MOLINA
INFORME DE LA PRCTICA N 5
Qumica Analtica
Alumnos
(20140128)
(20140133)
(20120144)
(20131021)
(20110430)
(20121361)
Facultad
Docente
Lima Per
2016
I.
INTRODUCCIN
El nitrgeno (del latn nitrum -i y ste del griego , "nitro" -nombre que
histricamente ha sido usado en forma vaga para referirse a diversos compuestos de
sodio y de potasio que contienen nitrgeno-, y -geno, de la raz griega -, "generar")
se considera que fue descubierto formalmente por Daniel Rutherford en 1772 al dar a
conocer algunas de sus propiedades. Sin embargo, por la misma poca tambin se
dedicaron a su estudio Scheele, que lo aisl, Cavendish, y Priestley.
El nitrgeno es un gas tan inerte que Lavoisier se refera a l como azote (zoe) que
significa sin vida2 (o tal vez lo llam as por no ser apto para respirar). Se clasific
entre los gases permanentes, sobre todo desde que Faraday no consiguiera verlo
lquido a 50 atm y -110 C, hasta los experimentos de Pictet y Cailletet que en 1877
consiguieron licuarlo.
Los compuestos de nitrgeno ya se conocan en la Edad
Media; as, los alquimistas llamaban aqua fortis al cido
ntrico y aqua regia (agua regia) a la mezcla de cido
ntrico y clorhdrico, conocida por su capacidad de
disolver el oro y el platino.
El nitrgeno es un elemento qumico de nmero atmico
7, smbolo N y que en condiciones normales forma un
gas diatmico (nitrgeno diatmico o molecular) que
constituye del orden del 78 % del aire atmosfrico.1 En
ocasiones es llamado zoe antiguamente se us tambin Az como smbolo del
nitrgeno.
Tambin el nitrgeno tiene importancia biolgica. El nitrgeno es un componente
esencial de los aminocidos y los cidos nucleicos, vitales para los seres vivos. Las
legumbres son capaces de absorber el nitrgeno directamente del aire, siendo ste
transformado en amonaco y luego en nitrato por bacterias que viven en simbiosis con
la planta en sus races. El nitrato es posteriormente utilizado por la planta para formar
el grupo amino de los aminocidos de las protenas que finalmente se incorporan a la
cadena trfica (vase tambin el ciclo del nitrgeno).
Existen varios mtodos para poder determinar el nitrgeno por ejemplo el Mtodo de
Kjeldahl su fundamento se caracteriza por el uso de ebullicin, cido sulfrico
concentrado que efecta la destruccin oxidativa de la materia orgnica de la muestra
y la reduccin del nitrgeno orgnico a amonaco el amonio es retenido como bisulfato
de amonio y puede ser determinado in situ o por destilacin alcalina y titulacin.
Tambin el Mtodo de Dumas Se caracteriza por pirolisis completa de la muestra y
medicin del contenido de nitrgeno de los gases de combustin. El nitrgeno
puedeser medido con manmetro despus de absorber el dixido de carbono en una
solucin alcalina o por conductividad trmica en mtodos automatizados.
1.1 Objetivos
Determinar la concentracin nitrgeno amoniacal por la volumetra
cido-base por retrovaloracin titulando con NaOH estandarizado y
aplicando las leyes de la estequiometra.
1.2 Hiptesis
La concentracin de amoniaco, NH3, una base Bronsted y Lowry, puede
determinarse desprendiendo y arrastrndolo como gas NH3 con vapor de agua en
una reaccin cido-base usando la tcnica de la retrovaloracin o valoracin
inversa y aplicando las leyes de estequiometria.
II.
REVISIN DE LITERATURA
Proceso analtico para la determinacin de nitrgeno orgnico a travs
del mtodo Kjeldahl
En 1883 el investigador dans Johann Kjeldahl desarroll el mtodo ms
usado en la actualidad para el anlisis de protenas (mtodo Kjeldahl)
mediante la determinacin del nitrgeno orgnico. En esta tcnica se digieren
las protenas y otros componentes orgnicos de los alimentos en una mezcla
con cido sulfrico en presencia de catalizadores. El nitrgeno orgnico total
se convierte mediante esta digestin en sulfato de amonio. La mezcla digerida
se neutraliza con una base y se destila posteriormente. El destilado se recoge
en una solucin de cido brico. Los aniones del borato as formado se titulan
con HCl (o H2SO4) estandarizado para determinar el nitrgeno contenido en la
muestra.
El resultado del anlisis es una buena aproximacin del contenido de protena
cruda del alimento ya que el nitrgeno tambin proviene de componentes no
proteicos.
El mtodo Kjeldahl ha sufrido varias modificaciones. Originalmente se utiliz
permanganato de potasio para llevar a cabo el proceso de oxidacin
(digestin), sin embargo, los resultados no fueron satisfactorios, de manera que
este reactivo se descart. En 1885 Wilforth encontr que se poda acelerar la
digestin utilizando cido sulfrico y aadiendo un catalizador. Gunning en
1889 propuso aadir sulfato de potasio que eleva el punto de ebullicin del
cido sulfrico utilizado en la digestin para disminuir el tiempo de la reaccin.
Las reacciones que suceden son:
a. La digestin
Por ebullicin de la materia orgnica con H 2SO4 concentrado y en
presencia de catalizadores, la materia orgnica se oxida a CO 2 y agua,
mientras que una parte del cido se reduce a SO 2.Luego, como la reaccin
fue hecha bajo la accin de un catalizador.
Materia orgnica + H2SO4 CO2 +H2O+ (NH4)2SO4
MATERIALES Y MTODOS
3.1 Materiales
Reactivos:
cido sulfrico concentrado.
Hidrxido de sodio 12M.
cido sulfrico 0.10M estandarizado.
cido clorhdrico de 0.05M estandarizado.
Equipos:
Balanza analtica.
Equipo de digestin en campana extractora para capturar gases emitidos.
DIGESTIN:
En esta parte nos ayud el tcnico de laboratorio y el profesor Palma, ya que este
proceso requera del uso de cidos en calor lo cual era peligroso.
Alistar papel para pesar nuestra muestra libre de fuentes de nitrgeno para no
alterar nuestro clculo ya que este ser incorporado a la digestin junto con
nuestra muestra.
Previa tara del papel en la balanza analtica, se introduce nuestra muestra
orgnica de 0.2369 g en el papel, envolver y cerrar e introducir al fondo del
baln de digestin.
Aadir aproximadamente 1 g de catalizador.
Agregar cido sulfrico concentrado.
Llevar por aproximado 2 horas al digestor hasta que esta se torne una solucin
incolora.
Retirar del digestor, dejar enfriar.
DESTILACION:
Para la recepcin y captura del amoniaco, NH3.
TITULACIN:
IV.
RESULTADOS Y DISCUSIONES
Tabla 1: Determinacin de nitrgeno orgnico.
Harina de
pescado
0.2305
25
0.0568
13.3
0.0816239
2
1/2
1.42
2.84
2.84
10.6558
66.59875
DISCUSIONES
Cada uno de los datos depende del otro pues las reacciones se dan a pares, el cido
con el NH3 y el hidrxido de sodio con cido sulfrico, debido a que es un mtodo de
retrovaloracin.
El porcentaje de protena de harina de pescado hallado en el experimento fue de
66.59875%. Segn la bibliografa recopilada se sabe que el porcentaje de protena
varia aproximadamente entre 55-72%;este valor depende y vara segn la especia
analizada, es decir, una especie magra (con menos cantidad de grasa) tiene mayor
contenido proteico que una especie grasa.
De acuerdo al International Fishmeal and Fish Oil Organization (IFFO) (fig. 1), el
porcentaje mnimo de protena de anchoveta esta entre 64 y 68%, por lo cual se podra
afirmar que la harina de pescado con la que se trabaj proviene de esta especie, o al
menos de una con un porcentaje parecido.
Fig. 1:
composici
n de la
harina de
pescado
VI.
CONCLUSIONES:
VII.
RECOMENDACIONES
VIII.
BIBLIOGRAFA
Alaiz, M., et al. (1992). Amino acid analysis by high-performance liquid chromatography
after derivatization with diethyl ethoxymethylenemalonate. (Journal of Chromatography
591:181-186).
Greenfield, H. and Southgate, D.A.T. (1992). Food Composition Data. London, Elsevier
Appllied Science.
King. (1978). Developments in Food Analysis Techniques. London, Applied Science
Publishers.
Pomeranz, C. and Meloan. (1971). Food Analysis; Theory and Practice. Westport,
Connecticut, The AVI Publishing.
Skoog, D. A.; West, D. M., (1994). Qumica analtica, 4a edicin. Ed. Mc. Graw Hill
Mxico DF. Pp. 231-233.
Dominic, C.; Wong, V.S., 1995. Qumica de los alimentos, mecanismos y teora. Ed.
Acribia S. A., Zaragoza, Espaa.
FAO, Departamento de Pesca. (1986). Manual de tcnicas para laboratorio de
nutricin de peces y crustceos. Obtenida el 22 de abril de 2016, de
http://www.fao.org/docrep/field/003/ab489s/ab489s03.htm
Gary D., Christian. (2009). Qumica Analtica (6ta ed.). Mxico: Mc Graw Hill.
Clavijo, A. (2002). Fundamentos de qumica analtica: Equilibrio inico y anlisis
qumico (1ra ed.). Bogot: Universidad Nacional de Colombia.
IX.
CUESTIONARIO
Mtodo de Biuret
Se basa en la propiedad que presentan los compuestos que poseen enlaces
peptdicos de reaccionar en medio alcalino con sales de cobre para formar un
complejo, de estructura desconocida, entre el in Cu y los grupos carbonlicos
e imnicos del enlace peptdico. La intensidad de color es proporcional al
Mtodo de Lowry
Utiliza el reactivo de fenol-FolinCiocalteu. En este mtodo se desarrollan dos
reacciones coloridas: primero se desarrolla un color de poca intensidad con el
cobre en medio alcalino; despus se forma un color azul-verde con el reactivo
mencionado, que contiene molibdato de sodio y tungstato de sodio en
presencia de cido fosfrico y clorhdrico, que reacciona con los aminocidos
aromticos, fenilalanina y triptfano de la protena. Este mtodo permite
determinar la concentracin de protena en rangos de 0.01-1mg/mL.
Mtodo de Bradfort
Este mtodo se fundamenta en que la unin de las protenas al colorante de
Coomasie G-250 provoca un desplazamiento, desde 465nm a 595nm. Por lo
tanto las medidas de absorbancia del complejo protena colorante se
realizarn a 595nm.
Mtodo de la Ninhidrina
Permite la determinacin de aminocidos que presentan un grupo carboxilo y
un grupo aminos libres. Es una reaccin general para todos los aminocidos,
excepto para la prolina y la hidroxipolina, que son aminocidos.
La ninhidrina-hidrato de tricetohidrileno- reacciona con los aminocidos en
medio cido (pH 3-4) y en caliente, produciendo amonaco, dixido de carbono
y un complejo de color prpura-azulado dicetohidrindileno - .Este compuesto
de color azul-prpura absorbe a una longitud de onda de 570nm, siendo la
cantidad de color proporcional a la cantidad de aminocidos presentes en la
muestra.
La mayora de los aminocidos reaccionan con la ninhidrina a temperatura
ambiente formando un complejo azul que adquiere una tonalidad prpura por el
calor. La determinacin de los aminocidos requiere una tonalidad prpura por
el calor. La determinacin de los aminocidos requiere la eliminacin previa de
sustancias como protenas, amoniaco y urea, que pueden reaccionar con el
reactivo, interfiriendo en la determinacin cuantitativa de los aminocidos
Mtodo de Turbidimetra
La turbidimetra es una tcnica analtica basada en la dispersin de la luz por
partculas en suspensin en el seno de una disolucin. Como consecuencia de
la interaccin entre la radiacin y las partculas, el sistema no se eleva a un
nivel energticamente excitado, sino que la radiacin incidente induce un dipolo
elctrico oscilante, que acta como una nueva fuente emisora de radiacin.
La intensidad de radiacin que se presenta en cualquier ngulo depende del
nmero de partculas, de su tamao y forma, de los ndices de refraccin
relativos de las partculas y del medio y de la longitud de onda de la radiacin
incidente.
%N =
2.807=
mol
g
x 50 ml x ( 1 ) x 0.014
L
mmol
x 100
W muestra de cereal g
W cereal=0.6234 g
7) Una muestra de leche desecada pesa exactamente 1g y se analiza por el
mtodo de Kjeldahl. El amoniaco se recoge en 50mL de HCl 0,122M y el
exceso de cido gasta 20,7mL de NaOH 0,145 M. Calcular el % de protenas.
(500.122 200.145)10.014
1
%N =
* 100
%N = 4.48%
%N =
%N =
mol
g
x 7.2 ml x ( 1 ) x 0.014
L
mmol
x 100
0.5 g
N =2.33856
Porcentaje de protenas en la muestra (Factor convencional=6.25):
Proteina=14.616
%N =
45.320.18210.014
1
* 100
% N= 11.55%
10) Cul ser el peso en gramos de muestra que se analizar para que, por la
tcnica de Kjeldahl, variante cido brico, el gasto de HCl 0.1M consumido
en la titulacin final sea igual al %de protenas totales de la muestra?
%N =
Si el
V gastado de HCl=%Protena :
%N =
W muestra =0.875 g
11) Una muestra impura de 0,25g de urea es analizada por la tcnica de
Kjeldahl. El gasto en la valoracin final fue de 44,2mL de HCl 0,35M.
Calcular el % de pureza de la muestra.
%N =
44.20.3510.014
0.25
* 100
%N = 86.63 %
% de impurezas: 13.37%
12) Se sabe que un embutido contiene 20.09 de protenas totales. Cul ser el
volumen de HCl 0.125M que se gastar en la valoracin final si se analiza
una muestra de 0.875 g por la tcnica de Kjeldahl?
Si el %Protenas=20.09:
Proteina=%N x 6.25
N =3.2144
Entonces:
%N =
3.2144=
mol
g
x V gastado de HCl x 1 x 0.014
L
mmol
x 100
0.875 g
V HCl =16.072 ml