Untuk melakukan analisis kuantitatif injeksi Klonidin HCl dengan menggunakan

spektrofotometer UV, pertama-tama dilakukan pembuatan larutan uji. Larutan uji dibuat dengan
cara mengambil sejumlah volume sampel larutan injeksi Klonidin HCl yang setara dengan 0,15
mg Klonidin HCl BPFI. Ke dalam sampel tersebut kemudian ditambahkan 5 mL air untuk
melarutkan sampel, setelahnya

ditambahkan 25 mL dapar fosfat sitrat pH 7,6 untuk

mempertahankan kondisi pH dari larutan sampel dan ditambahkan 1 mL larutan yang

mengandung biru bromotimol P 0,15 % dan natrium karbonat anhidrat P 0,15 %. Selanjutnya ke
dalam larutan tersebut ditambahkan 30 mL kloroform P, kocok selama 1 menit dan sentrifus
untuk memisahkan fasa yang terbentuk. Lapisan Kloroform P yang terbentuk diambil sebanyak
15 mL lalu ditambahkan 10 mL asam borat LP.
Selanjutnya dilakukan pembuatan larutan baku Klonidin HCl. Larutan ini dibuat dengan
cara menimbang dengan saksama 0,15 mg Klonidin Hidroklorida BPFI larutkan dan encerkan
dengan air hingga kadar 0,003 %, kemudian 5,0 mL larutan ini diambil dan tambahkan 20 ml
dapar fosfat sitrat pH 7,6 untuk mempertahankan pH larutan. Kemudian ke dalam larutan
tersebut ditambahkan 1 ml larutan yang mengandung biru bromotimol P 0,15 % dan natrium
karbonat anhidrat P 0,15 %. Lalu ke dalam larutan tersebut ditambahkan 30 mL kloroform P,
kocok selama 1 menit dan sentrifus untuk memisahkan fasa yang terbentuk. Lapisan Kloroform
P yang terbentuk diambil sebanyak 15 mL lalu ditambahkan 10 mL asam borat LP.
Sebelum dilakukan pengukuran dengan menggunakan spektrofotometer UV, dilakukan
pembuatan larutan blanko yang terdiri dari 10 mL asam borat LP yang diencerkan dengan 15 ml
kloroform P. Fungsi dari larutan blanko ini adalah untuk mengkalibrasi alat sehingga hasil yang
didapat lebih akurat. Larutan uji dan larutan baku diukur pada panjang gelombang serapan
maksimum lebih kurang 420 nm. Hitung jumlah dalam mg C 9H9Cl2N3.HCI, dengan rumus: C =
Au
As . Dimana C adalah kadar Klonidin HCl BPFI dalam mg per mL larutan baku, Au dan As
berturut-turut adalah serapan larutan uji dan larutan baku.