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Ao de la Consolidacin del mar de Grau

Facultad de Ciencias
Escuela Acadmica Profesional de Ciencias
Biolgicas

AGENTES QUMICOS Y FSICOS SOBRE


MICROORGANISMOS

CURSO:

MICROBIOLOGA

INTEGRANTES:

LA TORRE RIVERA, Gina Stephany


MENDOZA ROJAS, Cesar Gabriel
ORREGO SNCHEZ, Mara
RAMREZ ORREGO, Lourdes Adriana

DOCENTE:

Mcblgo. Bermejo Benites, Jorge L.

CICLO:

V ciclo-UNP-2016

FECHA:

21/06/16

PIURA PER

AGENTES QUMICOS Y FSICOS SOBRE


MICROORGANISMOS
Los microorganismos ofrecen diversos beneficios a la sociedad en diferentes
formas. En otro aspecto son tambin los microorganismos un vehculo para la
produccin de enfermedades, por la produccin de toxinas propiamente
dichas o metabolitos txicos. Adems de daos en cultivos, descomposicin
de alimentos y enfermedades en animales. Es por esto que el ser humano ha
buscado los procedimientos necesarios para destruir o controlar el crecimiento
de los microorganismos perjudiciales.

DEFINICIONES IMPORTANTES
- Muerte microbiana: Prdida irreversible de la capacidad de reproducirse.
- Esterilizacin: Proveniente del latn sterilis incapaz de reproducirse.
Proceso por el cual las clulas vivas, esporas viables, virus y viroides
destruidos o eliminados de un objeto o hbitat.
- Desinfeccin: Destruccin, eliminacin o inhibicin de los microorganismos
que pueden producir enfermedad de una superficie u objeto. Se mantienen
viables las esporas.
- Germicida: Terminacin cida del latn que significa destruir. Es un agente
que puede destruir microorganismos patgenos y muchos no patgenos pero
no necesariamente esporas. (Bactericida, fungicida, viricida)
- Terminacin statico: proveniente del griego statikos que causa
detencin, agente con capacidad de inhibir el crecimiento microbiano, pero
sin matarlos. (Bacteriosttico, fungisttico).

I.

PROCEDIMIENTOS PARA EL CONTROL MICROBIANO

1.

MTODOS FSICOS
Los mtodos fsicos se utilizan a menudo para lograr la descontaminacin,
la desinfeccin y la esterilizacin microbiana.

A.

CALOR
La exposicin al agua en ebullicin durante 10 minutos es suficiente para
destruir clulas vegetativas, pero no es suficiente para destruir
endosporas. No esteriliza. La eficacia del calor como agente
antimicrobiano, se puede expresar como el Tiempo de muerte trmico
(TMT), que se define como el tiempo ms corto necesario para destruir
los microorganismos en una suspensin, a una temperatura especfica y

en condiciones definidas. Sin embargo como la destruccin es


logartmica no es posible eliminar completamente los microorganismos
de una muestra.
Existen diversos mtodos de control de microorganismos por medio del
calor:
a) Esterilizacin por vapor (calor hmedo o autoclave): El agua es
llevada a punto de ebullicin de manera que el vapor llena la cmara,
desplazando el aire fro. Cuando todo el aire es expulsado, se cierran
las vlvulas de seguridad y el vapor satura toda la cmara, por lo que
incrementa la presin, hasta que se alcanzan los valores deseados
(121C y 15 lb presin).
En estas condiciones se destruyen todas las clulas vegetativas y
endosporas en un tiempo que por lo general es de 15 minutos. Se
piensa que el calor hmedo degrada los cidos nucleicos,
desnaturaliza protenas y adems alterar las membranas celulares.
Si no se cumplen las condiciones adecuadas, no hay esterilizacin.
Para controlar el buen funcionamiento del equipo, se pueden incluir con
la esterilizacin un control biolgico o un indicador qumico.
El indicador biolgico consiste en una ampolla estril con un medio y
un
papel
cubierto
con
esporas
de Bacillus
stearothermophilus o Clostridium. Luego de la esterilizacin se
rompe la ampolla y se incuba por unos das. El indicador qumico
consiste en una cinta especial con letras o lneas que cambian de color
despus del tratamiento suficiente con calor.
b) Pasteurizacin: Se utiliza para sustancias o medios que no pueden
ser calentadas a ms de su temperatura de ebullicin.
Un calentamiento breve a 55 o 60C destruir los microorganismos
patgenos y disminuye los causantes de la descomposicin de la
sustancia. NO esteriliza. Existen variaciones que son utilizadas en la
industria de la leche: la pasteurizacin rpida (HTST high temperature
short-term) que consiste en calentar a 72C por 15 segundos. Y la
pasteurizacin a temperatura ultra elevada (UTH ultrahigh
temperature) que calienta a 140-150C por 1 a 3 segundos.
c) Tindalizacin o esterilizacin fraccionada al vapor: Se utiliza para
qumicos o material biolgico que no puede llevarse a ms de 100C.
Se calienta a una temperatura de 90C a 100C durante 30 minutos por
tres das consecutivos y se incuba a 37C entra cada calentamiento.
El primer calentamiento destruye clulas vegetativas pero no esporas,
por lo que germinan a 37C y luego son eliminadas con el siguiente
calentamiento.
d) Calor seco: Se utilizan hornos o estufas a una temperatura de 160170C por 2 o 3 horas. Es menos efectivo que el calor hmedo, pero
no corroe utensilios metlicos. Es lenta y no se puede utilizar para
material
termo
sensible.

e) Incineracin: Destruye por completo los microorganismos. (Calentar


las asas en los mecheros).
f) Temperaturas bajas: Refrigeracin y congelacin, son nicamente
bacteriostticos. En general, el metabolismo de las bacterias est
inhibido a temperaturas por debajo de 0 C. Sin embargo estas
temperaturas no matan a los microorganismos sino que pueden
conservarlos durante largos perodos de tiempo.
Esta circunstancia es aprovechada tambin por los microbilogos para
conservar los microorganismos indefinidamente. Los cultivos de
microorganismos se conservan congelados a -70 C o incluso mejor en
tanques de nitrgeno lquido a -196 C.
g) Desecacin: Es de efecto bacteriosttico y las esporas permanecen
viables.

B.

FILTRACIN
Utilizada para materiales termosensibles.

a) Filtros de profundidad: Se utilizan materiales fibrosos o granulados


que forman una capa gruesa con canales de dimetro muy pequeo.
La solucin es aspirada al vaco y los microorganismos quedan
retenidos o son adsorbidos por el material. Se utilizan diatomeas,
porcelana no vidriada, asbestos.
b) Filtros de membrana: Son circulares con un grosor de 0.1 mm y con
poros muy pequeos, de unos 2 m por lo que los microorganismos no
pueden atravesarlo. Se fabrican de acetato de celulosa, policarbonato,
fluoruro de polivinilo u otros materiales sintticos.

C.

RADIACIN

a) Ultravioleta: Es letal para todas las clases de microorganismos por su


longitud de onda corta y su alta energa. Es letal a 260 nm ya que es la
longitud de onda que es ms efectivamente absorbida por el ADN.
El mecanismo primario del dao al ADN es la formacin de dmeros de
timina lo que inhibe su funcin y replicacin. Son escasamente
penetrantes y se utilizan para superficies.
b) Ionizante: Niveles bajos pueden producir mutaciones e
indirectamente resultar en la muerte, niveles altos son letales.
Especficamente causan una serie de cambios en las clulas: ruptura
de puentes de hidrgeno, oxidacin de dobles enlaces, destruccin de
anillos, polimerizacin de algunas molculas, generacin de radicales
libres.
La mayor causa de muerte es la destruccin del ADN. Es excelente
esterilizante y con penetracin profunda en distintos materiales, por lo

que se utilizan para esterilizar materiales termolbiles (termosensibles)


como jeringas desechables, sondas, etc.
No se utilizan para medios de cultivo o soluciones proteicas porque
producen alteraciones de los componentes.

2.

MTODOS QUMICOS

a) Fenoles: El primer desinfectante y antisptico utilizado, en 1867


Joseph Lister los emple para reducir el riesgo de infeccin en las
cirugas. Hasta ahora los fenoles y sus derivados (cresol, xilenol) son
utilizados como desinfectantes en laboratorios y hospitales. Elimina
micobacterias, eficaz an en presencia de materia orgnica y
permanece activo en la superficie despus de mucho tiempo de su
aplicacin. Desnaturaliza protenas y altera la membrana. Tiene olor
desagradable y puede producir irritaciones cutneas.
b) Alcoholes: No elimina esporas pero son bactericidas y fungicidas y
algunas veces viricida (virus que contienen lpidos), son comnmente
utilizados principalmente el etanol y el isopropanol en concentraciones
de 70-80%. Tienen el mismo modo de accin de los fenoles.
c) Metales pesados: Mercurio, arsnico, plata, zinc y cobre. Son
bacteriostticos ya que el metal se combina con los grupos sulfhdricos
de las protenas inactivndolas o precipitndolas. Son txicos.
Ejemplos: sulfato de cobre (alguicida) y nitrato de plata (gonorrea
oftlmica en nios).
d) Halgenos: Yodo y Cloro
-Yodo: Antisptico cutneo. Oxida componentes celulares y forma
complejos con las protenas. En altas concentraciones puede destruir
algunas esporas. Puede lesionar la piel, dejar manchas y desarrollar
alergias.
-Cloro: oxida componentes celulares, requiere un tiempo de exposicin
de unos 30 minutos. El producto clorado ms utilizado en desinfeccin
es el hipoclorito de sodio, que es activo sobre todas las bacterias,
incluyendo esporas, y adems es efectivo en un amplio rango de
temperaturas. La actividad bactericida del hipoclorito de sodio se debe
al cido hipocloroso (HClO) y al Cl2 que se forman cuando el hipoclorito
es diluido en agua. La actividad germicida del ion hipocloroso es muy
reducida debido a que por su carga no puede penetrar fcilmente en la
clula a travs de la membrana citoplasmtica. En cambio, el cido
hipocloroso es neutro y penetra fcilmente en la clula, mientras que el
Cl2
ingresa
como
gas.

e) Compuestos cuaternarios de amonio (detergentes): Molculas


orgnicas emulsificantes porque contienen extremos polares y no
polares, solubilizan residuos insolubles y son agentes limpiadores
eficaces.
Solo los catinicos son desinfectantes, alteran membrana y pueden
desnaturalizar protenas. No destruyen micobacterias ni esporas. Se
inactivan con el agua dura y el jabn.
f)

Aldehdos: Formaldehdo y glutaraldehdo, se combinan con las


protenas y las inactivan. Eliminan esporas (tras 12 horas de
exposicin) y pueden usarse como agentes esterilizantes.

g) Gases esterilizantes: Esterilizacin de objetos termosensibles.


-xido de etileno: Microbicida y esporicida, se combina con las
protenas celulares. Alto poder penetrante. En concentraciones de 1020% mezclado con CO2 o diclorodifluorometano. Se debe de airear
ampliamente los materiales esterilizados para eliminar el gas residual
porque es muy txico.

II.

MICROORGANISMOS PRODUCTORES DE
ANTIBITICOS:

En el pasado, la medicina tradicional empleaba materiales naturales con cierta


actividad contra los microbios, como la corteza del rbol cinchona (que
contiene quinina) para el tratamiento del paludismo. Los mtodos racionales
de quimioterapia comenzaron con Ehrlich y su desarrollo de compuestos de
arsnico para el tratamiento de la sfilis a inicios del siglo xx. Muchos aos
pasaron antes de que ocurriera el siguiente avance, que fue el descubrimiento
de la eficacia teraputica de una sulfonamida (prontosil rubrum) que realiz
Domagk en 1935. La penicilina, que haba descubierto Fleming en 1929, no
se pudo purificar en forma adecuada en ese entonces; sin embargo, esto se
logr despus y la penicilina se fabric en cantidades suficientes, de modo
que Florey y sus colaboradores pudieron demostrar su eficacia clnica a
principios del decenio de 1940-1949. Se han descubierto o desarrollado
numerosos agentes antimicrobianos nuevos y muchos de ellos han
encontrado un uso dentro de la prctica clnica.
Las sulfonamidas
antibacterianas

la

penicilina

fueron

las

primeras

sustancias
eficaces.

DEFINICIONES IMPORTANTES:

Antibitico: Antimicrobianos de origen microbiano, la mayora de los


cuales son el producto de hongos o bacterias del gnero Streptomyces.
Antimicrobianos: Cualquier sustancia con suficiente actividad
antimicrobiana que se puede emplear para el tratamiento de las
enfermedades infecciosas.
Bactericida: Antimicrobiano que no slo inhibe el crecimiento, sino que
es letal para las bacterias.
Bacteriosttico: Un antimicrobiano que inhibe el crecimiento, pero que
no elimina a los organismos. Las defensas del hospedador son las
responsables en ltima instancia de la erradicacin de la infeccin.
Espectro: Expresin de las categoras de microorganismos contra los
cuales tiene actividad el antimicrobiano de manera tpica. Una
sustancia de espectro estrecho tiene actividad slo contra unos
cuantos organismos. Un medicamento de amplio espectro tiene
actividad contra organismos de diversos tipos (p. ej., bacterias
grampositivas y gramnegativas).

CONSIDERACIONES GENERALES
Todas las sustancias antimicrobianas eficaces en un sentido clnico exhiben
una toxicidad selectiva contra el parsito en lugar de contra el hospedador,
caracterstica que las diferencia de la mayora de los desinfectantes.
En la mayora de los casos, la toxicidad selectiva se explica por medio de la
accin sobre los procesos o estructuras microbianos que difieren de aquellos
de las clulas mamferas. Por ejemplo, algunos medicamentos actan sobre
la sntesis de la pared celular de las bacterias y otros se dirigen a las funciones
del ribosoma bacteriano 70S, pero no contra el ribosoma eucariota 80S.
Algunos antimicrobianos, como la penicilina, en esencia no son txicos para
el hospedador, a menos que ste haya desarrollado hipersensibilidad.
En otros, como los aminoglucsidos, la dosis teraputica eficaz est
relativamente cerca de la dosis txica; como resultado, el control de dosis y
concentracin en sangre deben ser mucho ms precisos.
En el mundo existen Microorganismos que benefician de forma directa la salud
humana en la produccin de antibiticos, de esta forma la industria
farmacutica tambin se beneficia con el aprovechamiento de estos
microorganismos, hay bacterias que producen una gama de antibiticos como
las del gnero Streptomyces, de all se derivan antibiticos como la
tetraciclina, la estreptomicina y la eritromicina, asi como de los hongos se
obtienen algunos otros del gnero Penicillium del cual se obtiene la penicilina.

La siguiente tabla resume algunos de los microorganismos productores de


antibiticos.
Antibitico

Organismo productor

Organismos blanco

Sitio o modo de
accin

Penicilina

Penicillium chrysogenum (H)

Bacterias Gram +

Sntesis de la pared

Cefalosporina

Cephalosporium
acremonium (H)

Bacterias Gram + y -

Sntesis de la pared

Bacitracina

Bacillus subtilis (B)

Bacterias Gram +

Sntesis de la pared

Polimixina B

Bacillus polymyxa (B)

Bacterias Gram +

Membrana celular

Anfotericina
B

Streptomyces nodosus (B)

Hongos

Membrana celular

Eritromicina

Streptomyces erythreus (B)

Bacterias Gram +

Sntesis proteica

Neomicina

Streptomyces fradiae (B)

Bacterias Gram + y -

Sntesis proteica

Streptomycin

Streptomyces griseus (B)

Bacterias Gram -

Sntesis proteica

Tetraciclina

Streptomyces rimosus (B)

Bacterias Gram + y -

Sntesis proteica

Vancomicina

Streptomyces orientalis (B)

Bacterias Gram +

Sntesis proteica

Gentamicina

Micromonospora
purpurea (B)

Bacterias Gram + y -

Sntesis proteica

Rifampicina

Streptomyces
mediterranei (B)

M. tuberculosis

Sntesis proteica

Griseofulvina

Penicillium griseofulvum (H)

Hongos dermatfitos

Microtbulos

FRMACOS ANTIBACTERIANOS SELECTOS:

Antimicrobianos que actan sobre la sntesis de la pared celular:

El componente de peptidoglucano de la pared celular de las bacterias le da


su forma y rigidez. Esta molcula gigante est formada por el
entretejimiento de glucanos lineales de N-acetilglucosamina y cido Nacetilmurmico en una estructura similar a una canasta. El peptidoglucano
se sostiene por el entrecruzamiento de cadenas laterales cortas de
pptidos que cuelgan de molculas largas de glucano. Este proceso de
entrecruzamiento es el blanco de dos de los grupos ms importantes de
antimicrobianos, los betalactmicos y los glucopptidos (vancomicina y
teicoplanina). El peptidoglucano es una caracterstica nica de las
bacterias, de modo que la inhibicin de su sntesis no conlleva ningn
potencial txico.

Inhibidores de la sntesis de protenas:

Todos los miembros del grupo de aminoglucsidos entre los medicamentos


antibacterianos
tienen
un
anillo
aminociclitol
con
seis
miembros que tiene aminoazcares unidos a l. Cada uno de los
frmacos difiere en trminos de la estructura anular exacta, y el
nmero y naturaleza de los residuos de aminoazcar. Los aminoglucsidos
tienen actividad contra una amplia variedad de bacterias, pero slo contra
organismos que pueden transportarlos dentro de la clula por medio de un
mecanismo que implica fosforilacin oxidativa. De este modo, tienen poca
o ninguna actividad contra anaerobios estrictos u organismos facultativos
que metabolizan slo por medio de fermentacin (p. ej., estreptococos).

Inhibidores de la sntesis de cido nucleico:

Las quinolonas tienen un ncleo de dos anillos fusionados de seis


miembros que, cuando se sustituyen con flor, se convierten en
fluoroquinolonas, que son ahora las quinolonas dominantes para el
tratamiento de las infecciones bacterianas. Entre las fluoroquinolonas
ciprofloxacino, norfloxacino y ofloxacino, la adicin de un
anillo de piperazina y su metilacin alteran la actividad y propiedades
farmacolgicas del compuesto individual. El principal objetivo
de todas las quinolonas es la topoisomerasa (girasa) de DNA, la
enzima responsable del corte, superenrollamiento y sellado del
DNA bacteriano durante la replicacin. Las topoisomerasas bacterianas
tienen cuatro subunidades y cada quinolona especfica inhibe una o ms
de ellas. La actividad ampliada y menor frecuencia de
resistencias observadas con las fluoroquinolonas ms nuevas se
atribuyen a su enlace en mltiples sitios de la enzima.

Antimicrobianos que actan sobre las membranas externa y


citoplsmica:

Los medicamentos antimicrobianos polipptidos polimixina B y


colistina tienen un efecto catinico similar al del detergente. Se
enlazan con las membranas celulares de bacterias gramnegativas
susceptibles y alteran su permeabilidad, lo cual produce la prdida
de componentes citoplsmicos esenciales y muerte de la bacteria.
Estas sustancias reaccionan a menor grado con las membranas
celulares del hospedador, causando nefrotoxicidad y neurotoxicidad. Su
espectro es esencialmente gramnegativo;
actan contra
P.
aeruginosa y otros bacilos gramnegativos. Aunque en el pasado
estos antimicrobianos se utilizaron para tratamientos sistmicos,
ahora su empleo se limita a aplicaciones tpicas. Tienen la ventaja
de
que
rara
vez
se
desarrollan
resistencias
a
ellos.

Otros antimicrobianos.

Otros varios antimicrobianos se utilizan casi en forma exclusiva para un


solo agente infeccioso o para tipos de infecciones como la tuberculosis,
infecciones de vas urinarias e infecciones anaerbicas.

III.

LOS ANTIBITICOS

Un antibitico ha sido definido como una sustancia qumica producida por un


microorganismo capaz de inhibir el desarrollo de otros microorganismos. Los
antibiticos modificados por manipulaciones qumicas an se consideran
como tales. Un agente antimicrobiano es activo contra los microorganismos y
puede ser producido en forma natural por microorganismos o sintticamente
en el laboratorio. El trmino agente quimioterpico ha sido empleado para
referirse a agentes antimicrobianos sintticos o no y tambin se refiere a
agentes que actan contra clulas humanas como inmunomoduladores y
drogas antitumorales. Los trminos agente antiviral y agente antimictico son
trminos ms especficos, incluidos dentro de la categora ms general de
agentes antimicrobianos.
El aislamiento de un agente infeccioso a partir de un paciente no es con
frecuencia suficiente para establecer la terapia adecuada. Muchas bacterias y
algunos hongos presentan resistencia a los agentes antimicrobianos y
algunos virus han desarrollado resistencia a los agentes antivirales ms
actuales. Los patrones de resistencia cambian en forma constante y no
importa lo rpidamente que se introduzcan los nuevos agentes teraputicos
porque los microbios parecen siempre dispuestos a superarlos. Incluso entre
los neumococos, que por dcadas han permanecido invariablemente
susceptibles a niveles de penicilina G menores de 0.04 U/ml, han aparecido
cepas que han desarrollado resistencia a esta droga.
Ya que no se puede predecir la susceptibilidad de las bacterias, hongos y virus
a los agentes antimicrobianos, con frecuencia es necesario estudiar la
sensibilidad individual de cada patgeno a estas drogas, pudindose elegir
entonces el agente apropiado (el ms activo contra el patgeno, el menos
txico para el husped, con las caractersticas farmacolgicas apropiadas y el
ms econmico), que proporciona mayores posibilidades de una evolucin
favorable.
Por supuesto, el resultado teraputico final depende de muchas otras
variables. La enfermedad subyacente y condicin clnica del husped, las
propiedades farmacolgicas del agente antimicrobiano, la administracin de
otros agentes teraputicos adicionales y otros factores ejercern una fuerte
influencia sobre el desenlace final. Los microbilogos slo pueden
recomendar agentes teraputicos sobre la base de sus actividades in vitro. El
clnico debe tomar la decisin final, teniendo en cuenta su conocimiento sobre
todos los factores pertinentes.
Un concepto importante sobre el que es necesario insistir es que no se pueden
realizar pruebas de sensibilidad in vitro con cultivos mixtos, slo los cultivos
puros proporcionarn resultados vlidos sobre la eficacia de un antibitico.
En la prctica diaria, una buena parte de los tratamientos efectuados tanto a
nivel hospitalario como ambulatorio, se establecen con arreglo a unos criterios

derivados del estudio in vitro del comportamiento de las distintas especies


bacterianas frente a un determinado grupo de antibiticos (tratamiento
emprico). Ello se debe a que en muchas ocasiones, no puede disponerse de
la bacteria aislada del proceso infeccioso y la eleccin teraputica, en esos
casos, responde a criterios de empirismo derivados precisamente del
conocimiento del comportamiento de distintos tipos de antibiticos frente a las
bacterias presuntamente responsables de la infeccin.
Por otra parte, cada vez se hace ms necesario contar con un diseo de un
programa de vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos, a nivel general,
basado precisamente en el conocimiento que tanto a nivel hospitalario como
ambulatorio se tiene del comportamiento de los distintos aislamientos de
bacterias frente a los antimicrobianos para poder disear las actuaciones que
tiendan a superar la resistencia de las mismas a los antibiticos.
Se hace necesario tambin contar no solamente con criterios de tipo
cuantitativo o cualitativo (sensible, intermedio, resistente), sino que adems
los resultados han de interpretarse adecuadamente para evitar llegar a
conclusiones errneas que pueden derivarse de atender exclusivamente al
dato que el sistema de realizacin del antibiograma nos ofrece ya que existen
muchas formas de interrelacin bacteria-antibitico que deben conocerse para
llegar a ese objetivo final que es la eleccin de la terapia ms adecuada.
En lneas generales y en funcin sobre su forma de actuar sobre los
microorganismos, hablamos de dos grandes grupos de antibiticos

Antibiticos primariamente bactericidas: Ejercen una accin


letal e irreversible sobre el microbio (Fosfomicina Vancomicina.
B-Lactmico Polimixina. Aminoglucsidos Rifampicina. cido
Nalidxico Quinoleinas. Nitrofurantoinas)

Antibiticos primariamente bacteriostticos: Inhiben el


crecimiento pero no matan al microorganismo, permitiendo que
las propias defensas del husped pueden eliminar a las
bacterias
(Tetraciclina
Cloranfenicol.
Sulfonamidas
Trimetroprim. Lincomicina Clindamicina. Macrlidos).

1)

EL ANTIBIOGRAMA
Por qu realizar un antibiograma?

El primer objetivo del antibiograma es el de medir la sensibilidad de una cepa


bacteriana que se sospecha es la responsable de una infeccin a uno o varios
antibiticos. En efecto, la sensibilidad in vitro es uno de los requisitos previos
para la eficacia in vivo de un tratamiento antibitico. El antibiograma sirve, en
primer lugar, para orientar las decisiones teraputicas individuales.
El segundo objetivo del antibiograma es el de seguir la evolucin de las
resistencias bacterianas. Gracias a este seguimiento epidemiolgico, a escala
de un servicio, un centro de atencin mdica, una regin o un pas, es como
puede adaptarse la antibioterapia emprica, revisarse regularmente los

espectros clnicos de los antibiticos y adoptarse ciertas decisiones sanitarias,


como el establecimiento de programas de prevencin en los hospitales.
Hay pues un doble inters: Teraputico y epidemiolgico.
Cundo realizar un antibiograma?
Siempre que una toma bacteriolgica de finalidad diagnstica haya permitido
el aislamiento de una bacteria considerada responsable de la infeccin.
Establecer esta responsabilidad exige una colaboracin entre el bacterilogo
y el clnico. En efecto, en ciertas circunstancias, el microbilogo no podr
determinar con certeza que el aislamiento de una bacteria exige un
antibiograma, sin los datos clnicos que le aporta el mdico. Por ejemplo, una
bacteria no patgena puede ser responsable de la infeccin de un enfermo
inmunodeprimido o en un lugar determinado del organismo. La presencia de
signos clnicos puede ser tambin determinante para la realizacin de un
antibiograma (por ejemplo: la infeccin urinaria con un nmero reducido de
grmenes).

2)

SENSIBILIDAD BACTERIANA A LOS ANTIBITICOS

La determinacin de la Concentracin Inhibidora Mnima (CIM) es la base de


la medida de la sensibilidad de una bacteria a un determinado antibitico. La
CIM se define como la menor concentracin de una gama de diluciones de
antibitico que provoca una inhibicin de cualquier crecimiento bacteriano
visible. Es el valor fundamental de referencia que permite establecer una
escala de actividad del antibitico frente a diferentes especies bacterianas.
Hay diferentes tcnicas de laboratorio que permiten medir o calcular de rutina,
y de manera semi-cuantitativa, las CIM (mtodos manuales y mtodos
automatizados o semiautomatizados). Estos diferentes mtodos de rutina
permiten categorizar una cierta cepa bacteriana en funcin de su sensibilidad
frente al antibitico probado. Esta cepa se denomina Sensible (S), Intermedia
(I) o Resistente (R) al antibitico.
Para un determinado antibitico, una cepa bacteriana es, segn la NCCLS:

Sensible, si existe una buena probabilidad de xito


teraputico en el caso de un tratamiento a la dosis
habitual.

Resistente, si la probabilidad de xito teraputico es nula


o muy reducida. No es de esperar ningn efecto
teraputico sea cual fuere el tipo de tratamiento.

Intermedia, cuando el xito teraputico es imprevisible.


Se puede conseguir efecto teraputico en ciertas
condiciones (fuertes concentraciones locales o aumento
de
la
posologa).

Ciertas molculas son representativas de un grupo de antibiticos. Los


resultados (S, I, R) obtenidos con estas molculas pueden ser ampliados a los
antibiticos del grupo, que en ese caso no es necesario ensayar (Ejemplo:
Equivalencia entre la cefalotina que se ensaya y las restantes cefalosporinas
de 1 generacin que no es necesario probar, ya que el resultado puede
deducirse
del
obtenido
en
la
cefalotina).
Este hecho permite ensayar un nmero reducido de antibiticos, sin limitar por
ello las posibilidades teraputicas.

3) INTERPRETACIN DE UN ANTIBIOGRAMA
Certos mecanismos de resistencia se expresan dbilmente in vitro, cuando
se inscriben en el DNA bacteriano. Su expresin en el organsmo, en donde
las condiciones en cuanto a medios son diferentes, expondra al riesgo de
fracaso teraputico. Para evitar esto, el antibiograma debe ser interpretado de
manera global a fin de descubrir, a travs de la comparacin de las respuestas
para cada antibitico, un mecanismo de resistencia incluso dbilmente
expresado. As, gracias a la interpretacin, una cepa que aparece como
falsamente sensible ser categorizada como I o R (Ejemplo: Una cepa de
Klebsiella pneumoniae productora de BLSE puede aparecer sensible in vitro
a las cefalospornas de 3" generacin. El resultado de Sensible debe ser
corregido a Intermedio o Resistente, ya que la utilizacin de estos antibiticos
correra el riesgo de provocar un fracaso teraputico).
4) CLASIFICACIN POR SU ESPECTRO DE ACCIN
Segn su espectro de accin (tipo de microorganismos a los que afectan), los
antibiticos pueden ser activos frente a Procariontes: en general presentan
baja toxicidad frente a los eucariontes (clulas humanas) aunque hay que
considerar que existen en estos ciertos orgnulos celulares de origen:
a) Procaritico: Que pueden verse afectados y, por consiguiente,
afectada la actividad celular general.
b) Eucariontes: Suelen presentar ms problemas de toxicidad frente a
clulas humanas ya que estas son eucariticas. Ambos grupos. A ellos
se aplica tambin el comentario del grupo anterior.
c) Antivirales: Son compuestos que boquean el proceso de replicacin y
multiplicacin vrica. Puesto que los virus son parsitos intracelulares
que utilizan los componentes celulares del husped para su
multiplicacin, los antivirales usados en clnica presentan pueden
presentar un cierto grado de toxicidad para las clulas eucariticas.
Los antibiticos pueden usarse para evitar se desarrollen bacterias o
microorganismos eucariticos (hongos) en un determinado ambiente. Sin
embargo, el uso preventivo de antivirales no tiene sentido puesto que los virus
slo pueden desarrollarse en el interior de una clula viva y en un ambiente
sin
clulas
slo
pueden
permanecer
inactivos.

4.- Resistencia a antibiticos:


La resistencia a los antimicrobianos es la capacidad adquirida de un
organismo para resistir los efectos de un agente quimioteraputico al que es
sensible habitualmente. No existe un nico antibitico que inhiba todos los
microorganismos; por otra parte, la resistencia a los antimicrobianos es una
propiedad inherente a prcticamente todos los microorganismos. Como ya
hemos visto, los productores de antibiticos son microorganismos que, para
poder sobrevivir, desarrollan mecanismos de resistencia que neutralizan o
destruyen sus propios antibiticos. Se considera que ste es el origen de los
genes que codifican la resistencia a los antibiticos. La resistencia a los
antimicrobianos se puede extender rpidamente si estos genes pasan a otros
microorganismos por transferencia horizontal de genes.

Antecedentes de resistencia:

La conjugacin, es decir, la transferencia de DNA entre bacterias por contacto


directo, depende de la presencia de un elemento extra de DNA circular
conocido como plsmido.

Conjugacin
bacteriana.
Microfotografa electrnica de
dos clulas de E. coli durante
el proceso de conjugacin. La
clula F+ a la derecha est
cubierta
de
pequeas
fimbrias, y un pilus sexual
conecta
ambas
clulas.

Origen de los plsmidos de resistencia:

Existen indicios de que la existencia de plsmidos R es anterior a la era de los


antibiticos. Por ejemplo, una cepa de Escherichia coli que fue liofilizada en
1946 contena un plsmido con genes que conferan resistencia a la
tetraciclina y la estreptomicina, aunque ninguno de estos antibiticos se
utilizara en medicina hasta varios aos ms tarde. Tambin se ha demostrado
que los genes plasmdicos R de resistencia a las penicilinas semisintticas
existan ya antes de que estas penicilinas hubiesen sido sintetizadas.
Quizs tenga todava mayor importancia ecolgica el hecho de que los
plsmidos R con genes de resistencia a antibiticos se hayan detectado en
algunas bacterias gramnegativas no patgenas del suelo. En el suelo, los
plsmidos R pueden conferir ventajas selectivas porque los principales
organismos productores de antibiticos (Streptomyces y Penicillium) son
tambin organismos del suelo. Por tanto, parece que los plsmidos R existan
en las poblaciones microbianas naturales antes de que se descubrieran los
antibiticos y se utilizaran con fines teraputicos y agrcolas.

Plsmidos:

Los plsmidos desempean muchas funciones importantes en la vida de las


bacterias. Tambin han demostrado tener un valor inestimable para los
microbilogos y los genetistas moleculares en la construccin y transferencia
de nuevas combinaciones genticas y en la clonacin de genes. En esta
seccin se analizan los distintos tipos de plsmidos.
Los plsmidos son pequeas molculas circulares de DNA capaces de existir
de forma independiente respecto a los cromosomas del husped, y estn
presentes en muchos tipos de bacterias (y tambin en algunas levaduras y
otros tipos de hongos). Tienen sus propios orgenes de replicacin, se replican
de forma autnoma y se heredan de forma estable. Un replicn es una
molcula o secuencia de DNA que contiene un origen de replicacin y que es
capaz de replicarse. Los plsmidos y los cromosomas bacterianos son
replicones independientes. Los plsmidos tienen relativa-mente pocos genes,
en general menos de 30. Su informacin gentica no es esencial para el
husped, y las bacterias que carecen de ellos suelen funcionar con
normalidad. Los plsmidos de copia nica (o plsmidos monocopia) presentan
slo una copia por clula husped. Los plsmidos de copias mltiples (o
plsmidos multicopia) pueden estar presentes en ms de 40 copias por clula.
De forma caracterstica, los plsmidos pueden eliminarse de las clulas
husped en un proceso que se conoce como curacin. La curacin puede
ocurrir de forma espontnea o puede ser inducida por tratamientos que
inhiban la replicacin del plsmido sin afectar a la reproduccin de la clula
husped. La concentracin de plsmidos inhibidos se va diluyendo hasta su
desaparicin de la poblacin bacteriana en crecimiento. Algunos tratamientos
de curacin de uso habitual son los mutgenos de acridina, la radiacin UV e
ionizante, la privacin de timina, y el crecimiento por encima de las
temperaturas
ptimas.

Los plsmidos pueden clasificarse en funcin de su modo de existencia y


diseminacin. Un episoma es un plsmido capaz de existir bien integrado en
el cromosoma del husped o libre. Algunos plsmidos, los denominados
plsmidos conjugativos, tienen genes que codifican pili que les permiten
transferir copias de s mismos a otras bacterias durante la conjugacin.

13.4 Produccin y destino de


los merocigotos. Vase el
comentario en el texto.

Factores de resistencia:

Los plsmidos a menudo confieren resistencia a los antibiticos a las bacterias


que los contienen. Los factores R o plsmidos R contienen de forma

caracterstica genes que codifican enzimas capaces de destruir o modificar


antibiticos. No suelen estar integrados en el cromosoma del husped.
Se han encontrado en los plsmidos genes que codifican la resistencia a
antibiticos como la ampicilina, el cloranfenicol y la kanamicina, entre otros.
Algunos plsmidos R contienen un solo gen de resistencia, mientras que otros
pueden tener hasta ocho. Con frecuencia, los genes de resistencia se
encuentran en un elemento transponible, de forma que las cepas bacterianas
pueden desarrollar con rapidez plsmidos que codifican resistencias mltiples.

Mecanismos de resistencia:
Existen seis razones por las que los microorganismos pueden ser
naturalmente resistentes a ciertos antibiticos:
(1) El microorganismo puede carecer de la estructura que es inhibida por el
antibitico; por ejemplo, algunas bacterias como los micoplasmas carecen de
una pared celular tpica, por lo que son resistentes de forma natural a las
penicilinas.

(2) El organismo puede ser impermeable al antibitico, como ocurre con la


mayora de las Bacteria gramnegativas, que son impermeables a la penicilina
G y la platensimicina.

(3) El organismo puede alterar el antibitico inactivndolo. Muchos


estafilococos contienen p-lactamasas, unas enzimas que rompen el anillo P
lactmico de la mayora de las penicilinas. (4) El microorganismo puede
modificar la diana del antibitico.

(5) El microorganismo puede desarrollar una ruta bioqumica resistente; por


ejemplo, muchos patgenos desarrollan resistencia a las sulfamidas, que
inhiben la produccin de cido flico en Bacteria. Las bacterias resistentes
modifican su metabolismo para captar cido flico ya sintetizado del medio,
obviando as la necesidad de una ruta que pueda ser bloqueada por las
sulfamidas.
(6) El microoganismo puede ser capaz de bombear hacia el exterior un
antibitico que haya penetrado la clula. Este proceso se denomina eflujo.

Transmisin de la resistencia a los antimicrobianos:

El uso generalizado de antibiticos en medicina, veterinaria y agricultura


proporciona condiciones altamente selectivas para la propagacin de
plsmidos R. Los genes de resistencia de estos plsmidos confieren una
ventaja selectiva inmediata, y de este modo, la resistencia a antibiticos
debida a los plsmidos R se ha convertido en el resultado predecible de la
seleccin natural. Los plsmidos R y otras fuentes de genes de resistencia

limitan significativamente el empleo a largo plazo de cualquier antibitico


como agente quimioteraputico eficaz.
El uso inapropiado de antimicrobianos es la causa principal del rpido
desarrollo de resistencias especficas en microorganismos causantes de
enfermedades. El descubrimiento y uso clnico de muchos de los antibiticos
conocidos ha sido paralelo a la aparicin de bacterias resistentes a su accin.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

AHMAD N, PLORDE J & W DREW, 2011. Sherris. Microbiologa mdica. 5


Edicin. McGRAW-HILL INTERAMERICANA EDITORES, S. A. de C.
V. Mxico.
BROCK, T. Y M. MADIGAN. Biologa de los microorganismos. Prentice Hall
Hispanoamericana S.A Mxico. 1993. www.prenhall.com/- brock
JAWETZ, E. MELNICK. J, ADELBERG. E. Manual de microbiologa medica
Ed. Manual Moderno S.A. Mxico. 1998
MADIGAN T., M. y col. 2009 Brock Biologa de los microoganismos Dcima
edicin, Pearson educacin S. A. .
PRESCOTT, L. M. y col. 2004. Microbiologa. Segunda edicin en espaol.
Mc-Graw-Hill-Interamericana de Espaana, S. A. U. Aravaca.
Madrid.
SCHLEGEL, HANS G. 1997. Microbiologa general. 7ma edicin. Ediciones
Omega S.A. Barcelona, Espaa. 654 pg.