Guia de laboratorio
BIOLOGA
Gemacin en Levaduras
Figura N3. Gemacin. Fuente: CURTIS, 2000.
Fragmentacin o Escisin:
Esta clase de reproduccin est presente en algunas plantas, en hongos y en algunos animales. Consiste en la
obtencin de individuos completos a partir de fragmentos de un nico progenitor. Esto implica que el fragmento del
progenitor tiene la informacin necesaria para dar lugar a un organismo completo. Dicho de otro modo, en el fragmento
hay clulas totipotentes, esto es, clulas capaces de diferenciarse y originar cualquier tejido u rgano del individuo
completo. En los hongos cada fragmento de una hifa se transforma en un nuevo hongo. En las plantas se conocen
muchas especies que a partir de ramas o fragmentos de tallo o raz son capaces de generar una planta completa.
Finalmente en animales, la escisin es el mecanismo usado por varias clases de gusanos que al llegar al estado adulto
se rompen en varios fragmentos, cada uno de los cuales regenera al gusano completo. (Figura N 4)
Figura N 4
Fuente:201.116.18.153/laciencia/biologia/bg_reproduccion.htm
MATERIALES
I.
PROCEDIMIENTO 1
1. Observacin de esporas de helechos.
Tome una hoja de helecho y realice un corte longitudinal del soro situado en el envs de la hoja.
Coloque el corte realizado sobre un portaobjetos.
Raspe la mitad del soro que qued fijada a la hoja sobre el portaobjeto para desprender las esporas.
Adicione una gota de agua y cubra con una laminilla.
Observe con objetivo de 40 X la estructura del soro y de los esporangios incluidos en ste. Dentro de los
esporangios estn las esporas.
Presentacin de resultados:
I.1 Diagrame un esporangio e indique la ubicacin de las esporas.
PROCEDIMIENTO 2
2. Observacin de levaduras en gemacin:
Tome con un asa, previamente esterilizada con el mechero, una colonia de la levadura Candida albicans.
Sobre un portaobjetos coloque una gota de solucin azucarada y mezcle en la gota la colonia previamente
tomada.
Coloque el cubreobjetos y observe al microscopio con 40X y 100 X.
Presentacin de resultados:
2.1 Dibuje las levaduras observadas y seale en stas ncleo y membrana celular.
2.2 Dibuje una levadura en gemacin.
2.3 Haga un conteo de levaduras en gemacin por campo visual para objetivo de 40 X.
# de levaduras en gemacin x campo:_____
PROCEDIMIENTO 3
3. Observacin de hongos filamentosos:
A un portaobjetos agrguele una gota de azul de lactofenol.
Ponga en contacto delicadamente un pedazo de cinta transparente con la superficie del hongo suministrado
de tal manera que ste quede adherido a la cinta.
Pegue la cinta con el hongo sobre la lmina con el azul de lactofenol.
Observe al microscopio con objetivo de 40 X.
Presentacin de resultados:
3.1 Dibuje un esporangio enfocado por usted. Seale las esporas:
3.2 Dibuje los conidios observados por usted y las conidiosporas que salen de stos:
GENTICA MENDELIANA
OBJETIVOS:
Comprender los principios bsicos de herencia, basados en la gentica mendeliana.
Comprender como se relacionan el genotipo y el fenotipo.
Observar cmo se expresan algunos genes en el fenotipo de las personas.
Demostrar como ocurre el sorteo de alelos y como esto se refleja en una poblacin.
Entender como la gentica determina las diferencias fenotpicas de los organismos.
INTRODUCCIN:
La Gentica es la ciencia que estudia cmo se transmiten las caractersticas de generacin a
generacin. Gregor Mendel formul la base de la gentica moderna en 1865. Los rasgos heredados
se encuentran en los genes y estos en los cromosomas:
La informacin que determina los rasgos heredados se encuentra en unidades discretas de ADN
llamadas genes que se encuentran en los cromosomas. Los cromosomas se encuentran en pares,
por lo tanto los genes tambin. Las formas alternas de un gen son los alelos. Estn en pares en los
cromosomas: uno proviene de la madre y el otro del padre.
Homocigoto: ambos alelos son idnticos para un gen
Heterocigoto: posee alelos diferentes para un gen
Homocigoto:Individuo que para un gen dado tiene en cada cromosoma homlogo el mismo tipo
de alelo, por ejemplo, AA o aa
Heterocigoto: Individuo que para un gen dado tiene en cada cromosoma homlogo un alelo
distinto, por ejemplo, Aa.
Genotipo: Es el conjunto de genes que contiene un organismo heredado de sus progenitores. En
organismos diploides, la mitad de los genes se heredan del padre y la otra mitad de la madre.
Fenotipo: Es la manifestacin externa del genotipo, es decir, la suma de los caracteres
observables en un individuo. El fenotipo es el resultado de la interaccin entre el genotipo y el
ambiente.
Ley de Segregacin: separacin de los genes durante la meiosis para la formacin de gametos
(haploide). En la fecundacin se restituye la condicin diploide de los genes. Esta segregacin
permite que se puedan producir nuevas combinaciones genticas en la progenie
Dominancia Completa: un alelo domina al otro expresando su caracterstica completamente en
presencia del alelo no dominante o recesivo
Dominancia incompleta: cuando un alelo no es claramente dominante o recesivo, el fenotipo
resulta intermedio.
Codominancia: cuando un alelo no es claramente dominante o recesivo ambos alelos se expresan
Se puede inferir el genotipo a partir del fenotipo?
S, haciendo cruces de prueba (Cruce Monohbrido) a partir de parentales para observar como
estas caractersticas se manifiestan en la generacin filial.
PROCEDIMIENTO:
Esta prctica se divide en tres partes, por tanto se deben recolectar datos de forma adecuada,
organizada y metdica, al final los datos obtenidos deben ser analizados y representados
grficamente.
1. Algunos rasgos humanos, como el color de los ojos, el color del pelo o la calvicie, son rasgos
fenotpicos que se heredan de modo simple. Son miles los rasgos visibles que forman el
fenotipo nico que distingue a cada persona. Algunas caractersticas fsicas tienen un patrn
mendeliano simple de herencia. La Tabla 1 muestra algunos de estos rasgos e indica cmo
Nt
Frecuencia LL =
Frecuencia LB =
BB =
BB
Nt
LB
Nt
Frecuencia
=
allicas en esa muestra de poblacin,
pi = Nii + Nij
Nt
Para calcular las frecuencias de ambos alelos se debe utilizar la frmula descrita
anteriormente, de forma tal que:
PL = NLL +
1
2
NLB
PB = NBB +
1
2
NLB
Nt
Nt
Vemos que las frecuencias de ambos alelos suman a 1. Esto es un concepto muy importante, ya
que la frecuencia de un evento es una fraccin del total de eventos. Si se suman todas las
fracciones de ese evento, obtendremos el valor unitario (100%) de esos eventos.
Dominante
Recesivo
Con espacio
Prominente
Presente
Presente
Posible
Posible
Libre
Sin espacio
Pequea
Ausente
Ausente
No posible
No posible
Pegada
Uso de la mano
Derecha
Izquierda
Forma de la nariz
Recta
Pequea (ff)
Pecas
Romana
Grande (FF)
Mediana (Ff)
Presentes
Presentes
Ausentes
Pico de viuda
Presente
Ausente
Curvo
Recto
Dedo meique
Curvo
Recto
Forma de la cara
Redonda
Cuadrada
Cejas
Pobladas
Ms oscuras que el pelo
(BB)
Igual color del pelo (Bb)
No conectadas
Cerca (AA) Normal o
promedio (Aa)
Anchos o alargados
Finas
Ms claras
que el pelo
(bb)
Conectadas
Distantes
(aa)
Redondos
Tamao de la nariz
Ausentes
Grandes (DD)
Medianos (Dd)
Largas
Gruesos (LL)
Medianos (Ll)
Pequeos
(pp)
Cortas
Finos (ll)
1 mm = 1000
1 = 1000 m
1 m = 10
P.R
L.R
1
L.R
0,61
AN
Donde:
P.R = Poder de resolucin
L.R. = Lmite de resolucin
= longitud de onda
AN = Apertura numrica
La Apertura numrica es el total de los rayos luminosos que ingresando a una lente se
utilizan en la formacin de la imagen (especie de cono luminoso).
AN n sen
Donde n = ndice de refraccin del medio interpuesto y es el ngulo de apertura. Si el
medio interpuesto es el aire el ndice de refraccin es igual a 1 y por lo tanto AN ser igual
que sen &, en cambio si se usa aceite de inmersin cuyo ndice de refraccin es igual a 1,66
el valor de AN habr aumentado y por consiguiente el poder de resolucin.
Preparacin de un portaobjeto
Limpiar bien un portaobjetos con un pedazo de lino o con un papel para lentes. Manejar el
portaobjetos nicamente por los bordes (Figura 1)
1. Con un gotero, coloque una gota de agua en el centro del portaobjetos
2. Poner una muestra sobre la gota de agua.
3. Sostener el cubreobjetos en un ngulo en relacin al portaobjetos.
4. Con una aguja, bajar el cubreobjetos hacia el agua. No presionar el cubreobjetos, ya que
puede quebrarse y estropear la preparacin.
Preparacin:
Aumento:
Tincin:
Descripcin:
MATERIALES
Azcar o melaza
Vaso (beaker) de 200 ml
Papel de parafina (Parafilm)
Soluciones de sacarosa, galactosa, maltosa y lactosa
PROCEDIMIENTO
1. Prepare una suspensin de levadura por laboratorio mezclando:
Un paquete de levadura 2 g de sacarosa o melaza 100 ml de agua tibia
2. Rotule cuatro tubos del 1 al 4. Aada y mezcle bien lo siguiente:
Tubo 1: 2 ml de solucin de sacarosa y 2 ml de suspensin de levadura
Tubo 2: 2 ml de solucin de galactosa y 2 ml de suspensin de levadura
Tubo 3: 2 ml de solucin de maltosa y 2 ml de suspensin de levadura
Tubo 4: 2 ml de solucin de lactosa y 2 ml de suspensin de levadura
3. Para cada tubo:
a. Llene una pipeta graduada con la solucin del tubo.
b. Tape el extremo con el dedo mientras sella el lado opuesto con papel de parafina.
c. Utilizando la pipeta Pasteur, contine llenando la pipeta graduada con la solucin hasta que se
desborde.
d. Invierta la pipeta, colocndola en el tubo de ensayo.
Enunciar un problema o una pregunta de investigacin concreta, relacionado (a) con la fisiologa
cardiopulmonar.
1
Men principal de la aplicacin, seleccionar la
opcin Alien.
2
Luego de seguir los pasos y escoger la opcin
de experimentos, seleccione en primer lugar
las pruebas con un humano.
1 Biology in the Laboratory. Third edition. Doris R. Helms, et al. Clemenson University, W. H. Freeman and
Company, New York, 1998. (Traduccin de la gua: Nicols Guevara Prieto.)
4
Con su mtodo de recoleccin de datos y
la
distribucin
del
tiempo
por
experimento,
inicia
a
variar
alas
condiciones que permite el programa de
simulacin, recuerde tomar datos de
forma frecuente
5
En el fichero de respuestas ingrese los
valores y repuestas que considere
correctas, al final se desplegar
un
porcentaje de acierto con la informacin
detallada de la prueba. Anote los
resultados en su informe.
MITOSIS Y MEIOSIS
OBJETIVOS
MATERIALES
Los materiales se dividen en tres categoras Biolgicos, instrumentos y reactivos, as:
A. Bulbo de cebolla Allium cepa,Pez macho
B. Pinzas, Vaso de precipitado o vaso desechable, Palillos grandes, Tijeras, Pipeta pasteur,
Papel de filtro, Portaobjetos, Cubreobjetos, Aguja de diseccin, pinzas largas, Bistur y
bandeja de diseccin.
C. Aceto orceina, Eosina, Metanol, Acido actico.
Profase:
Leptoteno: En esta fase, los cromosomas se hacen visibles, como hebras largas y finas. Otro
aspecto de la fase leptoteno es el desarrollo de pequeas reas de engrosamiento a lo largo del
cromosoma, llamadas crommeros, que le dan la apariencia de un collar de perlas.
Cigoteno: Es un perodo de apareamiento activo en el que se hace evidente que la dotacin
cromosmica del meiocito corresponde de hecho a dos conjuntos completos de cromosomas. As
pues, cada cromosoma tiene su pareja, cada pareja se denomina par homlogo y los dos
miembros de la misma se llaman cromosomas homlogos.
Paquiteno: Esta fase se caracteriza por la apariencia de los cromosomas como hebras gruesas
indicativas de una sinapsis completa. As pues, el nmero de unidades en el ncleo es igual al
nmero n. A menudo, los nucleolos son muy importantes en esta fase. Los engrosamientos
cromosmicos en forma de perlas, estn alineados de forma precisa en las parejas homlogas,
formando en cada una de ellas un patrn distintivo.
Diploteno: Ocurre la duplicacin longitudinal de cada cromosoma homlogo, al ocurrir este
apareamiento las cromtidas homlogas parecen repelerse y separarse ligeramente y pueden
apreciarse unas estructuras llamadas quiasmas entre las cromtidas.ademas La aparicin de
estos quiasmas nos hace visible el entrecruzamiento ocurrido en esta fase.
Diacinesis: Esta etapa no se diferencia sensiblemente del diploteno, salvo por una mayor
contraccin cromosmica. Los cromosomas de la interfase, en forma de largos filamentos, se han
convertido en unidades compactas mucho ms manejables para los desplazamientos de la
divisin meitica.
Metafase Al llegar a esta etapa la membrana nuclear y los nucleolos han desaparecido y cada
pareja de cromosomas homlogos ocupa un lugar en el plano ecuatorial. En esta fase los
centrmeros no se dividen; esta ausencia de divisin presenta una diferencia importante con la
meiosis. Los dos centrmeros de una pareja de cromosomas homlogos se unen a fibras del huso
de polos opuestos
Anafase Como la mitosis la anafase comienza con los cromosomas movindose hacia los
polos. Cada miembro de una pareja homologa se dirige a un polo opuesto
TELOFASE Esta telofase y la interfase que le sigue, llamada intercinesis, son aspectos variables
de la meiosis I. En muchos organismos, estas etapas ni siquiera se producen; no se forma de
nuevo la membrana nuclear y las clulas pasan directamente a la meiosis II.
Meiosis 2
Profase Esta fase se caracteriza por la presencia de cromosomas compactos en nmero
haploide. Los centroiolos se desplazan hacia los polos opuestos de las clulas
Metafase En esta fase, los cromosomas se disponen en el plano ecuatorial. En este caso, las
cromtidas aparecen, con frecuencia, parcialmente separadas una de otra en lugar de
permanecer perfectamente adosadas, como en la mitosis.
Anafase:
Los centrmeros se separan y las cromtidas son arrastradas por las fibras del huso
acromtico hacia los polos opuestos
Telofase: En los polos, se forman de nuevo los ncleos alrededor de los cromosomas.
En suma, podemos considerar que la meiosis supone una duplicacin del material gentico (fase
de sntesis del DNA) y dos divisiones celulares. Inevitablemente, ello tiene como resultado unos
productos meiticos con solo la mitad del material gentico que el meiosito original
PROCEDIMIENTO
MITOSIS
Para el desarrollo de esta prctica utilice bulbos de cebolla, Allium cepa y realice preparaciones
con la raz de material fijado y teido, una vez obtenidos los extendidos de clulas obsrvelos al
microscopio ptico.
Preparacin de la cebolla:
1. Con ayuda de una pinza retire la capa externa marronacea o roscea y lave con abundante agua,
esto se realiza para eliminar restos de sustancias con las que frecuentemente han sido tratadas
para inhibir o retardar la germinacin de las raicillas.
2. Llene un vaso de precipitados con agua y coloque un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres
palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua.
3. Pngalo a germinar a 25C o a temperatura ambiente durante 3 das, al cabo de estos
aparecern numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm. de longitud.
4. Revise diariamente y procure que la corona no se deseque para lo cual es necesario rellenar con
agua cada 24 horas.
Elaboracin del montaje:
5. Cuando las races tengan entre 0.5 y 1 cm de longitud, realice cortes de raz de
aproximadamente 2 3 mm a partir del pice.
6. colquelas en una lmina portaobjetos. Adiciona una gota del colorante aceto orceina o eosina.
7. Coloque el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raz. Con ayuda de la punta de una aguja
de diseccin, d unos golpecitos sobre el cubre objetos sin romperlo, de modo que la raz quede
extendida.
8. Use papel de filtro para retirar el exceso de colorante realice una suave presin, evitando que l
cubre objetos resbale. Si la preparacin est bien asentada no hay peligro de rotura por mucha
presin que se realice.
9. Coloque la preparacin al microscopio e inicie la observacin con el objetivo de 10x e identifique
las clulas.
Observacin al microscopio:
10. Cambie al objetivo de 40X para detallar las clulas. Observe los ncleos y cromosomas en
color rosceo morado.
11. Ubique el objetivo de 100 x y anote sus observaciones describiendo las diferencias en cada
uno de los aumentos mencionados.
12. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga clulas en interfase, profase,
anafase, etc.., y haga un conteo de las clulas en divisin en cada una de estas fases. Realice
dibujos de lo observado.
II.
MEIOSIS
Para la observacin de las diferentes fases de la meiosis trabaje con un pez macho:
Preparacin del pez:
1. Introduzca el pez en una bandeja de diseccin y realice un corte rectangular desde el ano hasta
el oprculo y observe la musculatura.
2. Retire la musculatura y de esta manera quedan a la vista las vsceras del pez.
3. Con la pinza tome los testculos los cuales aparecen como cintas alargadas de color blanco
situadas en la parte superior de la cavidad abdominal desde la regin occipital hasta el poro
genital.
Preparacin del montaje:
4. Coloque los testculos sobre una lmina portaobjetos.
5. Agregue una gota del colorante aceto orceina o eosina.
5. Coloque encima una laminilla, realice una suave presin y observe al microscopio con objetivo
de menor y mayor aumento. Anote sus observaciones.
Observacin al microscopio:
6. Coloque la preparacin al microscopio e inicie la observacin con el objetivo de 10x e identifique
las clulas, cambie progresivamente de objetivo y mencione las diferenias entre las observaciones
hechas en cada aumento.
7. Realice dibujos o tome fotos y Escriba una descripcin detallada de lo observado, disee una
tabla en la que incluya los dibjos o fotos y sus descripciones.
8. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga clulas en interfase, profase,
anafase, etc.., y haga un conteo de las clulas en divisin en cada una de estas fases. Realice
dibujos de lo observado tenga en cuenta la posicin de los cromosomas para identificar las fases.
OBJETIVOS
Identificar y clasificar protozoos representativos.
Identificar tipos de algas basndose en caractersticas morfolgicas.
PROCEDIMIENTO
En esta prctica de laboratorio se identificaran organismos representativos de protozoos y
algas, por tanto el procedimiento se divide en dos:
I.
II.
Identificando algas: Las algas son organismos eucariticos fotosintticos. Las algas
evolucionaron hace ms de 450 millones de aos, todas las algas modernas
contienen clorofila a, como su principal pigmento fotosinttico pero tambin tienen
algunos pigmentos accesorios. Las distinciones hechas a travs de los grupos de
algas se basan en el tipo de pigmentos accesorios, la naturaleza del tipo de
almacn de alimentos, la composicin de la pared celular, si presenta, y si el cuerpo
es unicelular o extracelular.
Realice montajes con el agua que le provee el profesor, esta ha sido una muestra
reciente de agua estancada y/o de cultivo de algas. Coloque la laminilla y con un
papel absorbente elimine el exceso de agua.
Observe las muestras en diferentes aumentos, dibuje y/o tome fotografas, describa
detalladamente cada observacin y compare con las claves taxonmicas anexas
para asignar los nombres correspondientes.
ENZIMAS
OBJETIVOS
1. Explicar qu es una enzima y cmo stas actan en reacciones intracelulares.
2. Identificar factores que afectan la actividad enzimtica.
3. Distinguir entre inhibicin competitiva e inhibicin no-competitiva.
INTRODUCCIN
Las clulas llevan a cabo simultneamente una gran cantidad de reacciones qumicas necesarias
para la vida. Muchos de los productos de esas reacciones se necesitan inmediatamente, y si no
fuera por la participacin de las enzimas, algunas reacciones no se produciran tan rpido.
Las enzimas, en su mayora protenas o RNA (riboenzimas), son catalizadores qumicos que agilizan
una reaccin que envuelve la formacin o rompimiento de enlaces qumicos.
Las enzimas no se consumen en las reacciones, ni tampoco se alteran, razn por lo cual no se
necesitan en grandes cantidades. Las enzimas actan sobre los sustratos formando un complejo
enzima sustrato; esto ocurre en un lugar en especfico conocido como el sitio activo de la enzima.
Las enzimas son muy selectivas porque pocas molculas pueden interactuar bien con este sitio.
Las enzimas reducen la energa de activacin necesaria para llevar a cabo una reaccin; es decir,
reducen la barrera de energa que hay que sobrepasar para que la reaccin se lleve a cabo.
Las enzimas trabajan ptimamente bajo condiciones especficas y ciertos cambios pueden alterar
el funcionamiento de la enzima, desactivarla o hasta destruirla. Algunas enzimas necesitan
activadores para cambiar su conformacin de modo que pueda formarse el complejo enzima
sustrato. Estos activadores se conocen como cofactores y pueden ser tan simples como iones
metlicos. Los cofactores orgnicos se conocen como coenzimas. Las enzimas pueden afectarse
negativamente por inhibidores que impidan la actividad enzimtica. Estos inhibidores pueden
afectar el sitio activo de dos maneras: competitivamente, al bloquear el sitio activo, o no
competitivamente, al pegarse en otro lugar de la enzima y alterar indirectamente la forma del sitio
activo.
Factores que afectan el funcionamiento de la catalasa
En los ejercicios siguientes se estudiar el funcionamiento de la catalasa. Esta enzima est
presente en casi todas las clulas aerbicas y acta descomponiendo perxido de hidrgeno (agua
oxigenada) en agua y oxgeno, segn la siguiente reaccin:
MATERIALES
Perxido de hidrgeno, papa, hgado, setas, espinaca, gasa, placas de porcelana, goteros,
morteros o licuadora
Prueba 2.
Prueba 3.
CUESTIONARIO
Qu ocurri al aadir el perxido? Ocurri lo mismo en todas las muestras? Por qu se forman
burbujas? Qu otros organismos podran usarse para esta prueba? Por qu se prepararon los
homogenados? Por qu no se aadi el perxido directamente a los tejidos sin macerarlos?
Explique por qu la gran mayora de las especies de plantas y de animales producen la enzima
catalasa.
Lmina 1
PREGUNTAS
Lmina
2
1. Cuntos pares de cromosomas tiene
la especie
humana?
2. Cul es el sexo del individuo cuyo cariotipo ha investigado? Justifique su respuesta.
3. A qu se denominan autosomas?
4. Tiene algo que ver el nmero de cromosomas de una especie con su tamao?
Brinde ejemplos.
5. Qu es una anomala cromosmica?
*Introduzca el escalpelo o la aguja enmangada por la aorta para que despus sirva de gua por
donde cortar.
*Con las tijeras abrimos el ventrculo izquierdo, siguiendo el recorrido de la aguja enmangada o
el escalpelo (que anteriormente haba introducido por la aorta) a 05, cm por debajo del surco
interventricular.
*De la vuelta al corazn e introduzca el escalpelo o la aguja enmangada por la vena cava superior
para que despus nos sirva de gua por donde cortar.
*Con las tijeras abra la aurcula derecha, siguiendo el recorrido de la aguja enmangada o el
escalpelo
Qu capas distingue en las paredes del corazn?; haga una breve descripcin de lo observado.
Identifique el tabique que separa el corazn izquierdo y derecho; haga una breve descripcin de lo
observado. Qu nombre reciben las cavidades y por qu se caracterizan?, identificarlas por medio
del esquema. Establezca la diferencia entre aurculas y ventrculos.
4. Analice e identifique las vlvulas que conforman el corazn y conteste:
Realice una descripcin de la estructura morfolgica de las vlvulas: Observe los pliegues de color
blanquecino que separan las aurculas de los ventrculos y haga una breve descripcin. En el
esquema identifique las vlvulas que conforman el Corazn.
RESULTADOS. (Esquemas, dibujos, descripciones)
ANLISIS DE RESULTADOS (Elaborar un escrito con buena argumentacin y redaccin sobre lo
aprendido en el laboratorio).