4.

Datos
Concentraci
n
10-1

BLANCOS
E.Coli
LB+Penicilina

10-1

LB+Penicilina

10-7

Agar MacConkey

10-8

Agar MacConkey

10-9

Agar MacConkey

Colonias
Incontabl
e
Incontabl
e
Incontabl
e
Incontabl
e
Incontabl
e

Tabla N1. Formacin de colonias mutadas (UFC/mL)

Agar MacConkey
Dilucin
10-7
10-8
10-9

Nmero de Colonias
Incontable
99
5

Tabla N2. Formacin de colonias mutadas (UFC/mL) con el cultivo expuesto a la luz UV y luz blanca en
agar MacConkey.

Dilucin
10-4
10-5
10-6

Nmero de Colonias
Incontable
Incontable
268

Tabla N3. Formacin de colonias mutadas (UFC/mL) con el cultivo expuesto a la luz UV y no expuesto a
luz blanca en agar MacConkey.

Agar LB Penicilina
Dilucin
10-1
10-1

Nmero de Colonias
-

Tabla N4. Formacin de colonias mutadas (UFC/mL) con el cultivo expuesto a la luz UV y luz blanca en
agar LB+Penicilina.

Dilucin
10-1
10-1

Nmero de Colonias
-

Tabla N5. Formacin de colonias mutadas (UFC/mL) con el cultivo expuesto a la luz UV y no expuesto a
luz blanca en agar LB+Penicilina.

5. Clculos:
La siguiente ecuacin permite calcular la tasa de mutacin:

Tasade mutacin=

Nmero de colonias
Nmero de colonias en el blanco

Debido a que las colonias formadas en el blanco fueron incontables, no se puede determinar la tasa
de mutacin global.
6. Resultados
6.1 Agar MacConkey

Imagen N1. Crecimiento de la bacteria E. coli en la dilucin

de 10-4 del cultivo recubierto de aluminio.

Imagen N2. Crecimiento de la bacteria E. coli en la

dilucin de 10-5 del cultivo recubierto de aluminio.

Imagen N3. Crecimiento de la bacteria E. coli en la dilucin

de 10-6 del cultivo recubierto de aluminio.

Imagen N4. Crecimiento de la bacteria E. coli en la

dilucin de 10-7 del cultivo no recubierto de aluminio.

Imagen N5. Crecimiento de la bacteria E. coli en la dilucin

de 10-8 del cultivo no recubierto de aluminio.

Imagen N6. Crecimiento de la bacteria E. coli en la

dilucin de 10-9 del cultivo no recubierto de aluminio.

Imagen N7. Crecimiento de la bacteria E. coli en la dilucin

de 10-7 del cultivo no expuesto a luz UV.

Imagen N8. Crecimiento de la bacteria E. coli en la

dilucin de 10-8 del cultivo no expuesto a luz UV.

Imagen N9. Crecimiento de la bacteria E. coli en la dilucin de 10-9 del cultivo no expuesto a luz UV.

Agar LB
5.2 Resultados del cultivo en el agar LB despus de ser sometidos a la luz UV.

Imagen N10. Crecimiento de la bacteria E.coli de la dilucin 10-1 en cultivo no cubierto de

aluminio.

Imagen N11. Crecimiento de la bacteria E.coli de la dilucin 10-1 en cultivo cubierto de

aluminio

Imagen N12. Crecimiento de la bacteria E.coli de la dilucin 10-1 en cultivo no expuesto a luz
UV

7. Anlisis
Al observar las imgenes 7, 8, y 9, siendo estos los cultivos sembrados en agar MacConkey que no
fueron expuestos a la luz UV se puede observar la aparicin de colonias rosadas o rojas, producidas
por la disminucin del pH alrededor de la colonia debido a la utilizacin de lactosa en el medio.
http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/maconkeyagar.htm Se puede observar un mayor
crecimiento de colonias en la dilucin de 10-7, y un menor crecimiento en la dilucin de 10-9.
Al exponer la bacteria a 1 minuto y 20 segundos de luz ultravioleta, se pueden observar los agares
MacConkey sin foto reactivacin en las imgenes 1, 2 y 3 se encontr que en las diluciones de 10 -4,
10-5 y 10-6 poco crecimiento respecto a las diluciones mencionadas anteriormente. Las imgenes 4, 5
y 6 muestran el crecimiento de la bacteria estudiada en la presente prctica, Escherichia coli,
expuesta a UV y foto reactivacin, se observa un crecimiento de la bacteria aunque se ve un
disminucin en el crecimiento con respecto a los cultivos que no fueron expuestos a la luz UV.
Las radiaciones UV inducen la formacin de dimeros de pirimidina donde se enlazan lineal o
cclicamente dos restos de timina vecinos que distorsionan el ADN y constituyen un problema para
la ADN-polimerasa. Existen formas de corregir los errores del ADN mutado, entre ellos, la enzima
ADN-fotoliasa separa el anillo de ciclobutano de los dmeros de timina que se haban enlazado con
ayuda de dos cofactores que absorben la luz. https://books.google.com.co/books?
id=X2YVG6Fzp1UC&pg=PA316&dq=fotoliasa,+la+cual+ayuda+a+los+d

%C3%ADmeros+de+pirimidina&hl=es&sa=X&ei=IFVJVd_iJcSZgwTN_oDADg&ved=0CBsQ6A
EwAA#v=onepage&q=fotoliasa%2C%20la%20cual%20ayuda%20a%20los%20d%C3%ADmeros
%20de%20pirimidina&f=false Es por esto que, como se puede observar en la presente prctica, el
crecimiento de la bacteria en los cultivos no expuestos a la luz visible estuvo ms restringido que en
los cultivos con la bacteria mutada expuesta a la misma luz, puesto que los daos que se generaron
a partir de la exposicin de la E. coli a la luz ultravioleta pudieron ser revertidos gracias a la enzima
fotoliasa.
Por otra parte, el agar MacConkey posee presencia de lactosa para el aislamiento de bacilos
entricos Gram-negativos. http://laboratorioclinico-ldc.blogspot.com/2008/11/tutorial-sobre-lasptc.html En Escherichia coli el gen de la galactosidasa, usada para fermentar los azcares de la
lactosa, LacZ est presente como parte del opern lac que es activado en presencia de lactosa con
niveles bajos de glucosa. http://apuntesbioquimicageneral.blogspot.com/ La bacteria E. coli al ser
mutada tiene la capacidad de catalizar la hidrlisis de la lactosa en glucosa en el medio, pero si no
es
mutada,
no
se
genera
crecimiento
bacteriano.
http://pendientedemigracion.ucm.es/info/genetica/grupod/Operon/Operon.htm
No se encontr crecimiento en los agares LB-penicilina, adicionalmente no se pudo determinar la
tasa de mutacin, esto ltimo debido a que muchos de los resultados de la cantidad de colonias en
muchas de las cajas de Petri utilizadas eran incontables, todo esto se pudo producir gracias a la
incorrecta y poco homognea siembra del cultivo en los agares previstos para la presente prctica.
Se esperaba un alto crecimiento de la bacteria E. coli en los agares mencionados previamente,
debido a la poca actividad que tiene la penicilina frente a esta bacteria gracias a la alta prevalencia
de
betalactamasas.
http://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-microbiologiaclinica-28-articulo-evolucion-del-patron-sensibilidad-aislados-13073144