EVALUACIN

SEROLGICA
DE
Caninum
EN
BOVINOS
en
_________________________________________

NEOSPORA
COLOMBIA

Dr. Jorge Luis Zambrano V. 1Dr. Vctor Cotrino B. 1Dra. Claudia

Jimnez E. 1Profesor Asistente. Facultad de Medicina Veterinaria
y de Zootecnia Universidad Nacional de Colombia. 2Dra. Mariana
2
Romero.
Bacteriologa.
Laboratorio
Mdico
Veterinario
L.M.V.
3
Dr. Bernardo Guerrero. 3 Mdico Veterinario. Laboratorios Pfizzer.
RESUMEN
Neospora caninum es un protozoario que ha adquirido gran importancia a nivel
mundial al ser implicado en 1989 como una de las principales causas de aborto
en bovinos. Se ha reportado desde entonces en: Australia, Nueva Zelandia,
Estados Unidos y la mayora de los pases europeos, tambin en el Japn
(Ogino y col, 1992) e Israel Harmelin y col, 1995. El Estado de California (USA)
es una zona endmica de la enfermedad con prevalencias del 33% en los
hatos lecheros y con una variacin del 20 al 40% (Anderson y col., 1991).
Adems se ha identificado en el 24.4% de los fetos abortados sometidos a
exmenes histopatolgicos en los laboratorios de referencia. En Amrica
Latina solo existe un reporte de actividad serolgica en Argentina (Venturini y
col, 1995) y otro en Mxico donde adicionalmente se demostr la presencia del
parsito (Mendoza, 1997).
El primer aislamiento se produjo solo hasta 1991 (Conrad y col), y en 1988
McAllister y col definen al perro como el husped definitivo, es decir en el cul
se cumplen la fase sexual del protozoario.
En este primer reporte nacional, se evaluaron 357 sueros bovinos procedentes
de 74 fincas que tenan problemas de tipo reproductivo con aborto en
diferentes edades de la gestacin y para los cuales no fue posible definir un
diagnstico serolgico para entidades como Brucelosis, Leptospirosis, IBR y
DVB.
El haber encontrado un 54% de sueros con una reaccin positiva a la prueba
de ELISA, abre la posibilidad de la presencia de N. Caninum como agente
causal de la muerte en bovinos y crea la necesidad de adelantar
investigaciones con miras a la demostracin o no de esta entidad en nuestro
medio.
REVISIN DE LITERATURA

HISTORIA
La historia de neosporosis se inicia en 1984 con un reporte de Bjerkas en
Noruega de un caso de encefalitis y miocarditis en caninos, producido por un
protozoario. Dubey y col en 1988 propusieron el nombre de Neospora caninum
y lograron comprobar los postulados de Koch en esta especie. Thilsted y col en
1989 reporta su participacin como causa de aborto en bovinos y un ao
despus Dubey y su grupo demostraron la transmisin transplacentaria en
caninos, felinos, ovinos y bovinos. En el ao de 1991 fue considerada como la
mayor causa de abortos bovinos en el Estado de California. En 1993 Conrad y
col logran reproducir la enfermedad al inocular taquizoitos en bovinos en forma
experimental.
Desde el punto de vista diagnstico el mismo Bjerkas en 1991 report que las
cepas aisladas en caninos son idnticas a las aisladas en bovinos. Con este
hallazgo y el desarrollo de tcnicas de diagnstico inmunohistoqumico
(Lindsay, 1989) y de ELISA (Bjorkman, 1994) se amplan las herramientas
diagnsticas. A pesar de los estudios realizados quedaban por definir algunos
aspectos relacionados con el ciclo de vida del protozoario especialmente
referentes con el husped definitivo de la entidad, y aunque este tema fue
elaborado desde 1988 por varios autores como Dubey y col, solamente en
1998 el grupo de McAllister y col, logran definir al perro como husped
definitivo al haber demostrado la presencia de ooquistes en materia fecal de
animales alimentados con tejidos infectados de taquizoitos.
PATOGENESIS
La Neosporosis es una enfermedad que se ha detectado en la mayora de las
especies domsticas: bovinos, ovinos, caprinos, equinos, ciervos y caninos
(Anderson, 1996).
La ruta de transmisin mejor descrita e identificada hasta el momento es la va
transplacentaria la cul parece ser la forma ms importante para mantener la
infeccin en los hatos debido a la eliminacin del parsito a travs de los fetos
abortados o por el nacimiento de terneros congnitamente infectados (Par y
col, 1996).
Thurmond y Hietala, 1998, proponen tambin la posibilidad de infeccin
postnatal basados en el hecho encontrar que de las terneras nacidas en hatos
con seropositividad del 30 50% solamente el 1 2% de ellas presentaban
una infeccin. Adicionalmente las terneras nacidas de vacas seronegativas
alimentadas con calostro y leche de seropositivas no presentaron
seroconversin. Se document que la evidencia de infeccin post natal es ms
frecuente desde el sexto mes de vida cuando el animal ya consume una dieta
mixta. Por esta razn y debido a su similitud con el Toxoplasma gondii, se
propone que puede haber transmisin por va oral a travs del consumo de
forrajes contaminados con materia fecal de caninos u otros carnvoros que
actuaran como huspedes definitivos.

La transmisin entre carnvoros demostrada por Anderson, 1996, sucede a

travs del consumo de tejidos bovinos o de otros carnvoros infectados.
Con base en los trabajos realizados por Lindsay y col, en 1993, y la definicin
por McAllister y col, en 1998 del perro como husped definitivo; el ciclo de vida
de N caninum comprendera una fase sexual en el intestino del perro con la
formacin de ooquistes que al ser eliminados en las heces y posteriormente al
ser ingeridos por los bovinos dara el inicio de la fase asexual con la formacin
de quistes tisulares y taquizoitos en los tejidos del husped intermediario o del
feto y que al ser ingeridos por los caninos cerraran el ciclo epidemiolgico con
la formacin de ooquistes.
Los nicos estados bien conocidos hasta el momento son los taquizoitos y los
quistes tisulares que contienen bradizoitos los primeros se encuentran en
muchos tejidos de terneros infestados congnitamente y se relacionan con las
lesiones microscpicas. Los quistes tisulares, se han detectado igualmente, en
cerebro y medula espinal de los fetos, pero en estos casos no se hallan
asociados a lesiones microscpicas (Lindsay y col, 1996).
Los taquizoitos pueden crecer en cultivos celulares y son una fuente de
antgeno para el diagnstico serolgico (Veturini Col, 1995). Los primeros
cultivos se hicieron en monocitos bovinos y en clulas endoteliales de la arteria
cardio pulmonar, actualmente se utilizan las clulas VERO y los fibroblastos
humanos en forma rutinaria (Dubey y Lindsay, 1996).
SIGNOS CLINICOS
Los abortos pueden ocurrir en cualquier poca de la gestacin en manera
espordica o en forma de brotes. Un reporte de Neosporosis, en una finca en
Tasmania, describe una tormenta de abortos que afect a un 23.5% de las
vacas gestantes sin diferencia en el nmero de partos (Obendorf y col, 1994).
Los abortos se presentan entre los 90 y 240 das (158 10 das) de gestacin,
aunque la mayor presentacin (78%) se concentra entre los 4 y los 6 meses
(Lindsay y col, 1996).
En los casos reportados, no se han detectado signos clnicos previos al aborto,
que se caracteriza por la expulsin de un feto usualmente en estado autoltico
y que ocasionalmente presenta grados variables de momificacin (Bidfel col.,
1994), por lo general cursa sin retencin placentaria (Anderson y col., 1994).
Obendorf y col (1994), reportan que el 43.8% de las vacas que abortaron por
primera vez, lo volvieron hacer, sin definir si la infeccin se origin de los
quistes existentes en ellas o si se debi a una reinfestacin.
Las vacas infestadas con Neospora spp pueden parir terneros congnitamente
infestados y que se consideran importantes diseminadores de la enfermedad.
Dichos terneros pueden presentar sintomatologa nerviosa o pueden ser
portadores de tipo asintomtico (Anderson y col., 1994).

Se ha reportado una mayor prevalencia en las ganaderas de leche que de

carne, no porque haya una mayor resistencia de los ltimos a la enfermedad,
sino porque en las ganaderas de leche se manejan mayores densidades de
poblacin lo que favorece la diseminacin de la enfermedad (Anderson y col.,
1994).
DIAGNSTICO
Considerando Neosporosis como un entidad que puede producir aborto su
diagnstico se debe orientar hacia la diferenciacin con entidades bacterianas,
vrales y protozoarios que cursa con sintomatologa similar.
Especial nfasis en el diagnstico diferencial debe hacerse con el Toxoplasma
gondii considerando las similitudes taxonmicas, morfolgicas y
epidemiolgicas con Neospora. As mismo, se debe considerar el Sarcocystis
sp, el cul produce lesiones histolgicas similares.
Los cambios macroscpicos del aborto muestran un feto parcialmente
macerado , autolisado o momificado.
Los hallazgos histopatolgicos en fetos abortados, cuyos tejidos se pueden
teir con Hematoxilina Eosina son caracterizados por un infiltrado celular
mononuclear en el epicardio, miocardio, endocardio con necrosis multifocal
asociada con una leve mineralizacin y definida como una miocarditis no
supurativa (Boulton y col., 1995).
En el cerebro se encuentra necrosis focal y microgliosis dispersa (Ogino y col,
1992), que compromete los ndulos microgliales en la corteza particularmente
en las zonas adyacentes a los vasos sanguneos de la interfase de la materia
gris y blanca. Tambin se pueden encontrar taquizoitos intracelulares y
extracelulares, as como quistes tisulares en cualquier rea del cerebro y del
corazn. Se considera que el grado de lesin depende de la edad del feto y de
su inmunocompetencia (McNamee y Jeffrey, 1994).
Se han realizado pruebas inmunohistoqumicas con antisueros policlonales de
Neospora, para identificar el parsito en los tejidos y as diferenciarlos de los
otros protozoarios (Venturini y col., 1995). Es importante mencionar que el
anticuerpo generado contra N. Caninum es eficaz para detectar por
inmunohistoqumica los parsitos en fetos bovinos y que no existe reaccin
cruzada con el Toxoplasma o el Sarcocystes lo cul hace que la prueba sea
muy especfica (Barr y col., 1995). Se han detectado tcnicas con
inmunofluorescencia indirecta para detectar anticuerpos en fetos mayores de 5
meses de desarrollo y en neonatos congnitamente infestados. Si embargo es
importante anotar que una prueba negativa no elimina la posibilidad de que el
animal haya estado en contacto con la enfermedad. En el caso del animal
adulto la prueba es menos sensible debido a la disminucin de los ttulos entre
los 2 y los 5 meses despus del aborto, adicionalmente, la presencia de ttulos
con Neospora no confirman que la vaca haya abortado por esta causa, pues en
general las tasa de infestacin son ms latas que las del aborto (Barr y col.,
1995).

CONTROL Y PREVENCION
En la actualidad no existe una conducta de control, prevencin ni tratamiento
especfico para la enfermedad. Esto es principalmente debido a la poca
informacin que se tiene del parsito, de su comportamiento en los huspedes
intermediarios, ni del efecto que tendra la presencia de los animales
congnitamente infectados dentro de los hatos.
Las propuestas de control y prevencin sobre la infeccin congnita han sido
variadas, por ejemplo Lindsay y col (1989 y 1997), postularon el efecto benfico
del uso de antococcidiales para inhibir el desarrollo de la Neospora, pero no
pudieron definir realmente si su uso evitaba la infeccin o el aborto. Tambin se
ha propuesto la necesidad de implementar altas tasas de reemplazo o el
empleo de transferencia de embriones con novillas no infectadas.
Las medidas orientadas al control y prevencin de la infeccin postnatal se
fundamentan en el conocimiento del ciclo de vida del parsito. Aqu juegan un
papel importantisimo las poblaciones de caninos y probablemente de otros
carnvoros como contaminantes de forrajes y de fuentes de agua a travs de la
materia fecal. As mismo se debe limitar el acceso de los mismos al consumo
de tejidos bovinos que puedan estar contaminados como son las placentas o
las carcazas de animales muertos en la finca. Es muy importante la
identificacin de animales seropositivos y congnitamente infectados para
establecer normas de manejo dentro del hato como por ejemplo la cra
individual que disminuyan el riesgo de contacto e infeccin entre terneras.
En la actualidad se esta trabajando en la elaboracin de vacunas como un
mtodo de prevencin especfico.
ANTECEDENTES DEL MUESTREO
Como se mencion anteriormente, el diagnstico de las enfermedades relacionadas con
aborto, generalmente se orienta a las entidades de mayor incidencia histrica tales como I.B.R.
Brucelosis, Leptospira y D.V.B., esto disponibles en los Laboratorios a nivel nacional. Cotrino.,
1998, haciendo un anlisis de la casustica del ao anterior, menciona que para 263 fincas
evaluadas mediante diagnstico serolgico de las enfermedades anteriormente nombradas,
solamente las tres cuartas partes arrojan resultados positivos y la cuarta parte restante no
genera ningn tipo de informacin por lo cul no dan una aproximacin diagnstica.
Si se analiza la respuesta clnica a la aplicacin de biolgicos para el control de IBR, DVB, P13
y Leptospira que se utilizan en el pas, se han observado efectos variables a pesar de haber
empleado el biolgico previo diagnstico clnico y serolgico a una o varias de esas
enfermedades. Vale la pena mencionar que tradicionalmente en nuestro pas, no se realiza en
forma rutinaria el diagnstico de otras entidades patolgicas que tienen una fuerte influencia en
la presentacin de aborto como son : Listeria monocitogenes, Clamidia psitacii y Haemophilus
somnus entre otros.
MATERIALES Y MTODOS
Se procesan 357 muestras de vacas con historia de aborto y negativas serologicamente a:
Brucelosis, Leptospirosis, DVB e IBR.

Para sta primera evaluacin serolgica de Neospora, se utilizo un reactivo para ELISA:
Neospora caninum Antibody Test Kit Idexx Laboratories, Inc. Westbrook Maine USA)
El procesamiento de las muestras se realiz segn el instructivo suministrado por el fabricante.
De igual forma la valoracin y la interpretacin de los resultados donde un valor s/p inferior a
0.50 se considera negativo y mayor o igual como positivo.
Se evaluaron 357 sueros procedentes de 74 predios distribuidos as:
265 muestras de 60 explotaciones lecheras de la Sabana de Bogot
37 muestras de 7 fincas lecheras de Nario.
55 sueros de 7 fincas de clima clido.
DISCUSIN DE RESULTADOS
Queremos resaltar una vez ms, que el presente no es un estudio de prevalencia y la
seropositividad obtenida busca llamar la atencin en trminos de investigacin:
de los 357 sueros examinados 193 (54.1%) dieron valores s/p superiores a 0.50 lo que los
clasificara como positivos a la presencia de anticuerpos contra Neospora caninum.
Thurmond y Hietala en 1998, plantean el hecho de que los ttulos de anticuerpos no pueden ser
asociados directamente con la presentacin de aborto o infeccin Congnita, sin embargo
como ya se mencion, la presencia de anticuerpos de N. Caninum es un buen indicador de
exposicin natural al parsito.
Los mismos autores reportaron en 1995 que para el diagnstico serolgico en bovinos la
prueba de ELISA tena una especificidad del 97% con una sensibilidad del 89%, mientras que
la prueba de Inmunofluorescencia Indirecta (IFA) tena una especificidad entre el 82 92% y su
sensibilidad poda alcanzar el 87 90%. Vale la pena mencionar que un resultado negativo en
caso de aborto, no excluye la posibilidad de que el agente etiolgico sea Neospora y tambin
que no necesariamente las vacas seropositivas presenten aborto.
La seropositividad en fetos deber ser considerada como un indicador de infeccin pero no
necesariamente la causa del aborto, de hecho no hay una alta correlacin entre las lesiones
histolgicas del feto y su serolgia y/o de la madre.
El comportamiento serolgico de muestras pareadas en vacas abortadas no es tpico en
cualquiera de sus vas (Seropositivo a seronegativo y viceversa) en los casos de infeccin
natural (Dubey y col, 1996).
Se puede considerar que casos de infeccin congnita los ttulos persisten durante toda la vida
del animal, mientras que los anticuerpos calostrales derivados de la inmunidad pasiva solo lo
hacer por 4 5 meses en terneros no infectados (Thurmond y Hietala, 1998).
Basados en los resultados de seropositividad obtenidos, se realizaron consultas a la Dra.
Helena Davison, parasitloga de la Escuela de Medicina Tropical de Liverpool en Inglaterra,
quin hace un reporte de seropositividad del 18% en animales con problemas de aborto. La
Dra. Elizabeth Mendoza de la Universidad Autnoma de Mxico reporta una seropositividad
serolgica del 35 40 % en vacas abortadas. Las dos investigadoras coinciden en afirmar que
los dos resultados obtenidos en la presente investigacin son preocupantes y sintomticos de
una posible participacin de N caninum como causa de aborto en nuestro medio.
Vale citar la opinin del Dr. Jos Luis Azumendi sobre la participacin del Sarcocystes en el
problema reproductivo en Colombia. Si se considera la fuerte interrelacin taxonmica que
puede tener estos dos parsitos, es necesaria la diferenciacin de cada uno de ellos.

Lo ms importante de este informe preliminar, es llamar la atencin acerca de la probabilidad

de que ste patgeno este contribuyendo al problema reproductivo en nuestro medio e invitar a
la comunidad cientfica a que defina la presencia o no de Neospora y evale su impacto real en
la ganadera nacional. En forma adicional abre una importante perspectiva de investigacin en
la casustica de aborto haciendo nfasis en el diagnstico etiolgico, lo cul implica realizar un
trabajo ms intenso en las tcnicas de aislamiento viral, inmunohistoqumica, serologa pero
tambin obliga a la implementacin de estudios de corte epidemiolgico en esta rea.
DISCUSIN DE RESULTADOS
265
Sabana de Bogot
55
Clima Clido
37
Nario
Total Muestras: 357 sueros

RESULTADOS
193
(54.1%)*
*Valores s/p superiores a 0.50. Positivos a la presencia de anticuerpos contra Neospora caninum

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