Prctica No.

6 CROMATOGRAFA EN CAPA FINA

Autor: Valdivia Caballero Luis Miguel

Resumen
Primero se prepararon los portaobjetos, metindolos en una solucin de gel de
slice, esperamos a que secaran. Adems preparamos los capilares hacindolos
ms delgados para dejar la menor cantidad de mezcla posible. En el primer
experimento con ayuda del capilar aplicamos la muestra 1A en el portaobjetos 1
vez por un lado, 3 veces en el centro y 9 veces en otro, despus la colocamos el
portaobjetos en el frasco de cromatografa con Acetato de etilo y lo cerramos,
despus de que corriera revelamos con UV. En el segundo experimento
colocamos 3 aplicaciones de 2 muestras 2A y 3A, en tres portaobjetos distintos
con hexano, metanol y acetato de etilo respectivamente, para despus revelar con
UV y con Yodo para ayudarnos a calcular el Rf, ya que se pudo medir ms
fcilmente. En el tercer experimento colocamos 3 aplicaciones de dos muestras
4A y 5A en la cromatoplaca, despus comparamos las marcas al revelarlo en UV
para comparar la pureza de ambas muestras.
Introduccin
La cromatografa en capa fina es una tcnica analtica rpida y sencilla, muy
utilizada en un laboratorio de Qumica Orgnica. Permite determinar el grado de
pureza de un compuesto. Tambin permite comparar muestras. Si dos muestras
corren igual en placa podran ser idnticas. Si, por el contrario, corren distinto
entonces no son la misma sustancia.
La muestra a analizar se deposita cerca de un extremo de una lmina de plstico
o aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente
(fase estacionaria). Entonces, la lmina se coloca en una cubeta cerrada que
contiene uno o varios disolventes mezclados (eluyente o fase mvil). A medida que
la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a travs del adsorbente, se
produce un reparto diferencial de los productos presentes en la muestra entre el
disolvente y el adsorbente.
Los dos adsorbentes (fase estacionaria) ms ampliamente utilizados son la gel de
slice (SiO2) y la almina (Al2O3), ambas de carcter polar. La almina anhidra es
el ms activo de los dos, es decir, es el que retiene con ms fuerza a los
compuestos; por ello se utiliza para separar compuestos relativamente apolares.
La gel de slice, por el contrario, se utiliza para separar sustancias ms polares. El
proceso de adsorcin se debe a interacciones intermoleculares de tipo dipolodipolo entre el soluto y el adsorbente. El adsorbente debe ser inerte con las

sustancias a analizar y no actuar como catalizador en reacciones de

descomposicin. El adsorbente interacciona con las sustancias mediante
interaccin dipolo-dipolo o mediante enlace de hidrgeno si lo presentan. . El
orden de elucin de un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la
fase mvil o eluyente. El eluyente puede ser un disolvente nico o dos miscibles
de distinta polaridad.
El eluyente idneo para cada caso ha de encontrarse por "el mtodo del ensayo y
del error" ste es encontrado por medio de la determinacin del Rf La retencin se
puede explicar en base a la competencia que se establece entre el soluto a
separar y la fase mvil por adsorberse a los centros activos polares de la fase
estacionaria.. La retencin y la selectividad dependen de la polaridad del
compuesto. Los solutos ms polares quedarn ms retenidos puesto que se
adsorben ms firmemente, mientras que los no polares se eluirn con mayor
facilidad. La relacin entre las distancias recorridas por el soluto y por el eluyente
desde el origen de la placa se conoce como Rf, y tiene un valor constante para
cada compuesto en unas condiciones cromatogrficas determinadas. Para
calcular el Rf se aplica la siguiente expresin: Rf = distancia recorrida por el
compuesto (X) / distancia recorrida por el eluyente (Y) La distancia recorrida por el
compuesto se mide desde el centro de la mancha. Si sta es excesivamente
grande se obtendr un valor errneo del Rf. Se recomienda elegir un eluyente en
el que los componentes de la mezcla presenten un Rf medio en torno a 0.3-0.5.
Revelado de las placas La mayor parte de las placas de cromatografa llevan un
indicador fluorescente que permite la visualizacin de los compuestos activos a la
luz ultravioleta. El indicador absorbe la luz UV y emite luz visible. La presencia de
un compuesto activo en el UV evita que el indicador absorba la luz en la zona en
la que se encuentra el producto, y el resultado es la visualizacin de una mancha
en la placa que indica la presencia de un compuesto.
Resultados
Experimento 1

Muestra 1A, 1 aplicacin, tres aplicaciones, nueve aplicaciones.

Experimento 2

Muestra 2A y 3A, hexano, acetato de etilo y metanol.

Rf en hexano; 2A=(1.5cm/4.8cm)= 0.31
3A=(1.3cm/4.8cm)= 0.27
Rf en acetato de etilo; 2A=(2.5cm/4.8cm)=0.52
3A=(3.3cm/4.8cm)=0.68

Rf en metanol; 2A=(3cm/5cm)=0.6
3A=(3.6cm/5cm)=0.72
Experimento 3

Muestras 4A y 5A.
Anlisis de resultados
En el experimento 1 podemos observar tres manchas, las dos ltimas no estn
bien definidas y son de un gran tamao. stas dos manchas son corresponden a
las 3 y 9 aplicaciones, mientras que la primer mancha que qued ms puntual es
la de 1 sola aplicacin con el capilar.

En el experimento 2 podemos ver que las muestras 2A y 3A se quedaron casi a la

misma altura de donde fueron implantadas, el Rf de ambas fue muy pequeo, de
0.31 para la muestra 2A y de 0.27 para 3A. En cambio para el acetato de etilo
vemos que las muestras se comportaron mejor, con un Rf de 0.52 para el 2A y de
0.68 para el A. Por ltimo vemos que con el metanol los Rf de ambos compuestos
se elevan, siendo 0.6 para 2AA y 0.72 para el 3A.
En el experimento 3 vemos que ambas manchas corrieron bien y a la misma
altura, pero en la segunda, la 5A podemos observar que hay una pequea
mancha, cosa que no se observa en la muestra 4A.
Conclusiones
Del experimento 1 podemos llegar a la conclusin que mientras ms concentrada
este la muestra (ms aplicaciones), la mancha que dejar ser menos fina y ser
mucho ms difcil de distinguir, por lo tanto, para realizar una mejor lectura, lo
recomendable es realizar menos aplicaciones, ya que as es ms fcil observar el
movimiento de nuestra muestra problema.
En cuanto al experimento 2, podemos llegar a la conclusin que el mejor
disolvente para nuestras muestras problema fue el acetato de etilo, ya que
tuvieron un Rf bastante parecido a 0.5 lo cual nos dice que no es excesivamente
polar o no polar, mientras que el hexano result tener un Rf menor a 0.5 esto
debido a que es bastante no polar y por otro lado el metanol obtuvo un Rf mucho
mayor a 0.5 lo cual nos dice que es bastante polar para nuestras muestras.
Por ltimo, en el experimento 3 podemos concluir que ambas muestras tenan un
componente igual ya que corrieron igual y llegaron a alturas iguales, pero la
segunda muestra, la 5A tuvo una mancha, por lo cual podemos concluir que la
muestra era menos pura que la 4A y tena una cantidad considerable de
impurezas que eran menos polares y por eso quedaron ms abajo que la muestra
5.
Cuestionario
a) Cmo se elige el eluyente para cromatografa en capa fina?
Se tiene que ver la polaridad de la sustancia problema y compararla con la de
varios eluyentes, esto en caso de conocer la polaridad de nuestra muestra,
pero si no se sabe con certeza, se tendrn que hacer varias pruebas y el
eluyente que llegue a tener un Rf igual a 0.5 o bastante parecido, es el que se
utilizar.
b) El valor de Rf depende del eluyente utilizado?
En parte, podemos decir que s, pero tambin tiene que ver con la polaridad de
nuestra sustancia problema, ya que si tenemos por ejemplo un eluyente
bastante polar, con una sustancia problema no polar el Rf ser distinto al caso
de tener una sustancia problema bastante polar.
c) Qu significa que una sustancia tenga?
1.Rf<0.5 Eluyente poco polar.
2.Rf=0.5 Eluyente ideal

3.Rf>0.5 Eluyente muy polar

d)Por qu se dice que la cromatografa en capa fina es un criterio parcial y
no total de identificacin?
Esto se debe a que podremos tener sustancias con polaridades parecidas y que
se comportarn igual ante los distintos eluyentes que les apliquemos, aunque
estos casos son muy raros pero si llegara a pasar puede ser necesario repetir el
procedimiento eluyndolo varias veces para lograr una separacin eficiente.
e)Cul ser el resultado de los siguientes errores en cromatografa en capa
fina?
1. Aplicacin de solucin muy concentrada. Se llegar a observar una gran
mancha en la capa y la lectura del movimiento de la muestra tendr muchos
errores, as como la identificacin de impurezas.
2.Utilizar eluyente de alta polaridad. La muestra se correr bastante, casi a la
par del eluyente, lo cual no nos dejar observar si tiene impurezas, ya que estas
corrern en la misma magnitud.
3.Emplear gran cantidad de eluyente en la cmara de cromatrografa. La
muestra podr disolverse totalmente en el eluyente, y quedar en el eluyente de la
cmara, no se observar nada en la placa al revelarla.
Bibliografa:
Petrucci Herring. (2012). Qumica General. Mxico: Pearson.
Chang Raymond, (2010). Qumica General. Mxico: Mc GrawHill.