UNIVERSIDAD AUTNOMA DE CD.

JUREZ
INSTITUTO DE CIENCIAS BIOMDICAS
ESCUELA DE MEDICINA

MANUAL DE LABORATORIO
FISIOLOGA GENERAL
MAESTROS:
I.B.E.B. EDENZER ARTURO LEYVA OSUNA
DRA. LOURDES AGUILAR
AUTORES:
DR. ALBERTO WECKMANN ORTEGA
DR. MIGUEL A. ROSALES SERRANO
M. en C. ANTONIO FLIX CALDERN
I.B.E.B. EDENZER LEYVA OSUNA

2006
PREFACIO

En esta tercera revisin, los autores han realizado en forma extensa las revisiones
y adiciones en casos necesarios del manual, continuando con el mismo formato los
objetivos seguirn siendo los mismos, en la prctica, se le presentara al estudiante de
medicina un manual de prcticas de laboratorio, necesario para conocimientos previos de
mtodos y procedimientos a realizar
El presente manual tiene la finalidad de presentar al estudiante, lo conocimientos
necesarios para efectuar cada una de las prcticas que realizar durante el semestre,
informndole los objetivos, metodologas, paso a paso, el material necesario para cada
una de las prcticas que debe realizar; durante el semestre: siendo necesario por parte del
alumno la presentacin de un protocolo de cada practica, con los resultados y
conclusiones obtenidos en cada una de ellas.
Esperando que este manual sea til, y que facilite la enseanza hacia el alumno,
deseamos para ellos un mayor aprovechamiento, y que tengan un mejor desempeo
dentro del laboratorio.
Nos queda desear el mximo beneficio y provecho del manual a todos los
estudiantes.

Atte.

ACADEMIA DE FISIOLOGA

INDICE
NOMBRE DE LA PRCTICA

Datos generales de la asignatura

2. Objetivos generales del curso
3. Introduccin
4. Evaluacin
5. Reglamento
6. Instrumentacin y manejo del material de laboratorio
7. Cristalera
8. Mtodo cientfico
9. Sistema de medicin y margen de error
10.
Comprobacin de las leyes de Gay Lussac y Graham
15
11.
Difusin
17
12.
Fotocolormetria
13.
Diluciones
30
14.
Osmosis
32
15.
Preparacin de soluciones
34
16.
Potenciometra
36
17.
Potencial de accin
38
1.

PGINA

4
4
5
5
5
7
9
11
14

18

DATOS GENERALES DE LA ASIGNATURA

NOMBRE:
COORDINADOR:
CARACTER:
TIPO:
UBICACIN:
REA:
DURACIN:
NUMERO DE HORAS:

LABORATORIO DE FISIOLOGA GENERAL.

ACADEMIA DE FISIOLOGA.
OBLIGATORIO.
TERICO - PRCTICO.
PRIMER SEMESTRE.
FISIOLOGA.
SEMESTRAL.
48 HORAS.
TEORIA: 16 HORAS (SESIONES DE 1 HORASEMANA)
PRACTICA: 32 HORAS (SESIONES DE 2 HORASSEMANA)
CRDITOS:
13
CLAVE:
BAS00394
REQUISITOS ACADMICOS: Bachillerato de Biologa o nico

OBJETIVOS GENERALES PARA EL CURSO DEL LABORATORIO DE

FISIOLOGA GENERAL.
1.- El alumno corroborar los conocimientos adquiridos tericamente, por medio
de las prcticas y podr correlacionar por si mismo.
2.- Recorrer el camino para desarrollar la capacidad de observacin y de poder
fomentar su espritu crtico.
3.- Por medio del curso se pretende despertar en los alumnos la inclinacin hacia
la investigacin biomdica.
4.- Durante el curso se dirigir al alumno en la metodologa cientfica hasta lograr
su capacitacin para resolver problemas de anlisis clnicos.

INTRODUCCIN.
El desarrollo del curso se llevar a cabo en sesiones de 2 horas a la semana, donde
el alumno realizara la prctica con direccin e indicacin del maestro.
El alumno aplicar los conocimientos tomados en teora, he ira tomando notas, de
observaciones, resultados obtenidos de la prctica, para recabarlos en su cuaderno de
trabajo en forma individual, y poder realizar su protocolo en forma adecuada.
En esta sesin de prcticas, se formarn equipos de trabajo para facilitar su
desarrollo.
Posteriormente tendr otra sesin de 1 hora a la semana que se destinar para
discusin de los resultados obtenidos en la prctica.
El cual deben de estar
adecuadamente tabulados y elaboradas matemticamente, contando con ilustraciones
representativas, grficas para discutir en conjunto las posibles implicaciones acadmicas.

EVALUACIN.
En cada sesin de laboratorio, se tomaran parmetros como:
1.- Participacin en la prctica de cada alumno y de que presente buena disciplina,
evalundosele de 0 a 2.
2.- En la discusin se tomar en cuanta la intervencin del alumno en el anlisis
de la prctica, y se evaluara de 0 a 6.
3.- El alumno tendr que presentar un reporte de prcticas, por medio de un
protocolo y este se evaluar de 0 a 2.
4.- El total de las evaluaciones nos da 10 puntos, que ser la calificacin mxima
obtenida por el alumno en una prctica.
5.- Se toma como calificacin mnima aprobatoria 7.
6.- Al fin del semestre, se sumaran los resultados del total de prcticas, obteniendo
el promedio de ellas, el cual equivaldr a la calificacin final de laboratorio,
correspondiendo en 30 % de la calificacin final del curso.

REGLAMENTO INTERNO DEL LABORATORIO DE FISIOLOGA

GENERAL.
1.- En el curso de laboratorio es obligatoria la asistencia.
2.- Se le permitir al alumno un retardo mximo de 10 minutos.
3.- Faltar a prctica, equivale a cero en toda la prctica.
4.- El acumular 3 faltas al laboratorio causa baja; y automticamente se reprueba
la materia.
5

5.- No se permitir al alumno, comer, fumar, durante su permanencia en el

laboratorio.
6.- Es obligacin entrar al laboratorio con bata blanca y manga larga.
7.- La evaluacin de laboratorio estar dada por el promedio de las calificaciones
que comprenden el desarrollo dentro de la prctica, discusin de los resultados y del
protocolo.
8.- La evaluacin del laboratorio cuenta en un 30 % ms en la calificacin final de
teora.
9.- El alumno que reprueba laboratorio automticamente reprobara teora.
10.- El protocolo se entregar el da de discusin de resultados y tendr
parmetros de acuerdo al modelo elegido que deber incluir lo siguiente:
A)
TITULO: Este estar incluido en la hoja frontal con las
caractersticas siguientes:
A: 1.- Universidad a la que pertenece.
A: 2.- Instituto al que pertenece.
A: 3.- Escuela a la que pertenece.
A: 4.- Laboratorio al que pertenece la prctica.
A: 5.- Nombre de la prctica.
A: 6.- Nombre del alumno y su matrcula.
A: 7.- Grupo al que pertenece.
A: 8.- Nombre del maestro de laboratorio.
A: 9.- Fecha del da de la prctica.
B)

OBJETIVO: Estar dado con la finalidad de la prctica y se

explica en laboratorio; debiendo contener (Donde, Cuando, Como, Por
que y Para que).

C)

INTRODUCCIN: Es un relato breve de los antecedentes que

sirven como base para la parte experimental de la prctica.

D)

MATERIAL: Se refiere al equipo y material que se utiliza en la

prctica.

E)

METODOLOGA: Se describen e ilustra, paso por paso la forma

de elaboracin de la prctica de tipo experimental.

F)

RESULTADOS: Se anota en su cuaderno de trabajo los resultados

obtenidos, para la elaboracin posterior de tablas, grficas, dibujos, etc.
(todos los cambios observados en la variables manejadas).

G)

CONCLUSIN: En est captulo se analizarn los cambios en las

variables manejadas durante la prctica, su sentido y se explicar en
base a datos bibliogrficos experimentales.

H)

BIBLIOGRAFA: Se anotarn las fuentes de consulta que se

utilizaron para el diseo de la prctica y para la interpretacin de sus
resultados (mnimo 3), que debe contener los siguientes datos: Nombre
del autor, titulo del libro, editorial, ao de edicin, pas, pginas
consultadas.

INSTRUMENTACIN Y MANEJO DEL MATERIAL DE

LABORATORIO.
OBJETIVO:
El alumno conocer el uso, manejo y funcionamiento de los aparatos e
instrumentos de un laboratorio.
INTRODUCCIN:
La tecnologa del laboratorio mdico es una profesin prctica, adems de realizar
lo mejor posible los distintos anlisis modernos del laboratorio, se debe recordar ante
todo los posibles accidentes o eventuales peligros y debemos conocer las medidas para
disminuir las probabilidades de lesiones y daos materiales. En un laboratorio se
utilizan reactivos venenosos y custicos que pueden originar vapores txicos,
quemaduras o escaldaduras.
APARATOS:
Los instrumentos empleados en este laboratorio son:
1.-FOTOCOLORMETRO: Es un aparato que utiliza un rayo de luz
monocrmica para medir la concentracin de soluciones coloridas, est formado por un
sistema ptico que suministra una banda estrecha, la cual incide en un filtro de color
definido, que al llegar a la celdilla se absorbe cierta cantidad de luz rastreada en la foto
celda que pasa la seal a un galvanmetro, e informando en pantalla su valor.
2.- BALANZA GRANATARA Y ANALTICA O ELCTRICA: La balanza
granatara posee en uno de sus extremos un platillo donde se coloca la substancia a pesar
y en el otro extremo se tiene una escala con pesas, las cuales son colocadas, sumando la
cantidad a pesar, teniendo mediciones de peso total de 500 gr. A diferencia de la balanza
analtica que tiene el mismo fundamento, pero es mas exacta, y se pueden hacer
mediciones menores de un gramo, y se utiliza cuando se requieren pesos con un margen
mnimo de error. Tiene la desventaja de que se tiene que calibrar cuidadosamente
motivo por lo que lo hace menos rpida y de tener un costo econmico muy elevado.
3.- CENTRIFUGA ANALTICA: Es un instrumento en el cual se aprovecha la
fuerza centrfuga para separar substancias, lquidos de distintas densidades o substancias
slidas de un lquido en que este suspendidas. Las centrfugas ms simples tienen un
recipiente vertical con agujeros (camisa), donde se introducen tubos de ensaye,
conteniendo las soluciones para centrifugar, ste aparato gira a gran velocidad, entre 1000

a 5000 rpm., las partculas mas pesadas son depositadas en el fondo del tubo. Existen
centrfugas manuales y elctricas entre las que se encuentran la centrfuga clnica, la ultra
centrfuga y la centrfuga para microhematocrto, que gira a una velocidad constante de
5000 rpm.
4.- BAO MARIA: Es un mtodo utilizado para calentar substancias que no
pueden ser calentadas directamente por el fuego, estas substancias son calentadas
indirectamente con agua caliente, hay baos muy simples que utilizan el fuego para
calentar su agua, otros son electrnicos, otros no utilizan agua sino que directamente usan
electricidad teniendo un termmetro para regular la temperatura, esto ltimo es el mas
fcil de controlar.
5.- POTENCIMETRO: Instrumento para medir la concentracin de iones
hidrgeno de la solucin ph, las celdas que se utilizan en la medicin del ph, estn
formadas por un electrodo indicador de ph y un electrodo de referencia.
Los
potencimetros que emplean electrodos de vidrio son elementos de lectura directa,
leyndose el ph de la solucin, en la parte donde se introduce el electrodo de vidrio, por
medio de una escala con unidades de ph, el cual se grada con valores de ph de
referencia, suministrado por soluciones con valor estndar. Se debe tener en cuenta que:
El instrumento mide actividades de in hidrgeno.
La membrana de vidrio se debe mantener limpia.
6.- FISIOGRAFO:
Instrumento de registro el cual es diseado para
perfeccionar el registro grfico de una gran variedad de fenmenos fisiolgicos.
Transforma al fenmeno fisiolgico en una seal proporcional.
El fisigrafo consta de un transductor el cual nos conducir la informacin y la
transformara en seal elctrica, pasando esta a un pre-amplificador.
Se cuenta con cuatro canales de recepcin, cada uno con un pre-amplificador y un
amplificador de informacin. Pasando posteriormente esta informacin a las plumillas
para su registro en el papel donde ser impreso para su lectura posterior.
Adems se cuenta con un canal para producir estmulos y poder amplificarlos.
Tiene adems una pantalla de cristal que sirve para proyectar los registros que se
obtienen en material transparente, en lugar de papel.
7.- SISTEMA ANLOGO DIGITAL.
Este instrumento tiene las mismas
funciones que el fisigrafo, con diferencia de que por ser digitalizado se pueden hacer
cambios una vez tomados los registros, y en esta forma podemos efectuar cambios a
diferentes programas de computacin para permitir una fcil interpretacin de los
resultados obtenidos.
Con este programa computarizado, se tiene una mejor informacin de los
registros, los cuales pueden ser amplificados, tomar espacios determinados para su
interpretacin y obtener mejores resultados en el estudio realizado.

CRISTALERA
OBJETIVO:
El alumno conocer y aprender a utilizar los instrumentos de cristalera de un
laboratorio.
INTRODUCCIN:
Los instrumentos de cristalera de un laboratorio, tienen una infinidad de usos, por
lo que el alumno aprender a manejarlos en forma correcta para cada una de sus
prcticas, debiendo tener el cuidado requerido para evitar daos en el material,
(romperlo).
MATERIAL:
1.- MATRAZ.- Estos pueden ser de diferentes tipos y con variacin de
volmenes, se pueden utilizar para transporte, calentar y mezclar soluciones, y los hay
como: M. Erlenmeyer, M. de baln de fondo plano, M. Aforado y M. de baln
2.- BURETA.- Es un tubo largo, calibrado, que posee una llave de paso en su
extremo inferior, y es de varios volmenes.
3.- PIPETAS.- Son tubos, los cuales se encuentran graduados en diferentes
volmenes y graduaciones. Se tienen dos tipos, terminales y subterminales.
Al utilizar pipetas debemos de tener cuidado, debemos identificarlas
adecuadamente y no cometer errores de medicin.
La pipeta es uno de los instrumentos ms utilizados en el laboratorio, proporciona
medidas exactas y nos sirve para medir pequeos volmenes de soluciones. Formada de
un tubo largo el cul termina en punta, se utiliza para absorber soluciones. Para llenarlas
se introduce la punta inferior en la solucin y por la parte superior se absorbe el lquido
con cuidado hasta la mxima graduacin de la pipeta, se tapa el orificio superior con el
dedo ndice, para impedir que el lquido salga, cuando se requiere verter el lquido se
destapa suavemente el orificio superior.
Las pipetas por lo general en su extremo superior tienen inscrito dos nmeros, el
primero indica la capacidad de la pipeta, el segundo indica las divisiones de la pipeta,
entre marca y marca, y se pueden estar expresados en fraccin o nmero decimal, hay
indicacin de la temperatura a la cul debemos manejar los lquidos para obtener una
lectura precisa.

PIPETA TERMINALES.- Son pipetas graduadas cuya calibracin termina en

la punta a pesar de que no podemos ver las ultimas marcas. Debe de soplarse el
contenido para completar la medida exacta al momento de verter la solucin.
PIPETA SUBTERMINAL.- Son pipetas graduadas cuya calibracin termina
antes de la punta, observndose la ltima medicin. Debiendo tener cuidado, con el
lquido que se encuentra en la marca final y la punta, ya que este lquido no tiene
medicin por lo tanto se debe desechar, nunca se debe soplar.
PIPETA VOLUMETRICA.- Son pipetas graduadas de presicin, cuentan con
un bulbo entre la boca y la punta el cul disminuye la superficie por unidad de volumen,
disminuyendo el posible error debido a la pelcula de agua en las paredes, adems
aumenta la presin de vaciamiento. Solo tiene una graduacin y solo se puede usar para
medir la cantidad para la cual esta calibrada.
PIPETA PASTEUR.- Es un tubo con una pequea prolongacin en uno de sus
extremos, no esta graduada y sirve para recoger sobrenadante y algn sedimento.
PIPETA SAHLI.- Esta pipeta se utiliza para efectuar mediciones volumtricas
pequeas en microlitros o lamdas.
PIPETA DE THOMAS.Estas son micro pipetas, para la medicin de
volmenes muy pequeos, de 0.01 (1/1000). Para evitar un error en la lectura del
volumen, el ojo del observador debe estar al mismo nivel del menisco cncavo que se
forma cuando el lquido moja las paredes de la pipeta, adems debe escogerse la pipeta
adecuada al volumen que se desea medir.
4.- PROBETA.- Es un cilindro graduado, que puede contener volmenes de 50,
100. 500 y 1000 ml., posee una base en su extremo inferior. Se pueden hacer mediciones
exactas.
5.- EMBUDO DE VIDRIO.- Es un embudo de diferentes tamaos, con extremo
inferior delgado y longitud variable, utilizado para verter soluciones en recipientes de
boca pequea, para evitar se derramen.
6.- TUBO DE ENSAYE.- Son recipiente cilndrico con fondo ovalado y de
diferentes volmenes no graduados, utilizados para calentar, transportar, centrifugar,
diluir soluciones y substancias.
7.- FRASCO PARA REACTIVOS.- Son frascos de un color mbar, para evitar
la luz en forma directa sobre las soluciones, que pueden inactivar el producto, adems son
tiles para el almacenamiento.
8.- TUBO CAPILAR.- Son tubos de vidrio de diferentes dimetros y se utiliza
para conexiones, en diferentes medios del estado de la materia.

10

9.- CUBA HIDRONEUMTICA.- La cuba es de vidrio y se utiliza para

contener lquidos a temperaturas de bao mara, con la finalidad de poder observar
cambios a travs de sus paredes.
10.- TERMMETRO.- El termmetro se utiliza para la toma de la temperatura
de substancias lquidas. Es de mercurio, con particularidad de no ser necesario el
agitarlo para sus lecturas siguientes, ya que desciende, o aumenta segn la temperatura a
la que se encuentren las soluciones.
MTODO CIENTFICO.
OBJETIVO.
El alumno debe de aprender a observar y ordenar los fenmenos que ocurran en la
naturaleza, para obtener un conocimiento cientfico, y que tenga la capacidad de reunir
requisitos que lo lleven a diferenciarlo del conocimiento comn, y de comprobar la ley de
Boyle Mariotte.
INTRODUCCION.
Segn Rosenblueth.- La ciencia es el conocimiento ordenado de los fenmenos
naturales y de sus relaciones mutuas. Para que un conocimiento nuevo pueda ser
admitido dentro del conocimiento cientfico debe reunir una serie de requisitos que lo
diferencien del conocimiento comn.
Para llegar al conocimiento cientfico de un fenmeno hay que recorrer todas las
disciplinas conocidas como Ciclo de la Ciencia. Iniciando con:
1.- El inters de una persona por un tema o rea del conocimiento, que lo lleva a
buscar informacin disponible.
2.- Recopilacin de informacin, que le permita observar los fenmenos que
ocurren en la naturaleza con una visin diferente.
3.- Observacin de un fenmeno, visin diferente o curiosidad intelectual que
pregunte sobre las causas, caractersticas o efectos de ese fenmeno.
4.- Planteamiento del problema, el cual se necesita ser resuelto. La habilidad
cientfica para plantear los problemas, es en relacin directa con su productividad. Para
dar respuesta a preguntas que se han planeado en el problema. El hombre de ciencia se
ofrece a si mismo varias explicaciones provisionales, de la misma manera que un mdico
se ofrece una o varias posibilidades de diagnosticar ante un cuadro clnico.
5.- Hiptesis, es la explicacin provisional. La trascendencia y universalidad de
los conocimientos generados por una investigacin, dependen de la originalidad en
planteamiento de las hiptesis.
De la misma manera un mdico no ofrece un diagnstico definitivo, sin antes
haber descartado las otras posibilidades diagnsticas mediante la experimentacin, ya sea
utilizando procedimientos clnicos, de laboratorio o de gabinete, el cientfico no puede
ofrecer un conocimiento originado en una hiptesis, si sta no ha sido sometida a
comprobacin y contrastacin mediante la experimentacin.
Antes de disear un experimento es necesario que el investigador defina
claramente los objetivos de la investigacin.

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6.- Objetivos generales y particulares. Estos pueden definirse como una meta
final hacia la cual estn orientados el inters y los esfuerzos del investigador.
7.- Diseo experimental, este debe permitir someter a prueba la hiptesis
planteada en la investigacin, el cual debe estar orientada a alcanzar los objetivos que
fueron propuestos.
8.- Realizacin de los experimentos permitir observar una serie de cambios
medibles llamados datos, el cual deben ser ordenados y analizados.
9.- Resultados es la ordenacin y anlisis de los datos, los cuales por si solos no
constituyen un nuevo conocimiento cientfico.
10.- Interpretacin de resultados, esto da formacin de idea cientfica y es
aceptada como conocimiento cientfico.
11.- Conclusiones, estas estn dadas por resultados comprobados de una manera
cientfica, donde se manifiestan todos los pasos observados y obtencin final del tema.
12.- Publicacin. Esto nos da generacin de conocimiento. El ciclo de la
ciencia no queda completo si los nuevos conocimientos no son hechos pblicos a travs
de los canales de divulgacin, analizados y discutidos por otros cientficos
independientes.
El ciclo inicia de nuevo, ya que se plantean nuevas interrogantes a partir de los
conocimientos generados.
MATERIAL.
1. Cuba hidroneumtica.
2. Agua.
3. Bascula granatara.
4. Tabletas de Alka-Seltzer.
5. Embudo de vidrio.
6. Probeta de 500 ml.
7. Cronmetro.
METODOLOGA.
Primeramente se tomara la Cuba hidroneumtica y le verteremos agua hasta los
de su volumen, se toma la temperatura del agua y se registra en el cuaderno.
Se toman dos alka-seltzer y se pesaran por separado en la bscula granatara; una
tableta completa, media tableta y un cuarto de tableta respectivamente, anotando los
pesos en el cuaderno.
El embudo se coloca dentro de la cuba hidroneumtica en forma invertida y en el
centro, tomamos la probeta, la llenamos de agua, aproximadamente 500 ml., tapamos con
la palma de la mano el orifico superior y la invertimos para impedir se derrame el agua,
posteriormente la colocamos encima del embudo, procurando que el agua de la probeta
no se derrame, la sostenemos para que no se incline y podamos tomar la lectura del nivel
del agua en forma correcta, anotndola en el cuaderno como volumen inicial, se toma la
temperatura con el termmetro y se anota.
Entre dos personas procedern a efectuar la prctica, una de ellas se encargara del
cronmetro para tomar el tiempo que tarda la tableta completa o sus divisiones en
disolverse en el agua. La otra persona con una mano sostendr la probeta sin levantarla,
inclinando la probeta y el embudo para que se levante una parte, por donde con la otra

12

mano introducir la tableta de alka-seltzer, en forma rpida. En el momento en que la

tableta o sus divisiones estn dentro del embudo, inicia el conteo del tiempo, el cual se
suspende al terminar de disolverse, se anota el tiempo. Inmediatamente se toma la
lectura del nivel de agua y se anota, como volumen desalojado. Se realiza mismo
procedimiento para el resto de las divisiones de tableta.
Al finalizar cada uno de los experimentos con las tabletas de alka-seltzer, se debe
de lavar todo el material utilizado, para evitar residuos.
Estos pasos se efectan con tableta completa, media y un cuarto, a temperatura
ambiente, y con temperatura de 20 grados C. mas de la ambiental.
RESULTADOS.
El alumno tendr que anotar los siguientes datos:
Peso
Temp. Tiempo Vol. Inicial Vol. Desalojado
Tableta completa
Media tableta
Cuarta parte de tableta
Se debern de elaborar tablas estadsticas con los resultados obtenidos.
Se realizaran grficas.
Peso contra temperatura.
Peso contra tiempo.
Peso contra volumen desalojado.
CONCLUCIONES:
El alumno anotar las relaciones existentes entre cada una de las variables,
siguiendo los principios termodinmicos.
BIBLIOGRAFIA:
CUESTIONARIO:
1.- Mencione que es una tabla estadstica.
2.- Mencione que es una grfica.
3.- Mencione los componentes de una tabla.
4.- Mencione las caractersticas esenciales de una grfica.
5.- Mencione que es mtodo.
6.- Comparacin de resultados de los dems grupos.

13

SISTEMA DE MEDICIN Y MARGEN DE ERROR

OBJETIVO:
El alumno aprender a efectuar mediciones de soluciones por medio de
instrumentos para tal fin, adems adquirir la pericia de identificar errores efectuados
durante la prctica.
Conocer e identificar los materiales de medicin exacta e inexacta que se
utilizan en el laboratorio.
MATERIAL:
Se utilizaran materiales de fabricacin americana y mexicana para comparar
margen de error posible.
1. Matraz de Erlen Mayer fondo plano (250, 500 ml.)
2. Probeta (250, 500, 1000 ml.)
3. Pipeta (1, 2, 5, 10 ml.)
4. Vaso deprecipitado.
5. Agua.
METODOLOGIA:
El alumno primeramente identificar el instrumental que utilizar.
Un matraz de erlen mayer lo llenar de agua el cual solo ser para su transporte,
de este lo pasar a un matraz de erlen mayer para efectuar su primera medicin, (el
instructor indicara el volumen), y para su comprobacin lo verter despus en una
probeta. Anotando ambas mediciones en el cuaderno.
Se comprobar la medicin de las probetas mexicanas y americanas y se obtendr
el margen de error.
Este ejercicio se repetir en 10 ocasiones por equipo, el cul los integrantes del
equipo efectuaran mediciones rotatorias, que tendrn que ir anotando para su anlisis
posterior.
NOTA: Recordar que el matraz erlen mayer pertenece al sistema de medicin inexacta y
que la probeta es de medicin exacta.
La medicin en soluciones debe efectuarse en donde los ojos del observador
quedan a nivel de la lnea de medicin a efectuar (muesca), y que la muesca debe quedar
por encima de la lnea de medicin exacta.
RESULTADOS:

14

Anotar en el cuaderno las mediciones efectuadas.

Efectuar una tabla y grficas con los resultados obtenidos con las mediciones.
Calcular el margen de error efectuado en la prctica.
CONCLUCIONES:
El alumno debe de haber aprendido a efectuar correctamente las mediciones en
los distintos tipos de medicin, y de poder identificar los errores posibles.
BIBLIOGRAFIA:

COMPROBACIN DE LAS LEYES DE GAY LUSSAC Y GRAHAM.

OBJETIVO:
El alumno conoce y comprueba el comportamiento de los gases y las leyes de
Graham y Gay Lussac.
INTRODUCCION:
La difusin de los gases obedece a las leyes generales en base a sus propiedades.
En el movimiento de los gases intervienen los siguientes parmetros: densidad,
peso molecular, gradiente de concentracin, tiempo, rea de superficie y distancia.
La difusin es un elemento puramente fsico; a nivel alveolar es un fenmeno ms
complejo donde intervienen otros factores como la absorcin de oxgeno por la
hemoglobina, la absorcin de los hidrogeniones, la formacin de HCO3, etc.
La ley de Gay Lussac nos indica que cuando el volumen de un gas es constante ,la
relacin del aumento de la temperatura con un aumento de la presion del gas, o la
disminucin de ambos es (directamente proporcional) (Temperatura 0=-273.15 grados
absolutos).
La ley de Graham nos dice que la velocidad de difusin es inversamente
proporcional a la raz cuadrada de la densidad del gas. S la densidad es directamente
proporcional al peso del gas (molcular).
MATERIAL:
1. Matraz de Erlen Meyer.
2. Tubo de vidrio.
3. Tubo de wastergren.
4. HCL al 37 %.
5. NH3 concentrado.
6. Estufa de placa.
7. Termmetro.
8. Pinzas universales.
9. Soporte universal.
10. Pipeta pasteur. o Goteros
11. Cronometro.
12. Regla para medir.
13. Algodn.
14. Tubo de ensaye.
15. Tapon de hule.

15

16.

Vaso deprecipitado

METODOLOGIA:
Demostracin de la ley de Graham.
A un tubo de vidrio de 50 cm. De longitud aproximadamente se le colocan en los
extremos algodn, con un soporte y unas pinzas universales lo sujetamos en forma
horizontal.
NOTA Las personas que manejaran soluciones no deben de invertir las pipetas
pasteur, ya que pueden producir quemaduras en la piel, si quedaron soluciones en las
pipetas deben de regresar el sobrante a su respectivo frasco y cirrelo perfectamente. En
caso de derrame de soluciones en la mesa de trabajo, lmpielo cuidadosamente con una
magitel hmeda. Si la solucin derramada toca la piel, lvese con abundante agua.
Dos personas toman cada una, una pipeta pasteur, llenndola menos de la mitad
con HCL y NH3 respectivamente. En forma simultnea cada una de las personas
agregara 3 gotas de la solucin en los extremos donde se encuentran los tapones de
algodn. Al mismo tiempo una tercera persona tomar el tiempo, estando muy pendiente
al momento en que aparezca un anillo blanquecino que es la reaccin de los gases,
deteniendo el cronometro en ese momento. Se tomaran mediciones desde el anillo a los
extremos. Estos datos deben de anotarse en el cuaderno para posteriormente efectuar los
problemas.
Demostracin de la ley de Gay Lussac.
Utilizando un tubo graduado en mm. (tubo de wastergreen) con mercurio (agua
coloreada) como indicador, se sujeta con pinzas universales, a un soporte universal en
posicin vertical, en su extremo inferior se le coloca un tubo de ensaye con un tapn de
hule en su extremo.
Un vaso deprecipitado contiene agua a temperatura ambiente a un nivel
determinado previamente, colocar el termmetro paralelamente, donde ser sumergido el
tubo de ensaye y el de wastergreen.
Una vez colocado el dispositivo anote el volumen inicial del tubo de westergreen.
Posteriormente se ira aumentando 5 grados centgrados la temperatura del agua en el
vaso deprecipitado, teniendo cuidado de no aumentar su nivel inicial, ni de verter agua
caliente cerca del tubo de ensaye.
Cada una de las lecturas efectuadas en los cambios de temperatura se anotaran en
el cuaderno, se efectuaran lecturas hasta que el mercurio este por derramarse del tubo de
wastergreen.
NOTA: Se repetir el experimento cuando un equipo por falta de precaucin, derrame del
tubo el mercurio. Hay que tener cuidado de que el mercurio no caiga al piso por ser
material toxico.
RESULTADOS:
Anote la velocidad de difusin de gases, utilizando la ley de Graham.
Indique si comprob la ley de Gay Lussac, y por qu.
CONCLUSION.

16

Deduzca los resultados estableciendo una relacin con temperatura, densidad,

peso molecular, incluyendo los posibles errores.
BIBIOLGRAFIA.
CUESTIONARIO.
1. Elabor una grfica de Presion y Temperatura utilizando papel milimtrico.
2. Interprete la grfica resultante.
3. Mencione 3 errores en la demostracin de la ley de Gay Lussac.
4. Que factores influyen en la velocidad de difusin de un gas a nivel alveolar.
5. Cual es el mecanismo mediante el cual se realiza el intercambio gaseoso.

DIFUSIN
OBJETIVO.
El alumno aplicar los conocimientos del mtodo cientfico y de medicin,
teniendo que observar y medir la distribucin de las substancias en el proceso de la
prctica.
INTRODUCCIN.
El proceso de difusin consiste en el paso de substancias, de un medio de mayor
concentracin a uno de menor concentracin.
MATERIAL.
Caja de petri.
Agar bacteriolgico a concentraciones de 1.2 % y de 1.8 %.
Ac. clorhdrico a concentraciones de 0.05 y de 0.1 Molar.
Permanganato de potasio a concentraciones de 0.05 y de 0.1 Molar.
Goteros.
Regla para medir o papel milimtrico.
Reloj.
METODOLOGA.
Se identifican las cajas de petri con las concentraciones especficas, por medio de
un nmero 1 al agar que se encuentra a una concentracin de 1.2 %. y de un nmero 2 al
agar con concentracin de 1.8 %., y observ que en el agar se encuentran 4 orificios.
Se identifican las soluciones, y tenga a la mano un gotero para cada una de ellas,
con la precaucin de no mezclarlo con otra solucin.
Se toma en cada gotero una porcin de la solucin respectiva, y en forma conjunta
se llenarn los orificios en el agar hasta el ras de estos, teniendo precaucin de no
derramar solucin sobre el agar. Una vez concluido este paso se procede a tomar el
tiempo, y se tomaran mediciones cada 5 minutos, desde el extremo central de los orificios
hacia el centro de caja de petri; midiendo el desplazamiento de la soluciones en el agar
correspondiente, hasta un nmero de 10 para cada concentracin, y anotando cada
medicin en el cuaderno,
Se deber tener cuidado y estar vigilando que los orificios se encuentren siempre
llenos de solucin, con la finalidad de que la difusin se lleve a cabo en forma correcta.

17

RESULTADOS.
Se anotaran en forma de tabla para cada una de las concentraciones de agar.
Se efectuaran grficas para cada una de las tablas.
CONCLUCIONES.
Explicar cada uno de los resultados obtenidos, en comparacin con los esperados.
BIBLIOGRAFIA.

FOTOCOLORMETRO:
La concentracin de una sustancia en solucin es normalmente determinada por una
reaccin de color. El principio general es que a mayor sea la concentracin, mayor ser la
intensidad del color. Por ejemplo en el anlisis de la glucosa, la solucin es tratada para
producir un color azul.
Entre ms grande sea la concentracin de glucosa, de mas intensidad ser el color azul.
La profundidad del color es entonces medida en un instrumento llamado colormetro.
En general hay dos tipos de colormetros: visuales y fotoelctricos. Estos instrumentos
son considerados en este capitulo.
COLORMETROS VISUALES:
El colormetro visual DUBOSCQ, es uno de los instrumentos ms refinados dentro de los
colormetros visuales. Consiste de un sistema ptico y una fuente de luz. La vista a travs
del ocular presenta un campo de luz circular dividido a la mitad. El objetivo de esto es
ajustar la taza de la sustancia desconocida hasta igualar el color con la muestra de
referencia. La fuente de error con este mtodo depende de la capacidad visual del tcnico.
Algn tcnico podr reproducir el mismo resultado pero es difcil para diferentes
personas igualar los mismos colores. Con el color azul producido en la prueba de la
glucosa el tcnico vera solo el color azul por ser este el color predominante, por lo tanto,
estndares similares a la concentracin desconocida debern trabajarse con cada grupo de
anlisis.
CLCULOS CON COLORMETROS VISUALES.
Como se vio antes, la profundidad de color de la solucin desconocida es comparada con
la profundidad de color de la solucin estndar. Esta comparacin nos da una relacin de
su referencia, por ejemplo, la solucin estndar se ajusta siempre a 20. Supngase que la
lectura de la solucin desconocida es 16 entonces la relacin ser 20/16. Otro ejemplo, la
estndar es ajustada a 20 y la lectura de la desconocida es de 22, por lo tanto la relacin
es de 20/22. Cuando la relacin es multiplicada por la concentracin del estndar
obtendremos la concentracin de la desconocida.
Lectura estndar
Lectura desconocida

X
X

Concentracin estndar.
Concentracin desconocida.

18

Para ilustrar, supngase que estamos determinando una concentracin de glucosa y

tenemos los siguientes datos:
La lectura estndar es 20.
La lectura de la desconocida es 16.
La concentracin del estndar representa una concentracin de glucosa de 100 mg/ 100
ml de sangre.
La concentracin de glucosa desconocida ser: 20/16 X 100 = 125mg/100 ml de sangre.
Esta es otra forma de comprender los clculos anteriores.
La ley de Beer puede ser enunciada como sigue: la densidad ptica (D.O. o D) de una
solucin coloreada es igual al producto de la concentracin ( C ) de la sustancia que
produce el color, por la profundidad ( L ) de solucin a travs de la cual la luz viaja, por
una constante (K), por lo tanto tenemos:
D = C X L X K.
La densidad ptica es proporcional a la concentracin de la solucin que es medida. Si el
color azul aumenta, entonces tambin la cantidad de color y tambin la densidad ptica.
Igualando los colores en el campo circular iluminando, la densidad ptica desconocida y
la densidad ptica de la estndar sern iguales.
Siendo K igual en ambas ecuaciones tambin se cancelan quedando lo siguiente:
C X L = C X L
C X L = C
o
100 X 20 = 125 mg/100ml. De sangre
16
COLORMETROS FOTOELCTRICOS.
En esta seccin se cubre el principio de operacin de los colormetros fotoelctricos as
como instrucciones en el uso de alguno de los instrumentos ms populares.
PRINCIPIO DE OPERACIN.
Para determinar la concentracin de una sustancia en solucin el tcnico toma dos pasos
principales:
1. Trata la solucin para producir un color. La concentracin es relativa al color,
normalmente entre mayor es la concentracin ms profundo ser el color.
2. Determina la profundidad del color haciendo pasar la luz a travs de la solucin, a
mayor profundidad de color menor ser la luz transmitida a travs de la solucin (nota 1).
Con los pasos anteriores, el tcnico ha creado una relacin entre 3 factores; la
concentracin de la sustancia en solucin, la profundidad del color producido y la
cantidad de luz transmitida a travs de la solucin.
Esta cadena de relaciones es la clave para determinar la concentracin de la sustancia en
la solucin.
Si empezamos por el final de la cadena y vamos hacia el principio veremos que la
cantidad de luz transmitida es proporcional a la profundidad del color el cual es a su vez
proporcional a la concentracin de la sustancia. Por lo tanto despus de haber tratado la

19

solucin para obtener color debemos encontrar la cantidad de luz transmitida a travs de
la solucin. Esta cantidad de luz transmitida se mide por medio del colormetro
fotoelctrico.
Un colormetro que use un vidrio de color o un filtro de gelatina para obtener una cierta
longitud de onda es llamado fotmetro de filtro. l nmero de filtro indica la longitud de
onda a su transmitanca optima. Por ejemplo, un filtro # 40 transmite luz en el rango 380
a 430 milimicras con su transmitanca ptima en 400 milimicras. La tabla #15 nos da una
longitud de onda de varios filtros. En el manual Klett-Summerson se hace la sugerencia
para escoger el filtro mas apropiado para algn procedimiento cuando se desconoce el
filtro que hay que usar. Utilice la tabla #15 para escoger un filtro de acuerdo al color de la
solucin que se va a leer. Preprense varias concentraciones conocidas de la solucin y si
la lectura mas alta no es mayor de 400 o 500 en la escala del colormetro entonces el
filtro es correcto. En este caso cuando las concentraciones y las lecturas son planteadas
en una grafica regular (lineal) la grafica deber mostrar una lnea recta.
(tabla #15)
NOTA 1: La relacin entre la profundidad de color y la luz transmitida permanece
verdadera nicamente dentro de los lmites de la ley Bouguer-Beer que se expresa en la
siguiente ecuacin:
C = - log de I
K
I
Donde C es la concentracin de la sustancia coloreada en solucin I es la intensidad de la
luz enfocada en la solucin, I es la cantidad de luz que logra pasar a travs y K es una
constante de absorcin caracterstica de la sustancia. En efecto, la ley dice que la relacin
entre la profundidad del calor y la luz transmitida es valida solo dentro de ciertos limites.
Por ejemplo, si la solucin es extremadamente plida o extremadamente oscura, la
cantidad de luz transmitida no ser una indicacin verdadera de la profundidad del color.
El tcnico sin embargo no debe preocuparse por esto, es solo un problema que enfrenta
cualquier qumico clnico cuando conduce una prueba de laboratorio.
Las lecturas Klett-Summerson son proporcionales a la densidad ptica en vez de un
porcentaje de la transmitanca (%T).
Los fotmetros pueden usar una o dos foto celdas: los instrumentos de una foto celda
deben tener un regulador de voltaje para minimizar las fluctuaciones de voltaje o
corriente de lnea. Porque adems de que el instrumento depende de una fuente de luz
estable, la luz que llega a la foto celda no esta solo en funcin de la solucin que la luz
atraviesa sino tambin de la intensidad de la fuente de luz (Fig. 23).
Instrumentos de doble celda no son tan afectados por las fluctuaciones en la corriente
porque debido a que sus celdas se balancean antes de tomar las lecturas fotomtricas, ya
sea con agua o con una muestra blanca neutra. Cuando la muestra o solucin desconocida
se coloca en el camino de la luz, las foto celdas s desequilibran elctricamente, desvan
la aguja del galvanmetro. Ajustando la aguja de nuevo a 0, las celdas regresan a su
balance. La diferencia de potencial entre la foto celdas permanece constante a pesar de
las variaciones en el voltaje de alimentacin

20

Los espectrofotmetros tienen un prisma o una rejilla bifractora para dividir la luz en
bandas espectrales de diferentes longitudes de onda.
Por medio de una exacta medicin de la luz espectral transmitida a travs de la muestra,
la cantidad de la sustancia desconocida en ella puede ser cuantificada
Las ventajas de un espectrofotmetro se aprecian cuando consideramos que todas las
longitudes de onda se pueden obtener en este tipo de instrumentos, mientras que en los
colormetros las longitudes de onda estn limitadas a los filtros construidos para estos
instrumentos.
En algunos anlisis la longitud de onda se escoge no tanto para aumentar la sensitividad
del aparato sino para eliminar algunas interferencias.
Con los colormetros no siempre se tiene el filtro que se necesita. Algunos
espectrofotmetros incluso pueden ser usados para anlisis con luz infrarroja o
ultravioleta. Esto es posible por el uso de foto tubos adecuados en conjuncin con el
prisma. Es tambin generalmente considerado que los espectrofotmetros dan una mejor
calidad de luz monocromtica que la que se obtiene con los filtros. El costo de un
electrofotmetro es normalmente ms alto que el de un colormetro y los de tipo con
prisma son aun ms caros que los que usan rejilla bifractora.
CALIBRACIN DEL INSTRUMENTO.
Aun y cuando muchos fabricantes incluyen un certificado de calibracin con el
instrumento, una pieza nueva de equipo debe ser calibrada en el laboratorio. No importa
que bien protegido para transportarse haya sido el instrumento este sufre abuso suficiente
para demandar una recalibracin. La ecuacin bsica para calibrar un instrumento es:
D.O.
=
K
x
C
Se hace una serie de corridas estndar a diferentes concentraciones para determinar la
densidad ptica (D.O.). El factor K puede ser calculado dividiendo la densidad ptica
entre la concentracin (porcentaje en mg) de las muestras estndar. El factor K es una
constante para un procedimiento particular hecho de una manera particular. Si K es
conocida y la densidad ptica es medida entonces la concentracin de la solucin
desconocida puede calcularse:
K = D.O o mg% = D.O
Mg%
K
Ejemplo:
50 mg % de azcar nos lee 71% T
71% T es igual a una D.O. de 0.148%
Divida 0.148 entre los 50 mg% nos da un factor K de 0.00298.
(Refirase a la tabla 19 para convertir el porcentaje de T a D.O.).
Para la serie de estndar y sus clculos de factor K hgase una hoja de trabajo similar
al ejemplo:
(Hoja de trabajo de pagina 72).

21

Los trminos % de T y D.O. son usados sin un verdadero conocimiento de lo que

verdaderamente significa. Otros trminos usados en fotocolorimetra son tambin usados
con este semientendimiento.
DEFINICIONES Y FORMULAS USADAS EN COLORIMETRA.
ABSORBENCIA.
Es la cantidad de luz que es absorbida por una solucin y expresada como densidad
ptica, esto es el logaritmo negativo del porcentaje de transmitanca.
D.O. = -log T.
FLUORESCENCIA.
Es el evento de absorber luz en una longitud de onda y radiar parte de esa luz en otra
longitud de onda.
FRECUENCA.
Vibraciones por segundo (V).
LINEAL.
Relativo a una lnea recta o a una dimensin de longitud. Este trmino se usa tambin
para describir papel para graficar.
LUZ MONOCROMTICA.
Luz en un rango angosto de longitud de onda.
MONOCROMETRO.
Aparato para producir luz monocromtica.
NEFELOMETRIA.
Medida cuantitativa de sustancia en suspensin por medio de la difusin de la luz o la
determinacin del grado de turbidez de una solucin.
DENSIDAD PTICA.
Es lo mismo que absorbencia. Al aumentar la concentracin de una solucin coloreada, la
densidad ptica tambin aumenta en rangos de valor de 0 a 2.0000.
FOTMETRO.
Instrumento usado para medir la capacidad de transmisin de luz de una solucin.
RELACIONES FOTOMTRICAS.
Las leyes Beer-Lambert que muestran los dos principios ms importantes de la
fonometra.
LEY DE BEER (LEY DE ABSORCIN). La absorcin de luz por una solucin
directamente proporcional a
la concentracin del soluto. El principio de esta ley es
nicamente aplicable cuando se emplea luz monocromtica.

22

LEY DE LAMBERT. La absorcin de luz es independiente a la intensidad de la

energa radiante que pasa por la solucin que contiene el soluto. Al pasar la luz por la
solucin esta es sometida a una reduccin logartmica de su intensidad al aumentar la
concentracin de la solucin.

FOTOMETRA.
Es la medida de la capacidad para transmitir luz de una solucin que nos permite terminar
la concentracin de materia absorbente de luz presente en la solucin.
RELACIN.
A mayor frecuencia menor longitud de onda.
ESPECTRMETRO.
Aparato para producir luz de longitudes de onda selectivas.
ELECTROFOTMETRO.
Fotmetro que permite la seleccin de longitudes de onda por medio de un prisma o una
rejilla bifractora en vez de un filtro.
TRANSMITANCA O TRANSMISIN (% de T).
Es la relacin de luz que pasa por una solucin coloreada comparada con la relacin de
luz que pasa por una solucin de agua sin color.
Puede ser expresada como el
porcentaje de la luz original.
El rango de valor es de 100 a 0.
TURBIDIMETRA.
Refirase a nefelometra. Medida cuantitativa de las sustancias en suspensin en una
solucin por medio de la difusin de la luz.
LONGITUD DE ONDA.
Distancia entre las crestas de ondas adyacentes expresadas en milimicras.
OPERACIN DE COLORMETROS FOTOELCTRICOS.
No tiene sentido aprender los procedimientos de operacin de toda la variedad de
colormetros que existe. El alumno deber notar el tipo de instrumento que esta siendo
usado en su escuela o laboratorio, para entonces estudiar cuidadosamente las
instrucciones para operar ese instrumento en particular.
Esta seccin contiene los procedimientos de operacin de 5 colormetros. Estas
instrucciones han sido tomadas literalmente de los respectivos manuales de operacin con
permiso especial concedido por los fabricantes.
Baush y Lomb Spectronic 20
Coleman Spectrophotometer.
Hellige CliniCol.

23

Leitz Photrometer.
Photovolt Lumetron.
COLORIMETRA.
Para uso calorimtrico, el control de longitud de onda (1) se gira hasta obtener la longitud
de onda deseada, expresada en milimicras que aparece en la escala (2). Esta longitud de
onda se encuentra refirindose al procedimiento que s esta usando. El instrumento se
activa girando el control del amplificador (3) en sentido de las manecillas del reloj.
Despus de algunos minutos de calentamiento este control podr ser ajustado para mover
la aguja del indicador a 0 en la escala del % de transmitanca (4) o (infinito) en la
escala de densidad ptica.
El tubo de ensayo o la taza conteniendo agua u otro solvente es entonces puesta en el
sujeta muestra (5).
Para mejores resultados, cuando se use tubo de ensayo se debern usar nicamente tubos
Baush y Lomb y tener cuidado de ajustar la lnea ndice en el tubo de oposicin a la lnea
de las sujeta muestras. Para evitar cualquier posible raspadura del tubo en el camino
ptico, insrtese el tubo en ngulo recto a la lnea del ndice en el sujeta tubo y una vez
que ya este asentado el tubo, alinese las marcas ndice o indicadoras. El control de luz
(6) deber ser girado hasta que la lectura sea 100 en la escala de porcentaje de
transmitanca a 0 en la escala de densidad ptica. La muestra desconocida puede ser
entonces puesta en lugar del neutro y el porcentaje de transmitanca o el valor de la
densidad ptica se podrn leer directamente de la escala.
Aun y cuando el medidor (4) esta protegido electrnicamente contra quemaduras, es
mejor girar el control de luz (6) en sentido contrario de las manecillas del reloj antes de
cambiar a otra longitud de onda en la cual la foto celda pudiera ser ms sensible.
Para la mayor precisin posible, el uso de tazas es recomendado aun cuando se obtienen
excelentes resultados con los tubos de ensayo Baush y Lomb en este instrumento.
ESPECTROFOTOMETRA.
El colormetro espectrmetro 20 es un excelente espectrofotmetro. El mtodo de
operacin es esencialmente el mismo que para el de colorimetra a excepcin por
supuesto que la longitud de onda se restablece para cada lectura y consecuentemente el
control de
Iluminacin tiene que ser reajustado. El control del amplificador se ajusta cuando no hay
sobre la foto celda y por lo tanto es independiente del ajuste de longitud de onda. Para
resultados arriba de 650 milimicras (la parte roja de la escala de longitud de onda) se usa
como accesorio un filtro rojo y una foto celda tipo IP40. Para insertar estas, refirase al
manual Baush y Lomb.
OPERACIN DEL COLEMAN SPECTROPHOTOMETER.

24

1. Seleccione y monte la escala adecuada en la ventana de galvanmetro.

2. Insrtese en el portatazas un adaptador para el tamao adecuado de la taza segn el
mtodo de anlisis contemplado.
3. Encindase el interruptor localizado en la parte de atrs del instrumento. El foco piloto
encender indicando que la lmpara excitadora esta encendida.
4. Verifique que el galvanmetro marque 0 y ajstese si es necesario.
5. Ajstese el selector de longitud de ondas segn las especificaciones para el mtodo
analtico contemplado.
6. Lmpiese y luego insrtese en el ngulo correcto en el portatazas una taza conteniendo
el suficiente volumen de la solucin de referencia.
7. Ajstese los botones para ajuste rudo y fino hasta que el ndice en el galvanmetro lea
el valor correcto para el mtodo analtico contemplado (normalmente esto ser 100% de
T s es una escala de transmitanca, o 0 s es una escala de densidad ptica.
Se deber usar una escala del 6 al 400).
8. Qutese la taza de referencia, LIMPIESE BIEN Y LUEGO INSERTE en el ngulo
correcto una taza similar conteniendo la solucin muestra.
9. Lase la posicin del ndice del galvanmetro en la misma escala que fue usada en el
ajuste inicial (punto 6).
10. Refirase en las tablas, curvas o lectura de escalas para la concentracin actual de la
solucin muestra como se indica en el mtodo analtico contemplado.
OPERACIN DEL HELLIGE CLINICOL
1. Asegrese que cuando el control de ajuste rudo esta en la posicin OFF la aguja
del porcentaje de transmisin este en 0. Para ajustar grese el tornillo negro en la
base de la cubierta del medidor. Golpese ligeramente la caja abajo del medidor
para reajustar si es necesario.
2. Conctese la clavija a una toma que suministre el voltaje y la frecuencia correctas
para el modelo que s este usando. Para detalles, vea la seccin de fuentes de
poder elctricas del manual Hellige. Los modelos #900D-90, 900D-66 y 900D-43
operan con 2 bateras secas internas y por lo tanto no tienen ni clavija ni se deben
conectar con una toma.
3. Grese el selector de filtros hasta que el valor del color del filtro especificado en la
prueba aparezca. Un clic indica el alineamiento adecuado entre el filtro y el
camino de la luz.
4. Llnese una celda de absorcin cuadrada #904 con el neutro preparada como se
especifico en el procedimiento de prueba. Asegrese que el nivel lquido alcanza
por lo menos las graduaciones en la celda. insrtese la celda en la apertura en la
parte superior del instrumento. LAS CELDAS DE ABSORCIN DEBERAN
SIEMPRE SER INSERTADAS CON UN LADO GLASEADO HACIA EL
FRENTE DEL APARATO DE TAL FORMA QUE LOS LADOS CLAROS
QUEDEN HACIA LA IZQUIERDA Y HACIA LA DERECHA.
5. Prepare la solucin de la concentracin desconocida de acuerdo con el
procedimiento de prueba y llnese una segunda celda 904 por lo menos hasta las
graduaciones con la muestra a tratarse.
6. Grese el control fino hasta que la flecha blanca indique directamente hacia arriba
en el selector de filtros.

25

7. Grese el control rudo en sentido de las manecillas del reloj hasta que la flecha
pase la palabra.
ON, continu girando hasta que la aguja se reflexione aproximadamente 98 o 99
en la escala. Entonces grese el control fino hasta que la aguja se reflexione
exactamente a 100. Golpese ligeramente el aparato y reajstese si es necesario.
8. Reemplcese la celda de absorcin cuadrada conteniendo l lquido neutro con la
celda que contiene la solucin con la concentracin desconocida. Golpese
ligeramente el aparato, lase y anote la deflexin que marca la aguja
9. Muvase el control rudo hacia la posicin OFF. El instrumento deber estar
prendido nicamente mientras se toman las lecturas.
10. Obtngase el valor de la solucin con la concentracin desconocida de la carta de
calibracin para esta prueba en particular como se sugiere en el procedimiento de
prueba.
IMPORTANTE. La limpieza es de gran importancia en todas las mediciones
fotoelctricas. Antes de poner cualquier celda de absorcin dentro del instrumento,
asegrese que sus superficies exteriores estn secas y completamente libres de manchas.
Suciedad de cualquier tipo, incluso marcas de dedos, absorber la luz y provocaran
lecturas incorrectas. No se deje secar los lquidos que se muestran dentro de las celdas.
Siempre lave y seque las celdas de absorcin inmediatamente despus de ser usadas y
gurdense en lugares contra el polvo u otros danos.
OPERACIN DE LEITZ PHOTROMETER
1. TOMENSEN TODAS LAS DETERMINACIONES EN ESTRICTO ACUERDO
CON LAS DIRECCIONES, DADAS PARA PROCEDIMIENTOS CON EL LEITZ
PHOTROMETER. Aun pequeos cambios en el procedimiento podra cambiar l color
producido y por lo tanto dar resultados inexactos.
2. Antes de usar el fotmetro, asegrese de que la guja en la escala del micro
ampermetro este en 0 cuando la luz este apagada. El pequeo tornillo (B) puede ser
girado para ajustar la aguja a 0. Este ajuste es raramente necesario. Se aconseja no poner
el fotmetro en una posicin en donde la luz fuerte caiga directamente en l sujeta celdas
(A), mientras el instrumento este en uso ya que las lecturas pudieran ser afectadas.
3. Gire la perilla (K) como 3 vueltas completas en sentido contrario de las manecillas
del reloj. Esto previene un posible dao a la aguja al golpear ms all de 100 al encender
la luz.
4. Ajstese el disco de filtros (F) girndolo hasta que l nmero de filtros requerido
para el proceso sea visible y se asiente en posicin.
5. Por lo menos 5 minutos antes de que una muestra sea leda, encindase el
interruptor (S). Esto se hace mientras la muestra esta siendo preparada para que no haya
prdida de tiempo.
6. Cuando s este listo para toma una medida, insrtese una celda de absorcin
conteniendo agua destilada en el sujeta celdas (A) empujndola suavemente hasta que
entre completamente. Los lados glaseados de la celda debern estar paralelos a los lados
ms largos del fotmetro.
7. Grese la perilla (K) hasta que la aguja llegue exactamente al 100 de la escala.

26

8. Qutese la celda de absorcin conteniendo agua e INMEDIATAMENTE

reemplcela o cmbiela por la celda de absorcin que contiene la desconocida.
9. Anote la lectura en la escala. De la tabla de calibracin determine la concentracin
de la desconocida.
10. Cuando el trabajo se ha terminado siga el paso #3. Apguese el interruptor (S)
cuando el fotmetro este en uso.
11. Pasos #6 y #7 debern hacerse cada vez que una lectura de una desconocida es
hecha (paso #8).
Mientras el fotmetro este en uso la posicin de la aguja tendera a variar
ligeramente
Pero una vez que el instrumento este bien caliente nicamente algunos ligeros
reajstese la aguja para que marque 100 sern necesarios.
12. Cuando se mida el color de una solucin deber estar libre de bruma o turbidez, ya
que anterior absorber luz y causara un error en la lectura.
13. La capacidad total de una celda para un fotmetro Litz es de 9CC.
OPERACIN DE PHOTOVOLT LUMETRON
1. Pngase el filtro de color seleccionado en el as de luz como lo indican las lneas
blancas.
2. Insrtense los tubos conteniendo el neutro y la muestra en sus correspondientes
aperturas en el porta tubos.
3. Deslcese el porta tubos hacia el operador para atraer el neutro hacia el as de luz.
4. Ajstese la aguja a 100 en la escala inferior (o en la escala superior) por medio de
los botones de control rudo y fino.
5. Deslcese el porta tubos lejos del operador para atraer la muestra hacia el as de luz y
tomar la lectura.
FOTMETROS DE FLAMA.
Prcticamente todos hemos desparramado sal comn hacia la llama de una estufa y
hemos visto la llama amarilla que se produce cuando se quema el sodio. Si fuera posible
medir la intensidad de este color amarillo tendramos una indicacin de la cantidad de
sodio presente. Entre ms intenso sea el color ms grande ser la concentracin de sodio.
Este principio es usado en los fotmetros de flama.
En un fotmetro de flama, soluciones diluidas de suero, plasma u orina son vaporizadas y
quemadas. Varios colores son producidos. Estos son filtrados para aislar el color que es
caracterstico de la sustancia a determinar. La intensidad del color es luego comparada
por medio de una celda fotoelctrica con valores estndar para conocer su concentracin.
Debido a su rapidez y exactitud, los fotmetros de flama son ahora uno de los mas usados
instrumentos de diagnostico de laboratorio. Hay muchos instrumentos excelentes,
algunos con la capacidad para analizar litio, magnesio y los controversiales iones de
calcio.
El fotmetro de flama tiene las siguientes partes bsicas:
1. Atomizador.

27

2. Quemador.
3. Espectrofotmetro, este ultimo usado ya sea una celda o doble celda.
4. Galvanmetro o registro.
Hay dos tipos generales de atomizadores usados con los fotmetros de flama. Los de
alimentacin hacia arriba y los de alimentacin por gravedad se describen enseguida. La
funcin de los atomizadores es crear un aerosol fino de la solucin y alimentar este a la
flama. El aerosol se obtiene por medio de un chorro de aire comprimido u oxigeno
soplando sobre la parte superior de un tubo capilar. El atomizador promedio sifona una
razn de 1 ml en 10 o 15 seg. lo que permite el tiempo suficiente para tomar lecturas. Un
sifn ms rpido por supuesto acorta el tiempo de lectura porque el nivel del lquido del
contenedor es rpidamente consumido. Una tendencia del tcnico de sostener el
contenedor de la muestra por mucho tiempo en el atomizador cambia el nivel de fluido en
el contenedor causando tambin lecturas errticas.
Con el sistema de alimentacin hacia arriba (Fig. 31) el atomizador 1 sifona la muestra
diluida del contenedor y pasa un fino aerosol hacia la flama 2. Para un control constante
de la temperatura el gas y l oxigeno se mezclan en el mismo quemador. Este ajuste es
hecho manualmente de acuerdo a las instrucciones para cada instrumento especfico
usado. Cuando entra la mezcla a la flama en un flujo constante, la luz y el color
producidos son transmitidos a travs de la lente, filtro y foto celda 3, y la intensidad de la
luz es registrada ya sea por un galvanmetro o por un registro 4. Todos los estudiantes de
anlisis cualitativo que hayan hecho la prueba del grano reconocern los siguientes
metales y sus colores:
Sodio (Na)
Amarillo
Potasio (K)
Violeta
Litio (Li)
Rojo oscuro
Calcio (Ca)
Rojo
Magnesio (Mg)
Incoloro
El calor del quemador es importante. Una flama caliente es generalmente
preferible por su mayor sensitividad, ya que una flama de un alto grado de calor causa
una accin ms grande en las molculas lo que a su vez da ms luz. Un atomizador que
alimente lentamente no afecta al calor de la llama al bajar su temperatura ya que el
volumen de aerosol que se introduce al quemador es muy pequeo, sin embargo, una
alimentacin muy rpida del atomizador introducir ms solucin hacia el quemador lo
que bajara la temperatura y afectara su sensibilidad.
El quemador alimentado por gravedad (Fig. 32) funciona en una manera diferente.
La muestra es depositada en un embudo
1. Por gravedad esta muestra fluye hacia la salida del embudo de donde es
dirigida como un fino roci hacia la flama. Aire comprimido en la base del embudo acta
de manera constante para dispersar l liquido en forma de ese fino roci. La muestra
entonces sigue el mismo patrn bsico en el tipo de quemador hacia arriba.
Los fotmetros de flama usan ya sea un mtodo de lectura directa o el mtodo
estndar interno de anlisis de acuerdo con el sistema elctrico del instrumento.

28

En el mtodo de lectura directa la luz emitida por las sales de la muestra en la

flama son medidas por un fotmetro o registro. El sistema estndar interno es ms
complejo, utiliza una doble foto celda. Con este sistema el suero es diluido con una
cantidad conocida de litio y agua. Cuando la muestra diluida hace contacto con la flama,
la luz que se produce es dividida en 2 ases, uno de ellos pasa por un filtro de litio hacia
una foto celda. La luz del elemento que es analizado es transmitida a travs de un filtro
respectivo hacia la otra foto celda. La corriente de la foto celda de litio es ajustada por un
potencimetro (con una escala calibrada) hasta que iguala exactamente a la corriente de
la otra foto celda. Las lecturas obtenidas por el potencimetro son comparadas con
estndares de concentraciones conocidas para encontrar los valores del elemento que esta
siendo analizado. Aun y cuando cada instrumento tiene su hoja de solucin de problemas,
los problemas principales que el tcnico que use un fotmetro de flama va a encontrar
son los siguientes:
1. Permitir que la muestra sea aspirada por demasiado tiempo lo que reduce
drsticamente el volumen de la muestra en el contenedor.
2. No limpiar los atomizadores despus de un da de correr muestras.
3. Permitir que las pantallas, chimeneas y otras partes alrededor del quemador se
llenen de sales de varios elementos interfiriendo con el flujo constante de
aerosol al quemador.
Antes de comprar un fotmetro de flama, investigue todos los tipos y diferentes unidades
para disponibilidad de espacio en el laboratorio, ventilacin, cdigo de incendios y la
disponibilidad de partes y servicios. Algunos fabricantes recomiendan un tipo especfico
de gas para sus instrumentos. Algunos gases recomendados son: gas natural, acetileno,
propano y butano. Como algunos cdigos contra incendio varan segn las localidades
este factor debe ser verificado antes de comprar un instrumento.
FLUORIMETRA.
Es la medicin cuantitativa de la fluorescencia. Bajo ciertas condiciones las molculas de
ciertos compuestos absorben energa radiante. Despus de un periodo extremadamente
corto de tiempo (10 a la menos 1 o 10 a la menos 8 segundos) los electrones excitados
regresan a sus niveles bajos de energa lo que produce la emisin de luz visible o
fluorescencia. La diferencia entre fluorescencia y fosforescencia es que la fluorescencia
cesa cuando la energa que lo excita es eliminada, pero con la fosforescencia la emisin
de luz persiste despus de cierto tiempo que la radiacin es detenida. La radiacin
ultravioleta es generalmente la ms eficiente forma de energa debido a su relativamente
larga longitud de onda. Las molculas emiten grupos de bandas espectrales y si son lo
suficientemente grandes y complejas producirn un espectro continuo. Sin embargo,
algunos compuestos no son fluorescentes o son de fluorescencia muy dbil. Estos podran
ser adaptados para fluorometra por medio de reacciones qumicas o condensacin,
sustitucin o deshidratacin. La sensitividad de este mtodo de anlisis depende de la
intensidad de energa radiante incidente y la sensitividad del instrumento usado para
medir la fluorescencia.
Medidas cuantitativas pueden ser hechas de quinidinas, porfirinas, catecolaminas,
vitaminas, antibiticos y estrgenos que pueden ser difciles de medir por otros mtodos.

29

Hay muchos instrumentos disponibles para este tipo de anlisis. Cada uno vara de alguna
manera de los otros y es la demanda del laboratorio y del comprador lo que es mas para
saber cual es el instrumento mas apropiado. Estos instrumentos operan en los principios
bsicos de los fotmetros con la excepcin de que estos utilizan luz ultravioleta y miden
la intensidad de la fluorescencia en ngulos rectos con la luz incidente. Tienen foto tubos,
foto celdas con capas de barreras y tubos foto multiplicadores con espectros de respuesta
caractersticos conocidos. Hay mediciones fotomtricas para los fotmetros,
espectrofotmetros y auto analizadores.
DILUCIONES
OBJETIVO.
El alumno conocer las formas de efectuar una dilucin de una sustancia y podr
llevarlas a efectos en forma prctica para un mayor conocimiento.
INTRODUCCIN.
Dilucin significa disminuir la concentracin de una solucin, por medio de un
solvente dependiendo cuanto se quiera diluir el soluto, pueden hacerse diluciones dobles,
triples, cudruples, etc., y logartmicas.
MATERIAL.
1. Permanganato de potasio. 0.01M
2. Dicromato de potasio 0.01M y 0.05M.
3. Agua.
4. Tubos de ensaye.
5. Pipetas.
6. Gradillas.
7. Fotocolormetro
METODOLOGIA.
A) Diluciones dobles.- Significa que la disminucin del soluto ser la mitad del
anterior. y se efectan en forma seriada.
Se toma un ml. de la solucin a diluir (soluto) se agrega un ml. de solvente (agua).
Ejem. Tubo 1 1:1 un ml. equivale a 1.0 (1) de concentracin del soluto
Tubo 2 1:2 un ml. equivale a 0.5 (1/2) de dilucin del soluto.
Tubo 3 1:4 un ml. equivale a 0.25 (1/4) de dilucin del soluto.
Tubo 4 1:8 un ml. equivale a 0.125 (1/8) de dilucin del soluto.
Tubo 5 1:16 un ml. equivale a 0.625 (1/16) de dilucin del soluto.
Tubo 6 1:32 un ml. equivale a 0.03125 (1/32) de dilucin del soluto.
Mtodo:
El tubo # 1 contiene 2 ml. de solucin (soluto) al 100 % de concentracin.
Al tubo # 2 se le agrega 1 ml. de soluto del tubo # 1 ms 1 ml. de solvente (agua).
Al tubo # 3 se le agrega 1 ml. de solucin del tubo # 2 ms 1 ml. de solvente.
Al tubo # 4 se le agrega 1 ml. de solucin del tubo # 3 ms 1 ml. de solvente.
Al tubo # 5 se le agrega 1 ml. de solucin del tubo # 4 ms 1 ml. de solvente.
Al tubo # 6 se le agrega 1 ml. de solucin del tubo # 5 ms 1 ml. de solvente.

30

B) Diluciones triples.- Es la disminucin de la concentracin del soluto a la

tercera parte del anterior, y se efecta en una forma seriada.
Ejem. Tubo 1 1:1 equivale a 1.0 (1) de concentracin del soluto.
Tubo 2 1:3 equivale a 0.33 (1/3) de soluto diluido.
Tubo 3 1:9 equivale a 0.11 (1/9) de soluto diluido.
Tubo 4 1:27 equivale a 0.037 (1/27) de soluto diluido.
Tubo 5 1:81 equivale a 0.0123 (1/81) de soluto diluido.
Tubo 6 1:243 equivale a 0.0041 (1/243) de soluto diluido.
Mtodo:
Tubo # 1 contiene 2 ml. de solucin de soluto al 100 % de concentracin.
Tubo # 2 contiene 1 ml. de solucin del tubo # 1 y se le agregan 2 ml. de solvente.
Tubo # 3 contiene 1 ml. de solucin del tubo # 2 y se le agregan 2 ml. de solvente.
Tubo # 4 contiene 1 ml. de solucin del tubo # 3 y se le agregan 2 ml. de solvente.
Tubo # 5 contiene 1 ml. de solucin del tubo # 4 y se le agregan 2 ml. de solvente.
Tubo # 6 contiene 1 ml. de solucin del tubo # 5 y se le agregan 2 ml. de solvente.
C) Diluciones logartmicas.- Las disminucin de la concentracin del soluto es
diez partes de la anterior (est efectuada en base 10).
Ejem. Tubo 1 1:1 equivale a 1 (1) concentracin de soluto.
Tubo 2 1:10 equivale a 0.1 (1/10) de dilucin de soluto.
Tubo 3 1:100 equivale a 0.01 (1/100) de dilucin de soluto.
Tubo 4 1:1000 equivale a 0.001 (1/1000) de dilucin de soluto.
Tubo 5 1:10000 equivale a 0.0001 (1/10000) de dilucin de soluto.
Mtodo.
Tubo # 1 contiene 2 ml. de solucin de soluto al 100 % de concentracin.
Tubo # 2 contiene 1 ml. del tubo # 1 y se le agregan 9 ml. de solvente.
Tubo # 3 contiene 1 ml. del tubo # 2 y se le agregan 9 ml. de solvente.
Tubo # 4 contiene 1 ml. del tubo # 3 y se le agregan 9 ml. de solvente.
Tubo # 5 contiene 1 ml. del tubo # 4 y se le agregan 9 ml. de solvente.
D) Diluciones directas. Estas se efectan directamente, segn la concentracin
requerida, no siendo necesario elaborarlas en una forma seriada.
En las logartmicas de base 10, se toma la parte proporcional del soluto y se le
agrega solvente para completar los 10 ml.
Ejem. Tubo 1 (1/100) Se toma 0.1 ml. de soluto y se le agrega 9.9 ml de solvente.
Tubo 2 (1/1000) Se toma 0.01 ml. de soluto y se le agrega 9.99 ml. de solvente.
En la doble se tomar en cuenta la concentracin deseada del soluto,
posteriormente se le agregar el solvente para completar la cantidad requerida.
Ejem. Tubo 1 (1/16) 0.625 Se tomar .1 ml. de soluto y se agregar 1.5 ml. de solvente.
En la triple se tomar en cuenta la concentracin deseada del soluto,
posteriormente se le agregar el solvente para completar la cantidad requerida.
Ejem. Tubo 1 (1/27) 0.037 Se tomar .1 ml. de soluto y se agregar 2.6 ml. de solvente.
RESULTADOS.

31

El alumno observar mediante el fotocolormetro la Absorvancia, Transmitancia,

Concentracin y densidad de las diluciones efectuadas y comparar los resultados con los
dems grupos, identificando posibles errores.
CUESTIONARIO.
1. Mencione 3 tcnicas clnicas en las cuales utilice diluciones.
2. Investiga significado de dilucin.
3. Mencione lo que es un soluto y solvente.
BIBLIOGRAFIA.

OSMOSIS
OBJETIVO.
El alumno debe conocer prcticamente los mecanismos de transporte a travs de
membranas y los efectos resultantes.
INTRODUCCIN.
Los mecanismos de transporte a nivel de membranas permeables o
semipermeables, constituyen uno de los temas de mayor importancia en fisiologa, como
en otras funciones especificas, como la formacin de potenciales de membrana,
necesarios para la transmisin nerviosa, la contraccin de msculo liso y esqueltico,
contraccin cardiaca, sensibilidad, etc.
La smosis es el mecanismo homeosttico espontneo, que siguiendo la tercera
ley de la termodinmica; ocasiona el paso de un solvente de un compartimiento de mayor
concentracin a otro de menor concentracin de solvente a travs de una membrana
semipermeable, a favor de un gradiente de concentracin y por lo tanto sin gasto de
energa.
MATERIAL.
1. Tubos capilares.
2. Vasos deprecipitados.
3. Termmetro.
4. Bolsas de colodin.
5. Sacarosa 0.2 M.
6. Sacarosa 0.4 M.
7. Cronmetro.
8. Tapones de caucho.
9. Ligas.
10.
Agua destilada.
11.
Parilla elctrica.
12.
Soporte universal.
13.
Pinzas universales.
14.
Jeringa acepto.
15.
Regla o papel milimtrico.
METODOLOGA.

32

Se coloca una bolsa de colodin tapado en un extremo con un tapn de caucho

sujetado por una liga, en el extremo superior se coloca un tapn de caucho el cul
contiene un tubo capilar de 50 cm. Aproximadamente y se sujeta a la bolsa de colodin
con una liga, posteriormente se procede a llenarla con sacarosa a una concentracin de .1
M. y otra de .3 M. Es sostenida por medio de un soporte universal y una pinza universal.
La bolsa una vez llena de sacarosa a concentraciones indicadas se procede a
sumergirlas en 250 ml. de agua destilada a una temperatura de 25 grados centgrados, la
cual est contenida en un vaso de precipitado.
Se procede a tomar la lectura de la columna de solucin en el tubo capilar,
midindola con una regla milimtrica, y se anotaran los datos cada 5 minutos en tu
cuaderno, hasta obtener un nmero de 10 mediciones. Posteriormente se elevar la
temperatura a 45 grados centgrados el agua del vaso de precipitado y se efectuaran
nuevamente 10 mediciones cada 5 minutos y se anotarn en tu cuaderno.
Estos dos ltimos pasos se efectuarn en cada una de las concentraciones de
sacarosa.
RESULTADOS.
En cada uno de los experimentos de sacarosa a concentraciones diferentes se
efectuaran tablas estadsticas y grficas, segn la obtencin de los resultados
correspondientes.
CONCLUCIONES.
Compare y analice cada uno de los resultados de los experimentos de su prctica.
BIBLIOGRAFIA.

33

PREPARACIN DE SOLUCIONES
OBJETIVO.
El alumno aprender los componentes de las soluciones mas frecuentemente
usadas en medicina y la preparacin de las mismas.
INTRODUCCIN.
En el campo de la medicin el alumno necesita conocer el empleo de soluciones,
su preparacin e importancia, ya sea electrolticas o no electrolticas. El centrar su
investigacin en organismos vivos o tejidos, se debe procurar tener las preparaciones
respectivas en un medio lo mas semejante posible al ambiente y/o al medio interno
natural.
La finalidad de conocer el empleo de las soluciones es establecer o mantener un
equilibrio hdrico y electroltico de un enfermo segn los valores normales. Se toma en
cuenta el aspecto osmtico y las concentraciones ms usuales o adecuadas.
Las
concentraciones (en base al soluto) son los porcentuales, molares, mlales, normales
(milieq/lt. O mg/100ml.), osmolares.
El recuperar o extraer cada uno de los electrolitos en la clula es como el
propsito de establecer el equilibrio electroltico necesario para el buen funcionamiento
del organismo.
MATERIAL.
1. Probeta de 100, 250, 500 y 1000 ml.
2. Matrz aforado de 250, 500 y de 1000 ml.
3. Balanza granatara.
4. Gradilla.
5. Pipetas de 1, 2, 5, 10 ml.
Reactivos
6. NaCl
7. CaCl2
8. KCl
9. MgCl2
10.
Bicarbonato de Na
11.
Glucosa

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METODOLOGA.
Preparar las siguientes soluciones por equipo, segn se indique por el instructor.
Solucin de Hartman
Sodio.130 meq/lt.
Potasio.4 meq/lt.
Calcio.3 meq/lt.
Cloro.109 meq/lt.
Lactato.28 meq/lt.

Convertir de meq/lt. A mg/100 ml.

Solucin de Ringer (para mamfero)

Cloruro de sodio.9 g/lt.
Cloruro de potasio..42 g/lt.
Cloruro de calcio..42 g/lt.
Bicarbonato de sodio.- .20 g/lt.
Solucin de ringer para rana.
Cloruro de sodio.6.50 g/lt.
Cloruro de potasio.- .14 g/lt.
Cloruro de calcio..12 g/lt.
Bicarbonato de sodio.- .19 g/lt.
Manitol al 5 % (m/v)
Pedialyte.
Sodio.30 meq/lt.
Potasio.20 meq/lt.
Calcio.4 meq/lt.
Magnecio.4 meq/lt.
Cloro.30 meq/lt.
Lactato.28 meq/lt.
Solucin glucosada al 5 %.Solucin glucosada al 10 %.Acido clorhdrico.Hidrxido de sodio.Solucin fisiolgica isotnica.-

250 ml.
500 ml.
0.01 normal.
0.01 normal.
180 m.

RESULTADOS.
Anotar las cantidades en gramos de las soluciones que prepar y la cantidad de
solvente utilizado.
CONCLUCIONES.
Identificar si la soluciones fueron adecuadamente elaboradas o se cometieron
errores.
CUESTIONARIO.

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1.- Convertir los meq/lt. En mg/100 ml. en la solucin de Hartman.

2.- Mencion 5 soluciones electrolticas de uso clnico.
3.- Que es una solucin hipertnica.
4.- Defina lo que es normalidad, molaridad y molalidad.
5.- Cuantos meq/lt. de sodio y potasio habr en una solucin fisiolgica isotnica.
BIBLIOGRAFA.

POTENCIOMETRA
OBJETIVO.
El alumno deber conocer el manejo del potencimetro e identificar soluciones
cidas, bsicas y amortiguadoras.
INTRODUCCIN.
La teora de Bronsted - Lowry nos indica que un cido es cualquier sustancia
molecular o inica que cede un protn mientras que una base es una sustancia capaz de
aceptar un protn.
Una solucin amortiguadora es aquella que opone resistencia al cambio en la
concentracin de in de hidrogeniones, cuando se le agrega un cido o una base fuerte, y
al presentarse el cambio lo efecta en una manera brusca.
Los cidos pueden ser fuertes o dbiles, ya sea que estn completamente
disociados o parcialmente disociados, las bases tambin pueden ser fuertes o dbiles
segn su disociacin. La ionizacin de iones ya formados.
MATERIAL.
1. Acido Clorhdrico 0.1 N 30 ml.
2. Acido Actico 0.1 N 30 ml.
3. Hidrxido de sodio 0.1 N 30 ml.
4. Glicina 0.1 N.
5. Soporte universal.
6. Pinzas universales.
7. Bureta.
8. Pipeta Pastur.
9. Pipeta volumtrica de 5 ml.
10.
Vaso de precipitado.
11.
Piseta.
12.
Agua destilada.
13.
Potencimetro.
METODOLOGA.
Titular los siguientes compuestos con NaOH al 0.1 N (solucin en la bureta)
a.- cido clorhdrico al 0.1 N.
36

b.- Acido actico al 0.1 N.

c.- Glicina al 0.1 N.
Titular la glicina (30 ml.) con HCl al 0.1 N. y posteriormente titule otros 30 ml. de
glicina con NaOH al 0.1 N
NOTA. En la bureta se tendr la sustancia titulante y en el vaso de precipitado la
sustancia a titular.
Se proceder primeramente a colocar 50 ml. en la bureta de la solucin titulante,
en el vaso de precipitado se colocan 20 ml de la solucin a titular, se tomar el pH de la
solucin a titular y se anota en tu cuaderno, posteriormente se le irn agregando pequeas
cantidades (0.5 ml.) de solucin titulante y se agitar el vaso de precipitado para tomar su
pH. Procedimiento que se efectuara en forma repetida hasta que la solucin titular se
neutralice (pH de 7.0). En caso de que se dispare por arriba o abajo de la neutralizacin,
se repetir el procedimiento desde el inicio.
RESULTADOS.
Se representarn en una tabla y grficas los resultados.
Graficar en papel milimtrico pH contra vol. de NaOH en la titulacin de HCl.
Graficar pH contra volumen de NaOH en la titulacin de cido actico.
Graficar pH contra volumen de NaOH en la titulacin de la glicina.
Graficar pH contra volumen de HCl en la titulacin de la glicina.
CONCLUCIONES.
Explicar cada una de las grficas
CUESTIONARIO.
1.- Que es un indicador.
2.- Que significa pH y pK
3.- A que se refiere cido fuerte y cido dbil.
4.- Que es un amortiguador.
BIBLIOGRAFA.

37

POTENCIAL DE ACCIN
OBJETIVO.
El alumno deber reconocer y encontrar el potencial de accin grficamente de un
nervio, por medio del Osciloscopio.
INTRODUCCIN.
Dentro de las caractersticas de los nervios es importante hacer mencin de la
conduccin nerviosa a partir de la membrana en reposo ya que por medio de estmulos se
puede mandar la informacin a travs de la cadena nerviosa por medio de los potenciales
de accin, siempre y cuando estos estmulos sean del tipo umbral y que excite la
membrana en reposo para poder transmitir la informacin hasta el lugar que se desee y
poder obtener una respuesta a un estmulo determinado.
MATERIAL.
1. Conejo adulto.
2. Estuche de diseccin.
3. Osciloscopio.
4. Fisigrafo.
5. Cables.
6. Cmara para nervio.
7. Soporte universal.
METODOLOGIA.
Primeramente se anestesia el conejo con una dosis de pentobarbital sodico dada
por el instructor de laboratorio una vez anesteciado el conejo, se procede a ponerse en
decbito ventral, se procede a efectuar una insicin de aproximadamente 6 a 8 cm. de
longitud en la regin gltea seleccionada, se diseca plano muscular hasta encontrar el
nervio citico, el cual se separa lo mas que se pueda en su parte superior e inferior, con
cuidado de no daar el nervio.
Se corta y se pone en una caja de petri, se pasa a la cmara de nervio.
La cmara de nervio consiste en un espacio hueco con unas agujas insertadas de
lado a lado, con un espacio entre cada una de ellas de 1 cm. zona donde se coloca
cuidadosamente el nervio. Por un lado de la cmara del nervio sobresalen las agujas y
sirven para conectar por medio de pinzas, los cables que corresponden a tierra,

38

estimulador y registr (al osciloscopio). Una vez hecho lo anterior se procede a las
siguientes observaciones.
1. Caractersticas del potencial de accin.
2. Curva de intensidad amplitud.
3. Curva de intensidad duracin.
4. Conduccin del nervio en ambas direcciones.
5. Velocidad de conduccin.
6. Trastornos del potencial de accin por factores externos como hielo o
anestsicos locales.
Dentro de la primera observacin se vern las caractersticas de un potencial de
accin como son:
1. Artefacto del estimulo.
2. Periodo de latencia.
3. Umbral.
4. Repolarizacin.
5. Meseta.
6. Despolarizacin.
7. Potencial ulterior positivo.
Dentro de la segunda observacin se har la grfica de acuerdo a la tabla obtenida
al aumentar la intensidad del estmulo y medir los cambios en la amplitud esto se har
hasta que se encuentre la respuesta mxima.
Dentro de la tercera observacin, se realizar, tomando el 50 % de nuestra
respuesta mxima y se iniciar, aumentando la duracin gradualmente y disminuyendo la
intensidad, hasta volver a encontrar los valores normales del 50 %.
En la cuarta observacin, se proceder a cambiar los cables de estmulo al lugar
de los cables de registro y viceversa, se observa el nuevo trazo en la grfica, o se har una
comparacin con el potencial de accin anterior.
Para la quinta observacin, se sacara la velocidad de conduccin del nervio
sabiendo que es igual a distancia sobre tiempo, la distancia estar dada por el cable de
estmulo al cable de registro y el tiempo estar dado por el perodo de latencia existente
en el trazo de potencial de accin obtenido.
Para la observacin final, se aplicara hielo o anestsico local directamente al
nervio y se observaran los cambios en la pantalla.
RESULTADOS.
Se presentaran grficas de de intensidad y amplitud en respuesta mxima.
Grfica de la respuesta mxima al 50 %.
CONCLUCIONES.
Se explicar motivos de la prctica y finalidad. Adems mencionara sus
conclusiones.
BIBLIOGRAFIA.
CUESTIONARIO.

39

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.

Que es un potencial de accin.

Que es el osciloscopio
Menciona lo que es intensidad.
Menciona lo que es amplitud.
Indica lo que es umbral.
Que es repolarizacin.
Que es despolarizacin
Que es periodo de latencia

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