``Ao de la consolidacin del Mar de Grau

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA

FACULTAD DE INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

INFORME
EL ESPECTOFOTMETRO DE ABSORCION MOLECULAR UV VISIBLE:
EL ESPECTRO DE ABSORCION MOLECULAR

ALUMNOS

Martnez Ureta, Keydi.

DOCENTE

Ing. Lauriano A. Zavaleta.

CURSO

Mtodos Instrumentares de Anlisis.

CICLO

2016-II

INTRODUCCIN

La Espectrofotometra es una de las tcnicas experimentales ms

utilizadas para la deteccin especfica de molculas. Se caracteriza por su precisin,
sensibilidad y su aplicabilidad a molculas de distinta naturaleza (contaminantes,
biomolculas, etc.) y estado de agregacin (slido, lquido, gas). Los fundamentos
fsico-qumicos de la espectrofotometra son relativamente sencillos. Las molculas
pueden absorber energa luminosa y almacenarla en forma de energa interna.
La Espectrofotometra se denomina espectrofotometra a la medicin
de la cantidad de energa radiante que absorbe un sistema qumico en funcin de la
longitud de onda de la radiacin, y a las mediciones a una determinada longitud de
onda. La teora ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz es un flujo
de cuantos de energa llamados fotones; la luz de una cierta longitud de onda est
asociada con los fotones, cada uno de los cuales posee una cantidad definida de
energa.
II

OBJETIVOS

Conocer la instrumentacin y manejo de un espectrofotmetro.

Conocer como calibrar con la muestra blanco.
Obtencin del espectro de absorcin de las distintas muestras.
Graficar los valores de absorbancia o tramitancia VS la longitud de
onda.

Tingo Mara Per 2016

III

MARCO TERICO
3.1 Espectroscopia UV y Visible
Estudia el fenmeno de adsorcin de la radiacin UV-Visible de
molculas orgnicas e inorgnicas.
La regin UV del espectro electromagntico se encuentra entre
0.6 y 380 nm.

UV cercano o de cuarzo. Regin en la que el

aire y el cuarzo son transparentes) UV .El UV lejano re quiere

tcnicas es peciales, ya que el aire que se encuentra en el
trayecto ptico absorbe intensamente en esta regin, no es til
desde un punto de vista prctico. La regin visible, a la que es
sensible el ojo humano, se localiza entre los 380 y 780 nm.
La absorcin de la radiacin UV o Visible por molculas,
generalmente se produce por la excitacin de los electrones de
enlace. La longitud de onda de los mximos de absorcin se
puede relacionar con los enlaces de las especies absorbentes.

Figura 1. Porcin de la representacin grfica del espectro electromagntico de

absorcin UV-VIS.

3.2 Componentes bsicos espectroscpicos

Fuente de luz: Lmpara que emite una mezcla de longitudes de

onda.
Monocromador: Conjunto de lentes que enfocan la luz
convirtindola en un haz de rayos paralelos. Monocromador:

Dispositivo que selecciona luz de una nica longitud de onda.

Detector fotoelctrico: Transductor de luz en electricidad. La luz
provoca el desplazamiento de electrones en el metal del detector,
produciendo una corriente elctrica que es proporcional a la

intensidad de la luz recibida.

Registrador: Mide la seal del detector, la compara y genera una
medida en una escala determinada.

Figura 2. Componentes y materiales de los instrumentos espectroscpicos.

Celda
(Cubeta de muestra)

Registrador (sist. de lectura)

Figura 3. Fuentes de radiacin electromagntica.

Figura 4. Tipos de fuentes de radiacin electromagntica.

Fuente de Lneas

Fuente Continua

IV

MATERIALES Y METODOS

3.1 Materiales:
Espectrofotmetro UV-vis. Modelo Orin Aquamate 8000.
Marca Thermo Scientific.
Celdas.
Tubos de ensayo.
Muestra de Hoja de Tetilla de vaca.
Muestra de Pulpa de Tetilla de vaca.
Muestra de Semilla de Tetilla de vaca.
Muestra de Alcohol (M. Blanca).

3.2 Metodologa

La metodologa era descriptiva y expositiva que consista en

que el Tcnico del laboratorio el Sr. Celidonio Yache Melgarejo
manejaba el Espectrofotmetro UV VIS para hallar la

absorbancia de las muestras.

Primero se coloc cierto volumen de la muestra en las celdas.
Ajustamos la absorbancia a cero, empleando el solvente como

blanco.
Obtener la absorbancia a diferentes longitudes de onda.
Graficar los valores de absorbancia vs la longitud de onda.

RESULTADOS Y DISCUSIN
Cuadro N1. Tabla de Absorbancia con respecto a las distintas
muestras y su longitud de onda.

longitud Absorba Absorban Absorbanc

de onda ncia
cia
ia (hoja)
(nm.)
(pulpa)
(Semilla)
200
0.268
0.448
0.506
220
0.328
0.495
0.547
240
0.342
0.494
0.552
260
0.689
0.614
0.689
280
2.362
2.522
2.551
300
3.855
4.057
3.903
320
3.983
4.22
3.961
340
3.965
4.218
3.924
360
4.044
4.179
3.71
380
2.806
3.206
2.957
400
1.375
2.871
2.224
420
0.63
2.111
1.665
440
0.293
1.041
1.191
460
0.157
0.502
0.655
480
0.106
0.318
0.493
500
0.073
0.235
0.391
520
0.056
0.189
0.295
540
0.045
0.161
0.267
560
0.036
0.139
0.132
580
0.031
0.121
0.134
600
0.027
0.108
0.167
Fuente: Datos obtenidos en el laboratorio de UNAS.

Grafico N1.

Espectro de absorcin en la muestra de la hoja

(planta tetilla de vaca).

4.5
4
3.5
3
2.5

Absorbancia

2
1.5
1
0.5
0
150

200

250

300

350

400

450

500

550

600

650

550

600

650

Longitud de onda ()

4.5
4
3.5
3
2.5

Absorbancia

2
1.5
1
0.5
0
150

200

250

300

350

400

450

500

Longitud de onda ()

Grafico N2.

Espectro de absorcin en la muestra de la pulpa

(planta tetilla de vaca).

4.5
4
3.5
3
2.5

Absorbancia

2
1.5
1
0.5
0
150

200

250

300

350

400

450

500

550

600

Longitud de onda ()

Grafico N3. Espectro de absorcin en la muestra de la semilla

(planta tetilla de vaca).

RESULTADO DE ABSORBANCIA

La absorbancia de la muestra Hoja tiene :

200 nm = 0.506
(Inicia)
340 nm = 3.924 (Lmite mximo)
600 nm = 0.167 (Lmite mnimo)

La absorbancia de la muestra pulpa tiene :

200 nm = 0.268 (Inicia)
360 nm = 4.044 (Lmite mximo)
600 nm = 0.073 (Lmite mnimo)

La absorbancia de la semilla tiene :

200 nm = 0.448 (Inicia)
340 nm = 4.218 (Lmite mximo)
600 nm = 0.235 (Lmite mnimo)

650

VI

CONCLUSIN

Conoco el manejo de un espectrofotmetro.

S cmo calibrar con la muestra blanco en alcohol.
Obtuve los espectros de absorcin de las distintas muestras

tanto de la hoja, la pulpa y la semilla de la planta Telilla de vaca.

Grficamente los valores de absorbancia o tramitancia VS la
longitud de onda de las muestras se observan los lmites de
absorbancia en distintas longitudes de onda su lmite mximo
(340 nm 360 nm.) y mnimo en 600nm.

VII

BIBLIOGRAFIA

Sergio valladares. 1988 Espectofotometria de absorcion molecular

UV Visible.web:http://www.fao.org/docrep/field/003/ab482s/AB482S03.htm

VIII

ANEXO

Figura 5. Las celdas de cuarzo con las

respectivas muestras electromagntica.

Figura 6. Muestras para hallar su

espectro electromagntico.

Figura 7. Espectrofotmetro UV-Vis. Modelo Orin

Aquamate electromagntica.