros de agua destilada
Balanza elctrica
Luna de reloj
Esptula, pizeta
Fiola de 250 mL
7 frascos gerber de 250 mL
Microscopio ptico
Lminas y laminillas
Papel filtro

PROCEDIMIENTO
a- Preparacin del agente qumico a diferentes concentraciones
Iniciamos con el respectivo pesado del sulfato de hierro y del cianuro de potasio
a diferentes cantidades (0.01 y 0.05 g para cada uno); con ayuda de la balanza

electrnica. Seguidamente, con ayuda de la fiola de 250 mL, se procedi a diluir

estas cantidades en agua destilada.Se procedi con el llenado hasta la capacidad
mxima de 150 mL de los frascos con las diluciones.
b- Preparacin de los bulbos de Allium cepa L
Escogimos usar bulbos de 5 a 6 cm de dimetro, bajo una temperatura
aproximada de entre 18 a 20C.
Con ayuda de una cuchilla retiramos varias capas de la cebolla, limpiamos la
zona del aro situada en el primordio de la raz.
Antes de sumergir los bulbos limpios de Allium cepa en las diluciones del
agente qumico se homogeniz el crecimiento de las races en agua pura por un
periodo de 48 horas, de manera que se pueda evidenciar de forma confiable el
efecto inhibitorio del crecimiento del meristemo radicular de Allium cepa a
diferentes concentraciones de los compuestos.
c- Bioensayo
Los tubos de prueba fueron separados con las concentraciones de los
contaminantes (40 y 200 mg/L).
Los bulbos de Allium cepa L se colocaron en los frascos prueba que
previamente fueron llenados con el agente qumico; un bulbo en cada frasco.
Los frascos con los bulbos se deja a temperatura ambiente (aproximadamente
20C) durante 72 horas.