MAKALAH FITOKIMIA

Teh Putih dan Teh Hijau (Camellia sinensis var. sinensis) Dengan
Variasi Fenolik, Methylxanthine, dan Profil Antioksidan

REVIEW JURNAL

Disusun Oleh :
Syifa Fauziyyah
P17335114040
No. Jurnal : 18
Kelas : II A

POLTEKKES KEMENKES BANDUNG

JURUSAN FARMASI
2016

Teh Putih dan Teh Hijau (Camellia sinensis var. sinensis):

Dengan Variasi Fenolik, Methylxanthine, dan Profil
Antioksidan
Uchenna J. Unachukwu, Selena Ahmed, Adam Kavalier, James T. Lyles, and Edward J. Kennelly

Abstrak: Penelitian terbaru telah mengaitkan bahwa teh putih sebagai antikarsinogenik, meningkatkan kekebalan tubuh, dan memiliki sifat yang dapat
mempengaruhi kesehatan manusia seperti pada teh hijau. Analisis kimia secara
mendalam dari jenis teh putih dilakukan untuk mengukur polifenol dan
antioksidan potensial dari 8 teh putih yang tersedia di pasaran, dan
membandingkannya dengan teh hijau. Ekstraksi dan protokol HPLC dioptimasi
dan divalidasi untuk kuantifikasi 9 fenolik dan 3 senyawa methylxanthine untuk
memeriksa inter dan intra-variasi dalam jenis teh putih dan hijau dan subtipenya.
Sebuah strategi sampling dirancang untuk menilai berbagai subtipe diperoleh dari
sumber yang berbeda di pasaran. Variasi dalam aktivitas antioksidan dan
kandungan total fenolik (TPC) dari kedua jenis teh selanjutnya dinilai oleh 1-1difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH) dan Folin-Ciocalteau (F-C) tes, secara berturutturut. Total kandungan katekin (TCC) untuk teh putih berkisar 14,40-369,60 mg /
g bahan tanaman kering untuk ekstrak air dan 47,16-163,94 mg / g untuk ekstrak
metanol. TCC untuk teh hijau juga berkisar lebih dari 10 kali lipat, 21,38-228,20
mg / g bahan tanaman kering untuk ekstrak air dan 32,23-141,24 mg / g untuk
ekstrak metanol. Penemuan ini menunjukkan urutan hirarkis kandungan katekin
antara jenis teh tidak meyakinkan dan harus dibuat dengan memperhatikan
strategi pengambilan sampel yang menentukan subtipe teh dan sumbernya. Teh
putih tertentu memiliki jumlah total katekin yang sebanding dengan beberapa teh
hijau, tetapi dilihat dari kapasitas antioksidan yang lebih rendah, menunjukkan
bahwa teh putih memiliki antioksidan non-katekin yang lebih sedikit.
Kata kunci: antioksidan, Camellia sinensis, katekin, teh hijau, teh putih

Practical Application: Dalam penelitian ini teh putih dan hijau diekstraksi
dengan cara seperti pada persiapan teh umum, dan profil kimianya ditentukan
dengan menggunakan metode kimia analitik yang divalidasi. Hasil menunjukkan
jenis teh hijau dan putih tertentu memiliki tingkat katekin yang sebanding dengan
potensi meningkatkan kualitas kesehatan. Secara khusus, isi polifenol teh hijau
ditemukan mirip dengan varietas teh putih tertentu, yang membuat jenis teh yang
terakhir menjadi pengganti yang potensial untuk orang yang tertarik dalam
mengkonsumsi polifenol karena alasan kesehatan. Selain itu, penelitian ini adalah
yang pertama untuk menunjukkan sampling efek sub tipe, sumber pengadaan,
budidaya, dan praktik pengolahan terhadap produk teh putih akhir, analisis
tersebut sebelumnya telah sebagian besar dilakukan pada teh hijau.
Pendahuluan
Teh dari tunas muda dan daun Camellia sinensis (L.) O. Kuntze (Theaceae) adalah
minuman yang paling banyak dikonsumsi di dunia setelah air dan digemari karena
rasa, aroma, manfaat kesehatan, dan praktik budaya (Khokhar dan Magnusdottir
2002). Tanaman teh dianggap asli dari Cina Barat Daya dan dibudidayakan di
daerah tropis secara global (Pettigrew 2004). Teh putih, hijau, oolong, hitam, dan
teh pu'erh adalah jenis teh utama bersumber dari daun dan tunas dari tanaman teh
dan dikategorikan berdasarkan variasi dalam panen, pengolahan, dan terkait
tingkat oksidasi polifenol dalam daun teh segar ( Pettigrew jenis 2004). Teh tipe
ini juga berbeda berdasarkan varietas Camellia sinensis yang digunakan dalam
produksi. Misalnya, teh hijau Cina dan Jepang yang dibuat dari Camellia sinensis
var sinensis,sementara teh hitam yang dibuat dari Camellia sinensis var assamica
(Takeo 1992). Dari semua jenis teh ini, teh putih kurang dikenal di masyarakat
Barat, tetapi berharga dan digemari di Asia, rasa nya bahkan lebih diterima
daripada teh hijau di Eropa (Almajano dan lain-lain 2008).
Teh

putih

telah

dilaporkan

memiliki

antielastase

lebih

tinggi,

anticollagenase, dan aktivitas antioksidan dari teh hijau tertentu, menunjukkan

kemampuannya untuk mendorong kulit yang kuat dan elastis dan mengurangi
peradangan dan rheumatoid arthritis, telah menyebabkan banyak orang tertarik

pada teh jenis ini (Thring dan lain-lain 2009). Aktivitas teh putih lipolitik dan
kemampuannya untuk menghambat adipogenesis mendapatkan perhatian khusus
terutama di negara-negara maju yang bersaing dengan peningkatan obesitas dan
penyakit terkait obesitas (S hle dan lain-lain 2009).
Teh putih berbeda dengan teh tipe lain karena diproduksi dari pucuk/tunas
yang belum dibuka, diklasifikasikan sebagai silver needle (bai hao Yinzhen), atau
menggabungkan tunas yang belum dibuka dan dua daun dewasa, tertutup rambut
daun putih, pada tahap awal pembentukan klorofil, seperti kasus untuk peony
putih (bai mudan) (Pettigrew 2004). Untuk membedakan antara proses produksi
teh hijau dan putih, daun matang untuk produksi teh hijau yang layu, ditumis
sebentar, digulung, dan dikeringkan dalam proses pembuatan teh hijau tradisional
Cina. Beberapa produsen teh Cina menguapkan teh mereka pada panci
penggorengan, seperti produksi teh hijau Jepang (Pettigrew 2004; Hilal dan
Engelhardt 2007; Ho dan lain-lain 2009). Kedua metode pemanasan teh
menonaktifkan enzim oksidase polifenol. Dalam beberapa laporan yang
dipublikasikan, beberapa teh putih, juga dikukus selama pemrosesan untuk
menonaktifkan enzim. Kebanyakan teh putih menggunakan tunas yang baru
dipetik sebelum tunas terbuka kemudian layu dan udara kering di tempat teduh, di
bawah sinar matahari, atau suhu ruang dikontrol untuk menghilangkan kadar air
(Pettigrew 2004). Tunas kering memiliki penampilan berwarna keperakan dan
melengkung.
Beberapa studi mendukung bahwa di antara semua jenis teh, teh hijau
mengandung jumlah katekin tertinggi, sekelompok polifenol monomer flavan-3-ol
dan turunannya gallate (Lin dan lain-lain 2003). Katekin utama termasuk ( ) epicatechin (EC), (-) -epigallocatechin (EGC), (-) - epicatechin-3-gallate (ECG),
dan (-) - Epigallocatechin-3-gallate (EGCG). Senyawa ini terutama banyak
berperan sebagai sifat pelindung kesehatan yang terkait dengan teh termasuk
antioksidan (Mildner-Szkudlarz dan lain-lain 2009), antiinflamasi (Cao dan lainlain 2007), saraf (Mandel dan Youdim 2004), anti-kanker (Yang dan lain-lain
2002) antimikroba, dan sifat antiatherosclerotic (Zhen 2002). Namun, laporan lain

menunjukkan bahwa katekin dan total kandungan fenolik (TPC) tidak dapat
digunakan sebagai kriteria untuk membedakan antara teh hijau dan putih (Hilal
dan Engelhardt 2007). Teh putih Cina juga telah dilaporkan memiliki
antimutagenik yang lebih besar dari teh hijau premium (Sanatan-Rios dan lainlain 2001; Hilal dan Engelhardt 2007) dan efek antioksidan yang sebanding
seperti teh hijau dalam plasma tubuh dan beberapa organ (Koutelidakis dan lainlain 2009). Teh putih juga telah ditemukan mengandung jumlah kafein yang lebih
tinggi daripada teh hijau (Hilal dan Engelhardt 2007) bersamaan dengan
methylxanthines lainnya, seperti sebagai TB dan TP, theanine asam amino, dan
free-sugars, adalah senyawa yang umum ditemukan dalam teh.
Mengingat banyak faktor yang mempengaruhi produk teh akhir untuk
konsumsi atau analisis laboratorium termasuk iklim, tanah, plucking-time, serta
pengolahan dan persiapan metode (Zhen 2002; Lin dan lain-lain 2003; Pettigrew
2004) dan, meningkatnya penggunaan teh dalam asupan makanan sehari-hari di
Amerika Serikat selama 2 dekade lalu (Sultana dan lain-lain 2008), inter-variasi
senyawa menguntungkan antara teh hijau dan putih dan intra-variasi dalam setiap
jenis teh harus diakui. Berbagai Camellia sinensis yang digunakan dalam produksi
teh juga menentukan jumlah senyawa yang bermanfaat di mana misalnya,
berbagai assamica telah dilaporkan memiliki lebih dari dua kali kandungan
flavanol dari berbagai sinensis meskipun penggunaannya dibatasi untuk produksi
teh hitam karena untuk rasa pahit yang dihasilkan dari kandungan flavanol yang
tinggi (Takeo 1992). Sebuah survei literatur tentang profil kimia dan bioaktivitas
dari semua jenis teh mengungkapkan kurangnya informasi atau kesepakatan
tentang sifat teh putih dibandingkan dengan jenis teh lainnya sementara variasi
dalam komposisi dan bioaktivitas antara teh putih dan hijau dan subtipe masih
belum jelas ( Hilal dan Engelhardt 2007). Penelitian ini mengembangkan dan
memvalidasi efisiensi ekstraksi teh dan metode kromatografi untuk analisis
kuantitatif pada 9 katekin dan 3 methylxanthines dalam teh putih. Penelitian
sebelumnya pada teh putih dilakukan pada satu produk dengan hanya
memasukkan 1 subtipe teh putih dalam protokol pengambilan sampel mereka

(Rusak dan lain-lain 2008; Horzic dan lain-lain 2009), atau dengan subtipe teh
putih yang tidak masuk spesifikasi sedang diselidiki (Hilal dan Engelhardt 2007 ).
Penelitian ini dilakukan sebagai kemungkinan intra-variasi senyawa dalam
subtipe teh putih dengan memeriksa 2 subtipe teh putih dari 4 sumber yang ada di
pasaran dan membandingkan ini dengan 5 subtipe teh hijau dari 5 sumber dari
pasaran. Komposisi fenolik dan sifat antioksidan dari teh putih dan hijau diteliti
lebih lanjut menggunakan uji Folin-Ciocalteau (F-C) TPC dan uji 1-1-difenil-2pikrilhidrazil (DPPH), secara berturut-turut.
Bahan dan Metode
Bahan Kimia dan Reagen
Analisis meliputi asam trifluoroasetat (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ,
USA), HPLC-kelas asetonitril (JT Baker, Phillipsburg, NJ, USA) dan air suling
menggunakan sistem Milli-Q (Millipore Lab., Bedford, Mass., USA ). HPLCgrade metanol (E. Merck, Darmstadt, Jerman) digunakan untuk persiapan sampel.
Reagen kelas etanol (Fisher Scientific), asam askorbat, dan 1- 1-difenil-2pikrilhidrazil (DPPH, Sigma Chemical Co., St. Louis, Mo, AS) yang digunakan
untuk uji DPPH scavenging. F-C reagen (2N) dan natrium karbonat bubuk
(Kemurnian : > 99,5%) (Sigma Chemical Co) yang digunakan untuk uji TPC.
Standar
Standar murni asam gallic (GA) (1), (+) - katekin (C) (2), kafein (CAF) (3), (-) epigallocatechin 3-gallate (EGCG) (4), dan (- ) gallocatechin (GC) (5) yang dibeli
dari ChromaDex (Santa Ana, California., USA). (-) - Epicatechin 3-gallate (ECG)
(6), (-) - epigallocatechin (EGC) (7), dan (-) - catechin 3-gallate (CG) (8) yang
dibeli dari Fisher Scientific (Pittsburgh, Pa., USA). Theobromine (TB) (9), teofilin
(TP) (10), (-) - gallocatechin 3-gallate (GCG) (11) dan (-) - epicatechin (EC) (12)
diperoleh dari Sigma Chemical Co. Quercetin dihidrat (Sigma Chemical Co.)
digunakan sebagai standar internal untuk tujuan kalibrasi.
Bahan Tanaman

Sebanyak 8 sampel teh putih dari 2 subtipe utama, peony putih (Bai mudan) dan
Yin Zhen silver needle (bai hao Yin Zhen), baik dari Provinsi Fujian di China
(Pettigrew 2004), dan 19 sampel dari teh hijau yang mewakili 5 subtipe
(Dragonwell, mesiu, melati mutiara, sencha, dan gykuro) diperoleh dari 5
perusahaan-A komersial, B, C, D, dan E. daun longgar sampel teh yang digunakan
untuk semua percobaan karena ekstraksi senyawa dari daun teh longgar telah
terbukti lebih efektif daripada teh kantong dalam kuantifikasi analit ( Rusak dan
lain-lain 2008). Semua analisis sampel teh dilakukan dalam tiga kali pengulangan.
Ekstrasi Sampel
Air dan ekstrak larutan metanol pada teh disiapkan untuk kuantifikasi
fenolik dan komposisi methylxanthine dan bioaktivitas. Prosedur ekstraksi air teh
kondisi persiapannya direplikasi pada saat meminum teh (Khokhar dan
Magnusdottir 2002; Rusak dan lain-lain 2008). Daun teh kering (1 g) direndam
dengan 100 ml air deionisasi pada suhu 95 sampai 100oC selama 5 menit.
Campuran teh yang dihasilkan disaring di bawah vakum menggunakan kertas
filter Whatman nr 5. Sebuah alikuot (1,5 mL) dari filtrat disentrifugasi pada 15000
rpm selama 15 menit dan supernatan melewati 0,45 m filter membran nilon
sebelum analisis HPLC. Sisa dari filtrat dibekukan pada -20oC dan beku-kering
dalam lyophilizer untuk memperoleh ekstrak air kering untuk DPPH dan tes TPC.
Ekstraksi alkohol dilakukan untuk meniru kondisi industri dan penelitian
(Rusak dan lain-lain 2008). Ekstrak metanol diperoleh menggunakan modifikasi
prosedur yang telah dijelaskan sebelumnya (Nuntanakorn dan lain-lain 2007).
Tanah daun teh kering yang diekstrasi dengan 80% larutan metanol dalam rasio 1
g : 10 ml pelarut (w / v) menggunakan sonikator selama 30 menit. supernatan
disaring di bawah vakum menggunakan kertas saring Whatman nr 5 dan filtratnya
disentrifugasi pada 15000 rpm selama 15 menit dan disaring melalui 0,45 pM
filter membran nilon setelah pra-pembilasan dengan sampel sebelum analisis
HPLC.
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (HPLC)

Analisis HPLC dilakukan dengan menggunakan aWaters 2695 HPLC

(Milford, Mass., AS) modul dilengkapi dengan 996 fotodioda detektor array
(PDA) dan dioperasikan dengan software Empower. Sampel dan standar
dipisahkan pada Synergi Fusion, 4 m, 250 4,6 mm ID, C-18 kolom fase terbalik
(Phenomenex, Torrance, California., AS). Suhu kolom dipertahankan pada 30oC
dengan pemanas kolom dan suhu autosampler pada 4C. Sebuah sistem gradien
digunakan untuk fase gerak yang terdiri dari 0,05% (v / v) asam trifluoroasetat
dalam air suling (A) dan dalam asetonitril (B), dengan laju alir 1 mL / menit dan
durasi 35 menit. Profil gradien digunakan seperti sebelumnya digambarkan
(Dalluge dan lain-lain 1998) adalah sebagai berikut: 0 sampai 25 menit, 12%
sampai 21% B; 25 sampai 30 menit, 21% sampai 25% B. Kolom dibilas dengan
100% B selama 10 menit dan di re-equilibrated selama 5 menit dengan kondisi
awal. Volume sampel disuntikkan adalah 5

L untuk ekstrak metanol dan 40

L untuk ekstrak air. Spektrum UV-vis tercatat 254-400 nm dan puncak yang

relevan terdeteksi pada 280 nm. Puncak diidentifikasi berdasarkan spektra serapan
karakteristik dan waktu retensi.
Validasi Metode HPLC
Validasi dilakukan sesuai dengan AOAC Intl. Pedoman untuk Single Lab.
Validasi ChemicalMethods untuk Suplemen diet dan Botanicals (AOAC 2002).
Metode ini divalidasi terhadap selektivitas, linieritas, pemulihan, deteksi, dan
batas kuantifikasi dan presisi.
Kurva kalibrasi didirikan pada 5 sampai 7 poin data untuk serial
pengenceran standar 1 sampai 12 menggunakan 80% metanol, measuredat 280 nm
dan mencakup berbagai konsentrasi 2,23-11.000

g/mL. Studi pemulihan

dilakukan pada daun the yang lepas dengan 0,985, 1,97, dan 3,94 mg / konsentrasi
mL quercetin dihidrat (3,3,4,5,7-pentahydroxyflavone) digunakan sebagai
standar internal.

Untuk pengujian intra-day,

dilakukan dengan mereplikasi 10 analisis

standar 1, 4 sampai 12 dilakukan dan juga dilakukan pada 2 konsentrasi yang

berbeda (0.6 dan 1 mg / mL) dari campuran 10 standar pada 2 hari yang berbeda
untuk inter-day studi presisi. Presisi pada setiap konsentrasi dinyatakan sebagai %
RSD dari luas puncak diukur dari rata-rata daerah puncak. Resolusi puncak (Rs)
dihitung sebagai rasio perbedaan waktu retensi (T1 & 2) antara puncak berdekatan
dengan penjumlahan dari bandwidth puncak pada half height (W0.5,1 & 2) sesuai
dengan rumus di bawah ini (Snyder dan lain-lain 1997):
Rs = 1.18(T2 T1)/W0.5,1 + W0.5,2
Pengenceran standar 1 sampai 4, 6, 9, dan 10 dianalisis dengan HPLC untuk
mendapatkan konsentrasi dengan puncak rasio signal-to-noise dari sekitar 3: 1
(batas deteksi [LOD]) dan 10:1 (LOQ). Hasil dinyatakan sebagai konsentrasi
terdeteksi atau diukur dalam mikrogram per mililiter.
1-1-Diphenyl-2-pikrilhidrazil (DPPH) Pengujian Penangkapan Radikal
Pengujian pembersihan radikal DPPH dilakukan seperti yang dijelaskan
sebelumnya (Saito dan lain-lain 2007b). Ekstrak air teh terlarut (50
dicampur dengan 150

L)

L 400 larutan pM DPPH. Campuran diinkubasi selama

30 menit pada 37oC dan nilai-nilai absorbansi diukur pada 517 nm menggunakan
Softmax Pro 3.0 lempeng pembaca (Molecular Devices, Sunnyvale, California.,
AS). Kemampuan pembersih radikal sampel dihitung sebagai persentase dari
radikal bebas DPPH dihambat oleh sampel dibandingkan dengan penghambatan
radikal dalam kontrol air negatif digunakan:
(AB negatif control - sampel ABS / AB kontrol negatif) * 100
asam galat (0.015625 ke 0,25 mg / mL) dan asam askorbat (,03125-,5 mg / mL)
digunakan sebagai kontrol positif. Nilai-nilai yang diperoleh diplotkan terhadap
konsentrasi (mg / mL) pengenceran sampel dan hasil akhir dinyatakan sebagai
nilai IC50 (konsentrasi sampel yang diperlukan untuk mengais 50% dari radikal
DPPH).

Total Phenolic Content (TPC) Assay

TPC ditentukan secara spektrofotometri menggunakan reagen F-C seperti
dijelaskan sebelumnya (Prior and others, 2005). Untuk 100

L pengenceran

ekstrak air teh ditambahkan 1 mL dari 10% (v / v) reagen 2N F-C dan setelah
inkubasi pada suhu kamar selama 5 menit, 1 mL dari 10% (m / v) larutan natrium
karbonat ditambahkan untuk membuat ekstrak alkali. Campuran diinkubasi
selama 90 menit pada suhu kamar setelah absorbansi diukur pada 765 nm dan
hasil dinyatakan sebagai Gallic Acid Equivalent (GAE) dalam miligram per gram
bahan tanaman kering. Konsentrasi polifenol dalam sampel berasal dari kurva
standar absorbansi konsentrasi asam gallic dalam rentang 31,25-500

g / mL.

Analis Statistik
Hasil dianalisis secara statistik menggunakan JMP 7.0 software (SAS) untuk
menentukan nilai rata-rata, standar deviasi dan standar error sarana massa terukur
senyawa dianalisis dengan HPLC di triplicates. ANOVA dengan tingkat
signifikansi = 0,05% dilakukan untuk menentukan hubungan antara Jenis teh
dan jumlah catechin, catechin individu, aktivitas antioksidan IC50, dan TPC.
Perbedaan dengan P 0,05 dianggap signifikan. Total kandungan katekin (TCC)
untuk air dan metanol ekstrak itu diselesaikan dengan penambahan jumlah katekin
individu (EGCG, EKG, EGC, GCG, CG, C, dan EC). perhitungan serupa telah
diasumsikan oleh studi analitis sebelumnya sampel teh (Khokhar dan
Magnusdottir 2002; Rusak dan lain-lain 2008). analisis korelasi dilakukan untuk
DPPH IC50 terhadap TPC, TCC terhadap DPPH IC50, dan TCC terhadap TPC
untuk mengevaluasi hubungan antara kedua jumlah dalam ekstrak teh dianalisis.
Grafik dibangun menggunakan JMP 7.
Hasil dan Diskusi
Validasi HPLC
Modifikasi dari metode analisis, dipisahkan campuran standar kafein,
asam galat, dan delapan catechin (EGC, EC, EGCG, GCG, (+) - C, CG, GC, dan

EKG) berjarak 22 menit. Sebuah jenis kolom yang berbeda (Synergi Fusion,
Phenomenex, Torrance, California., USA), dengan karakteristik yang sama seperti
kolom (Zorbax Eclipse XDB-C18, Rockland Teknologi Inc./Dupont, Newport,
Del., USA) digunakan oleh Dalluge dan rekannya dengan cara memisahkan lebih
dari 5 senyawa yang dibandingkan dengan 7 senyawa (6 fenolat dan kafein) yang
diperoleh oleh para peneliti ini (Dalluge dan lain-lain 1998). Gambar 1
menunjukkan kromatogram dari beberapa sampel teh putih dan hijau yang
digunakan dalam penelitian ini.
Pemisahan standar dicapai oleh HPLC dengan nilai kritis sepasang pita
(Rs. = 3.81) dihitung seperti yang dijelaskan sebelumnya (Sharma dan lain-lain
2005). Linearitas yang baik diamati untuk semua katekin dan asam galat (r2> 0.99)
dalam kisaran konsentrasi yang diberikan kecuali kafein yang koefisien korelasi
lebih rendah (r2= 0,9787) disebabkan optimalisasi rentang linear untuk
memperhitungkan konsentrasi yang lebih tinggi diamati untuk kafein dalam
beberapa sampel ekstrak air teh. LOD dan batas kuantifikasi (LOQ) dari 7 standar;
GA, C, CAF, EGCG, EKG, TP, dan TB yang ditemukan dalam rentang 0,05
sampai 1 mg / mL dan 0,1 sampai 5

g / mL,secara berturut-turut.

Analisis intra-day dari campuran 10 standar senyawa yang mengandung

GA, GCG, CG, EGCG, GC, EKG, EGC, TB, TP, dan EC berkisar antara 0,19%
dan 0,53% untuk eksperimen pengulangan presisi, sedangkan analisis inter-day
campuran standar yang sama di 2 tingkat konsentrasi (0,6 dan 1 mg / mL) selama
2 hari yang berbeda menghasilkan% RSD mulai dari 0,13% menjadi 1% untuk 0,6
mg / konsentrasi mL, dan 0,1% menjadi 1,07% untuk 1 mg / konsentrasi mL .
pemulihan persen dari internal standar, quercetin dihidrat (r2 = 0,9996), dengan
menggunakan metode ekstraksi dimodifikasi dari prosedur yang diterbitkan
(Nuntanakorn dan lain-lain 2007; lihat Lampiran 1) berkisar antara 64,2% sampai
93% untuk teh hijau dan 81,6% untuk 101,7% untuk teh hitam (lihat Lampiran 2).

Membandingkan Total Kandungan Katekin (TCC) Teh Putih dan Hijau

Hasil TCC menunjukkan inter dan intra-variasi dalam jenis teh dan subtipe
serta dengan jenis metode ekstraksi yang digunakan. TCC untuk ekstrak metanol
teh putih berkisar 47,16-169,94 mg / g dan 32,23-141,24 mg / g untuk ekstrak teh
metanol hijau (Tabel 1). Nilai-nilai ini merupakan maksud persen berat dari bahan
tanaman kering 6,77% untuk teh hijau dan 7,62% untuk teh putih. Hasil ini sesuai
dengan nilai-nilai yang diperoleh dalam penelitian sebelumnya menggunakan
metode ekstraksi yang sama dan bahan pelarut pada teh hijau (Sharma dan lainlain 2005). Teh putih memiliki kandungan katekin lebih tinggi dari teh hijau
dengan nilai rata-rata 76,15 mg / g bahan teh kering (Tabel 1).
TCC untuk ekstrak air teh putih dianalisis berkisar lebih dari 25 kali lipat
(14,40-369,60 mg / g bahan tanaman kering; Tabel 1) dan sekitar 11 kali lipat
(21,38-228,20 mg / g) untuk teh hijau. Total katekin ekstrak air teh sebesar 8.20%
dari lepas teh putih kering dan 9,97% untuk teh hijau. Fluktuasi kali retensi dan
co-elusi antara TB dan GC mengharuskan pengecualian dari 2 senyawa ini dari
kuantifikasi untuk menghindari kesalahan sistematis. TP tidak terdeteksi dalam
sampel teh dan juga dikecualikan dari perhitungan seperti yang terjadi di beberapa
penyelidikan lainnya dari teh hijau (Khokhar dan Magnusdottir 2002; Sharma dan
lain-lain 2005).
Sementara ekstrak air teh hijau memiliki rata-rata komposisi katekin lebih
tinggi sebesar 99,66 mg / g (Tabel 1), subtipe tertentu dari teh putih memiliki TCC
lebih tinggi dari subtipe teh hijau. Misalnya, Perusahaan A peony putih memiliki
sebuah TCC dari 369,60 mg / g ekstrak air daun kering dan silver needle.
Perusahaan C menghasilkan 163,94 mg / g TCC untuk ekstrak teh metanol. TCC
teh hijau tertingi diamati untuk ekstrak air teh hijau perusahaan E dengan
kuantitas 228,20 mg / g teh kering. Namun, sampel peony putih dari perusahaan
lain yang terdapat kandungan katekin secara signifikan lebih rendah, membuat
pernyataan mengenai subtipe teh dengan kandungan katekin lebih tinggi tidak
meyakinkan (Tabel 1).

Teh memiliki jumlah signifikan lebih tinggi dari fenolat dan flavonoid
dalam 5 menit pertama ekstraksi dibandingkan dengan teh putih ketika air dan
pelarut larutan metanol digunakan untuk ekstraksi. Dinding sel lipofilik trikoma
pada tunas teh putih tampak mempengaruhi kinetika ekstraksi katekin hidrofilik
(Rusak and others, 2008). Sebaliknya, Hilal dan Engelhardt (2007) menemukan
tingkat rata-rata lebih tinggi dari jumlah katekin dalam teh putih dibandingkan
pada sampel teh hijau yang dianalisis. Dalam penelitian ini, tingkat yang lebih
tinggi dari katekin dalam beberapa sampel teh putih dan variasi antara sampel dari
subtipe tertentu dari sumber yang ada di pasaran yang berbeda menunjukkan
bahwa pernyataan kategoris mengenai jumlah relatif dari katekin dalam teh hijau
dan putih harus dilakukan dengan pertimbangan untuk subtipe spesifik dan
sumber teh dianalisis seperti yang telah disebutkan sebelumnya (Friedman dan
lain-lain 2006). Selain itu, dalam satu arah ANOVA antara jenis teh untuk TCC,
tidak ada perbedaan yang signifikan antara teh hijau dan putih dalam air (F1,79 =
0,72, P = 0,4004) dan ekstrak metanol (F1,79 = 1,38, P = 0,2437) untuk TCC,
berarti pembuatan pernyataan hirarkis kandungan katekin antara kedua jenis teh
dipertanyakan (lihat Lampiran 3 dan 4).
Membandingkan Tingkat Katekin Individu, Kafein, Dan Asam Galat Pada
Teh Putih Dan Hijau
Perbandingan katekin yang terkuantifikasi dan profil methylxanthine pada
teh putih dan hijau metanol dan ekstrak air katekin yang diukur dapat dilihat pada
Gambar 2 dan 3. EGCG memiliki nilai rata-rata tertinggi dari semua katekin
diukur di kedua teh hijau dan putih. Senyawa ini tidak berbeda secara signifikan
dalam jumlah antara jenis teh putih dan hijau pada ekstrak metanol (P = 0,63) dan
ekstrak air (P = 0,18) (lihat Lampiran 5 dan 6).
Dalam beberapa studi kuantifikasi yang melibatkan teh putih dan hijau, teh
hijau telah dilaporkan kaya akan sumber fenolat daripada teh putih (Rusak dan
lain-lain 2008; Horzic dan lain-lain 2009). Studi yang terbatas pada teh putih telah
sebagian besar didasarkan pada hasil analisis kesimpulan mereka pada beberapa
sampel teh dan tanpa memperhatikan subtipe teh (Hilal dan Engelhardt 2007)

.Pada penelitian ini, ekstrak the putih metanol menghasilkan tingkat EKG, C ,
GCG, dan asam galat (P <0,0001) lebih tinggi dari rata-rata dan jumlah yang
relatif lebih tinggi dari EGC dan GCG dalam ekstrak air daripada teh hijau. Teh
putih juga mengandung kafein yang lebih tinggi dari teh hijau walaupun
perbedaannya tidak signifikan secara statistik (lihat Lampiran 5 dan 6). Kadar
kafein adalah sama dengan yang diterbitkan oleh Saito dan lain-lain (2007a),
menggunakan pelarut ekstraksi yang sama. Khokhar dan Magnusdottir (2002)
melaporkan ekstrak teh hijau menggunakan larutan metanol mengandung kafein
berkisar 11-20 mg / g, rentang tersebut meliputi jumlah yang diperoleh dalam
penelitian ini.
Analisis kuantitatif teh menunjukkan jumlah yang sangat berbeda dari
kebanyakan katekin antara subtipe teh dalam kelompok teh yang sama. Misalnya,
ekstrak air teh hijau tertentu seperti Perusahaan D's sencha, mesiu Perusahaan As
gunpowder dan sencha, Perusahaan Es green tea, dan Perusahaan Bs gyokuro
memiliki jumlah khas kafein yang tinggi, EGCG, dan EGC. Sebagian besar
subtipe peony putih dan Perusahaan Bs silver-needle menghasilkan jumlah EGC
dan EGCG tinggi (lihat Lampiran 7). Ekstrak metanol dari kedua jenis teh
mengungkapkan variasi yang jauh lebih sedikit di antara subtipe teh pada katekin
dan kafein. Namun, subtipe tertentu seperti Perusahaan Cs Dragonwell green tea
dan silver needle white tea dan Perusahaan Es Jasmine Green Tea, juga memiliki
jumlah khas EGC, EGCG dan EKG yang tinggi (lihat Lampiran 8. Hasil ini
mengungkapkan sifat individualistis profil kimia subtipe teh dan membuatnya
penting bahwa kesimpulan lebih lanjut mengenai jumlah komparatif dari senyawa
fenolik antara teh hijau dan putih dibuat dengan hati-hati. Khokhar dan
Magnusdottir (2002) sebelumnya telah dikutip dalam variasi kelimpahan senyawa
dalam teh tergantung pada subtipe teh sampel dan subtipe yang berbeda hasil dari
protokol yang berbeda dalam pengolahan teh, praktek hortikultura, dan
pengaturan geografis (Pettigrew 2004; Sultana dan lain-lain 2008).

Teh dari 5 perusahaan yang berbeda yang digunakan dalam penelitian ini,
dan subtipe teh sejenis yang dimiliki, jumlah bervariasi dari fenolat dan kafein
tergantung pada sumber perusahaan teh. Misalnya, TCC ekstrak air dari peony
putih subtipe teh putih yang diproduksi oleh 3 perusahaan yang berbeda; A, B,
dan D adalah 369,6, 89,64, dan 35,5 mg / g, meskipun konten katekin dalam
ekstrak metanol tidak bervariasi. Serbuk mesiu teh hijau subtipe dari perusahaan
B dan E menghasilkan 94.74 dan 188,37 mg / g dalam ekstrak air teh, dan 32,23
dan 46,21 mg / g, masing-masing dalam ekstrak metanol (Tabel 1). Variasi dalam
komposisi fitokimia antara sampel dari subtipe teh tertentu dari sumber komersial
yang berbeda mungkin hasil dari kondisi penyimpanan dan lama penyimpanan
(Friedman dan lain-lain 2008). Beberapa manufaktur mengikuti protokol untuk
memastikan kesegaran produk teh mereka sementara produsen lain menyimpan
produk teh mereka untuk waktu yang lama dengan kurang memperhatikan kondisi
penyimpanan yang optimal. Praktek yang terakhir mungkin mengakibatkan
degradasi komposisi fitokimia (Friedman dan lain-lain 2008).
Hasil dari studi pelarut yang digunakan, protokol ekstraksi, dan sumber
pengadaan teh menghasilkan variasi dalam jumlah relatif senyawa dalam teh.

Dengan demikian, disarankan bahwa penyelidikan profil kimia teh harus

mengikuti protokol pengambilan sampel yang mencakup sampel teh dari berbagai
sumber dan produsen dan disertai dengan spesifikasi sub tipe teh , praktek yang
sudah diadopsi oleh beberapa peneliti (Saito dan lain-lain 2007b; Lin dan lain-lain
2008).
Kandungan Fenolik Dan Aktivitas Antioksidan Teh Putih Dan Hijau
Teh putih menghasilkan nilai rata-rata DPPH IC50 36,07

g / mL sedangkan

teh hijau secara signifikan menunjukkan (P = 0,0002) aktivitas antioksidan yang

lebih tinggi dengan nilai IC50 23,26

g / mL (Gambar 4). Galia dan asam

askorbat digunakan sebagai kontrol positif menyelesaikan aktivitas scavenging

dengan nilai IC50 rata-rata 3,68

g / mL (r2 = 0,9943) dan 11,56

g / mL (r2

= 0,9998) masing-masing. Hasil DPPH dari investigasi dibandingkan oleh Saito

dan lain-lain (2007b) pada teh hijau memiliki nilai IC50 berkisar antara 8,33-16.10
g / mL, nilai sedikit lebih rendah dari yang diperoleh dalam penyelidikan

kami; Namun, metode ekstraksi teh berbeda. Manian dan lain-lain (2008)
mengamati nilai DPPH IC50 untuk ekstrak teh hijau 19,50
metode ekstraksi yang sedikit berbeda.

g / mL dengan

Teh hijau juga secara signifikan memiliki (P <0,0001) rata-rata TPC lebih tinggi
(7.72 mg GAE / g teh kering) dari teh putih (3,42 mg GAE / g teh kering)
(Gambar 5). Nilai TPC teh hijau berkisar 1,17-18,59 mg GAE / g sedangkan
kisaran untuk TPC teh putih adalah 0,96-5,62 mg GAE / g. Rusak and others
(2008) melaporkan nilai konten teh putih fenolik di kisaran 0,4-2,1 mg GAE / g
meskipun asam hidrolisis prosedur dan pelarut yang bervariasi digunakan dalam
ekstraksi sampel mereka dapat menjelaskan perbedaan dengan hasil yang
diperoleh dalam penelitian ini, tren juga diamati pada hasil teh hijau mereka (0,82,4 mg GAE / g). Khokhar dan Magnusdottir (2002) melaporkan tingkat konten
fenolik yang lebih tinggi untuk teh hijau (65,8-106,2 mg / g) menggunakan
metode ekstraksi daun yang sama seperti dalam penelitian ini, tetapi nilai-nilai
yang berbeda mungkin berasal dari variasi dalam protokol F-C assay (Prior and
others, 2005).
Sebelumnya peneliti telah mengaitkan aktivitas scavenging DPPH teh
terutama untuk keberadaan katekin, khususnya EGCG (Nanjo dan lain-lain 1999).
Penelitian ini mengungkapkan bahwa meskipun subtipe teh putih dan hijau
memiliki TCC sebanding dan tingkat EGCG, sampel teh hijau memiliki aktivitas
antioksidan lebih tinggi secara signifikan.

Hal ini mungkin disebabkan oleh adanya senyawa antioksidan tambahan seperti
flavonol glikosilasi, proanthocyanidins, dan asam fenolik dan turunannya (Lin dan
lain-lain 2008) dalam teh hijau terbukti dengan tingkat TPC lebih tinggi. Menurut
Lin dan lain-lain (2008), teh yang terdiri dari tunas muda dan daun dipanen pada
awal pertumbuhan (teh putih) mengandung fenol yang lebih rendah daripada daun

yang lebih matang yang digunakan dalam produksi teh (teh hijau). Selanjutnya,
para peneliti melaporkan bahwa infus air panas dari teh putih, disiapkan dengan
cara yang sama seperti dalam studi ini, tidak akan mengandung glikosida flavonol
terasilasi, yang dapat mengakibatkan tingkat TPC lebih rendah dan aktivitas
antioksidan. Horzic dan lain-lain (2009) juga menegaskan bahwa kapasitas
antioksidan dari teh tidak ditentukan oleh satu atau beberapa senyawa fitokimia
dalam tumbuhan, namun secara luas didistribusikan di antara berbagai fenolat
termasuk katekin.
Untuk mengkonfirmasi hubungan uji fenol-redoks, analisis korelasi
multivarian antara nilai-nilai DPPH IC50 dan TPC (r = -0,3058) ekstrak air teh
putih dalam penelitian ini menunjukkan peningkatan aktivitas antioksidan (nilai
IC50 yang lebih rendah) dari sampel teh, kekuatan fenolik meningkat.Namun,
korelasi positif yang sangat rendah diperoleh antara TCC ekstrak teh putih dan
nilai-nilai DPPH IC50 (r = 0,0093) dan TPC (r = 0,1080) menunjukkan bahwa
katekin bukan satu-satunya senyawa yang berperan untuk reaksi redoks yang
diukur di kedua tes. Sebaliknya, TPC dari ekstrak air teh hijau berkorelasi positif
dengan TCC (r = 0,6217) dan berkorelasi negatif dengan nilai-nilai DPPH IC50 (r
= -0,4143). TCC ekstrak air teh hijau memberikan kontribusi terhadap
kemampuan pembersih radikal dari jenis teh (r = -0,4845). Nilai korelasi yang
diperoleh untuk teh hijau mirip dengan hasil oleh Saito dan lain-lain (2007b)
(TCC terhadap DPPH; r = -0,628), meskipun sistem ekstraksi sampel sedikit
berbeda.
Kesimpulan
Studi ini memberikan bukti keandalan jumlah relatif senyawa dalam jenis
teh pada faktor-faktor yang terlibat dalam budidaya, pengolahan, penanganan, dan
kemasan teh yang mengarah pada subtipe yang berada di pasaran(Khokhar dan
Magnusdottir 2002). Temuan ini mendukung bahwa peringkat urutan jenis teh
untuk kelimpahan senyawa penyusun seperti fenolat atau methylxanthines akan
berlaku untuk tujuan perbandingan hanya jika praktek budidaya dan teh
pengolahan dapat dikendalikan. Untuk tujuan validitas, perbandingan luas

menegaskan dalam banyak publikasi dari jumlah relatif senyawa fenolik berada di
urutan hijau> oolong> hitam> putih (Lin dan lain-lain 1998; Lin dan lain-lain
2003; Rusak dan lain-lain 2008) atau urutan hitam > oolong> hijau> putih
(Khokhar dan Magnusdottir 2002; Lin dan lain-lain 2003) berkaitan dengan
kandungan kafein, harus didasarkan pada protokol pengambilan sampel termasuk
berbagai subtipe diperoleh dari berbagai sumber yang ada di pasaran. Subtipe
tertentu teh putih seperti peony putih mengandung jumlah katekin yang tinggi dan
kafein yang bervariasi tergantung pada protokol ekstraksi dan sumber yang berada
di pasaran. Subtipe ini membangkitkan minat dalam jenis lain teh putih seperti
kultivar silver-tipped

Sri Lanka (Pettigrew 2004), kemungkinan hasil

perbandingan diperoleh ketika kultivar teh putih dianalisis bersama dengan jenis
teh lainnya, atau jika ukuran putih teh sampling meningkat.
Ucapan Terimakasih
Para penulis ingin mengucapkan terima kasih para ilmuwan berikut untuk
kontribusi untuk penyelidikan penelitian ini: Ulyana Munoz-Acuna, Amy Keller,
Dr. Bei Jiang, Dr. Hui Yang, Dr. Mario Figueroa, dan John Vinod. Para penulis
juga mengucapkan terima kasih mereka ke Dalam Pursuit of Tea dan perusahaan
teh Adagio untuk sampel teh mereka.

KESIMPULAN MENURUT PEMBACA

Dalam suatu penelitian terbaru telah diketahui bahwa teh putih memiliki
efek farmakologi

sebagai sebagai anti-karsinogenik, dapat meningkatkan

kekebalan tubuh, dan memiliki sifat yang dapat mempengaruhi kesehatan manusia
seperti pada teh hijau. Penelitian dilakukan untuk mengukur kadar polifenol dan
antioksidan. Dari hasil penelitian, teh putih tertentu memiliki jumlah total katekin
yang sebanding dengan beberapa teh hijau, tetapi dilihat dari kapasitas antioksidan
yang lebih rendah, menunjukkan bahwa teh putih memiliki antioksidan nonkatekin yang lebih sedikit. Proses pengukuran kadar polifenol dan antioksidan
pada teh putih dan teh hijau dilakukan dengan melalukan ekstraksi sedangkan
profil kimianya ditentukan menggunakan metode kimia analitik yang divalidasi.
Penelitian ini mengembangkan dan memvalidasi efisiensi ekstraksi teh dan
metode kromatografi untuk analisis kuantitatif pada 9 katekin dan 3
methylxanthines dalam teh putih. Komposisi fenolik dan sifat antioksidan dari teh
putih dan hijau diteliti lebih lanjut menggunakan uji Folin-Ciocalteau (F-C) TPC
dan uji 1-1-difenil-2-pikrilhidrazil (DPPH), secara berturut-turut.
Bahan dan metode yang digunakan diantaranya adalah bahan kimia dan
reagen, standar, bahan tanaman,ekstrasi sampel, kromatografi cair kinerja tinggi
(HPLC), validasi metode HPLC, 1-1-diphenyl-2-pikrilhidrazil (DPPH) pengujian
penangkapan radikal Total Phenolic Content (TPC) assay,dan analis statistik. Teh
yang dilakukan pengujian adalah teh yang berasal dari beberapa perusahaan dan
dari teh yang beredar di pasaran. Dari hasil penelitian diketahui bahwa peringkat
urutan jenis teh untuk keberadaan senyawa penyusun seperti fenolat atau
methylxanthines dipengaruhi oleh budidaya dan pengolahan. Hal tersebut dapat
dilihat dari hasil pengujian teh bahwa berbeda perusahaan, hasil pengujian pun
memiliki nilai yang berbeda karena cara pengolahan yang berbeda.