Anda di halaman 1dari 6

Spectrophotometric Determination of Sitagliptin and Metformin in Their Pharmaceutical

Formulation
I.

Sifat Fisikokimia Analit dan Jenis Matrik Sampel

Metode validasi untuk Sitagliptin fosfat monohidrat (STA) dan Metformin Hidroklorida (MTF)
dapat dilakukan dengan dua metode. Metode pertama berdasarkan pengukuran absorban STA
pada 268 nm pada kadar 25 500 g/mL. Metode kedua menggunakan metode isosbestic point.
Larutan campuran diukur absorbannya pada 257 nm. Menggunakan gabungan dari dua metode.
Perhitungan statistik menggunakan Analisis Variansi (ANOVA).
Sifat fisiko kimia Bahan Obat
BO : Sitagliptin Phospat
Nama Kimia

: {(2R)-1-(2,4,5-trifluorophenyl)-4-oxo-4-{3-(trifluoromethyl)-5,6 dihydro

[1,2,4]triazole [4,3-a]pyrazin-7(8H)-yl]butan-2-amine]
Rumus Molekul : C16H15F6N5O.H3PO4
BM

: 505,31

TL

:202C 204 C

Titik Didih

: 529.9050C pada 760 mmHg

Indeks bias

: 1.59

Keterangan : 1. Digunakan untuk pengobatan diabetes tipe 2


2.

BO : Metformin
Nama kimia : {N,N dimethylimidodicarbonimic diamide hydrochloride}
Rumus Molekul : C4H11N5HCl
BM :165,6
TL : 223C - 226C
Keterangan : 1. Sangat mudah larut dalam air
2.

+ H-Cl

PENENTUAN KADAR SITAGLIPTIN DAN METFORMIN DALAM FORMULASI


SEDIAAN FARMASI DENGAN METODE SPEKTROFOTOMETRI
BAHAN DAN METODE
1. INSTRUMEN
Spektrofotometer UV-Vis: Shimadzu UV-1601 PC Japan (double beam)
2. SAMPEL
Tablet Janumet yang mengandung Sitagliptin Fosfat 50 mg dan Metformin HCl 1000 mg
3. BAHAN DAN ALAT
Bahan
- Standar Sitagliptin fosfat
- Standar Metformin HCl
- Tablet Janumet
- Aquadest

Alat
- Spektrofotometer
- Alat gelas lain

4. PROSEDUR
Larutan Standar STA : 1 mg/ml
Larutan Standar MTF : 0,1 mg/ml
dalam aquadest.
Perhitungan dan preparasi sampel digunakan dalam bentuk garam Sitagliptin fosfat dan
metformin HCl yang di preparasi 24 jam sebelum digunakan setelah disimpan dalam
pendingin.

5. METODE SPEKTROFOTOMETRI LANGSUNG


- Karakteristik Spektra dari Sitagliptin dan Metformin
Dari 3 ml larutan sitagliptin 1 mg/ml dan 1,5 ml larutan metformin 0,1mg/ml yang
dilarutkan dalam aquadest,di pindahkan kedalam 2 labu ukur 10,0 ml dan di ad kan
dengan menggunakan aquadest untuk mendapatkan konsentrasi akhir 300 g/ml sitagliptin
-

dan 15 g/ml metformin.


Linieritas
Dalam 0,25-5,0 ml standar sitagliptin mengandung 1 ppm sitagliptin yang dipindahkan
kedalam labu ukur 10 ml dan di ad kan dengan aquadest ad batas tanda untuk
mendapatkan kadar dengan rentang 25-500 g/ml.

6. METODE ISOSBESTIC
-

Pembuatan kurva kalibrasi


Bagian dari larutan yang mengandung sitagliptin dan metformin 1 mg/ml,1dan 10 mg/ml
untuk mendapatkan rentang katar sitagliptin 25-500 g dan 20-1000 g kadar metformin
dipindahkan kedalam dua labu ukur 10,0 ml dan di ad kan dengan aquadest sampai garis
tanda. Setelah preparasi tersebut rekam spektra sitagliptin dan metformin dengan
menggunakan blanko aquadest dan diukur absorbansi sitagliptin pada panjang gelombang
268 nm dan metformin pada panjang gelombang 257 nm.
Dua kurva kalibrasi dibuat dari hubungan antara absorban dan panjang gelombang terpilih
untuk menghitung konsentrasi dengan regresi linier.
Untuk obat 1 dan 2,absorban dapat dihitung pada beberapa panjang gelombang terpilih
dari persamaan :
A

bc . . . . . (1)

Untuk obat 1 :
A1

C1 . . . (2)

dan untuk obat 2 :


A2

C2 . . . (3)

Keterangan :
A1 dan A2 = absorban obat 1 dan obat 2
C1 dan C2 = konsentrasi obat 1 dan obat 2

= absortivitas pada tebal kuvet 1 cm


Dengan konsentrasi 1g/100 ml untuk obat

Jika C1 = C2 , A1 = A2 ,dan b1 = b2 , panjang gelombang ini disebut isosbestic point.


Dan pada panjang gelombang ini :
= A2
Untuk campuran dua bahan obat,absorban pada panjang gelombang dapat dihitung dari
persamaan :
AM
= A1

C1M + A2

AM

(C1M+ C2M ) = A1

= A1

C2M
(CTM )

Keterangan :
AM
= absorban campuran isobestic point
C1M dan C2M = konsentrasi obat 1 dan obat pada campuran
CTM
= konsentrasi campuran
Kesimpulan

(C1M + C2M = CTM )


Jika mempunyai data konsentrasi total dan konsentrasi salah satunya,maka dapat dihitung
konsentrasi obat kedua dengan cara subtitusi.
Teori ini dapat dikonfirmasi secara eksperimental dengan merekam spektra absorban dari
konsentrasi dua obat dan spektra absorban dari campuran kedua obat dengan konsentrasi
yang sama.

Bagian dari 500 g/ml sitagliptin dan 500 g/ml metformin diambil 1mg/ml,dimasukkan
kedalam dua labu ukur 10,0 ml dan di ad kan dengan aquadest sampai batas tanda untuk
mendapatkan konsentrasi akhir 50 g/ml sitagliptin dan 50 g/ml metformin.
Campuran disiapkan dengan memindahkan 250 g/ml sitagliptin dan 250 g/ml
metformin kedalam labu ukur 10,0 ml dan di ad kan dengan aquadest sampai garis tanda
untuk mendapatkan konsentrasi 25g/ml sitagliptin dan 25g/ml metformin.
Spektra dari larutan yang disiapkan direkam secara terpisah.

Analisis Campuran Preparasi Laboratorium


Absorban dari campuran preparasi laboratorium mengandung rasio berbeda dari sitagliptin
dan metformin yang diukur pada panjang gelombang 268 nm yang hanya mengandung
sitagliptin dan pada panjang gelombang 257 nm yang berisi konsentrasi total sitagliptin
dan metformin dalam campuran.
Konsentrasi sitagliptin tunggal dan konsentrasi total dari kedua bahan obat dihitung dari
perhitungan persamaan regresinya. Konsentrasi metformin dalam campuran diperoleh
dengan mensubtitusikan konsentrasi sitagliptin dari konsentrasi total.

Uji Kadar dari Formulasi Farmasetik (Janumet Tablet)


20 tablet ditimbang dan dihitung rata-ratanya, kemudian tablet digerus sampai jadi serbuk
halus dan homogen. 2,375 gm serbuk tab dilarutkan dengan bantuan ultrasonik selama 2
jam. Setelah itu saring dengan filter kertas Whatman no.41 untuk menyiapkan larutan
sampel yang dideskripsikan di bawah ini.