MICROSCOPIO Y CLASIFICACIN DE LOS MICROORGANISMOS

Introduccin.
La microbiologa es el estudio de los microorganismos y sus actividades, su forma,
estructura, reproduccin, fisiologa, metabolismo e identificacin, cmo estn
distribuidos en la naturaleza, sus relaciones con otros seres, los efectos benficos
o perjudiciales que ejercen sobre los humanos y las alteraciones fsicas y qumicas
que provocan en su medio.
La microbiologa empez cuando el hombre aprendi a pulir piezas de vidrio y a
combinarlas para lograr ampliaciones lo bastante grandes como para poder ver los
microbios. Aunque probablemente no fuera en ver las bacterias y protozoos,
Anthony van Leeuwenhoek fue el primero en comunicar sus observaciones con
descripciones y dibujos precisos. Leeuwenhoek observo entre otras cosas,
bacterias y protozoarios del agua de lluvia, en infusiones diversas y en su sarro
dental. Leeuwenhoek registr cuidadosamente sus observaciones en una serie de
cartas dirigidas a la British Royal Society, sus cartas fueron ledas con inters por
cientficos britnicos, pero es claro que la importancia de sus descubrimientos no
fue debidamente apreciada.
El estudio microscpico de los microrganismos proporciona datos fundamentales
para su identificacin, determinar su forma, tamao, reaccin a diferentes
colorantes y estructuras celulares; orienta al microbilogo cuando trata de aislar
microorganismos y permite establecer caractersticas como la pureza, presencia
de contaminantes, variedad o edad de una poblacin, entre otras cosas. Por ello,
el microscopio es uno de los instrumentos de mayor importancia en bacteriologa.
Su descubrimiento y desarrollo fueron los acontecimientos ms determinantes en
el florecimiento de la microbiologa.
Los microscopios pertenecen a dos clases, el de luz (ptico) y el electrnico,
segn el principio en el que se basa la amplificacin.
El microscopio mediante el cual la amplificacin se obtiene por medio de un
sistema de lentes pticos (microscopios de luz), abarca los siguientes tipos:
a)
b)
c)
d)
e)

Campo luminoso
Campo oscuro
Luz ultravioleta
Fluorescencia
Contraste de fases

El microscopio electrnico como su nombre lo indica, se basa en un haz de

electrones (en lugar de ondas luminosas) y un campo magntico para obtener la
imagen amplificada. La microscopia electrnica abarca dos tipos:
a) Microscopia electrnica de transmisin
b) Microscopia electrnica de barrido

Esta ltima presenta la caracterstica de dar una notable impresin tridimensional,

aunque su poder de resolucin es menor que al utilizar un microscopio electrnico
de transmisin.
Con respecto a la clasificacin de los seres vivos, desde su introduccin en 1959,
el sistema de clasificacin de R.H. Whittaker se ha convertido en uno de los ms
ampliamente utilizados en biologa. En este sistema, los diferentes organismos
vivos son colocados en uno de los cinco reinos con base en su tipo y arreglo
celular, asi como en sus requerimientos nutricionales, este sistema de clasificacin
cuenta con cinco reinos, los cuales son:
1. REINO ANIMAL
Son organismos pluricelulares eucariticos cuyo principal modo de nutricin es por
ingestin. Frecuentemente ocurre en ellos una considerable migracin y
reorganizacin celular de los tejidos durante el curso del desarrollo embrionario.
Su reproduccin es primariamente sexual.
2. REINO VEGETAL
Son organismos eucariotes pluricelulares fotosintticos que carecen de rganos
de motilidad.
3. REINO PROTISTA
Son organismos eucariotas que incluyen a los auttrofos fotosintticos
unicelulares y pluricelulares (algas) y a los hetertrofos unicelulares o colonias
simples (protozoarios). Sus modos de nutricin incluyen fotosntesis, ingestin y
absorcin.
4. REINO FUNGI
Son organismos eucariticos filamentosos o unicelulares (levaduras) hetertrofos,
parsitos o saprofitos y su nutricin es por absorcin. +
5. REINO MONERA
Son clulas procariotas, unicelulares cuyo modo de nutricin es
predominantemente hetertrofo, por absorcin, pero algunos grupos son
auttrofos foto o quimio sintticos. La reproduccin es primariamente asexual por
fisin binaria o gemacin pero en algunos ocurren intercambios genticos como
resultado de conjugacin.

Mtodo.
MICROSCOPIO

I.

CUIDADO DEL
COMPONETES

MICROSCOPIO

IDENTIFICACION

DE

SUS

Se recibi el microscopio, sujetndolo firmemente con ambas manos para

trasladarlo, con una mano se tom del brazo y con la otra por debajo del soporte o
pie, nunca se tom de lado o por la platina porque se pudo haber cado y daado
irremediablemente. Se deposit sobre la mesa con suavidad.
Se identific cada uno de los componentes del microscopio.
Se asegur que las piezas pticas se encontraran limpias, pero como no fue as,
se limpiaron cuidadosamente utilizando un trozo de papel seda. Los lentes que se
limpiaron fueron: oculares, objetivos y condensador, las cuales no se quitaron de
su lugar porque se poda introducir polvo en el interior del microscopio.
Se observaron los datos del microscopio y se identific: en el ocular, el coeficiente
de aumento; en el objetivo, el coeficiente de aumento, la apertura numrica, la
longitud mecnica del tubo y el espesor del portaobjeto a emplear.
Se calcul el total de amplificacin de aumentos que se pueden obtener con los
diferentes objetivos, se alineo el objetivo de menor aumento con el tubo del
microscopio y con el tornillo macromtrico se acerc al mximo la platina al
objetivo, observando lateralmente para que no llegaran a chocar.
II.

ILUMINACIN

Se conect el microscopio a la corriente elctrica y se encendi la lmpara, se

abri el diafragma y se subi el condensador. Se seleccion el objetivo de 10x, se
aline la distancia interpupilar (distancia entre los ojos) y se enfoc con el
macromtrico y micromtrico. Se cerr el diafragma y se descendi ligeramente el
condensador hasta que se vio ntido el borde del diafragma de campo.
III.

ENFOQUE DE LA PREPARACIN

Se coloc cada una de las preparaciones en la platina y con el tornillo

macromtrico se llev la platina lo ms cercano posible al objetivo (observando
lateralmente). Se observ por el ocular, se movi lentamente el tornillo
macromtrico para separar el objetivo de la preparacin hasta que apareci la
imagen del objeto, para mejorar la nitidez de la imagen se utiliz el tornillo
micromtrico y se disminuy la intensidad de la luz bajando ligeramente el voltaje
de la lmpara.
Se coloc el objeto de inters en el centro del campo del microscopio, moviendo
ligeramente la platina. Se gir el revlver y se aline el objetivo de 40x con el tubo
del microscopio. Se observ por el ocular y se verifico que la imagen
permaneciera enfocada, como no fue as nicamente se movi el tornillo
micromtrico.

Despus de retirar la preparacin, se limpiaron escrupulosamente las lentes del

microscopio con un trozo de papel de seda.

CLASIFICACIN DE LOS MICROORGANISMOS

I.

PROTOZOARIOS

Con una semana de anticipacin se coloc en un frasco pequeo de boca ancha

un poco de pasto con agua de charco a temperatura ambiente. El da de la
prctica se coloc una gota de esta agua en el porta y su puso el cubreobjetos, se
observ al microscopio en objetivos seco dbil y seco fuerte realizando las
descripciones y anotaciones de los organismos observados.
II.

HONGOS Y LEVADURAS

Se tom una muestra de hongo filamentoso de una fruta contaminada con un asa
micolgica y se coloc en el portaobjetos, se agreg una gota de azul de algodn
de lactofenol. Se desmenuz la muestra y se coloc un cubreobjetos,
posteriormente se observ al microscopio con el objetivo seco dbil y seco fuerte y
se realizaron las descripciones y anotaciones de los organismos observados.
Se realiz el mismo procedimiento anterior con el pulque, tomando una muestra
con una pipeta Pasteur.
III.

BACTERIAS

De la muestra de Yakult, se tom una muestra con el asa bacteriolgica y se hizo

una extensin delgada sobre el portaobjetos con una gota de lugol. Se observ al
microscopio con el objetivo seco dbil y seco fuerte identificndose a las bacterias
como puntos mviles y refringentes todo el tiempo, finalmente se realizaron las
descripciones y anotaciones de los organismos observados.
Se realizaron las mismas actividades para la muestra de heces de perico.

Resultados.

Imagen 1. Hifas y esporas de hongo filamentoso del durazno a 10x

(Izquierda) y 40x (Derecha) teido con Azul de algodn de lactofenol.

Imagen 2. Levaduras del pulque a 10x (Izquierda) y 40x (Derecha)

teidas con Azul de algodn de lactofenol.

Imagen 3. Lactobacilos del Yakult 10x (Izquierda) y 40x (Derecha)

teidos con Lugol.

Imagen 4. Bacterias de heces de perico 10x (Izquierda) y 40x (Derecha)

teidas con Lugol.

Imagen 5. Protozoarios de agua de charco 10x (Izquierda) y 40x

(Derecha) sin tincin.

Anlisis de resultados.
En la imagen 1. Se puede observar hifas del hongo nacidos en el durazno, los
hongos corresponden al reino fung. En estas hifas son cenocticas ya que sus
organelos estn en contacto. Tambin se puede observar algunas esporas de
estos hongos las cuales cumplen con la funcin de reproduccin. Con exactitud no
podramos determinar qu tipo de hongo es ya que requerimos de realizar ciertas
pruebas para descartar de la amplia variedad de hongos que pueden invadir a las
frutas.
En la imagen 2. Observamos levaduras que contiene el pulque teidas con Azul de
algodn de lactofenol, las levaduras corresponden al reino fung. Las levaduras
tiene por caracterstica ser unicelulares y en particular esta podran ser de
Saccharomyces cerevisiae, ya que estas levaduras son las causantes de la
fermentacin ya que esta produce etanol y bixido de carbono, lo que hace una
bebida alcohlica al pulque, para estar completamente seguros igual tendramos
que someter a ms pruebas una muestra de pulque.
En la Imagen 3. Observamos Lactobacilos del Yakult teidos con Lugo, los bacilos
corresponden al reino mnera, estos bacilos en particular sabemos que son
Lactobacillus casei Shirota la cual es una especie de bacteria anaerbica de
origen intestinal, productora de cido lctico, que se emplea en la industria lctea
en la elaboracin de alimentos prebiticos.
En la Imagen 4. Vimos Bacterias de heces de perico, las bacterias corresponden
al reino mnera. En esta muestra esperbamos observar pasitos, pero lo nico
que puede observarse son bacterias presentes en todas la heces fecales, es
complicado ver parsitos en la heces ya que este mtodo no las desenmascara

por completo a los parsitos o los quistes de estos, por lo cual no pudieron se
observados.
En la Imagen 5. Observamos protozoarios de agua de charco. Los protozoarios
son correspondiente del reino protista. Y en esta muestra en particular pudimos
observar con claridad, algunas Euglenas moverse por toda la muestra.
Conclusin.
La microscopia dentro de la microbiologa, es una de las herramientas de rutina de
mayor importancia, ya que la informacin que de aqu se deriva mediante las
observaciones con los diferentes objetivos nos proporcionan una idea confiable del
estado general de la morfologa del o los microorganismos que se observan y con
ello nos permite poder clasificarlos dentro de alguno de los cinco reinos de los
organismos vivos.
Sin embargo, para que esta herramienta nos sea de toda utilidad es necesario que
el microscopio utilizado este en buenas condiciones y que quien lo utilice conozca
y tenga los cuidados mnimos necesarios para su uso y manejo. Adems de que
tambin es necesario saber diferenciar entre los tipos de preparaciones que se
pueden realizar y el objetivo con el que se puede observar cada una de ellas.
Se cumpli el objetivo de reforzar conocimiento terico y prctico del uso y manejo
correctos del microscopio ptico compuesto y conocer su utilidad en el laboratorio
de microbiologa general I observando y clasificando diferentes microrganismos
presentes en muestras diversas.

Bibliografa.

Brook, T. Biologa de los microorganismos. Omega ediciones. Barcelona.

1978. 2 Ed.
Arellano, B. Gonzalez, J. Gutieeres, A. Martinez, M. Romero, G. Saucedo, J.
Manual de prcticas para el laboratorio de microbiologa general I.
Mxico: Facultad de estudios superiores Zaragoza. UNAM.
Ortega, P. Fernndez, I. Clasificacin de los seres vivos, los cinco reinos.
IES. Santiago Crisoln. 2014.
Yakult,(internet) (citado el 17/08/2016) disponible en
http://www.yakult.com.mx/que-es-el-lactobacillus-casei-shirota-lcs/