PT.

Maja Bintang Indonesia

PT. Maja Bintang

Indonesia
REVIEW
JURNAL
SPE (Solid Phase Extraction): Teknik Terbaru dalam Preparasi Sampel
Analisis Obat dalam Sediaan Farmasi dan dalam Cairan Biologis

Oleh :
Muchtaridi
1

Departemen Farmakokimia, Fakultas Farmasi UNPAD

ABSTRACT
Sample preparation is one of the step in analysis wich able to determine efficacy
of analysis, because it can establish reproducibility and recovery of the matrix
interference. SPE (Solid Phase Extraction) and SPME (Solid Phase
Microextraction) is recent trends in sample preparation for reduction solvent
volume and time. This article reviews recent advances in sample preparation
techniques for pharmaceutical analysis, with special focus on SPE.
PENDAHULUAN
Identifikasi dan kuantifikasi suatu senyawa obat dan metabolitnya dalam
cairan biologis secara ekstensif dikembangkan untuk kebutuhan perkembangan
kajian ketersediaan hayati obat (bioavailability) dan profil farmakonetika obat itu
sendiri.
Materi biologis seperti darah dan urin dan sediaan farmasi seperti tablet,
sirup, dan krim memiliki matriks yang kompleks, karena di dalamnya terdapat
protein, polisakarida, steroid, lemak, garam, asam dan basa organik yang dapat
mengganggu dalam analisis senyawa aktif obat yang diperiksa. Selain itu, analat
senyawa aktif memiliki kadar yang rendah dalam sampel.
Kecenderungan penggunaan instrumen oleh peneliti di industri atau
peneliti lain untuk analisis obat dalam matriks sampel sangat besar. Meskipun
perkembangan analisis instrumen dengan efisiensi tinggi untuk menentukan
analat di dalam sampel biologis dan sediaan jadi telah berkembang pesat, namun
pre-treatment atau preparasi sampel dalam mengisolasi, mengekstrak, dan
mengkonsentratkan komponen interest dalam matriks sampel tetap sangat
diperlukan, sebab instrumen secanggih apapun tidak bisa menangani matriks
secara langsung.
.
Ekstraksi cair-cair sudah banyak ditinggalkan dalam preparasi sampel,
sebab cara ini memiliki banyak keterbatasan seperti solven yang berjumlah besar
akan mengkibatkan analat tidak terkonsentratkan, analat yang bersifat ionik dan
sangat polar (karena pelarutnya sukar diuapkan) banyak kendala dalam
pemisahannya.
Oleh karena itu, untuk mencegah kelemahan ini, dua teknik utama yang
saat ini sedang berkembang yaitu SPE dan SPME dapat menghasilkan analisa
1

PT. Maja Bintang Indonesia

sangat efisien dengan recovery yang tinggi. Pada artikel ini, hanya akan dibahas
aplikasi SPE saja pada analisis obat dalam sediaan dan cairan biologis.
Pada SPE, sampel disaring melalui suatu fasa padat yang dapat menseleksi
zat analat setelah dielusi dengan fasa gerak yang volumenya sedikit. Teknik ini
dapat mengkonsetratkan analat yang memiliki konsetrasi rendah, jika pemilihan
fasa pada yang ditempatkan pada kolom sesuai dengan sifat fisikokimia analat [12]. Sebagai tambahan, beberapa sistem kini tersedia dalam bentuk cartridge
seperti yang dikeluarkan Baker (Jerman), Supelco (USA), Waters (Inggris),
Varian (Jerman), Merck (Jerman), dan Schimadzu (Jepang), namun ada juga yang
on-line otomatis dengan HPLC, GC, atau CE [2, 3, 4].
PREPARASI SAMPEL DENGAN SOLID PHASE EXTRACTION (SPE)
SPE diadopsikan secara luas dalam preparasi sampel berbagai jenis
sediaan farmasi dan zat aktif obat terutama dalam cairan biologis. Kerns et al. [6]
menyatakan bahwa SPE merupakan penemuan baru untuk lebih memudahkan
dalam mengungkapkan profil farmasetika suatu obat. SPE digabungkan (on-line)
dengan tandem MS-MS sebagai autosampler, seperti yang terlihat pada Gambar
1.

Gambar 1. Diagram Sistem SPE-LC-MS/MS [6]

Selain itu autosampler digunakan pada instrumen lain seperti SPE-SIA

(Sequential Injection Analysis) [22], SPE-LC/MS [31], dan HPLC-SPE [9, 17,
40].
SPE mampu menangani sampel dalam jumlah yang besar hingga 50
sampel per hari pada analisa rutin obat golongan sulfonamida dengan langkah
yang singkat [6].
SPE sangat efektif untuk preparasi sampel dalam cairan biologis [7-21,
40], namun juga dapat dioptimalkan dalam sediaan farmasi yang berupa cairan [6,
19, 22-33] dan mendukung untuk preparasi sampel pada analisis pencemaran
lingkungan oleh obat [23, 27, 34-39].

ANTIBIOTIKA

PT. Maja Bintang Indonesia

Analisis berbagai jenis sifat kepolaran obat dapat dibantu preparasinya

oleh SPE. Preparasi sampel untuk antibiotika golongan -laktam telah diterapkan
dengan menggunakan SPE. Sefalosforin dalam darah dan urin dapat dipekatkan
dengan menggunakan kolom oktadesil Spherishorb ODS-2 pada sistem SPE
dengan eluen campuran buffer asetat dan metanol, recovery analisis meningkat
hingga antara 76-112 % [19], bahkan prosedur baru untuk spektrometer penentuan
sefotaksim hanya dibedakan dengan penggunaan SPE dibandingkan dengan
prosedur sebelumnya [15]. Antibiotik lain [18, 35], seperti siprofloksasin dalam
cairan biologis dipreparasi dengan C18-SPE menghasilkan analisis dengan
reprodusibilitas yang tinggi, selain itu HPLC menjadi dapat mendeteksi senyawa
tersebut dengan limit deteksi hingga 20 pg [18].
ANTI INFLAMASI
Obat-obat antiinflamasi turunan tersier-butildimetilsilil (ketopropen,
ibuprofen, naproksen, tolfenamik, dan diklofenak) dapat dideteksi dalam bentuk
asamnya dalam polutan air melalui GC-MS dengan limit kuantifikasi 20-50 ng/l,
sedangkan recovery mencapai 90-115 %, antiinflamasi non steroid lain seperti
indometasin [9] dan asam antranilat [4] menggunakan preparasi dengan C18 yang
menghasilkan limit detaksi masing masing 2,0-3,5 ng dan 50 ng.
STEROID
Sedangkan antiinflamasi steroid dilaporan oleh AbuRuz et al. (2003).
Menurutnya, analisis prednisolon dan kortisol dengan preparasi SPE-HLB
(Hydrophilic Liphophilic Balanced) lebih reprodusibel dibandingkan dengan
ekstraksi solven cair-cair [42]. Estron dan estrodial memberikan recovery yang
tinggi pada kolom SPE-OASIS HLB ((ukuran partikel 30 m, berat 200 mg) dan
Bakebond-SDB 1 (ukuran partikel 40 m, berat 200 mg), namun pada kolom HRP (ukuran partikel 50 m, berat 500 mg) dan kolom Chromabond EASY (ukuran
partikel 40/80 m, berat 500 mg) memiliki recovery sekitar 70 % [24]. Hal ini
kemungkinan disebabkan oleh ukuran partikel dan jumlah kemasan, semakin kecil
ukuran partikel dan jumlah kemasan, semakin besar recoverynya.
SANTIN
Efisiensi dan efektifitas SPE diperlihatkan oleh Ray ku et al. (1999) dalam
menganalisi kafeine dari teh yang diresepkan dalam obat tradisional China.
Menurutnya, clean-up dengan SPE-C18 dapat mengurangi pengotor dalam
analisis seperti yang terlihat pada Gambar 2.

PT. Maja Bintang Indonesia

Sebelum diclean-up C18

Setelah pencucian oleh pelarut

Sesudah diclean-up C18

Waktu (menit)

Gambar 2. Kromatogram HPLC kafein (CA) sebelum clean-up dengan SPE-C18 (a) dan 8kloroteofilin (CT) yang terdeteksi setelah clean-up dengan SPE-C18 (c) dan setelah dilakukan
pencucian (b) [25].

Weigel et al. (2004), melaporkan recovery analisis kafein dengan berbagai

jenis kolom SPE (Bakebond SPE, Lichrolut EN, Isolut Env+, Chromabond HR-P,
Chromabond EASY, Abelut Nexus dan OASIS HLB) yang semuanya berisi
polistiren divenilbenzen (PS-DVB), hanya besar permukaan, jumlah partikel dan
ukuran partikel yang membedakan pada penelitian tersebut. Semua jenis kolom
memberikan recovery di atas 90 %.
-BLOCKER
Obat-obat -blocker yang digunakan dengan kadar kecil dapat
dikuantifikasi dengan baik setelah berbantuan SPE (C18)-HPLC [16] dan SPE
(C18)-CE [7, 8], karena analisis ini menghasilkan akurasi, reprodusibilitas,
linearitas, dan LOQ yang tinggi. Pada analisis oksprenolol dan timolol, menurut
Maguregui et al. (2002) Bond Elut Certify LRC SPE membantu meningkatkan
recovery analisis hingga 94,52 % [8]. Khartat et al. (2002) melaporkan bahwa
preparasi analisis lasipidin dalam dengan menggunakan SPE-Seppak C18 sangat
efektif untuk diaplikasikan pada studi farmakokinetik.
Multi vitamin baik larut air maupun larut lemak dapat dipisahkan dengan
baik menggunakan SPE-C18 sebelum dinalisis oleh HPLC [26].
SENYAWA OBAT VOLATIL
Selain senyawa non volatil, SPE dapat diaplikasikan pada analat yang
bersifat volatil [22, 32, 36]. Recovery pada analisis miristisin dalam plasma darah
mencit setelah inhalasi minyak biji pala dengan menggunakan C18 (Sep Pak
4

PT. Maja Bintang Indonesia

Waters) mencapai 90 %, dibandingkan dengan tanpa perlakuan SPE, selain itu

senyawa-senyawa volatil lain lebih banyak terdeteksi seperti terlihat pada Gambar
3 [24].
Standar
Internal

Gambar a

Metil
palmitat

Perlakuan tanpa SPE-C18

Standar
Internal

Gambar b

Metil
palmitat

4-terpineol
Miristisin

Perlakuan dengan SPE-C18

Gambar 3. Kromatogram ion total senyawa miristisin dalam plasma darah mencit setelah inhalasi
minyak biji pala. Gambar (a) analisis tanpa preparasi dengan SPE-C18 (b) analisis dengan
preparasi SPE C18 [24].

Pada Gambar 3 terlihat bahwa dengan penggunaan SPE, senyawa-senyawa

pengotor menjadi berkurang, bahkan kadar standar internal 1,4-diklorobenzen
lebih besar (b) dan senyawa miristisin muncul pada menit ke-17 (Muchtaridi et
al). Aplikasi SPE pada senyawa volatil sebelumnya dikembangkan oleh Jirovetz
et al. (1991) [32, 36].
Selain itu masih banyak aplikasi SPE pada analisis obat baik dalam
sediaan maupun dalam cairan biologis, seperti yang terlihat pada Tabel 1.

PT. Maja Bintang Indonesia

Tabel 1. Aplikasi SPE pada analisis obat baik dalam sediaan farmasi maupun dalam cairan
biologis
No.
Analat
Jenis Sampel
Kemasan SPE
Acuan
1.
Derivat asam antranilat (asam Tablet dan urin
Pertukaran
ion [4]
mefenamat, asam flufenamat dan
(Bond-Elut SAX)
asam tolfenamat)
2.
Cilazapril
Tablet dan urin
C8
[7]
3.
Reboteksin
Plasma darah
HLB-OASIS
[10]
4.
Multi vitamin
Tablet dan sirup
C18-AR
[26]
5.
Naproksen dan nabumeton
Tablet dan urin
Anion
Exchange- [3]
Bond Elut Certify II
6.
Talidomid
Tablet, urin dan C18
[11]
plasma darah
7.
Vitamin C dan Rutin
Tablet
C18 mikrokolom
[30]
8.
Neurokinin-I antagonis reseptor
Zat aktif
HLB-OASIS
[31]
9.
Eritromisin,
roksitromisin, Polutan air
C18
[35]
sulfadiazin,
sulfametazin,
sulfametokzasol, dan trimetoprim
10.
Siproloksasin
Darah
C18
[18]
11.
Tetrasiklin
Tablet
C18
[32]
12.
Kurukumin
Sediaan Jamu
Tributil fosfat resin
[33]
13.
Oksprenolol dan timolol
Urin
Bond Elut Certify
[8]
LRC SPE
14.
Cefotaksim
Urin
C18
[15]
15.
Lasidipin
Urin
C18
[16]
Metformin
Plasma darah
Ion pair
[41]
16.
17.
18.
19.
20.
21.

Prednisolon dan kortisol

Benzalkonium klorida
Retinoid
Indometasin
Nifedipin
Sulfonamida

Darah dan urin

Darah dan jaringan
Larutan
Plasma darah
Kapsul
Berbagai sediaan

HLB-OASIS
C18-Bakebond
C18
TSK BSA-C18

[42]
[7]
[23, 40]
[9]

C18

[6]

Aplikasi SPE untuk Analisis Cemaran Air oleh Produk Farmasi

Perkembangan industri farmasi mengakibatkan pencemaran lingkungan
oleh polutan produk farmasi semakin banyak, sehingga prosedur analisis cemaran
farmasi dalam air ataupun dalam tanah diperlukan teknik yang cepat, akurat,
efisien, dan murah. Penggunaan SPE dalam membantu analisis cemaran produk
farmasi dijelaskan oleh beberapa peneliti [27, 28, 34-39]. Koutsouba et al. (2003)
melaporkan adanya diklofenak, ibuprofen dan metabolitnya dalam air comberan
di daeran Urban Yunani setelah preparasi dibantu SPE-C18 (Bakebond-Baker)
[28], sedangkan Rodriguez et al. [27] dapat menemukan turunan asam antranilat
sebagai tert-butildimetilsilil dengan bantuan SPE-OASIS HLB dalam air kotoran
yang terdapat di sekitar lingkungan industri dan rumah sakit Spanyol. Ternes et al.
[38] dapat mengidentifikasi kafeine, propipenazon, 4-aminoantipirine, diazepam,
glibenklamid, nifedipine, omeprazole, oksipenbutazone, dan penilbutazon pada 6
lokasi sungai di Frankfurt dengan preparasi C18. Ternes et al. [37] mengulas
berbagai macam metode analisis cemaran farmasi dan hampir keseluruhannya
menggunakan SPE untuk preparasi sampelnya. Peneliti lain, seperti Hilton dan
Thomas [39] memaparkan bagaimana keterhandalan teknik SPE untuk preparasi
sampel cemaran farmasi pada air seperti yang teerlihat pada Tabel 2.

PT. Maja Bintang Indonesia

Tabel 2. Data analisis Recovery, LOD, dan Koefisien variasi dari preparasi kolom
Bond Elut C18 dan Phenemenes Strata X pada sampel cemaran faramasi pada air [39]
Recovery Kolom SPE
Koefisien
Waktu
Analat
VARIAN Strata X
Variasi
Retensi
(SD)
(SD)
56 (5.4)
56 (4.8)
4.3
0.9989
Acetil-sulfamethoksazole
83 (7.0)
62 (10)
13.8
0.9690
Asam klofibrat
63 (3.9)
43 (25)
16.4
0.9843
Dekstropropoksipene
62 (20)
44 (9.7)
16.6
0.9998
Diklofenak
0.92 (16) 73 (30)
19.4
0.9942
Erithromisin
108 (5.5) 117 (22)
15.5
0.9784
Ibuprofen
0.13 (54) 4.2 (35)
23.8
0.9989
Lofepramin
24 (7.9)
19 (14)
17.8
0.9988
Asam mefenamat
75 (6.9)
61 (6.8)
14.8
0.9989
Parasetamol
45 (5.6)
41 (4.2)
15.3
0.9947
Propranolol
120 (16)
43 (26)
4.0
0.9966
Sulfamethoksazole
42 (40)
17 (37)
20.5
0.9941
Tamoksifen
123 (2.5)
39 (9.3)
14.5
0.9943
Trimetoprim

SPE Varian

LOD
(ngl-1)
50
50
20
20
10
20
10
50
50
10
50
10
10

Pada Tabel 2 dapat dijelaskan bahwa penggunaan kolom kolom Strata X

(Phenomenex) memberikan hasil terbaik dibandingakan C18. Penelitian ini pun
sekaligus menjelaskan bahwa SPE memiliki kapasitas besar untuk merecovery
senyawa-senyawa yang kadarnya kecil dalam sampel, dan data ini didukung oleh
peneliti Wiegel et al. [3] yang menggunakan 7 jenis kolom SPE, dan dapat
mengidentifikasi 14 senyawa obat dalam cemaran air .
JENIS KEMASAN KOLOM SPE DAN PEMILIHANNYA
Berbagai jenis kolom SPE telah dipasarkan secar komersial dengan isi
kemasan bermacam-macam sesuai yangn diinginkan dalam analisis. Pada dasarya
pemilihan kolom SPE, sama halnya dengan cara memilih kolom pada HPLC.
Interaksi gaya intermolekul antara fase eluen (solven) dan interes (analat dan
interference) menjadi pertimbangan dalam pemilihan kolom SPE. Interaksi
tersebut melibatkan sifat non polar, polar atau interaksi ionik [36]. Sebagai
contoh, Moreno dan Salvado [26] menjelaskan dalam metodenya mengapa
mereka menggunakan kolom C18 untuk memisahkan multivitamin larut air dan
larut lemak. Menurutnya, strategi SPE umumnya terdiri dari mengisolasi dan
mengkonsetratkan analat dari suatu matriks kompleks sampel dengan
mengadsorpsi ke suatu sorbent, menghilangkan zat interference dengan pencucian
dan memodifikasi sistem solven untuk menghasilkan recovery yang lebih baik.
Sampel dilarutkan dalam solven yang polar, kemudian larutan diseleksi dengan
sistem Reversed-phase, senyawa polar akan berinteraksi dengan sorben yang non
polar, sehingga senyawa interference polar akan tertahan. Suatu eluen polar
dibutuhkan untuk mencuci material (interference) lebih polar yang tertahan pada
fasa padat.
Strategi untuk mengoptimasi SPE dilaporkan oleh Ferreira et al. (2004).
Koefisien distribusi dapat digunakan untuk memperkirakan jenis eluen dan jenis
kolom. Hal ini dijelaskan pada Tabel 3, kolom dengan kemasan resin (IST-ENV
dan Lichrolut-EN) memiliki kapasitas lebih besar, sedangkan kolom dengan
kemasan C18 (Bond elut dan Varian) memiliki selektivitas yang lebih baik, hal
tersebut terlihat dari koefisien distribusinya yang besar. Namun, pemilihan secara

PT. Maja Bintang Indonesia

cepat dapat ditentukan dengan memperkirakan polaritas analat atau interaksi

analat.
Tabel 3. Koefisien distribusi fasa padat-cair dari analat dan interference dengan sorbent SPE
IST
LiChrolut Bond
Bond Elut VAR DSC
Jenis Kolom SPE
ENV
EN
Elut ENV LMS
C18
C18
Interference utama
Isoamil Alkohol
-Feniletanol
Asam heksanoat

63
366
657

88
441
954

31
108
227

31
98
229

3
9
27

10
15
33

Analat
trans-Whiskylactone
cis-Whisky lactone
-Octalactone
-Nonalactone
-Decalactone
-Decalactone
-Undecalactone
-Dodecalactone

4259
5126
2240
2630
12000
3130
5785
2480

4240
5274
2178
2871
10000
3950
4390
2671

2003
2073
1912
2696
7882
3536
5257
2567

1476
1569
1205
2317
10003
3162
4879
2223

98
78
69
99
410
308
793
1905

87
62
70
164
435
348
805
1379

Selektifitas (vs isoamil alkohol)

Rata-rata
Minimum

74.7
35.6

50.5
24.8

113
61.7

108
38.9

157
23.0

41.9
6.2

12.9
6.1

10.1
4.9

32.3
17.7

34.2
12.3

52.2
7.7

27.9
4.1

7.2
3.4

4.7
2.3

15.4
8.4

14.6
5.3

17.4
2.6

12.7
1.9

Selectifitas (vs -feniletanol)

Rata-rata
Minimum
Selectifitas (vs asam heksanoat)
Rata-rata
Minimum

= selektifitas

Wiegel et al. (2004) meneliti perbandingan reprodusibilitas dan recovery

tujuh kolom SPE (Bakebond SDB-1, Lichrolut EN, Isolute ENV, Chromabond
HR-P, Chromabond EASY, Abselut Nexus dan OASIS HLB) analisis pada empat
belas senyawa cemaran dari farmasi. Enam dari tujuh kolom berisi polistiren
divenil benzen, sedngkan Abselut Nexus berisi polistitren metaktrilat. Recovery
dari ketujuh kolom tersebut diperlihatkan pada Tabel 4 [3].
Pada Tabel 4 diperlihatkan bahwa kolom HBL-OASIS dan Isolut Env
memberikan recovery terbaik, hal ini dikarenakan kedua kolom tersebut memiliki
keseimbanngan gugus polar dan non polar dibandingkan kolom lain. Kemasan
kolom pertukaran ion akan lebih cocok pada senyawa-senyawa yang derajat
ionisasinya tinggi seperti N,N-dietil-3-toluamida, kafein dan karbamazepin,
sedangkan kemasan kolom yang memiliki sisi hidrofilik dan hidrofobik akan
dapat memisahkan semua komponen dengan baik seperti yang terjadi pada OASIS
HLB. Senyawa asam kuat seperti asam diklofenak dan asam klofibrat hanya dapat
dipisahkan dengan baik oleh dua jenis kolom yaitu OASIS-HLB dengan kemasan
PS-DVB-N-vinilpirolidon dan Abelut Nexus dengan kemasan PS-metakrilat,
artinya kedua kolom tersebut dapat memisahkan pada berbagai kondisi keasaman.

PT. Maja Bintang Indonesia

Tabel 4. Recovery pada 7 kolom SPE dalam analisis sampel air tercemar produk farmasi (n=3) [3].
Sorben

Bakerbond SDB

1 Lichrolut EN

Isolute Env+

Chromabond HR

Tipe polimer
Luas permukaan (m2/g)
Ukuran parrikel (m)
Jumlah (mg)

PS-DVB-OH
1000
90
200
Recoverya SD

PS-DVB
1200
50100
500
Recoverya

PS-DVB-OH
1000
90
200
Recoverya SDb

PS-DVB
1200
50100
500
Recoverya

SD

SD

Chromabond
EASY
PS-DVB-AX
650700
40/80
500
Recoverya SDb

Parasetamol
60
4
37
4
39
22
72
4
50
Kafeine
99
4
91
2
99
9
94
3
99
DEET
96
3
100
3
94
6
91
2
100
Karbamazepin
100
3
97
2
104
3
95
5
99
Oksazepam
65
3
74
2
81
4
27
5
80
Fluoksetine
69
4
80
5
86
7
53
5
86
Metoprolol
81
6
79
13
50
14
52
4
79
Propranolol
68
4
65
8
36
22
50
6
70
Estrone
92
2
75
0
80
3
54
5
71
17-Estradiol
96
2
89
3
101
5
85
5
95
Asam klofibrat
54
3
29
1
48
10
25
4
27
Bezafibrate
55
9
55
5
43
9
23
5
18
Ibuprofen
46
2
61
4
55
9
6
10
10
Diklofenak
42
6
62
3
38
7
19
4
1
Kondisi: 1l sampel air (pH 7,8) pada concentration of 25 g/l. PS: polistirena, DVB: divinilbenzena, EVB: etilvinilbenzena, OH: hidroksi,
AX: anion exchanger lemah, MA: metakrilat, NVP: N-vinilpirrolidone.
a

n = 1.

S.D. standar deviasi (volume elusi 70 ml, n = 3).

25
3
3
3
4
4
3
1
3
0
3
110
25
92

Abselut Nexus

Oasis HLB

PS-MA
500650
6580
200
Recoverya

SD

PS-DVB-NVP
810
30
200
Recoverya SDb

0
25
91
95
91
94
97
90
92
95
23
87
68
90

0
2
3
1
4
4
2
2
1
1
3
2
1
3

14
97
100
101
98
88
96
98
96
98
83
95
98
102

2
3
3
2
1
2
7
4
3
2
6
2
1
2

PT. Maja Bintang Indonesia

10

PT. Maja Bintang Indonesia

Saat ini, Molecularly Imprinted Polymers (MIPs) merupakan jenis kolom

terbaru yang telah diaplikasikan dalam analisis produk farmasi. Berikut Tabel 5
memaparkan beberapa penelitian yang memakai kolom SPE-MIPs.
Tabel 5. Aplikasi kolom MIPs pada preparasi analisis obat dalam Sediaan farmasi
dan cairan biologis
Analat
Jenis Sampel
Acuan
7-Hydroxycoumarin (coumarin)
Pentanamide ( to treat AIDS-related
pneumonia)
Propranolol (anti-hypertensive and antiarrhythmic )
Sameridine ( local anaesthetic and
analgesic )
Tamoxifen (anti-oestrogenic )
Atrazine (herbicide)
Nicotine
Theophylline ( bronchodilator )
Indoleacetic acid ( plant hormone)
Darifenacin (to treat urinary
incontinence)
4-Aminopyridine (potassium channel
blocker )
Clenbuterol (growth promoter )
Bupivacaine (anaesthetic )
Triazines (herbicides )
Atenolol (anti-hypertensive and antiarrhythmic )

PT. Maja Bintang Indonesia

Urine
Human urine

[14]
[ 22]

Dog plasma, rat bile and human urine

aqueous solution
Human plasma

[ 30, 53 ]
[ 54 ]

Human plasma and urine

Beef liver extracts
Chewing gum
Human serum
Chloroformic solution
Human plasma

[ 55 ]
[ 56 ]
[ 57 ]
[ 58, 59]
[ 60 ]
[ 61 ]

Human serum

[ 62 ]

Calf urine
Human plasma
Urine
Methanolic or acetonitrilic solution

[ 63 ]
[ 64 ]
[ 65 ]
[ 66 ]

Aplikasi SPE Pada Kajian Farmakonetik dan Ketersediaan Hayati

Peran SPE dalam membantu analisis obat untuk perkembangan bidang
ilmu farmakokinetik dan ketersediaan hayati (biovaibility) sangat besar, karena
kajian ilmu tersebut tidak lepas dari cairan biologis seperti urin dan darah.
Schutze et al. [31] meneliti keterhandalan SPE-Genesis otomatis dalam preparasi
analisis neurokinin-1 antagonis dan metabolitnya untuk kebutuhan
farmakokinetik, hasilnya menunjukkan bahwa integrasi SPE-LC/MS dapat
membantu dalam mengkaji farmakokinetik suatu obat. Peneliti lain [9,13]
menyatakan bahwa selain untuk kebutuhan farmakokinetik, SPE dapat digunakan
untuk analisis rutin dengan kapasitas jumlah sampel yang banyak, hal itu
diterapkan pada kontrol stabilitas obat antiinflamasi indometasin (Liu et al.[9]),
naproksen, nabutamen (Mikami et al. [13]), anti diabetes metformin (AbuRuz et
al. [41]), antidepresan reboksetin (Raggi et al. [10]), -blocker lasidipin (Kharat
et al. [16]), steroid prednisolon dan kortisol (AbuRuz et al. [42]), antibiotik
ciproploksasin (Zotou et al. [18]), dan sefalosporin (Samanidou et al [19]). Selain
untuk kebutuhan farmakokinetik, penelitian tersebut juga meneliti ketersediaan
hayati obat. Selain itu, Kerns et al. [6] memanfaatkan SPE untuk menerangkan
profil obat baru. Ketersediaan hayati retinoid (vitamin A) dilaporkan oleh Gatti et
al. [23] dan Ruhl et al. [40]. Kedua penelitian tersebut menggunakan SPE (C2modified silica [40] dan C18 [23]) untuk preparasi sampel.
Perbandingan dengan Teknik Preparasi lain
Menurut Castell et al. [43] kombinasi teknik SPE-GC/NSI-MS lebih
selektif dan akurat dengan LOD lebih kecil dibandingkan dengan teknik SPMEGC/NSI-MS dalam mengukur paraffin terklorinasi dalam air, kedua teknik (SPE
11

PT. Maja Bintang Indonesia

dan SPME) dibandingkan dengan melihat koefisien distribusinya. Namun,

recovery dan standar deviasi SPE tidak lebih baik dengan teknik kolom Chem
elut, meskipun demikian SPE efektif dalam preparasi okratoksin dalam makanan
[20]. Berbeda dengan yang dikemukakan Zheng et al. [12], baik SPE ataupun
FAST LC tidak memiliki kelebihan jika ditandemkan dengan sitem MS-MS dalam
menganalisa 27 senyawa produk farmasi dalam media mikrosomal.
Akhirnya, aplikasi SPE tidak selalu baik pada setiap proses analisis,
karena SPE hanya mampu memnangani sampel-sampel cair, untuk menutupi
kekurangan SPE, maka dikembangkan SPME yaitu modifikasi SPE dengan
mikrokolom, sehingga dengan SPME kekurangan SPE dapat tertutupi, dan pelarut
lebih minimal, serta biaya yang murah dan waktu yang cepat.
Kesimpulan
Aplikasi SPE dalam analisis sediaan farmasi baik pada sediaan, cairan
biologis, maupun pada pencemaran air sangat besar perannya. SPE memiliki
keunggulan dari metode sebelumnya, yaitu recovery yang besar, kapasitas
separasi yang besar, waktu yang cepat, pelarut yang sedikit, pengoperasian yang
mudah, dan dapat dilakukan dengan otomatisasi. Namun SPE memiliki
kelemahan, yaitu hanya mampu diaplikasikan pada sampel cair.
Ucapan Terima Kasih
Diucapkan terima kasih kepada Prof. Dr. G. Buchbauer dan Dr. L. Jirovetz
(Vienna University) yang telah memberikan publikasi-publiokasi penelitiannya,
juga pada Dr. Ir. Anton Apriyantono (IPB) dan Dr. Anas Subarnas (UNPAD), atas
bimbingannya.
Pustaka Acuan
1. Masque N., R.M. Marce, F. Borrull. Trends in Analytical Chemistry, 20/9 (2001)
477-486.
2. Ferreira V., I. Jarauta, L. Ortega, J. Caho. Journal of Chromatography A, 1025
(2004) 147156.
3. Weigel S., R. Kallenborn, H. Hhnerfuss. Journal of Chromatography A, 1023
(2004) 183195.
4. Mikami E., T. Goto , T. Ohno , H. Matsumoto , K. Inagaki , H. Ishihara, M. Nishida.
Journal of Chromatography B, 744 (2000) 8189.
5. B. Sellergren, Anal Chem, 66 (1994) 1578.
6. Rhl R., F.J. Schweigert. Journal of Chromatography B, 798 (2003) 309316.
7. Prieto J.A., U. Akesolo, R. M. Jimenez , R.M. Alonso. Journal of Chromatography
A, 916 (2001) 279288.
8. Maguregui M.I., R.M. Jimenez , R.M. Alonso , U. Akesolo. Journal of
Chromatography A, 949 (2002) 9197.
9. Liu S., M. Kamijo, T. Takayasu, S. Takayama. Journal of Chromatography B, 767
(2002) 5360.
10. Raggi M.A., R. Mandrioli , G. Casamenti , V. Volterra , S. Pinzauti. Journal of
Chromatography A, 949 (2002) 2333.
11. Cardoso C.E., R.O.R. Martins, R.Q. Journal of Aucelio. Microchemical, xx (2003) 1
7.
12. Zheng J.J, E.D. Lynch, S.E. Unger. Journal of Pharmaceutical and Biomedical
Analysis, 28 (2002) 279285

12

PT. Maja Bintang Indonesia

13. Mikami E., T. Goto, T. Ohno, H. Matsumoto, M. Nishida . Journal of

Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 23 (2000) 917925.

14. Walshe M., J. Howarth, M.T. Kelly, R. O'Kennedy, M.R. Smyth, J. Pharmaceutical
Biomedicinal Analysis, 16 (1997) 319.
15. Martinez L.G., P. Campins-Falco, A. Sevillano-Cabeza, F. Bosch-Reig. Journal of
Chromatography B, 718 (1998) 143151.
16. Kharat V.R., K.K. Verma, J.D. Dhake. Journal of Pharmaceutical and Biomedical
Analysis, 28 (2002) 789793. [short communication]
17. Xue Y., Y. Hieda, K. Kimuraa, T. Nishiyama, T. Adachi. Legal Medicine, 4 (2002)
232238.
18. Zotou A., N. Mitiadou. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 28
(2002) 559568.
19. Samanidou V.F., E.A. Hapeshi, I.N. Papadoyannis. Journal of Chromatography B,
788 (2003) 147158.
20. Domijan A.M., M. Peraica, M. Miletic-Medved, A. Lucic, R. Fuchs. Journal of
Chromatography B, 798 (2003) 317321
21. Kerns E.H., T. Kleintop, D. Little, T. Tobien, L. Mallis, L. Dia, M. Hua, Y. Hong,
O.J. McConnell. (2003) Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. xxx (5)
xxxxxx.
accsess
in
http://
0-

www.sciencedirect.com.newcutter.newcastle.edu.au/science [01 Januari 2004]

22. Legnerov Z., D. atinsk, P. Solich. Analytica Chimica Acta, 497 (2003) 165174.
23. Gatti R., M.G. Gioia, V. Cavrini. Journal of Pharmaceutical and Biomedical
Analysis, 23 (2000) 147159.

24. Muchtaridi, A. Apriyantono, A. Subarnas, S. Budijanto. Proceeding of International

Symposium on Biomedicine; Bogor : 18-19 Sept 2003. p.31 Biopharmaca Research
Center. Indonesia.
25. Ray Ku Y., K.C. Wen c, L.K. Ho, Y.S. Chang. Journal of Pharmaceutical and
Biomedical Analysis, 20 (1999) 351356.
26. Moreno P., V. Salvado. Journal of Chromatography A, 870 (2000) 207215.
27. Rodrguez I., J.B. Quintana, J. Carpinteiro, A.M. Carro, R.A. Lorenzo, R. Cela.
Journal of Chromatography A, 985 (2003) 265274.
28. Koutsouba V., Th. Heberer, B. Fuhrmann, K. Schmidt-Baumler, D. Tsipi, A. Hiskia.
Chemosphere, 51 (2003) 6975
29. Patravale V.B., V.B. Nair, S.P. Gore. Journal of Pharmaceutical and Biomedical
Analysis, 23 (2000) 623627.
30. Martin P., I.D. Wilson, D.E. Morgan, G.R. Jones, K. Jones. Analysis Communication,
34 (1997) 45.
31. Schutze D., B. Boss, J. Schmid. Journal of Chromatography B, 748 (2000) 5564.
32. Jirovetz L., G. Buchbauer, W. Jager, A. Woidich and A. Nikiforov. Journal of
Biological Chromatography, 6 (1992)133-134.
33. Sun X., C. Gao, W. Cao, X. Yang, E. Wang. Journal of Chromatography A, 962
(2002) 117125.
34. Zwiener C., F. H. Frimmel. Water Research , 34/6 (2000) 1881-1885.
35. Lffler D., Thomas A. Ternes. Journal of Chromatography A, 1021 (2003) 133144.
36. Jirovetz L., G. Buchbauer, W. Jager, A. Woidich and A. Nikiforov. Jounal of Mass
Spectrometry, 20 (1991) 801-803.
37. Ternes T.A. Trends in Analytical Chemistry, 20/8 (2001) 419-434.
38. Ternes T.A., TM. Bonerz, T, Scmidt. Journal of Chromatography A, 938 (2001)
175185.
39. Hilton M.J., Kevin V. Thomas. Journal of Chromatography A, 1015 (2003) 129141.

13

PT. Maja Bintang Indonesia

40. Rhl R., F.J. Schweigert. Journal of Chromatography B, 798 (2003) 309316
41. AbuRuz S., J. Millership, J. McElnay. Journal of Chromatography B, 798 (2003)
203209.

42. AbuRuz S., J. Millership, L. Heaney, J. McElnay. Journal of Chromatography B, 798

(2003) 193201.

43. Castell P. T.J. Santos, M.T. Galceran. Journal of Chromatography A, 1025 (2004)
157162.
44. Glidden P.F., D.B. Goldberg, C.M. Heldebrant. Journal of Pharmaceutical and
Biomedical Analysis, 28 (2002) 295302.
45. Romoloa F.S., M.C. Rotoloa, I. Palmib, R. Pacificib, A. Lopez. Forensic Science
International, 138 (2003) 1726
46. Nelson B.C., C.M. Pfei.er, S.A. Margolis, C.P. Nelson. Analytical Biochemistry, 325
(2004) 4151
47. Heudi O., MJ Trisconi, C.J. Blake. Journal of Chromatography A, 1022 (2004) 115
123
48. Reineke N., K. Bester, H . Huhnerfuss, B. Jastor, S. Weigel. Chemosphere, 47
(2002) 717723.
49. Li Z., S. Wang, N.A. Lee, R.D. Allan, I.R. Kennedy. Analytica Chimica Acta, 503
(2004) 171177.
50. Bagheri M., M.H. Mashhadizadeh, S. Razee. Talanta, 60 (2003) 839-/844.
51. Kataoka H., Journal of Anal. Bioanal. Chem, 373 (2002) 31.
52. Hilton M.J., Kevin V. Thomas. Journal of Chromatography A, 1015 (2003) 129141.
53. Olsen J., P. Martin, I.D.Wilson, G.R. Jones, Journal of Analyst,124 (1999) 467.
(abstract)
54. Andersson L.I., A. Paprica, T. Arvidsson, Journal of Chromatographia, 46 (1997)
57. (abstract)
55. Rashid B.A., R.J. Briggs, J.N. Hay, D. Stevenson, Analysis Communication, 34
(1997) 303. (abstract)
56. Muldoon M.T., L.H. Stanker, Analysis Communication, 69 (1997) 803. (abstract)
57. Zander A ., P. Findlay, Th. Renner, B. Sellergren, A. Swietlow, Analysis
Communication, 70 (1998) 3304. (abstract)
58. Mullett W.M., E.P.C. Lai, Analysis Communication, 70 (1998) 3636. (abstract)
59. Mullett W.M., E.P.C. Lai, Journal of Michrochemistry, 61 (1999) 143. (abstract)
60. Mullett W.M., E.P.C. Lai, J of Pharmaceutical Biomedical Analysis, 21 (1999) 835.
(abstract)
61. Kugimiya A., T. Takeuchi, Jounal of Analytica Chemica Acta, 395 (1999) 251.
(abstract)
62. Venn R.F., R.J. Goody, Journal of Chromatographia, 50 (1999) 407. (abstract)
63. Mullett W.M.,M.F.Dirie, E.P.C. Lai,H. Guo, X. He, Jounal of Analytica Chemica
Acta, 414 (2000) 123. (abstract)
64. Berggren C., S. Bayoudh, D. Sherrington, K. Ensing, Journal of Chromatography A,
889 (2000) 105. (abstract)
65. L.I. Andersson, Journal of Analyst, 125 (2000) 1515. (abstract)
66. Bjarnason B., L. Chimuka, O. Ramstrom, Anal Chem, 71 (1999) 2152.

14

PT. Maja Bintang Indonesia