TEMA 1: INTRODUCCIN

Anlisi , es la ciencia que estudia el estado de una poblacin y los

mtodos e instrumentos que se necesitan para conocer dicho estado.
Por ejemplo, en un anlisis de sangre la poblacin corresponde a la
muestra de sangre y las metodologas necesarias para conocer el
estado de esta poblacin. Llamamos tcnica : El medio de obtener la
informacin sobre el analito . Mtodo: conjunto de operaciones y
tcnicas aplicadas al anlisis de una muestra.
Un anlisis qumico , es conocer una poblacin des del punto de
vista de su composicin y naturaleza qumica ( iones ,tomos
,molculas ). Un anlisis nos puede responder :Que hay ,cmo
,dnde , en que forma de la composicin .Hay la composicin
total , ,global pero tambin hay la composicin parcial como objeto de
anlisis qumico .
Un anlisis bioqumico , es aquella parte del anlisis qumico que
tiene como objeto el conocimiento de molculas biolgicas ,o bien
,partes de las muestras de tipo biolgico.
Bioensayos (tcnicas bilgicas)
Segn la informacin que queremos obtener : Encontramos analisi
cualitativo , el qual responde el que ( identifica la presencia o la
ausencia de un analito ) y el anlisis cuantitativo , que responde a
la pregunta cuanto hay(dessarrola mtodos para determinar su
concentracin).
El lmite de deteccin , es aquel nivel de concentracin mnima de
una sustancia a partir de la cul somos capaces de detectar con
fiabilidad aquella concentracin de sustancia a parir de la cual
podemos detectar su presencia en una poblacin a travs de un
mtodo analtico determinado . Intuitivamente, el LDD sera la
concentracin mnima obtenida a partir de la medida de una muestra
(que contiene el analito) que seramos capaces de discriminar de la
concentracin obtenida a partir dela medida de un blanco, es decir,
de una muestra sin analito presente. Este parmetro depende del
instrumento utilizado .No siempre el mismo analito en distintas
concentraciones es el mismo . Por lo tanto, la pregunta que hay no
se puede responder , lo correcto seria : que se puede detectar , por
encima del lmite de deteccin ( margen por el que podemos empezar
hacer el anlisis) . Tambin existe el lmite de deteccin instrumental :
que corresponde a la concentracin mnima de un compuesto
analizado , que sin presencia de la matriz , un instrumento puede
detectar con una fiabilidad definida .Cuando no detectas un analito se
escribe < L.D ( zona de indeterminacin )-

PROCESO ANALTICO
Etapas consecutivas, las cuales no pueden romperse para llegar a un
resultado global . Consistente en un conjunto de procedimientos
realizados para solucionar un determinado problema analtico.
A pesar de la gran diversidad de objetos suseptibles al anlisis ,hay :
-

Muestra : parte representativa de la materia objeto del anlisis

Analitos : compuestos o elementos de inters (espcie qumica
que se analiza )
Matriz: poblacin donde se encuentra el analito .
1.
L

a definicin del problema (porque no funciona ), es la primera

etapa , en la que se plantea el tipo de anlisis que se necesita y la
escala de trabajo .
2. La definicin del problema analto (
que tengo que
detectar).Estos dos pasos son propios del analito.
3. seleccin del mtodo de anlisi ( ms adecuado y factible el
analista tiene que disponer de toda la informacin ) ,es un aspecto
clave para la resolucin adecuado del problema. La seleccin del
mtodo de anlisis generalmente representa un compromiso entre:
exactitud requerida, concentracin prevista del analito en la

muestra, disponibilidad de tiempo, factor econmico, complejidad

de la muestra y nmero de muestras bajo anlisis, entre otros
factores.
4. El muestreo : tcnicas y estrategias : se refiere al como
realizar el anlisis .Es propio del analista .El muestreo ser
diferente en funcin de la matriz y del analito .El tiempo tambin
influye con el nmero de muestras .Otro parmetro a tener en
cuenta es la fiabilidad , a veces tcnicas muy largas son ms
fiables , pero por el tipo de anlisis una ms corta ya sera
suficiente. Por ejemplo puede hacer un anlisis de : 2mg /g +/0,1 ;1,9-2,1 ; 2mg /g +/- 0,001 ; 1999-20001 .Otro punto
importante es el coste, que tambin influir en la eleccin del
mtodo .Por ltimo , el funcin de la concentracin de analito
usaremos distintas estrategias ( segn el margen de concentracin
) . El mtodo se puede seleccionas consultando revistas
cientficas , bibliografa ,webgrafias fiable, la experiencia del propio
analista o del equipo, libros de anlisis , una reunin cientfica
(convenciones ) ,las normas (estndar , para hacer procedimientos
estandarizados ) ( europeas EN, UNE, normas espaolas ,DIN
,alemanas y las ISO que son las internacionales ).
5. Conservacin de la muestra : Para que la informacin obtenida
sea significativa, es necesario que la muestra tenga la misma
composicin que el resto del material del que se obtuvo. Es decir,
tiene que ser una parte global de la poblacin que sea
representativa. Si la poblacin es homognea no hay problema ,
pero si es heterognea si .El muestreo normalmente se realiza en
el campo donde se sita la poblacin y no la realiza el analista
,pero es una etapa muy critica . La toma de muestra requiere un
plan adecuado con el fin de conseguir una pequea masa del
material cuya composicin represente con exactitud a la totalidad
del material muestreado. Para eso, se necesitan estadsticas para
para conocer cuntas muestras se tienen que tomas, etc. La
muestra tiene que ser inalterada, por los efectos externos ( no se
puede alterar respecto a la original ).No se debe contaminar ni
absorber los analitos .Las muestras se tienen que conservar hasta
su anlisis : las muestras acuosas normalmente se mantienen en
la nevera , en cambio los materiales degradables vago congelacin
.( la temperatura i el recipiente es importante ).
6. Toma de alcuota: cantidad de muestra y numero de replicados
(siempre 2 o 3 para contrastar. En hacer replicados aumenta la
fiabilidad ,pero no la calidad del anlisis .La cantidad de la muestra
tiene que ser suficiente para detectar el nivel q r pero el mnimo

posible para tener stock .Los replicados facilita el mtodo analtico,

la mayora de los anlisis qumicos se llevan o deben llevarse a
cabo sobre varias rplicas de la muestra. La realizacin de rplicas
mejora la calidad de los resultados e informa acerca de la fiabilidad
del anlisis.
7. Preparacin de muestra : obtener una disolucin que contenga
el analito que estaba presente en la muestra .
Si la muestra es solida se tendr que traspasar el analito de la fase
solida a una disolucin , con dos mtodos :
-

Extraccin slido lquido : traspasar el analito del solido

(muestra ) al disolvente , para pasar a tenerla en disolucin
Digestiones / Hirdolisi (acido / base) : tratamos la muestra con
un cido.

Si la muestra es lquida , entonces la extraccin del analito

normalmente es innecesaria .Pero si es orgnico ,se tiene que realizar
la extraccin lquido-lquido ( porque no es soluble el analito el la
muestra) con un disolvente orgnico .Otro mtodo, es la extraccin
en fase slida .
La ltima opcin es que el analito ya es soluble , y por lo tanto no se
tiene que hacer nada .(disolucin con analito ) .Esto no requiere que
se analice toda la muestra , sino que la disolucin a mesurar tenga
todo el analito .
Hay otras sustancias que pueden ser detectadas en el anlisis de la
disolucin , y no son el analito de inters, estos se denominan
INTERFERENCIAS (cualquier seal que interfiere en el mtodo de
deteccin del analito ) .Por lo tanto alter la lectura del resultado . Ej :
AgNO3 + NaCl AgCl (precipita) +NaNO3
AgNO3 +KI AgI (precipita)
Por lo tanto hay que eliminar las interferencias .Los mtodos de mas a
menos selectividad sn :
-

especficos Aquellos que dan seal a un nico analto (No

pueden haber interferencias )

Selectivos Dan seal a un numero bajo de sustancias

( Podemos encontrar algunas interferencias ).
Inespecficos Dan seal a un nmero muy alto de
sustancias (Pueden haber muchas interferencias ).

Para la eliminacin de interferencias se considera como parte de la

preparacin de la muestra y resulta indispensable antes de proceder
a la etapa de medida, para ello se recurrir al mtodo de separacin

ms adecuada ( a travs de reacciones , procesos separativos

,etc ).Aquellas tcnicas analticas que requieran reconocimiento
biolgico , presentan una selectividad muy alta (especficos ) .En
cambio , los qumicos , normalmente son de menor selectividad y
requieren ms etapas de separacin de interferencias.

8. Determinacin analtica : Se mesurar una seal relacionada

con nuestro analito .
Los mtodos analticos se clasifican en funcin de la naturaleza y de
la medida, hablamos de:
-

Mtodos Clsicos o Qumicos: , se basan en las propiedade

qumicas del analito . Son mtodos inespecficos , cualquier
interferencia puede modificar el resultado ,por ejemplo ,en
precipitacin ,peso ,etc. ( la volatilizacin , pesas la muestra
hmeda y seca y la diferencia el agua ).En este tipo de mtodos
se usa una relacin con una reaccin qumica .
o En los mtodos gravimtricos (peso) se determina /
relaciona la masa de analito o de algn compuesto
relacionado qumicamente con l. (se relaciona un peso
con la concentracin de analito en una precipitacin de
analito o volatilizacin).La balanza es inespecfica. Lo
separado corresponde a una porcin del total de la
muestra que se analiza; como se sabe cul es el peso de
la muestra y el de la sustancia aislada es fcil calcular el
porcentaje del elemento o del compuesto que se
determina si se conoce su frmula y las reacciones
qumicas correspondientes. La estequiometria en este
caso tiene gran aplicabilidad .Ej :
FeCl3 +NH3 Fe(OH)3 (precipita )+
NH4Cl

Lo secamos y obtenemos
Fe2O3 y pesamos ,sino limpias
el producto tambin hay NH4Cl
que puede quedar en el
precipitado ( interferencia )

o En los mtodos volumtricos se

mide el volumen de una disolucin de concentracin
conocida que contiene la cantidad de reactivo necesaria
para reaccionar completamente con el analito.

AgNO3

NaCl+ AgNO3 AgCl (precipita ,cambio de

color ) +NAaNO3
NaCl

Mtodos Instrumentales: Basados en

propiedades qumico fsicas .Se basan a que la concentracin
del analito (Ca) es en funcin de una seal (x) : Ca = f (x) ,para
conocer la relacin se usan sustancias patrn (concentracin
conocida ).
o Los mtodos electroanalticos o electromtricas conllevan
la medida de alguna propiedad elctrica como potencial,
intensidad de corriente, resistencia o cantidad de
electricidad. (Ph-metre ,seal de voltajes)
o Los mtodos espectrofotomtricos se basan en la medida
de la interaccin de la luz con los tomos o molculas de
analito (la materia )( absorcin ,emisin o fluorescencia) ;
o bien la produccin de radiacin electromagntica a
partir del analito cuando la materia ha sido sometida a
algn tipo de excitacin.
o Tcnicas cromatografas y electroforticas: se produce la
separacin del analito de los otros componentes de la
disolucin .
o Inmunolgicas: se basan en el reconocimiento de
anticuerpo-antgeno ( muy selectivos )
o M.Radioqumicos :marcan los analitos de forma
radioactiva y se mide la radiacin ( frecuente en mbitos
bilgicos)

9. Procesado de datos :

Ca

La propiedad analtica medida

(x)
depende
de
manera
conocida
y
reproducible
de
la
x
concentracin del
analito (CA). En teora, la medida
de la propiedad es directamente
proporcional a la concentracin
segn la siguiente ecuacin Ca
= K* X. Salvo dos excepciones,
los mtodos analticos
Blanco
instrumentales
( referen
cia )
requieren
la
determinacin emprica de K con
estndares o patrones del analito
(SUSTANCIA
PATRN),
que
permiten construir una relacin. La determinacin del valor de K se
denomina calibracin. Lo ms habitual es buscar una relacin
lineal para poder cuantificar.

Las sustancias patrn se usan para calibrar instrumentos y

procedimientos cuando no hay efectos de interferencias de los
componentes de la matriz en la disolucin del analito. Se preparan
una serie de sustancias patrn de distintas concentraciones
conocidas del analito. Idealmente se utilizan tres o ms
disoluciones en el proceso de calibracin pare definir
correctamente la relacin seal / concentracin .

Tambin se necesita tener un BLANCO , que es aquella disolucin

donde se han incorporado todo el protocolo pero sin el analito .Si
no hay analito debera dar una seal de 0 .Si da diferente puede
ser a causa de las interferencias o de la contaminaciones durante
el proceso. El blanco tiene que ser el mnimo posible
(minimizarse) .Se puede bajar el blanco a 0 en el instrumento para
relizar la recta de referencia .
La calibracin se lleva a cabo al obtener la seal de respuesta
(altura o rea de pico, absorbancia, voltaje, etc.) como funcin de
la concentracin conocida del analito . Al representar grficamente
los datos y ajustarlos a una ecuacin matemtica se obtiene la
curva de calibrado. La constante de proporcionalidad (K) o factor
respuesta
corresponde
a
la
pendiente
de
calibracin.
Seguidamente la seal analtica obtenida para la muestra
analizada se sustituye en la ecuacin de calibracin obtenindose

la concentracin del analito. Los factores de dilucin o

precocentracin a los que hubiese sido sometida la muestra antes
del proceso de medida, habrn de ser considerados para la
obtencin del resultado final. Cuando se emplean sustancias
patrn se supone que cuando en la muestra y el estndar est
presente la misma concentracin de analito, se obtendr la misma
respuesta. Sin embargo, esto no siempre ocurre as y en esos
casos es necesario recurrir a otros mtodos de calibracin como el
del estndar interno o el de adiciones estndar a las muestras.
10.

Interpretacin de datos :

Si pretendemos que los resultados tengan valor, debe

proporcionarse alguna medicin de la incertidumbre relacionada
con los clculos obtenidosposteriormente (se tiene que medir el
error del proceso analtico fiabilidad ) .Normalmente se miden 2
parmetros :
-

EXACTITUD : es la concordancia entre un resultado y el valor

verdadero o comnmente aceptado. En ausencia de
exactitud se tiene error sistemtico.
PRECISIN :
Concordancia entre los diferentes valores
obtenidos al repetir el mismo mtodo. Refleja el efecto de los
errores aleatorios producidos durante el proceso analtico.

Se pueden dar 4 situaciones :

Todos los
resultados son
exactos y
precisos

Impreciso y
exacto

Inexactos y
muy precisos

Inexacto y muy
impreciso

Como el valor verdadero, no es exsecible , hay las aproximaciones ,

que son comnmente aceptadas . La exactitud se puede determinar
de dos formas:
-

(1) Comprar la muestra certificada con la concentracin de

analito conocido (comnmente aceptado) .Ej :

10mgCl / L
9,5mgCl /L

SESGO = ___0,5____ x 100 = 5%

10

El sesgo , expresa el error numricamente, como es un error

sistemtico se puede asumir que hay el mismo en todas tus
muestras .La exactitud va asociada a un mtodo , a un
analito y a un matriz .Los materiales de referencia
(comnmente aceptados ) : se preparan con una cantidad
muy grande , se comprueba la concentracin y su
homogeneidad y se distribuye en los diferentes laboratorios
ms importantes (cada uno con sus mtodos ), con todos los
requerimientos y repeticiones ) .Se renen todos los
laboratorios ,y se tiene un parecido resultado , se reproduce
el valor certificado .Si no consiguen todos el mismo valor , no
se certifica .Los materiales de referencia caducan o se
gastan ( son muy caros ).
-

(2) Pseudomuestras (patrn )

100 x _muestra adicionada -muestra_= SESGO
X
La diferencia en el % .Se prepara un patrn la cual conoces y
sabes la concentracin .Entonces mezclas la muestra con tu
patrn y se vuelve a medir .La precisin se repite n veces el
experimento con el mismo mtodo .Cuanto ms alto es la
desviacin estndar, hay menos precisin .Cuanto menor es
la concentracin ms aumenta el error.