AVALIAO DA TOXICIDADE
Compreende a anlise dos dados toxicolgicos de uma
substncia qumica com o objetivo de classific-la
quimicamente.
Dados toxicolgicos:
AVALIAO DA TOXICIDADE
A lista de estudos pode variar de pas para pas, mas
basicamente inclui os seguintes tpicos
- Informaes preliminares,
- Toxicidade aguda,
- Toxicidade sub-crnica,
- Toxicidade crnica,
- Mutagnese e Carcinognese
- Reproduo e Teratognese,
- Toxicocintica,
- Efeitos sobre a pele e olhos,
- Sensibilizao cutnea,
- Ecotoxicidade
Informaes preliminares
- Estrutura qumica
- Impurezas
- Propriedades fsico-qumicas
Experimentao animal
DURAO E FREQNCIA DE EXPOSIO
- Exposio aguda: at 24 horas (geralmente at 4 horas)
- Exposio subaguda: exposies repetidas at 1 ms
- Exposio subcrnica: de 1 a 3 meses
- Exposio crnica: mais de 3 meses.
Experimentao animal
Experimentao animal
DURAO E FREQNCIA DE EXPOSIO
DL50
Quantidade necessria, em mg/kg
de peso corpreo, para provocar a
morte de 50% de um lote de animais
submetidos experincia.
-Curva dose x resposta
AR SINTTICO
CMARA DE
MISTURA
CONTROLE DE
TEMPERATURA
E UMIDADE
CMARA DE EXPOSIO
AGENTE TXICO
SISTEMA DE COLETA
DE URINA E FEZES
Etanol
Cloreto de sdio
Sulfato ferroso
Morfina
Fenobarbital
Estricnina
Nicotina
Tubocurarina
Tetrodotoxina
Dioxina
Toxina botulnina
DL50 (mg/Kg)
7.000
4.000
1.500
900
150
2
1
0,5
0,1
0,001
0,00001
O
O C
NHCH3
Animais
Cobaias
Camundongos
Rato
Coelhos
DL50 (mg/Kg)
280
360-590
540-720
710
Paration etlico
Animais machos
Animais fmeas
0,57
Paration metlico
2,40
Endrin
2,38
Endossulfon
0,65
Aldrin
Heptacloro
0,61
DDT
0,95
10
30
50
70
100
DL50 A e B = 8mg/kg
Animal no-tratado
Animal tratado
MS = DL1
DE 99
Estudos de neurotoxicidade
A neurotoxicidade pode ser definida
como sendo a capacidade de um
composto qumico em provocar efeitos
adversos no sistema nervoso central, em
nervos perifricos e em rgos sensoriais.
Pode ser:
Reversvel: quando ocorrem mudanas funcionais temporrias
Irreversvel: quando envolvem mudanas estruturais com
degenerao de clulas nervosas.
Estudos de neurotoxicidade
Nenhuma tcnica experimental nica capaz de evidenciar
neurotoxicidade dos compostos qumicos
necessrio constituir um conjunto de tcnicas, com
estudos comportamentais, eletrofisiolgicos, neurolgicos,
histoqumicos e bioqumicos com diferentes espcies.
O grau de anormalidade necessrio para caracterizar a
neurotoxicidade uma questo controvertida que muitas vezes
depende de avaliaes subjetivas.
Estudos de neurotoxicidade
Escala de nveis para avaliar o grau de neurotoxicidade:
Nivel
Efeito
Caracterizao
1*
2*
3**
-Parmetros bioqumicos
4**
-Alteraes fisiolgicas e
comportamentais
5*
-Alteraes neurolgicas
6**
-Alteraes morfolgicas
Estudos de neurotoxicidade
Mesmo que a neurotoxicidade de um composto seja
efetivamente demonstrada em estudos com animais, a
extrapolao para o homem deve ser feita com cautela.
Ex:
1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetraidropiridina
extremamente
neurotxico para o homem, mas no para ratos.
Estudos de mutagnese
Mutagnese a capacidade de substncias em causar
alteraes no material gentico de modo que essas alteraes
possam ser transmitidas durante a diviso celular.
Ensaios in vitro e in vivo
In vivo
Estudo do potencial mutagnico
Aberraes cromossmicas so identificadas na
medula ssea do fmur de ratos e camundongos expostos ao
agente txico. Estas aberraes podem afetar uma ou ambas
as cromtides.
Estudos de mutagnese
In vivo
Teste do microncleo
Promove a deteco de substncias mutagncias
clastognicas (ruptura dos cromossomas com recombinao
entre eles) ou interferentes na formao do fuso mittico.
Os
microncleos
resultam
de
fragmentos
cromossmicos acntricos, sendo facilmente reconhecidos no
citoplasma.
Estudos de mutagnese
In vitro - So rpidos, sensveis, de baixo custo, reprodutveis e
recomendados por entidades governamentais e rgos de pesquisa
de diversos pases.
-Teste de Ames
Substncia a
ser avaliada
Microssomas
de rato
Salmonella
mutante
Agar sem
histidina
Colnias que
sofreram reverso
da mutao
incubao
Estudos de mutagnese
-Teste de Ames
Composto orgnico
benz[b]fluoranteno
3,3 - dimetoxibenzidina
4-cloro-fenilenediamina
2-nitroflureno
4-aminobifenila
benzidina
2-naftilamina
benz(a)antraceno
benz(a)pireno
4-cloro-toluidina
n-nitrosodimetilamina
Classificao IARC
Grupo 1
(reconhecidamente carcinognico)
Grupo 2A
(possivelmente carcinognico)
Grupo 2B
(provavelmente carcinognico)
Estudos de carcinognese
A carcinognese um processo anormal, nocontrolado, de diferenciao e proliferao celular, inicialmente
localizado mas que pode ser disseminado pelo organismo,
provocando a sua morte.
-O cncer s pode ser evidenciado em organismos superiores,
-Estudos devem ser realizados em duas espcies de animais
(ratos e camundongos). Durao: 100-130 semanas.
Estudos de carcinognese
Testes de carcinognese devem ser realizados
principalmente nos casos em que ocorra exposio humana a
longo prazo.
Limitao:
toda substncia que apresenta efeito carcinognico em
animais tambm apresentar em humanos - nem sempre
verdadeira
- Variao deve estar relacionada na diferena nos processos
de biotransformao de pr-carcingenos e carcingenos
definitivos.
Estudos de carcinognese
- Uso da Maior Dose Tolerada (dose que administrada aos
animais durante seu perodo mdio de vida, no provoque a
morte ou diminuio de 10% do peso).
- utilizadas para garantir o aparecimento do tumor em um
pequeno nmero de animais.
Problemas de interpretao:
Ex. sacarina provoca tumor em ratos (altas doses)
-Sacrifcio da metade
dos animais para a
constatao
de
anormalidades uterinas.
Gestao(dias)
22
20
33
15
Organognese (dias)
6-15
5-14
6-18
8-12
-Administrao
do
agente
em
fmeas
durante o perodo da
organognese.
Estudos de toxicocintica
Informaes sobre absoro, distribuio, biotransformao e
excreo de substncias.
Ex: A comparao da dose letal de uma substncia por diferentes
vias de exposio pode fornecer importantes informaes sobre sua
extenso de absoro.
Outros objetivos:
- Diferenas de metabolismo (atividade enzimtica) entre espcies,
- Velocidade de metabolismo
Estudos de ecotoxicidade
Ecotoxicologia: estudo dos efeitos txicos provocados pelas
substncias qumicas sobre os constituintes dos ecossistemas,
animais, vegetais e microorganismos, num contexto integrado.
Fatores a serem considerados:
Qumicos (estados de oxidao, interao com outros
materiais, etc)
Biodegradao
Testes de toxicidade aguda (microorganismos, plantas, peixes,
mamferos)
Desaparecimento da atmosfera
Bioacumulao
Eutroficao
Outros estudos
Programas de computador - predizer a toxicidade de
compostos, atravs de modelos com uma srie de variveis.
Avaliao da toxicidade in silico
PROGRAMA 3Rs
REDUCTION
REFINEMENT
REPLACEMENT