PRACTICA N8
DETERMINACION DE ACIDOS GRASOS EN ACEITE DE CHIA Y AJONJOLI
POR CROMATOGRAFIA DE GASES
I.
INTRODUCCION
II.
OBJETIVOS
III.
FUNDAMENTO TEORICO
Semillas de ajonjol:
Se entiende como semilla de ajonjol descortezada a la semilla pura, a la
cual se ha retirado la corteza por inmersin
en solucin caliente de soda y centrifugacin
para una mayor separacin de la corteza.
La semilla descortezada es la tratada a
temperatura y tiempo controlados, para
disminucin de la humedad de la semilla,
volvindola crocante al paladar
CONTENIDO PORCENTUAL DE ACIDOS GRASOS EN LAS SEMILLAS
DE AJONJOLI
Aceite de ajonjol:
El aceite de
ssamo
se
obtiene
de
las
semillas
Mtodo FAMEs
El anlisis de los steres metlicos de cidos grasos
metil-ster
La
reaccin de
GC en el mtodo FAMEs
La cromatografa de gases se ha convertido en la herramienta ms
empleada en la separacin, identificacin y cuantificacin de los cidos
grasos convertidos primero metil esteres de cidos grasos (Fatty Acids
Methyl Esters, FAMEs); cuya exactitud est limitada por la complejidad
del proceso de calibracin, la pureza de las sustancias empleadas como
estndares y la imposibilidad de identificar los compuestos en las
muestras. [3-5]
Los anlisis por cromatografa de gases acoplada a espectrometra de
masas para FAMEs (GC-MS, siglas en ingls) por el mtodo de impacto
electrnico (EI) resultan en una fragmentacin fuerte y reestructuracin
de la molcula que a menudo no produce un ion molecular [M]+, este
realmente aumenta con pesos moleculares elevados (>6 tomos de
carbono), aunque decrece con ramificaciones en la cadena [4-6]. El
modo de ionizacin qumica usando como gas reactivo el metano,
permite que el
legible.
Con estos dos mtodos de ionizacin, y con el uso de un estndar
comercial de una mezcla de metil esteres de cidos grasos se realiz la
identificacin de cada pico y la calibracin para cada compuesto
separado.
Principios
para
el
mtodo FAMEs
REACTIVOS
a. Gas portador
Gas inerte (nitrgeno, helio, argn, hidrgeno, etc.), perfectamente
desecado y que contenga menos de 10
mg/kg de oxgeno.
Nota 1: El hidrgeno, que slo se
emplea como gas portador en las
columnas capilares, puede duplicar la
velocidad
del
anlisis,
peligroso.
Existen
pero
es
dispositivos
de
seguridad.
b. Gases auxiliares
Hidrgeno (pureza 99,9%) exento de
impurezas orgnicas.
Aire u oxgeno, exento de impurezas
orgnicas.
c. Patrn de referencia
Una mezcla de steres metlicos de cidos grasos puros, o los steres
metlicos de una grasa de composicin conocida y, preferentemente,
similar a la de la materia grasa objeto de anlisis. Deber evitarse la
oxidacin de los cidos grasos poliinsaturados.
APARATOS
la columna.
Fase estacionaria: lquido polar de tipo polister (por ejemplo:
polisuccinato
de
dietilenglicol, polisuccinato
de
butanodiol,
IV.
MATERIALES
CROMATOGRAFO DE
GRASOS
MUESTRAS
ACEITE DE
CHIA:
previamente
derivatizado
V.
VI.
ACEITE DE
AJONJOLI:
previamente
derivatizado
PROCEDIMIENTO
RESULTADOS
ACEITE DE CHIA
4.0
3.0
2.0
1.0
Acido Palmtico
Acido Esterico
Acido Olico (Cis-9)
uV(x10,000)
5.0 Chromatogram
uV (x
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
40.0
45.0
50.0
55.0
min
Acido Palmtico
Acido Esterico
Acido Olico (Cis-9)
1.5
1.0
0.5
uV(x100,000)
2.0 Chromatogram
uV (x
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
40.0
45.0
50.0
55.0
min
Acido Palmtico
3.0
Acido Esterico
Acido Olico (Cis-9)
4.0
2.0
1.0
uV(x10,000)
5.0 Chromatogram
uV (x
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
40.0
45.0
50.0
55.0
min
4.0
3.0
2.0
1.0
Acido Palmtico
uV(x10,000)
5.0 Chromatogram
Acido Esterico
Acido Olico (Cis-9)
Acido Olico (Cis-9)
Acido Linoleico (Cis-9,12)
uV (x
0.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
40.0
45.0
ACEITE DE AJONJOLI
Acido Palmtico
uV(x10,000)
5.0 Chromatogram
Acido Esterico
Acido Olico (Cis-9)
uV (x
4.0
3.0
2.0
1.0
50.0
55.0
min
5.0
0.0
0.0
5.0
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
40.0
45.0
50.0
55.0
min
4.0
3.0
2.0
1.0
Acido Palmtico
uV(x10,000)
5.0 Chromatogram
Acido Esterico
Acido Olico (Cis-9)
uV (x
0.0
5.0
ESTANDAR
10.0
15.0
20.0
25.0
30.0
35.0
40.0
45.0
50.0
55.0
min
ESTANDAR
cido
Palmtico
cido
4.9020
4.7833
5.0809
4.8834
2.0635
Media
X
X X
-0.0104
-0.1291
4.9124
0.1685
-0.029
2.07195
-
( X X )2
0.00011
0.01667
0.02839
0.00084
0.00007
S=
( X X )2
N 1
0.1238
0.1059
2.0011
Esterico
2.2209
1.9923
3.9606
2.7869
cido
Oleico
3.9419
3.1627
17.421
15.799
15.476
16.302
71.652
cido
74.628
Linolenico 73.279
72.201
ACEITE DE CHIA
cido
Linleico
ACEITE DE AJONJOLI
0.0084
5
0.0708 0.00502
5
0.1489
0.02219
5
0.0796 0.00634
5
0.4975
0.24758
7
0.6761 0.45715
3
3.46303
0.4788
0.22932
7
0.3003 0.09020
3
1.1715 1.37241
-0.4505 0.20295
16.2495
-0.7735 0.59830
0.0525 0.00276
-1.288 1.65894
1.688
2.84934
72.94
0.339
0.11492
-0.739
0.54612
0.5843
0.8517
1.3127
X
cido
Palmtico
cido
Esterico
cido
Oleico
cido
Linleico
cido
Araquidoni
co
Acido
Eicosanoic
o
VII.
Media
X
8.1707
8.0155
3.9934
3.4418
32.082
28.796
55.197
59.746
0.2705
0
8.0931
X X
( X X )2
0.776
0.00602
18.4719
4
0.07607
0.07607
2.69945
2.69945
5.17335
5.17335
0
4.2979
0.2758
-0.2758
1.643
30.439
-1.643
-2.2745
57.4715
2.2745
0
0.2705
-0.2705
3.7176
0.2852
0
0.2852
S=
-0.2852
0.08134
N 1
4.2986
0.39005
2.32355
3.21663
0.2705
0.07317
( X X )2
0.2852
DISCUSIONES
Los
mtodos
de
derivatizacin
ms
comunes
base seca.
Al comparar los resultados de concentraciones en porcentajes de
cada cido graso reportado en el anlisis con la tabla n2
proporcionada por el codex alimentarius, nos percatamos que
nuestros valores se encuentran dentro del rango establecido.
Analiza
VIII. CONCLUSIONES
Satisfactoriamente obtuvimos la formacin de las dos fases, una la de
cidos grasos y la otra de desechos.
La metodologa analtica implementada en la prctica result ser
adecuada para cumplir con los objetivos propuestos en este estudio ya
que permiti la determinacin de los cidos grasos del aceite de ajonjol
y de chia. Se observ buena resolucin tanto en las soluciones estndar
de calibracin, como en las muestras de la mezcla reaccionante en las
muestras. Las funciones de calibracin se ajustan a lneas rectas en el
intervalo de anlisis.
Se determin el contenido de cidos grasos en una muestra de aceite de
chia y ajonjol.
IX.
ANEXOS
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Barquero
Quirs,
Mariam.
2006.
Principios
aplicaciones
de