Captulo 3
CLULAS Y RGANOS DEL SISTEMA INMUNE
Ivn Palomo G., Jaime Pereira G. y Cecilia Koenig S.
1. Introduccin
2. Clulas del sistema inmune
2.1. Hematopoyesis
2.2. Linfocitos
2.3. Sistema fagoctico mononuclear
2.3.1. Monocitos
2.3.2. Macrfagos
2.3.3. Clulas dendrticas
2.4. Granulocitos
2.4.1. Neutrfilos
2.4.2. Eosinfilos
2.4.3. Basfilos
3. rganos linfoides
3.1 rganos linfoides primarios
3.1.1. Mdula sea
3.1.2. Timo
3.2. rganos linfoides secundarios
3.2.1. Ganglios linfticos
3.2.2. Bazo
3.2.3. Tejido linfoide asociado a
mucosa
4. Trnsito linfocitario
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RESUMEN
Las clulas del sistema inmune que incluyen linfocitos, granulocitos y monocitosmacrfagos, se forman en la mdula sea a partir de clulas pluripotentes, a travs de un proceso
finamente regulado y en el que participan varias citoquinas.
Los linfocitos son las clulas que participan en la inmunidad adquirida o especfica. Las
clulas T participan en la inmunidad celular y las clulas B en la inmunidad humoral. Una tercera
subpoblacin de linfocitos, las clulas NK, participan en la inmunidad celular de tipo innata.
Las clulas del Sistema Fagoctico Mononuclear (monocitos, macrfagos y clulas
dendrticas) tienen como funcin fagocitar, actividad ms desarrollada en los macrfagos, que
son clulas tisulares derivadas de los monocitos circulantes.
Los granulocitos (neutrfilos, eosinfilos y basfilos) presentan particularidades
morfolgicas y funcionales. La principal funcin de los neutrfilos es su capacidad fagoctica.
En el captulo se explican los procesos de activacin, quimiotaxis, fagocitosis y bacteriolisis.
Los rganos linfoides se pueden clasificar en primarios (timo y mdula sea) y secundarios (bazo, ganglios linfticos y tejido linfoide asociado a mucosas). En el timo maduran los LT
y en la mdula sea los LB. En los rganos linfoides secundarios, los linfocitos toman contacto
con los antgenos y es en ellos donde se genera la respuesta inmune especfica (clulas efectoras
y de memoria). En estos rganos existen zonas ricas en clulas B, y otras en que, principalmente,
existen clulas T.
La capacidad de los linfocitos de recircular entre los rganos linfoides secundarios, vasos
linfticos, conducto torcico y vasos sanguneos le permiten tomar contacto con antgenos en
diferentes lugares del organismo.
1. INTRODUCCIN
2.1. Hematopoyesis
En el feto la hematopoyesis ocurre en el hgado y en el bazo. A partir del nacimiento se suspende este proceso en esos rganos y se incrementa
en la mdula sea, sitio donde haba comenzado
en los ltimos meses de gestacin. En la mdula
sea tres aspectos son importantes a considerar:
(a) la estructura anatmica (ver punto 3.2.1): disposicin tridimensional de vasos sanguneos y diferentes tipos celulares; (b) el estroma: incluye varios tipos celulares, (fibroblastos, adipocitos,
macrfagos, linfocitos y clulas endoteliales de
los sinusoides) y macromolculas de la matriz
extracelular (colgeno, fibronectina, laminina,
hemonectina, tenascina, trombospondina y
proteoglicanos).
En la mdula sea las clulas hemato-
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Figura 3-1. Compartimientos celulares en la mdula sea. Se distinguen 3 compartimientos morfo-funcionales: de clulas
madres (stem cells), mittico y de maduracin almacenaje. En la figura, los dos ltimos compartimientos ejemplifican la serie
granultica, representndose el tamao relativo de los diferentes compartimientos.
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Figura 3-2. Esquema de la Hematopoyesis. La clula madre pluripotencial autoperpetuable, da origen a una clula pluripotencial,
tambin denominada CFU-ML (Unidad formadora de colonias mieloides y linfoides), de la que se originan: a) el progenitor
mieloide (CFU-GEMM), a partir del cual por procesos de maduracin y diferenciacin se originan los granulocitos (neutrfilos,
eosinfilos y basfilos), monocitos, eritrocitos y plaquetas; y b) el progenitor linfoide (CFU-L), que despus de un proceso de
maduracin y diferenciacin, da origen a los linfocitos T y linfocitos B. Se muestra los puntos de accin de las citoquinas (IL-1, IL3, IL-6 e IL-7) y factores estimuladores de colonias (CSF) especficos, que participan como factores reguladores de la granulopoyesis
y linfopoyesis. EPO, eritropoyetina; TPO, trombopoyetina.
Receptor
Eritropoyetina (EPO)
Kit ligand (KL)
Interleuquina-1, etc. (IL-1, etc.)
Factor estimulador de colonias de granulocitos (G-CSF)
Factor estimulador de colonias de granulocitosmacrfago (GM-CSF)
Factor estimulador de colonias de monocito-macrfago
(M-CSF, CSF-1)
Interfern (IFN) , ,
Trombopoyetina (TPO, mpl, ligand)
Factor inhibidor de leucemia (LIF)
Oncostatin M (OSM)
Factor de crecimiento transformante (TGF-)
Factor de crecimiento tipo insulina (IGF-1)
Flt-3 ligand (FL)
Flk-1 ligand
EPOR
Kit
IL-1 receptor
G-CSF receptor
G-CSF receptor
CSF-1R
IFN-, , receptor
mpl
LIF receptor
OSM receptor
EGF receptor
IGF-1R
Flt-3, STK
Flk-1
2.2. Linfocitos
Los linfocitos, junto con las clulas presentadoras
de antgeno (CPA) son la base celular de la respuesta inmune especfica. Actualmente los
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tanto, sobre la ontogenia y funcin de las diferentes subpoblaciones de linfocito, en este captulo el
tema ser tratado slo en sus aspectos generales.
Caractersticas generales
Los linfocitos constituyen aproximadamente
el 20-25% de los leucocitos circulantes en el adulto (tabla 3-2). Desde el punto de vista morfolgico, en frotis sanguneo teido con May
Grnwald-Giemsa se distinguen dos tipos: los
linfocitos pequeos (7-9 m) que presentan una
relacin ncleo/citoplasma alta y representan la
mayora, y los linfocitos grandes (11-20 m),
que presentan citoplasma ms abundante (figura
3-3). El ncleo generalmente es redondo u oval
y compuesto predominantemente de heterocromatina. Los nuclolos pueden no observarse con
tincin de May Grnwald-Giemsa. En los
linfocitos grandes puede observarse grnulos
citoplasmticos (linfocitos granulares grandes).
Tabla 3-2. Leucocitos normales en sangre perifrica del humano adulto normal
Tipo de clula
Leucocitos (totales)
Neutrfilos
Eosinfilos
Basfilos
Monocitos
Linfocitos
60-65
0-4
<1
4-10
20-25
cias morfolgicas son un grupo heterogneo estructural y funcionalmente. Se dividen en tres grupos funcionales diferentes: los linfocitos T (LT)
que participan en la inmunidad adquirida de tipo
celular, los linfocitos B (LB) que participan en la
inmunidad adquirida de tipo humoral y las clulas NK ("Natural Killer") que no expresan marcadores de clulas T ni clulas B y que participan
en la inmunidad natural o innata.
Las clulas T y B, originadas a partir de la
CFU-L en la mdula sea (figura 3-2), experimentan un proceso de maduracin y diferenciacin en
el timo y mdula sea (tejido bolsa equivalente en
el humano). La mayor parte de los linfocitos que
se encuentran en la sangre, linfa, ganglio linftico
y timo son linfocitos T, en cambio un mayor porcentaje de los linfocitos presentes en la mdula
sea son linfocitos B; en el bazo y amgdalas el
porcentaje de ambas subpoblaciones es similar.
Figura 3-3. Esquema de estructura subcelular de un linfocito pequeo. En el frotis de sangre teido con May Grnwald
- Giemsa los linfocitos pequeos presentan un dimetro similar a los glbulos rojos (7-9 mm). A la microscopa electrnica
se observa nuclolo y un pequeo aparato de Golgi. Adems,
en su escaso citoplasma presenta algunos ribosomas y un pequeo retculo endoplsmico y escasos grnulos.
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Las clulas plasmticas generalmente presentan forma ovalada. Corresponden a las clulas
efectoras de la lnea linfoide B (productoras de
inmunoglobulinas). El ncleo, con una distribucin radial de la heterocromatina, est ubicado
excntricamente y el citoplasma presenta una gran
cantidad de retculo endoplsmico rugoso que le
otorga la intensa basofilia que le caracteriza al ser
teidas estas clulas con May Grnwald - Giemsa.
A nivel perinuclear presenta un desarrollado aparato de Golgi (figura 3-4).
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Sinnimo
Expresin
clula
Funcin(es)
CD2
CD3
CD4
CD7
CD8
CD10
CD11b
LFA-2
CAM
Transduccin de seales
Adhesin, transduccin de seales
CALLA
CR3 ()
CD16
FcRIII
LT, clulas NK
LT
LT "helper"
LT y timocitos
LT citotxicos
LT inmaduros
Granulocitos,
monocitos, NK
Granulocitos,
macrfagos, clulas NK
Clulas B
Pre-B y LB
LB
CD19
CD20
CD21
CD22
CD23
CD25
CD28
CD29
CD35
CD40
CD54
CD55
CD56
CD57
FcRIIa
Receptor de IL-2
baja afininidad
VLA ()
CR1
ICAM-1
DAF
LB maduros
LB activados
LT, LB, macrfagos
Activados
LT citotxicos
Amplia
Granulocitos, monocitos, eritrocitos LB
LB
Amplia
Amplia
NK, algunos LT
NK, algunos LT
CD, "cluster designation"; CAM, molcula de adhesin celular; LB, linfocitos B; LT, linfocitos T; LFA,
antgeno asociado a funcin de linfocito; ICAM, molcula de adhesin intercelular; VLA, antgeno muy
tardo; DAF, "Decay Accelerating factor"; NK, clulas "Natural Killer".
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Figura 3-5. Maduracin de los linfocitos B en el centro germinal de los folculos linfticos. Los LB vrgenes toman contacto
con el antgeno en la zona oscura del centro germinal (del folculo linfoide). En esta zona ocurre la expansin clonal y mutacin
somtica. Luego en la zona clara del centro germinal se produce el cambio de clase, y se generan clulas B de memoria (recirculan)
y clulas plasmticas (algunas migran a la mdula sea). CDF, clula dendrtica folicular.
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leucocitos sanguneos (tabla 3-2). En su citoplasma tienen grnulos azurfilos o primarios que
contienen hidrolasas cidas, que junto con los
mecanismos oxidativos, participan en la destruccin de las partculas fagocitadas; al respecto es
vlido lo descrito antes para los neutrfilos.
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e)
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2.4. Granulocitos
Como se indic antes, en la serie
granuloctica, a partir del estadio madurativo de
mielocito se reconocen tres lneas celulares diferentes: neutrfilos, eosinfilos y basfilos. En la
tabla 3-2 se muestra el porcentaje que cada lnea
celular ocupa entre los leucocitos en los adultos y
el nmero absoluto que representa.
2.4.1. Neutrfilos. En los adultos, los
neutrfilos maduros representan aproximadamente el 65% de los 4-10 x 103 glbulos blancos o leucocitos por microlitro de la sangre.
Los neutrfilos tienen un dimetro de 1015 m y un ncleo segmentado con 2-5 lbulos
(figura 3-8). En su citoplasma se han descrito
cuatro tipos de grnulos, los primarios o
azurfilos (lisosomas), secundarios (especficos), terciarios y vesculas secretoras (tabla 35). Los grnulos primarios, son escasos en los
estadios maduros, y contienen enzimas y protenas microbicidas (entre otras, peroxidasa,
lisozima, protenas catinicas) protenas
(elastasa, catepsina G y otras protenas) e
hidrolasas cidas (entre otras, N-acetilglucuronidasa y catepsinas B y D). Los grnulos
secundarios, son los ms numerosos en los
neutrfilos maduros; contienen lisosima,
colagenasa, fosfatasas alcalina, lactoferrina y
otras enzimas y protenas. Los grnulos terciarios contienen principalmente gelatinasa. Las
vesculas secretoras, al parecer formadas por
endocitosis, contienen algunas protenas
plasmticas.
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Grnulos Terciarios
CD11b (Mac-1)
CD11b (Mac-1)
Citocromo b558
Citocromo b558
Receptor de FMLP
Receptor de FMLP
Receptor de laminina Receptor de laminina
Receptor de uPA
CD15
CD66a
CD666
Receptor de fibronectina
Subunidad de Protena G
Antgeno NB1
RAP1, RAP2
Receptor de Trombospondina
Receptor de TNF
Receptor de Vitronectina
CD63
CD66c
CD68
Vesculas Secretoras
CD11b (Mac-1)
Citocromo b558
Receptor de FMLP
Receptor de uPA
Fosfatasa alcalina
CD10, CD13, CD45
CD16
DAF (CD55)
CR1 (CD35)
Matriz
Agentes microbicidas
Lisozima
Lisozima
Mieloperoxidasa
Colagenasa
Defensinas
Protenas catinicas
Protena bactericida
permeabilizante (BPI)
Lisozima
Proteasas Elastasa
Catepsina G
Proteinasa 3
Hidrolasas cidas N-Acetilglucuronidasa
Catepsinas B y D
-Glucuronidasa
-Glicerofosfatasa
-Galactosidasa
-Glucosaminidasa
-Fucosidasa
-Manosidasa
N-Acetil--glucosaminidasa
Otros
Sialidasa
Azurocidin
cido mucopolisacrido
Protena ligante de heparina
Factor inactivador de C5a
Sialisidasa
Pro-uPA
Pro-uPA/uPA
Apolactoferrina
Gelatinasa
Protenas plasmticas:
2-Microglobulina Acetiltransferasa Tetranectina,
Histaminasa
Albmina,
Heparinasa
Otras
Protena ligante de Vitamina B12
Inhibidor de protena Kinasa C
Otros
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factor, (DAF, CD55), Antgeno lencocitario comn (CD45) (Protena tirosina fosfatasa).
Una vez que los neutrfilos salen de la mdula sea, permanecen en circulacin aproximadamente 7 horas, para luego pasar al azar a los
tejidos, donde subsisten vivos 2-3 das. La produccin y destruccin diaria de neutrfilos es de
0,9x109/Kg de peso.
Para que los neutrfilos puedan cumplir su
funcin de fagocitar y destruir las partculas ingeridas deben movilizarse al foco infeccioso.
Figura 3-8. Esquema de la estructura subcelular de un
neutrfilo. Clula de 10-15 m. Debido al pH neutro de su
citoplasma y contenido granular, stos no se tien con la clsica tincin hematolgica de May Grnwald-Giemsa. Una caracterstica de los neutrfilos maduros es su ncleo segmentado.
El citoplasma contiene un pequeo aparato de Golgi y retculo
endoplsmico rugoso, y escasas mitocondrias y ribosomas. Los
neutrfilos presentan dos tipos de grnulos, primarios y secundarios; estos ltimos ms numerosos en neutrfilos maduros. Adems contienen numerosos y pequeos grnulos de
glicgeno.
Quimiotaxis
El movimiento de los neutrfilos al sitio de
infeccin es dirigido por un gradiente qumico
(quimiotaxis). Entre otros factores quimiotcticos
(tabla 3-6), para los que estos leucocitos poseen
receptores, destacan algunas protenas del complemento (C5a, C3a), pptidos formilados (Ej. Nformil-met-leu-phe, FMLP) y lpidos derivados de
las bacterias, factor plaquetario 4 (PF4),
metabolitos de la va de la lipoxigenasa del
metabolismo del cido araquidnico, especialmente el leucotrieno B4 (LTB4), y las llamadas
quimioquinas, entre ellas la IL-8. Varios de estos
factores han sido clonados y secuenciados. A modo
de ejemplo el receptor de C5a es una protena de
transmembrana de 30 kDa y presenta tres loops
extracelulares e intracelulares, siete dominios
transmembrana, el extremo carboxilo citoplasmtico y el extremo amino extracelular.
Algunas molculas expresadas en la membrana de los neutrfilos son: (a) molculas de adhesin (ver captulo 12), entre ellas LFA-1 (CD11a),
Mac-1 (CD11b), p150, 95 (CD11c), 2- integrina
(CD18), ICAM-3 (CD50), L-selectina (CD62b), (b)
receptores: FcRI (CD64), FcRII (CD32), FcRIII
(CD16), Receptor para C5a (CD68), receptor para
G-CSF (CD114), (c) ectoenzimas: aminopeptidasa
N (CD13, inactiva IL-8), endopeptidasa (CD10,
inactiva FMLP) y (d) otros: Decay accelerating
Fuente
Pptidos formilados
Fragmento C5a
Leucotrieno B4 (LTB4)
Factor activador de plaquetas (PAF)
Bacterias
Activacin del Complemento
Metabolismo del cido araquidnico
Metabolismo de fosfatidilcolina
Quimioquinas C-X-C
Interleuquina 8 (IL-8)
-tromboglobulina
gro-
ENA-78
Quimioquinas C-C
MIP-1
Monocitos
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Entre los receptores de opsoninas, se distinguen: (i) los receptores de fragmento Fc de IgG
(FcR) e IgA (FcR) unidos a un dmero de cadenas , los receptores del complemento y otros
receptores (de colectinas y de protenas
plasmticas). Los receptores de Fc son miembros
de la superfamilia de las inmunoglobulinas (ver
captulo 6), con 3 (FcRIA) o 2 (otros receptores
Fc) dominios tipo inmunoglobulina extracelulares, un dominio transmembrana y una corta cola
citoplasmtica; FcRIIIB, unido a glicofosfatidilinositol (GPI), es una excepcin. En la tabla
3-7 se muestra en diferentes FcR y el FcR indicado las clulas que los presentan:
Los receptores del complemento incluyen
CR1, una protena de transmembrana que une C3b,
y dos integrinas CD11b/CD18 y CD11c/CD18, llamadas tambin CR3 y CR4, respectivamente. Estos dos ltimos receptores unen iC3b, molcula
derivada de C3b y se une covalentemente a la superficie celular.
Otros receptores unen un grupo de molculas llamadas colectinas, entre ellas la protena que
une manosa (MBL), molcula que participa en la
activacin del sistema del complemento y la protena C reactiva (PCR) que se puede unir por ejemplo al carbohidrato C del Streptococcus
pneumoniae. Adems de receptores para las
colectinas tambin existe receptores para algunas
protenas plasmticas que se pueden unir a los
microorganismos, por ejemplo receptores para
fibringeno y fibronectina.
CD
Clulas
FcRI*
CD64
FcRIIA
CD32
FcRIIB
CD32
FcRIIIA
CD16
FcR
CD89
Monocitos, macrfagos,
Neutrfilos maduros tratados con IFN
Neutrfilos maduros, monocitos
Macrfagos, plaquetas
Monocitos, macrfagos
Linfocitos B, mastocitos
Macrfagos, clulas NK
Mastocitos
Granulocitos, monocitos
Macrfagos
* Tres locus gnicos; I, alta afinidad; II, afinidad intermedia; III, baja afinidad
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Figura 3-9. Activacin de los neutrfilos a travs de FcR. La unin de bacterias opsonizadas con IgG a FcR favorece la
fosforilacin de las cadenas del FcR por protena kinasa. Adems se activa la fosfolipasa C que desdobla el fosfatidil inositol 4,5-difosfato (PIP2) en inositol-1,4,5-trifosfato (IP3) y diacilglicerol (DAG). La figura muestra esquemticamente la participacin
de los segundos mensajeros (IP3, Ca2+ y DAG).
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Fagocitosis
La endocitosis, proceso por el cual el material es introducido en la clula, puede tomar la
forma de una pinocitosis (bebiendo por clulas) y
fagocitosis (comiendo por clulas). La fagocitosis
es visible al microscopio ptico; la pinocitosis se
refiere a la ingestin de macromolculas. Ambos
procesos involucran invaginacin de la membrana celular y la formacin de vesculas o vacuolas
(fagosomas). La mayora de las clulas pueden
realizar pinocitosis, pero la fagocitosis es un proceso caracterstico de los neutrfilos, monocitos
y macrfagos, y, en mucho menor grado, de los
eosinfilos y basfilos.
La fagocitosis de los microorganismos se ve
favorecida si stos estn recubiertos (opsonizados)
FcRII
FcRI
FcRII
FcRIII
C5aR
CR1
CR3
Neutrfilos
Eosinfilos
Basfilos
+
+
-
+?
-
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
+
Monocitos/
macrfagos
FcR, Receptor para IgE (I, alta afinidad; II, afinidad intermedia); Fc, Receptor para IgG (I, alta afinidad; II, afinidad intermedia; III, baja afinidad); C5aR, receptor de C5a; CR1, receptor de C3b; CR3,
receptor de iC3b.
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Mecanismos microbicidas
Una vez fagocitados los microorganismos,
stos son destruidos por mecanismos dependientes e independientes del oxgeno, tambin denominados mecanismos oxidativos y no oxidativos,
respectivamente (tabla 3-9).
Tabla 3-9. Mecanismos antimicrobianos de
los neutrfilos
Dependientes del oxgeno
Mediados por mieloperoxidasa
cido hipocloroso (HOCl)
Independientes de mieloperoxidasa
Perxido de hidrgeno (H2O2)
In superxido (O2-)
Otros?
Independientes del Oxgeno
pH cido
Lisozima
Lactoferrina
Defensinas
Protena bactericida permeabilizante (BPI)
Protenas catinicas de los grnulos
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Figura 3-11. Mecanismos microbicidas oxidativos. Una oxidasa cataliza la reduccin de oxgeno a in superxido (O-2) a expensas del NADPH. El NADPH es regenerado a travs de la va de las hexosas. El O-2 es transformado en perxido de hidrgeno
(H2O2) y O2 por la superxido dismutasa (SOD). Reacciones posteriores que comprometen al H2O2 y al O-2, llevan a la formacin
de dos tipos de compuestos microbicidas: radicales libres altamente oxidantes (OH) o halgenos oxidados (por ejemplo: cido
hipocloroso, HOCl).
Figura 3-12. NADPH oxidasa. La oxidasa dependiente NADPH est formada por protenas de membrana (22 y 91 kDa), unidas
a flavin adenin dinucletido (FAD) y a protenas citoslicas (40, 47 y 67 kDa y Rac 2). Estas ltimas se translocan a la membrana
cuando el neutrfilo es activado.
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Grnulos
Los eosinfilos presentan dos tipos de grnulos en su citoplasma: grnulos especficos de
eosinfilos y grnulos pequeos. Los grnulos
especficos, aproximadamente 20 por clula, en
su centro presentan la protena bsica mayor
(MBP) y algunas citoquinas; en la matriz contienen protena catinica eosinfila (ECP),
peroxidasa eosinfila (EPO), neurotoxina derivada de eosinfilos (EDN) y algunas citoquinas.
Los grnulos pequeos que almacenan
arilsulfatasa, se encuentran en los eosinfilos
maduros.
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Eosinfilos y patologas
Hay varias situaciones patolgicas en que aumenta la cifra absoluta de eosinfilos en la sangre
(eosinoflia). Destacan: (a) las infecciosas parasitarias, particularmente por helmintos, en las cuales se ha observado que los eosinfilos pueden
tener una accin efectora (captulo 35) y (b) las
enfermedades alrgicas (captulos 21 y 22). Enfermedades mieloproliferativas, otras neoplasias
y algunos frmacos (Ej. Penicilina, Tetraciclina,
Nitrofurantoina) pueden asociarse con eosinfilos.
2.4.3 Basfilos. Los basfilos representan menos
del 1% de los leucocitos sanguneos (tabla 3-2).
Al igual que los otros granulocitos maduros presentan un dimetro aproximado de 10 m. En los
frotis sanguneos teidos con May-Grnwald
Giemsa, los grnulos citoplasmticos cidos que
se caracterizan por presentar un intenso color
azul violeta, casi cubren completamente el ncleo
bilobulado. La figura 3-15 muestra un esquema
de su estructura subcelular.
Receptores de membrana
Uno de los receptores ms importantes desde el punto de vista fisiopatolgico son los receptores de Fc de IgE de baja afinidad (FcRIII)
(tabla 3-8).
Acumulacin de eosinfilos en tejidos
La quimiotaxis, adhesin a clulas
endoteliales y matriz extracelular parece ser controlada por la respuesta inmune de clulas T y subsecuente liberacin de citoquinas. Las citoquinas
liberadas en procesos alrgicos son las que participan en respuestas inmunes tipo Th2 (IL-4, IL5), en cambio en la reaccin de hipersensibilidad
de tipo retardada (DTH) se encuentran citoquinas
asociadas a respuesta tipo Th1 (Ej. IL-2, IFN).
La liberacin de IL-5 por LTh2 sensibilizados luego de su estimulacin con antgeno especfico, se
puede asociar al desarrollo de eosinofilia durante
enfermedad alrgica.
Las citoquinas adems de participar en la diferenciacin de los eosinfilos a partir de los precursores, contribuyen a su acumulacin en el tejido inflamado. En esta ltima funcin participan
principalmente IL-3, IL-5, GM-CSF, PF4, LTB4,
IL-8 y RANTES.
En la adhesin a endolelio y migracin
transendotelial participan, al igual que para los
neutrfilos, las molculas de adhesin celular:
selectinas, integrinas y de la superfamilia de las
inmunoglobulinas (ver punto 2.2.1).
Algunas citoquinas (IL-3, IL-5 y GM-CSF)
prolongan la sobrevida de los eosinfilos en los
tejidos. Estas citoquinas tambin aumentan la capacidad citotxica de ellos.
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En la tabla 3-10 se indican las principales protenas de membrana de los basfilos y mastocitos. Ambos tipos de clulas presentan receptores de alta afinidad para IgE (FcRI), slo los basfilos presentan
integrinas y solamente los mastocitos presentan c-kit.
Concavalina A), algunas citoquinas (ej. IL-1, MIP1). El pptido formil-met-leu-phe slo estimula
la secrecin de los basfilos.
Ambos tipos celulares participan en las etapas iniciales del proceso inflamatorio, pero en las
etapas ms avanzadas de reparacin slo lo hacen
los mastocitos. As, inicialmente ambos secretan
mediadores inflamatorios: (Histamina, IL-4,
quimioquinas; basfilos: IL-13; mastocitos:
TNF, etc.), molculas que durante el proceso van
disminuyendo. Por su parte, las clulas cebadas
durante el desarrollo del proceso siguen liberando otros mediadores, ahora antiinflamatorios (IL10, TGF-, etc.) y ms adelante, molculas que
favorecen la reparacin tisular (proteinasas, factores de crecimiento y otras citoquinas).
Varios frmacos antialrgicos y antiinflamatorios inhiben la secrecin de mediadores desde
los basfilos y mastocitos; sus acciones son mltiples y variadas. Entre ellas se incluyen: Agonistas
de B 2 , antagonistas de H 1 , corticoides y
ciclosporina A, entre otros.
Bsofilo
Mastocitos
+
+
-
+
+
+
+
+
+
+
+
3. RGANOS LINFOIDES
En las primeras etapas de maduracin participa el factor de stem cell o c-kit ligand. En
la maduracin de clulas cebadas participan
citoquinas como IL-3, IL-6. En cultivos celulares
se han descrito las CFU de basfilo y eosinfilos
(CFU- baso/eo).
En la diferenciacin de basfilos la principal
citoquina que participa es IL-3; tambin participan GM-CSF, IL-4 e IL-5. Esta ltima promueve
adems la diferenciacin de eosinfilos. El TGF, en presencia de IL-3 suprime la diferenciacin
de eosinfilos y favorece la diferenciacin de
basfilos.
Varias molculas mediadoras de inflamacin
son liberadas desde ambos tipos celulares por mecanismos mediados por unin de IgE u otros mecanismos. Ambas clulas contienen histamina,
PAF, condroitinsulfato, LTB4, LTC4, IL-4 e IL-13.
Slo en los mastocitos, xido ntrico (NO),
prostaglandinas D2 (PGD2), PGF2, tromboxano A2,
triptasa, carboxipeptidasa A, IL-5, IL-6, IL-8, IL10, TNF, TGF-, IFN. Slo en los basfilos,
MIP-1.
Varios factores pueden activar la secrecin
de mediadores de inflamacin por parte de
basfilos y clulas cebadoras. Entre ellos, la unin
de una molcula de IgE (o IgG) y su respectivo
antgeno (alergeno) a los FcRI (o FcRII),
anafilotoxinas (C3a y C5a), lectinas (ej.
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Figura 3-16. rganos linfoides. Se muestran los rganos linfoides primarios, (Mdula sea y Timo) secundarios (Bazo, Ganglios
linfticos: cervicales, axilares mesentricos e inguinales), tejido asociado a mucosa (GALT: intestinal; BALT: bronquial) y amgdalas (palatinas, farngea y linguales). Adems se indica el lugar de drenaje de los linfocitos desde el conducto torcico a la sangre
(vena subclavia izquierda).
Figura 3-17. Estructura general de la mdula sea. Se destaca el compartimiento vascular (arterias, venas y sinusoides)
y del compartimiento hematopoytico.
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Figura 3-18. Estructura histolgica de la mdula sea. La mdula sea est formada por vasos sanguneos, sinusoides, clulas
del estroma y clulas hematopoyticas. Los distintos tipos de clulas se desarrollan en islotes hematopoyticos ubicados a diferente distancia de la pared de los sinusoides, segn el linaje celular.
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Figura 3-19. Maduracin de clulas B en la mdula sea. Esquemticamente se muestra la secuencia de maduracin de las
clulas B a partir de una clula madre (stem cell); durante este proceso depende de clulas de estroma (clulas reticulares, entre
otras). Otro aspecto importante es que muchas clulas no reordenan correctamente los segmentos gnicos VDJ o VJ (ver captulo
6) y sufren apoptosis por lo que son fagocitadas por los macrfagos medulares. Las clulas B vrgenes (este proceso no ha
requerido de contacto con antgeno) pasan a la sangre a travs de los sinusoides y luego a los rganos linfoides secundarios donde
pueden tomar contacto con el antgeno para el cual presentan especificidad. Se indican los principales marcadores en diferentes
etapas de maduracin. , cadena pesada mu (IgM); k, cadena liviana de Ig; TdT, desoxinucleotidil transferasa terminal.
Respecto a las clulas T, si bien stas maduran en el timo, desde la mdula sea emigran clulas encomendadas a madurar como linfocitos T.
Usando citometra de flujo (ver captulo 43), en mdula sea, se ha detectado una subpoblacin que
coexpresa CD34 (marcador de Stem Cells), CD2,
CD7 y CD3 citoplasmtico (marcadores de lnea
T). Sin embargo, tambin se propone la existencia
de un progenitor comn para ambos linajes celulares, B y T. Otros hallazgos indican que CD44 podra participar en el "homing" de las clulas linfoides
que llegan al timo a madurar como clulas T.
unidos por tejido conectivo. Ambos lbulos estn rodeados por una cpsula de tejido conectivo;
sta emite numerosos tabiques al interior de los
lbulos subdividindolos en miles de lobulillos de
0,5-2 mm. Cada lbulo posee una zona perifrica
y ms rica en clulas, denominada corteza y la
mdula. Los tabiques llegan hasta el lmite
corticomedular (figura 3-20).
El estroma laxo, compuesto por clulas
reticulares epiteliales entreteje la corteza y la mdula. En el retculo se encuentran linfocitos,
macrfagos y clulas dendrticas interdigitantes.
3.1.2. Timo
Las Clulas reticulares epiteliales tienen un aspecto variable. Presentan prolongaciones en forma de estrella, que interaccionan entre s. En la
periferia de la corteza y alrededor de los vasos sanguneos, estas clulas conforman una capa continua de clulas planas.
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Figura 3-20. Estructura histolgica del timo. En cada lbulo del timo se pueden describir 2 regiones: corteza y mdula. En
ambas zonas, corteza y mdula tmica, existen clulas linfoides, reticulares epiteliales y macrfagos. En la corteza ocurren los
procesos de seleccin positiva y negativa de las clulas linfoides T (ver texto) en el que participan las clulas reticulares
epiteliales corticales. Las clulas linfoides a medida que maduran migran a la mdula tmica desde donde emigran a la sangre. A
medida que maduran las clulas linfoides expresan diferentes marcadores de superficie.
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asociado a mucosas (MALT). Los rganos secundarios, son los tejidos donde los linfocitos vrgenes (B y T) interactan con los antgenos y con
otras clulas del sistema inmune; es aqu donde se
inicia la respuesta inmune. En estos tejidos existe
un microambiente linfoide altamente organizado,
donde las clulas B y T toman contacto con el
antgeno y como consecuencia de ello se activan
y proliferan (expansin clonal), desarrollndose
dos subpoblaciones, clulas efectoras y clulas de
memoria.
3.2.1. Ganglios linfticos
Los ganglios linfticos son pequeos rganos linfoides ovales y encapsulados, de 1-3 cm de
dimetro. A diferencia de otros rganos linfoides,
estn interpuestos en el trayecto de los vasos
linfticos, actuando como filtros a travs de los
cuales pasa la linfa en su camino hacia la sangre;
entre otros elementos filtran bacterias, otros
microorganismos y otras sustancias extraas.
Los ganglios linfticos se encuentran en nmero variable en ciertas zonas del cuerpo, pero
son ms abundantes en las regiones axilar, cervical, inguinal, en las cavidades corporales (Ej.
Mesenterio) y a lo largo de los vasos mayores (figura 3-16).
Histologa. Los elementos de sostn del ganglio
linftico son: (i) cpsula: rodea al ganglio y est
compuesta de tejido conectivo, (ii) trabculas: son
prolongaciones de la cpsula hacia el interior del
parnquima ganglionar, especficamente de la corteza y (iii) tejido reticular: red tridimensional formada por clulas y fibras reticulares, suspendidas
de la cpsula y trabculas, que forma la estructura
del rgano. En uno de los bordes donde la cpsula
es ms gruesa se distingue el hilio.
El parnquima del ganglio se divide en dos
regiones: corteza y mdula (figura 3-21). La corteza, es la zona ms externa y separada en compartimientos por las trabculas. Se distinguen las
cortezas externa y profunda (o paracorteza). La
corteza externa alberga los denominados folculos
(o ndulos) linfoides primarios que son agregados esfricos de LB (vrgenes y de memoria). Estos ndulos pueden presentar un centro
germinativo, denominndose as folculos
linfoides secundarios. Estos ltimos se forman
cuando se desarrolla una respuesta inmune; en el
centro germinal se encuentran LB llamados
centroblastos. Aqu se generaran los LB de me-
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Figura 3-21. Estructura histolgica de un ganglio linftico. El ganglio posee elementos de sostn (cpsula, trabculas y tejido
reticular). Su parnquima se divide en corteza y mdula; en la corteza existe tejido linfoide organizado como folculos y en la
mdula existen cordones de tejido linfoide separados por senos medulares. Vasos linfticos aferentes y eferentes entran y salen de
los ganglios, respectivamente.
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3.2.2 Bazo
El bazo es el rgano linfoide de mayor tamao del cuerpo (aproximadamente 150 g en adultos); est situado en el peritoneo, en la regin superior izquierda del abdomen.
El bazo est rodeado por una cpsula de tejido conectivo desde la cual parten trabculas hacia
el parnquima del rgano (figura 3-22). Por el hilio
entran la arteria esplnica y nervios, y salen por
la vena esplnica y vasos linfticos. La estructura
del rgano est dada por una red tridimensional
de fibras y clulas reticulares, conectadas a la cpsula y trabculas (similar a los ganglios linfticos).
Figura 3-22 Estructura histolgica del bazo. Una cpsula de tejido conectivo rodea al bazo; de sta se originan trabculas hacia
el parnquima. La pulpa blanca est compuesta principalmente por linfocitos. La pulpa roja la componen sinusoides venosos,
clulas y fibras reticulares, eritrocitos, macrfagos, linfocitos y granulocitos.
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La arteria esplnica se ramifica en las arterias trabeculares, las que al presentar un dimetro
de 0,2 mm dejan las trabculas y son rodeados
por linfocitos denominndose a stos vaina
linftica periarterial y al vaso, arteria central.
Luego sta pierde la vaina linftica y se subdivide en varias arterias penicilares, que entran la llamada pulpa roja (ver ms adelante). El extremo
de las arterias penicilares corresponden a capilares arteriales terminales que descargan la sangre
en los senos esplnicos. stos drenan en las venas
pequeas de la pulpa, las que van aumentando de
calibre, llegando a formar la vena esplnica, que
drena en la vena cava.
El parnquima esplnico o pulpa esplnica,
se divide en pulpa blanca y pulpa roja. La pulpa
blanca est compuesta por tejido linfoide, principalmente linfocitos, estrechamente asociados a
la arteria central, a cuyo alrededor forman la vaina linftica periarterial. En sta existen principalmente clulas T (aproximadamente 70% de CD4+
y 30% de CD8+). Las clulas B estn organizadas
en folculos, generalmente incorporados en la vaina linftica periarterial. Los folculos primarios
contienen clulas B no estimuladas y los folculos
secundarios son sitios de activacin y proliferacin de clulas B, y contienen centro germinal.
La pulpa blanca est rodeada por una delgada zona
marginal que la separa de la pulpa roja, que contiene clulas B, clulas helper, macrfagos y
clulas dendrticas interdigitantes (clulas presentadoras de antgeno).
En la zona marginal tambin se encuentran
los senos marginales; aqu es donde las clulas y
antgenos transportados por la sangre tienen acceso al parnquima del bazo. As puede ocurrir:
(i) contacto entre los antgenos y las clulas presentadoras de antgeno; (ii) los macrfagos pueden fagocitar microorganismos y clulas
senescentes; (iii) clulas T y B de la sangre pueden ingresar a la pulpa blanca; y (iv) los LTh,
reconocen antgenos presentados en molculas
MHC clase II por las clulas dentrticas
interdigitantes; esto dar lugar a activacin y proliferacin clonal en la pulpa blanca (folculo secundario).
A modo de resumen, los linfocitos se forman
en la pulpa blanca, las clulas B de memoria y clulas plasmticas en los folculos linfticos y las
subpoblaciones de clulas T en las vainas linfticas
periarteriales. Los LB y LT recin formados entran
en los senos marginales y emigran hacia el sitio
inflamatorio, o forman parte de la reserva
recirculante de linfocitos. La mayora de las clulas plasmticas emigran a la mdula sea para sintetizar y secretar anticuerpos en los senos medulares;
slo algunas se quedan en la zona marginal para
hacer lo propio en los senos marginales.
La pulpa roja est compuesta de sinusoides
venosos separados por cordones parenquimatosos,
que consisten en mallas de clulas reticulares y
fibras reticulares, en la que existen abundantes
eritrocitos, macrfagos, linfocitos, clulas
plasmticas y granulocitos. Estos macrfagos son
responsables de retirar de la circulacin los glbulos rojos y plaquetas, senescentes y alterados.
Desde el punto de vista inmune, el bazo presenta una funcin similar a los ganglios linfticos,
la diferencia fundamental radica en que el bazo es
el ms importante sitio de respuesta inmune a
antgenos circulantes y los ganglios linfticos participan en la respuesta inmune a antgenos presentes en la linfa. El concepto de respuesta inmune se refiere a la respuesta inmune innata y especfica, tanto celular (fagocitosis, activacin de clulas T) como humoral (activacin de clulas B
con la consiguiente sntesis de anticuerpos).
3.2.3 Tejido linfoide asociado a mucosa
En muchas regiones del cuerpo, el tejido
linfoide no est encapsulado como en los ganglios
linfticos y el bazo. Se trata de tejido linfoide difuso sin organizacin especial, que no se separa
con precisin del tejido conectivo vecino, pero que
presenta folculos linfoides aislados. A estos tejidos se le denomina tejido linfoide asociado a
mucosa (MALT), las localizaciones ms caractersticas son las asociadas a la mucosa intestinal
(GALT, gut) y respiratoria (BALT, broncus)
(figura 3-16); tambin existe en la mucosa
urogenital (ver captulo 16). Adems de linfocitos,
clulas que se encuentran en mayor porcentaje,
tambin se hallan linfoblastos, clulas plasmticas
y macrfagos. Los folculos de los MALT son similares a los existentes en el bazo y los ganglios
linfticos; las regiones centrales son ricas en clulas B, igual que los centros germinales.
GALT. Todo el tracto gastrointestinal contiene
MALT. Sin embargo, el intestino delgado, principalmente el leon, adems de folculos linfoides
aislados, contiene conglomerados linfoides denominados placas de Peyer. stas presentan un folculo formado por clulas B, rodeado por una
regin ms laxa de clulas T y macrfagos que
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actan como CPA. Las placas de Peyer no cuentan con vasos linfticos aferentes, pero s presentan vasos linfticos eferentes que drenan en los
ganglios linfticos mesentricos. Los linfocitos
llegan a las placas a travs de pequeas arteriolas
que son drenadas por HEV. Si bien el leon est
revestido por epitelio cilndrico simple, las zonas
adyacentes a los folculos linfoides de las placas
estn cubiertas por clulas de tipo escamoso (pequeas y anchas) llamadas clulas M, a travs de
las cuales los antgenos luminales penetran por
pinocitocis y fagocitosis. (figura 3-23)
Figura 3-23. Participacin de las clulas M en la incorporacin de antgenos hasta las placas de Peyer. Las clulas
M, expuestas hacia el lumen intestinal, permiten el ingreso de
antgenos por pinocitosis y fagocitosis. De esta forma los
antgenos pueden tomar contacto con los linfocitos y
macrfagos de las placas de Peyer.
4. TRNSITO LINFOCITARIO
Una parte de los linfocitos formados en la
mdula sea pasa al timo, donde se diferencia a
clulas T y otra parte se diferencia a clulas B en la
propia mdula sea. Luego de adquirir en los rganos linfoides primarios, los receptores que los
caracterizan como linfocitos T (helper y
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citotxicos) y linfocitos B, las clulas linfoides vrgenes pasan a travs de la circulacin general a los
tejidos linfoides secundarios. El paso desde la sangre por las HEV se ve favorecido por molculas de
adhesin (ver captulo 12); molculas que presentan ciertas diferencias dependiendo del tipo de linfocito (virgen o de memoria) y del tejido de destino
(ganglio linftico, placas de Peyer, GUT o piel).
All toman contacto con los antgenos para los cuales presentan especificidad. En los rganos linfoides
secundarios se ubican en zonas especficas, as los
folculos linfoides son ricos en LB y la paracorteza
(de los ganglios linfticos) es rica en LT. Aqu en
los rganos linfoides secundarios se generan los
linfocitos de memoria (T y B) y efectores (linfocitos
T citotxico y clulas plasmticas Los linfocitos
salen de los ganglios linfticos a travs de los vasos linfticos eferentes, para llegar nuevamente a
la circulacin a travs del conducto torcico y conducto linftico derecho (figura 3-24).
En condiciones normales, los linfocitos estn recirculando permanentemente, lo cual proporciona una vigilancia inmunolgica ms eficiente, al permitir la presencia de todo el repertorio de
linfocitos antgeno-especficos, en diferentes partes del organismo.
LECTURAS SUGERIDAS
Austyn, J. and Wood, K., Principles of cellular
and molecular immunology, Chapter 1, Oxford
University Press, New York, 1993.
Babior, B., NADPH oxidase: An update, Blood,
93(5):1464-1476, 1999.
Bokoch, G., Chemoattractant signaling and leucocyte activation, Blood 86(5):1649-1660, 1995.
Degos, L; Linch, C.; Lwenberg, B., Textbook of
Malignant Haematology, Chapters 3, 4, Martin
Dunitz, 1999.
Gartner, L. y Hiatt, J., Traducido por Sapia, S.,
Histologa, texto y atlas, Captulos 10 y 12,
Interamericana, 1997.
Geneser, F., Histologa: sobre bases moleculares,
Captulos 10, 11 y 16, Editorial Panamericana,
2001.
Figura 3-24. Recirculacin de los linfocitos. Una vez que las clulas T y B salen de los rganos linfoides primarios como
linfocitos maduros, pasan a travs de la circulacin general a los tejidos linfoides secundarios. Desde los ganglios linfticos, salen
a travs de los vasos linfticos eferentes y vuelven a la circulacin general, fundamentalmente, por el conducto torcico.
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