UNIVERSIDAD AUTNOMA DE

COAHUILA
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS
U.T

PRCTICA NO. 1

CONTROL DE
MICROORGANISMOS POR
MEDIOS FSICOS Y QUMICOS
Equipo No. 7
3 B
Integrantes

Garca Echegaray Ana Luisa

Garca Rodrguez Daniela
Moreno Puente Johanna Valeria
Muoz Chairez Sara Sofa

Docente
Bilogo. Manuel Ramrez Prez

Viernes 26 de agosto de 2016, Torren Coahuila.

Introduccin
El pasado viernes 26 de agosto mis compaeras de laboratorio y yo nos
dispusimos a realizar la primer prctica de laboratorio de la materia de
Microbiologa General, esta se llev a cabo en el laboratorio general
nmero dos y lleva por nombre Control de microorganismos por medios
fsicos y qumicos.
Para esto nos gustara definir lo que es un
microorganismo.
Por microorganismo entendemos cualquier organismo vivo que no sea
visible
a
simple
vista.
Tambin
llamado microbio u organismo
microscpico, es un ser vivo que slo puede visualizarse con
el Microscopio. La ciencia que estudia a los microorganismos es
la Microbiologa. Micro del griego (diminuto, pequeo) y bio
del griego (vida) seres vivos diminutos. Dentro de los microorganismos
se encuentran organismos unicelulares Procariotas, como las Bacterias,
y eucariotas, como los Protozoos, una parte de las Algas y los Hongos, e
incluso los organismos de tamao ultramicroscpico, como los Virus.
En esta prctica nos centramos especficamente en una bacteria, la cual
es una Escherichia Coli mejor conocida como E.coli. La E. coli es el
nombre de un tipo de bacteria que vive en el intestino. La mayora de las
E. coli no causan problemas. Pero, algunos tipos pueden producir
enfermedades y causar diarrea.
La E. coli como otros muchos microorganismos debe ser controlada ya
sea por medios fsicos o qumicos. El control de los microorganismos es
de alta importancia debido que as podemos prevenir la contaminacin
para evitar la proliferacin de microorganismos, prevenir la transmisin
de la infeccin y/o enfermedad o prevenir el deterioro de materiales
causados por stos.
El propsito general de esta prctica es observar cmo podemos
controlar la actividad enzimtica de la E.coli para evitar que esta se
reproduzca con la ayuda de un producto qumico que acte como
germicida. Cada equipo cont con una sustancia diferente en nuestro
caso se us Merthiolate blanco el cual sabemos de antemano que es un

antisptico acta sobre bacterias, virus y hongos para el tratamiento de

heridas y quemaduras superficiales.
Sin embargo mediante est prctica veremos si es verdad que acta
como germicida y observar cmo es su modo de accin y si destruye o
inhibe nuestra E.coli que se encuentra en nuestras cajas de Petri.

Conceptos Antecedentes

TEMPERATURA DE MUERTE TERMICA: Es una tcnica para

matar microorganismos, consiste en aplicar calor a cierta
temperatura dependiendo la sustancia en la que est el microbio
etc. No involucra el empleo de sustancias letales para los
microorganismos, sino procedimientos fsicos como la radiacin
ionizante, el calor o la filtracin de soluciones con membranas que
impiden el paso de microorganismos, incluyendo virus.
ACTIVIDAD ENZIMATICA: Se define la unidad de actividad
enzimtica (U) como la cantidad de enzima que cataliza la
conversin de 1 mol de sustrato en un minuto.
Recientemente, el Sistema Internacional de unidades (SI) ha
definido la unidad de actividad enzimtica como la cantidad de
enzima que transforma 1 mol de sustrato por segundo.
BACTERIOSTATICO: Es aquel que aunque no produce la muerte a
una bacteria, impide su reproduccin; la bacteria envejece y
muere sin dejar descendencia. Un efecto bacteriosttico est
producido por sustancias bacteriostticas. Estas sustancias son
secretadas por los organismos como medios defensivos contra las
bacterias.
COMPUESTO DE AMONIO CUATERNARIO :
Los compuestos de amonio cuaternario representan una familia de
compuestos antimicrobianos, considerados como agentes activos
catinicos potentes en cuanto a su actividad desinfectante, ya que
son
activos
para
eliminar
bacterias
grampositivas
y
gramnegativas, aunque stas ltimas en menor grado.
FENOL: Es un slido que cristaliza como agujas incoloras de olor
particular. Su temperatura de fusin es de 38C y su punto de
ebullicin de 181C. es higroscpico, es decir, absorbe mucha
agua. Se puede oxidar ante la luz adquiriendo una coloracin
rosada. Es custico.

DESINFECTANTE: Un desinfectante es un producto que permite

eliminar las bacterias, los virus o los microorganismos. La
utilizacin de un desinfectante permite limitar o, incluso, hacer
desaparecer completamente, los riesgos de contaminacin de una
enfermedad.
LETALIDAD: Este trmino se relaciona con el concepto de letal, de
que algo es muy peligroso y altamente relacionado con la muerte.
La letalidad es, entonces, la capacidad que ese elemento o
fenmeno letal tiene de desarrollar resultados efectivos al ser
aplicado o al suceder.
BACTERICIDA: Del griego baktheria, y del latn caedere, matar).
Que mata las bacterias. Poder bactericida: La ms dbil
concentracin de una sustancia capaz de provocar la destruccin
definitiva de la vitalidad de un microbio. Provocan la lisis y muerte
de microorganismos. Ej: Penicilinas, Cefalosporinas, Polipeptdicos.
DETERGENTE: Un detergente es una sustancia que se utiliza para
limpiar ya que dispone de propiedades que le permiten quitar la
suciedad sin afectar el material sometido al proceso de limpieza.
INODORO: La palabra inodoro significa que no tiene olor.
DESINFECCION: Eliminacin de los grmenes que infectan o que
pueden provocar una infeccin en un cuerpo o un lugar.
SANIZANTE: Los sanitizantes son sustancias que reducen el
nmero de microorganismos a un nivel seguro. Debe tener
propiedades germicidas o antimicrobianos y se aplican a los
objetos no vivos para destruir los microorganismos, de las cuales
el proceso que se conoce como la desinfeccin o sanitizacin.

Material, Reactivos y Equipo

Somos el equipo nmero siete conformado por Ana Garca, Daniela
Garca, Sara Muoz y Valeria Moreno.
1.- Reactivos de la prctica
Estos reactivos fueron elaborados por el primer y el segundo equipo. El
equipo uno hizo la solucin salina y el equipo dos el agar nutritivo.

Solucin Salina.
Agar nutritivo.

2.-Material para la prctica

8 TUBOS DE ENSAYE 16X150

JERINGA
2 TRIPIE
2 MECHEROS BUNSEN
2 TELA DE ASBESTO
4 PIPETAS DE 1 ML
3 CAJAS PETRI
PINZAS PARA TUBO DE ENSAYE
TERMOMETRO
VASO DE PRECIPITADO DE 250 Y 400 ML
PINZAS PARA CRISOL
GRADILLA
ALGODN
DERMOCLEAN

Procedimiento Experimental
Nuestro procedimiento experimental inicia desde el primer minuto que
llegamos al laboratorio lo primero que realizamos al iniciar la prctica
fue lavar nuestro material de laboratorio y enjuagarlo con agua destilada
al mismo tiempo en lo que se lavaba el material otros miembros del
equipo limpiaban la mesa con dermoclean y encendan los mecheros
para matar cualquier microorganismo que pudiera perjudicar de alguna
manera nuestra prctica. Despus de esto secamos por completo el
material. La primera indicacin fue colocar dos sistemas.
En el primer sistema colocamos un vaso de precipitado de 400ml con
2/3 de agua de la llave sobre un mechero de bunsen y esperamos a que
este alcance su punto de ebullicin, o sea 100C. Esta temperatura fue
asignada por el profesor todo los equipos usamos esta temperatura.
En el segundo sistema colocamos en un vaso de precipitado de 250ml
con de agua de la llave nuevamente a punto de ebullicin o sea
100C, esta temperatura fue asignada por el profesor cada equipo us
una temperatura diferente.
El primer sistema sirvi para poner los tres tubos de ensaye que
contenan el agar nutritivo, los colocamos al momento que el agua
comenzar hervir, esto con la finalidad de desgelatinizar el agar que
posteriormente colocaramos en nuestra caja de Petri.

Primer Experimento

En el segundo sistema para el primer experimento que es control de

microorganismos por medios fsicos colocamos en un tubo de ensaye
que contena solucin salina, despus de esto hicimos una suspensin
bacteriana con la Escherichia Coli. Esta se realiz vertiendo la bacteria a
la solucin salina y despus vertimos nuevamente un poco de solucin
salina que ya tena la bacteria al tubo que contena la e. coli.
Homogenizamos dando unos golpes en el tubo y dejamos hervir por 20
minutos nosotras colocamos nuestro tubo a las 10:27 y fue retirado a las
10:47.
Tomamos nuestra primer caja de Petri y la rotulamos, despus la
abrimos y colocamos un con una pipeta de 1ml que estaba previamente
esterilizada un 1ml de nuestra solucin bacteriana colocamos la muestra
en el centro de la caja de Petri. Todo esto lo realizamos cerca del
mechero para hacer nuestra rea de trabajo lo ms esterilizada posible y
cerramos momentneamente nuestra caja de Petri.
Regresamos a nuestro primer sistema por uno de los agares nutritivos
que estaban previamente en punto de ebullicin. Tomamos el agar con
unas pinzas para tubo de ensaye y lo llevamos hacia el chorro del agua
de la llave, cabe destacar que tenamos que tener cuidado de que el
agua no entrar hacia el tubo ya que echara a perder nuestro agar. Esto
se hace con la finalidad de bajar la temperatura del agar. El tubo debe
de tener aproximadamente 42C en vista de que no podemos usar el
termmetro utilizamos una de las tantas maas de laboratorio que
consiste en medir la temperatura con la parte superior de nuestra mano
y con nuestra mejilla hasta tal punto de que el tubo no nos queme la
piel. Despus de esto no podemos demorar tanto ya que el agar al
enfriarse se solidifica rpidamente, regresamos a nuestra caja de Petri y
vertemos el agar nuevamente cerca del mechero, colocamos la tapa y
hacemos una serie de movimientos para que el agar y la suspensin
bacteriana se homogenicen, retiramos la caja del mechero y aplicamos
cinta masking tape alrededor de la caja y la colocamos de manera
invertida en una estufa de incubacin, esperando ver los resultados
hasta el prximo lunes, dos das despus de la prctica.

Segundo Experimento
El segundo experimento es el control de microorganismos por medios
qumicos. En nuestra gradilla tenamos 3 tubos de 16x150mm con 9ml
de solucin salina. Tomamos un tubo de 5ml para hacer nuevamente

una suspensin bacteriana hicimos el proceso igual que en el primer

experimento solo que en esta ocasin utilizamos un 1ml de nuestro
qumico que en nuestro caso fue merthiolathe lo dejamos en el mechero
alrededor de 20 minutos en un lapso de tiempo de 10:27 a 10:47.
En un primer tubo que contena solucin salina con una nueva
pipeta( cabe destacar que para cada tubo usamos una pipeta de 1ml
diferente, stas ya haban sido esterilizadas) agregamos 1ml del tubo
que contena la suspensin bacteriana, esta fue nuestra primer dilucin
1:10, de este tubo pusimos nuevamente 1ml en el segundo tubo que fue
nuestra segunda dilucin 1:100.
Nosotras solo hicimos las primeras dos diluciones ya que slo
contbamos con tres agares y tres cajas de Petri a diferencia de los
dems equipos que contaban con 4 de ambos elementos.
Rotulamos nuestra segunda y tercer caja de Petri. Tomamos la segunda
y colocamos una pipeta un ml de nuestra primera dilucin la vertemos
en medio de la caja de Petri y en seguida colocamos el agar que ya
haba sido enfriado cerramos la caja de Petri e hicimos una serie de
movimientos para homogenizar. A s mismo repetimos este paso
tomamos la tercer caja de Petri y colocamos 1ml de la segunda dilucin
y vertimos el agar para finalmente homogenizar.
Se hizo la tcnica de placa invertida para poder as evitar evaporizacin,
y lo llevamos a la estufa de incubacin para as poder registrar los
resultados que obtuvimos 24 horas despus.
As finalizamos ambos experimentos esperando tener resultados
concluyentes y exitosos cuando lo veamos la siguiente clase.

OBSERVACIONES
Durante nuestra prctica tomamos algunas fotografas que nos
ayudaron a guiarnos en la elaboracin de este reporte.

RESULTADOS

Los resultados que obtuvimos a travs de esta prctica fueron

meramente buenos y concluyentes.

En el primer experimento en nuestra primer caja de Petri pudimos

observar que no se encontraba absolutamente ningn tipo de
rastro de la E.coli o de algn otro tipo de bacteria a simple vista, lo
llevamos al microscopio para confirmar y efectivamente no haba
rastro de nada. Esto se debe a las altas temperaturas que
manejamos los diferentes equipos. Nuestro equipo manejo a punto
de ebullicin lo cual no solo inhibi sino tambin destruy o
elimin por completo la e. coli demostrando que la temperatura es
un factor importantsimo para el control de microorganismos con
esto se demuestra que la actividad enzimtica de los microbios
son regulados por la temperatura. Entre mayor es la temperatura
se detiene el desarrollo microbiano y entre ms baja es slo la
inhibe o evita que se reproduzca ya que la mantiene atontada de
una manera esttica.

En el segundo experimento que fue el control de los

microorganismos por medios qumicos tambin pudimos observar
resultados satisfactorios en nuestras cajas de Petri. En la primer
caja que vendra siendo la primer dilucin 1:10 haba unos
pequeos crculos para ser exactos slo dos de color naranja sin
embargo estos no eran rastros de e.coli sino de bacterias que se
colaron en el proceso del experimento tal vez podran ser de la
saliva o quizs del ambiente. La segunda caja que tena la
segunda dilucin 1:100 tampoco contena rastros de bacterias
estaba limpia. Esto se debe a que el merthiolate cumpli con su
accin germicida. Con esto tenemos la certeza de que ciertos
productos qumicos antispticos como el isodine realmente si
funcionan tanto como en nuestra dermis y en nuestra mucosa y
que s actan como desinfectante matando todos los
microorganismos que existan en nuestro cuerpo.

CONCLUSIONES
ANA LUISA GARCA ECHEGARAY
En esta prctica nuestro objetivo fue observar como el merthiolate (que
fue el antisptico que se nos asign), poda eliminar la bacteria
Escherichia coli, as que con el uso del mechero en toda la prctica para
que no tuviramos otros tipos de microorganismos en nuestra caja Petri,
colocamos la bacteria y 1 ml. de merthiolate y de esta manera
observamos que el merthiolate elimino de manera permanente esta
bacteria. Como ya sabemos el merthiolate es un antisptico tpico que
acta sobre bacterias, virus y hongos para el tratamiento de heridas,
quemaduras superficiales, raspones y la curacin de infecciones leves
de la piel. Como conclusin, fuimos capaces de observar y demostrar
que el merthiolate es un germicida ya que es capaz de destruir los
microbios, al contrario de los bacteriostticos que solamente previenen
o inhiben su crecimiento.
DANIELA GARCA RODRIGUEZ
Mi conclusin personal en base a esta prctica es que en ambos tipos de
control de microorganismos tanto fsicos como qumicos actan cada
uno a su manera especfica, sin embargo por medios fsicos dependen
muchsimo de la temperatura, cada bacteria tiene resistencia a
diferentes grados algunas temperaturas son ms altas otras ms bajas
por lo cual no todas las bacterias moriran a una temperatura
determinada. Aun que puede causar que la bacteria disminuya su
actividad enzimtica y que esta no se reproduzca y se quede esttica.
En cambio por medios qumicos es ms fcil que el microorganismo
muera ya que stos actan como germicidas y antispticos que
garantizan por lo general un 99% de muerte en microorganismos. Pero
algo es seguro ambos mtodos ayudan a controlar el microorganismo.
SARA SOFIA MUOZ CHAIREZ
EN ESTA PRACTICA ME DI CUENTA DE MUCHAS COSAS UNA DE ELLAS ES
QUE LOS PRODUCTOS DEINFECTANTES SON MERAMENTE IMPORTANTES
PARA NOSOTROS YA QUE ACABAN CON LOS MICROORGANISMOS Y
BACTERIAS QUE NOS PUEDANAFECTAR EN NUESTRA SALUD,
COMPROBAMOS CON EL MEDIO FISICO Y QUIMICO QUE LAS BACTERIAS

SE MUEREN AL ENTRAR EN UN MEDIO CON ALTAS TEMPERATURAS Y

ALGUNAS SOBREVIVEN COMO LAS DEL AMBIENTE, QUE NO NECESITAN
ESTAR EN UN MEDIO DETERMINADO Y SE ADAPTAN PARA SU
REPRODUCCION, COMO CONCLUSION DETERMINO QUE EL CLORO, EL
AGUA OXIGENADA SON MAS EFICACES QUE OTROS DESINFECTANTES
PERO QUE TODOS TIENEN UN FUNCIONAMIENTO CORRECTO PARA
MATAR CUALQUIER TIPO DE MICROORGANISMO.
JOHANNA VALERIA MORENO PUENTE
Trabajamos con la Escherichia coli es una bacteria habitual en el
intestino del ser humano y de otros animales de sangre caliente. Aunque
la mayora de las cepas son inofensivas, algunas pueden causar una
grave enfermedad de transmisin alimentaria. La infeccin por E. coli se
transmite generalmente por consumo de agua o alimentos
contaminados, como productos crnicos poco cocidos y leche cruda. El
objetivo de la prctica fue conocer el punto trmico en el que la bacteria
ya mencionada morir y conocer las propiedades bactericidas del
merthiolate, Para esto integramos la bacteria a un tubo de ensayo con
agua estril, homogenizamos y colocamos a bao mara por 20 min.
Despus de ese tiempo vaciamos la sustancia en una de las cajas Petri
con agar en estado lquido (no caliente() y lo colocamos en la
incubadora. En el siguiente experimento colocamos una muestra de la
bacteria y merthiolate en uno de los tubos de ensayo con agua estril y
homogenizamos. Del tubo anterior tomamos 1ml de la muestra y lo
colocamos en otro tubo con agua estril del cual tomaremos 1ml y lo
colocaremos en nuestro tercer tubo, obteniendo 3 tubos cada uno con
diferente concentracin de la bacteria. Calentamos los 3 tubos a bao
mara a 100 C por 20 minutos. Colocamos la sustancia de cada tubo en
su respectiva caja Petri para luego introducir a la incubadora. Despus
de 3 das de reposar en la incubadora se pudo observar que la bacteria
haba muerto totalmente debido a la alta temperatura y a nuestro gran
bactericida. Tambin se observ contaminacin del medio ya que no se
usaron las precauciones o medidas necesarias para no daar la muestra.

CUESTIONARIOS
1.- Por qu es importante la temperatura de incubacin?
Los microorganismos tienen un margen de temperaturas en l cual
pueden crecer. Este margen viene delimitado por la temperatura

mxima de crecimiento, a partir de la cual no pueden vivir he incluso

mueren; la temperatura mnima por debajo de la cual no pueden crecer
aunque generalmente no mueren ; y la temperatura ptima a la cual
ofrecen mejor crecimiento.
2.- Por qu la utilizacin de los diferentes gradientes de
temperatura aplicados a los microorganismos?
Los microorganismos presentan distintos comportamientos en cuanto a
las temperaturas de incubacin que requieren. La mayora de las
bacterias del suelo o del agua son mesfi1as; las cuales tienen su tasa
mxima de crecimiento entre los 20C y los 42C. Los organismos
termotolerantes son los que todava pueden crecer a 50C
(Methylococcus capsulatus). Las bacterias termfi1as crecen a
temperaturas superiores a los 40C con una tasa mxima y tienen el
lmite superior a los 70C (Bacillus stearothermophilus,
Thermoactinomyces vulgaris). Se denominan organismos termfi1os
extremos a aquellos que tienen su ptimo de crecimiento por encima de
los 65C (Thermus aquaticus, Sulfolobus); algunos de ellos pueden
crecer a temperaturas por encima de los 70C (varias especies del
genero Bacillus y Clostridium) o incluso por encima de los 80C
(Sulfolobus acidocaldarius) o incluso a lO5C (Pyrodictium occultum, una
bacteria reductora de sulfato anaerbica estricta). A las bacterias que
crecen por encima de los 80C y l00C se las denomina organismos
hipertermofi1os. Al otro extremo de la escala de temperaturas se
encuentran los psicrofi1os (o criofi1os), organismos entre los que
predominan algunas bacterias marinas (bacterias luminiscentes) y las
bacterias del hierro (Gallionella); tienen su tasa ptima de crecimiento
por debajo de los 20C.
3.- Por qu es importante la dilucin de los microorganismos
en 10-1, 10-2 y 10-3?
Las diluciones en serie se utilizan para crear disoluciones muy diluidas
con precisin, as como disoluciones para experimentos en los que se
pretenda estudiar curvas de concentracin con una escala logartmica.
La dilucin en serie tambin se puede utilizar para reducir la
concentracin de microorganismos o clulas de una muestra. Por
ejemplo: el nmero de colonias de bacterias que crecen en una placa de
Petri en un momento dado depende de la concentracin, y dado que
muchas otras tcnicas de diagnstico implican contar fsicamente el
nmero de microorganismos o clulas en ciertas reas impresas dentro

de una rejilla (comparando las concentraciones de dos tipos de clulas o

microorganismos en la muestra) o en cavidades de un volumen
determinado (para concentraciones absolutas). La dilucin puede ser til
para obtener resultados ms manejables o para tener un nmero
definido de colonias de cultivo en cada placa.

BIBLIOGRAFA
http://www.ecured.cu/Microorganismo
http://www.unavarra.es/genmic/microgral/01_morfologia_y_estructura.pdf
https://medlineplus.gov/spanish/ecoliinfections.html
https://books.google.com.mx/books?
id=5RjS6B0X5RgC&pg=PA203&dq=control+de+microorganismos&hl=es419&sa=X&ved=0ahUKEwi2sZHO_efOAhUBEWMKHYWGDUoQ6AEIJDAC#v=one
page&q=control%20de%20microorganismos&f=false
http://www.ehu.eus/biomoleculas/enzimas/enz3.htm#ae
jarytqm.blogspot.com/2011/09/resumen-de-bacteriostatico-y.html
http://www.quimicayalgomas.com/quimica-organica/alcoholes-aldehidoscetonas/alcoholes-parte-4/
http://salud.ccm.net/faq/12714-desinfectante-definicion
via Definicion ABC http://www.definicionabc.com/salud/letalidad.php
ermerograleducastillo.blogspot.mx/2011/09/bactericida-y-bacteriostatico.html
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http://definicion.de/detergente/#ixzz4Ix9yU7xe