Judul

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI KANDUNGAN

MINYAK ATSIRI TERHADAP Staphylococcus aureus,
Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Escherichia coli,
Pseudomonas aeruginosa dan Salmonella typhimorium
DARI BUAH BAWANG HUTAN
(Scorodocarpus borneensis Becc.)
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi
MUHAMAD LUQMANUL HAKIM

NIM : 108102000060
FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

PROGRAM STUDI FARMASI
JAKARTA
1435 H/ 2014 M
ii
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
iii
iv
ABSTRAK
Nama
: Muhamad Luqmanul Hakim
Program Studi : Farmasi

Judul
: Uji Aktivitas Antibakteri Kandungan Minyak Atsiri

Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis,
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa dan Salmonella
typhimorium dari Buah Bawang Hutan (Scorodocarpus
borneensis .Becc)
Telah diuji aktivitas antibakteri dari minyak atsiri buah bawang hutan terhadap
tiga bakteri Gram positif yaitu Staphylococcus aureus ATCC 25923, Bacillus
cereus, Bacillus subtilis ATCC 6633 dan tiga bakteri Gram negatif, yaitu
Eschericia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853,
Salmonella typhimurium ATCC 14028 dengan metode dilusi cair. Minyak atsiri
diperoleh menggunakan dua metode yaitu destilasi uap air dan enfleurasi. Analisis
kimia minyak atsiri dengan GC-MS menunjukkan beberapa komponen kimia
untuk destilasi uap air yaitu asam butanoat, 1,2,3 trimetil benzene dan
dimetoksisulfon sedangkan untuk enfleurasi yaitu 2,3 butanediol, 1,3 asam
sikloheksadiena dan asam tiosulfurat. Hasil akhir menunjukkan bahwa minyak
atsiri buah bawang hutan dari hasil destilasi uap air maupun enfleurasi tidak
memiliki kemampuan sebagai antibakteri.
Kata Kunci : Bawang Hutan (Scorodocarpus borneensis Becc.), minyak atsiri,
antibakteri, dilusi cair.
ABSTRACT
Name
: Muhamad Luqmanul Hakim
Program Study: Pharmacy

Tittle
: Antibacterial Activity Test Component of Essential Oil in Wood

Garlic Fruit (Scorodocarpus borneensis .Becc) Againts
Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus subtilis,
Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa dan Salmonella
typhimorium.
The antibacterial activity of essential oil of wood garlic was tested against three
bacteria of Gram-positive such as Staphylococcus aureus ATCC 25923, Bacillus
cereus, Bacillus subtilis ATCC 6633 and three bacteria Gram-negative such as
Eschericia coli ATCC 25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853,
Salmonella typhimurium ATCC 14028 by broth dillution method. The essential
oil was obtained by two methods water steam distilation and enfleurage. The
identified of the chemical components of essential oils by GC-MC showed several
components e.q water steam distilation : butanoic acid, 1,2,3, trimethyl benzene
and dimethoxysulfone and enfleurage : 2,3 butanediol, 1,3 cyclohexadiene and
thiosulfuric acid. The final result showed the essential oil of wood garlic from
water steam distilation and enfleurage didnt have antibacterial activity.
Key word : Wood Garlic (Scorodocarpus borneensis Becc.), volatile oil,
antibacterial, broth dilution.
vi
KATA PENGANTAR
Puji syukur saya panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa Allah SWT,
karena atas berkat rahmat-Nya, saya dapat menyelesaikan skripsi ini. Penulisan
skripsi ini dilakukan dalam rangka memenuhi salah satu syarat untuk mencapai
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan dan Ilmu
Kesehatan Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah Jakarta.
Saya menyadari bahwa, tanpa bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak,
dari masa perkuliahan sampai penyusunan skripsi ini, sangatlah sulit bagi saya
untuk menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, saya mengucapkan terima kasih
kepada:
1. Bapak Prof. Dr. H. Chairul, M.Chem, Apt. selaku Pembimbing pertama dan
Ibu Prof. Dr. Atiek Soemiati, M.Si selaku pembimbing kedua, yang memiliki
andil besar dalam proses penelitian dan penyelesaian tugas akhir saya ini,
semoga segala bantuan dan bimbingan Bapak dan Ibu mendapat imbalan yang
lebih baik oleh Allah SWT.
2. Bapak Prof. (hc) dr. MK. Tadjudin, selaku Dekan Fakultas Kedokteran dan
Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah Jakarta.
3. Bapak Drs. Umar, M.Sc, Apt selaku Ketua Program Studi Farmasi Fakultas
Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif
Hidayatullah Jakarta.
4. Bapak/Ibu Dosen dan Staff Akademika yang telah memberikan bantuan dan
bimbingan selama saya menempuh pendidilkan di Program Studi Farmasi
Fakultas Kedikteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri (UIN)
Syarif Hidayatullah Jakarta.
5. Sahabat-sahabat saya, Ikhsan, Dzikro, Irfan, Labib, Syukron, Doni, Ali,
Farhan, Yan, Irul dan Mas Teguh yang selalu ada dan menemani penulis
dalam menyelesaikan perkuliahan dan penelitian ini.
vii
6. Rekan-rekan FKIK seperti Ari, Aan, Adam, Megawati, Mega Armayani, Tika,
Tia, Novi, Selvia, Nurmalita, dan Ade Fitrotunnadiroh yang tidak jarang
memberi semangat kepada penulis.
7. Keluarga Besar Farmasi angkatan 2008 baik Alcoolique maupun Betalactam,
yang selalu bersama-sama mengisi hari-hari penulis dengan suka maupun
duka.
Tak lupa kepada orang tua saya, Ayahanda Umar, S.pd dan Ibunda Umi
Kulsum, semoga segala amalan dan jerih payah keduanya mendapat balasan yang
lebih baik dari Allah SWT.
Akhir kata, saya berharap Tuhan Yang Maha Esa berkenan membalas
segala kebaikan semua pihak yang telah membantu. Semoga skripsi ini membawa
manfaat bagi pengembangan ilmu.
Ciputat, September 2014
Penulis
viii
ix
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS .......................................... ii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ........................................... iii
HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... iv
ABSTRAK ....................................................................................................... v
ABSTRACT ..................................................................................................... vi
KATA PENGANTAR ..................................................................................... vii
HALAMAN PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ................... ix
DAFTAR ISI ................................................................................................... x
DAFTAR TABEL ........................................................................................... xiii
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xiv
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... xviii
BAB 1. PENDAHULUAN .............................................................................. 1
1.1 Latar Belakang . .............................................................................. 1
1.2 Perumusan Masalah . ...................................................................... 3
1.3 Tujuan Penelitian . .......................................................................... 3
1.4 Manfaat Penelitian . ........................................................................ 3
BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................... 4

2.1 Bawang Hutan (Scorodocarpus borneensis. Becc)......................... 4
2.1.1
Klasifikasi Tanaman ........................................................... 4
2.1.2
Nama Lain .......................................................................... 4
2.1.3
Deskripsi.............................................................................. 5
2.1.4
Tempat Tumbuh ................................................................. 5
2.1.5
Kandungan Kimia .............................................................. 5
2.1.6
Khasiat ................................................................................ 6
2.2 Isolasi Minyak Atsiri ...................................................................... 6

2.2.1
Destilasi .............................................................................. 6
2.2.2
Enfleuransi ......................................................................... 7
2.2.3
Minyak Atsiri ..................................................................... 8
2.3 Bakteri dan Antibakteri .................................................................. 9

2.3.1
Definisi Bakteri . ................................................................. 9
2.3.2
Struktur Bakteri . ................................................................. 9
2.3.3 Pembagian Bakteri ............................................................. 12

2.3.4
Bakteri uji ........................................................................... 12

2.3.4.1 Bakteri Gram positif ............................................... 12
2.3.4.2 Bakteri Gram negatif .............................................. 13
2.3.5
Antibakteri .......................................................................... 15
2.3.5.1 Pendahuluan ........................................................... 15
2.3.5.2 Mekanisme Kerja Antibakteri ................................ 16
2.3.5.3 Metode Pengujian Antibakteri ................................ 18
2.3.5.4 Antibakteri Pembanding ........................................ 20
BAB 3. METODE PENELITIAN .................................................................. 21

3.1 Lokasi Dan Waktu Penelitian ........................................................ 21
3.2 Bahan Dan Alat .............................................................................. 21
3.2.1
Bahan Uji ............................................................................ 21
3.2.2
Bakteri Uji .......................................................................... 21
3.2.3
Antibakteri Pembanding ..................................................... 21
3.2.4
Bahan Kimia ....................................................................... 22
3.2.5
Alat ..................................................................................... 22
3.3 Prosedur Kerja ................................................................................ 22

3.3.1
Penyiapan Simplisia ........................................................... 22
3.3.2
Isolasi ................................................................................. 22
3.3.3.1 Destilasi Uap Air .................................................... 22
3.3.3.2 Enfleurasi ............................................................... 23
3.3.3
Analisis senyawa menggunakan Gas Spectroscopy- Mass

Spectrofotometry (GC-MS) ................................................ 23
3.3.4
Sterilisasi alat dan bahan .................................................... 24
3.3.5
Pembuatan media pertumbuhan ......................................... 24
3.3.6
Pembuatan larutan uji ......................................................... 24
xi
3.3.7
Pembuatan stok bakteri ...................................................... 25
3.3.8
Pembuatan suspensi bakteri ............................................... 25
3.3.9
Pengujian Aktivias Antibakteri .......................................... 25
BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................... 27

4.1. Hasil Determinasi .......................................................................... 27
4.2. Hasil Minyak Atsiri Buah Bawang Hutan .................................... 27
4.3. Hasil Identifikasi Menggunakan GC-MS ..................................... 28
4.4. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri ..................................................... 31
4.5. Pembahasan ................................................................................... 32
BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................... 37
5.1. Kesimpulan ................................................................................... 37
5.2. Saran .............................................................................................. 37
5.3. Ucapan Terima Kasih .................................................................... 37
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 38
LAMPIRAN .................................................................................................... 42
xii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel IV.1: Hasil Randeman Minyak Atsiri ..................................................... 27

Tabel IV.2 : Data Kandungan Kimia Penyusun Minyak Atsiri dari Hasil Destilasi
Uap Air ............................................................................................... 29
Tabel IV.3 : Data Kandungan Kimia Penyusun Minyak Atsiri dari Hasil
Enfleurasi ............................................................................................ 30
Tabel IV.4 : Hasil Uji Antibakteri Minyak Atsiri Bawang Hutan dari Hasil
Destilasi Uap Air ................................................................................ 31
Tabel IV.5 : Hasil Uji Antibakteri Minyak Atsiri Bawang Hutan dari Hasil
Enfleurasi ............................................................................................ 31
Tabel IV.6 : Hasil Uji Antibakteri Pembanding Ciprofloxacin ........................ 32
xiii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1: Buah Bawang Hutan ...................................................................... 5

Gambar 2 : Struktur Kimia Cyprofloxacin ....................................................... 20
Gambar 3 : Hasil Kromatogram Minyak Atsiri Bawang Hutan dengan
menggunakan Metode Destilasi Uap Air ....................................... 28
Gambar 4 : Hasil Kromatogram Minyak Atsiri Bawang Hutan dengan
menggunakan Metode Enfleurasi ................................................... 28
Gambar 5 : S-methyl methanethiosulphinate ............................................................. 34
Gambar 6 : Dimethyoxysulfone .................................................................................... 34
Gambar 7 : Methyl methyltiomethyl disulfide .............................................................. 34
Gambar 8 : Thiosulfuric acid ........................................................................................ 34
Gambar 9 : Methyl allyl trisulfida ................................................................................ 34
Gambar 10 : Diallyl disulfida ...................................................................................... 34
Gambar 11 : Diallyl trisulfida ...................................................................................... 35
Gambar 12 : Buah Bawang Hutan ................................................................... 43

Gambar 13 : Alat Destilasi Uap Air .................................................................. 43
Gambar 14 : Rotary Evaporator ........................................................................ 43
Gambar 15 : Metode Enfelurasi Bagian Samping dan Depan .......................... 43
Gambar 16 : Tabung Uji Berisi Minyak Atsiri Hasil Destilasi Uap Air Berbagai
Konsentrasi dan Bakteri S.aureus sebelum dan setelah di inkubasi
.... .................................................................................................... 58
xiv
Konsentrasi dan Bakteri B.cereus sebelum dan setelah di inkubasi
.... .................................................................................................... 58
Konsentrasi dan Bakteri B.subtilis sebelum dan setelah di inkubasi
.... .................................................................................................... 58
Konsentrasi dan Bakteri E.coli sebelum dan setelah di inkubasi ... 59
Konsentrasi dan Bakteri S.typhimorium sebelum dan setelah di
inkubasi .......................................................................................... 59
Konsentrasi dan Bakteri P.aeruginosa sebelum dan setelah di inkubasi
.... .................................................................................................... 59
Gambar 22 : Tabung Uji Kontrol berisi Kontrol Medium, Kontrol Ekstrak dan
Kontrol Bakteri sebelum di inkubasi .............................................. 60
Gambar 23 : Tabung Uji Kontrol berisi Kontrol Bakteri setelah diinkubasi ..... 60
Gambar 24 : Tabung Uji Kontrol Ekstrak (kiri) dan Kontrol Medium (kanan)
setelah diinkubasi ........................................................................... 60
Gambar 25 : Tabung Uji Berisi Minyak Atsiri Hasil Enfleurasi Berbagai
Konsentrasi dan Bakteri S.aureus sebelum dan setelah di inkubasi
.... .................................................................................................... 61
Konsentrasi dan Bakteri B.cereus sebelum dan setelah di inkubasi
.... .................................................................................................... 61
xv

Konsentrasi dan Bakteri B.subtilis sebelum dan setelah di inkubasi
.... .................................................................................................... 61
Konsentrasi dan Bakteri E.coli sebelum dan setelah di inkubasi ... 62
Konsentrasi dan Bakteri S.typhimorium sebelum dan setelah di
inkubasi .......................................................................................... 62
Konsentrasi dan Bakteri P.aeruginosa sebelum dan setelah di inkubasi
.... .................................................................................................... 62
Gambar 31 : Tabung Uji Kontrol berisi Kontrol Ekstrak dan Kontrol Bakteri
sebelum di inkubasi ........................................................................ 63
Gambar 32 : Tabung Uji Kontrol berisi Kontrol Ekstrak dan Kontrol Bakteri
setelah di inkubasi .......................................................................... 63
Gambar 33 : Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Kandungan Minyak Atsiri Hasil
Destilasi Uap Air dari Buah Bawang Hutan terhadap Staphylococcus
aureus .............................................................................................. 64

Destilasi Uap Air dari Buah Bawang Hutan terhadap Bacillus cereus
.... .................................................................................................... 64
Destilasi Uap Air dari Buah Bawang Hutan terhadap Bacillus subtilis
.... .................................................................................................... 65
Destilasi Uap Air dari Buah Bawang Hutan terhadap Escherichia coli
.... .................................................................................................... 65
xvi

Destilasi Uap Air dari Buah Bawang Hutan terhadap Salmonella
typhimurium ................................................................................... 66
Destilasi Uap Air dari Buah Bawang Hutan terhadap Pseudomonas
aeruginosa ...................................................................................... 66
Enfleurasi dari Buah Bawang Hutan terhadap Staphylococcus aureus
.... .................................................................................................... 67
Enfleurasi dari Buah Bawang Hutan terhadap Bacillus cereus ..... 67
Enfleurasi dari Buah Bawang Hutan terhadap Bacillus subtilis .... 68
Enfleurasi dari Buah Bawang Hutan terhadap Escherichia coli .... 68
Enfleurasi dari Buah Bawang Hutan terhadap Salmonella typhimurium
.... .................................................................................................... 69
Enfleurasi dari Buah Bawang Hutan terhadap Pseudomonas
aeruginosa ...................................................................................... 69
xvii
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1: Hasil Determinasi Tanaman ......................................................... 42

Lampiran 2 : Gambar Bahan dan Alat Penelitian .............................................. 43
Lampiran 3 : Alur Penelitian .............................................................................. 44
Lampiran 4 : Penyiapan Simplisia ..................................................................... 45
Lampiran 5 : Skema Isolasi Minyak Atsiri Buah Bawang Hutan ...................... 46
Lampiran 6 : Skema Kerja Peremajaan Bakteri ................................................. 47
Lampiran 7 : Skema Kerja Pembuatan Suspemsi Bakteri Uji ........................... 47
Lampiran 8 : Skema Kerja Pengujian Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Buah
Bawang Hutan ................................................................................. 48
Lampiran 9 : Pembuatan Larutan Uji Antimikroba ........................................... 49
Lampiran 10 : Hasil GC-MS Kandungan Kimia Penyusun Minyak Atsiri Buah
Bawang Hutan dari Metode Destilasi Uap ...................................... 50
Lampiran 11 : Hasil GC-MS Kandungan Kimia Penyusun Minyak Atsiri Buah
Bawang Hutan dari Metode Enfleurasi ........................................... 54
Lampiran 12 : Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Kandungan Minyak Atsiri Hasil
Destilasi Uap Air dari Buah Bawang Hutan Terhadap Tiga Bakteri
Gram Positif dan Tiga Bakteri Gram Negatif ................................. 58
Enfleurasi dari Buah Bawang Hutan Terhadap Tiga Bakteri Gram
Positif dan Tiga Bakteri Gram Negatif ........................................... 61
xviii

Destilasi Uap Air dari Buah Bawang Hutan Terhadap Tiga Bakteri
Gram Positif dan Tiga Bakteri Gram Negatif setelah Dikultur pada
Media Agar ...................................................................................... 64
Enfleurasi dari Buah Bawang Hutan terhadap Tiga Bakteri Gram
Positif dan Tiga Bakteri Gram Negatif setelah Dikultur pada Media
Agar ................................................................................................. 67
Lampiran 16 : Hasil Pengamatan Menggunakan Spektrofotometri UV-VIS untuk
Larutan Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri dari Hasil Destilasi
Uap Air ............................................................................................ 70
Larutan Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri dari Hasil Enfleurasi
.... ..................................................................................................... 72
Larutan Uji Antibiotik Ciprofloxacin sebagai Pembanding ............ 74
xix
BAB I
PENDAHULUAN
1.1.
LATAR BELAKANG
Agen-agen antimikroba merupakan contoh kemajuan yang dramatis
pada pengobatan modern. Aktivitas obat obat antimikroba yang luar biasa
kuat dan spesifik ini disebabkan oleh kemampuan obat-obat tersebut
memilih target yang sangat spesifik dan juga unik bagi mikroorganisme,
atau memilih target yang jauh lebih penting bagi mikroorganisme daripada
bagi manusia (Katzung, 2002).
Walaupun penggunaan antibiotik dan analog semisintesisnya secara
klinik sudah tersedia secara luas, sebuah penelitian untuk mendapatkan
agen antiinfeksi baru tetap diperlukan (Hostettmann, 1991). Penelitian
untuk mencari senyawa aktif farmakologi baru yang diperoleh dengan
penyarian sumber alam telah membawa kepada penemuan banyak obat
klinis yang berguna dan berperan penting dalam pengobatan manusia
(Shridhar et al., 2009).
Salah satu strategi yang memungkinkan untuk menemukan obat
antiinfeksi yang baru meliputi pencarian senyawa dengan aktivitas
kemoterapi tambahan dan perbedaan struktur secara luas dari senyawa
tersebut pada penggunaan sekarang. Senyawa ini dapat diekstrak dari
sumber yang memilikinya, yang untuk banyak alasan, sangat kurang
dieksplorasi dibandingkan dengan mikroorganisme tradisional, termasuk,
diantaranya, tanaman tingkat tinggi (Hostettmann, 1991). Bahan alam
masih menjadi sumber utama dalam pengembangan senyawa terapetik
untuk penyakit infeksi (baik bakteri maupun jamur), kanker, gangguan
kolesterol dan immunomodulasi (Shridhar et al., 2009). Melihat dari
laporan mengenai jumlah yang sangat besar dan keanekaragaman struktural
yang mengagumkan dari unsur-unsur pokok tumbuhan yang aktif
antimikroba dan antiviral yang ada sekarang, mungkin satu harapan agen
antiinfeksi dengan aksi sistemik dan/atau lokal yang menjanjikan mungkin

akan ditemukan di kerajaan tumbuhan (Hostettmann, 1991).
Bawang hutan merupakan salah satu dari tumbuhan di Indonesia
yang telah dimanfaatkan untuk pengobatan. Bawang hutan merupakan
famili dari Olecaceae. Bawang hutan adalah pohon yang tumbuh secara
alami di Pulau Kalimantan dan semenanjung Melayu. Memiliki nama asli
wood garlic (kayu bawang putih) karena baunya khas seperti bawang
putih dan irisan atau bubuk dari daging buah kadang-kadang digunakan oleh
masyarakat setempat sebagai bumbu untuk memasak ikan dan bahan
makanan lainnya (Lim et al.,1997).
Kubota et al 1999, telah melaporkan isolasi dan identifikasi dari
ekstrak etanol buah bawang hutan. Senyawa utamanya adalah kandungan
senyawa
sulfur yang sama dengan bawang putih, dimana 2,4,5,7-
tetrathiaoctane (CH3SCH2SSCH2SCH3), dan 2,4,5,7-tetrathiaoctane 2,2dioxida (CH3SO2CH2SSCH2SCH3) menunjukkan aktivitas antimikroba yang
lumayan kuat, khususnya melawan jamur.
Minyak atsiri merupakan salah satu senyawa hasil metabolit
sekunder yang akhir-akhir ini telah menarik perhatian dunia, karena
diketahui memiliki sifat aktif biologis sebagai antibiotik sehingga dapat
dipergunakan sebagai antibakteri dan antijamur (Soetjipto et al., 2008). Sifat
antimikroba dari minyak atsiri telah diketahui sejak lama namun baru akhirakhir ini ditetapkan secara ilmiah (Miksusanti et al., 2009). Minyak atsiri
dari suatu tumbuhan memiliki aroma yang berbeda dengan minyak atsiri
dari tumbuhan lain karena setiap minyak atsiri memiliki komponen kimia
yang berbeda (Praptiwi et al., 2000).
Menurut hasil penelitian Khadri et al 2010, diketahui bahwa minyak
atsiri dari bawang putih mempunyai khasiat sebagai antibakteri. Sedangkan
Lawrence (2011) mengatakan bahwa kandungan minyak atsirilah yang
menyebabkan bau pada buah bawang putih. Buah bawang hutan memiliki
bau bawang putih yang sangat kuat (Lim et al., 1997).
Hal inilah yang melatarbelakangi dilakukannya penelitian terhadap

uji antibakteri dari isolasi minyak atsiri kulit buah bawang hutan
(Scorodocarpus borneensis. Becc) terhadap tiga bakteri Gram positif dan
tiga bakteri Gram negatif. Semoga penelitian ini dapat memberikan manfaat
walaupun hanya sedikit informasi yang didapat.
1.2.
PERUMUSAN MASALAH
-
Bagaimana perbandingan hasil senyawa minyak atsiri buah bawang

hutan (Scorodocarpus borneensis. Becc) yang diperoleh antara Metode
Destilasi Uap Cair dengan Metode Enfleuransi?
Apakah senyawa minyak atsiri dari buah bawang hutan (Scorodocarpus

borneensis. Becc) dari hasil Metode Destilasi Uap Air dan Metode
Enfleuransi mempunyai aktivitas antibakteri?
1.3.
TUJUAN PENELITIAN
-
Mengetahui perbandingan hasil senyawa minyak atsiri buah bawang

hutan (Scorodocarpus borneensis. Becc) yang diperoleh antara Metode
Destilasi Uap Cair dengan Metode Enfleuransi.
Menentukan ada tidaknya aktivitas antibakteri pada senyawa minyak

atsiri dari buah bawang hutan (Scorodocarpus borneensis. Becc) dari
hasil Metode Destilasi Uap Air dan Metode Enfleuransi.
1.5
MANFAAT PENELITIAN
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi dalam
meningkatkan upaya kesehatan dengan cara menemukan senyawa kimia
baru yang berasal dari tumbuhan di Indonesia.
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1
BAWANG HUTAN (Scorodocarpus borneensis. Becc)
2.1.1 Klasifikasi Tanaman

Klasifikasi tanaman bawang hutan adalah sebagai berikut :
Kingdom
: Plantae
Sub kingdom : Tracheobionta

Divisio
: Spermatophyta
Sub divisio
: Magnoliophytinae (Angiospermae)
Class
: Magnoliatae (Dycotyledoneae)
Sub Class
: Rosidae
Ordo
: Santales
Familia
: Olacaceae
Genus
: Scorodocarpus
Species
: Scorodocarpus borneensis Becc.
(diakses dari www.plantamor.com/index.php?plant=1443)

2.1.2 Nama Lain
Sumatera
: Bawang, Kulim, Rengom.
Kalimantan
: Ansam, Bawang, Bawang Utan, Cepeluk, Jauhi,

Kudur, Marsindu, Merica, Madudu, Sedau, Selaru, Seluru,
Teradu, Sinduk dan Kayu Bawang.
2.1.3 Deskripsi
Tumbuhan ini merupakan pohon, tinggi sampai 36 m dan diameter
batang kayunya lebih dari 80 cm, pada umumnya tinggi 20 m dan
diameter batang kayunya 50 60 cm, batang pada umumnya tegak, bulat
torak (berbentuk gulungan), di bagian kaki batang sedikit berjalur atau
bersiku, bagian batang yang tidak bercabang pada umumnya panjang 15
m, kadang-kadang lebih dari 20 m. Tumbuhan ini mudah dikenal karena
memberikan bau menyengat seperti bawang putih dari kulit dan buah.
-
Kayu : lebar, padat, keras agak halus dan berwarna merah tua atau
cokelat keabu-abuan dengan sedikit ungu; kayunya sangat kuat dan
awet, sehingga sering digunakan sebagai bahan bangunan rumah, tiang

jembatan dan untuk bagian lunas (dasar) perahu.
-
Kulit batang : tebal, dari luar berwarna merah kecoklat-coklatan, dapat

lepas menjadi bagian-bagian kecil berbentuk lempeng segi empat dan
irisannya berwarna ungu.
Buah : bulat, memiliki bau yang kuat seperti bawang putih terutama
ketika dihancurkan. Digunakan sebagai pengganti bawang putih pada
masakan dan biji setelah dipanggang digunakan untuk pengobatan
cacing.
Gambar 1. Buah bawang hutan

2.1.4 Tempat Tumbuh
Tumbuhan ini tersebar di bagian barat Nusantara, tumbuh didataran
rendah dan daerah bukit sampai 300 m dpl (diatas permukaan
laut),
terutama pada tanah kering, tidak pernah di rawa-rawa, tidak membentuk

hutan murni, tetapi di hutan rimba tumbuh secara berkelompok dan hanya di
tempat-tempat tertentu tumbuh secara umum (Heyne,1987).
2.1.5 Kandungan Kimia
Tanaman
bawang
hutan
(Scorodocarpus
borneensis
Becc.)
mengandung senyawa polisulfida yang mirip dengan spesies Allium.

Daunnya mengandung senyawa megastigma dan flavanoid. Ekstrak kulit
batang bawang hutan mengandung saponin, steroid, flavanoid, alkaloid dan
senyawa metiltiometil (metil sulfonil) metal disulfida yang menyebabkan
bau seperti bawang putih (Kubota et al.,1999; Kartika,1999).
Komponen utama dari senyawa yang mengandung sulfur pada
bawang
hutan
diantaranya
yaitu
2,4,5-trithiahexane
2,4,5,7-
tetrathiaoctane
2,4,5,7-tetrathiaoctane
2,2-dioxide
dan
2,4,5,7
tetrathiaoctane 4,4-dioxide (Lim Haeyoung et al.,1997). Serta terdapat pula

senyawa
sesquiterpen
scodopin
dan
senyawa
alkaloid
berupa
scorodocarpines (Wiart Christophe et al.,2001).

2.1.6 Khasiat
Buahnya digunakan sebagai antimikroba, obat cacing dan sering
digunakan sebagai bumbu masak, begitu juga dengan kulit batangnya, hal
ini karena baunya yang khas seperti bawang putih. Daunnya digunakan
sebagai obat diare, sedangkan kayunya biasa digunakan untuk bahan
bangunan (Kubota et al.,1999).
2.2
ISOLASI MINYAK ATSIRI
2.2.1 Destilasi (Penyulingan)

Destilasi atau penyulingan dapat didefinisikan sebagai pemisahan
komponen-komponen suatu campuran dari dua jens cairan atau lebih
berdasarkan perbedaan tekanan uap dari masing-masing zat tersebut. Proses
penyulingan dengan demikian merupakan proses penting bagi produsen
minyak atsiri (Guenther, 1987).
Destilasi merupakan suatu perubahan cairan menjadi uap dan uap
tersebut didinginkan kembali menjadi cairan. Unit operasi destilasi
merupakan metode yang digunakan untuk memisahkan komponenkomponen yang terdapat dalam suatu larutan atau campuran dan tergantung
pada distribusi komponen-komponen tersebut antara fasa uap dan fasa air.
Destilasi dilakukan melalui tiga tahap, yaitu evaporasi atau
memindahkan pelarut sebagai uap dari cairan, pemisahan uap cairan
didalam kolom untuk memisahkan komponen dengan titik didih lebih
rendah yang lebih volatil dari komponen lain yang kurang volatil serta
kondensasi uap untuk mendapatkan fraksi pelarut yang lebih volatil (Irawan,
2010). Destilasi menurut Guenther (1987) terbagi menjadi :
1.
Destilasi Air
Pada metode ini, bahan yang akan didestilasi kontak langsung
dengan air mendidih. Bahan tersebut mengapung diatas air atau
terendam secara sempurna tergantung dari bobot jenis dan jumlah
bahan yang akan disuling. Ciri khas dari metode ini adalah kontak
langsung dari antara bahan dengan air mendidih. Beberapa jenis bahan
harus disuling dengan menggunakan metode ini, karena bahan harus
tercelup dan dapat bergerak bebas dalam air mendidih. Jika disuling
dengan menggunakan metode uap langsung, bahan ini akan merekat
dan membentuk gumpalan besar yang kompak, sehingga uap tidak
dapat berpenetrasi ke dalam.
2.
Destilasi Uap Air

Pada metode ini, bahan olah diletakkan diatas rak-rak atau
saringan berlubang. Ketel suling diisi dengan air sampai permukaan air
berada tidak jauh dibawah saringan. Ciri khas dari meode ini, adalah
uap selalu dalam keadaan basah, jenuh dan tidak terlalu panas serta
bahan yang disuling hanya berhubungan dengan uap dan tidak dengan
air panas.
3.
Destilasi Uap
Metode ketiga ini disebut penyulingan uap atau penyulingan uap
langsung dan prinsipnya sama dengan yang telah dibicarakan diatas,
kecuali air tidak diisikan dalam ketel. Uap yang digunakan adalah uap
jenuh atau uap panas pada tekanan lebih dari 1 atmosfer. Uap dialirkan
melalui pipa pipa uap berlingkar yang berpori yang terletak di bawah
bahan, dan uap bergerak keatas melalui bahan yang terletak diatas
saringan atau tempat berlubang.
2.2.2 Enfleurasi (Ekstraksi dengan Lemak Dingin)

Metode enfleurasi memanfaatkan lemak sebagai media untuk
mengabsorbsi aroma wangi yang dihasilkan oleh jenis bunga tertentu
misalnya melati, sedap malam dan mawar. Proses enfleurasi berakhir
apabila lemak telah jenuh dengan minyak bunga. Keberhasilan proses
enfleurasi tergantung kualitas lemak yang digunakan dan keterampilan
dalam mempersiapkan lemak.
Lemak mempunyai daya absorbsi yang tinggi dan jika dicampur dan
kontak dengan bunga atau bagian tumbuhan yang berbau wangi, maka
lemak akan mengabsorbsi minyak yang dikeluarkan oleh bunga atau bagian
tumbuhan tersebut. Prinsip ini diterapkan dalam proses enfleurasi.
Dalam proses enfleurasi biasanya bagian tumbuhan yang digunakan
adalah bunga. Hal ini karena proses penyulingan dengan uap air atau air
mendidih yang relatif lama cenderung merusak komponen minyak karena
proses hidrolisa, polimerasi dan resinifikasi, komponen yang bertitik didih
tinggi khususnya yang larut dalam air tidak dapat diangkut oleh uap air
sehingga rendemen minyak dan mutu yang dihasilkan lebih rendah.
Prinsip proses kegiatan enfleurasi yaitu, bunga segar hasil pemetikan
ditaburkan diatas permukaan lemak yang telah disediakan dan dibiarkan
selama 24 jam, kemudian diganti dengan bunga yang masih segar.
Kemudian minyak bunga tersebut diekstraksi dari lemak dengan
menggunakan alkohol dan selanjutnya alkohol dipisahkan (Guenther,1987).
2.2.3 Minyak Atsiri
Pada minyak atsiri yang bagian utamanya terpenoid, biasanya

terpenoid itu terdapat pada fraksi atsiri yang tersuling-uap. Zat inilah
penyebab wangi, harum, atau bau yang khas pada banyak tumbuhan. Secara
ekonomi senyawa tersebut penting sebagai dasar wewangian alam dan juga
untuk rempah-rempah serta sebagai senyawa cita rasa di dalam industri
makanan. Suku tumbuhan yang kaya akan minyak atsiri ialah suku
Compositae, Matricaria, Labiatae; misalnya Mentha spp., Myrtaceae,
Eucalyptus, Pinaceae, Pinus, Rosaceae, bunga mawar, Rutaceae, Citrus, dan
Umbelliferae, Pimpinella anisum, Carvum carvi, Cuminum cyminum,
Anethum, dll. Golongan senyawa lainnya mungkin terdapat bersama-sama
dengan terpena di dalam minyak atsiri. Terpena juga sering kali terdapat
dalam fraksi yang berbau, bersama-sama dengan senyawa aromatik seperti
fenilpropanoid.
Secara kimia, terpena minyak atsiri dapat dipilah menjadi dua
golongan, yaitu monoterpena dan seskuiterpena, berupa isoprenoid C10 dan
C15 yang jangka titik didihnya berbeda (titik didih monoterpena 140-180OC,
titik didih seskuiterpena > 200OC). Pertama-tama, monoterpena dapat
dipilah lebih lanjut menjadi tiga golongan, bergantung pada apakah struktur
kimianya asiklik (misalnya geraniol), monosiklik (misalnya limonena), atau

bisiklik (misalnya - dan - pinena). Monoterpena sederhana tersebar luas
dan cenderung merupakan bagian dari kebanyakan minyak atsiri.
Secara kimia, seperti monoterpena, seskuiterpena dipilah-pilah
berdasarkan kerangka karbon dasarnya. Yang umum ialah asiklik (misalnya
farnesol), monoosiklik (misalnya bisabolena), atau bisiklik (-selinena,
korotol).
Untuk mengisolasinya dari jaringan tumbuhan, sekarang, mono- dan
seskuiterpena dipisahkan dengan ekstraksi memakai eter, eter minyak bumi,
atau aseton.
Cara klasik
untuk
mengisolasi
minyak atsiri ialah
memisahkannya dari jaringan segar dengan penyulingan uap. Sekarang

langkah ini jarang dilakukan karena ada bahaya terbentuknya senyawa
jadian pada suhu yang dinaikkan. Terpena dapat mengalami tata susun ulang
(misalnya dehidrasi pada alkohol tersier) atau polimerasi. Keatsirian terpena
sederhana mempunyai arti bahwa terpena itu merupakan bahan yang ideal
untuk pemisahan dengan kromatografi gas. Banyak terpena yang berbau
harum dan dengan demikian sering kali dapat dikenali langsung dalam
sulingan tumbuhan bila terdapat sebagai kandungan utama (Harbone, 1987).
2.3
BAKTERI DAN ANTIBAKTERI
2.3.1 Definisi
Bakteri adalah organisme bersel satu yang harus mengabsorbsi
nutrisinya dengan difusi sederhana (Gerard et al.,2010).
2.3.2 Struktur Bakteri
1. Bentuk
Bersama dengan sifat-sifat lainnya, bentuk bakteri dipergunakan
untuk mengidentifikasi bakteri. Bentuk bakteri ditentukan oleh
mekanisme penyusunan sel.
a. Bentuk bakteri biasanya dapat ditentukan dengan pulasan yang tepat
dan dilihat dibawah mikroskop.
b. Jenis-jenisnya : Bulat (kokus), batang (basilus) dan spiral.
10
c. Kokus dan basilus sering berpasangan (diplokokus), atau tersusun

seperti rantai (streptokokus). Kokus yang tumbuh berkelompok
disebut stafilokokus.
d. Beberapa spesies antibakteri adalah pleomorfik, misalnya Bacteroides.
e. Antibiotika yang menyerang biosintesis dinding sel (misalnya
penisilin) dapat mengubah bentuk bakteri.
2. Inti
Di dalam bakteri, inti biasanya disebut nukleoid atau badan inti.
3. Sitoplasma
Sitoplasma bakteri mengandung ribosom dan berbagai jenis
granula penyimpan nutrisi. Sitoplasma tidak mengandung organel.
4. Ribosom
Ribosom bakteri mengandung protein dan RNA yang berbeda
dengan yang ada pada rekan-rekan eukariota lainnya.
5. Membran (sitoplasma) sel
Membran sel biasanya merupakan dua lapis fosfolipid yang
mengandung susunan sebagai berikut :
a. Sitokrom dan enzim yang berperan dalam transpor elektron dan
fosforilasi oksidatif.
b. Pembawa lipid, enzim, dan protein pengikat penisilin (PCP) yang
berperan pada biosintesis dinding sel.
c. Enzim yang berperan pada sintesis fosfolipid dan replikasi DNA.
d. Kemoreseptor
6. Mesosom
Merupakan struktur kontroversial yang merupakan invaginasi
membran plasma yang berkelok-kelok.
7. Plasmid
Plasmid adalah molekul DNA berserat ganda, kecil, melingkar,
nonkromosomal.
8. Transposon
Transposon ialah sepotong kecil DNA yang bergerak antara DNA
bakteri dan plasmid; transposon tidak mereplikasikan diri.
11
9. Pembungkus sel
Pembungkus sel tersusun dari lapisan-lapisan makromolekul yang
mengelilingi bakteri, meliputi:
a. Membran sel dan suatu lapisan peptidoglikan kecuali pada
mikoplasma.
b. Lapisan membran luar pada bakteri Gram-negatif.
c. Suatu kapsul, suatu lapisan glikokaliks, atau keduanya (kadangkadang)
d. Antigen yang seringkali menginduksi terjadinya respons antibodi
spesifik.
10. Lapisan luar
a. Protein permukaan
Protein antifagositik ini terletak di luar dari dinding sel beberapa
bakteri Gram-positif
b. Kapsul
Kapsul ialah suatu struktur polisakarida yang berbatas tegas yang
mengelilingi sel bakteri dan berada di luar dinding sel. Perkecualian
terhadap struktur polisakarida ialah kapsul poli D-asam glutamat
Bacillus anthraxis.
c. Glikokaliks
Istilah glikokaliks ditujukan untuk jaringan longgar benang
polisakarida yang mengelilingi beberapa dinding sel bakteri.
11. Struktur tambahan
a. Flagel ialah suatu struktur tambahan protein untuk pergerakan dan
mengandung determinan antigen yang menonjol.
b. Pili (fimbria) adalah struktur tambahan permukaan yang kaku dan
hanya terdiri dari protein yang disebut pilin.
12. Endospora
Endospora terbentuk sebagai respon untuk bertahan hidup
terhadap kondisi nutrisi tertentu, misalnya kekurangan sumber gizi
tertentu. Endospora ialah sel-sel bakteri yang secara metabolik inaktif
dan sangat tahan terhadap pengeringan, pemanasan, dan berbagai zat
12
kimiawi. Endospora berguna untuk mengidentifikasi beberapa jenis

bakteri (misalnya Bacillus dan Clostridium).
13. Biofilm
Ialah kumpulan sel-sel bakteri yang terbentuk di dalam
lingkungan tanah dan air laut dan permukaan alat yang dicangkokkan
secara medik (misalnya protesa). Biofilm meningkatkan asupan gizi dan
seringkali menyingkirkan antimikroba (Johnson et al. 2011).
2.3.3 Pembagian Bakteri
Bakteri dibagi atas bakteri Gram positif dan Gram negatif tergantung
pada respon diwarnai dengan pewarnaan Gram. Sel kuman mula-mula
diwarnai dengan kristal ungu dan jodium lalu dicuci alkohol atau aseton.
Kuman Gram negatif kehilangan zat warna ungunya setelah dicuci dengan
alkohol, sedangkan kuman Gram positif tetap mempertahankan warna ungu
meskipun telah dicuci dengan alkohol (Assani, 1994).
2.3.4 Bakteri Uji
2.3.4.1 Bakteri Gram Positif
a. Staphylococcus aureus
Klasifikasi bakteri Staphylococcus aureus menurut Usman et
al (1994) dan Sjoekoer et al (2003) adalah :
Ordo
: Eubacteriales
Famili
: Micrococcaceae
Genus
: Staphylococcus
Spesies
: Staphylococcus aureus
Staphylococcus aureus bersifat aerob atau anaerob fakultatif,

tes katalase positif dan tahan hidup dalam lingkungan yang
mengandung garam dengan konsentrasi tinggi (halofilik), misalnya
NaCl 10%. Infeksi oleh jenis kuman ini yang terutama menimbulkan
penyakit pada manusia. Setiap jaringan ataupun alat tubuh dapat
diinfeksi olehnya dan menyebabkan timbulnya penyakit dengan tandatanda yang khas, yaitu peradangan, nekrosis, dan pembentukan abses.
Kuman ini berbentuk sferis, bila menggerombol dalam susunan yang
13
tidak teratur mungkin sisinya agak rata karena tertekan. Diameter

kuman antara 0,8-1,0 mikron.
b. Bacillus cereus
Klasifikasi bakteri Bacillus cereus menurut Usman et al (1994)
dan Jawetz et al (2004) adalah:
Ordo
: Bacillales
Famili
: Bacillaceae
Genus
: Bacillus
Spesies
: Bacillus cereus
Bacillus cereus bersifat aerob, berbentuk batang dan berukuran

0,3-2,2 x 1,2-7,0 m. Bakteri Bacillus cereus ini dapat meyebabkan
keracunan makanan, pneumonia, bronkopneumonia dan luka.
c. Bacillus subtilis
Klasifikasi bakteri Bacillus subtilis menurut Usman et al
(1994) dan Jawetz et al (2004) adalah:
Ordo
: Bacillales
Famili
: Bacillaceae
Genus
: Bacillus
Spesies
: Bacillus subtilis
Genus
bacillus
sebagian
besar
aerobic,
Gram-positif,
berbentuk batang dan berantai. Selnya berbentuk khas, berukuran 1 x

3-4 m. Dapat menyebabkan meningitis, endokartis, infeksi mata dan
lain-lainnya.
2.3.4.2 Bakteri Gram Negatif
a. Escherichia coli
Klasifikasi bakteri Escherichia coli menurut Usman et al
(1994) adalah:
Ordo
: Eubacteriales
Famili
: Enterobacteriaceae
Genus
: Escherichia
Spesies
: Escherichia coli
14
Escherichia coli adalah kuman oportunis yang banyak

ditemukan di dalam usus besar manusia sebagai flora normal. Kuman
berbentuk batang pendek (kokobasil), Gram-negatif, ukuran 0,4-0,7
m x 1,4 m. Sifatnya unik karena dapat menyebabkan infeksi primer
pada usus misalnya diare pada anak dan travelers diarrhea, seperti
juga kemampuannya menimbulkan infeksi pada jaringan tubuh lain di
luar usus.
b. Pseudomonas aeruginosa
Klasifikasi bakteri Pseudomonas aeruginosa menurut Usman
et al (1994) adalah:
Ordo
: Eubacteriales
Famili
Genus
: Pseudomonas
Spesies
: Pseudomonas aeruginosa
Genus Pseudomonas terdiri dari sejumlah kuman batang Gram

negatif yang tidak meragi karbohidrat, hidup di aerob di atas tanah dan
air. Kuman ini sering dihubungkan dengan penyakit pada manusia.
Organisme ini dapat merupakan peyebab 10-20% infeksi nosokomial.
Sering diisolasi dari penderita dengan neoplastik, luka dan luka bakar
yang berat. Kuman ini juga dapat menyebabkan infeksi pada saluran
pernapasan bagian bawah, saluran kemih, mata dan lain-lainya.
Batang Gram negatif 0,5-1,0 x 3,0-4,0 um.
c. Salmonella typhimorium
Klasifikasi bakteri Salmonella typhimorium berdasarkan
Usman et al (1994) dan Sjoekoer et al (2003) adalah:
Ordo
: Eubacteriales
Famili
Genus
: Salmonella
Spesies
: Salmonella typhimorium
Organisme yang berasal genus Salmonella adalah agen

penyebab bermacam-macam infeksi, mulai dari gastroenteritis yang
ringan sampai dengan demam tifoid yang disertai bakterimia. Kuman
15
berbentuk batang, tidak berspora, pada pewarnaan Gram bersifat

Gram negatif, ukuran 1-3,5 um x 0,5-0,8 um, besar koloni rata-rata 24 mm, mempunyai flagel peritrikh.
2.3.5 Antibakteri
2.3.5.1 Pendahuluan
Obat-obat antimikroba diklasifikasi sebagai bakteriostatika atau
bakterisidal. Obat-obat bakteriostatika menahan pertumbuhan dan replikasi
bakteri pada kadar serum yang dapat dicapai dalam tubuh pasien, sehingga
membatasi penyebaran infeksi sementara sistem imun tubuh menyerang,
memobilisasi dan mengeliminasi bakteri patogen. Bila obat dikeluarkan
sebelum sistem imun menangkap organisme, organisme yang dapat hidup
ditemukan dalam jumlah yang cukup sehingga dapat memulai siklus
infeksi kedua. Catatan bahwa organisme dapat hidup meskipun dengan
adanya obat bakteriostatika. Sebaliknya, dengan penambahan obat
bakterisidal dapat membunuh bakteri dan jumlah total organisme yang
hidup menurun (Mary et al., 2001). Kadar minimal yang diperlukan untuk
menghambat pertumbuhan mikroba atau membunuhnya, masing-masing
dikenal sebagai kadar hambat minimal (KHM) dan kadar bunuh minimal
(KBM) (Rianto et al, 2008).
Spektrum kemoterapeutika dari suatu obat tertentu mengacu pada
spesies organisme yang dipengaruhi oleh obat tersebut.
Spektrum sempit
Obat kemoterapeutika yang bekerja hanya pada segolongan
bakteri saja, contohnya hanya mampu menghambat atau membunuh
bakteri Gram positif saja atau Gram negatif saja. Misalnya, isoniazid
hanya aktif terhadap mikobakteria.
Spektrum sedang
Spektrum sedang adalah suatu terminologi yang diaplikasikan
pada antibiotika yang secara efektif melawan organisme Gram positif
dan
sejumlah
bakteri
Gram
negatif.
Misalnya,
ampisilin
dipertimbangkan sebagai spektrum sedang.
16
Spektrum luas
Obat-obat antibiotik berspektrum luas dapat menghambat atau
membunuh bakteri dari golongan Gram positif maupun negatif, seperti
kloramfenikol dan tetrasiklin mempengaruhi spesies mikroba secara
luas dan dirujuk sebagai antibiotika secara luas. Pemberian antibiotika
spektrum luas secara drastis dapat merubah flora bakterial normal
secara alamiah dan dapat mencetuskan super infeksi suatu organisme
seperti kandida yang perkembangannya secara normal dipengaruhi
dengan adanya mikroorganisme (Pratiwi, 2008).
2.3.5.2 Mekanisme kerja antibakteri

Berdasarkan mekanisme kerjanya, menurut Rianto et al (2008)
antimikroba dibagi dalam lima kelompok:
1. Antimikroba yang menghambat metabolisme sel mikroba
Antimikroba yang termasuk dalam kelompok ini ialah
sulfonamid, trimetoprim, asam p-aminosalisilat (PAS) dan sulfon.
Dengan mekanisme kerja ini diperoleh efek bakteriostatik. Mikroba
membutuhkan asam folat untuk kelangsungan hidupnya. Berbeda
dengan mamalia yang mendapatkan asam folat dari luar, kuman
patogen harus mensintesis sendiri asam folat dari asam amino benzoat
(PABA) untuk kebutuhan hidupnya. Apabila sulfonamid atau sulfon
menang
bersaing
dengan
PABA
untuk
diikutsertakan
dalam
pembentukan asam folat, maka terbentuk analog asam folat yang

nonfungsional. Akibatnya, kehidupan mikroba akan terganggu.
Berdasarkan sifat kompetisi, efek sulfonamid dapat diatasi dengan
meningkatkan kadar PABA.
2. Antimikroba yang menghambat sintesis dinding sel bakteri
Obat yang termasuk dalam kelompok ini ialah penisilin,
sefalosporin, basitrasin, vankomisin, dan sikloserin. Dinding sel bakteri,
terdiri dari peptidoglikan yaitu suatu kompleks polimer mukopeptida
(glikopeptida). Sikloserin menghambat reaksi yang paling dini dalam
proses sintesis dinding sel; diikuti berturut-turut oleh basitrasin,
vankomisin, dan diakhiri oleh penisilin dan sefalosporin, yang
17
menghambat reaksi terakhir (transpeptidasi) dalam rangkaian reaksi

tersebut. Oleh karena tekanan osmotik dalam sel kuman lebih tinggi
daripada di luar sel maka kerusakan dinding sel kuman akan
menyebabkan terjadinya lisis, yang merupakan dasar efek bakterisidal
pada kuman yang peka.
3. Antimikroba yang mengganggu keutuhan membran sel mikroba
Obat yang termasuk dalam kelompok ini ialah polimiksin,
golongan
polien
serta
berbagai
antimikroba
kemoterapeutik,
umpamanya antiseptik surface active agents. Polimiksin sebagai

senyawa amonium-kuaterner dapat merusak membran sel setelah
bereaksi dengan fosfat pada fosfolipid membran sel mikroba. Antibiotik
polien bereaksi dengan struktur sterol yang terdapat pada membran sel
fungus sehingga mempengaruhi permeabilitas selektif membran
tersebut. Antiseptik yang mengubah tegangan permukaan (surfaceactive agents), dapat merusak permeabilitas selektif dari membran sel
mikroba.
4. Antimikroba yang menghambat sintesis protein sel mikroba
Obat yang termasuk dalam kelompok ini ialah golongan
aminoglikolisid, makrolid, linkomisin, tetrasiklin dan kloramfenikol.
Untuk kehidupannya, sel mikroba perlu mensintesis berbagai protein.
Sintesis protein berlangsung di ribosom, dengan bantuan mRNA dan
tRNA. Pada bakteri, ribosom terdiri atas dua subunit, yang berdasarkan
konstanta sedimentasi dinyatakan sebegai ribosom 30S dan 50S. untuk
berfungsi pada sintesis protein, kedua komponen ini akan bersatu pada
pangkal rantai mRNA menjadi ribosom 70S. Penghambatan sintesis
protein terjadi dengan berbagai cara.
5. Antimikroba yang menghambat sintesis asam nukleat
Antimikroba yang termasuk dalam kelompok ini ialah
rifampisin, dan golongan kuinolon. Rifampisin, salah satu derifat
rifampisin, berikatan dengan enzim polimerase-RNA (pada sub unit)
sehingga menghambat sintesis RNA dan DNA oleh enzim tersebut.
Golongan kuinolon menghambat enzim DNA girase pada kuman yang
18
fungsinya menata krromosom yang sangat panjang menjadi bentuk

spiral hingga bisa muat dalam sel kuman yang kecil.
2.3.5.3 Metode Pengujian Antibakteri
1. Metode Difusi
Metode Disc Diffusion (tes Kirby & Bauer)

Untuk menentukan aktivitas agen antimikroba. Piringan
yang berisi agen antimikroba diletakkan pada media Agar yang
telah ditanami mikroorganisme yang akan berdifusi pada media
Agar tersebut. Area jernih mengindikasikan adanya hambatan
pertumbuhan mikroorganisme oleh agen
antimikroba pada
pertumbuhan media Agar.
E-test
Metode E-test digunakan untuk mengestimasi MIC
(minimum inhibitory concentration) atau KHM (kadar hambat
minimum), yaitu konsentrasi minimal suatu agen antimikroba
untuk dapat menghambat pertumbuhan mikroorganisme. Pada
metode ini digunakan strip plastik yang mengandung agen
antimikroba dari kadar terendah hingga tertinggi dan diletakkan
pada permukaan media Agar yang telah ditanami mikroorganisme.
Pengamatan dilakukan pada area jernih yang ditimbulkannya yang
menunjukkan
kadar
agen
antimikroba
yang
menghambat
pertumbuhan mikroorganisme pada media Agar.
Ditch-plate technique
Pada metode ini sampel uji berupa agen antimikroba yang
diletakkan pada parit yang dibuat dengan cara memotong media
Agar dalam cawan petri pada bagian tengah secara membujur dan
mikroba uji (maksimum 6 macam) digoreskan ke arah parit yang
berisi agen antimikroba.
Cup-plate technique
Metode ini serupa dengan metode disc diffusion, dimana
dibuat sumur pada media Agar yang telah ditanami dengan
19
mikroorganisme dan pada sumur tersebut diberi agen antimikroba

yang akan diuji.
Gradient-plate technique
Pada metode ini konsentrasi agen antimikroba pada media
Agar secara teoritis bervariasi dari 0 hingga maksimal. Media Agar
dicairkan dan larutan uji ditambahkan. Campuran kemudian
dituang ke dalam cawan Petri dan diletakkan dalam posisi miring.
Nutrisi kedua selanjutnya dituang diatasnya. Plate diinkubasikan
selama 24 jam untuk memungkinkan agen antimikroba berdifusi
dan permukaan media mengering. Mikroba uji (maksimal 6
macam) digoreskan pada arah mulai dari konsentrasi tinggi ke
rendah. Hasil diperhitungkan sebagai panjang total pertumbuhan
mikroba maksimum yang mungkin dibandingkan dengan panjang
pertumbuhan hasil goresan.
Bila:
X = panjang total pertumbuhan mikroorganisme yang mungkin
Y = panjang pertumbuhan total
C = konsentrasi final agen antimikroba pada total volume media
mg/mL atau g/mL
Maka konsentrasi hambatan adalah : [(X,Y)]: C mg/mL atau
g/mL.
Yang perlu diperhatikan adalah dari hasil perbandingan
yang didapat dari lingkungan padat dan cair, faktor difusi agen
antimikroba dapat mempengaruhi keseluruhan hasil pada media
padat.
2. Metode Dilusi
Metode dilusi cair/broth dilution test (serial dilution)

Metode
ini
mengukur
MIC
(Minimum
Inhibitory
Concentration atau Kadar Hambat Minimum, KHM) dan MBC

(Minimum Bactericidal Concentration dan Kadar Bunuh
Minimum, KBM). Cara yang dilakukan adalah dengan membuat
seri pengenceran agen antimikroba pada medium cair yang
20
ditambahkan dengan mikroba uji. Larutan uji agen antimikroba

pada kadar terkecil yang terlihat jernih tanpa adanya pertumbuhan
mikroba uji ditetapkan sebagai KHM. Larutan yang ditetapkan
sebagai KHM tersebut selanjutnya dikultur ulang pada media cair
tanpa penambahan mikroba uji ataupun agen antimikroba, dan
diinkubasi selama 18-24 jam. Media cair yang tetap terlihat jernih
setelah inkubasi ditetapkan sebagai KBM.
Metode dilusi padat/solid dilution test

Metode ini serupa dengan metode dilusi cair namun
menggunakan media padat (solid). Keuntungan metode ini adalah
satu konsentrasi agen antimikroba yang diuji dapat digunakan
untuk menguji beberapa mikroba uji (Pratiwi, 2008).
2.3.5.4 Antibakteri Pembanding

Klasifikasi cyprofloxacin yang digunakan sebagai antibakteri
pembanding berdasarkan Rianto et al (2008) dan Soemitro et al (1995)
adalah sebagai berikut :
a. Rumus Kimia
: 1 cyclopropyl 6 fluoro - 1, 4-dihydro-4-oxo-
7- (1 piperazinyl) -3 quinolonecarboxylic acid

b. Rumus molekul
: C17H18FN3O3.HCl.H2O
O
F
HN
COOH
Gambar 2. Struktur Cyprofloxacin
c. Pemerian
: serbuk, putih
d. Aktifitas bakteri
: menghambat pertumbuhan bakteri (baktersidal)
e. Mekanisme kerja
:menghambat
subunit
pada
DNA
girase
(topoisomerase) yang merupakan bagian essensial dalam proses sintesa

DNA bakteri.
21
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
3.1
LOKASI DAN WAKTU PENELITIAN

Penelitian akan dilaksanakan mulai bulan September hingga Februari
2013 di Laboraturium Produk Alami dan Laboraturium Analisa Umum,
Bidang Botani dan Mikrobiologi Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu
Pengetahuan Indonesia (LIPI) yang berada di Jalan Raya Jakarta Bogor
Km 46, Cibinong; dan Laboratorium Mikrobiologi, Fakultas Kedokteran dan
Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
3.2
3.2.1
BAHAN DAN ALAT

Bahan Uji
Bahan uji
yang digunakan adalah buah bawang hutan
(Scorodocarpus borneensis. Becc) dengan spesifikasi warna kuning

kecoklatan, bau sulfur. Buah bawang hutan yang digunakan berasal dari
hutan di daerah Samarinda, Kalimantan Timur. Bahan sebelumnya telah
dilakukan determinasi dan authentication specimen di Herbarium
Bogoriense, Pusat Penelitian Biologi LIPI, Bogor, Jawa Barat.
3.2.2
Bakteri Uji
Bakteri uji yang digunakan adalah bakteri Staphylococcus aureus
ATCC 25923, Bacillus subtilis ATCC 6633, Escherichia coli ATCC
25922, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 dan diperoleh dari
Laboratorium Mikrobiologi Klinis, Fakultas Kedokteran Universitas
Indonesia, Jakarta. Salmonella typhimurium ATCC 14028 yang diperoleh
dari koleksi Pusat Pengujian Obat dan Makanan Nasional, Badan POM RI,
Jakarta. Bacillus cereus yang diperoleh dari Laboraturium Produk Alami
dan Laboraturium Analisa Umum, Bidang Botani dan Mikrobiologi Pusat
Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), Bogor.
3.2.3
Antibakteri Pembanding
Antibakteri pembanding yang digunakan adalah Cyprofloxacin
yang diperoleh dari Bagian Baku Pembanding, Badan POM RI, Jakarta.
22
3.2.4
Bahan Kimia
Bahan-bahan kimia yang digunakan diantaranya : Natrium Agar
(NA), Natrium Broth (NB), Tween 80%, NaCl 0,9%, larutan standar Mc
Farland III, adeps lanae, eter, alkohol 96%, metanol, NaCl jenuh dan
aquadest.
3.2.5
Alat
Alat-alat yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah
peralatan gelas (Pyrex), timbangan analitik (Sartonius CP2245), cawan
penguap, kapas, kain kasa, jarum ose, mikropipet (Nichipet Ex), bunsen,
alumunium oil, corong, corong pisah, alat destilasi, alat enfleurasi
(chamber ukuran 30 cm x 30 cm dan dua buah plat kaca setebal 0,5 cm
dengan ukuran 20 cm x 20 cm), lumpang dan alu, botol vial, batang
pengaduk, spatula, pipet tetes, cawan petri (Iwaki), autoklaf (Tommy type
SS-325), Magnetic stirrer (Daiki KB Lee 5001), oven (Memmert), Laminar
Air Flow (EACI), lemari pendingin (SANYO-MEDICOOL), vortex (Labnet
International
Inc),
jangka
sorong,
vacuum
rotary
evaporator,
Spektrofotometri UV-Vis (Genesys 20), Gas Chromatography-Mass

Spectrometry (GC-MS).
3.3
PROSEDUR KERJA
3.3.1
Penyiapan Simplisia
Penyiapan simplisia buah bawang hutan dilakukan dengan cara
sortasi basah untuk membersihkannya dari kotoran. Selanjutnya buah
bawang hutan dihancurkan dan ditumbuk dengan menggunakan lumpang
dan alu dan langsung diisolasi minyak atsiri yang terkandung di dalamnya.
3.3.2
3.3.2.1
Isolasi
Destilasi Uap Air
Isolasi buah bawang hutan dilakukan dengan menggunakan
destilasi uap air. Sebanyak 200 gram buah bawang hutan yang sudah
dirajang dan ditumbuk, didestilasi dengan menggunakan uap air selama
5 jam pada suhu diatas 100oC. Uap yang keluar dikumpulkan dan
dibiarkan mengembun. Kemudian hasil destilasi yang diperoleh
ditampung dalam corong pisah. Fase minyak dan fase air dipisahkan
23
menggunakan
NaCl
jenuh
hingga
diperoleh
minyak
atsirinya.
Selanjutnya ditambahkan Na2SO4 anhidrat untuk menghilangkan air yang

masih tersisa. Minyak atsiri bebas air kemudian ditimbang selanjutnya
dilakukan uji aktivitas antibakteri dan diidentifikasi kandungan kimianya
menggunakan Gas Chromatography-Mass Spectrometry (Jamal, 2009).
3.3.2.2 Enfleurasi
Sebanyak 30 gram lemak (dalam hal ini menggunakan adeps
lanae atau lemak bulu domba) dioleskan secara merata dengan tebal 0,3
cm pada permukaan plat kaca (hal ini dilakukan pada 2 buah plat kaca).
Buah bawang hutan sebanyak 180 gram yang telah dirajang dan
ditumbuk diletakkan di dasar permukaan chamber. Setelah itu 2 plat kaca
dimasukkan ke dalam dua sisi chamber dan membentuk pola segitiga
dengan mempertemukan 2 buah sisi atas dari plat kaca. Setelah itu
chamber ditutup dengan menggunakan penutup kaca yang bagian
dalamnya telah dioleskan lemak sebanyak 20 gram. Kemudian chamber
didiamkan pada suhu ruang.
Setelah 7 hari lemak kemudian diambil dari plat kaca dan
ditimbang beratnya. Lemak kemudian dilarutkan ke dalam metanol pro
analisis dengan perbandingan lemak : metanol = 1 : 2 dan dibiarkan selama
1 hari. Kemudian metanol diuapkan dengan menggunakan vaccum rotary
evaporator. Minyak atsiri bebas metanol kemudian ditimbang selanjutnya
dilakukan uji aktivitas antibakteri dan diitentifikasi kandungan kimianya
menggunakan Gas Chromatography-Mass Spectrometry.
3.3.3
Analisis
Senyawa
menggunakan
Gas
Chromatography-Mass
Spectrometry
Sebanyak 1 L minyak atsiri yang didapatkan diinjeksikan ke
injektor Gas Chromatography-Mass Spectrometry menggunakan detektor
FID. Temperatur kolom ditingkatkan dari 70oC-100oC dengan rata-rata
kenaikan 2 oC/menit, 100oC-150oC dengan rata-rata kenaikan 5oC/menit,
dan dari 150oC-200oC dengan rata-rata kenaikan 10oC/menit. Kolom yang
digunakan yaitu kolom kapiler (dimensi 30 m x 0,25 mm x 0,25 m), laju
alir 1 ml/menit, gas pembawa berupa helium tekanan 80 kPa, suhu injektor
24
250 oC, suhu interface 280 oC. Parameter Mass Spectrometry berupa
tegangan ionisasi sebesar 70 eV, suhu ion source (sumber ionisasi) 180 oC,
rata-rata scanning 50-600 Da (Baharum et al, 2010).
3.3.4
Sterilisasi Alat dan Bahan

Semua alat dan bahan yang digunakan untuk uji mikrobiologi
disterilkan menggunakan autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit,
kecuali untuk bahan yang terbuat dari karet disterilkan dengan cara
direndam dalam alkohol 70 % dan jarum ose disterilkan dengan cara
flambir pada nyala bunsen. Pengerjaan uji mikrobiologi dilakukan secara
aseptis di dalam lemari aseptis yang sebelumnya telah dibersihkan dengan
alkohol 70 % lalu disinari dengan lampu UV selama 2 jam yang
dinyalakan 15 menit sebelum digunakan (Harley, 2005).
3.3.5
Pembuatan Media Pertumbuhan

a. Nutrien Agar
Serbuk NA sebanyak 23 gram dilarutkan dalam 1 liter aquades
dan dipanaskan sampai mendidih hingga semuanya larut. Lalu
disterilkan dalam autoklaf pada suhu 121oC selama 15 menit.
Komposisi NA (g/L): Agar 15; gelatin pepton 5; Beef extract 3.
b. Nutrient Broth
Ditimbang 13 gr BHI NB dilarutkan dengan 1 L aquadest dan
dipanaskan hingga semuanya larut kemudian disterilkan dalam
autoklaf.
Komposisi NB (g/L): Lab-Lenco powder 1; Yeast extract 2; Peptone
5; dan Sodium chlorida 5.
3.3.6
Pembuatan Larutan Uji

Setiap larutan uji dibuat emulsi dengan menggunakan cara
mencampur minyak atsiri buah bawang hutan dengan pelarut aquadest
steril dan 0,5% Tween 80. Konsentrasi yang dibuat untuk semua bakteri
terdiri dari 125 ppm; 250 ppm; 500 ppm; 1000 ppm; 2000 ppm baik hasil
dari destilasi uap air maupun hasil enfleuransi (Hosamani et al., 2011).
25
3.3.7
Pembuatan Stok Bakteri

Semua bakteri uji diinokulasikan pada medium NA dengan cara
menggoreskan bakteri menggunakan jarum ose pada permukaan agar,
kemudian diinkubasi pada suhu 37 OC selama 24 jam (Suppakul et al.,
2006; Kumar et al., 2010).
3.3.8
Pembuatan Suspensi Bakteri

Biakan bakteri yang telah berumur 24 jam pada NA diambil satu
ose dan disuspensikan ke dalam tabung yang berisi 2 mL NaCl 0,9%.
Kemudian divortex dan diukur menggunakan Spectrophotometry, setelah
itu diencerkan hingga diperoleh suspensi 106 sel bakteri/mL sesuai dengan
standard Mc Farland III (109 sel bakteri/mL) sebagai acuan (Azrifitria et
al., 2010).
3.3.9
Pengujian Aktivitas Antibakteri

1. Pengujian Aktivitas Antibakteri Minyak atsiri dari Hasil Destilasi Uap
Air dan Enfleurasi
Penentuan KHM dan KBM dilakukan dengan menggunakan
metode dilusi cair/broth dilution test (serial dilution). Konsentrasi
larutan uji dibuat sebuah seri pengenceran pada medium cair dengan
volume total 3 ml dengan konsentrasi larutan uji 125 ppm; 250 ppm;
500 ppm; 1000 ppm; 2000 ppm yang kemudian ditambahkan dengan
suspensi bakteri uji sebanyak 0,3 ml dan 1,2 ml NB. Kemudian di
shaker dan diinkubasi pada suhu 37OC selama 24 jam dalam kondisi
aerob. Sebagai pembanding digunakan empat macam kontrol yaitu:
a. Kontrol bakteri
= 2,7 ml medium + 0,3 ml suspensi bakteri
b. Kontrol pelarut
= 1,5 ml medium + 1,5 ml pelarut
c. Kontrol ekstrak
= 1,5 ml medium + 1,5 ml ekstrak
Nilai KHM dinyatakan sebagai konsentrasi terendah minyak

atsiri buah bawang hutan yang masih dapat menghambat pertumbuhan
bakteri uji. Sedangkan nilai KBM akan dicari lebih lanjut berdasarkan
nilai KHM yang diperoleh. Nilai KBM dinyatakan sebagai konsentrasi
terendah minyak atsiri buah bawang hutan yang tidak menunjukkan
26
adanya pertumbuhan koloni bakteri pada agar. Pengujian dilakukan 2

kali pengulangan (Azrifitria et al., 2010; Suppaku et al., 2006).
2. Pengujian Aktivitas Antibakteri Cyprofloxacin sebagai Antibakteri
Pembanding
Pentuan KHM dan KBM dilakukan dengan menggunakan
metode dilusi cair/broth dilution test (serial dilution). Konsentrasi
larutan uji dibuat sebuah seri pengenceran pada medium cair dengan
volume total 3 ml dengan konsentrasi larutan uji sebagai berikut:
a. Untuk S. aureus 0,03125 ppm; 0,0625 ppm; 0,125 ppm; 0,25 ppm;
0,5 ppm
b. Untuk B. cereus 0,015625 ppm; 0,03125 ppm; 0,0625 ppm; 0,125
ppm; 0,25 ppm
c. Untuk B. subtilis 0,03125 ppm; 0,0625 ppm; 0,125 ppm; 0,25 ppm;
0,5 ppm
d. Untuk E.coli 0,225 ppm; 0,45 ppm; 0,9 ppm; 1,8 ppm; 3,6 ppm
e. Untuk P. aeruginosa 0,125 ppm; 0,25 ppm; 0,5 ppm; 1 ppm; 2 ppm
f. Untuk S. typhimurium 0,0625 ppm; 0,125 ppm; 0,25 ppm; 0,5 ppm;
1 ppm
Yang kemudian ditambahkan dengan suspensi bakteri uji
sebanyak 0,3 ml dan 1,2 ml NB. Kemudian di shaker dan diinkubasi
pada suhu 37OC selama 24 jam dalam kondisi aerob. Sebagai
pembanding digunakan empat macam kontrol yaitu:
a. Kontrol bakteri = 2,7 ml medium + 0,3 ml suspensi bakteri
b. Kontrol pelarut = 1,5 ml medium + 1,5 ml pelarut
c. Kontrol ekstrak = 1,5 ml medium + 1,5 ml ekstrak
Nilai
KHM
dinyatakan
sebagai
konsentrasi
terendah
cyprofloxacin yang masih dapat menghambat pertumbuhan bakteri uji.

Pengujian dilakukan 2 kali pengulangan (Azrifitria et al., 2010).
27
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 HASIL DETERMINASI
Hasil determinasi tumbuhan yang dilakukan di Herbarium Bogoriense,
Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi, LIPI Cibinong Bogor, menunjukan
bahwa tumbuhan uji yang digunakan dalam penelitian ini merupakan spesies
Scorodocarpus borneensis Becc. Sertifikat hasil determinasi dapat dilihat pada
Lampiran.
4.2 HASIL MINYAK ATSIRI BAWANG HUTAN
Pada penelitian ini, proses isolasi minyak atsiri dilakukan dengan
menggunakan metode destilasi uap air dan enfleurasi. Randemen minyak atsiri
yang dihasilkan dihitung menggunakan rumus :
Bobot minyak atsiri yang dihasilkan x 100%
Bobot sampel awal yang ditimbang
Tabel IV.1. Hasil Randemen Minyak Atsiri Bawang Hutan

No.
Metode Isolasi
Bobot awal
Bobot minyak
Randemen
yang ditimbang atsiri yang

dihasilkan
1.
Destilasi
Uap 200 gram
4,9 gram
2,5 %
180 gram
7,1 gram
3,9 %
Air
2.
Enfleurasi
Berdasarkan tabel diatas, dapat diketahui bahwa jumlah minyak atsiri yang
diperoleh menggunakan metode enfleurasi lebih besar (7,1 gram) dengan
randemen 3,9 % dibandingkan dengan menggunakan metode destilasi uap air
(4,9 gram) dengan randemen 2,5 %.
28
4.3.HASIL IDENTIFIKASI MENGGUNAKAN GC-MS

Proses identifikasi komponen kimia yang ada pada minyak atsiri
bawang hutan dilakukan menggunakan Gas Chromatography Mass
Spectrometry. Hasil kromatogram dan kandungan kimia minyak atsiri yang
didapatkan dapat dilihat pada gambar dan tabel.
Gambar 3. Hasil kromatogram minyak atsiri bawang hutan dengan

menggunakan metode destilasi uap air
Gambar 4. Hasil kromatogram minyak atsiri bawang hutan dengan

menggunakan enfleurasi.
29
Tabel IV.2. Data kandungan kimia penyusun minyak atsiri dari hasil Destilasi
Uap Air
No.
Nama Senyawa
Waktu
Rumus
Berat
Retensi
Molekul
Molekul
Quality
Persent
(%)
1.
Unknown
4,15
40,10
2.
Unknown
4,83
7,68
3.
Ethyl acetate
4,91
C4H8O2
88.12
91
2,63
4.
1,1
6,46
C6H14O2
118.174
90
17,82
7,03
C5H10O
86.073
72
3,13
Diethoxyethane
5.
3-methyl,2pentanone
6.
Butanoic acid
8,26
C4H8O2
88.052
94
0,27
7.
2-Hexanol
8,36
C6H14O
102.104
78
0,17
Unknown
9,15
4,69
9.
p-Xylene
11,00
C6H10
106.078
97
0,76
10.
1,1
C8H18O2
146.131
83
0,56
14,46
C7H16O
116.12
78
0,18
15,74
C9H12
120.094
94
0,19
16,16
C9H12
120.094
97
0,31
C2H6OS2
109.986
97
0,35
22,30
C2H6O4S
125.999
97
0,70
25,35
C3H8S
139.979
72
0,26
34,98
4,28
Diethoxy 12,41
butane
11.
3-methyl-3Heptanol
12.
1-Ethyl-2-methyl
benzene
13.
1,2,3-Trimethyl
benzene
14.
S-methyl methane 17,04

thiosulphinate
15.
Dimethoxysulfon
e
16.
Methyl
methyltiomethyl
disulfide
17.
Unknown
30
Tabel IV.3. Data kandungan kimia penyusun minyak atsiri dari hasil
Enfleurasi
No. Nama Senyawa
Waktu
Rumus
Berat
Retensi
Molekul
Molekul
Quality Persentase
(%)
1.
Ethanol
4,06
C2H6O
46.068
78
40,98
2.
Ethyl acetate
4,83
C4H8O2
88.12
87
12,56
3.
1-Butanol
5,41
C4H10O
74.073
91
6,40
4.
2,3-Butanediol
8,62
C4H10O2
90.068
80
0,29
5.
Unknown
9,12
10,09
6.
2-methyl-2,4-
14,00
C6H14O2
118.099
90
2,12
20,01
C6H14O3
134.094
90
1,86
22,35
C5H8O4
132.042
81
0,19
22,48
C10H20O
156.151
78
0,25
Pentanediol
7.
1-1-oxybis-2Propanol
8.
Diethyl
malonate
9.
Dihydro
myrcenol
10.
- Terpinolene
23,99
C10H18O
154.249
87
0,30
11.
-Citronellol
29,57
C10H20O
156.151
98
0,14
12.
1-methyl-4-
35,36
C10H16
136.125
95
0,09
(methylethyl)1,3Cyclohexadiene
13.
Coumarine
35,83
C9H6O2
146.037
93
0,67
14.
Thiosulfuric
36,23
H2S2O3
256
86
0,65
36,35
C16H32O2 256.24
93
1,61
39,20
C12H14O4 222.237
97
8,54
acid
15.
Hexadecanoic
acid
16
Diethyl
Phthalate
31
Berdasarkan tabel diatas, dapat diketahui bahwa kandungan kimia

minyak atsiri hasil metode destilasi uap air berbeda dengan kandungan kimia
minyak atsiri hasil metode enfleurasi. Hasil identifikasi minyak atsiri dari
kedua metode yang digunakan menunjukkan adanya kandungan kimia berupa
sulfur.
4.4. HASIL UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI
Tabel IV.4. Hasil Uji Antibakteri Minyak Atsiri Bawang Hutan dari Hasil
Destilasi Uap Air
Konsentrasi
Bakteri uji
minyak
S. a
atsiri (ppm)
B. s
B. c
E. c
S. t
P. a
2000 ppm
1000 ppm
500 ppm
250 ppm
125 ppm
Tabel IV.5. Hasil Uji Antibakteri Minyak Atsiri Bawang Hutan dari Hasil
Enfleurasi
Konsentrasi
Bakteri uji
minyak
S. a
atsiri (ppm)
B. s
B. c
E. c
S. t
P. a
2000 ppm
1000 ppm
500 ppm
250 ppm
125 ppm
32
Keterangan :
(+) menunjukan adanya pertumbuhan bakteri sehingga tidak mempunyai
aktivitas antibakteri
(-) menunjukan tidak adanya pertumbuhan bakteri sehingga mempunyai
aktivitas antibakteri
S. a = Staphylococcus aureus
E. c = Escherichia coli
B. s = Bacillus subtilis
S. t = Salmonella typhimorium
B. c = Bacillus cereus
P. a = Pseudomonas aeruginosa
Berdasarkan tabel diatas, dapat diketahui bahwa minyak atsiri yang

didapatkan baik dari hasil destilasi uap air maupun enfleurasi tidak
mempunyai aktifitas antibakteri.
Tabel IV.6. Hasil Uji Antibakteri Pembanding Ciprofloxacin
Bakteri uji
Konsentrasi
(ppm)
S. a
B. s
B. c
E. c
S. t
P. a
KHM
0,25
0,0625
0,125
0,12
0,5
KBM
0,5
0,125
0,25
0,24
Keterangan :
S. a = Staphylococcus aureus
E. c = Escherichia coli
B. s = Bacillus subtilis
S. t = Salmonella typhimorium
B. c = Bacillus cereus
P. a = Pseudomonas aeruginosa
Berdasarkan tabel diatas, dapat diketahui bahwa antibakteri pembanding

ciprofloxacin paling kuat aktifitasnya pada bakteri Bacillus subtilis dengan
Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) sebesar 0,0625 ppm dan Konsentrasi
Bunuh Minimum (KBM) sebesar 0,125 ppm.
4.5. PEMBAHASAN
Metode yang digunakan untuk mengisolasi minyak atsiri yang terdapat
pada buah bawang hutan adalah destilasi uap air dan enfleurasi. Pemilihan dua
metode ini selain untuk mengetahui perbedaan kandungan kimia minyak atsiri
yang didapatkan, sekaligus mengetahui ada tidaknya perbedaan jumlah yang
didapatkan secara kuantitas.
33
Setelah dilakukan pengamatan, didapatkan bahwa perolehan minyak

atsiri (randemen) dengan metode enfleurasi lebih tinggi (3,9 %) dibandingkan
dengan hasil dari metode destilasi uap air (2,5 %). Hasil randemen minyak
atsiri dari metode enfleurasi lebih banyak dikarenakan ketika dilakukan
perendaman selama satu hari untuk memisahkan metanol dari lemak, masih
terdapat lemak yang belum terpisah dan masih terbawa oleh metanol. Saat
dilakukan rotary evaporator dengan pelarut metanol, lemak tidak ikut
teruapkan dan tertinggal dengan minyak atsiri yang diperoleh.
Selanjutnya minyak atsiri yang diperoleh diidentifikasi menggunakan
Gas Chromatography-Mas Spectrometry. Berdasarkan hasil yang diperoleh,
terdapat perbedaan kandungan kimia pada minyak atsiri dari hasil destilasi uap
air jika dibandingkan dengan kandungan kimia yang ada pada minyak atsiri
hasil enfleurasi. Perbedaan kandungan kimia yang dihasilkan dikarenakan
perbedaan suhu yang digunakan pada kedua metode. Pada metode destilasi
uap air yang menggunakan suhu tinggi menyebabkan kandungan kimia yang
tidak tahan panas akan rusak. Sedangkan pada metode enfleurasi dengan
menggunakan suhu rendah menyebabkan kandungan kimia yang diharapkan
menguap selama proses berlangsung, namun tertinggal didalam sampel buah
bawang hutan.
Hasil isolasi minyak atsiri dengan metode destilasi uap air terdiri atas
senyawa
kimia
golongan
sulfur
(S-methyl
methanethiosulphinate;
Dimethyoxysulfone; Methyl methyltiomethyl disulfide), alifatik alkohol (2Hexanol;
3-methyl-3-Heptanol),
alifatik
keton
(3-methyl-2-Pentanone;
Butanoic acid; 1,1-diethoxy butane), aromatik (1,2,3-Trimethylbenzene; 1Ethyl-methyl benzene; p-Xylene). Sedangkan untuk hasil isolasi minyak atsiri
dengan menggunakan metode enfleurasi terdiri atas senyawa kimia golongan
kimia sulfur (Thiosulfuric acid), alifatik alkohol (1-Butanol; 2,3-Butanediol;
2-methyl-2,4-Pentanediol; 1-1-oxybis-2-Propanol; Dihydro myrcenol; Citronellol; Hexadecanoic acid), alifatik keton (Propanedioic acid), aromatik
(- Terpinolene; 1-methyl-4-(methylethyl)-1,3-Cyclohexadiene), aromatik
keton (Coumarine).
34
Hasil analisis GCMS pada minyak atsiri buah bawang hutan baik
dengan metode destilasi uap air maupun metode enfleurasi ditemukan
beberapa senyawa sulfur. Senyawa sulfur umumnya mempunyai aktivitas
antibakteri yang cukup kuat (Kubota et al.,1998).
Senyawa kimia golongan sulfur pada minyak atsiri yang dihasilkan
dari buah bawang hutan baik hasil destilasi uap air maupun enfleurasi berbeda
jika dibandingkan dengan senyawa kimia golongan sulfur pada minyak atsiri
buah bawang putih yang sudah lebih dahulu teruji aktivitas antibakterinya.
Khadri et al yang meneliti minyak atsiri buah bawang putih di Aelgeria Barat
menemukan dua senyawa sulfur utama yaitu Methyl allyl trisulfida dan Diallyl
disulfida. Sedangkan Ogara et al pada penelitianya tentang minyak atsiri buah
bawang putih di India, senyawa utama sulfur yang ditemukan yaitu Diallyl
disulfida dan Diallyl trisulfida.
H3CO
OCH3
Gambar 6. Dimethoxysulfone
Gambar 5. S-Methyl methanethiosulpinate
S
O
Gambar 7. Methyl methyltiomethyl disulfide
OH
Gambar 8. Thiosulfuric acid
S
S
H2C
OH
CH3
Gambar 9. Methyl allyl trisulfide
CH2
S
H2C
Gambar 10. Diallyl disulfide
35
S
H2C
S
S
CH2
Gambar 11. Diallyl trisulfide
Setelah dilakukan proses identifikasi selanjutnya dilakukan proses uji

aktivitas antibakteri. Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan dengan
menggunakan metode dilusi cair. Metode ini dipilih karena selain dapat
menentukan ada tidaknya kemampuan antibakteri pada minyak atsiri bawang
hutan juga dapat menentukan seberapa besar Kadar Hambat Minimum (KHM)
dan Kadar Bunuh Minimum (KBM) terhadap bakteri. Pembuatan larutan uji
minyak atsiri dilarutkan dalam aquadest dengan ditambahkan tween 80 %
sebanyak 0,5 %. Penggunaan tween 80 % bertujuan agar menjaga kestabilan
minyak dalam air sehingga lebih homogen. Penentuan nilai KHM ini
ditentukan setelah larutan uji dikultur kembali pada media agar.
Hasil uji aktivitas antibakteri minyak atsiri hasil destilasi uap air dan
minyak atsiri hasil enfleurasi tertera pada tabel 4 dan 5. Uji aktivitas
antibakteri hasil destilasi uap air dan hasil enfleurasi menggunakan tiga
bakteri gram positif yaitu Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Bacillus
subtilis dan tiga bakteri gram negatif yaitu Escherichia Coli, Salmonella
typhimorium, Pseudomonas aeruginosa. Konsentrasi minyak atsiri yang
digunakan untuk keenam bakteri tersebut yaitu 125 ppm, 250 ppm, 500 ppm,
1000 ppm dan 2000 ppm. Pemilihan konsentrasi mengacu kepada ketentuan
dimana suatu bahan fitokimia diklasifikasikan sebagai antimikroba jika
mempunyai nilai Kadar Hambat Minimum (KHM) pada rentang dibawah 1001000 mg/mL (Kuete et al,. 2011).
Hasil yang diperoleh pada konsentrasi tertinggi yang digunakan yaitu
2000 ppm, baik minyak atsiri buah bawang hutan hasil destilasi uap air
maupun hasil enfleurasi tidak menunjukkan adanya aktivitas antibakteri. Hal
ini dapat dilihat pada tabung larutan uji sebelum diinkubasi (kiri atau A)
berwarna kuning jernih, dan setelah diinkubasi (kanan atau B) semua tabung
larutan uji mulai dari konsentrasi terendah 125 ppm sampai yang tertinggi
yaitu 2000 ppm berwarna keruh yang menandakan adanya pertumbuhan
36
bakteri (Gambar 16 21 untuk minyak atsiri hasil destilasi uap air dan 25 30
untuk minyak atsiri hasil enfleurasi).
Untuk menghindari kesalahan ketika mengamati kekeruhan pada
tabung larutan uji saat menggunakan mata manusia maka dilakukan
pengamatan menggunakan Spektrofotometri UV-VIS. Hasil Spektrofotometri
UV-VIS menunjukkan bahwa nilai absorban yang diperoleh dari larutan uji
konsentrasi 2000 ppm, 1000 ppm, 500 ppm, 250 ppm dan 125 ppm dari
minyak atsiri hasil destilasi uap air sangat besar jika dibandingkan dengan
nilai absorban medium sebagai kontrol. Hasil yang sama juga dialami oleh
nilai absorban yang diperoleh dari larutan uji dari minyak atsiri hasil
enfleurasi (Lampiran 16 dan 17). Prinsip Spektrofotometri UV-VIS yaitu
semakin besar nilai absorban dari suatu larutan maka semakin keruh larutan
tersebut. Jadi dengan ini sudah bisa dipastikan bahwa larutan uji baik dari
minyak atsiri hasil destilasi uap air maupun hasil enfleurasi memang keruh.
Pengamatan terakhir dilakukan pengkulturan kembali pada medium agar, hal
ini untuk menghilangkan keraguan pada kekeruhan tabung larutan uji yang
ditimbulkan akibat pertumbuhan bakteri uji atau karena faktor lain. Setelah
dilakukan pengkulturan kembali pada medium agar dan terlihat pertumbuhan
bakteri di dalamnya maka dapat dipastikan bahwa kekeruhan yang terjadi pada
tabung larutan uji sebelumnya karena adanya bakteri yang tumbuh pula
(Gambar 33 - 44).
Untuk antibakteri pembanding yang digunakan yaitu ciprofloxacin,
diperoleh hasil paling besar aktivitasnya pada bakteri Bacillus subtilis dengan
Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) sebesar 0,0625 ppm dan Konsentrasi
Bunuh Minimum (KBM) sebesar 0,125 ppm.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa minyak atsiri buah bawang
hutan yang dihasilkan dari dua metode yang berbeda tersebut tidak memiliki
aktivitas antimikroba. Hal ini dapat terjadi karena konsentrasi yang dimiliki
oleh masing-masing senyawa kimia penyusun minyak atsiri sangat rendah
sehingga mempengaruhi aktivitas antibakteri yang dimilikinya.
37
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1. KESIMPULAN
1. Hasil minyak atsiri tertinggi buah bawang hutan diperoleh dari isolasi
enfleurasi (3,9%) dibandingkan dengan hasil destilasi uap air (2,5%).
2. Senyawa sulfur yang ditemukan dari hasil analisis GCMS pada minyak
atsiri buah bawang hutan dengan metode destilasi uap air yaitu Smethyl
methanethiosulphinate;
Dimethyoxysulfone;
Methyl
methyltiomethyl disulfide sedangkan pada minyak atsiri dengan metode

enfleurasi yaitu Thiosulfuric acid.
3. Hasil minyak atsiri buah bawang hutan baik dari hasil enfleurasi
maupun hasil destilasi uap air menunjukkan tidak mempunyai aktivitas
antibakteri.
5.2. SARAN
Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang kandungan minyak
atsiri buah bawang hutan dengan metode yang berbeda dan kegunaankegunaan yang lainnya dari minyak atsiri buah bawang hutan tersebut.
5.3. UCAPAN TERIMA KASIH

Penulis
berterimakasih
kepada
Prof.
(ris)
Dr.
Partomun
Simanjuntak, M.Sc dari Pusat Penelitian Bioteknologi LIPI atas buah

bawang hutan yang diperoleh langsung dari Samarinda, Kalimantan
Timur. Serta Ibu Lina dari Laboratorium Mikrobiologi Kesehatan FKUI
Cikini atas bantuanya dalam memberikan banyak pengetahuan kepada
penulis.
38
DAFTAR PUSTAKA
Andrews, Jennifer M. 2001. Determination of minimum inhibitory concentrations.

Journal of Antimicrobial Chemotherapy 48: 5-16.
Azrifitria, Aziz Syaikhul, Chairul. 2010. Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanolik
Daun Umbi Crinum asiatum L. Terhadap bakteri penyebab jerawat.
Majalah Farmasi Indonesia, 21(4) 249-254.
Baharum Syarul Nataqain, Bunawan Hamidun, Abd Ghani Maaruf, Mustapha
Wan Aida Wan and Noor Normah Mohd. 2010. Analysis of the Chemical
Composition of the Essential Oil of Polygonum minus Huds Using TwoDimensional Gas Chromatography-Time-of-Flight Mass Spectrometry
(GC-TOF-MS). Journal Molecules. 15. 7006-7015.
Harborne, J.B. 1987. Metode Fitokimia: Penuntun Cara Modern Menganalisis
Tumbuhan. Penerjemah: Kosasih P, Soediro Iwang. Bandung: Penerbit
ITB. 6-17.
Harley, John P. 2005. Laboratory Exercises in Microbiology, Sixth Edition.
Newyork: The McGraw-Hill Companies, Inc.
Heyne K. 1987. Tumbuhan Berguna Indonesia. Jilid II. Terjemahan oleh Badan
Litbang Kehutanan. Jakarta : Yayasan Sarana Wano Jaya.
Hosamani R C, K Sandeepkumar, C Lakshman H, A Hosamani P. 2011.
Antimicrobial Activity of Leaf Extract of Andrographis paniculata Wall.
Science Research Reporter 1(2): 92-95.
Hostettmann K. 1991. Methods in Plant Biochemistry. San Diego : Academic
Press inc. 47-58
Irawan Bambang T A. 2010. Peningkatan Mutu Minyak Nilam dengan Ekstraksi
dan Destilasi Pada Berbagai Komposisi Pelarut. Tesis. Magister Teknik
Kimia Universitas Diponegoro. Semarang.
Jamal Yuliasri. 2009. Komposisi Kimia Minyak Atsiri Melodorum cylindricum
(Maing. Ex Hook.f & Thoms), Litsea firma (Blume) Hook.f., FI. Brit. Ind.
Dan Calistemon lanceolatus D.C. Berita Biologi. 9 (6). 721-730.
Jawetz E, Melnick J, Adelberg E, 2004. Medical Microbiology. Singapore: The
McGraw-Hill Companies, Inc.
39
Johnson A G, Ziegler R J, Hawley L. 2011. Essential Mikrobiologi dan

Imunologi. Tangerang Selatan: Binarupa Aksara.
Karossi A.T, Hanafi M, Sutedja L. 1993. Isolation and Antibacterial Test of
Garlic Oil. JKTI Vol. 3(2): 49-53
Kartika R. 1999. Isolasi Senyawa Antibakteri dalam kulit kayu bawang hutan
(Scorodocarpus borneensis) (tesis). Bogor: Institut Pertanian Bogor;
H.4;22
Katzung B G. 2002. Farmakologi Dasar dan Klinik. Jakarta: Penerbit Salemba
Medika.
Khadri S, Boutefnouchet N, Dekhil M. 2010. Antibacterial Activity Evaluation of
Allium Sativum Essential Oil Compared to Different Pseudomonas
aeruginosa Strains in Estern Algeria. Chemistry& Chemical Engineering,
Biotechnology, Food Industry. 11 (4): 421-428.
Kubota K, Matsumoto M, Ueda M, Kobayashi A. 1999. New Antimicrobial
Compound from Scorodocarpus borneensis. Becc.Bioschi Biotechnol
Biochem. 63(2):298-301
Kumar B S, Saral A M, Madhumitha G, Sivaraj A, Kumar AV. 2010. In-vitro
Antibacterial Activities of Picrorhiza Kurroa Rhizome Extract Using Agar
Well Diffusion Methode. International Journal of Current Pharmaceutical
Research vol 2.
Lawrence Reena and Lawrence Kapil. 2011. Antioxidant Activity of Garlic
Essential Oil (Allium sativum) Grown in North Indian Plants. Asian
Pacific Journal of Tropical Biomedicine. 1-3.
Lim Haeyoung, Kubota Kikue, Kobayashi Akio, Fumio Sugawara. 1997. Sulfur
Containing Compounds from Scorodocarpus borneensis and Their
Antimicrobial Activity. Phytochemistry 48 ,787-790
Ogara E A, Ross Z M, Maslin D J. 2001. Antimicrobial Properties of Garlic
againts Human Enteric Bacteria: Evaluation of Methodologiesand
Comparisons with Garlic Oil Sulfides and Garlic Powder. Appl Environ
Microbiol 67 (1): 475-480
40
Poeloengan M. 2009. Pengaruh Minyak Atsiri Serai (Andropogon citratus DC.)

terhadap Bakteri yang Diisolasi dari Sapi Mastitis Subklinis. Berita
Biologi 9(6): 715-719.
Pratiwi, S. T. 2008. Mikrobiologi farmasi. Jakarta: Erlangga.
Praptiwi, Jamal Y, Murningsih T. 2002. Komponen Kimia dan Uji Antibakteri
Minyak Atsiri Daun Ki Cengkeh (Urophyllum arboreum (Reinw. Ex. Bl.)
Korth.). Berita Biologi 6(3): 461-465
Praptiwi, Harapini M. 2005. Aktivitas Ekstrak Metanol Buah Mbosi (Dysoxylum
gaudichandianum (A.Juss) Miq.) dan Penapisan Senyawa Kimianya. Biota
Vol. X (2): 93-97.
Praptiwi, Poeloengan M. 2010. Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kulit buah
Manggis (Garcinia mangostana Linn). Media Litbang Kesehatan Volume
XX nomor 2: 65-69.
Rianto S et al. 2008. Farmakologi dan Terapi Edisi V. Jakarta: Balai Penerbit
FKUI
Shridhar D. M. P, Mahajan G. B, Kamat V. P, Naik C. G, Parab R. R, Thakur N.
R, Mishra P. D. 2009. Antibacterial Activity of 2-(2,4-Dibromophenoxy)4,6-dibromophenol from Dysydea granulosa. Mar. Drugs 7: 464-471.
Soemitro et al.1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta: Departemen
Kesehatan.
Soetjipto H, Dewi L, Prayitno S.D. 2008. Isolasi dan Identifikasi Senyawa
Antibakteri Minyak Atsiri Daun Kembang Bulan (Tithonia diversifolia
(Hemsley) A.Gray). Berita Biologi 9(2): 155-162.
Suppakul P, Sanla-Ead N, Phoopuritham P. 2006. Antimicrobial and Antioxidant
Activities of Bettel Oil. Kasetsart J (Nat. Sci.) 40: 91-100
Syahrurachman Agus et al. 1994. Buku Ajar Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta:
Binarupa Aksara.
Sjoekor, M. D., Roekistiningsih, Sanarto, S., dan Sri, W. 2003. Mikrobiologi
Medik. Malang: Banyumedi A Publishing.
Tortora Gerard J, Funke Berdell R, Case Christine L. 2010. Microbiology An
Introduction ed.10. San Fransisco: Pearson Education, Inc.
41
Trimulyadi G, Ponco B, Jennie B. S. L, Miksusanti. 2008. Kerusakan Dinding Sel

Eschericia coli K.1.1 oleh Minyak Atsiri Temu Kunci (Kaempfira
pandurata). Berita Biologi 9 (1): 1-8.
Trimulyadi G, Ponco B, Syarief J, Jennie B. S. L, Miksusanti. 2009. Antibacterial
Activity of Temu Kunci Tuber (Kaempheria pandurata) Essential Oil
Against Bacillus cereus. Med J Indones 18: 10-17.
Wiart Christophe et al. 2001. Sesquiterpenes and Alkaloids from Scorodocarpus
borneensis. Phytochemistry 58,653-656
(http://webbook.nist.gov/chemistry)
www.plantamor.com/index.php?plant=1443
42
LAMPIRAN
Lampiran 1. Hasil Determinasi Tanaman
43
Lampiran 2. Gambar Bahan dan Alat Penelitian
Gambar 12. Buah Bawang Hutan (Scorodocarpus borneensis Becc.)
Gambar 13. Alat Destilasi Uap Air
Gambar 14. Rotary evaporator
Gambar 15. Metode enfleurasi (samping) dan Metode enfleurasi (depan)
44
Lampiran 3. Alur Penelitian

Penyiapan Simplisia
Isolasi Minyak Atsiri
Destilasi Uap Air
Analisis Minyak
Atsiri
Menggunakan
GC MS
Enfleuransi
Metode uji bakteri
Metode uji bakteri
Metode Dilusi Cair
Metode Dilusi Cair
Analisis Minyak
Atsiri
Menggunakan
GC MS
Analisis Data
45
Lampiran 4. Penyiapan simplisia

Buah bawang hutan diperoleh dari
daerah Samarinda, Kalimantan
Timur
Dilakukan sortasi basah dan

dibersihkan dari pengotor yang
menempel
Buah bawang hutan dihancurkan

dengan ditumbuk dalam lumpang
Dilakukan proses isolasi minyak

atsiri
Disimpan dalam wadah yang gelap
46
Lampiran 5. Skema Isolasi Minyak Atsiri Buah Bawang Hutan
Buah Bawang Hutan yang sudah

ditumbuk
Menggunakan Metode Destilasi

Uap Air
Menggunakan Metode
Enfleurasi
250 gram bahan ditimbang dan

didestilasi uap air selama 5 jam
180 gram bahan ditimbang dan

diletakkan di dalam chamber
Hasil destilasi ditampung pada

corong pisah
80 gram adeps lanae dioleskan

setebal 0,3 cm pada plat kaca
Difraksinasi menggunakan eter

dan dilakukan pengocokan
Chamber ditutup dan didiamkan

pada suhu ruang dan diamati 24
jam selama 1 minggu
Ditambahkan Na2SO4 untuk

mengeringkan air yang tersisa
Lemak diambil dari plat kaca

kemudian ditimbang
Dilakukan penyaringan dan di

rotary evaporator kemudian
ditampung dalam vial gelap
Dilarutkan dengan metanol p.a.

(1:2) dan didiamkan selama 1
hari
Diuapkan dengan rotary vacum

evaporator dan minyak
ditampung dalam vial tertutup
rapat
47
Lampiran 6. Skema Kerja Peremajaan Bakteri

Stok Bakteri Uji
Inokulasi pada agar miring
Inkubasi selama 24 jam pada suhu 37OC
Lampiran 7. Skema Kerja Pembuatan Suspensi Bakteri Uji

Stok biakan bakteri pada agar NA umur
24 jam
Suspensikan 1-2 jarum ose ke dalam 5

mL NaCl steril
Diukur menggunakan
Spectrophotometry agar sesuai standar
Mc Farland
Diencerkan hingga diperoleh suspensi

106 sel bakteri/mL
48
Lampiran 8. Skema Kerja Pengujian Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri Buah

Bawang Hutan
8 buah tabung reaksi

steril
Tabung 1-5
Tabung 6-8
UJI
KONTROL
+ 1,5 mL
medium NB
Tab.
1
Tab.
2
Tab.
3
Tab.
4
Tab.
5
+ 1,5
mL
Lar.
Induk
4000
ppm
+ 1,5
mL
Lar.
Tab 1
+ 1,5
mL
Lar .
Tab 2
+ 1,5
mL
Lar.
Tab 3
+ 1,5
mL
Lar.
Tab 4
Tab. 6
Tab. 7
Tab. 8
2,7 mL
NB + 0,3
mL
suspensi
bakteri
1,5 mL
NB + 1,5
mL
Larutan
induk
1,5 mL
NB + 1,5
mL
pelarut
+ 0,3 mL suspensi bakteri 106 sel

bakteri/mL
+ 1,2 mL
medium NB
Di vortex dan diinkubasi selama 24

jam pada suhu 37OC
Pengamatan
49
Lampiran 9. Pembuatan Larutan Uji Antimikroba

1. Pembuatan Larutan Induk
Larutan induk yang digunakan yaitu 4000 ppm
Ditimbang minyak atsiri sebanyak 40 mg
Ditambahkan 0,5 % tween 80 %

0,5 % x 10 mL = 0,05 mL
Di add hingga 10 mL
2. Pembuatan Larutan Uji dan Kontrol Positif
Konsentrasi 2000 ppm (tabung 1)

N1 . V1
= N2 . V2
4000 . V1 = 2000 . 3
V1
= 1,5 mL (jumlah larutan yang dipipet dari lar. induk)

N1 . V1
= N2 . V2
2000 . V1 = 1000 . 3
V1
= 1,5 mL (jumlah larutan yang dipipet dari lar. 2000 ppm)

N1 . V1
= N2 . V2
1000 . V1 = 500 . 3
V1

N1 . V1
= N2 . V2
500 . V1
= 250 . 3
V1

N1 . V1
= N2 . V2
250 . V1
= 125 . 3
V1
50
Lampiran 10. Hasil GC-MS Kandungan Kimia Penyusun Minyak Atsiri Buah
Bawang Hutan dari Metode Destilasi Uap Air
No.
Spesifikasi Senyawa
1.
Unknown
Waktu Retensi : 4.15
Quality : Rumus Senyawa : Berat Molekul : -
2.
Unknown
3.
Ethyl acetate
Quality : 91
Rumus Senyawa : C4H8O2
Berat Molekul : 88.12
Spektrometri Massa
4.
1,1 Diethoxyethane
Quality : 90
O
51
5.
3-methyl,2-Pentanone
Quality : 72
Rumus Senyawa : C5H10O
O
6.
Butanoic acid
Quality : 94
O
OH
7.
2-Hexanol
Quality : 78
OH
Unknown
9.
p-Xylene
Quality : 97
Rumus Senyawa : C8H10
52
10.
1,1 Diethoxy butane

Quality : 83
O
11.
3-methyl-3-Heptanol
Quality : 78
OH
12.
1-Ethyl-2-methyl benzene
Quality : 94
13.
1,2,3-Trimethyl benzene
Quality : 97
53
14.
S-Methyl methanethiosulphinate
Quality : 97
Rumus Senyawa : C2H6OS2
O
S
S
15.
Dimethoxysulfone
Quality : 97
Rumus Senyawa : C2H6O4S
O
S
H3CO
16.
OCH3
Methyl methyltiomethyl disulfide

Quality : 72
Rumus Senyawa : C3H8S
S
S
S
17.
Unknown
54
Lampiran 11. Hasil GC-MS Kandungan Kimia Penyusun Minyak Atsiri Buah
Bawang Hutan dari Metode Enfleurasi
No.
Spesifikasi Senyawa
Spektrometri Massa
1.
Ethanol
Quality : 78
OH
2.
Ethyl acetate
Quality : 87
O
3.
1-Butanol
Quality : 91
OH
4.
2,3 - Butanediol
Quality : 80
OH
HO
55
5.
Unknown
6.
2-methyl-2,4-Pentanediol
Quality : 90
OH
HO
7.
1,1-oxybis-2-Propanol
Quality : 90
HO
OH
O
8.
Diethyl malonate
Quality : 81
O
9.
Dihydro myrcenol
Quality : 78
HO
56
10.
-Terpinolene
Quality : 87
11.
-Citronellol
Quality : 98
HO
12.
1-methyl-4-(methylethyl)-1,3Cyclohexadiene
Quality : 95
13.
Coumarine
Quality : 93
57
14.
Thiosulfuric acid
Quality : 86
Rumus Senyawa : H2S2O
Berat Molekul : 256
S
OH
S
15.
OH
Hexadecanoic acid
Quality : 93
O
OH
16.
Diethyl phthalate
Quality : 97
O
O
58
Lampiran 12. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Kandungan Minyak Atsiri Hasil
Destilasi Uap Air dari Buah Bawang Hutan terhadap Tiga Bakteri Gram Positif
dan Tiga Bakteri Gram Negatif
Gambar 16. Tabung uji berisi Bakteri S.aureus sebelum (kiri atau A) dan setelah
(kanan atau B) di inkubasi
Gambar 17. Tabung uji berisi Bakteri B.cereus sebelum (kiri atau A) dan setelah
Gambar 18. Tabung uji berisi Bakteri B.subtilis sebelum (kiri atau A) dan setelah
59
(lanjutan)
Gambar 19. Tabung uji berisi Bakteri E.coli sebelum (kiri atau A) dan setelah
Gambar 20. Tabung uji berisi Bakteri S.typhimorium sebelum (kiri atau A) dan
setelah (kanan atau B) di inkubasi
Gambar 21. Tabung uji berisi Bakteri P.aeruginosa sebelum (kiri atau A) dan
60
Gambar 22. Tabung Uji Kontrol berisi kontrol medium, kontrol ekstrak dan
kontrol bakteri sebelum di inkubasi
Gambar 23. Tabung Uji Kontrol berisi kontrol bakteri setelah diinkubasi
Gambar 24. Tabung Uji Kontrol Ekstrak (kiri) dan Kontrol Medium (kanan)
setelah diinkubasi
61
Enfleurasi dari Buah Bawang Hutan terhadap Tiga Bakteri Gram Positif dan Tiga
Bakteri Gram Negatif
Gambar 25. Tabung uji berisi Bakteri S.aureus sebelum (kiri atau A) dan setelah
Gambar 26. Tabung uji berisi Bakteri B.cereus sebelum (kiri atau A) dan setelah
Gambar 27. Tabung uji berisi Bakteri B.subtilis sebelum (kiri atau A) dan setelah
62
(lanjutan)
Gambar 28. Tabung uji berisi Bakteri E.coli sebelum (kiri atau A) dan setelah
Gambar 29. Tabung uji berisi Bakteri S.typhimorium sebelum (kiri atau A) dan
Gambar 30. Tabung uji berisi Bakteri P.aeruginosa sebelum (kiri atau A) dan
63
Gambar 31. Tabung Uji Kontrol berisi kontrol ekstrak dan kontrol bakteri
sebelum di inkubasi
Gambar 32. Tabung Uji Kontrol berisi kontrol ekstrak dan kontrol bakteri setelah
di inkubasi
64
Destilasi Uap Air dari Buah Bawang Hutan terhadap Tiga Bakteri Gram Positif
dan Tiga Bakteri Gram Negatif setelah Dikultur pada Media Agar
250 ppm
500 ppm
125 ppm
1000
ppm
S.A
2000
ppm
Gambar 33. Hasil uji aktivitas antibakteri kandungan minyak atsiri buah bawang
hutan terhadap bakteri Staphylococcus aureus
1000
ppm
2000
ppm
500 ppm
B.
cereus
250 ppm
125 ppm
hutan terhadap bakteri Bacillus cereus
65
(lanjutan)
2000
ppm
B.
subtilis
1000
ppm
125 ppm
500 ppm
250 ppm
hutan terhadap bakteri Bacillus subtilis
125 ppm
e. coli
250 ppm
2000
ppm
500 ppm
1000
ppm
hutan terhadap bakteri Escherichia coli
66
(lanjutan)
2000
ppm
s. typhi
1000
ppm
125 ppm
500 ppm
250 ppm
hutan terhadap bakteri Salmonella typhimurium
250 ppm
500 ppm
125 ppm
1000
ppm
P.aeru
2000
ppm
hutan terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa
67
Enfleurasi dari Buah Bawang Hutan terhadap Tiga Bakteri Gram Positif dan Tiga
Bakteri Gram Negatif setelah Dikultur pada Media Agar
250 ppm
125 ppm
500 ppm
S.A
1000
ppm
2000
ppm
hutan terhadap bakteri Staphylococcus aureus
1000
ppm
2000
ppm
500 ppm
B. cereus
250 ppm
125 ppm
hutan terhadap bakteri Bacillus cereus
68
(lanjutan)
2000
ppm
B.
subtilis
1000
ppm
125 ppm
500 ppm
250 ppm
hutan terhadap bakteri Bacillus subtilis
500
ppm
1000
ppm
250
ppm
2000
ppm
125
ppm
E.coli
hutan terhadap bakteri Escherichia coli
69
(lanjutan)
250 ppm
500 ppm
125 ppm
1000
ppm
2000
ppm
s.typhi
hutan terhadap bakteri Salmonella typhimurium
p.aeru
125 ppm
250 ppm
2000
ppm
1000
ppm
500 ppm
hutan terhadap bakteri Pseudomonas aeruginosa
70
Lampiran 16. Hasil Pengamatan Menggunakan Spektrofotometri UV-VIS untuk

Larutan Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri dari Hasil Destilasi Uap Air
1. Kontrol Negatif
No. Bahan yang digunakan
1.
Natrium broth
Absorban
0.000
2. Staphylococcus aureus
No. Konsentrasi
Tabung
1.
125 ppm
1
2
2.
250 ppm
1
2
3.
500 ppm
1
2
4.
1000 ppm
1
2
5.
2000 ppm
1
2
Absorban
1.272
1.329
1.291
1.327
1.006
1.139
1.115
1.095
1.005
1.044
Rata-rata absorban
1.3005
Tabung
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
Absorban
1.217
1.599
0.901
0.999
1.253
0.973
1.125
1.235
0.888
1.081
Rata-rata absorban
1.408
Tabung
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
Absorban
1.352
1.288
1.338
1.347
1.001
1.173
1.176
1.030
0.966
0.902
Rata-rata absorban
1.320
3. Bacillus cereus
No. Konsentrasi
1.
125 ppm
2.
250 ppm
3.
500 ppm
4.
1000 ppm
5.
2000 ppm
4. Bacillus subtilis
No. Konsentrasi
1.
125 ppm
2.
250 ppm
3.
500 ppm
4.
1000 ppm
5.
2000 ppm
1.309
1.0725
1.105
1.0245
0.950
1.113
1.130
0.9845
1.3425
1.087
1.103
0.934
71
5. Escherichia coli
No. Konsentrasi
1.
125 ppm
Tabung
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
Absorban
1.336
1.377
1.388
1.285
1.318
1.330
1.327
1.227
1.144
1.152
Rata-rata absorban
1.3565
6. Pseudomonas aeruginosa
No. Konsentrasi
Tabung
1.
125 ppm
1
2
2.
250 ppm
1
2
3.
500 ppm
1
2
4.
1000 ppm
1
2
5.
2000 ppm
1
2
Absorban
1.204
1.065
1.120
1.269
1.195
1.165
1.209
1.262
0.828
0.996
Rata-rata absorban
1.1345
7. Salmonella typhimorium
No. Konsentrasi
Tabung
1.
125 ppm
1
2
2.
250 ppm
1
2
3.
500 ppm
1
2
4.
1000 ppm
1
2
5.
2000 ppm
1
2
Absorban
1.237
1.342
1.309
1.326
1.090
1.108
1.230
1.018
1.094
0.912
Rata-rata absorban
1.2395
2.
250 ppm
3.
500 ppm
4.
1000 ppm
5.
2000 ppm
1.3365
1.324
1.277
1.148
1.1945
1.180
1.2355
0.912
1.3175
1.099
1.124
1.003
72

Larutan Uji Aktivitas Antibakteri Minyak Atsiri dari Hasil Enfleurasi
1. Kontrol Negatif
1.
Natrium broth
Absorban
0.000
No. Konsentrasi
Tabung
1.
125 ppm
1
2
2.
250 ppm
1
2
3.
500 ppm
1
2
4.
1000 ppm
1
2
5.
2000 ppm
1
2
Absorban
1.357
1.090
1.037
0.986
1.094
1.000
0.998
0.771
0.862
0.698
Rata-rata absorban
1.2235
Tabung
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
Absorban
0.850
0.816
0.705
0.764
0.872
0.674
0.760
0.679
0.650
0.724
Rata-rata absorban
0.833
Tabung
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
Absorban
1.031
1.385
1.452
1.112
1.436
1.001
0.903
0.991
0.792
0.880
Rata-rata absorban
1.208
3. Bacillus cereus
No. Konsentrasi
1.
125 ppm
2.
250 ppm
3.
500 ppm
4.
1000 ppm
5.
2000 ppm
No. Konsentrasi
1.
125 ppm
2.
250 ppm
3.
500 ppm
4.
1000 ppm
5.
2000 ppm
1.0115
1.047
0.8845
0.780
0.7345
0.773
0.7195
0.687
1.282
1.218
0.947
0.836
73
5. Escherichia coli
No. Konsentrasi
1.
125 ppm
Tabung
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
Absorban
1.242
1.342
1.196
1.213
1.313
1.160
1.309
1.052
0.903
1.070
Rata-rata absorban
1.292
No. Konsentrasi
Tabung
1.
125 ppm
1
2
2.
250 ppm
1
2
3.
500 ppm
1
2
4.
1000 ppm
1
2
5.
2000 ppm
1
2
Absorban
1.307
1.298
1.079
1.082
1.170
1.164
0.701
0.689
0.573
0.574
Rata-rata absorban
1.3025
No. Konsentrasi
Tabung
1.
125 ppm
1
2
2.
250 ppm
1
2
3.
500 ppm
1
2
4.
1000 ppm
1
2
5.
2000 ppm
1
2
Absorban
1.366
1.062
1.252
1.065
1.004
1.039
0.958
0.941
0.973
0.876
Rata-rata absorban
1.214
2.
250 ppm
3.
500 ppm
4.
1000 ppm
5.
2000 ppm
1.2045
1.2365
1.1805
0.9865
1.0805
1.167
0.695
0.5735
1.1585
1.0215
0.9495
0.9245
74

Larutan Uji Antibiotik Ciprofloxacin sebagai Pembanding
1. Kontrol Negatif
1.
Natrium broth
Absorban
0.000
No. Konsentrasi
Tabung
1.
0,03125 ppm
1
2
2.
0,0625 ppm
1
2
3.
0,125 ppm
1
2
4.
0,25 ppm
1
2
5.
0,5 ppm
1
2
Absorban
0,326
0,312
0,279
0,401
0,351
0,286
0,128
0,126
0,138
0,157
Rata-rata absorban
0,319
Tabung
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
Absorban
0,192
0,190
0,165
0,167
0,152
0,152
0,062
0,090
0,071
0,014
Rata-rata absorban
0,191
Tabung
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
Absorban
0,235
0,245
0,134
0,135
0,076
0,078
0,041
0,060
0,008
0,008
Rata-rata absorban
0,240
3. Bacillus cereus
No. Konsentrasi
1.
0,03125 ppm
2.
0,0625 ppm
3.
0,125 ppm
4.
0,25 ppm
5.
0,5 ppm
No. Konsentrasi
1.
0,3125 ppm
2.
0,0625 ppm
3.
0,125 ppm
4.
0,25 ppm
5.
0,5 ppm
0,340
0,3185
0,127
0,1475
0,166
0,152
0,076
0,0425
0,1345
0,077
0.0505
0,008
75
5. Escherichia coli
No. Konsentrasi
1.
0,015 ppm
Tabung
1
2
1
2
1
2
1
2
1
2
Absorban
1,029
1,031
0,920
0,923
0,766
0,809
0,466
0,465
0,167
0,166
Rata-rata absorban
1,0305
No. Konsentrasi
Tabung
1.
0,125 ppm
1
2
2.
0,25 ppm
1
2
3.
0,5 ppm
1
2
4.
1 ppm
1
2
5.
2 ppm
1
2
Absorban
0,909
1,068
0,831
0,859
0,631
0,575
0,265
0,283
0,098
0,080
Rata-rata absorban
0,9885
No. Konsentrasi
Tabung
1.
0,0625 ppm
1
2
2.
0,125 ppm
1
2
3.
0,25 ppm
1
2
4.
0,5 ppm
1
2
5.
1 ppm
1
2
Absorban
1,162
1,167
1,031
1,027
0,721
0,728
0,227
0,288
0,114
0,114
Rata-rata absorban
1,1645
2.
0,03 ppm
3.
0,06 ppm
4.
0,12 ppm
5.
0,24 ppm
0,9215
0,7875
0,4655
0,1665
0,845
0,603
0,274
0,089
1,029
0,7245
0,2575
0,114

Judul

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Judul

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI KANDUNGAN

MUHAMAD LUQMANUL HAKIM

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

: Muhamad Luqmanul Hakim

Program Studi : Farmasi

: Uji Aktivitas Antibakteri Kandungan Minyak Atsiri

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

: Muhamad Luqmanul Hakim

Program Study: Pharmacy

: Antibacterial Activity Test Component of Essential Oil in Wood

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Ciputat, September 2014

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................... 4

Klasifikasi Tanaman ........................................................... 4

Nama Lain .......................................................................... 4

Tempat Tumbuh ................................................................. 5

Kandungan Kimia .............................................................. 5

2.2 Isolasi Minyak Atsiri ...................................................................... 6

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Minyak Atsiri ..................................................................... 8

2.3 Bakteri dan Antibakteri .................................................................. 9

Definisi Bakteri . ................................................................. 9

Struktur Bakteri . ................................................................. 9

2.3.3 Pembagian Bakteri ............................................................. 12

Bakteri uji ........................................................................... 12

BAB 3. METODE PENELITIAN .................................................................. 21

Bahan Uji ............................................................................ 21

Bakteri Uji .......................................................................... 21

Antibakteri Pembanding ..................................................... 21

Bahan Kimia ....................................................................... 22

3.3 Prosedur Kerja ................................................................................ 22

Penyiapan Simplisia ........................................................... 22

Analisis senyawa menggunakan Gas Spectroscopy- Mass

Sterilisasi alat dan bahan .................................................... 24

Pembuatan media pertumbuhan ......................................... 24

Pembuatan larutan uji ......................................................... 24

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Pembuatan stok bakteri ...................................................... 25

Pembuatan suspensi bakteri ............................................... 25

Pengujian Aktivias Antibakteri .......................................... 25

BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................... 27

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Tabel IV.1: Hasil Randeman Minyak Atsiri ..................................................... 27

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Gambar 1: Buah Bawang Hutan ...................................................................... 5

Gambar 12 : Buah Bawang Hutan ................................................................... 43

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Gambar 27 : Tabung Uji Berisi Minyak Atsiri Hasil Enfleurasi Berbagai

Gambar 34 : Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Kandungan Minyak Atsiri Hasil

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Gambar 37 : Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Kandungan Minyak Atsiri Hasil

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 1: Hasil Determinasi Tanaman ......................................................... 42

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

Lampiran 14 : Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Kandungan Minyak Atsiri Hasil