DEDICATORIA

A mi madre por su apoyo incondicional para

lograr mis metas trazadas.

AGRADECIMIENTO
A la Universidad Nacional de Cajamarca y
al docente de la asignatura de
Fitopatologa General.

DATOS INFORMATIVOS
1.1.

Sobre la investigacin

1.1.1. Tipo de investigacin: Investigacin Descriptiva evaluativa- experimental.

1.1.2. Lugar de investigacin: Universidad Nacional de Cajamarca
1.1.3. Fecha de inicio: 23 de Julio de 2012.
1.1.4. Fecha de trmino: 9 de agosto de 2012.
2.2.

Ubicacin geogrfica

2.2.1. Altitud: 2536 msnm

2.2.2. Longitud: 78 29 W
2.2.3. Latitud: 7 10 S
2.3.

Datos climatolgicos:

2.3.1. Temperatura mxima: 20C

2.3.2. Temperatura mnima: 10 C
2.3.3. Humedad relativa: 65%
2.3.4. Precipitaciones: 76 mm
2.3.5. Velocidad del viento: 21m/s
3

Datos obtenidos para el mes de abril de la estacin meteorolgica

AUGUSTO WEBERBAUER

INDICE
CAPITULO I.
pg
1.1. Introduccin.5
1.2. Objetivo........5
CAPITULO II: REVISION DE LITERATURA
2.1. Morfologa de Ralstonia solanacearum..6
2.2. Taxonoma del patgeno...6
2.3. Patognesis de Ralstonia solanacearum 6
2.3.1. Sintomatologa.7
2.4. Patogenicidad
de
Ralstonia
solanecearum....7
2.5. Dispersin de la enfermedad....8
CAPITULO III: MATERIALES Y METODOS
3.1. Lugar experimental....9
3.2. Materiales.9
3.2.1. Material experimental.....9
3.2.2. Material de trabajo.,9
3.2.3. Material de gabinete...9
3.3.

Metodologa...10

3.3.1. Instalacin y conduccin de la investigacin...10

CAPITULO IV: RESULTADOS Y DISCUSIONES
4.1. Resultados.12
4.2.
Discusiones...15
CAPITULO V: CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1. Conclusiones.....16
5.2. Recomendaciones17
CAPITULO VI: RESUMEN..18
CAPITULOVII: LITERATURA CITADA.19
4

ANEXOS:...20

CAPITULO I.
1.1.

Introduccin
El cultivo de la papa es afectado por diferentes plagas y enfermedades,
siendo la marchitez bacteriana causada por Ralstonia solanacearum una
de las enfermedades bacterianas ms importantes, los sntomas en las
plantas afectadas por Ralstonia solanacearum (E.F. Smith), son similares a
aquellos causados por falta de agua, nutrientes o de algn otro tipo de
marchitez.
La enfermedad se presenta como marchitez repentina y flcida de las
plantas, su efecto incluye obstruccin de los haces vasculares y cuando la
enfermedad avanza, emanan exudados pegajosos por las yemas del
tubrculo. Tiene como principal medio de transmisin tubrculo-semilla
contaminado.
Se encuentra con gran severidad en las tierras altas de los trpicos y en las
regiones subtropicales con los climas ms clidos de todo el mundo (Agrios
1 995). Tambin se ha encontrado en climas fros-templados de la regin
Cajamarca-Per, la bacteria ha sido reportada en ms de 30 pases y en
casi todos los continentes.

1.2. Objetivo

Reconocer los sntomas de Rolstonia solanacearum agente causal

de la marchitez bacteriana en maceta de papa (solanum tuberosum).

CAPITULO II.
REVISION DE LITERATURA
2.1.

Morfologa de Ralstonia solanacearum

Es una bacteria bacilo Gram negativo, cuyo tamao aproximado es de
0,5 X 1,5 m por lo que no se puede observar a simple vista, presenta
un nico flagelo polar que le da movilidad, aerbica estricta, la
temperatura ptima de crecimiento se encuentra entre 28 y 30C, es una
bacteria de crecimiento rpido (Agrios, 1997).

2.2. Taxonoma del patgeno

Clase: Schizomycetes.
Orden: Pseudomonadales.
Familia: Pseudomonadaceae.
Grupo: Pseudomonas no fluorescentes.
Gnero: Ralstonia.
Especie: solanacearum, raza 3, biovar 2.
Nombre comn: Marchitez bacteriana.
2.3. Patognesis de Ralstonia solanacearum
La infeccin tiene lugar a travs del sistema radicular. El patgeno
penetra por las heridas que pueden ocurrir particularmente durante las
labores de cultivo, o que se deben al crecimiento natural de los pelos
radiculares (citado por CIP, 1984). Tambin las heridas que provoca
6

Globodera pallida en la raz permite el ingreso de la bacteria y posterior

colonizacin del sistema vascular.
La marchitez bacteriana se manifiesta en cualquier edad de la planta,
ocasiona la necrosis del anillo vascular. Inicia como flacidez en un lado
de un foliolo de la hoja. A medida que ocurre la obstruccin del xilema la
flacidez se generaliza a los foliolos de un lado de la hoja, luego a las de
un lado de la rama y por ultimo a las ramas de un lado de la mata, por
estas caractersticas se denomin marchitez unilateral (M.S. Ordoez.
2004).
2.3.1. Sintomatologa
a. Sntomas areos.
Marchitamiento por

falta

de

agua

en

los

vasos

xilematicos,

amarillamiento del follaje generalmente en una sola parte y luego en

toda la planta, tambin se puede ver enanismo en toda la planta (CIP,
1996). El marchitamiento es el resultado de una disminucin del
movimiento del agua en los vasos xilematicos del tallo debido a la
formacin del mucilago alrededor de las masas de bacterias.
b. Sntomas subterrneos
Si es una infeccin severa el exudado bacteriano se aglutina en los ojos
de los tubrculos, lo que hace que la tierra quede adherida a ellos,
despus de un corte de un tubrculo se podr apreciar una coloracin
pardusca en el anillo vascular.
2.4.

Patogenicidad de Ralstonia solanecearum

Rastonia solanacearum se propagan y mueven a travs de los haces
vasculares de las plantas hospedantes. Durante el proceso interfieren
con la translocacin del agua y los nutrientes y esto es la causa del
debilitamiento, marchitez y muerte de los rganos areos de la planta.
Ralstonia solanacearum secretan enzimas como las pectinasas y
celulasas que degradan las sustancias de la pared celular que, cuando
son trasportadas en la corriente de traspiracin, se renen en los
extremos de los vasos, forman heles y gomas que obstruyen los poros
de estos

bloqueando as el flujo de agua en ellos. Estas enzimas

7

producen tambin el ablandamiento y debilitamiento de paredes

celulares, las cuales se colapsan y hacen que los tejidos se debiliten y
marchiten.
En corte transversal de los tallos se observa la emanacin del flujo
bacteriano en forma de perlas de color amarillo claro. Infecciones
severas del tubrculo, conducen a la salida de exudado bacteriano a
travs de las yemas (M.S. Ordoez. 2004).
2.5.

Dispersin de la enfermedad.
Ralstonia solanacearum est presente desde el nivel del mar hasta los
2850 msnm aproximadamente. El principal medio de transmisin es la
papa de semilla contaminada. Tambin puede propagarse con la tierra
adherida a la maquinaria, aperos, calzado, agua de riego o de
escorrenta, por animales.
La bacteria puede vivir en la planta y en los tubrculos de la papa y en
otras plantas cultivadas o malas hierbas sin producir sntomas, tambin
puede mantenerse en el suelo, en el agua y en restos vegetales.

CAPITULO III.
MATERIALES Y METODOS
3.1.

Lugar experimental.
La presente investigacin se ha conducido en el laboratorio de
Fitopatologa, (Edificio 2G -106) de la Universidad Nacional de Cajamarca,
con una ubicacin geogrfica de 2680 m. s. n. m., con latitud 07 10 06.35
S y una longitud de 78 29 42.70 W. Datos Obtenidos del Software Google
Eart Imgenes Satelitales

3.2.

Materiales

3.3.2. Material experimental

a.

Tuberculo de papa.-Se utiliz tubrculo de papa infectado (solanum

tuberosum), obtenido del mercado San Martin de la ciudad de Cajamarca.

b.

Plantas de papa en maceta.- se utiliz tres macetas con plantas de

dos meses de edad variedad wairo.

3.3.3. Material de trabajo

Mondadientes de madera.

Alcohol.

Hipoclorito de sodio (lega).

Cmara hmeda.

Microscopio

Navaja estril.

Porta y cubre objetos.

3.3.4. Material de gabinete.

3.4.

Cmara digital

Libreta de apuntes

Computadora y material de escritorio.

Metodologa

3.4.1. Instalacin y conduccin de la investigacin.

a. Obtencin del inoculo
-

Desinfectar la navaja y rea de trabajo.

Lavar el tubrculo infectado con agua y lega.

Poner a hervir por 5 minutos los mondadientes.

Corte transversal del tubrculo y observar perlas bacterianas de

color crema cristalino (figura 1)

Presionar y recoger el inoculo bacteriano con la punta del

mondadientes.

10

Figura 1: tubrculo con Ralstonia solanacearum

b. Inoculacin
-

Introducir el mondadientes con inoculo en la yema lateral del tallo o

axila de la hoja (zona de insercin del peciolo y el tallo figura 2)

Maceta 1: planta testigo.

Maceta 2: inoculada por la base de la planta.

Maceta 3: inoculada por el pice de la planta.

Fecha de inoculacin: 23 de Julio de 2012.

Evaluaciones todos los das para observar los primeros sntomas.

11

Maceta 2

Maceta 3

Maceta 1

Figura 2: momento de la inoculacin.

CAPITULO IV.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
4.1.

Resultados.

12

Maceta 2: inoculada por la base.

30/07/12
Sntomas

Descripcin de sntomas observados

01/08/12
03/08/12
06/08/12
Sntomas
Muerte total de
La bacteria ha

localizados: hojas

generalizados

primeras hojas

ocasionado

marchitas en la

en toda la

trastornos

zona inoculada

planta: hojas

infectadas.
El resto de hojas

con epinastia.
Hojas prximas a

completamente
marchitas con

la zona inoculada

epinastia muy

con los foliolos

pronunciada.
Los sntomas

enrolladas hacia
arriba y peciolulo
inclinado hacia

presentan
marchitez con
foliolos
encarrujados y
peciolulo

avanzan hacia

inclinado hacia

el pice.

abajo.

fisiolgicos en
toda la planta.
Las hojas
apicales a un se
mantienen
verdes y en pie.

abajo.

Inicio de la infeccin

Muerte del hospedero

13

Hojas con

Empiezan a

La planta est

localizados: hojas marchitez

morir las

agonizando por

con foliolos con

permanente y

flacidez

completamente

primeras hojas.
El resto de

completo.
Todas las hojas

incipiente.

flcidas.
Yema apical con

hojas

estn marchitas

marchitadas

amarillas y

foliolos
Inicio de la infeccin

presentan
cadas hacia el
Muerte del hospedero

el pice

Maceta 3: inoculada por

Sntomas

14

Maceta 1: muestra en blanco.

Contina creciendo y desarrollando normalmente sin presentar trastornos

fisiolgicos.

Discusiones.

4.2.

El periodo de incubacin en la maceta inoculada por su base dos

veces simultneamente resulta ser ms inmediato la aparicin de los
primeros sntomas, que la maceta inoculada por su pice una sola
vez, sin embargo la invasin patognica fue ms veloz, muriendo la
planta a cabo de diez das.

15

Ralstonia solanacearum presenta sntomas en papa parecidos a

stress hdrico, porque obstruye los haces conductores impidiendo el

paso del agua y nutrientes.

Los trastornos fisiolgicos primero son localizados luego se

generalizan, porque las bacterias se multiplican muy rpido.

La maceta en blanco aparte de servir como medio de comparacin,
permiti constatar, que a pesar de estar junto y rosando a las
macetas infectadas no se infect; porque R. solanacearum se
trasmite directamente por heridas.

CAPITULO V
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1. Conclusiones
16

La maceta 2; inoculada su base dos veces simultneamente en

diferentes zonas, mostro los primeros sntomas a los seis despus de
la inoculacin.

La maceta 3; inoculada por su pice, al final mostro mayor

susceptibilidad a Ralstonia solanacearum.

El conjunto de sntomas observados implica: amarillamiento leve,

flacidez, marchitez en un solo lado de la hoja, epinastia, muerte de
hojas y finalmente toda la planta.

Ralstonia solanacearum

despus de

10 das de aparecer los

primeros sntomas mato su hospedero.

5.2. Recomendaciones.

Para verificar la infeccin de Ralstonia solanacearum se recomienda

cortar y sumergir un pedazo de tallo en agua limpia, despus de unos
minutos se observa la presencia de filamentos lechosos que salen por
un extremo del tallo.
Ralstonia solanacearum en tubrculos se observa un mucilago
bacteriano amarillo claro exudado por los ojos. Tambin al momento
de cortar se observa el anillo vascular oscurecido emanando zoogleas
bacterianas.

Para evitar Ralstonia solanacearum en campo, la rotacin de cultivos

con cereales y leguminosas es el mtodo ms eficaz.

17

CAPITULO VI
RESUMEN
El conjunto de sntomas ocasionados por Ralstonia solanacearum en
condiciones controladas de evaluacin, implican una serie ordenada de
trastornos fisiolgicos propios de la patogenicidad de R. solanacearum
invadiendo los haces conductores, obstruyendo la absorcin de agua,
nutrientes y la translocacin de fotoasimilados. Los primeros sntomas se
manifiestan en la zona inoculada como flacidez en un lado de un foliolo de la
hoja, luego a los foliolos de un lado de la hoja, despus a las hojas de un
lado de la rama y sucesivamente hasta toda la planta. Las hojas se
marchitan completamente en menos de dos das, se produce epinastia, las
hojas mueren quedndose adheridas al tallo. Para constatar la presencia de
R. solanacearum en un corte transversal de los tallos se observa la
18

emanacin del flujo bacteriano en forma de perlas color amarillo claro.

Finalmente los sntomas y signos se generalizan y muere la planta.

CAPITULOVII.
LITERATURA CITADA.

Roncal Ordoez, M.S. (2004). Principios de Fitopatologa Andina.

Universidad Nacional de Cajamarca. Cajamarca-Per. 420 p.

Agrios, C.N. (2010). Fitopatologa. 2da edicin. Edit. Limusa - Mxico.

838 p.
Gabriela Ros Morales. (2007). DISTRIBUCCIN Y VARIABILIDAD DE
Ralstonia solanacearum E.F. Smith. Trabajo de diploma. Universidad
Nacional

Agraria

Nicaragua.

35

p.

Disponible

en:

http://cenida.una.edu.ni/Tesis/tnh20r586.pdf

Patrice G. Champoiseau. (2009). Ralstonia solanacearum raza 3

biovar

2.

Universidad

de

Florida.

Disponible

en:
19

http://plantpath.ifas.ufl.edu/rsol/RalstoniaPublications_PDF/Ralstonia_so

lanacearum_ES_PDF.pdf
Centro Internacional de la papa (CIP). 1999. Principales Enfermedades,
Nematodos

Insectos

de

la

Papa.

Disponible

en:

http://es.wikipedia.org/wiki/Ralstonia_solanacearum

ANEXOS:

Ilustracin 1: antes de la infeccin

20

Ilustracin 2: inicio de la infeccin

Ilustracin 3: maceta inoculada por el pice durante la infeccin

21

Ilustracin 4: maceta inoculada por la base durante la infeccin.

22

Ilustracin 5: mxima invasin de Ralstonia solanacearum

23