El Ciclo de Krebs

Hans Adolf Krebs

El ciclo de Krebs, o ciclo del cido ctrico o ciclo de los cidos tricarboxlicos, toma su nombre de su descubridor, Hans
Adolf Krebs, un bioqumico alemn premiado con el Nobel en el 1953.
Esta ruta metablica es la tercera etapa de la respiracin celular, el proceso de produccin de energa en las clulas.
Forma parte de la respiracin aerobia, es decir, se realiza en presencia de oxgeno y se desarrolla entre los procesos de
glicolisis y cadena respiratoria. Su fin es la obtencin de NADH, una molcula con poder reductor, que se utiliza para la
produccin de ATP mediante la cadena respiratoria.

La Transformacin del Piruvato en Acetil-CoA mediante Descarboxilacin Oxidativa.

La descarboxilacin oxidativa del piruvato es un paso anterior al propio ciclo de Krebs. Durante la glicolisis en el
citoplasma se produce el piruvato, que pasa por una etapa de transicin para convertirse en acetil-CoA para que pueda
entrar en el ciclo de Krebs.

El piruvato pasa del citoplasma en las mitocondrias donde el complejo enzimtico piruvato-deshidrogenasa lo convierte
en acetil-CoA. Esto ocurre mediante la eliminacin de una molcula de CO 2 (descarboxilacin) y la unin del resto aclico
obtenido a la coenzima A por oxidacin.
El esquema siguiente visualiza este proceso:

Descarboxilacin oxidativa del piruvato.

La transformacin del piruvato en acetil-CoA es de gran importancia ya que une la glicolisis y el ciclo de Krebs. Hay que
mencionar que los acetil-CoA que participan en l, no proceden solamente de la gliclisis, sino tambin de la oxidacin de
los cidos grasos y del catabolismo de los aminocidos. Resulta que el ciclo del cido ctrico une todas las rutas
catablicas de las sustancias que aportan energa para nuestro cuerpo.

El Ciclo de Krebs: Resumen.

En general, el ciclo consiste en la formacin de citrato, una molcula de 6 tomos de carbono, mediante la reaccin del
acetil-CoA (2 carbonos) con oxalacetato (4 carbonos). A continuacin, el citrato sufre algunas transformaciones qumicas
hasta llegar a formar otra vez oxalacetato (4 carbonos). La reduccin del nmero de tomos de carbono a lo largo del
ciclo ocurre porque el compuesto pierde dos grupos carboxlicos como CO 2, respectivamente en el paso 4 y 5. Todos los
pasos son catalizados por enzimas.

Entradas y Salidas.
En total, en el ciclo de Krebs entran 1 molcula de acetil-CoA y 3 molculas de H 2O. Despus de su transcurso
obtenemos:

1 molcula de Coenzima A

3 NADH/H+ a partir NAD+

1 molcula de GTP (guanosina trofosfato) a partir de GDP + P i

1 molcula de Coenzima Q reducida (ubiquinol)

Los NADH/H+ y el ubiquinol tienen un papel importante en la cadena respiratoria para la produccin de ATP, producto final
de la respiracin celular.

Las reacciones en concreto.

En el esquema de abajo, por medio de los colores es fcil observar cuntos tomos de carbono contiene el producto de
cada paso. Las molculas de color naranja contienen 6 carbonos, la verde (alfa-cetoglutarato) 5 carbonos y las molculas
azules 4. El acetil-CoA (rosa) tiene 2 tomos de carbono.

El Ciclo de Krebs.
Las enzimas que juegan un papel en el ciclo de Krebs y las reacciones que catalizan son las siguientes:

1 - La citrato sintetasa facilita la unin del oxalacetato con el resto aclico que lleva la coenzima A. Para ello se necesita
adicionalmente un H2O y al final la coenzima A queda libre.
2 y 3 La aconitasa cataliza la produccin de cis-aconitato quitndo un H 2O del citrato. Despus incorpora un H 2O al cisaconitato para formar isocitrato.
4 La isocitrato deshidrogenasa oxida el isocitrato (y reduce al mismo tiempo NAD +, produciendo NADH/H+). Como
producto intermedio de este paso resulta oxalosuccinato (no aparece en el esquema) que se convierte en alfacetoglutarato mediante la descarboxilacin. Resulta que el producto de este paso contiene 5 tomos de carbono en vez
de 6. El grupo carboxlico se libera en forma de dixido de carbono (CO 2).
5 El alfa-cetoglutarato se une con una coenzima A con la ayuda de la alfa-cetoglutarato-deshidrogenasa para formar
succinil-CoA. En este paso se libera otro CO 2, lo que deja el producto con 4 tomos de carbono. Adems se genera un
NADH/H+.
6 - Durante la reaccin 6 que es catalizada por la succinil-CoA-sintetasa, se genera el succinato y una molcula de GTP
(un compuesto rico en energa). La coenzima A queda libre otra vez para reacciones siguientes.
7 La succinato-deshidrogenasa procede a la oxidacin del succinato formando el fumarato. En la misma reaccin se
obtiene un FADH2, que a continuacin reduce a la coenzima Q (ubiquinona), generando QH 2 (ubiquinol).
8 Sigue la hidratacin del fumarato por la fumarasa y se obtiene el malato.
9 Finalmente, la malato-deshidrogenasa permite la oxidacin del malato, generando oxalacetato y otro NADH/H +.
Regenerado, el oxalacetato puede aceptar de nuevo un acetil-CoA y recorrer el ciclo, ganando ms energa en forma de
NADH/H+ y QH2 que puede ser utilizada en la cadena respiratoria.
El ciclo de Krebs no es solamente una ruta catablica sino que tambin juega un papel importante en varios procesos
anablicos (por eso se llama una va anfiblica). Por ejemplo, el oxalacetato y el alfa-cetoglutarato sirven como
precursores en la biosntesis de algunos aminocidos. Otros de los metabolitos del ciclo participan en la gluconeognesis
y en la sntesis de los cidos grasos.

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Introduccin
El ciclo de Krebs (tambin llamado ciclo del cido ctrico o ciclo de los cidos tricarboxlicos) es una ruta metablica, es decir, una
sucesin de reacciones qumicas, que forma parte de la respiracin celular en todas las clulas aerbicas. En clulas eucariotas se
realiza en la mitocondria. En las procariotas, el ciclo de Krebs se realiza en el citoplasma, especficamente en el citosol.
En organismos aerbicos, el ciclo de Krebs es parte de la va catablica que realiza la oxidacin de glcidos, cidos grasos y
aminocidos hasta producir CO2, liberando energa en forma utilizable (poder reductor y GTP).
El metabolismo oxidativo de glcidos, grasas y protenas frecuentemente se divide en tres etapas, de las cuales, el ciclo de Krebs
supone la segunda. En la primera etapa, los carbonos de estas macromolculas dan lugar a molculas de acetil-CoA de dos carbonos, e
incluye las vas catablicas de aminocidos (p. ej. desaminacin oxidativa), la beta oxidacin de cidos grasos y la gluclisis. La
tercera etapa es la fosforilacin oxidativa, en la cual el poder reductor (NADH y FADH2) generado se emplea para la sntesis de ATP
segn la teora del acomplamiento quimiosmtico.
El ciclo de Krebs tambin proporciona precursores para muchas biomolculas, como ciertos aminocidos. Por ello se considera una va
anfiblica, es decir, catablica y anablica al mismo tiempo.
El Ciclo de Krebs fue descubierto el por el alemn Hans Adolf Krebs, quien obtuvo el Premio Nobel

Marco terico
El metabolismo comprende una serie de transformaciones qumicas y procesos energticos que ocurren en el ser vivo. Para que
sucedan cada una de esas transformaciones se necesitan enzimas que originen sustancias que sean a su vez productos de otras
reacciones. El conjunto de reacciones qumicas y enzimticas se denomina ruta o va metablica. El metabolismo se divide en:

El catabolismo es el metabolismo de degradacin de sustancias con liberacin de energa.

El anabolismo es el metabolismo de construccin de sustancias complejas con necesidad de energa en el proceso.
En las rutas metablicas se necesitan numerosas y especficas molculas que van conformando los pasos y productos intermedios de
las rutas. Pero, adems, son necesarios varios tipos de molculas indispensables para su desarrollo final:

1. metabolitos (molculas que ingresan en la ruta para su degradacin o para participar en la sntesis de otras sustancias ms
complejas),

2. nucletidos (molculas que permiten la oxidacin y reduccin de los metabolitos),

3. molculas energticas (ATP y GTP o la Coenzima A que, al almacenar o desprender fosfato de sus molculas, liberan o
almacenan energa),

4. molculas ambientales (oxgeno, agua, dixido de carbono, etc. que se encuentran al comienzo o final de algn proceso
metablico).

REACCIONES DEL CICLO DE KREBS

El ciclo de Krebs tiene lugar en la matriz mitocondrial en eucariota
El acetil-CoA (Acetil Coenzima A) es el principal precursor del ciclo. El cido ctrico (6 carbonos) o citrato se regenera en cada ciclo
por condensacin de un acetil-CoA (2 carbonos) con una molcula de oxaloacetato (4 carbonos). El citrato produce en cada ciclo una
molcula de oxaloacetato y dos CO2, por lo que el balance neto del ciclo es:

Los dos carbonos del Acetil-CoA son oxidados a CO2, y la energa que estaba acumulada es liberada en forma de energa qumica:
GTP y poder reductor (electrones de alto potencial): NADH y FADH2. NADH y FADH2 son coenzimas (molculas que se unen a
enzimas) capaces de acumular la energa en forma de poder reductor para su conversin en energa qumica en la fosforilacin
oxidativa.

El FADH2 de la succinato deshidrogenasa, al no poder desprenderse de la enzima, debe oxidarse nuevamente in situ. El FADH2 cede
sus dos hidrgenos a la ubiquinona (coenzima Q), que se reduce a ubiquinol (QH2) y abandona la enzima.

Etapas del ciclo de Krebs

Reaccin 1: Citrato sintasa (De oxalacetato a citrato)
El sitio activo de la enzima, activa el acetil-CoA para hacerlo afn a un centro carbonoso del oxalacetato. Como consecuencia de la
unin entre las dos molculas, el grupo tioster (CoA) se hidroliza, formando as la molcula de citrato.
La reaccin es sumamente exoergnica (?G'=-31.4 kJ/mol), motivo por el cual este paso es irreversible. El citrato producido por la
enzima, adems, es capaz de inhibir competitivamente la actividad de la enzima. Incluso estando la reaccin muy favorecida (porque
es exoergnica), la citrato sintasa puede ser perfectamente regulada. Este aspecto tiene una notable importancia biolgica, puesto que
permite una completa regulacin del ciclo de Krebs completo, convirtiendo a la enzima en una especie de marcapasos del ciclo.
Reaccin 2: Aconitasa (De citrato a isocitrato)
La aconitasa cataliza la isomerizacin del citrato a isocitrato, por la formacin de cis-aconitato. La enzima cataliza tambin la reaccin
inversa, pero en el ciclo de Krebs tal reaccin es unidireccional a causa de la ley de accin de masa: las concentraciones (en
condiciones estndar) de citrato (91%), del intermediario cis-aconitato (3%) y de isocitrato (6%), empujan decididamente la reaccin
hacia la produccin de isocitrato.
En el sitio activo de la enzima est presente un clster hierro-azufre que, junto a algunos residuos de aminocidos polares, liga el
sustrato. En concreto, la unin al sustrato se asegura por la presencia de un resto de serina, de arginina, de histidina y de aspartato, que
permiten slo la unin estereospecifica del citrato 1R,2S, rechazando la forma opuesta.
Reaccin 3: Isocitrato deshidrogenasa (De isocitrato a oxoglutarato)

La isocitrato deshidrogenasa mitocondrial es una enzima dependiente de la presencia de NAD+ y de Mn2+ o Mg2+. Inicialmente, la
enzima cataliza la oxidacin del isocitrato a oxalsuccinato, lo que genera una molcula de NADH a partir de NAD+. Sucesivamente, la
presencia de un in bivalente, que forma un complejo con los oxgenos del grupo carboxilo en posicin alfa, aumenta la
electronegatividad de esa regin molecular. Esto genera una reorganizacin de los electrones en la molcula, con la consiguiente rotura
de la unin entre el carbono en posicin gamma y el grupo carboxilo adyacente. De este modo se tiene una descarboxilacin, es decir,
la salida de una molcula de CO2, que conduce a la formacin de a-cetoglutarato, caracterizado por dos carboxilos en las extremidades
y una cetona en posicin alfa con respecto de uno de los dos grupos carboxilo.
Reaccin 4: a-cetoglutarato deshidrogenasa (De oxoglutarato a Succinil-CoA)
Despus de la conversin del isocitrato en a-cetoglutarato se produce una segunda reaccin de descarboxilacin oxidativa, que lleva a
la formacin de succinil CoA. La descarboxilacin oxidativa del a-chetoglutarato es muy parecida a la del piruvato, otro a-cetocido.
Ambas reacciones incluyen la descarboxilacin de un a-cetocido y la consiguiente produccin de una unin tioster a alta energa con
la coenzima A. Los complejos que catalizan tales reacciones son parecidos entre ellos.
La a-cetoglutarato deshidrogenasa (o, ms correctamente, oxoglutarato deshidrogenasa), est compuesta de tres enzimas diferentes:

Subunidad E1: las dos cetoglutarato deshidrogenasas.

Subunidad E2: la transuccinilasa.

(La subunidad E1 y E2 presentan una gran homologa con las de la piruvato deshidrogenasa.)

Subunidad E3: la dihidrolipoamida deshidrogenasa, que es el mismo polipptido presente en el otro complejo enzimtico.

Reaccin 5: Succinil-CoA sintetasa (De Succinil-CoA a succinato)

El succinil-CoA es un tioster a alta energa (su ?G' de hidrlisis est en unos -33.5 kJ mol-1, parecido al del ATP que es de -30.5 kJ
mol-1). La citrato sintasa se sirve de un intermediario con tal unin a alta energa para llevar a cabo la fusin entre una molcula con
dos tomos de carbono (acetil-CoA) y una con cuatro (oxalacetato). La enzima succinil-CoA sintetasa se sirve de tal energa para
fosforilar un nuclesido difosfato purinico como el GDP.
La energa procedente del tioster viene convertida en energa ligada a una unin fosfato. El primer paso de la reaccin genera un
nuevo intermediario a alta energa, conocido como succinil fosfato. Sucesivamente, una histidina presente en el sitio cataltico remueve
el fosfato de la molcula glucdica, generando el producto succinato y una molcula de fosfohistidina, que dona velozmente el fosfato
a un nuclesido difosfato, recargndolo a trifosfato. Se trata del nico paso del ciclo de Krebs en el que se produce una fosforilacin a
nivel de sustrato.
El GTP est implicado principalmente en las rutas de transduccin de seales, pero su papel en un proceso energtico como el ciclo de
Krebs es, en cambio, esencialmente trasladar grupos fosfato hacia el ATP, en una reaccin catalizada por la enzima nuclesido
difosfoquinasa.
Reaccin 6: Succinato deshidrogenasa (De succinato a fumarato)
La parte final del ciclo consiste en la reorganizacin de molculas a cuatro tomos de carbono hasta la regeneracin del oxalacetato.
Para que eso sea posible, el grupo metilo presente en el succinato tiene que convertirse en un carbonilo. Como ocurre en otras rutas,
por ejemplo en la beta oxidacin de los cidos grasos, tal conversin ocurre mediante tres pasos: una primera oxidacin, una
hidratacin y una segunda oxidacin. Estos tres pasos, adems de regenerar oxalacetato, permiten la extraccin ulterior de energa
mediante la formacin de FADH2 y NADH.
La primera reaccin de oxidacin es catalizada por el complejo enzimtico de la succinato deshidrogenasa, la nica enzima del ciclo
que tiene como aceptor de hidrgeno al FAD en vez de al NAD+. El FAD es enlazado de modo covalente a la enzima por un residuo
de histidina. La enzima se vale del FAD ya que la energa asociada a la reaccin no es suficiente para reducir el NAD+.

El complejo enzimtico tambin es el nico del ciclo que pasa dentro de la membrana mitocondrial. Tal posicin se debe a la
implicacin de la enzima en la cadena de transporte de los electrones. Los electrones pasados sobre el FAD se introducen directamente
en la cadena gracias a la unin estable entre la enzima y el cofactor mismo.
Reaccin 7: Fumarasa (De fumarato a L-malato)
La fumarasa cataliza la adicin en trans de un protn y un grupo OH- procedentes de una molcula de agua. La hidratacin del
fumarato produce L-malato.
Reaccin 8: Malato deshidrogenasa (De L-malato a oxalacetato)
La ltima reaccin del ciclo de Krebs consiste en la oxidacin del malato a oxalacetato. La reaccin, catalizada por la malato
deshidrogenasa, utiliza otra molcula de NAD+ como aceptor de hidrgeno, produciendo NADH.
La energa libre de Gibbs asociada con esta ltima reaccin es decididamente positiva, a diferencia de las otras del ciclo. La actividad
de la enzima es remolcada por el consumo de oxalacetato por parte de la citrato sintasa, y de NADH por parte de la cadena de
transporte de electrones.

Un balance posible de la degradacin total de la glucosa

Para calcular la energia que se obtiene de la glucosa se pueden establecer cuatro instancias en su degradacion: glucolisis,
decarboxilacion oxidativa del piruvato, ciclo de Krebs y cadena respiratoria.
La cantidad de ATP generado difiere segun las lanzaderas implicadas y el tipo de celula (procariota o eucariota). En el cuadro 1 se
plantea un balance en una celula eucariota, en la que opero solo la lanzadera del glicerol fosfato.

Conclusiones
La ltima fuente de energa de la que el metabolismo hace uso son las reservas de grasa.

2-Mientras haya reservas de glucgeno ser sta y no otra la fuente de energa utilizada.
3-Los alimentos con ndice glucmico alto provocan un rpido incremento de presencia glucmica en sangre.
4-El metabolismo advertido de la presencia de combustible rpido, deja relegada a un segundo plano la movilizacin de las reservas de
grasa (liplisis).
5-Por lo que para fomentar la liplisis se recurre a dietas con una reducida, pero correcta presencia de glcidos. Se pretende mantener
los azcares a niveles un tanto reducidos, con objeto de que el metabolismo basal eche mano de las indeseadas grasas corporales.

Bibliografa
Bioquimica, Mathews y van Holde, Editorial McGraw Hill Interamericana, 1999.
Links -Videos
http://www.youtube.com/watch?v=aCypoN3X7KQ&feature=related
http://www.youtube.com/watch?v=3W0sskfORjU&feature=related
http://www.youtube.com/watch?v=iXmw3fR8fh0

Leer ms: http://www.monografias.com/trabajos92/ciclo-krebs/ciclo-krebs.shtml#ixzz2W8nnTgyc

En condiciones anaerobias, las clulas animales reducen el piruvato a lactato, en las levaduras a etanol. Por el contrario, en
condiciones aerobias, el piruvato ingresa a la matriz mitocondrial y es convertido a acetil-Coenzima A (AcCoA) para llevar estos
Carbonos a su estado de oxidacin total en el ciclo del cido ctrico.

El ciclo del cido ctrico, considerado el embudo del metabolismo, consiste ocho reacciones enzimticas, todas ellas
mitocondriales en los eucariontes. El ciclo del cido ctrico es la va central del metabolismo aerobio: es la va oxidativa final en el
catabolismo de los carbohidratos, cidos grasos y aminocidos, adems es una fuente importante de intermediarios de vas
biosintticas. En muchas clulas la accin acoplada del ciclo del cido ctrico y la cadena de transporte de electrones son
responsables de la mayora de la energa producida.

Historia:

Si los libros cientficos fueran crnicas que narraran el tortuoso camino de la ciencia para viajar de una hiptesis a la
siguiente, desechando la primera y fortaleciendo la segunda, serian ms cercanos a las realidades del progreso cientfico que a la
ordenada narrativa que a menudo presentan. Estas realidades son perfectamente ilustradas por la historia y descubrimiento del ciclo
del cido ctrico.

La historia comienza a principios de la dcada de los 30s con el descubrimiento de que al agregar succinato, fumarato y
malato a msculos machacados incrementa la velocidad del consumo de Oxgeno. El oxaloacetato se incorpor a la lista de cidos

dicarboxlicos cuando se descubri que se poda formar en condiciones aerbicas a partir del piruvato. En 1935 A. Szent-Gyrgyi
propuso que ciertos pares de cidos dicarboxilicos eran interconvertidos por la accin de deshidrogenasas y que este proceso
estaba relacionado con la respiracin.

Aunque el cido ctrico fue descubierto en 1784 por Carl Wilhelm Scheele en el jugo de limn, y no fue hasta 1937 que los
cientficos entendieron su participacin en el metabolismo. Carl Martius y Franz Knoop mostraron que el cido ctrico es convertido
en alfa-cetoglutarato por medio del isocitrato. Se supo tambin que el alfa-cetoglutarato puede ser oxidado a succinato.

La formacin del citrato era la pieza faltante para poder armar completamente el rompecabezas metablico. El
descubrimiento que resolvi este rompecabezas y unific el metabolismo fue hecho en 1937 por Sir Hans Krebs y W.A. Johnson:
ellos mostraron que el citrato es derivado del piruvato y del oxaloacetato completando lo que se conoce como el ciclo del cido
ctrico. En 1953 Krebs gan el premio Nobel por estas importantes aportaciones.

Se necesito de una dcada para demostrar que el Ac-CoA, derivado del piruvato, es la fuente intermediaria de los fragmentos
de dos Carbonos que se combinan con el oxaloacetato para formar citrato.

En 1948 E.P. Kennedy y A. Lenhinger descubrieron que en mitocondrias aisladas de homogenados de hgado de rata, se
llevaban a cabo la oxidacin del piruvato y de todos los intermediarios del ciclo de Krebs a expensas de O 2, por tanto contienen
todas las enzimas necesarias para catalizar las reacciones del ciclo y del transporte energtico. Algunas de las enzimas que
participan en este proceso, estn en la matriz mitocondrial, otras unidas a la membrana interna. En algunos tejidos, en el citosol, se
encuentran la aconitasa (hidrolasa), la isocitrato deshidrogenasa (NADP+ dependiente), la fumarasa y la malato deshidrogenasa.

La respiracin es el proceso por medio del cual las clulas aerbicas obtienen energa a partir de la oxidacin de las
molculas combustibles por el oxgeno.

El ciclo de Krebs, es la ruta central comn para la degradacin de los restos acetilo (de 2 tomos de C) que derivan de los
glcidos, cidos grasos y aminocidos. Es una ruta universal, catalizada por un sistema multienzimtico que acepta los grupos
acetilo del acetil-CoA como combustible, degradndolo hasta CO2 y tomos de Hidrgeno, que son conducidos hasta el O2 que se
reduce para formar H2O (en la cadena de transporte de electrones).

Figura: las reacciones del ciclo de Krebs.

La oxidacin del piruvato a Ac-CoA es catalizada por el complejo multienzimtico de la piruvato deshidrogenasa (PDH), el
proceso que es muy complicado, se resume en:

Piruvato + NAD+ + CoA Ac-CoA + NADH + H+ + CO2

G= - 8.0kcal/mol

Esta reaccin irreversible en tejidos animales, no forma parte del ciclo de Krebs, pero constituye un paso obligatorio para la
incorporacin de los glcidos al ciclo.

El trabajo acoplado del ciclo del cido ctrico y la cadena de transporte de electrones es la mayor fuente de energa
metablica.

El metabolismo aerobio del piruvato por el ciclo del cido ctrico y la cadena de transporte de electrones produce mucha mas
energa que la simple conversin aerobia del piruvato a lactato o etanol . En condiciones aerobicas, el piruvato sufre una
descarboxilacion oxidativa con la formacin de AcCoA. El grupo acetilo del AcCoA es transferido al oxaloacetato para dar citrato

En reacciones subsecuentes, dos de los tomos de Carbono del citrato se oxidan a CO2 y el oxaloacetato es regenerado. La
reaccin neta de ciclo del cido ctrico tambin produce tres molculas de NADH, una de FADH 2 y una molcula del compuesto
trifosfato de guanosina (GTP) altamente energtico (en algunos organismos es directamente ATP) por cada molcula de AcCoA
oxidada

AcCoA + 3NAD+ + FAD + GDP + Pi + H2O CoASH + 3NADH + FADH2 + GTP + 2CO2 + 3H+

Las molculas de NADH y FADH2 son oxidadas en la cadena de transporte de electrones con la formacin de ATP en
la fosforilacin oxidativa. El ATP puede ser producido a partir del GTP va una fosforilacin a nivel de sustrato, que es
la transferencia de un grupo fosforilo de un compuesto rico en energa como el GTP, al ADP.

La conversin anaerbica de glucosa a lactato por la gluclisis ocurre con un cambio en la energa libre estndar de 30 kcal
-1

mol

D-glucosa

2Pi +

2ADP

2lactato +

2ATP

2H2O

La oxidacin completa de la glucosa a bioxido de Carbono y agua por la gluclisis, el ciclo del cido ctrico y la cadena de
transporte de electrones ocurre con un cambio en la energa libre estndar de 686 kcal mol-1, un cambio de mas de 20 veces:

C6H12O6 + 6O2 6CO2 + 6H2O

G= - 686 kcalmol.

Alrededor del 40 % de la energa liberada por la oxidacin de los alimentos es conservada en forma de ATP.
Aproximadamente tres molculas de ATP son producidas por cada molcula de NADH oxidada a NAD+ y aproximadamente dos
molculas de ATP son producidas por cada molcula de FADH2 oxidada a FAD por la cadena de transporte de electrones. Un
mximo de 38 molculas de ATP pueden ser producidas por la oxidacin completa de la glucosa

La enzima citrato sintasa fue descrita por Severo Ochoa quien la denomin como enzima condensante, pues lleva
a cabo una condensacin aldlica entre el metilo del Ac-CoA y el carbonilo del oxaloacetato, en la reaccin se hidroliza el
tioster y se forma el CoA-SH (succinil-CoA). Esta enzima tambin cataliza la formacin del monofluorocitrato a partir de
monofluoro-Ac-CoA. Esta reaccin es letal, pues el fluoroacetato no es txico, pero el fluorocitrato es inhibidor de la
aconitasa, siguiente enzima del ciclo. La citrato sintasa en inhibida por succinil-CoA, ATP, NADPH, steres de CoA y
cidos grasos de cadena larga (18C), no se sabe si esto ltimo tiene significado biolgico.

La reaccin de la citrato sintasa se divide en tres pasos, los dos primeros son concertados: 1.- formacin del anin
tioenolato; 2.- formacin del S-citril-CoA (una molcula quiral) y 3.- formacin de citrato y liberacin de CoASH.

Figura: representacin de la transformacin del oxaloacetato en citrato.

La aconitasa cataliza la interconversin entre estos ismeros. La enzima contiene Fe(II) y necesita un tiol como
cistena o glutatin (Glu-Cys-Gly) para efectuar la reaccin. Cataliza la adicin reversible de H 2O al doble enlace del cido
cis-acontico, el H y el OH del agua siempre se acoplan en posicin trans entre ellos a travs de la formacin del
intermediario cis-aconitato.

Regresa a las reacciones del ciclo de Krebs

Es una descarboxilacin oxidativa del isocitrato para formar -ceto(oxo)glutarato y la generacin de la primera
molcula de CO2 y NADH del ciclo. La enzima que cataliza la reaccin es la isocitrato deshidrogenasa, que existe en dos

isoformas, una dependiente de NAD+ que slo se encuentra en mitocondria y otra dependiente de NADP + que tambin
est en citoplasma.

La enzima dependiente de NAD+ es el catalizador principal de la va, necesita ADP como modulador positivo, as
como Mg2+. Es un homooctmero de 380,000 que es inhibido por NADH y ATP. La isocitrato deshidrogenasa dependiente
de NADP+ no es alostrica.

En animales, es una oxidacin irreversible del -ceto(oxo)glutarato, proceso catalizado por el complejo de la ceto(oxo)glutarato deshidrogenasa que consiste en la descarboxilacin oxidativa de un cetocido (-ceto(oxo)glutarato),
liberando el segundo CO2 y NADH del ciclo del cido ctrico. El proceso en general recuerda la reaccin catalizada por el
complejo multienzimtico de la piruvato deshidrogenasa; en este caso las enzimas que forman el complejo son: cetoglutarato deshidrogenasa (E1), dihidrolipoil transsuccinolasa (E2) y dihidrolipoil deshidrogenasa (E3). La reaccin es
anloga a la oxidacin del piruvato a Ac-CoA y se produce por el mismo mecanismo, participan como coenzimas: PPi de
tiamina, cido lipico, CoA, FAD+, y NAD+;

Es una disociacin del succinil-CoA, la CoA no se pierde por simple hidrlisis, sino en una reaccin de
conservacin de la energa con el difosfato de guanosina y fsforo inorgnico.

La enzima es la succinil-CoA sintetasa (tambin llamada succinato tiocinasa), que sintetiza un enlace de alta
energa en el GTP. Se ha encontrado que el mecanismo se lleva por la fosforilacin de la enzima en una histidina, el
mecanismo de reaccin consiste de tres eventos:

1.- Succinil-CoA + Pi + Enzima (E) E-Succinil-P + CoA

2.- E-succinil-P E-P + succinato
3.- E-P + GDP E + GTP.

El GTP cede su P al ADP para formar ATP reaccin catalizada por la nuclesido difosfato cinasa, esta es una
fosforilacin a nivel de sustrato como la que cataliza la piruvato cinasa en la gluclisis.

La oxidacin del succinato es catalizada por la succinato deshidrogenasa, flavoprotena que contiene FAD unido
covalentemente.

FAD-ribitol-P-P-ribosa
I
Flavina

I
Adenina

Esta enzima est unida a la membrana interna mitocondrial, el FAD acta como un aceptor de hidrgenos en la
reaccin.

Esta enzima es una ferrosulfoprotena de 100,000 kDa, que contiene un FAD, 8 tomos de Fe y 8
un heterodmero. En la subunidad mayor (70,000 kDa), se encuentra el FAD, 4Fe y 4S; la otra subunidad
Da. La succinato deshidrogenasa es activada por succinato, fsforo inorgnico, ATP, y coenzima Q (CoQ)
otra parte, es inhibida por oxaloacetato, su actividad es mucho mayor que las dems enzimas del ciclo y
cadena respiratoria.

de azufre; es
es de 30,000
reducida. Por
que las de la

La hidratacin reversible del fumarato a L-malato es catalizada por la fumarasa, que es una enzima hidratasa.

La fumarasa tiene un peso molecular de 200,000 kDa, es un homotetrmero activo (sus monmero son inactivos
cuando se separan). Esta enzima es Inhibida por ATP, y es estereoespecfica para su substrato.

Es la ltima reaccin del ciclo. La malato deshidrogenasa NAD + dependiente cataliza la oxidacin del L-malato a
oxaloacetato. Es una enzima estereoespecfica, se encuentran 2 isoformas en animales, una mitocondrial y otra
citoplsmica.

Figura: Representacin de las transiciones moleculares que ocurren durante el ciclo de Krebs.

substrato(s)

enzima

productos

AcCoA + oxaloacetato + H2O

citrato + CoASH

-9.08

isocitrato

+3.18

citrato sintasa
citrato

aconitasa

isocitrato + NAD+

-cetoglutarato
+ NADH + CO2+ H+

isocitrato deshidrogenasa

-1.70

-cetoglutarato + CoASH + NAD+

succinil-CoA
+ NADH + CO2+ H+

-8.82

-cetoglutarato deshidrogenasa

succinil-CoA + GDP + Pi

succinato + GTP +
CoASH

-2.12

fumarato + FADH2

L-malato

-0.88

oxaloacetato

+6.69

succinil-CoA sintasa

Succinato + FAD

succinato deshidrogenasa

Fumarato + H2O

fumarasa

L-malato + NAD+

malato deshidrogenasa

Tabla: las reacciones parciales del ciclo de los cidos tricarboxlicos.

Las flechas rojas indican la posibilidad de reversibilidad del proceso. en kcalmol-1

Figura: representacin del ciclo de los cidos tricaboxlicos y su funcin en el metabolismo central.

Leucina

Arginina

Lisina

Glutamina

Fenilalanina
Glutamato
Triptofano

Histidina
Prolina

Tirosina

-cetoglutarato

isocitrato

Isoleucina
citrato
Acetoacetil-CoA

Metionina
Ciclo
del

Acetil-CoA

Treonina
Succinil-CoA

Valina

Acido Ctrico
Succinato
Oxaloacetato

Fenilalanina

Piruvato

Fumarato
Malato

Isoleucina

Alanina

Leucina

Cisteina

Asparagina

Triptofano

Glicina

Aspartato

Serina
Triptofano

Tirosina

Figura: incorporacin de los aminocidos al ciclo de los cidos tricarboxlicos.

La degradacin de glucosa que rinde 2 molculas de piruvato con la generacin de neta de 2 molculas ATP y 2 de NADH.
En condiciones anaerbicas, el piruvato es convertido a lactato (en levaduras a etanol) para reciclar el NADH. En condiciones
aerbicas, el NAD+ es regenerado a travs de la fosforilacin oxidativa. El control principal de la va se lleva a cabo en la
fosfofructocinasa 1 (PFK 1), activndola el AMP y el ADP (que varan de acuerdo al estado energtico del organismo); la enzima es
inhibida por ATP y citrato. La PFK es activada por fructosa-2.6-bisfosfato (F2,6P), cuya concentracin es regulada por los niveles de
glucagon, epinefrina y norepinefrina, a travs del cAMP. Los niveles de este metabolito son regulados inversamente en el hgado y el
msculo cardiaco: Un incremento de cAMP en hgado ocasiona un decremento en la concentracin de F2,6P y un incremento en
corazn.

Para ir a ms informacin sobre la gluclisis

El ciclo del cido ctrico oxida acetil-CoA, producto comn de la degradacin de la glucosa, cidos grasos y
aminocidos cetognicos, a CO2 y H20 con la produccin de NADH y FADH 2. Muchos aminocidos glucognicos pueden
ser oxidados va el ciclo del cido ctrico por su conversin a uno de los intermediarios del ciclo. Las actividades de las
enzimas regulatorias del ciclo del cido ctrico (citrato sintasa, isocitrato deshidrogenasa y -cetoglutarato
deshidrogenasa), estn controladas por la disponibilidad de substratos y por inhibicin por retroalimentacin de
intermediarios del ciclo.

Los cidos grasos se rompen en unidades de C 2 a travs de la -oxidacin formando acetil-CoA, y son sintetizados
a partir de esta molcula en una va diferente. La actividad de -oxidacin vara con la concentracin de cidos grasos, la
cual a su vez depende de la actividad de la triacilglicerol lipasa sensible a hormonas que se encuentra en el tejido
adiposo. Esta enzima es estimulada por reacciones de fosforilacin/defosforilacin dependientes de cAMP, gracias a la
accin de glucagon y epinefrina, e inhibida por insulina. La sntesis de cidos grasos depende de la actividad de la acetilCoA carboxilasa, la cual es activada por citrato e inhibida por el producto de la va en palmitoil-CoA (que es el precursor
de cidos grasos de cadena mayor o insaturados). Esta va es regulada a largo plazo a travs de alteraciones en la
velocidad de sntesis de las enzimas, lo cual es estimulado por la insulina e inhibido por ayuno.

Es la va mitocondrial que oxida NADH y FADH2 con la sntesis acoplada de ATP. La velocidad de la fosforilacin
oxidativa (que est fuertemente coordinada con los flujos metablicos de la gluclisis y el ciclo del cido ctrico), es
dependiente de la concentracin de ATP, ADP y Pi.

El exceso de aminocidos puede ser degradado a intermediarios metablicos comunes. Muchas de estas vas comienzan
con la transaminacin de los aminocidos a sus correspondientes -ceto cidos con la eventual transferencia del grupo amino a la
urea a travs del ciclo de la urea. La leucina y la lisina son aminocidos cetognicos (slo pueden ser convertidos en acetil-CoA o
acetoacetato y por tanto no son precursores de la glucosa). Los aminocidos restantes, son glucognicos (pueden cuando menos en
parte ser convertidos en uno de los precursores de la glucosa piruvato, oxaloacetato, -cetoglutarato, succinil-CoA o fumarato-). 5
aminocidos son cetognicos y glucognicos. Los aminocidos esenciales son aquellos que los animales no pueden sintetizar,
deben ser obtenidos de la dieta (a travs de fuentes provenientes de plantas o microorganismos (levaduras y bacterias
principalmente)). La sntesis de los aminocidos no esenciales en animales es generalmente ms sencilla que la de los esenciales.

Esta va genera NADPH (para utilizarlo en la biosntesis reductora, as como precursor de los nucletidos, la ribosa-5-fosfato),
a travs de la oxidacin de G6P. La generacin de este metabolito es catalizada por la G6P deshidrogenasa, la cual es controlada
por los niveles de NADP+. La capacidad de las enzimas de discernir entre NADH (el cual es principalmente utilizado en el

metabolismo energtico) y NADPH permite que el metabolismo energtico y la biosntesis puedan ser regulados
independientemente.

El glucgeno, reserva de glucosa en los animales, se almacena principalmente en hgado y msculo. Su

conversin a glucosa-6-fosfato (G6P) para entrar a la gluclisis, es catalizada en parte por la glucgeno fosforilasa; el
camino inverso i.e. la sntesis, se lleva a cabo por la glucgeno sintasa. Estas enzimas estn reguladas recprocamente
a travs de reacciones de fosforilacin/defosforilacin, este proceso es el resultado de una cascada de fosforilacin que
responde a los niveles de glucagon y epinefrina a travs del CAMP.

Los mamferos pueden sintetizar glucosa a partir de una gama de precursores (piruvato, lactato, glicerol y aminocidos
glucognicos), la va ocurre principalmente en hgado y rin. Muchos de estos precursores son convertidos a oxaloacetato el cual a
su vez es transformado en fosfoenolpiruvato y de ah, a glucosa (muchas de las reacciones son inversas a las de la gluclisis). Los
pasos irreversibles de la gluclisis (PFK y hexoquinasa) son rodeados por reacciones hidrolticas catalizadas respectivamente por la
fructosa-1,6-bisfosfatasa (FBPasa) y glucosa-6-fosfatasa. Ambas enzimas pueden ser al menos parcialmente, activas
simultneamente lo que ocasiona un ciclo de substrato. Este ciclo es importante para regular la velocidad y direccin de flujo entre la
gluclisis y la gluconeognesis.

........ en general, la respiracin es solamente una lenta combustin de carbono e hidrogeno, lo cual es enteramente
similar a lo que ocurre en una lampara o vela, y por tanto, desde ese punto de vista, los animales que respiran son
cuerpos combustibles que se queman y consumen a ellos mismos.

Seguin, Armand y Lavoisier Antoine (1789).

Lavoisier, padre de la qumica moderna, haba demostrado que los animales consumen O 2 y generan CO2. A principios del
siglo XX, Otto Warburg inici estudios de enzimologa y quedo claro que las oxidaciones biolgicas son catalizadas por enzimas
intracelulares.

Introduccin

Mitocondria del griego: mitocondrias, thread + chondros, grnulo es el sitio donde se lleva a cabo la respiracin celular, i.e. el
metabolismo aerobio, en la mayora de los organismos eucariontes (con ncleo verdadero). Lo anterior fue demostrado por A.
Lenhinger y E. Kennedy en 1948. Este organelo descubierto en el siglo XIX, vara en tamao y forma dependiendo de la fuente y el
estado metablico, pero a menudo son elipsoides de aproximadamente 5 m de dimetro y 1 m de largo, del tamao de una
bacteria tpica. Una clula eucarionte tpica contiene mas de 2000 mitocondrias, lo que ocupa alrededor de la quinta parte del
volumen celular; esta cantidad es necesaria porque este organelo es la central energtica de la clula. Las clulas de mamferos que
contienen ms mitocondrias son las clulas cardiacas y los espermatozoides..

Las microscopias electrnicas de las mitocondrias, revelan la presencia de dos membranas, una de ellas lisa, en la parte
externa del organelo y otra muy plegada, a cada pliegue se le denomina cresta. El nmero de crestas vara con la actividad
respiratoria del tipo particular de clula en estudio. Lo anterior se debe a que las enzimas que llevan a cabo el transporte de
electrones y las fosforilacin oxidativa, estn unidas a esta membrana. En los hepatocitos, las mitocondrias tienen pocas crestas, en
las clulas cardiacas, hay muchas. Debido a lo anterior, en este organelo existen dos espacios, el intermembranal y la matriz. Las
enzimas respiratorias, forman parte tanto de la membrana interna, como de la matriz gelatinosa (50 % H 2O). Estas enzimas acoplan
la energa producida por la oxidacin de los nutrientes a la energa necesaria para sintetizar adenosn trifosfato (ATP), que despus
de transportarse a los diversos organelos, es utilizado como combustible en diversos procesos.

Las mitocondrias tienen ms similitudes con las bacterias que nicamente tamao y forma. La matriz mitocondrial, contiene
DNA, RNA y ribosomas que participan en la sntesis de algunos componentes mitocondrias (el resto es importado del citoplasma
despus de su expresin desde el ncleo). A pesar de esto, se reproducen por fisin binaria, adems el proceso respiratorio que
llevan a cabo, es muy semejante al que se observa en bacterias aerobias actuales. A partir de estas observaciones, Lynn Margulis
propuso que el origen de las mitocondrias modernas es a partir de la endosimbiosis (endo, dentro + simbiosis relacin biolgica con
beneficio mutuo) de bacterias aerobias con eucariontes anaerobios antiguos. Los nutrientes abastecidos por el eucarionte y
consumidos por la bacteria, fueron presumiblemente reembolsados con creces, debido a la alta eficiencia metablica oxidativa que el
procarionte (sin ncleo), le dio al eucarionte. La corroboracin de la teora endosimbitica se da en la amiba Pelomyxa palustris,

uno de los pocos eucariontes que carece de mitocondrias. Esta amiba, permanentemente hace endosimbiosis con bacterias
aerobias. El origen de diversos organelos tambin se puede explicar a partir de la teora endosimbitica.

A la mitocondria, se le considera la central energtica de las clulas, ah se lleva a cabo el metabolismo oxidativo de los
eucariontes: actividades de piruvato deshidrogenasa, enzimas del ciclo del cido ctrico, oxidacin de los cidos grasos y las
enzimas y protenas redox que llevan a cabo el transporte de electrones y la fosforilacin oxidativa.

Introduccin.

La transferencia de electrones en la cadena de transporte de electrones es energticamente favorable porque el NADH es un

poderoso donador de electrones y el Oxgeno molecular es un potente aceptor de electrones. De hecho el flujo neto de electrones
desde el NADH hasta el Oxgeno resulta en la sntesis de ATP. La fosforilacin oxidativa es una serie de eventos qumicos que llevan
a la sntesis de ATP:

ADP + Pi

sntesis del ATP

fosforilacin del ADP

El evento vital se lleva a cabo en la membrana plasmtica bacteriana, en la membrana interna mitocondrial y en los tilacoides
de los cloroplastos.

En la dcada de los 30s: Belitzer y Tsivakoba encontraron que el proceso de la fosforilacin de ADP en los tejidos animales
estaba asociado a la respiracin o consumo de O2. Mas adelante se describi que la respiracin se lleva a cabo en las mitocondrias.

H. Krebs encontr el ciclo de los cidos tricarboxlicos en el cual el piruvato se transforma en Ac-CoA que a su vez interviene en la
reduccin de NAD y en la posterior generacin del succinato.

Como ha sucedido muchas veces a los largo de la historia de la investigacin cientfica, dos investigadores reportaron
simultneamente un evento bioqumico. En 1937, Kalkar en Dinamarca y Belitzer en la antigua URSS, encontraron una correlacin
muy interesante entre la desaparicin del Pi y la respiracin. Estudiaron el efecto de la adicin de Pi (HPO34) a homogenados de
tejidos de mamferos; el experimento lo realizaron en presencia y ausencia de 0 2 o en presencia de cianuro (CN-). Reportaron que a
medida que se consuma el 02 el Pi desapareca del medio de reaccin y que cuando agregaban a un inhibidor del consumo de 0 2,
CN- e este caso, el proceso no se llevaba a cabo. Posteriormente se verific que la sntesis de ATP es una reaccin endergonica, en
la cual la respiracin o consumo de 02 acopladas a la fosforilacin del ADP, genera energa.

En los seres vivos la oxidacin de molculas orgnicas tiene como resultado el movimiento de protones (H+) del interior de la
matriz mitocondrial al espacio intermembranal en mitocondrias y cloroplastos o bien al citoplasma en las bacterias. La cadena de
transporte de electrones y la fosforilacin oxidativa estuvieron separadas conceptualmente por mucho tiempo. Las observaciones de
la formacin del ATP hacan pensar a los investigadores en buscaba un intermediario fosforilado de la reacin. Hasta que en 1961
Peter Mitchell propuso la hiptesis quimiosmtica en la cual propuso que el intermediario energtico necesario para la formacin del
ATP (o fosforilacin del ADP), era una diferencia en la concentracin de protones a travs de la membrana. Gracias a estas
observaciones Mitchell recibi en premio Nobel de Qumica en 1978. Muri al final de la dcada de los 80s.

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