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GIMNASIO DE LOS CERROS

Guia de laboratorio
BIOLOGA

EXTRACCIN DE ADN EN TEJIDOS VEGETALES


PROTOCOLO DE SHAWN CARLSON
INTRODUCCIN
Con el desarrollo de esta prctica usted conocer una tcnica sencilla para extraer ADN,
en la primera parte del laboratorio se desarrollar la metodologa establecida, recuerde
tomar datos cuantitativos exactos acerca del proceso, as como asegurarse de establecer
el mtodo adecuado para recopilar datos. En la segunda parte usted podr aplicar la
tcnica de extraccin de ADN para establecer un experimento que le permita conocer
datos con relacin a una o ms especies vegetales, es decir deber aplicar el mtodo
aprendido en la comprobacin de una hiptesis creada por usted con relacin a cualquier
especie vegetal.
MATERIALES.
DE USO COMN: Agua mineral, sal, bicarbonato, champ, fruta o verdura, isopropanol
(fro), azul de metileno, vasos de precipitados grandes (250 ml), centrfuga, probeta (500
ml), matraces (500 ml), pipeta (5 ml).

PARA CADA GRUPO:


1 tubo de ensayo grande.
2 tubos de ensayo pequeos (para centrfuga).
1 vaso de precipitados pequeo.
1 varilla de vidrio.
1 pipeta PaSteur.
METODOLOGA

Preparacin del tampn.


Elaborar la siguiente mezcla: 240 ml agua mineral + 3 g de sal + 10 g de bicarbonato + 10
ml de champ. Enfrar a 0 C.
Preparacin del material biolgico.
La trituracin del material biolgico, mejor en fro. Se trocean las verduras, se les aade un
poco de agua y a continuacin se trituran.
Se toman 5 ml del triturado y se depositan en el tubo de ensayo grande. A continuacin se le
aaden 10 ml del tampn fro. Se agita VIGOROSAMENTE durante 2 minutos.
Centrifugacin 5.
El contenido del tubo de ensayo se separa en los dos tubos de ensayo pequeos, de manera
que los dos tengan la misma masa. A continuacin estos tubos se ponen en la centrfuga
durante 5 min. Tras la centrifugacin se recoge el sobrenadante (con cuidado de no coger
el precipitado) de cada uno de los tubos de ensayo; para ello nos ayudamos de una pipeta
Pasteur. Este sobrenadante se coloca en el vaso de precipitados pequeo.
Aadir 10 ml de isopropanol fro.
Se aade al vaso de precipitados sobre la muestra con mucho cuidado: para ello se va
dejando caer el isopropanol sobre las paredes del vaso de precipitados.
Tras aadir el isopropanol en la muestra han quedado dos fases, una superior (contiene el
isopropanol) y otra inferior. Se introduce la varilla de vidrio en la interfase entre el
isopropanol y el resto de la muestra y se va moviendo la varilla con cuidado de uno a otro
lado durante 1 min. Entonces se saca la varilla y en ella estar adherido el ADN.
Aadir una gota de azul de metileno al tubo de ensayo.
El mtodo que hemos utilizado para extraer al ADN no es todo lo eficiente que se quisiera,
con lo que en la muestra todava queda ADN sin extraer. Al aadir el azul de metileno, en
la interfase, se teirn las fibras de ADN que no se han conseguido extraer.

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BIOLOGA
REPRODUCCIN ASEXUAL
OBJETIVOS
Diferenciar las clases de reproduccin asexual.
Observar las estructuras productoras de esporas en plantas y hongos.
Observar la gemacin de las levaduras.
Aprender a realizar montajes de hongos.
INTRODUCCIN
La reproduccin es una funcin biolgica inherente a todo ser vivo. Un individuo puede sobrevivir sin reproducirse pero
una especie no. Es de tal importancia esta funcin que en muchas especies la inversin de energa en la reproduccin
conlleva a la muerte y dejar descendencia es el ltimo de los actos vitales. As sucede con especies de araa cuyos
huevos son incubados dentro de la madre y la descendencia se desarrolla devorando a su propia progenitora.
Conocido tambin es el caso de la Mantis religiosa, una especie de insecto, donde es frecuente ver que la hembra se
provee de reservas energticas, para engendrar la descendencia, comindose al macho despus de la cpula.
Ejemplos como los anteriores nos hacen creer que el objetivo de todo el desarrollo de un ser vivo es precisamente
generar otros seres vivos por medio de la reproduccin, es decir, que el fin de la vida es mantenerse a s misma, auto
perpetuarse mediante esta funcin.
La reproduccin consiste esencialmente en la capacidad para originar nuevos seres vivos y es una de las propiedades
de los organismos que ms formas diferentes y asombrosas adopta. No obstante esta diversidad de formas, todos los
tipos de reproduccin pueden agruparse en dos clases principales: La reproduccin asexual y sexual. La primera
de ellas consiste en la formacin de nuevos organismos a partir de una o varias clulas de un solo individuo. En este
caso la informacin gentica del descendiente es una copia casi exacta de la informacin gentica del progenitor. En la
reproduccin sexual, en cambio, la descendencia se origina a partir de clulas (gametos), obtenidas por meiosis, de
dos progenitores, de modo que los individuos originados son una mezcla de informaciones genticas diferentes.
Las principales formas de multiplicacin asexual son:
1. Fisin Binaria o Biparticin:
La clula madre se divide en dos clulas hijas iguales a ella. Antes de la divisin, la clula progenitora ha duplicado su
material gentico y la mayora de sus componentes celulares, y estos sern repartidos equitativamente entre las
clulas hijas. Este mecanismo es el ms simple de todos y es practicado por Procariotas y por Eucariotas simples
como los protistas. La nica fuente de variacin son las mutaciones y la transferencia de material gentico.

Figura N 1. Fisin binaria. Fuente: fai.unne.edu.ar


Esporulacin:
Reproduccin por medio de esporas. Las esporas son clulas especializadas con capacidad de dar origen a un
organismo completo y que se distinguen por su altsima resistencia a temperaturas extremas, desecacin, paso del
tiempo y a otros factores con potencial para destruir otras clases de clulas. Este mecanismo reproductivo est
presente en unas pocas especies de bacterias, en hongos y en algunas algas y plantas. (Figura N2)
De modo general las esporas presentan una pared celular muy resistente y son muy livianas lo cual facilita su
dispersin por medio areo y acutico. En los organismos pluricelulares como hongos y plantas, las esporas son
producidas en rganos especializados, los esporangios.

Figura N2. Esporulacin. Fuente: www.edu.xunta.es


Gemacin:

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Es una divisin consistente en la formacin de yemas o prominencias en el cuerpo del progenitor, que al desarrollarse
originan nuevos individuos que pueden ser liberados y llevar una vida independiente. Este mecanismo puede verse
tanto en especies unicelulares (levaduras) o en pluricelulares (plantas y animales invertebrados). En el caso de
organismos unicelulares la gemacin es un proceso de mitosis asimtrica, esto quiere decir que la clula madre
duplica su material gentico (ncleo) y aumenta el nmero de sus componentes celulares, pero no se divide en dos
clulas hijas iguales, sino que se forma un abultamiento en la membrana de la clula progenitora, que posteriormente
se desprende en forma de una pequea clula. Esta clula hija tiene una copia del material gentico de la madre pero
una cantidad de componentes celulares y tamao muy inferior. Figura N 3

Gemacin en Levaduras
Figura N3. Gemacin. Fuente: CURTIS, 2000.

Fragmentacin o Escisin:
Esta clase de reproduccin est presente en algunas plantas, en hongos y en algunos animales. Consiste en la
obtencin de individuos completos a partir de fragmentos de un nico progenitor. Esto implica que el fragmento del
progenitor tiene la informacin necesaria para dar lugar a un organismo completo. Dicho de otro modo, en el fragmento
hay clulas totipotentes, esto es, clulas capaces de diferenciarse y originar cualquier tejido u rgano del individuo
completo. En los hongos cada fragmento de una hifa se transforma en un nuevo hongo. En las plantas se conocen
muchas especies que a partir de ramas o fragmentos de tallo o raz son capaces de generar una planta completa.
Finalmente en animales, la escisin es el mecanismo usado por varias clases de gusanos que al llegar al estado adulto
se rompen en varios fragmentos, cada uno de los cuales regenera al gusano completo. (Figura N 4)

Figura N 4
Fuente:201.116.18.153/laciencia/biologia/bg_reproduccion.htm

MATERIALES
I.

PRIMERA PARTE, REPRODUCCIN ASEXUAL.

PROCEDIMIENTO 1
1. Observacin de esporas de helechos.
Tome una hoja de helecho y realice un corte longitudinal del soro situado en el envs de la hoja.
Coloque el corte realizado sobre un portaobjetos.
Raspe la mitad del soro que qued fijada a la hoja sobre el portaobjeto para desprender las esporas.
Adicione una gota de agua y cubra con una laminilla.
Observe con objetivo de 40 X la estructura del soro y de los esporangios incluidos en ste. Dentro de los
esporangios estn las esporas.
Presentacin de resultados:
I.1 Diagrame un esporangio e indique la ubicacin de las esporas.
PROCEDIMIENTO 2
2. Observacin de levaduras en gemacin:
Tome con un asa, previamente esterilizada con el mechero, una colonia de la levadura Candida albicans.
Sobre un portaobjetos coloque una gota de solucin azucarada y mezcle en la gota la colonia previamente
tomada.
Coloque el cubreobjetos y observe al microscopio con 40X y 100 X.

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Presentacin de resultados:
2.1 Dibuje las levaduras observadas y seale en stas ncleo y membrana celular.
2.2 Dibuje una levadura en gemacin.
2.3 Haga un conteo de levaduras en gemacin por campo visual para objetivo de 40 X.
# de levaduras en gemacin x campo:_____
PROCEDIMIENTO 3
3. Observacin de hongos filamentosos:
A un portaobjetos agrguele una gota de azul de lactofenol.
Ponga en contacto delicadamente un pedazo de cinta transparente con la superficie del hongo suministrado
de tal manera que ste quede adherido a la cinta.
Pegue la cinta con el hongo sobre la lmina con el azul de lactofenol.
Observe al microscopio con objetivo de 40 X.
Presentacin de resultados:
3.1 Dibuje un esporangio enfocado por usted. Seale las esporas:
3.2 Dibuje los conidios observados por usted y las conidiosporas que salen de stos:

GENTICA MENDELIANA

OBJETIVOS:
Comprender los principios bsicos de herencia, basados en la gentica mendeliana.
Comprender como se relacionan el genotipo y el fenotipo.
Observar cmo se expresan algunos genes en el fenotipo de las personas.
Demostrar como ocurre el sorteo de alelos y como esto se refleja en una poblacin.
Entender como la gentica determina las diferencias fenotpicas de los organismos.
INTRODUCCIN:
La Gentica es la ciencia que estudia cmo se transmiten las caractersticas de generacin a
generacin. Gregor Mendel formul la base de la gentica moderna en 1865. Los rasgos heredados
se encuentran en los genes y estos en los cromosomas:
La informacin que determina los rasgos heredados se encuentra en unidades discretas de ADN
llamadas genes que se encuentran en los cromosomas. Los cromosomas se encuentran en pares,
por lo tanto los genes tambin. Las formas alternas de un gen son los alelos. Estn en pares en los
cromosomas: uno proviene de la madre y el otro del padre.
Homocigoto: ambos alelos son idnticos para un gen
Heterocigoto: posee alelos diferentes para un gen
Homocigoto:Individuo que para un gen dado tiene en cada cromosoma homlogo el mismo tipo
de alelo, por ejemplo, AA o aa
Heterocigoto: Individuo que para un gen dado tiene en cada cromosoma homlogo un alelo
distinto, por ejemplo, Aa.
Genotipo: Es el conjunto de genes que contiene un organismo heredado de sus progenitores. En
organismos diploides, la mitad de los genes se heredan del padre y la otra mitad de la madre.
Fenotipo: Es la manifestacin externa del genotipo, es decir, la suma de los caracteres
observables en un individuo. El fenotipo es el resultado de la interaccin entre el genotipo y el
ambiente.
Ley de Segregacin: separacin de los genes durante la meiosis para la formacin de gametos
(haploide). En la fecundacin se restituye la condicin diploide de los genes. Esta segregacin
permite que se puedan producir nuevas combinaciones genticas en la progenie
Dominancia Completa: un alelo domina al otro expresando su caracterstica completamente en
presencia del alelo no dominante o recesivo
Dominancia incompleta: cuando un alelo no es claramente dominante o recesivo, el fenotipo
resulta intermedio.
Codominancia: cuando un alelo no es claramente dominante o recesivo ambos alelos se expresan
Se puede inferir el genotipo a partir del fenotipo?
S, haciendo cruces de prueba (Cruce Monohbrido) a partir de parentales para observar como
estas caractersticas se manifiestan en la generacin filial.
PROCEDIMIENTO:
Esta prctica se divide en tres partes, por tanto se deben recolectar datos de forma adecuada,
organizada y metdica, al final los datos obtenidos deben ser analizados y representados
grficamente.
1. Algunos rasgos humanos, como el color de los ojos, el color del pelo o la calvicie, son rasgos
fenotpicos que se heredan de modo simple. Son miles los rasgos visibles que forman el
fenotipo nico que distingue a cada persona. Algunas caractersticas fsicas tienen un patrn
mendeliano simple de herencia. La Tabla 1 muestra algunos de estos rasgos e indica cmo

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se heredan. Reuna informacin de forma apropiada para estas caractersticas de por lo
menos 100 personas diferentes.
2. Escoja uno o dos rasgos de la Tabla.1 y prepare un rbol genealgico de su familia para ese
rasgo; Vaya tan atrs en las generaciones como le sea posible. Pueden determinarse los
genotipos al hacer un rbol genealgico? Explique.
3. El instructor colocar varias bolas de plastilina de dos colores (2 alelos) en una bolsa
transparente. Si en el saln hay 20 estudiantes, el nmero de canicas a utilizar es el doble
de la cantidad de estudiantes, en este caso seran 40.
Una vez que mezcle
homogneamente las bolas de plastilina, los estudiantes se deben acercar y tomar de la
bolsa (con sus ojos cerrados) dos bolitas cada uno. Se proceder a contabilizar las diferentes
combinaciones que obtuvieron los estudiantes.
Si utilizaron dos colores, las combinaciones posibles son tres, a saber: Lila /lila (LL), Lila / Blanco
(LB), Blanco / Blanco (BB). Utilizando estos resultados, y sabiendo que el nmero total (Nt) de la
muestra eran los ____ estudiantes, calcule las frecuencias genotpicas de la siguiente forma:

Nt

Frecuencia LL =

Frecuencia LB =
BB =

BB
Nt

Ahora bien, se puede calcular las frecuencias


utilizando la frmula a continuacin:

LB
Nt

Frecuencia

=
allicas en esa muestra de poblacin,

pi = Nii + Nij
Nt

Para calcular las frecuencias de ambos alelos se debe utilizar la frmula descrita
anteriormente, de forma tal que:

PL = NLL +

1
2

NLB

PB = NBB +

1
2

NLB

Nt

Nt

Vemos que las frecuencias de ambos alelos suman a 1. Esto es un concepto muy importante, ya
que la frecuencia de un evento es una fraccin del total de eventos. Si se suman todas las
fracciones de ese evento, obtendremos el valor unitario (100%) de esos eventos.

TABLA 1. Algunas caractersticas humanas.


Caractersticas

Dominante

Recesivo

Dientes superiores frontales


Tamao de la barbilla
Partidura en la barbilla
Pelo en los nudillos
Enrollar la lengua
Doblar la lengua
Lbulo de la oreja

Con espacio
Prominente
Presente
Presente
Posible
Posible
Libre

Sin espacio
Pequea
Ausente
Ausente
No posible
No posible
Pegada

Uso de la mano

Derecha

Izquierda

Forma de la nariz

Recta
Pequea (ff)

Pecas

Romana
Grande (FF)
Mediana (Ff)
Presentes

Hoyuelos en las mejillas

Presentes

Ausentes

Pico de viuda

Presente

Ausente

Forma del Pulgar

Curvo

Recto

Dedo meique

Curvo

Recto

Forma de la cara

Redonda

Cuadrada

Cejas

Pobladas
Ms oscuras que el pelo
(BB)
Igual color del pelo (Bb)
No conectadas
Cerca (AA) Normal o
promedio (Aa)
Anchos o alargados

Finas
Ms claras
que el pelo
(bb)
Conectadas
Distantes
(aa)
Redondos

Tamao de la nariz

Color de las cejas


Posicion de las cejas
Distancia entre los ojos
Forma de los ojos

Ausentes

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Tamao de los ojos
Pestaas
Labios

Grandes (DD)
Medianos (Dd)
Largas
Gruesos (LL)
Medianos (Ll)

Pequeos
(pp)
Cortas
Finos (ll)

DETERMINACIN DEL DIMETRO DEL CAMPO VISUAL DEL MICROSCOPIO


La informacin del tamao del dimetro del campo visual se utiliza para estimar el
tamao de las estructuras o de los organismos que se estn observando en el
microscopio. Es importante tener las medidas correspondientes para cada uno de los
objetivos. Prepare una placa temporal con un pedacito de papel milimetrado. Enfoque con
el objetivo 4X y enfoque una lnea. Determine a cuntos milmetros y fracciones de
milmetro corresponde el dimetro del campo visual. Anote este dato.
Coloque la muestra en el objetivo de 10X y haga el mismo ejercicio.
Calcular el dimetro de los lentes de 10X, 40X y 100X conociendo el valor del dimetro
hallado utilizando el objetivo de 4X
Unidades ms utilizadas en mediciones microscpicas
La mayora de organismos y estructuras que se estudian con el microscopio son muy
pequeos. Las medidas ms comnmente usadas en microscopa son el ngstrom (), la
milimicra (m), la micra () y el milmetro.Las relaciones entre ellas son las siguientes:

1 mm = 1000

1 = 1000 m

1 m = 10

Teniendo en cuenta estos datos resuelva lo siguiente:


a. A cuntas m equivale 1 mm? b. A cuntas m equivale 1 ?

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c. El dimetro del campo visual de un microscopio es de 1500 cuando se observa con un
ocular de 10X y un objetivo de 10X. Cul ser el dimetro del campo visual si se observa
con un objetivo de 40 X y el mismo ocular?
d. Un estudiante observ una clula al microscopio utilizando un objetivo de 10X y un
ocular de 10X y se dio cuenta de que su tamao aproximado era de una cuarta parte del
dimetro de ese campo visual. Si tal dimetro mide 1600 : Cunto mide la clula? Se
observar completamente esa clula si se utiliza un objetivo de 40X y el mismo ocular de
10X?
PROPIEDADES DE LAS LENTES DEL MICROSCOPIO
Poder de aumento: es la capacidad que posee el microscopio para dar una imagen
aumentada de un objeto. El microscopio compuesto consta de dos lentes que aumentan la
imagen, los oculares y los objetivos. El aumento total del microscopio se calcula
multiplicando el aumento del ocular por el aumento del objetivo utilizado.
Poder de penetracin capacidad para poder observar simultneamente y con nitidez
varios planos del preparado manteniendo una misma posicin de enfoque. A mayor
aumento, menor poder de penetracin.
Poder de definicin: es la capacidad que tiene un instrumento de formar imgenes claras
y de contornos ntidos: es mayor en los objetivos de mayor aumento.
Poder de resolucin: se define como la capacidad de mostrarnos separados dos
estructuras que realmente lo estn, pero cuya distancia es demasiado pequea para
distinguir a ojos ambas estructuras y stas nos aparecen como una sola.

P.R

L.R

1
L.R

0,61
AN

Donde:
P.R = Poder de resolucin
L.R. = Lmite de resolucin
= longitud de onda
AN = Apertura numrica
La Apertura numrica es el total de los rayos luminosos que ingresando a una lente se
utilizan en la formacin de la imagen (especie de cono luminoso).

AN n sen
Donde n = ndice de refraccin del medio interpuesto y es el ngulo de apertura. Si el
medio interpuesto es el aire el ndice de refraccin es igual a 1 y por lo tanto AN ser igual
que sen &, en cambio si se usa aceite de inmersin cuyo ndice de refraccin es igual a 1,66
el valor de AN habr aumentado y por consiguiente el poder de resolucin.
Preparacin de un portaobjeto
Limpiar bien un portaobjetos con un pedazo de lino o con un papel para lentes. Manejar el
portaobjetos nicamente por los bordes (Figura 1)
1. Con un gotero, coloque una gota de agua en el centro del portaobjetos
2. Poner una muestra sobre la gota de agua.
3. Sostener el cubreobjetos en un ngulo en relacin al portaobjetos.
4. Con una aguja, bajar el cubreobjetos hacia el agua. No presionar el cubreobjetos, ya que
puede quebrarse y estropear la preparacin.

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Figura 1. Preparacin hmeda


Figura 2. Forma de expresar las observaciones de cada muestra

Preparacin:
Aumento:
Tincin:
Descripcin:

RESPIRACIN CELULAR ANAEROBIA


CRITERIO: OBTENCIN Y PROCESAMIENTO DE DATOS (OPD)
Docente: Nicolas Guevara Prieto
Duracin: 2 Horas
OBJETIVOS DE LA PRCTICA

Estudiar el proceso de fermentacin alcohlica que realizan las levaduras.

Identificar cuales carbohidratos son metabolizados mediante la fermentacin.

Registrar, procesar y presentar los datos de forma apropiada.

FERMENTACIN ALCOHOLICA EN LEVADRAS


En este ejercicio se estudiar el proceso de fermentacin alcohlica que llevan a cabo las
levaduras. Estos organismos llevan a cabo respiracin aerbica en presencia de oxgeno y
respiracin anaerbica en ausencia de ste. La levadura que se usar es Saccharomyces
cerevisiae, la misma que se utiliza para la produccin de pan, cerveza y vino. En la fermentacin
alcohlica se produce bixido de carbono y alcohol etlico (etanol). El bixido de carbono crea la
efervescencia en la cerveza y hace que el pan suba dentro del horno. El etanol que se produce es
el alcohol presente en la cerveza y los vinos. Se usarn varias soluciones de carbohidratos para
determinar cules pueden metabolizarse mediante la fermentacin.

MATERIALES

Gradilla para tubos de ensayo


Cuatro tubos de ensayo medianos
Cuatro pipetas graduadas de 1 ml
Cuatro pipetas Pasteur desechables
Lpiz de cera
Un sobre de levadura

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Azcar o melaza
Vaso (beaker) de 200 ml
Papel de parafina (Parafilm)
Soluciones de sacarosa, galactosa, maltosa y lactosa

PROCEDIMIENTO
1. Prepare una suspensin de levadura por laboratorio mezclando:
Un paquete de levadura 2 g de sacarosa o melaza 100 ml de agua tibia
2. Rotule cuatro tubos del 1 al 4. Aada y mezcle bien lo siguiente:
Tubo 1: 2 ml de solucin de sacarosa y 2 ml de suspensin de levadura
Tubo 2: 2 ml de solucin de galactosa y 2 ml de suspensin de levadura
Tubo 3: 2 ml de solucin de maltosa y 2 ml de suspensin de levadura
Tubo 4: 2 ml de solucin de lactosa y 2 ml de suspensin de levadura
3. Para cada tubo:
a. Llene una pipeta graduada con la solucin del tubo.
b. Tape el extremo con el dedo mientras sella el lado opuesto con papel de parafina.
c. Utilizando la pipeta Pasteur, contine llenando la pipeta graduada con la solucin hasta que se
desborde.
d. Invierta la pipeta, colocndola en el tubo de ensayo.

4. Durante la fermentacin, el CO2 subir y se acumular en el extremo superior de la pipeta.


Anote la produccin de CO2 de cada pipeta a intervalos de 5 minutos durante 20 minutos.

SIMULACION DE LA FISIOLOGA CARDIOPULMONAR


CRITERIO: DISEO
Docente: Nicolas Guevara Prieto
OBJETIVOS DE LA PRCTICA

Enunciar un problema o una pregunta de investigacin concreta, relacionado (a) con la fisiologa
cardiopulmonar.

Identificar las variables pertinentes.

Disear un mtodo que permita controlar eficazmente las variables.

Desarrollar un mtodo que le permita obtener datos pertinentes y suficientes.

BIOBYTES SIMULATION: ALLIEN


Allien es una simulacin por computador de la fisiologa cardiopulmonar (Corazn Pulmn), que
se puede utilizar como un generador de datos para simular experimentos.
Para desarrollar un entendimiento bsico de los conceptos fisiolgicos usted va a experimentar con
un voluntario humano (Simulado), Puede investigar los efectos de hacer ejercicio en grandes
altitudes y a nivel del mar, los efectos del incrementar los niveles sanguneos de dixido de
carbono conforme la concentracin de dixido de carbono atmosfrico aumenta, la relacin entre la
relacin entre velocidad, distancia del recorrido, y el agotamiento fsico.
Entonces usted tiene la opcin de cinco extraterrestres cuyas fisiologas se adaptan a su planeta
de origen extico. Puede hacer observaciones y recopilar datos acerca de un extraterrestre en
cuanto a la frecuencia cardiaca, tensin arterial, la respiracin, la qumica sangunea y la tasa
metablica, puede llevar a cavo experimentos que implican el aumento o la disminucin de los

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niveles de oxgeno y dixido de carbono, utilizando un tapiz rodante, la administracin de drogas,
la aplicacin de diversos factores, y as sucesivamente.
Allien le permite hacer observaciones sobre la homeostasis y la ruptura de la homeostasis letal
cuando se exceden los lmites. Los sujetos experimentales que son empujados ms all de su
capacidad fisiolgica puede llevar a la fatiga, desmayo, tener un ataque al corazn, o morir! (Sin
embargo, puede ser capaz de salvarlos con la aplicacin de RCP antes de que los daos cerebrales
sean muy graves.1
METODOLOGA
Elabore una revisin terica acerca de las caractersticas anatmicas y fisiolgicas principales del
sistema cardiopulmonar. Establezca los parmetros necesarios para suministrar una adecuada RCP
Una vez instalado el software, seleccione la casilla Allien (1), del men de opciones.
En los ficheros que se despliegan a continuacin encontrar las opciones que le permitirn
controlar variables en los experimentos que haya diseado, recuerde cubrir todas las posibilidades
que ofrece el programa de simulacin.
La duracin de la prctica es de dos horas, as que se sugiere que distribuya de forma adecuada el
tiempo para cada prueba teniendo en cuenta el problema de investigacin planteado y que el
registro de los datos brutos se haga de forma adecuada.

1
Men principal de la aplicacin, seleccionar la
opcin Alien.

2
Luego de seguir los pasos y escoger la opcin
de experimentos, seleccione en primer lugar
las pruebas con un humano.

1 Biology in the Laboratory. Third edition. Doris R. Helms, et al. Clemenson University, W. H. Freeman and
Company, New York, 1998. (Traduccin de la gua: Nicols Guevara Prieto.)

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4
Con su mtodo de recoleccin de datos y
la
distribucin
del
tiempo
por
experimento,
inicia
a
variar
alas
condiciones que permite el programa de
simulacin, recuerde tomar datos de
forma frecuente

Cuando haya finalizado de experimentar


tomar
los
datos
(Cuantitativos
y
cualitativos) necesarios, remtase al
fichero de preguntas (16 en total) revise
los libros, realice los clculos y seleccione
el fichero de respuestas.

5
En el fichero de respuestas ingrese los
valores y repuestas que considere
correctas, al final se desplegar
un
porcentaje de acierto con la informacin
detallada de la prueba. Anote los
resultados en su informe.

MITOSIS Y MEIOSIS
OBJETIVOS

Identificar cada uno de los periodos que comprende el ciclo celular.


Relacionar cada cambio presente en las clulas meristemticas, con las diferentes fases de
la mitosis.
Reconocer los procesos de la meiosis con base en el material suministrado.

MATERIALES
Los materiales se dividen en tres categoras Biolgicos, instrumentos y reactivos, as:
A. Bulbo de cebolla Allium cepa,Pez macho
B. Pinzas, Vaso de precipitado o vaso desechable, Palillos grandes, Tijeras, Pipeta pasteur,
Papel de filtro, Portaobjetos, Cubreobjetos, Aguja de diseccin, pinzas largas, Bistur y
bandeja de diseccin.
C. Aceto orceina, Eosina, Metanol, Acido actico.

Meiosis 1 Las caractersticas tpicas de la meiosis I, solo se hacen evidentes despus de la


replicacin del DNA, en lugar de separarse las cromtidas hermanas se comportan como bivalente

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o una unidad, como si no hubiera ocurrido duplicacin formando una estructura bivalente que en si
contiene cuatro cromtidas. Las estructuras bivalentes se alinean sobre el huso, posteriormente los
dos homlogos duplicados se separan desplazndose hacia polos opuestos, a consecuencia de que
las dos cromtidas hermanas se comportan como una unidad, cuando la clula meitica se divide
cada clula hija recibe dos copias de uno de los dos homlogos. Por lo tanto las dos progenies de
esta divisin contienen una cantidad doble de DNA, pero estas difieren de las clulas diploides
normales.

Profase:
Leptoteno: En esta fase, los cromosomas se hacen visibles, como hebras largas y finas. Otro
aspecto de la fase leptoteno es el desarrollo de pequeas reas de engrosamiento a lo largo del
cromosoma, llamadas crommeros, que le dan la apariencia de un collar de perlas.
Cigoteno: Es un perodo de apareamiento activo en el que se hace evidente que la dotacin
cromosmica del meiocito corresponde de hecho a dos conjuntos completos de cromosomas. As
pues, cada cromosoma tiene su pareja, cada pareja se denomina par homlogo y los dos
miembros de la misma se llaman cromosomas homlogos.
Paquiteno: Esta fase se caracteriza por la apariencia de los cromosomas como hebras gruesas
indicativas de una sinapsis completa. As pues, el nmero de unidades en el ncleo es igual al
nmero n. A menudo, los nucleolos son muy importantes en esta fase. Los engrosamientos
cromosmicos en forma de perlas, estn alineados de forma precisa en las parejas homlogas,
formando en cada una de ellas un patrn distintivo.
Diploteno: Ocurre la duplicacin longitudinal de cada cromosoma homlogo, al ocurrir este
apareamiento las cromtidas homlogas parecen repelerse y separarse ligeramente y pueden
apreciarse unas estructuras llamadas quiasmas entre las cromtidas.ademas La aparicin de
estos quiasmas nos hace visible el entrecruzamiento ocurrido en esta fase.
Diacinesis: Esta etapa no se diferencia sensiblemente del diploteno, salvo por una mayor
contraccin cromosmica. Los cromosomas de la interfase, en forma de largos filamentos, se han
convertido en unidades compactas mucho ms manejables para los desplazamientos de la
divisin meitica.
Metafase Al llegar a esta etapa la membrana nuclear y los nucleolos han desaparecido y cada
pareja de cromosomas homlogos ocupa un lugar en el plano ecuatorial. En esta fase los
centrmeros no se dividen; esta ausencia de divisin presenta una diferencia importante con la
meiosis. Los dos centrmeros de una pareja de cromosomas homlogos se unen a fibras del huso
de polos opuestos
Anafase Como la mitosis la anafase comienza con los cromosomas movindose hacia los
polos. Cada miembro de una pareja homologa se dirige a un polo opuesto
TELOFASE Esta telofase y la interfase que le sigue, llamada intercinesis, son aspectos variables
de la meiosis I. En muchos organismos, estas etapas ni siquiera se producen; no se forma de
nuevo la membrana nuclear y las clulas pasan directamente a la meiosis II.

Meiosis 2
Profase Esta fase se caracteriza por la presencia de cromosomas compactos en nmero
haploide. Los centroiolos se desplazan hacia los polos opuestos de las clulas
Metafase En esta fase, los cromosomas se disponen en el plano ecuatorial. En este caso, las
cromtidas aparecen, con frecuencia, parcialmente separadas una de otra en lugar de
permanecer perfectamente adosadas, como en la mitosis.
Anafase:
Los centrmeros se separan y las cromtidas son arrastradas por las fibras del huso
acromtico hacia los polos opuestos
Telofase: En los polos, se forman de nuevo los ncleos alrededor de los cromosomas.
En suma, podemos considerar que la meiosis supone una duplicacin del material gentico (fase
de sntesis del DNA) y dos divisiones celulares. Inevitablemente, ello tiene como resultado unos
productos meiticos con solo la mitad del material gentico que el meiosito original

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BIOLOGA

PROCEDIMIENTO

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BIOLOGA
I.

MITOSIS

Para el desarrollo de esta prctica utilice bulbos de cebolla, Allium cepa y realice preparaciones
con la raz de material fijado y teido, una vez obtenidos los extendidos de clulas obsrvelos al
microscopio ptico.

Preparacin de la cebolla:
1. Con ayuda de una pinza retire la capa externa marronacea o roscea y lave con abundante agua,
esto se realiza para eliminar restos de sustancias con las que frecuentemente han sido tratadas
para inhibir o retardar la germinacin de las raicillas.
2. Llene un vaso de precipitados con agua y coloque un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres
palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua.
3. Pngalo a germinar a 25C o a temperatura ambiente durante 3 das, al cabo de estos
aparecern numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm. de longitud.
4. Revise diariamente y procure que la corona no se deseque para lo cual es necesario rellenar con
agua cada 24 horas.
Elaboracin del montaje:
5. Cuando las races tengan entre 0.5 y 1 cm de longitud, realice cortes de raz de
aproximadamente 2 3 mm a partir del pice.
6. colquelas en una lmina portaobjetos. Adiciona una gota del colorante aceto orceina o eosina.
7. Coloque el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raz. Con ayuda de la punta de una aguja
de diseccin, d unos golpecitos sobre el cubre objetos sin romperlo, de modo que la raz quede
extendida.
8. Use papel de filtro para retirar el exceso de colorante realice una suave presin, evitando que l
cubre objetos resbale. Si la preparacin est bien asentada no hay peligro de rotura por mucha
presin que se realice.
9. Coloque la preparacin al microscopio e inicie la observacin con el objetivo de 10x e identifique
las clulas.
Observacin al microscopio:
10. Cambie al objetivo de 40X para detallar las clulas. Observe los ncleos y cromosomas en
color rosceo morado.
11. Ubique el objetivo de 100 x y anote sus observaciones describiendo las diferencias en cada
uno de los aumentos mencionados.
12. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga clulas en interfase, profase,
anafase, etc.., y haga un conteo de las clulas en divisin en cada una de estas fases. Realice
dibujos de lo observado.

II.

MEIOSIS

Para la observacin de las diferentes fases de la meiosis trabaje con un pez macho:
Preparacin del pez:
1. Introduzca el pez en una bandeja de diseccin y realice un corte rectangular desde el ano hasta
el oprculo y observe la musculatura.
2. Retire la musculatura y de esta manera quedan a la vista las vsceras del pez.
3. Con la pinza tome los testculos los cuales aparecen como cintas alargadas de color blanco
situadas en la parte superior de la cavidad abdominal desde la regin occipital hasta el poro
genital.
Preparacin del montaje:
4. Coloque los testculos sobre una lmina portaobjetos.
5. Agregue una gota del colorante aceto orceina o eosina.
5. Coloque encima una laminilla, realice una suave presin y observe al microscopio con objetivo
de menor y mayor aumento. Anote sus observaciones.
Observacin al microscopio:
6. Coloque la preparacin al microscopio e inicie la observacin con el objetivo de 10x e identifique
las clulas, cambie progresivamente de objetivo y mencione las diferenias entre las observaciones
hechas en cada aumento.
7. Realice dibujos o tome fotos y Escriba una descripcin detallada de lo observado, disee una
tabla en la que incluya los dibjos o fotos y sus descripciones.
8. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga clulas en interfase, profase,
anafase, etc.., y haga un conteo de las clulas en divisin en cada una de estas fases. Realice
dibujos de lo observado tenga en cuenta la posicin de los cromosomas para identificar las fases.

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BIOLOGA

TAXONOMA, DIVERSIDAD DEL REINO PROTISTA


INTRODUCCIN
Con el reino protista comienza el estudio de los organismos eucariontes. Las clulas de los
organismos eucariticos contienen un ncleo rodeado por una membrana, as como los dems
organelos celulares. Los dems organismos eucariticos (Incluyendo hongos, plantas y animales) se
originaron probablemente de protistos pimitivos. Para nuestros propsitos los protistos sern
clasificados en tres grupos basndonos en modelos de nutricin.
PROTOZOA: Unicelulares hetertrofos, tpicamente como animales.
MOHOS: Algunos los llaman hongos inferiores por que pueden ser multinucleados como los
hongos, durante alguna parte de su ciclo de vida. Son clasificados con llos protistas por que
presentan similitudes con los protozoos.
ALGAE: Organismos unicelulares y multicelulares parecidos a las plantas pues son
fotosintetizadores.

OBJETIVOS
Identificar y clasificar protozoos representativos.
Identificar tipos de algas basndose en caractersticas morfolgicas.
PROCEDIMIENTO
En esta prctica de laboratorio se identificaran organismos representativos de protozoos y
algas, por tanto el procedimiento se divide en dos:
I.

Identificando Protozoos: Los protozoos son organismos unicelulares, la mayora son


mviles, pueden ser encontrados como organismos de vida libre y en formas
parasticas, adems pueden estar en ecosistemas de agua dulce y marinos. Existen
muchos Fillum de protozoos. En esta prctica identificaremos algunas de las formas
ms representativas. Estas pueden distinguirse por la forma del cuerpo y el tipo de
locomocin.
Realice montajes con el agua que le provee el profesor, esta ha sido una muestra
reciente de agua estancada y/o de cultivo de protozoos. Coloque la laminilla y con
un papel absorbente elimine el exceso de agua, agregue unas gotas de solucin de
nicotina para adormecer a los protozoos y as facilitar su observacin.
Observe las muestras en diferentes aumentos, dibuje y/o tome fotografas, describa
detalladamente cada observacin y compare con las claves taxonmicas anexas
para asignar los nombres correspondientes.

II.

Identificando algas: Las algas son organismos eucariticos fotosintticos. Las algas
evolucionaron hace ms de 450 millones de aos, todas las algas modernas
contienen clorofila a, como su principal pigmento fotosinttico pero tambin tienen
algunos pigmentos accesorios. Las distinciones hechas a travs de los grupos de
algas se basan en el tipo de pigmentos accesorios, la naturaleza del tipo de
almacn de alimentos, la composicin de la pared celular, si presenta, y si el cuerpo
es unicelular o extracelular.
Realice montajes con el agua que le provee el profesor, esta ha sido una muestra
reciente de agua estancada y/o de cultivo de algas. Coloque la laminilla y con un
papel absorbente elimine el exceso de agua.
Observe las muestras en diferentes aumentos, dibuje y/o tome fotografas, describa
detalladamente cada observacin y compare con las claves taxonmicas anexas
para asignar los nombres correspondientes.

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BIOLOGA

ENZIMAS
OBJETIVOS
1. Explicar qu es una enzima y cmo stas actan en reacciones intracelulares.
2. Identificar factores que afectan la actividad enzimtica.
3. Distinguir entre inhibicin competitiva e inhibicin no-competitiva.
INTRODUCCIN
Las clulas llevan a cabo simultneamente una gran cantidad de reacciones qumicas necesarias
para la vida. Muchos de los productos de esas reacciones se necesitan inmediatamente, y si no
fuera por la participacin de las enzimas, algunas reacciones no se produciran tan rpido.
Las enzimas, en su mayora protenas o RNA (riboenzimas), son catalizadores qumicos que agilizan
una reaccin que envuelve la formacin o rompimiento de enlaces qumicos.
Las enzimas no se consumen en las reacciones, ni tampoco se alteran, razn por lo cual no se
necesitan en grandes cantidades. Las enzimas actan sobre los sustratos formando un complejo
enzima sustrato; esto ocurre en un lugar en especfico conocido como el sitio activo de la enzima.
Las enzimas son muy selectivas porque pocas molculas pueden interactuar bien con este sitio.
Las enzimas reducen la energa de activacin necesaria para llevar a cabo una reaccin; es decir,
reducen la barrera de energa que hay que sobrepasar para que la reaccin se lleve a cabo.
Las enzimas trabajan ptimamente bajo condiciones especficas y ciertos cambios pueden alterar
el funcionamiento de la enzima, desactivarla o hasta destruirla. Algunas enzimas necesitan
activadores para cambiar su conformacin de modo que pueda formarse el complejo enzima
sustrato. Estos activadores se conocen como cofactores y pueden ser tan simples como iones
metlicos. Los cofactores orgnicos se conocen como coenzimas. Las enzimas pueden afectarse
negativamente por inhibidores que impidan la actividad enzimtica. Estos inhibidores pueden
afectar el sitio activo de dos maneras: competitivamente, al bloquear el sitio activo, o no
competitivamente, al pegarse en otro lugar de la enzima y alterar indirectamente la forma del sitio
activo.
Factores que afectan el funcionamiento de la catalasa
En los ejercicios siguientes se estudiar el funcionamiento de la catalasa. Esta enzima est
presente en casi todas las clulas aerbicas y acta descomponiendo perxido de hidrgeno (agua
oxigenada) en agua y oxgeno, segn la siguiente reaccin:

MATERIALES
Perxido de hidrgeno, papa, hgado, setas, espinaca, gasa, placas de porcelana, goteros,
morteros o licuadora

Prueba 1. En este ejercicio se prepararn varios homogenizados para obtener partculas


pequeas y uniformes al mezclarlas con el agua.
1. Para preparar los homogenizados, corte en pedazos por separado las muestras de papa, hgado,
setas y espinaca.
2. Usando una licuadora o mortero, muela el material con un poco de agua hasta diluir parte de la
muestra; no muela excesivamente para que no queden pedazos muy pequeos del material.
3. De ser necesario, filtre el macerado con una gasa
4. Coloque cada homogenizados en un tubo de ensayo.
5. Usando un gotero, coloque cinco gotas de cada homogenizados en las fosas de la placa de
porcelana y aada tres gotas de perxido de hidrgeno
Observe y anote los resultados en la Tabla

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Prueba 2.

Se comporta la catalasa de igual manera en todos los organismos?

MATERIALES: Homogenizado de hgado, papa, setas y espinaca, Tubos de ensayo grandes,


Perxido de hidrgeno, Goteros.
PROCEDIMIENTO
1. Rotule cinco tubos de ensayo con las letras A a la E.
2. Ponga 3 mL de cada homogenado en los tubos como sigue:
A Hgado B Papa C Setas D Espinaca E - Agua
3. Marque el nivel hasta donde llega cada homogenizado.
4. Ponga 3 mL de perxido de hidrgeno en cada tubo de ensayo.
5. Observe la reaccin que sucede en cada tubo y marque el cambio en el nivel del lquido.
6. Tabule los resultados en la Tabla

Prueba 3.

Efecto de la temperatura sobre el funcionamiento de las enzimas

MATERIALES: Homogenado de hgado, bao de agua, termmetro, agarradera de tubo, hielo,


congelador
PROCEDIMIENTO:
1. Rotule cinco tubos de ensayo del 1 al 5 y caliente un bao de agua hasta 37 C y otro hasta
80C.
2. Aada 5 mL de hgado homogenado a cada tubo.
3. Mantenga los tubos a las siguientes temperaturas:
Tubo 1 = 80 C por 15 minutos
Tubo 2 = 37 C por 15 minutos
Tubo 3 = Temperatura ambiental
Tubo 4 = Hielo por 30 minutos
Tubo 5 = Congelador a 4 C por 30 minutos
4. Aada 2 mL de perxido de hidrgeno al tubo 1.
5. Mida el tiempo transcurrido desde que se aadi el perxido hasta que se comienzan a producir
burbujas, y antelo en la Tabla.
6. Repita con los dems tubos.
7. Compare sus resultados en trmino de tiempo de reaccin vs. temperatura.

Prueba 4. El efecto del pH sobre el funcionamiento de las enzimas


PROCEDIMIENTO
1. Rotule tres tubos de ensayo A, B y C
2. Aada 3 mL de homogenado de hgado a cada tubo.
3. Aada soluciones 3M de HCl y 3M de NaOH a los tubos como sigue, y agite suavemente hasta
mezclar:
Tubo A 3 ml de 3M HCl

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BIOLOGA
Tubo B 3 ml de 3M NaOH
Tubo C control (sin cido ni base)
4. Aada 3 mL de perxido de hidrgeno a cada tubo.
5. Observe y anote las reacciones en la Tabla

CUESTIONARIO
Qu ocurri al aadir el perxido? Ocurri lo mismo en todas las muestras? Por qu se forman
burbujas? Qu otros organismos podran usarse para esta prueba? Por qu se prepararon los
homogenados? Por qu no se aadi el perxido directamente a los tejidos sin macerarlos?
Explique por qu la gran mayora de las especies de plantas y de animales producen la enzima
catalasa.

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BIOLOGA

ESTUDIO DEL CARIOTIPO HUMANO


Se denomina cariotipo al conjunto de cromosomas de una especie determinada. Su
determinacin se realiza observando durante la metafase la dotacin cromosmica de una
clula y la obtencin de una fotografa de esta observacin permite investigaciones
genticas sobre ese individuo o esa especie.
METODOLOGA
La lmina 1 representa un cariotipo humano.
Recorte cada uno de los cromosomas.
Agrpelos de acuerdo con su tamao, forma y bandas de tincin.
Identifique cada pareja de homlogos ayudndote del cariotipo ordenado de
la lmina 2.
Pegue cada pareja en la plantilla vaca de la ficha del alumno.

Lmina 1

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BIOLOGA

ESTUDIO DEL CARIOTIPO HUMANO

FICHA DEL ALUMNO___________________________________________

PREGUNTAS
Lmina
2
1. Cuntos pares de cromosomas tiene
la especie
humana?
2. Cul es el sexo del individuo cuyo cariotipo ha investigado? Justifique su respuesta.
3. A qu se denominan autosomas?
4. Tiene algo que ver el nmero de cromosomas de una especie con su tamao?
Brinde ejemplos.
5. Qu es una anomala cromosmica?

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BIOLOGA
DISECCIN DE CORAZN
OBJETIVO GENERAL:
Identificar y analizar la organizacin estructural del corazn y vasos sanguneos, a travs de un
estudio experimental.
OBJETIVOS ESPECFICOS:
Identificar la morfologa externa e interna del corazn.
Analizar el recorrido de la sangre en el corazn.
Identificar los vasos sanguneos que ingresan y salen del corazn.
MATERIALES:
Lupa, bistur, bata, guantes, tapa bocas, libreta de apuntes, bayetilla, bandeja, un corazn de res o
cerdo.
MARCO TERICO:
1. Elaborar un breve resumen sobre la morfologa y fisiologa del corazn.
2. Elaborar un esquema morfolgico identificando partes, vasos sanguneos y vlvulas.
PROCEDIMIENTO:
1. Colocar el corazn sobre la bandeja de tal forma que la parte inferior quede al frente suyo,
realice una breve descripcin de la morfologa externa teniendo en cuenta los siguientes aspectos:
Describa el color que presenta el corazn? Dibuje y describa su forma. Nombre el tejido que
conforma el tejido del corazn y realice una breve descripcin.
2. Analice la conformacin de los vasos sanguneos y haga lo siguiente:
Observe las estructuras de vasos (venas y arterias) y haga una breve descripcin. Explique las
diferencias encontradas con respecto a los vasos observados.
3. VENTRICULO DERECHO:
*Introduzca el corazn de res/cerdo, en la cubeta de diseccin y observe detenidamente tratando
de reconocer la aurcula derecha y la izquierda para proceder a su diseccin.
* Coloque el corazn con la cara convexa hacia arriba, introduzca la aguja enmangada o el
escalpelo por la arteria pulmonar para que luego sirva de gua por donde cortar
*Con las tijeras abra el ventrculo derecho, siguiendo el recorrido de la aguja enmangada o el
escalpelo (que anteriormente haba introducido por la arteria pulmonar) a 05, cm por encima del
surco interventricular.
VENTRICULO IZQUIERDO:

*Introduzca el escalpelo o la aguja enmangada por la aorta para que despus sirva de gua por
donde cortar.
*Con las tijeras abrimos el ventrculo izquierdo, siguiendo el recorrido de la aguja enmangada o
el escalpelo (que anteriormente haba introducido por la aorta) a 05, cm por debajo del surco
interventricular.
*De la vuelta al corazn e introduzca el escalpelo o la aguja enmangada por la vena cava superior
para que despus nos sirva de gua por donde cortar.
*Con las tijeras abra la aurcula derecha, siguiendo el recorrido de la aguja enmangada o el
escalpelo

Qu capas distingue en las paredes del corazn?; haga una breve descripcin de lo observado.
Identifique el tabique que separa el corazn izquierdo y derecho; haga una breve descripcin de lo
observado. Qu nombre reciben las cavidades y por qu se caracterizan?, identificarlas por medio
del esquema. Establezca la diferencia entre aurculas y ventrculos.
4. Analice e identifique las vlvulas que conforman el corazn y conteste:
Realice una descripcin de la estructura morfolgica de las vlvulas: Observe los pliegues de color
blanquecino que separan las aurculas de los ventrculos y haga una breve descripcin. En el
esquema identifique las vlvulas que conforman el Corazn.
RESULTADOS. (Esquemas, dibujos, descripciones)
ANLISIS DE RESULTADOS (Elaborar un escrito con buena argumentacin y redaccin sobre lo
aprendido en el laboratorio).

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BIOLOGA
CONCLUSIONES. (Mnimo 3)

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