Membranas celulares y del glbulo rojo

Conceptos de gentica
Rene L. Crisp
reneecrisp@gmail.com

Departamento de Qumica Biolgica

Facultad de Ciencias Exactas y Naturales - UBA

Servicio de Hematologa Dpto Medicina

Hospital Nacional Prof. A. Posadas

MEMBRANA PLASMATICA
Define los lmites de la clula
Separa el interior del exterior
NO la aisla:
barrera altamente selectiva,
regula el intercambio de materiales entre la clula y el medio
que la rodea.
Espesor: 3 -10 nm (segn tipo celular)
No se ve al microscopio ptico
Se ve al microscopio electrnico

MODELO: MOSAICO FLUIDO (Singer y Nicholson 1972)

disoluciones bidimensionales de lpidos y protenas
COMPOSICIN DE LAS MEMBRANAS BIOLGICAS
Todas las membranas biolgicas de los seres vivos, tanto la membrana plasmtica,
como las de las organelas, estn formadas por:

A. Lpidos
B. Protenas
C. Hidratos de carbono
unidos a lpidos (glucolpidos)
unidos a protenas (glucoprotenas)

DIFUSION LATERAL
Sus lpidos y protenas pueden desplazarse
libremente en todas las direcciones, pero
siempre sobre el plano de la membrana.

LIPIDOS

Las membranas no son estructuras estticas ni rgidas.

DISTRIBUCIN
ASIMTRICA

Sus lpidos y protenas pueden desplazarse libremente en todas las direcciones, pero siempre
sobre el plano de la membrana. (Difusin lateral).
Flexin y rotacin de las cadenas de cidos grasos.
FLIP-FLOP: no es un movimiento que ocurra de manera espontnea. Est mediado por
enzimas denominadas flipasas. (exposicin de fosfatidilserina = dao celular o envejecimiento)

Protenas
Diferentes membranas tienen distinta proporcin y composicin de protenas, de
acuerdo a sus funciones.
Rol estructural
Funciones especficas: transporte, reconocimiento, enzimticas, etc

Ancladas va GPI
glicosil fosfatidil
inositol

Protenas integrales

Protenas perifricas

Hidratos de carbono
Las membranas celulares contienen entre un 2-10% de glcidos.
Se asocian covalentemente a los lpidos (glicolpidos) y a las protenas (glicoprotenas).
Poseen muchas cargas negativas, que atraen cationes y agua del medido extracelular.
Intervienen en el reconocimiento y adhesin celular. Actan como una huella dactilar
caracterstica de cada clula, que permite distinguir lo propio de lo ajeno.

SISTEMAS de GRUPOS SANGUINEOS

5 sistemas : estructuras antignicas formadas por carbohidratos
2 sistemas: son adquiridos desde el plasma
23 sistemas: estructuras antignicas de protenas de la membrana
eritrocitaria

ESTRUCTURA DE LAS PROTEINAS

Estructura primaria
Estructura secundaria
Estructura terciaria
Estructura cuaternaria

ESTRUCTURA PRIMARIA
Secuencia de los aminocidos

ESTRUCTURA SECUNDARIA
Ordenamientos espaciales regulares, a lo largo de un eje, encontrados
en forma recurrente en las cadenas polipeptdicas.
Dos ordenamientos comunes:
-hlice
plegamiento

hlice

Plegamiento

ESTRUCTURA TERCIARIA
Ordenamiento espacial de hlices y plegamientos que dan lugar a la estructura
globular (ej albmina) y la estructura fibrilar (ej: fibringeno).

Estructura globular

Estructura fibrilar

ESTRUCTURA CUATERNARIA
(Cuando una protena est constituda por dos o ms cadenas peptdicas)

Interaccin de dos o ms cadenas polipeptdicas que forman la

protena

Estructura cuaternaria

PROTEINAS CHAPERONAS
Plegamiento de la protena recin formada
Transporte celular a otra parte de la clula donde la protena realiza su funcin
Ensamblaje en el lugar donde la protena debe ejercer su funcin
Si la nueva protena no se ensambla correctamente, se degrada.

Determinante antignico o epitope

Parte de la molcula que es reconocida por el anticuerpo

Estructural: secuencia de aminocidos

(estructura primaria de la protena)

Conformacional: estructura secundaria de una

zona restringida de la protena. Son sensibles a sufrir
desnaturalizacin.

Topogrfico o discontinuo: formado por

aminocidos distantes en la estructura primaria, pero
que quedan prximos por la estructura terciaria o
cuaternaria

Los epitopes topogrficos pueden estar en una sola protena o

estar constituidos por la proximidad de ms de una protena.

MEMBRANA ERITROCITARIA
Bicapa
Citoesqueleto
Funcin: elasticidad,
deformacin

Las protenas del citoesqueleto

carecen de contacto directo con
el componente lipdico de la
membrana.
La unin del citoesqueleto a la
bicapa se establece por medio
de protenas integrales (banda 3
y glicoforina C)

Interacciones
Verticales

Son perpendiculares al plano de la

membrana.

Interaccin de protenas del

esqueleto con protenas integrales.

Unen el citoesqueleto con la

membrana plasmtica.

Estabilizan la bicapa lipdica.

(Esferocitosis)

Horizontales

Son paralelas al plano de la membrana.

Interaccin entre las protenas del

citoesqueleto.

Integridad del citoesqueleto.

Capacidad de deformacin.

(Eliptocitosis)

Las protenas ms abundantes son la Banda 3 y la glicoforina A ( 1.000.000 copias / cel)

Varias de las protenas de los grupos sanguneos se encuentran asociadas formando

macrocomplejos.
Los complejos se unen mediante interacciones proteicas con las protenas del
citoesqueleto.

Alteraciones en una protena puede tener consecuencia en las otras.

ALTERACIONES EN LAS PROTEINAS

Durante el proceso de Sntesis

Durante el
envejecimiento celular

Intervalo!!!!!

El Dogma de la Biologa Molecular

DNA RNA protena

replicacin

transcripcin y
empalme

traduccin

El Dogma de la Biologa Molecular

DNA RNA protena

Transcripcin
(sntesis de ARN)

Traduccin
(sntesis de protena)
AUG

CGU

UCU
Triplete: una secuencia de tres bases necesaria
para especificar un amino cido (codn).

Protena

EL CDIGO GENETICO
En 1966, Nirenberg, Ochoa y

Khorana dilucidaron el cdigo

gentico, que relaciona una
secuencia de nucletidos con
una de aminocidos.
Cada aminocido de una
protena es codificado por una
secuencia de 3 nucletidos del
RNA: un codn. El cdigo
gentico es redundante, debido
a que hay solo 20 aminocidos
y 43 = 64 combinaciones para
codones. Solo metionina (AUG)
y triptofano (UGG) son
codficados por un codn.

El DNA se enrolla alrededor de protenas (histonas) y se

compacta organizndose en cromosomas

Durante la divisin celular, el DNA se duplica y se observan cromosomas metafsicos

Cromosomas:

estructuras
informacin gentica.

que

llevan

Clula somtica humana

46 cromosomas (23 pares)
22 pares homlogos autosomas
1 par de cromosomas sexuales
XX =mujer
XY = hombre
Cada par cromosmico est constituido por un
cromosoma derivado del padre y otro de la madre.
Los cromosomas pueden visualizarse durante la divisin celular (mitosis). La tincin con
Giemsa muestra un patrn de oscuras (Bandas G) y bandas claras reversas (bandas R)

Cada cromosoma posee dos secciones o brazos unidos por el

centrmero. El brazo corto p se lo ubica en la parte
superior del diagrama. El brazo largo q en la parte inferior
del cromosoma

Durante la divisin celular, el DNA se duplica y se observan cromosomas metafsicos

No confundir las representaciones de los cromosomas metafsicos con el par cromosmico
Cromtides hermanas

Cromosomas metafsicos

Par Cr 5

Un Cr 5 metafsico

Los cromosomas se distinguen por su largo y por la posicin del centrmero.

El cromosoma 1 es el ms grande y el 22 el ms pequeo

Cariotipo 46XX

Las bandas se numeran desde el centrmero hacia afuera.

La regin ms cercana al centrmero es la 1 (p1 q1).
Cada regin se subdivide en bandas ms finas que se
numeran con el mismo criterio, ej : p11, p12, etc
Esta nomenclatura permite describir la ubicacin de los
genes en los cromosomas.
Un gen es una secuencia ordenada
de nucletidos en la molcula de ADN que
contiene la informacin necesaria para la sntesis
de una macromolcula con funcin celular
especfica.
Locus: posicin que un gen ocupa en el

cromosoma (es un concepto principalmente

topogrfico).
Los genes que codifican los 30 sistemas de grupos sanguneos han sido localizados en
cromosomas especficos

Los Cr se duplican
Se separan las cromtides hermanas
Se generan 2 clulas diploides (46 Cr) idnticas a la original
Clulas somticas

MITOSIS

Clulas reproductivas

MEIOSIS

Los Cr se duplican
Existe cruzamiento: intercambio de material gentico entre Cr homlogos
1) Se separan los cromosomas homlogos
2) Se separan las cromtides
Se generan 4clulas haploides (23 Cr) no necesariamente idnticas a la original (gametas)

Lyonizacin = inactivacin de genes del cromosoma X

Mecanismos de compensacin de dosis gnica, evitndose que las hembras
expresen el doble de producto gnico por disponer de 2 cromosomas X (frente
a un X y otro Y en los machos).
Las mujeres tienen 2 cromosomas X y los hombres slo uno.
En las mujeres muchos de los genes de uno de los cromosomas X se inactivan.
Todas las clulas somticas tendrn el mismo Cr X inactivado (puede ser el materno
o el paterno)
Algunos genes escapan a la inactivacin

La inactivacin del cromosoma X no es completa, es decir, no afecta a todos los

genes del cromosoma. Se estima que:
65% de los genes presentes en el cromosoma X se inactivan
20% de los genes se inactivan slo parcialmente (es decir, no estn inactivados
en todas las clulas)
15% escapan totalmente al proceso de inactivacin. Es decir que, para esos
genes, existen dos copias funcionales en mujeres XX pero slo existe una copia
en varones XY.

GENOTIPO
Genes heredados por cada persona de sus padres. Aunque puede referirse a
todos los genes generalmente se refiere a UN LOCUS. (Sitio preciso de un
cromosoma donde est situado un gen determinado)
FENOTIPO
Expresin observable de los genes heredados, refleja la actividad biolgica de los
genes. Por ej en el grupo ABO, el fenotipo B puede tener genotipo B/B B/0

MARCADOR GENTICO
Cualquier sitio en el genoma donde exista una variacin del DNA que se detecta
como una diferencia entre individuos de una poblacin. Es el resultado de un
cambio permanente en el DNA.
Si la diferencia es rara, se denomina MUTACIN (<1% poblacin normal),
si en cambio es comn hablamos de POLIMORFISMO (>1% poblacin normal)

ALELO
Cada una de las copias de un gen. Cada persona tiene dos cromosomas homlogos y
por lo tanto tiene 2 alelos de cada gen. Tambin se denomina as las distintas variantes
de un gen (polimrficas o mutadas = Ej: alelos A, B, O )
HOMOCIGOTA
Tiene los dos alelos iguales para un dado gen. Por ej grupo O (ABO)
HETEROCIGOTA
El individuo tiene dos alelos diferentes para un dado gen.
Por ej grupo AB (ABO)
CARCTER GENTICO: expresin observada de un gen
Carcter dominante: si se expresa cuando el alelo est presente (heterocigota): ej Grupo A
Carcter recesivo: la caracterstica no se expresa a no ser que est en ambos alelos: ej Grupo0
Una mutacin es el resultado de un cambio permanente en el DNA (es un error que se
produce al copiarse el DNA)
La mutacin debe generarse en las clulas germinales para ser heredada
Se genera un alelo nuevo que no exista en los padres.

Mutaciones y polimorfismos pueden tener efecto

beneficioso, perjudicial o nulo.

SUSTITUCIN de una base

Los efectos pueden ser:

DISTINTOS TIPOS DE MUTACIONES

ALTERACIONES MOLECULARES

Cambio del aminocido codificado en la protena (puede tener o no consecuencias en el

funcionamiento de la protena) : mutacin MISSENSE
Ningn cambio (Cdigo redundante): mutacin NONSENSE
Detencin de la sntesis proteica (se gener un codn de STOP: UAA, UAG, UGA)

INSERCIONES DELECIONES
Se genera un corrimiento o cambio en el marco de lectura (frameshift)

ALTERACIONES A NIVEL CROMOSMICO

Afecta a todo el cromosoma o a algn (os) gen (es)

Las mutaciones pueden afectar distintas zonas de un gen

Producto gnico alterado
Empalmes alternativos
Iniciacin alternativa

ALTERACIONES
CROMOSMICAS

TIPOS DE HERENCIA
Segn el tipo de cromosoma:
Herencia autosmica (el gen est en alguno de los autosomas: Cr 1-22)
Herencia ligada al sexo (el gen est en el cromosoma X).
Los varones son hemicigticos (un solo Cr X)
Las mujeres tienen un Cr X inactivo (Lyonizacin)

Segn el nmero de alelos mutados necesarios para su expresin:

Herencia dominante (un solo alelo mutado es suficiente para manifestarse)
Herencia recesiva (slo se manifiesta si los dos alelos estn mutados)

Patrones bsicos de herencia:

Autosmica dominante
Autosmica recesiva

Ligada al sexo dominante

Ligada al sexo recesiva

FENOTIPO HOMOCIGOTA = FENOTIPO HETEROCIGOTA HERENCIA DOMINANTE

FENOTIPO SOLO SE EXPRESA EN HOMOCIGOTAS HERENCIA RECESIVA

LEYES DE MENDEL
Ley de Segregacin independiente
Durante la formacin de gametos, los pares allicos de cromosomas se separan y se
distribuyen en gametos diferentes. Slo se transmite un miembro del par allico en cada
gameta
B
A
Segregacin independiente
B/O
A/O
Los alelos ABO se transmitieron
aleatoriamente . Cada hijo hered una
O
AB
B
A
combinacin diferente de los alelos de sus
B/O
O/O
A/O
A/B
progenitores

Ley de Recombinacin independiente

Los alelos se heredan independientemente. La herencia del alelo de un par allico no ejerce
influencia sobre la herencia del alelo de otro par
M+N+

B
B/O ; M/N

B
B/O; M/N

M+N+

O
O/O; M/N

M+N+

M+N-

A/O; M/M

A
A/O; M/M

M+N-

AB

Recombinacin independiente
Los alelos ABO y MNS se heredan
independiente entre ellos. El alelo N est
presente tanto si hered el alelo B como el
alelo O paterno.

A/B; M/M

M+N-

Se verifica si los genes se encuentran

en diferentes Cromosomas

Cmo se heredan los genes que estn en un mismo cromosoma?

Genes ligados
Los genes que se encuentran prximos entre ellos tienden a transmitirse juntos.
Ej: en el Cr 4 estn los genes que codifican los antgenos MN y Ss. Estn adyacentes y se
transmiten como un conjunto. Progenitor MS/Ns hijos con haplotipo MS Ns
Progenitor
M
S

haplotipo:
combinacin de alelos en dos o
ms loci prximos en el mismo
cromosoma.

N
s

Gametas del Progenitor

M
S

M
S

N
s

N
s

Slo dos haplotipos posibles:

MS y Ns

Entrecruzamiento o recombinacin
Intercambio de material gentico entre pares de cromosomas homlogos. Ocurre en la etapa
temprana de la meiosis. Permite generar nuevas combinaciones de genes en los cromosomas
involucrados
Progenitor

Gen 1

Gen 2

Dos genes no ligados, portados en un mismo

cromosoma, pueden heredarse de acuerdo a la
recombinacin independiente. Al estar alejados
pueden presentar entrecruzamiento y
transmitirse independientemente.
Se llaman genes sintnicos.

Gametas del Progenitor

Gametos
diferentes a las
parenterales

BANDA 3
1.000.000 copias /clula

Protena integral de la bicapa

Unin bicapa citoesqueleto
Transportador de aniones
Banda 3: Ag de Sistema Diego

Protena glicosilada Ag A, B, H, I, i
Marcador de senescencia

BANDA 3
Funcin:

Protena intercambiadora de aniones (forma parte de un macrocomplejo)

Unin de la bicapa al citoesqueleto estabilizacin de la membrana

Su deficiencia parcial genera

Su deficiencia total es incompatible con la vida.

Esferocitosis Hereditaria

Anemia hemoltica

Wrb

Los antgenos del Sistema Diego se encuentran

localizados en la superficie de la Banda 3
Para la expresin del antgeno del Sistema
Diego Wrb se requiere de la presencia de
Banda3 y glicofA.

Ag topogrfico

Azul: polimorfismos Sistema Diego

Naranja: mutaciones en anemias hemolticas
Verde: mutaciones que alteran en su funcin

Sistema Rh
Surge por duplicacin de un gen ancestral
2 genes ligados y
altamente homlogos

La protenas Rh difieren
en 32-35 aminocidos
(de los 417)

Complejo
2 protenas RhAG (codificadas por el Cr 6)
2 protenas Rh (D y CE)
Macrocomplejo: B3, RhAG, Rh, LW, glicofA y B
Funcin
Transportador de cationes
Transportador de gases
Estructura de membrana

Ausencia de RhAG Rh null

MUTACIONES en el gen RHD

Consecuencias (se conocen ms de 100)
Alteraciones cuantitativas de Rh D

Mutaciones a nivel intracelular o

en zona de transmembrana
impiden que quede bien
anclada
Es una alteracin cuantitativa

Alteraciones topogrficas: diferentes epitopes

Mutaciones a nivel extracelular

alteran o crean nuevos
epitopes

No pueden distinguirse serolgicamente con los reactivos comerciales

Los genes RHD y RHCE pueden recombinarse

Exones RH
Exones RHCE

Rh D negativos
Hay diferentes genotipos
Delecin total del gen RHD (Caucsicos)

Generacin de un pseudogen: Stop prematuro

por duplicacin de 37 pb no se sintetiza una
protena funcional ( Africanos: 66% de los Rh
negativos africanos)

Formacin de un gen hbrido RHD-CE-D: el gen

no expresa el antgeno D y expresa el Ag C
alterado ( Africanos: 15% de los Rh negativos)

Gracias por su atencin!