Reviso
INTRODUO
Apesar da descoberta do grande poder de solubilizao dos
fluidos supercrticos ter ocorrido no final do sculo XIX1, seu
uso em qumica, e particularmente em qumica analtica, somente se verificou quase um sculo depois, no final do sculo
XX2. Ainda assim, o uso de fluidos supercrticos em qumica
analtica tem sido extremamente modesto no Brasil, fato no
justificado considerando-se o enorme potencial de aplicao
dos mesmos em vrias tcnicas, destacando-se a cromatografia
com fluido supercrtico (SFC, do ingls supercritical fluid chromatography) e a extrao com fluido supercrtico (SFE, do
ingls supercritical fluid extraction). Nesta srie de artigos
pretende-se discutir a evoluo histrica, principais caractersticas, instrumentao, potencial e limitaes do uso de fluidos
supercrticos em qumica analtica, principalmente as tcnicas
de cromatografia e extrao com fluido supercrtico.
Quando um composto confinado em um espao determinado, gs e lquido esto em equilbrio entre si. Aquecendo-se
o sistema, as propriedades intrnsecas de ambos convergem
para um mesmo ponto at serem idnticas (por exemplo, densidade, viscosidade, ndice de refrao, condutividade trmica,
etc.). Este ponto denominado ponto crtico3, e nele acaba-se
a interface gs/lquido, pois a partir deste ponto encontra-se
uma nica fase supercrtica. Fluido supercrtico portanto toda
substncia que se encontrar em condies de presso e temperatura superiores aos seus parmetros crticos. Essa regio
melhor visualizada no diagrama de fases da Figura 1.
Hannay e Hogarth1 foram os primeiros a descobrir o grande
poder de solvatao dos fluidos supercrticos quando estudaram a
solubilidade de cloretos metlicos em etanol supercrtico. Apenas
10 anos aps o advento da cromatografia gasosa por James e
Martin4 em 1952, a utilizao de fluidos no estado supercrtico
foi postulada e demonstrada por Klesper, Corwin e Turner5.
Sob o ponto de vista cromatogrfico, as propriedades fsico-qumicas de um fluido supercrtico so intermedirias quelas dos gases ou dos lquidos e, muitas vezes, se aproximam
s melhores caractersticas de cada um como, por exemplo, o
e-mail: flancas@iqsc.sc.usp.br
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Quim. Nova
P
T 2
128Pc
(4)
B C D
+
+
+ ...
V V 2 V3
(1)
(2)
(3)
Cfe
Cfm
(5)
(6)
onde y a frao molar do componente 2, B11 e B22 (coeficientes de dois gases puros) so funes somente de temperatura
e foras entre os pares de molculas 1,1 e 2,2, e B12 uma
funo idntica para foras entre 1,2. A interao entre gs de
arraste e soluto pode ser descrita pelo segundo coeficiente de
virial atravs de B12.
Para uma fase gasosa no ideal, o relacionamento entre
volume (Vg), nmero de moles (ng), presso (P) e temperatura
(T) pode ser escrito como
RT
RT
p
=
+ Bnm =
Bnm
1 +
ng
P
P RT
(7)
Partindo da equao [7], Sie e Rijnders11, atravs de aproximaes e rearranjos, chegaram na expresso
ln K P = ln K Po
(8)
(9)
onde uma funo universal vlida para todas as substncias, V* e T* so o volume e a presso caractersticos para os
quais geralmente so adotados os valores crticos. Para uma
mistura binria, a equao (9) pode ser escrita como
T
B12
= *
*
T12
V12
*
T12
B12
0
,
438
0
,
881
*
T
V12
(10)
*
0,757 T12
*
0,503 T12
(11)
e
T12*
B12
0
,
461
1
,
158
*
T
V12
(12)
Vg
P Po
+
(2B12 V2 )
RT
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F.M.
Tc (oC)
Pc (atm)
c (g/mL)
31,3
36,5
196,6
72,9
71,7
33,3
0,47
0,45
0,23
45,5
16,6
240,5
235,3
37,1
58,4
78,9
47,0
0,74
1,10
0,27
0,27
Dixido de
Carbono
CO2
xido Nitroso
N 2O
n-Pentano
C5H12
Hexafluoreto
de Enxofre
SF6
Xennio
Xe
Metanol
CH3OH
Isopropanol
C3H7OH
Unidades
Gs
g/mL 10-4/10-3
cm2/sec 10-2/1
poise
10-4
Lquido
Fluido
Supercrtico
1
<10 -5
10 -2
0,2/0,9
10 -4/10-3
10-4/10-3
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(13)
onde est em cal cm-3, Pc em atm, e r(liq.), a densidade reduzida dos lquidos. O efeito de estado pode ser identificado
pelo termo [r/r(liq.)] enquanto que o fator 1,25Pc1/2 pode ser
associado ao efeito qumico. Giddings et al.20 mostraram ainda alguns valores de presso nos quais vrios compostos de
elevada massa molecular no apresentavam migrao na coluna at que se atingisse determinada presso limite.
Para se ter uma idia de como a densidade influencia no
poder de solvatao (ou o ), o CO2, o qual em condies
normais de T e P um gs apolar, sob altas presses apresenta
um igual ao da piridina, que dos mais elevados entre os
solventes lquidos.
Na Figura 3 mostrado o efeito da presso e da temperatura de um fluido supercrtico sobre a solubilidade. Nota-se que
baixas presses, a solubilidade diminui com o aumento da
temperatura.
Seletividade
A seletividade em SFC o parmetro cromatogrfico que
permite as maiores possibilidades de alterao para que seja
possvel a eluio e separao das espcies a serem analisadas.
Alguns itens que podem modificar a seletividade so: fase
mvel, fase estacionria, temperatura, presso de trabalho,
(14)
P c = a P a + bP b
(15)
Onde a e b so fraes molares, Ta e Tb suas temperaturas criticas e Pa e Pb suas presses crticas21, dos solventes a e
b, respectivamente.
Razo de Fluxo
Em um sistema de HPLC normal costuma-se controlar o
fluxo da fase mvel tornando a presso do sistema uma varivel dependente. Em SFC invertem-se estes parmetros. Com
o controle da presso o fluxo varia proporcionalmente afetando a separao de diferentes maneiras. Schmitz e Klesper22
afirmaram que a fluxos baixos ( 1,0 mL/min), a funo de
resoluo, Q, era praticamente constante e a fluxos maiores
decrescia rapidamente.
Gouw e Jentoft 18,23 citaram uma observao feita por
Giddings24 onde o mnimo da curva de van Deemter, a qual
relaciona a altura equivalente a um prato (AEP ou H) em funo da velocidade linear mdia, , era muito prximo ao valor
ot =
DM
dp
(16)
513
Neste estudo23, compararam-se diferentes tamanhos de partculas, avaliando-se a variao H e a queda de presso (P)
atravs da coluna em funo do fluxo. A queda de presso
um efeito indesejvel em qualquer modalidade de cromatografia, ainda mais em SFC onde a base da separao cromatogrfica est no controle da presso. Se o aumento de presso causa
uma melhor solvatao, pode causar tambm uma grande queda
de presso atravs da coluna e, com isso, diminuir a densidade.
O aumento da presso aumenta a velocidade linear a qual, por
sua vez, faz com que H aumente (perda de resoluo)25 .
Procurando sanar o problema da queda de presso com o
aumento do fluxo, Hirata e Nakata26 apresentaram um bom
sistema dotado de duas bombas de pressurizao, uma antes e
outra depois do sistema injetor/coluna/detector. Neste sistema
foi possvel uma programao de presso sem aumento do fluxo ou da queda de presso.
Temperatura
O efeito da influncia da temperatura sobre o comportamento cromatogrfico pode ser analisado sob duas condies:
uma a presso constante e outra sob densidade constante.
densidade constante, a dependncia do fator de reteno (k)
com a temperatura pode ser calculada por uma equao termodinmica (equao de Vant Hoff)27.
0
d ln k
= H T
d 1
R
T
(17)
cromatografia gasosa, enquanto que a regio de inclinao negativa tem como mecanismo predominante o do tipo cromatografia
lquida; a passagem pelo mximo indica uma combinao dos
mecanismos. Essa combinao pode ser dada pela expresso:
log(k ) =
0,43H s
0,43H m
log +
RT
RT
(18)
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Figura 6. Variao logartmica de k contra o recproco da temperatura absoluta sob presso constante de CO 2. 1: pireno; 2: fenantreno;
3: fluoreno; 4: naftaleno, coluna: 25 cm octadecilsilano (adaptado
da referncia 29)
(19)
K
t + t
(20)
sendo K uma nova constante dependente da razo de programao de densidade, t o tempo, t o tempo de referncia,
(K e t determinam o espaamento e reteno dos componentes), e a densidade de coeluio dos monmeros, e pode ser
calculado pela relao
ln()=Bo-m
(21)
Presso/Densidade
O controle da presso em SFC o mais importante
parmetro operacional pois como j foi afirmado, a densidade
do fluido extremamente influenciada pela mesma, acarretan-
Fase Mvel
Em SFC a variedade de fases mveis grande (vide Tabela
1), permitindo a escolha do solvente que melhor preencha os
requisitos para determinada amostra. A anlise de substratos
termolbeis deve ser feita com um eluente de baixa temperatura crtica como o CO2, N2O ou trifluorometano. Como foi visto na equao (13), a magnitude de Pc proporcional a fora
do solvente ou vice-versa. Geralmente, os compostos mais
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