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Universidad Nacional Autnoma de

Mxico
Escuela Nacional Preparatoria No. 6 Antonio
Caso
Prctica de Laboratorio No. 4 Tincin de

Gram
Biologa V
Grupo 654
Integrantes de equipo:
Carrillo Quintero Adolfo
Centeno Plata Fernando
Corona Mora Ulises
Duque Moreno Vctor Damin
Mendoza Vzquez Daniel Aldair

INTRODUCCIN
Desde tiempos inmemorables las bacterias interaccionan con los animales y
plantas del planeta Tierra, en algunos casos estas son benficas o simplemente
indiferentes al cuerpo del animal, pero tambin existen las bacterias patgenas y
estas producen infecciones dainas para el animal o planta husped.
La tincin de Gram, tambin conocida como coloracin de Gram, es una tcnica
de laboratorio que se utiliza rutinariamente en los estudios microbiolgicos de las
bacterias. Fue diseada por Christian Gram, un cientfico dans, en el ao 1884.
El objetivo de Gram era conseguir una prueba con la que fuera posible diferenciar
diferentes grupos de bacterias para as poder estudiarlas y clasificarlas. La prueba
result todo un xito y pronto se convirti en una tcnica muy til no solo para el
estudio de las bacterias, sino tambin para poder identificarlas rpidamente en
una infeccin y seleccionar el antibitico ms adecuado para tratarla.

OBJETIVO
Llevar a cabo la elaboracin de preparaciones de bacterias en las que se aplique
la tincin de Gram, con el fin de aprender los procedimientos que se requieren
para la tincin de una preparacin biolgica.

INFORMACIN PREVIA

Qu es un frotis?
Un frotis es un mecanismo cientfico que consiste en el extendido de una
gota de alguna sustancia en la superficie de un portaobjetos o de un
cubreobjetos, con el fin de analizarla posteriormente.

Qu utilidad se le da a la tincin de Gram?


Este tipo de tincin diferencial es empleado en bacteriologa para la
visualizacin de bacterias, sobre todo en muestras clnicas.

Ejemplos de bacterias grampositivas y gramnegativas.


-Grampositivas: S.aureus, S.epidermis, Enterococcus.
-Gramnegativas: E.coli, Salmonella, Enterobacter.

MATERIAL

Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Asa de siembra
Cubeta de tincin
Cultivo bacteriano
Pinzas
Frasco lavador
Mechero de alcohol
Papel filtro
Cristal violeta
Lugol
Alcohol
Safranina

DESARROLLO
1. Previamente deja un envase con caldo de pollo en un lugar tibio durante 48
horas.
2. Flamea un asa de siembra en un mechero, y limpia la zona de trabajo con
alcohol. Con un asa ya fra, toma una gota del cultivo bacteriano o caldo.
3. Coloca la gota del caldo en el centro del portaobjetos y extindela para
hacer un frotis.
4. Acerca el portaobjetos a la llama de un mechero cuidando que el
portaobjetos no se caliente demasiado, porque podra daarse la muestra.
Esto se prueba tocando por la parte de abajo el portaobjetos; al tacto no se
debe sentir caliente.
5. Pasa el portaobjetos otras tres veces por la llama del mechero. Djalo
enfriar entre una pasada y otra.
6. Tie con cristal violeta durante 1 minuto.
7. Lava con abundante agua, evitando que esta caiga directamente sobre la
muestra, para eliminar el exceso de colorante. Es importante cuidar que el
agua no caiga directamente sobre el frotis, porque podra arrastrarlo.
8. Cubre con lugol durante 1 minuto.
9. Escurre el exceso de lugol.
10. Decolora con una mezcla de alcohol-acetona en proporcin 70:30 por 30
segundos.
11. Lava con abundante agua.
12. Tie con safranina durante 30 segundos.
13. Lava con agua para eliminar el exceso de colorante.
14. Seca la preparacin al aire.
3

15. Observa al microscopio a 100x.

CUESTIONARIO
1. Qu condiciones favorecen la reproduccin de las bacterias?
R. Ciertos factores como la temperatura de 35 a 37 grados centgrados y
humedad.
2. Qu importancia tiene el uso de la tincin de Gram en el diagnstico de
enfermedades?
R. Permite identificar a la bacteria causante de la infeccin y as
contrarrestarla.
3. Qu estructura de la clula bacteriana se tie con los colorantes utilizados
en esta tcnica?
R. Se tie la pared bacteriana
4. Por qu las bacterias deben observarse con el aumento de 100x?
R. Por que solo as se pueden observar claramente

CONCLUSIN
Se puede concluir como exitosa la prueba de la tincin de Gram dando
resultados positivos en la observacin de las bacterias por medio del
microscopio permitiendo identificar los diferentes tipos de bacterias

BIBLIOGRAFA
- Velzquez,O.M. 2007. Temas Selectos de Biologa 1. Ed.St Editorial. Mxico.
-Novikoff, A. 1998. Estructura y dinmica celular, Ed. Iberoamericana, Mxico.
-http://www.webconsultas.com/pruebas-medicas/tincion-de-gram-13399

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