MicroTests Kits para testes microbiolgicos

Tem componentes pr-processados, esterilizados e descartveis, desenvolvidos

com o objetivo de proporcionar condies de anlises (de matrias-primas,
produtos, ar ambiente e sanitizao) sem a necessidade de um laboratrio
completo e de pessoal experiente em tcnicas microbiolgicas.
MicroTests so fceis de usar e no exigem experincia prvia em microbiologia,
so econmicos e dispensam a preparao dos meios de cultura.
MicroTests so versteis, pois avaliam a populao microbiana de diversos
materiais tais como matrias-primas, produtos intermedirios e acabados, gua,
ar ambiente e equipamentos utilizados nas indstrias de produtos cosmticos,
farmacuticos e alimentcios.
MicroTests apresentam resultados consistentes e
armazenagem (90 dias nas condies recomendadas).

excelente

tempo

de

MicroTests esto disponveis nas seguintes apresentaes:

MicroTests 1AX Para determinar o nmero total de microrganismos

aerbios mesfilos (bactrias, fungos e leveduras) e bactrias Gram
negativas.

MicroTests 1ACX Para determinar mesfilos, fungos e leveduras.

MicroTests 1BX Meios seletivos para determinao da presena de

Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli
(coliformes).

MicroTests 2X Para avaliar a flora microbiana do ar ambiente,

MicroTests 3X Para determinar presena de bactrias como

contaminantes em equipamentos utilizados nas linhas de fabricao e
envase.

MicroTests 1AX
Mesfilos, Gram negativos, Fungos e leveduras.
Objetivo:
Avaliar, quantitativamente, microrganismos aerbios totais e bactrias
Gram negativas.

Contedo do kit para 5 testes:

5 Frascos contendo aproximadamente 15 mL do meio de cultura Agar
Peptona de Casena/ Peptona de Farinha de Soja (TSA).
5 Frascos contendo aproximadamente 15 mL do meio Sabouraud Agar
(SA).
5 Frascos contendo aproximadamente 15 mL do meio MacConkey
Agar (MC).
5 Frascos contendo 9 mL do meio Caldo de Peptona de Casena/
Peptona de Farinha de Soja (TSB) e Tween 80.
15 Placas de Petri (15 x 90 mm), em poliestireno, esterilizadas e
embaladas individualmente.
5 Pipetas de 1,0 mL, graduadas 1/100, esterilizadas e embaladas
individualmente.
5 Pipetas multiuso para amostragem de lquidos, esterilizadas e
embaladas individualmente.
5 esptulas esterilizadas para amostragem de slidos ou produtos
pastosos.

Descrio e finalidade dos meios de cultura:

Agar Peptona de Casena/ Peptona de Farinha de Soja (TSA). As duas
peptonas presentes do condies de crescimento para ampla variedade
de bactrias comuns aerbias e facultativas (estas se multiplicam mesmo
na ausncia de oxignio).
Sabouraud Agar (SA). Este meio recomendado para promover o
crescimento de fungos tanto patognicos como no patognicos, e
leveduras.

 MacConkey Agar (MC). Este meio usado para evidenciar a presena

de bactrias Gram negativas, principalmente bacilos entrico (cujo habitat
o intestino de animais). Tambm usado para a determinao de
coliformes presentes na gua e alimentos de modo geral.
Caldo Peptona de Casena/ Peptona de Farinha de Soja (TSB). Este
meio tem dupla finalidade: a) diluir a amostra para posterior contagem de
aerbios totais; b) promover o enriquecimento da amostra com a finalidade
de pesquisar a presena de alguns patognicos como Staphylococcus
aureus, Pseudomonas aeruginosa e Escherichia coli.

Como estocar o material de teste:

Os kits MicroTests podem ser estocados por 6 meses (TSA, SA e MC) ou
12 meses (TSB), de preferncia em geladeira.

Preparao das placas:

1) Fundir o meio de cultura dentro do frasco, colocando-o para ferver em
banho-maria.
2) Uma vez fundido, esfriar o frasco a 60C com jato de gua de torneira
(no resfriar abaixo de 50C para impedir a solidificao do meio dentro do
frasco).
3) Abrir o frasco tirando o selo de alumnio (usar uma pina ou alicate).
4) Verter o contedo do frasco para a placa de Petri esterilizada, colocada
numa superfcie plana. Deixar solidificar o meio com a tampa levemente
levantada para permitir a evaporao.
5) Deixar esfriar por 30 minutos. Em seguida as placas podero ser
semeadas ou guardadas em geladeira por at 4 semanas. A condensao
de gua na superfcie da tampa da placa poder ocasionar contaminao
acidental, portanto tomar cuidado e aplicar a tcnica de trabalho correta.

Procedimento do teste:
1) Utilizando o amostrador adequado (pipeta multiuso ou esptula),
coletar cerca de 1 grama ou 1 mL do material a ser testado. Tomar
cuidado para no tocar o material, evitando a contaminao acidental.
Descartar o amostrador aps o uso.

2) Remover cuidadosamente a tampa do frasco que contm o TSB e

adicionar a amostra. Limpar a boca do frasco com um algodo umedecido
em lcool etlico a 70%. Fechar bem o frasco e agitar at completa
dissoluo da amostra.
3) Retirar cuidadosamente a tampa do frasco e, com auxlio da pipeta
graduada esterilizada, tomar 1 mL da amostra e despejar em cada uma
das trs placas previamente preparadas: TSA, SA e MC. Fechar as placas
imediatamente, pois a exposio prolongada ao ar ambiente pode
ocasionar contaminao acidental. Fechar o frasco. Descartar a pipeta
aps o uso.
4) Girar as placas de TSA, SA e MC suavemente para o lquido espalhar
completamente sobre o agar ou pode-se utilizar a ala de Drigalski. Fazer
esta operao o mais rpido possvel aps a semeadura, evitando a
difuso do lquido em um s ponto no Agar, que ir dificultar a contagem
das colnias, caso haja crescimento. Incubar as placas TSA e MC a
362C por 18-24 horas. A placa SA dever ser incubada temperatura
ambiente (25C) por 3-5 dias; no aparecendo nenhum crescimento,
prolongar por mais 2 dias.
5) Incubar o TSB na estufa de incubao a 362C por 18-24 horas
(estgio de enriquecimento).
6) Aps os perodos de incubao, proceder contagem das colnias
presentes no(s) meio(s) de cultura. Colnia o aglomerado de centenas
de unidade de um microrganismo. Desta forma, torna-se visvel a olho nu,
podendo ser contadas mesmo sem o uso de equipamento especial ou com
o auxlio de uma lupa.
7) Clculo do nmero total de aerbios (mesfilos) ou UFC, isto , o
nmero de microrganismos formadores de colnias (incluindo fungos e
levedura) por grama ou mililitro de produto:
UFC/g ou mL de produto = (nmero de colnias TSA + SA) x 10
8) Nmero total de microrganismos Gram negativos (n) por grama ou
mililitro de produto:
n = nmero de colnias MC x 10

Limites de aceitabilidade:
1) A CTFA (The Cosmetic Toiletry and Fragrance Association) sugere os
seguintes limites mximos para produtos cosmticos:

Produtos infantis e para a rea dos olhos: 500 UFC/g ou mL

Produtos para uso oral (enxaguatrios bucais): 1000 UFC/g ou

mL

Demais produtos: 1000 UFC/g ou mL.

Para todos os produtos: ausncia de patognicos.

2) Na Sucia, a recomendao para produtos estreis que o nmero

total de microrganismos aerbios no exceda 100 UFC/g ou mL. Muitos
fabricantes seguem esta recomendao mais rgida, limitando tambm
o nmero mximo de Gram negativos a 10 UFC/g ou mL.

Interpretao de resultados:
O aparecimento de colnias vermelhas na placa MC apresentando
evidncias de precipitao a sua volta, pode indicar a presena de coliformes
totais e fecais (Escherichia coli). Para confirmar ser necessrio proceder
identificao da espcie. Neste caso sugerido enviar amostras do material a um
laboratrio especializado.

Como descartar o material do teste:

No havendo nenhum crescimento, aps o teste, as placas podero ser
colocadas no lixo, sem qualquer esterilizao. Entretanto, havendo crescimento,
manusear as placas com muito cuidado e inativ-las atravs da imerso em
recipiente contendo soluo sanitizante (por exemplo, cloreto de benzalcnio a
0,5% ou hipoclorito de sdio a 2%).

MicroTests 1ACX
Mesfilos, fungos e leveduras.

Objetivo:
Avaliar, quantitativamente, microrganismos aerbios totais.

Contedo do kit para 5 testes:

5 Frascos contendo aproximadamente 15 mL do meio de cultura Agar

Peptona de Casena/ Peptona de Farinha de Soja (TSA) com lecitina.

5 Frascos contendo aproximadamente 15 mL do meio Sabouraud Agar

(SA).

5 Frascos contendo 9 mL do meio Caldo de Peptona de Casena/ Peptona

de Farinha de Soja (TSB) com Tween 80.

10 Placas de Petri (15 x 90 mm), em poliestireno, embaladas

individualmente e esterilizadas.

5 Pipetas de 1,0 mL, graduadas 1/100, embaladas individualmente e

esterilizadas.

5 Pipetas multiuso para amostragem

individualmente e esterilizadas.

5 esptulas esterilizadas para amostragem de slidos ou produtos

pastosos.

de

lquidos,

embaladas

Descrio e finalidade dos meios de cultura:

Agar Peptona de Casena/ Peptona de Farinha de Soja (TSA). As duas

peptonas presentes do condies de crescimento para ampla variedade
de bactrias comuns aerbias e facultativas (estas se multiplicam mesmo
na ausncia de oxignio).

Sabouraud Agar (SA). Este meio recomendado para promover o

crescimento de fungos tanto patognicos como no patognicos, e
leveduras.

Caldo Peptona de Casena/ Peptona de Farinha de Soja (TSB). Este meio

a finalidade de diluir a amostra para posterior contagem de aerbios totais.

Como estocar o material de teste:

Os kits MicroTests podem ser estocados por 6 meses (TSA e SA) ou 12
meses (TSB), de preferncia em geladeira.

Preparao das placas:

1) Fundir o meio de cultura dentro do frasco, colocando-o para ferver em
banho-maria.
2) Uma vez fundido, esfriar o frasco a 60C com jato de gua de torneira
(no resfriar abaixo de 50C para impedir a solidificao do meio dentro do
frasco).
3) Abrir o frasco tirando o selo de alumnio (usar uma pina ou alicate).
4) Verter o contedo do frasco para a placa de Petri esterilizada, colocada
numa superfcie plana. Deixar solidificar o meio com a tampa levemente
levantada para permitir a evaporao.
5) Deixar esfriar por 30 minutos. Em seguida as placas podero ser
semeadas ou guardadas em geladeira por at 4 semanas. A condensao
de gua na superfcie da tampa da placa poder ocasionar contaminao
acidental, portanto tomar cuidado e aplicar a tcnica de trabalho correta.

Procedimento do teste:
1) Utilizando o amostrador adequado (pipeta multiuso ou esptula), coletar
cerca de 1 grama ou 1 mL do material a ser testado. Tomar cuidado para
no tocar o material, evitando a contaminao acidental. Descartar o
amostrador aps o uso.
2) Remover cuidadosamente a tampa do frasco que contm o TSB e
adicionar a amostra. Limpar a boca do frasco com um algodo umedecido
em lcool etlico a 70%. Fechar bem o frasco e agitar at completa
dissoluo da amostra.
3) Retirar cuidadosamente a tampa do frasco e, com auxlio da pipeta
graduada esterilizada, tomar 1 mL da amostra e despejar em cada uma
das duas placas previamente preparadas: TSA e SA. Fechar as placas
imediatamente, pois a exposio prolongada ao ar ambiente pode
ocasionar contaminao acidental. Fechar o frasco. Descartar a pipeta
aps o uso.
4) Girar as placas de TSA e SA suavemente para o lquido espalhar
completamente sobre o agar ou pode-se utilizar a ala de Drigalski. Fazer

esta operao o mais rpido possvel aps a semeadura, evitando a

difuso do lquido em um s ponto no Agar, que ir dificultar a contagem
das colnias, caso haja crescimento. Incubar a placa de TSA a 362C por
18-24 horas. A placa SA dever ser incubada temperatura ambiente
(25C) por 3-5 dias. No aparecendo nenhum crescimento, prolongar por
mais 2 dias.
5) Aps os perodos de incubao, proceder contagem das colnias
presentes no(s) meio(s) de cultura. Colnia o aglomerado de centenas
de unidade de um microrganismo. Desta forma, torna-se visvel a olho nu,
podendo ser contadas mesmo sem o uso de equipamento especial ou com
o auxlio de uma lupa.
6) Clculo do nmero total de aerbios (mesfilos) ou UFC, isto , o nmero
de microrganismos formadores de colnias (incluindo fungos e levedura)
por grama ou mililitro de produto:

UFC/g ou mL de produto = (nmero de colnias TSA + SA) x 10

Como descartar o material do teste:

No havendo nenhum crescimento, aps o teste, as placas podero ser
colocadas no lixo, sem qualquer esterilizao. Entretanto, havendo crescimento,
manusear as placas com muito cuidado e inativar atravs da imerso em
recipiente contendo soluo sanitizante (por exemplo, cloreto de benzalcnio a
0,5% ou hipoclorito de sdio a 2%).

MicroTests 1BX
Meios Seletivos
Objetivo:
Testes presuntivos de Escherichia coli (coliformes), Staphylococcus aureus
e Pseudomonas aeruginosa. Este teste a segunda etapa do teste aps a
determinao das UFC (unidade formadoras de colnias) e das bactrias Gram
negativas (MicroTests 1AX).

Contedo do kit para 5 testes:

5 frascos contendo aproximadamente 15 mL de meio de cultura Vogel
Johnson Agar (VJ);
5 frascos contendo aproximadamente 15 mL de meio de Pseudocel
Agar ou Cetrimide (PS);
5 frascos contendo aproximadamente 15 mL de meio MacConkey
(MC);
15 placas de Petri (15x90 mm), em poliestireno, embaladas
individualmente e esterilizadas

5 cotonetes esterilizados, embalados individualmente.

Descrio e finalidade dos meios de cultura:

Vogel Johnson Agar (VJ). Este meio promove o crescimento de
Staphylococcus aureus.
Pseudocel Agar ou Cetrimide (PS). indicado para o crescimento de
Pseudomonas aeruginosa.
MacConkey (MC). recomendado para teste presuntivo de Escherichia
coli.

Como estocar o material de teste:

Os kits MicroTests podem ser estocados por 6 meses, de preferncia em
geladeira.

Preparao das placas:

1) Fundir o meio de cultura dentro do frasco, colocando-o para ferver em
banho-maria.
2) Uma vez fundido, esfriar o fraco a 60C com jato de gua de torneira
(no resfriar abaixo de 50C para impedir a solidificao do meio dentro do
frasco).
3) Abrir o frasco tirando o selo de alumnio (usar uma pina ou alicate).
4) Verter o contedo do frasco para a placa de Petri esterilizada, colocada
numa superfcie plana. Deixar solidificar o meio com a tampa levemente
levantada para permitir a evaporao.
5) Deixar esfriar por 30 minutos. Em seguida as placas podero ser
semeadas ou guardadas em geladeira por at 3 semanas. A condensao
de gua na superfcie da tampa da placa poder ocasionar contaminao
acidental, portanto tomar cuidado e aplicar a tcnica de trabalho correta.

Procedimentos de teste:
1) Tomar o frasco com TSB (caldo de peptona de casena/ peptona de
farinha de soja) aps o estgio de enriquecimento, isto , incubao por
18-24 horas a 362C (passo 4 do MicroTests 1AX).
2) Abrir o frasco cuidadosamente e molhar o cotonete com caldo
enriquecido. Fazer o esfregao em cada uma das placas de meio seletivo
(VJ, OS e MC). Tomar cuidado para o cotonete no ferir a superfcie do
Agar. Descartar o cotonete aps o uso.
3) Incubar as placas a 362C por 18 24 horas. Aps este perodo,
examinar as placas.

Interpretao das leituras:

Placa VJ: Aparecimento de colnias negras, brilhantes com halo
circundando a colnia, suspeita da presena de Staphylococcus aureus.
Placa PS: Aparecimento de colnias esverdeadas ou azuladas,
fluorescente (intensa sob raios UV), indicam suspeita de Pseudomonas
aeruginosa.
Placa MC: Aparecimento de colnias avermelhadas, bem delimitadas e
com precipitao rsea em toda a placa, pode indicar contaminao por
Escherichia coli.

Por ser um teste qualitativo, basta a presena de um microrganismo para

confirmar a contaminao.
Importante: Todos os resultados positivos devero ser retestados para
confirmao e, em caso positivo, enviar para laboratrio microbiolgico para
identificao dos contaminantes.

Como descartar o material de teste:

No havendo nenhum crescimento, aps o teste, as placas podero ser
colocadas no lixo, sem qualquer esterilizao. Entretanto, havendo crescimento,
manusear as placas com muito cuidado, inativar atravs da imerso em
recipiente contendo soluo sanitizante (por exemplo, cloreto de benzalcnio a
0,5% ou hipoclorito de sdio a 2%).

MicroTests 2X
Avalia flora microbiana do ar ambiente

Objetivo:
Determinao quantitativa da presena de bactrias aerbicas mesfilas,
fungos e leveduras como contaminantes microbiolgicos no ar ambiente.

Contedo do kit para 5 testes:

5 frascos contendo aproximadamente 15 mL do meio de cultura Agar
peptona de casena/ peptona de farinha de soja (TSA) com lecitina e
Tween 80;
5 frascos contendo aproximadamente 15 mL do meio Sabouraud Agar
(SA);
10 placas de Petri (15 x 90 mm), em poliestireno, embaladas
individualmente e esterilizadas.

Descrio e finalidade dos meios de cultura:

Agar Peptona de Casena/ Peptona de Farinha de Soja (TSA). As duas
peptonas presentes do condies de crescimento para ampla variedade
de bactrias comuns aerbias e facultativas (estas se multiplicam mesmo
na ausncia de oxignio).
Sabouraud Agar (SA). Este meio recomendado para promover o
crescimento de fungos tanto patognicos como no patognicos, e
leveduras.

Como estocar o material de teste:

Os kits MicroTests podem ser estocados por 6 meses, de preferncia em
geladeira.

Preparao das placas:

1) Fundir o meio de cultura dentro do frasco, colocando-o para ferver em
banho-maria.

2) Uma vez fundido, esfriar o fraco a 60C com jato de gua de torneira
(no resfriar abaixo de 50C para impedir a solidificao do meio dentro
do frasco).
3) Abrir o frasco tirando o selo de alumnio (usar uma pina ou alicate).
4) Verter o contedo do frasco para a placa de Petri esterilizada, colocada
numa superfcie plana. Deixar solidificar o meio com a tampa levemente
levantada para permitir a evaporao.
5) Deixar esfriar por 30 minutos. Em seguida as placas podero ser
semeadas ou guardadas em geladeira por at 3 semanas. A condensao
de gua na superfcie da tampa da placa poder ocasionar contaminao
acidental, portanto tomar cuidado e aplicar a tcnica de trabalho correta.

Procedimento do teste:
1) Usar placas com os meios TSA e SA, tantas quanto forem necessrias
para avaliao de reas especficas.
2) Fazer assepsia das mos com lcool etlico a 70%.
3) Abrir as placas somente quando estiver nos locais escolhidos para o
teste. A tampa da placa dever ser colocada de boca para baixo sob a
placa que contm o meio de cultura, isto ir evitar que partculas do meio
ambiente caiam sobre a tampa e possam falsear o resultado.
4) Expor as placas por tempo determinado, de acordo com a carga
microbiana do ambiente analisado, ou seja, ambientes muito
contaminados, 15 minutos; ambientes pouco contaminados, de 1 a 2
horas.
5) Aps esse perodo, fechar as placas e incubar: TSA a 362C por 18
24 horas e SA a 25C (temperatura ambiente) por 3 5 dias.
6) Clculo do nmero total de aerbios (mesfilos), isto , o nmero de
microrganismos formadores de colnia (UFC), por tempo de exposio:

UFC/ tempo de exposio = colnias TSA + SA

Interpretao dos resultados:

Contagem acima de 50 colnias no total (bactrias + fungos + leveduras)
pode ser considerada preocupante, em funo das atividades que so
desenvolvidas nessa rea (preparao e/ ou envase de produtos).

Como descartar o material de teste:

No havendo nenhum crescimento, aps o teste, as placas podero ser
colocadas no lixo, sem qualquer esterilizao. Entretanto, havendo crescimento,
manusear as placas com muito cuidado, inativar atravs da imerso em
recipiente contendo soluo sanitizante (por exemplo, cloreto de benzalcnio a
0,5% ou hipoclorito de sdio a 2%).

MicroTests 3x
Valida Sanitizao de Equipamentos
Objetivo:
Determinar a presena quantitativa de bactrias aerbicas mesfilas como
contaminantes microbiolgicos em equipamentos nas linhas de fabricao e
envase.

Contedo do kit para 5 testes:

5 frascos contendo aproximadamente 15 mL do meio de cultura Agar
peptona de casena/ peptona de farinha de soja com lecitina e Tween 80.
5 Placas de Petri (15x90
individualmente e esterilizadas

mm),

em

poliestireno,

embaladas

5 cotonetes esterilizados e embalados individualmente.

Descrio e finalidade do meio de cultura:

Agar peptona de casena/ peptona de farinha de soja (TSA): As duas
peptonas presentes do condies de crescimento para ampla variedade
de bactrias comuns aerbias e facultativas (que se desenvolvem mesmo
na ausncia de oxignio).

Como estocar o material de teste:

Os kits MicroTests podem ser estocados por 6 meses, de preferncia em
geladeira.

Preparao das placas:

1) Fundir o meio de cultura dentro do frasco, colocando-o para ferver em
banho-maria.
2) Uma vez fundido, esfriar o fraco a 60C com jato de gua de torneira
(no resfriar abaixo de 50C para impedir a solidificao do meio dentro
do frasco).
3) Abrir o frasco tirando o selo de alumnio (usar uma pina ou alicate).

4) Verter o contedo do frasco para a placa de Petri esterilizada, colocada

numa superfcie plana. Deixar solidificar o meio com a tampa levemente
levantada para permitir a evaporao.
5) Deixar esfriar por 30 minutos. Em seguida as placas podero ser
semeadas ou guardadas em geladeira por at 3 semanas. A condensao
de gua na superfcie da tampa da placa poder ocasionar contaminao
acidental, portanto tomar cuidado e aplicar a tcnica de trabalho correta.

Procedimentos do teste:
1) Com um cotonete, esfregar a rea desejada do equipamento em teste
(e necessrio umedecer o cotonete com gua estril ou TSB (peptona de
casena/ peptona de farinha de soja) estril.
2) Repassar o contedo coletado pelo cotonete na superfcie do meio de
cultura TSA. Cuidado para no ferir o agar. Descartar o cotonete aps o
uso.
3) Incubar a placa TSA a 362C, por 18 24 horas.
4) Clculo do nmero total de aerbios (mesfilos) e facultativos, isto , o
nmero de microrganismos formadores de colnias (UFC) por rea
amostrada:
UFC/ rea amostrada = colnias TSA

Interpretao dos resultados:

Cada fabricante deve estabelecer sua especificao, isto , que
quantidade de microrganismos pode ser aceito. Por exemplo, para superfcies
lisas com rea amostrada de 4 cm2 no deve haver crescimento.

Como descartar o material de teste:

No havendo nenhum crescimento, aps o teste, as placas podero ser
colocadas no lixo, sem qualquer esterilizao. Entretanto, havendo crescimento,
manusear as placas com muito cuidado, inativas atravs da imerso em
recipiente contendo soluo sanitizante (por exemplo: cloreto de benzalcnio a
0,5%, hipoclorito de sdio a 2%).