DFLBPA

(DECOLORACIN DE UN FLUJO LB POR ABSORCIN)

OBJETIVO GENERAL:
Retirar los colorantes presentes en un medio LB por medio de un lecho
empacado (bacterias inmovilizadas).
OBJETIVOS ESPECIFICIOS:
Disear y construir un lecho empacado que cuente con regulacin de
flujo, filtros, rea de recoleccin y contenedor de analito.
Disear y contruir un sensor de temperatura.
Disear y contruir un sensor de PH.
Inmovilzar las bacterias que serviran de lecho empacado con una
solucion de Alginato de Sodio y Cloruro de Calcio (CaCl2).
Controlar el paso del flujo a 500 microlitros por hora.
Obtener un medio LB libre de colorantes.

INTRODUCCIN
Los lechos empacaados son dispositivos frecuentemente utilizadas en la
absorcin de gases y algunas otras operaciones. Esta consiste en
una columna cilndrica, o torre, equipada con una entrada de gas y un espacio
de distribucin en la parte inferior; una entrada y un distribuidor en la parte
superior; salidas para el gas y liquido por cabeza y cola respectivamente;
cuerpos slidos inertes que reciben el nombre de relleno dela torre que
proporcionan un rea de superficie grande para facilitar el contacto entre el
lquido y el gas.
Las torres absorbedoras empacadas pueden alcanzar eficiencias de remocin
ms altas, manejar razones de lquido ms altas y tener requerimientos de
consumo de agua relativamente ms bajos que otros tipos de absorbedores
de gas. Sin embargo, las torres empacadas pueden tambin tener cadas de
presin altas en el sistema, potencial de obstruccin y ensuciamiento alto y
costos de mantenimiento extensos debido a la presencia del material de
empaque.
Las torres empacadas ocupan un lugar destacado en las industrias de
trasformacin fisicoqumica, ya que juegan un papel fundamental en las
operaciones de transferencia de masa y de calor que requieren el contacto
directo entre las fases inmiscibles.
Principales aplicaciones:

Remocin de contaminantes del aire, eliminacin de olores.

Absorcin de dixido de carbono en control de emisiones.

Absorcin en procesos de produccin de cido ntrico, sulfrico, cloro,

desorcin de carbonatacin de agua, despojamiento de amoniaco.

Recuperacin de compuestos orgnicos de corrientes acuosas.

Destilacin rectificacin al vaco de crudo. Extraccin lquido-lquido.

Deshumidificacin, desalinizacin de agua, enfriamiento de plantas

trmicas y nucleares, enfriamiento de cloro gaseoso.

La absorcin se refiere a la transferencia fsica de un soluto de la fase gaseosa

a la fase lquida. Generalmente, el soluto entra en la columna en un gas que
es insoluble o slo ligeramente soluble en la fase lquida. Mientras que algunos
de la fase lquida pueden ser vaporizados en la fase de gas, esto es incidental
para la operacin de absorcin. El soluto absorbido puede formar una solucin
simple en la fase lquida, o puede reaccionar qumicamente con un
componente en la fase lquida.
Alginato
Los alginatos son los polisacridos ms abundantes presentes en las algas
marinas. Comprenden hasta 40% de su peso seco. Son los componentes
estructurales de la pared celular de las algas, cuya funcin principal es dar
rigidez, elasticidad, flexibilidad y capacidad de enlazar agua.
Los alginatos son extrados principalmente de tres especies de algas. Estas
incluyen Laminaria hyperborea, Ascophyllum nodosum y Macrocystis pyrifera.
La aplicacin de los alginatos se basa en cuatro propiedades principales:

Hbil como espesante al ser disueltos en agua, generando aumento en

la viscosidad de la solucin en la que se disuelven.

Su capacidad para retener el agua.

Hbil para formar gel, dando lugar a la formacin de enlaces entre las
cadenas adyacentes del polmero alginato.

Formar pelculas.

Bacterias inmovilizadas
La esterificacin, es una tcnica culinaria antigua pero con un desarrollo
moderno.
Con la esterificacin, lo que conseguimos es encapsular en forma de esfera,
un volumen, por medio de la formacin de una membrana fina que lo rodea,
haciendo que tenga la apariencia de una substancia slida.

La gelificacin es el proceso mediante el cual se espesan y estabilizan

soluciones lquidas, emulsiones y suspensiones. En el caso de la
esterificacin, la gelificacin se produce por la unin entre molculas
solubilizadas de alginato con tomos o iones de calcio. Se trata pues, de una
gelificacin inica de tipo externa o interna, dependiendo de si los tomos de
calcio se suministran desde fuera hacia al interior, o viceversa.
a) La gelificacin interna es aquella que sucede cuando, los tomos de
calcio migran desde el exterior de la esfera a su interior, es decir, desde
la solucin de calcio donde se sumergen las esferas, hacia el interior de
las mismas, por unin al alginato que rodea dichas esferas. Como
consecuencia de esta unin, se produce un reordenamiento estructural,
resultando en la formacin de un gel. Para llevar a cabo esta gelificacin
correctamente, se debe considerar la solubilidad y concentracin de la
sal de calcio, la composicin del alginato, as como, la acidez de la
clula a encapsular.
b) La gelificacin externa es aquella que sucede cuando, los tomos de
calcio migran desde el interior de la esfera hacia su pared, dnde se
unen con el alginato presente en el medio o la solucin. La formacin
de la membrana o gel, se inicia en la interface de los dos lquidos,
avanzando hacia el interior a medida que la superficie se encuentra
saturada de iones calcio, desplazando a otros iones de la estructura
molecular del alginato.

Para llevar a cabo esta gelificacin

correctamente, se deben considerar la concentracin de los tomos de

calcio y la composicin del alginato.

REACTIVOS Y REACTANTES

LURIA-BERTANI (LB)

En el tanque de alimentacin contendr una solucin de medio LB (Luriabertani) el cual ser preparado en el laboratorio de investigacin.
Para preparar 300 ml de este medio se necesitan los siguientes reactivos:
1. Triptona enzimtica 3g
2. Extracto de levadura 1.5g
3. Cloruro de sodio
4. Agar

3g
3g

5. Hidrxido de sodio 14g

Los materiales a utilizar son:

Potencimetro
Probeta de 500 ml
Matraz de 500 ml
agua destilada de 500 ml
Mosca magntica.
Tuvo falcn.
Placa magntica
vaso de precipitado de 500 ml
Cinta testigo.

Se pesan las cantidades mencionadas para la preparacin de 300 ml, todos

los reactivos esepto el agar y NaOH se mezclan, en un vaso de precipitado de
500 ml, con una cantidad de 200 ml de agua destilada.

Para el NaOH se prepara una solucin 10N, esto requiere una cantidad de 14
g de NaOH, esta solucin se llevara a 1N, por lo que se toman 3.5 ml de 10 N
NaOH.
Teniendo esta solucin se utilizara para fijar el pH de del medio LB, fijado el
pH, la solucin del medio LB se verter en una probeta de 500 ml y se aforara
hasta 300 ml. Ya aforado se pasara a un matraz de 500 ml, as mismo se
pesara los gramos requeridos de agar, para verter este reactivo, la solucin se
pondr en una placa magntica y dentro del medio se introducir la mosca
magntica ayudando a la disipacin del reactivo.
El ltimo paso ser tapar el matraz donde este el medio LB y colocarle una
cinta testigo, que cambiara de color cuando esta elevar su temperatura y este
esterilizada. Para esterilizar este medio se someter a una presin de 120 psi
durante 20 min.
Ahora a este medio se le agregaran colorantes con el fin de que el la torre
empacada llena de un material que puedan eliminarse algunos colorantes son:

Tabla 1 Pigmentos que son similares a la estructura qumica de la lignina

PIGMENTO

ABREV.

ORIGEN

(acrnimos

CAS

FRMULA

NUM.

del ingls)
Azure B

Indigo
Carmn

AB

IC

Colorante

531-

C15H16ClN3

natural

55-5

Colorante

860-

C16H8N2Na2

natural

22-0

O8S2

derivado de
Indigofera
tinctoria

Verde de

MG

Malaquita

Colorante

569-

sintetizado a

64-2

C23H25ClN2

partir de
benzaldehdo
y
dimetilanilina.
Rojo Congo

Xylidine

CR

XP

ponceau

Azul de
metileno

MB

Colorante

573-

C32H22N6Na

sintetizado

58-0

2O6S2

3761- C18H16N2O7
53-3

S2

61-

C16H18N3SC

73-4

Azul de

TB

Toluideno

Azul
brillante de
Remazol R

RBBR

92-

C15H16N3SC

31-9

2580- C22H16N2Na
78-1

2O11S3

INMOVILIZACIN DE CLULAS MADRE.

Reactivos:
Alginato de sodio
Cloruro de Calcio

ESQUEMA GENERAL DEL LECHO EMPACADO

Esquema por partes del lecho empacado

Primera seccin: Contenedor de

medio LB y Vlvula reguladora
de flujo.

Segunda seccin: Lecho empacado,

vlvula controladora del sistema y
filtro de salida.

Nombre

Frasco de
vidrio para
autoclave

caractersticas
*Frasco 250 ml

uso
*Recipiente para
realizar la
con graduacin esterilizacin de la
*tapa cermica solucin LB.

Esquema

Imagen(presentacin)

Costo
$500

* resistente
hasta 140C
*Vidrio de
boro silicato

Vidrio borosilicato 3.3

Equipo para
suero.

Tubo de pvc
transparente

*equipo para
canalizar suero

*Tubo
transparente
de pvc.
*alta
resistencia
trmica.
* es un
material que
no reacciona
con el
contenido.
*sus
dimensiones
son de 10cm
de alto por 2.7
de dimetro.

*se utilizar el
sistema de
mangueras sachet y
vlvula para regular
el flujo del sistema

$100

* se utilizar como el
lecho empacado

$70

Filtro

*Eliminan de
forma fiable
microorganis
mos y
partculas
presentes en
lquidos, aire y
gases.
*Sus
aplicaciones
tpicas son la
clarificacin, la
filtracin
estril, la
preparacin
de muestras y
las
aplicaciones
mdicas.

*para retener
partculas no
deseadas en el
producto.

$50

total

$720