Anda di halaman 1dari 18

Formulasi, Pengembangan dan Evaluasi Sistem Penghantaran Obat

Transdermal Glimepirid

Abstrak
Penelitian sistem matriks transdermalterkontrol

dari obat anti-diabetes

glimepiride menggunakan polimer alam Chitosan untuk memperpanjang pengiriman


dan mengendalikan pelepasan obat. METODE: Karakterisasi dilakukan dengan studi
fisikokimia. Optimasi sistem dilakukan dengan menggunakan studi permeasi obat
secara in vitro melalui kulit tikus. Tes iritasi kulit dan evaluasi farmakokinetik
dilakukan pada tikus yang sehat. Aktivitas penurunan glukosa darah dilakukan pada
tikus diabetes. HASIL: Uji in vitro laju permebilitas di kulit tikus bervariasi untuk
obat yang berbeda: rasio polimer di patch. Patch dengan tingkat fluks maksimum
10,465 0.261mcg / cm2 dipilih untuk studi lebih lanjut. Patch tidak menyebabkan
iritasi kulit. Efek hipoglikemik bertahap tapi berkelanjutan untuk jangka waktu lama
dengan sistem transdermal. Bioavailabilitas relatif patch dibandingkan dengan
suspensi oral adalah 146,03%. KESIMPULAN: Penelitian ini menunjukkan bahwa
matriks ini memiliki control pelepasan obat yang lebih baik disbanding obat
konvensional.

1 | Page

1. Pendahuluan
Diabetes mellitus adalah gangguan metabolisme kronis ditandai dengan konsentrasi
glukosa darah tinggi yang disebabkan oleh kekurangan insulin, dan resistensi insulin.
Glimepirid, obat penting kelas sulfonylurea, saat ini tersedia untuk mengobati
hiperglikemia pada Non-Insulin Dependent Diabetes Mellitus (NIDDM); tetapi telah
dikaitkan dengan efek samping berat dan kadang-kadang hipoglikemiayang fatal dan
gangguan lambung seperti mual, muntah, mulas, anoreksia dan nafsu makan
meningkat setelah terapi oral. Karena obat ini biasanya digunakan untuk jangka
waktu yang panjang, kepatuhan pasien juga sangat penting. Glimepirid (berat
molekul: 490,6 dan pKa: 6.2) menunjukkan koefisien partisi menguntungkan (1,8
dioktanol / pH 7,4 buffer) [6]. Oleh karena itu dalam penelitian ini, kami telah
merumuskan jenis sistem matriks transdermal dari glimepiride menggunakan chitosan
reservoir obat dan dievaluasi dengan berbagai parameter in vitro, in vivo
farmakokinetik dan efek farmakodinamik pada tikus.

2. Bahan
Glimepirid didapat dari Biochem Pvt. Ltd, India.Chitosan diperoleh dari oleh Central
Cochin perikanan Ltd, Cochin, India. Asam laktat disediakan oleh Merck, Mumbai,
India. Semua reagen lain grade analisis,

2 | Page

3.

Metode

3.1 Persiapan Type-Matrix transdermal patch


Lapisan matriks transdermal monolitik untuk pengiriman glimepiride disiapkan
dengan metode casting film. Chitosan dilarutkan dalam asam laktaat dengan
konsentrasi 4% v/v. Campuran diaduk terus menggunakan pengaduk magnet diatas
lapisan Teflon sampai larutan yang bersih diperoleh. Kemudian glimepiride
ditambahkan dan pengadukan dilanjutkan untuk melarutkan dan menghomogenkan
obat dalam matriks polimer. Larutan yang dihasilkan kemudian dipindahkan ke
lapisan Teflon yang dilapisi aluminium foil sebagai membran pendukung. Sistem ini
dikeringkan dalam oven 40C selama 6 jam. Ditutup dengan corong terbalik untuk
mengendalikan laju pengeringan. Polimer matriks dipotong menjadi 1 cm2.
3.2 Karakterisasi
3.2.1 Ketebalan:
Ketebalan setiap patch diukur pada bagian yang berbeda menggunakan sekrup gauge
dan dihitung ketebalan rata-rata.
3.2.2 Penampilan fisik:
Polimer Matriks yang dievaluasi untuk penampilan fisik - buram/ transparan/ Halus/
keriput/ lembab/ kering/ kelenturan/ daya tahan/ lengket/ non-lengket.

3 | Page

3.2.3 Keseragaman Berat:


10 buah patch 1cm2 masing-masing ditimbang dan berat rata-rata mereka dihitung.
3.2.4 Kandungan Obat:
Sebuah Patch ukuran 1cm2 diambil dan ditambahkan ke 20ml metanol dalam labu
tersumbat. Larutan dikocok kuat. Kemudian sampe; dianalisis untuk melihat
kandungan obat menggunakan spektrofotometer UV pada 228nm. Rata-rata enam
sampel diambil untuk mendapatkan kandungan obat
3.3 Studi pelepasan in vitro
Studi evaluasi in-vitro dilakukan di difusi sel termodifikasi Franz.
3.3.1 Desain modifikasi sel difusi Franz
Difusi sel Franz terdiri dari kompartemen donor atas dan kompartemen reseptor
bawah dikelilingi oleh lapisan air untuk menjaga suhu fase reseptor pada 32
1 Celsius (USP). Keseragaman solusi di reseptor fase dipertahankan dengan
mengaduk pada kecepatan 600 rpm menggunakan Teflon kecil dilapisi magnetik.
Volume kompartemen reseptor dipertahankan 60ml. Kompartemen reseptor diambil
sampling dari satu sisi untuk pada interval waktu tertentu untuk estimasi kandungan
obat dengan spektrofotometer UV. Media reseptor itu30% v/v
phosphatebuffer saline (PBS) pH 7,4 yang mengandung sebagai pelarut.

4 | Page

PEG-400

3.3.2 Studi Permeasi di kulit tikus


Kulit punggung tikus dipotong. Rambut dan jaringan di bawahnya yang
dibersihkan dengan gunting. Kulit dicuci secara menyeluruh dengan air suling dan
normal saline. Direndam dalam salin normal semalam dan dicuci beberapa kali
sebelum digunakan. Kulit kemudian dipotong menjadi ukuran yang sesuai dan
dipasang diantara kompartemen sel difusi dengan strata korneum menghadapi
kompartemen donor. Dibiarkan semalaman pada cairan reseptor untuk stabilisasi dan
optimalisasi. Formulasi matriks yang akan diuji dipotong 1cm2 (N = 3) dan
ditempatkan di atas kulit dioptimalkan. Ditutup dengan aluminium foil sebagai
backing oklusif. Kompartemen donor dijepit di atasnya dengan, untuk memastikan
tidak ada gelembung udara di chamber reseptor. Sampel 3ml ditarik dalam interval
waktu selama 48 jam. cairan reseptor baru ditambahkan ke kompartemen penerima
untuk mempertahankan volume tetap konstan. Sampel disaring kemudian dianalisis
menggunakan spektrofotometer (Schimadzu) UV pasa 228 nm. Linearitas
ditunjukkan 2-22 mg / ml (R2> 0,999).
3.4 Studi In Vivo
Secara kelembagaan penelitian in vivo disetujui dilakukan di tikus wistar jantan
dengan berat 250-400 gram, dari rumah hewan, DIPSAR, Delhi, India (No
Pendaftaran 215 CPCSEA). Hewan ditempatkan di kandang polypropylene, 2 ekor
per kandang, dengan diet dan air standar labor. Protokol uji in vivo DIPSAR / IAEC /
6/2005 disetujui oleh Institutional Animal Ethical Committee, India.

5 | Page

3.4.1Studi Iritasi Kulit


Formulasi transdermal yang telah dioptimalkan dievaluasi untuk Studi iritasi kulit
pada 24 tikus yang sehat. Rambut dari Bagian punggung dibersihkan dengan bantuan
gunting bedah yang tajam dan kulit dicuci dengan benar satu hari sebelum digunakan.
Tikus dibagi menjadi empa kelompok (enam tikussetiap kelompok):
Kelompok I: Normal: Tidak ada pengobatan yang diberikan.
Kelompok II: Kosong: Patch Kosong (tanpa obat)
Kelompok III: Medicated: Patch Medicated (dengan obat)
Kelompok IV: Formalin: 0,8% v / v aq. larutan Formalin adalah diterapkan sebagai
iritan standar
Patch diangkat setiap 48 jam dan daerah diperiksa untuk tanda-tanda sensitivitas kulit
atau iritasi dan patch segar diganti di tempat yang sama di hari ke 2, 4, 6. Semua
perawatan dilanjutkan sampai 7 hari dan tempat aplikasi dipantau secara visual dan
dinilai sesuai dengan skala penilaian visual seperti pada Tabel 3.
3.4.2 Evaluasi farmakokinetik pada Tikus
Patch yang telah dioptimalkan dievaluasi untuk studi in vivo di tikus yang sehat. Dua
kelompok masing-masing 6 tikus (Berat 250-400g). Perlakuan berikut diberikan
kepada masing-masing kelompok:

6 | Page

Grup A: suspensi oral glimepiride di 2% (4 mg / hari).


Grup B: Patch Glimepirid (17 cm2) diterapkan.Rambut dibersihkan dengan bantuan
gunting tajam sebelum hari penelitian. Patch dipotong dan ditempatkan pada kulit;
Kemudian ditutup dengan pita perekat untuk mendekati kondisi yang digunakan.
Profil farmakokinetik pelepasan obat dipelajari dengan mengumpulkan 0.3ml sampel
darah dari vena ekor pada interval waktu yang telah ditentukan dan disentrifugasi
pada 4000 rpm, 0-4 C selama 30 menit untuk memisahkan plasma. Sampel disimpan
pada -20 C sampai analisis.
3.4.3 Ekstraksi Plasma dan Analisis kromatografi
Sampel plasma dianalisis dengan HPTLC dilaporkan sebelumnya (High Pressure
Thin Layer Chromatography) untuk estimasi glimepiride. 300 l plasma ditambahkan
300 l etil asetat danb larutan vortex selama 2 menit untuk mengekstrak obat dari
plasma. Larutannya disentrifugasi pada 3500 rpm pada 0-4 C selama 45 menit untuk
mengendapkan

protein.

Supernatan

kemudian

dipisahkan

dan

dianalisis

menggunakan HPTLC. Kolom sampel yang berbeda diterapkan (di bentuk band 6mm
lebar) menggunakan mikroliter Camag jarum suntik (100l) ke silika gel pra-dilapisi
Aluminium TLC piring menggunakan Linomat V sampel aplikator. Sebuah konstan
Tingkat penerapan 200nl / sec dipekerjakan. naik linear pengembangan kromatogram
dilakukan di Camag chamber melalui kembar jenuh dengan fase gerak
Kloroform: Methanol: Toluene: Asam asetat (7: 3: 6: 0,3). Itu waktu kejenuhan fase
gerak dioptimalkan menjadi 45 menit. Kromatogram adalah 7 cm dan selanjutnya ke

7 | Page

pengembangan, pelat TLC itu menggunakan udara kering dengan pengering udara.
Scanning densitometri dilakukan pada Camag TLC Scanner III dalam modus
absorbansi 234nm (Celah dimensi 5 x 0.45mm, kecepatan scanning 20mm / s) yang
menggunakan lampu deuterium sebagai sumber radiasi dan otomatis dihasilkan
kromatogram software WINCATS dengan memplot absorbansi terhadap nilai-nilai
Rf. Ara. 1 sampai 3 menunjukkan HPTLC pemindaian dan kurva standar glimepiride
pada plasma tikus.
3.4.4 Evaluasi farmakodinamik Dalam Tikus Diabetes
Tikus wistar jantan dengan berat 200 - 300 g dipuasakan selama 30 jam dan
kemudian didiabeteskan dengan menyuntikkan streptozotocin 50 mg / kg, i.p.
Glukosa darah diukur setelah 24 jam dan hewan dengan kadar glukosa darah> 250
mg / dL yang dipilih. Tikus diabetes yang terpilih dibagi menjadi dua kelompok
(Enam tikus dalam setiap kelompok) dan berpuasa semalam. air adalah libitum yang
tersedia. Dosis glimepirid tikus 10mg / kg.
Kelompok I: suspensi oral: 2% w / v dalam gum akasia. (Glimepiride: 10 mg / kg,
PO)
Kelompok II: Patch: 17cm2 Patch diaplikasikan mengandung mg glimepiride.
Darah ditarik berkala dari vena ekor di tertentu waktu interval dan kadar glukosa
darah diukur dengan menggunakan Accutrend Alpha glucometer (Roche
Diagnostics Jerman). Respon hipoglikemik dihitung dengan mengambil perbedaan
kadar glukosa pada 0 jam dan tiap jam berikutnya.
8 | Page

4. Hasil dan Pembahasan

9 | Page

10 | P a g e

11 | P a g e

12 | P a g e

13 | P a g e

4.1 Dasar Pemikiran


Biasanya, semua bentuk sediaan konvensional, kecuali infus intravena mengikuti
puncak dan lembah pola pelepasan obat kinetika dalam darah dan jaringan. Faktor ini,
serta dosis berulang-ulang menggambarkan penyerapan tak terduga dengan konsep
sistem pengiriman obat dikontrol. Sistem pengiriman terkendali ini dirancang untuk
melepaskan obat pada tingkat yang telah ditentukan dan terus menerus, menghindari
puncak tinggi dan palung subterapeutik di tingkat plasma. Sistem pengiriman obat
baru telah merevolusi metode pengobatan dan telah memberikan manfaat terapeutik.
Glimepirid sampai sekarang tersedia sebagai tablet pelepasan konvensional
saja, yang pelepasan tidak terkendali, puncak dan jenis lembah pola pelepasan obat
tak terduga. Dengan demikian, ada kebutuhan untuk pengembangan sebuah sistem
pengiriman transdermal, sehingga kontrol yang lebih baik atas terapi dapat dicapai
bersama dengan meningkat pemenuhan pasien.
Chitosan merupakan polimer kationik yang menunjukkan beberapa sifat yang unik,
yang fitur yang diinginkan dalam sistem pengantaran obat transdermal. Chitosan
memiliki kemampuan untuk bertindak sebagai wadah obat. Kedua, setelah film ini
diterapkan pada kulit, chitosan memediasi kontak lama dengan epitel melalui
interaksi elektrostatik dari bermuatan positif kitosan dan bermuatan negatif
glikoprotein residu pada permukaan sel. Pada titik ini gradien konsentrasi
dikembangkan dan mulai menyebarkan obat ke dalam epitel yang selama periode
panjang dan hasil dalam penyerapan obat. Ketiga, chitosan dapat bertindak sebagai

14 | P a g e

peningkat penetrasi untuk meningkatkan permeabilitas obat di jaringan di bawahnya


dengan dampaknya pada persimpangan ketat.
4.2 Karakterisasi Fisiko-kimia:
Komposisi formulasi yang berbeda, menghasilkan analisis fisik-kimia yang
ditunjukkan pada Tabel 1 dan 2. Keseragaman matriks dibuktikan dengan rendahnya
standar deviasi berat, ketebalan dan kandungan obat itu dalam batas yang diizinkan.
4.3 Studi in vitro permeasi kulit
Fig. 4 menunjukkan profil rpelepasan yang berbeda pada matriks. Formulasi P1, P2,
P3 dan P4, melepaskan total 26,7%, 27,9%, 33,3% dan 23,2% dalam 48 jam masingmasing. Formulasi P5 pelepasan 50% pada jam ke-18 dan total 71,4% di 48 jam.
Formulasi P6 pelepasan 50% dan 80% pada 8 dan 30 jam masing-masing dan total
93,6% di 48 jam. P6 memberi tingkat fluks maksimum 10,465 0.261mcg / cm2.
Jadi P6 dipilih sebagai formulasi yang dioptimalkan.
Perbandingan nilai R2 dibuat untuk menilai sifat profil pelepasan formulasi. masingmasing nilai R2 untuk formulasi P1 - P6ditemukan menjadi 0,8025, 0,7967, 0,8792,
0,842, 0,8891 dan 0,855 masing-masing untuk orde nol; 0,9768, 0,9746, 0,9816,
0,9699, 0,9882 dan 0,9755 masing-masing untuk Higuchi dan 0,9175, 0,9421,
0,9178, 0,9528, 0,9454 dan 0,9643 untuk plot orde 1. Nilai R2 yang tinggi dengan
Higuchi menunjukkan bahwa pelepasan obat mengikuti persamaan difusi klasik
Higuchi.

15 | P a g e

4.4 Studi iritasi Kulit:


Tidak ada tanda-tanda eritema dan edema yang teramati dalam uji , digambarkan
dalam Tabel 3. Kelompok Formalin sebagai kontrol positif yang menunjukkan
maksimum eritema dan edema. Perbedaan yang signifikan (P <0,01) adalah antara
patch dan kelompok formalin.
4,5 Studi farmakodinamik
Hasil efek hipoglikemik patch transdermal dibandingkan dengan suspensi oral
glimepiride (10 mg / kg) terhadap tikus diabetes diberikan dalam Tabel 4. Efek awal
hipoglikemik yang diamati pada jam 2 setelah pengobatan adalah penurunan 36,67%
dan 20,22% kadar glukosa darah untuk suspensi oral dan patch. Efek hipoglikemik
maksimum 39,53% untuk suspensi diamati pada jam ke 8, yang tetap stabil hingga
12 jam dan menurun setelahnya. Untuk patch transdermal, efek hipoglikemik
maksimum 38,06% diamati pada jam ke-12, yang tetap stabil hingga 48 jam. Pada 24
jam efek hipoglikemik adalah 10,61% dan 36,41% untuk suspensi dan patch.
Seperti yang digambarkan oleh Gambar. 5, pada patch, efek hipoglikemik yang
bertahap tapi berkelanjutan untuk periode waktu yang lama. Efek hipoglikemik yang
cepat dan berkepanjangan ini bisa disebabkan laju pelepasan yang berkelanjutan dan
pelepasan obat dikendalikan formulasi. Efek hipoglikemik awal yang lebih tinggi
suspensi oral menunjukkan bahwa hipoglikemia berat terkait dengan pemberian oral
glimepiride dapat diatasi dengan sistem transdermal. Dengan demikian dapat jelas
terlihat, bahwa pelepasan terkontrol dari formulasi transdermal menawarkan kontrol

16 | P a g e

lebih baikterhadap penurunan glukosa darah bila dibandingkan dengan pellepasan


obat konvensional oral.
4.6 Farmakokinetika
Parameter farmakokinetik yang berbeda dihitung dari Data yang dihasilkan dari
analisis HPTLC, seperti tergambar pada Tabel5. Untuk kelompok suspensi oral dan
kelompok patch transdermal, C max ditemukan 15.130,91 dan 7.225,59 ng / ml
masing-masing. Tmax ditemukan menjadi 4 dan 24 jam masing-masing. Untuk AUC
suspensi oral selama 24 jam pertama ditemukan 73.600 ng hr / ml dan untuk total 48
jam ditemukan 198.727 ng hr / ml. Bioavailabilitas relatif patch di dibandingkan
dengan suspensi oral dihitung menjadi 146,03%. Berpasangan t-test diterapkan antara
rata Cmax dari glimepiride dalam plasma tikus. Sebuah sangat signifikan P-nilai
kurang dari 0,001 diperoleh.
Parameter farmakokinetik jelas menunjukkan bahwa glimepiride diserap perlahanlahan, tapi terus menerus dari transdermal patch sebagai ditunjukkan pada Gambar. 6.
Meskipun peningkatan konsentrasi obat lebih lambat tapi berkelanjutan efektif untuk
jangka waktu yang lama. Peningkatan waktu paruh glimepiride dengan patch yang
menunjukkan bahwa obat tetap dalam tubuh untuk jangka waktu lama saat diberikan
melalui sistem pengiriman obat baru dan dengan demikian, akan mampu memberikan
efek berkelanjutan. Meskipun Cmax secara signifikan lebih rendah pada, nilai-nilai
AUC yang secara signifikan lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok suspensi,
yang bisa disebabkan oleh konsentrasi obat dalam kisaran farmakologi yang efektif

17 | P a g e

untuk jangka waktu yang lebih lama dengan system pelepasan terkontrol. Nilai AUC
secara signifikan lebih tinggi pada patch yang juga menunjukkan peningkatan
bioavailabilitas obat dibandingkan dengan pemberian suspensi oral.
5. Kesimpulan
Hasil penelitian ini, menunjukkan bahwa patch bioavalabilitas transdermal jauh lebih
baik, dan pelepasan obat untuk jangka waktu yang lama. Selain itu, tersedia metode
yang mudah dan efisien untuk formulasi sistem matriks transdermal menggunakan
polimer alam chitosan. Sifat non-iritan dari patch juga merupakan keuntungan
menggunakan polimer mukoadhesif alami. Sebaiknya eknologi ini dapat dieksplorasi
untuk obat antidiabetes lain juga sehingga memberikan control yang lebih baik
terhdap penyakit.

18 | P a g e