:',
]NTRODUCCION A LA
INGENIERIA BIOOU]MICA
;i
i
tl
s-^
B
NTRODUCCION A LA
INGENIERIA BIOOUIMICA
w
UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
FACULTAD DE INGENIERIA
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA OUIMICA
INSTITUTO DE BIOTECNOLOGIA
Profesor Titular
TABLA DE CONTENIDO
Frlogo
...xvii
1. NTRODUCCTON
I.,t LA CELULA
!i
1.2.1
i..,.
..,...
.2.1.1
....
Procesos de prodgccin de
1
1.2 METABOLISMOMICROBIA1
,r .
energfq,
Gluclisis
I
Embden
Meyerhof-Parnas..
1.2.1.1.2 Ruta metablca del
fosfato-pentosa .
1 .2.1.1.3 Ruta mstablica
Eatner-Doudoroff
1.2.1 .2 Respiracin
I
11
12
13
...
fosforilacinoxidativa,.....
tricarboxlico
13
.,
1.2.1.2.3
16
Reacciones de
oxidacin-reduccin
16
1.3
1.4
22
29
1.4.1 El biocatalizador
1.4.2 Cultivos de clulas y tejidos
1.4.3 El biorreactor
1.4.4 Esterilizacin
30
31
1.4.5
35
1.4.5.1
1.4.5.2
Separacideclulas'.....
Rupturadeclulas . . . . . . . i.
Productosextracelulares....;
producto
36
37
38
Productosintacelulares....i..
1.4.5.1.1
1.4.5,1.2
39
39
40
40
41
'travs d membranas
1 .4.5.3.2 Extraccin lquido-lquido
de antibiticos
1.4.5.3.3 Recupercin de
'
antbiticos y protelnas
mediante intercambio inico
1.5
33
35
....;.
41
42
42
SIMULACIONENINGENIERIA...J.II";
43
Etapas'en el planteamiento y la
solucin de un modelo' . .
Lenguajes de simulacin continua
43
45
1.5.1
1.5.2
BIBLIOGRAFIA.. .:...
46
2
2.1
BALANCE DE MATERIALES
52
53
54
2.2.1
'
Ejemplo
2.2
Ejemplo
2.3
Determinacin
en un proceso
Determinacin
en un proceso
de la ecuacin de crecimiento
aerobio
de la ecuacin de crecimiento
anaerobio . . . .
Ejemplo
Ejemplo
62
64
66
70
70
70
71
71
de rendimiento
2.5.5
2.5.6
57
69
56
58
58
59
2.5.1
2.5.2
2.5.3
2.5.4
54
55
en el
crecimiento aerobio de S. cerevisiae .
72
74
75
76
ilt
2.5.7
2.5.8
2.5.9
2.6
77
78
79
79
Ejemplo
2.7
2.7
Ejemplo
....
. . . . . 80
2.8 Formulacin
80
88*
2.7.1
88-
Requerimientos nutrimentales
2.7.1
.1
Requerimiento de elementos
89
gg
90
especficos
92
2.7.5Agua
2.T.6Fuentesdecarbono
2.7.6.1
2.7.6.2
2.7.6.3
2.7.6.4
2.7.6.5
2.7.7
Hidrocarburos
..:......:......97
......98
......
sintticas
93
94
94
98,100
100
101
101
101
1O2
'lO2
2.7
.7.4
2.7.7.5
104
105
106
107
108
DE CULTIVO
de un medio
PROBLEMAS...
BTBLTOGRAFT1
1'14
..
116
120
.1 Conservacin
.2 Entalpfa
120
"t21
de energfa
123
124
124
libre
3.1 .4 Entropfa
3.1.3
Energla
3.3.1
3.3.2
3.3.3
3.3.4
3.3.5
3.1
132
133
134
137
138
126
130
Ejemplo
DE COMBUSTION
139
. . ..
140
3.4.1
3.4.2
140
142
145
146
3.6.1
3.6.2
Disipacindeenerga
termodinmica
.......r.
Eficiencia
146
146
'i
149
3.2
3.8
3.8.1
3.8.3
lbl
153
. . . . . . 154
duranteel crecimientomicrobial
3.8.2
1S0
....
1Ss
energaliberadaporcatabolismo.,.:..
Ejemplo
1Sg
energa
59
3,8.4
vt
161
161
162
163
163
164
164
166
167
's,s.o aerobioenunreactorcontinuo
168
3.9,1
3.9.2
3.9.3
3.9.4
........
Ejemplo
3,6 Balance
Ejemplo
3.7
"171
anaerobio de obtencin de
etanol a partir de glucosa
174
178
PROBLEMAS
.,,.i..
BIBLIOGRAFIA..
4.1
.1 Cofactores y coenzimas . .
4.1.2
4.1
4.1
lsoenzimas y enzimas
alostricas
.3 Clasificacin
.4 lmportancia industrial
185
186
187
187
1 88
191
Ejemplo
4.2.2
181
185
INTRODUCCION
4.1
169
glucosa
167
4.1
Determinacin de la actividad
de la enzima B-glucosidasa
Nmero de
recambio
191
192
193
vil
4.2
Ejemplo
4.2.3
recambio , .
196
4.2.3.1 pH
4.2.3.2 Temperatura
4.3
Ejemplo
4.3 MODELOS
POR
194
196
196
198
ENZTMAS
200
Ejemplo
4.4
2O4
206
4.3.1.2 ModelodeBriggs-Haldane
4,3.1.3 Simulacin del modelo
vilt
2Og
212
215
Ejemplo
4.5
Ejemplo
4.6
4.3.3
4.3.4
. . . .;.
Menten.
de Michaelis
4.3.2
2OO
217
223
225
Ejemplo
4.7 Determinacin
constantescaractersticas...
4.3.5
4.4
REACTORES
4.4.1
4.4.2
ENZIMATICOS
Reactor por
lotes
Ejemplo
sustrato
4.8 Simulacin
tapn
i....
4.9
Determinacin de la variacin de la
concentracin de sustrato con respecto
a la distancia radial para diferentes
valores d'el modulo de Thiele. Efecto
del modulo de Thiele sobre el factor
de efectividad Para Paftlculas
esfricasinmovilizadas.
4.5.7
4.5.8
234
234
de la hidrlisis del
enzimanvertasa.
Ejemplo
231
233
4.5 CATALISIS
226
".
235
239
240
242
243
245
245
246
249
252
254
PROBLEMAS
255
BIBLIOGRAFIA
259
lx
ts
5.1
263
264
Densidad de la biomasa
Etapas
del crecimiento
5.1.2
5.1 .3 Velocidad especfica
264
264
266
5.1 .1
Ejemplo
5.1
267
Velocidad de crecimiento
Perodo de replicacin
de bacterias y levaduras
5.1.6 Perlodo de replicacin de los
organismos flamentosos
5.1.4
5.1.5
5.2
269
271
27
.:. . .
..i..,.
5.2.1 Temperatura . .i.!
. . r . . .,,. . .,,
5.2.2 Energfadeactivacin. ./. . .,,
....,
5.2.3 Actividaddel agua
5.2.4 Tonicidad, osmolalidad y osmolaridad. . .
5.2.5 pH
i.....
272
272
274
275
276
278
la velocidad de crecimiento de
algunas bacterias.
lnfluencia del pH del medio sobre
la velocidad de un bioproceso
5.3,1
28O
281
282
283
283
285
246
286
286
287
5.3.2
lnfluencia de la concentracin de
biomasa sobre la velocidad especfica
de crecimiento: Modelo de Meyrath.
5.3.8 Perodo de adaptacin:
Modelo de Hinshelwood
5.3,4 Fase estacionaria: Modelo de La Motta
5.3.5 Fase de muerte microbial.
5.3.6
5.4
288
288
289
289
29O
endgeno
290
Metabolismo
289
sustrato
292
292
293
294
295
5.4.2 lnhibicin
por
producto
5.4.2.1 ModelodeHolzberg
5.4.2.2 Modelo de Ghose y Tyagi
5.4.2.3 Modelo de Jerusalimsky . .
5.4.2.4 Modelo de Bazua y Wilkie
5.4.3
5,5
Represin catablica
..
,'....'i
292
295
295
296
296
296
297
. . . 297
298
299
299
300
xt
5.6.1
5.6.2
Ejemplo
5.7
Reactor por
Ejemplo
5.3
lotes
3OB
322
de Aerobacter cloacae
lotes.
5.7.6
5.4
5.7.7Fementadoresenseriei....
5.7.8
PROBLEMAS . .
BIBLIOGRAFIA
xil
302
305
'
'
301
5.7.1
5.2
301
323
327
328
330
334
335
338
342
343
347
351
ESTERILIZACION
356
6,1 TNTRODUCCION
356
6.2.1
6.2.2
.,. , . .
357
deArrhenius....
359
362
LOTES
369
6.3 ESTERIL]ZACION
6.3.1
6.3.2
DE MICROORGANISMOS
HUMEDO.
POR
Ejemplo
6.1 Determinacin
Ejemplo
6.2 Determinacin
Ejemplo
6.3
del perlodo de
sostenimiento en una fermentacin
371
por lotes,
de la influencia del
perodo de calentamento sobre el
perodo de sostenimiento.
Determinacin de la influencia
del volumen del caldo sobre el
perfodo de sostenimiento,
374
375
370
370
376
vaPor
mediante inyeccin de
375
380
384
6.5.1
385
386
386
388
i!..,
388
xlil
6.5.3
Filtracin
388
6.6 EFICIENCIA
6.6,1
389
391
392
393
Eficiencia de fibra
Ejemplo
6,6.2
393
6.5 Espesor
de un lecho empacado
con fibras de vidrio
396
Ejemplo
398
6.6 Determinacin
de la prdida de
presin del aire en un filtro de
fibras de vidrio
399
PROBLEMAS
400
BIBLIOGRAFIA
402
FENOMENOS DE TRANSPORTE EN
BIOPROCESOS
7.1 REOLOGTADELCALDO
.....
7.1.1 FluidosNewtonianos....
7.1.2 Plsticos Bingham
7.1.3 Comportamiento pseudoplstco .,,.
7.1.4 CuerpodeCasson.. .
7.2.1
potencia i
entregada al fluido
! .:., ! ,
Evaluacin de la
7.2.1
.1
7.2.1.2
7.2.2
xlv
Dispersin de
Agitacin
.......,.
...:.
4Og
4Og
4,lO
41O
... ,i !
;....
406
4Ol
....,,,.
gases
nogaseados
406
412
413
...416
7.2.3 Agitacin
de fluidos Newtonianos
gaseados
Ejemplo
7.2.4
t.2.5
7.1
4'19
..
422
423
424
425
428
429
7.3.4
7.3.5
7.3.6
7.3.7
7.3.8
7.3.9
'
Reactoresequipadosconcamisa
Ejemplo
7.4
421
nogaseados
no Newtonianos
7.3
agitacin
7.2
Tansferencia de calor en un
reactor aerbico
...,.
431
433
434
435
435
436
437
TRANSFERENCIA DE MASA
444
7.4.1 lntroduccin
7.4.2 Determinacin
444
experimental del
coeficiente de transferencia de oxlgeno
450
7.4.2.1
7.4.3
7.4.4
450
451
452
455
457
460
462
7.4.5.1
7.4.5.2
7.3
Ejemplo
7.4.6
Dispers.in de aire en
463
7.4
Ejemplo
7.4.7
467
...r?.
paraelcultivodeteiidosanimales .
.2
Sistemas de
cultivo
468
.,. ;.
7.5 Difusin
7.4.7
de oxgeno en frascos
.2.3
7.4.7.2.4
CAMBIO DE ESCALA
7.5.1
7,5.2
7.5.3
Transferencia de
Transferencia de
Ejemplo
7.6
T..
Difusin de oxgeno a
travs de capilares
Microencapsulacin
Agitacin
480
tpicas
465
aceto'butllica,.....
7.5
462
480
481
482
482
485
487
490
4g1
calor
masa
.....
492
493
496
cambiodeescala
.i.r
498
.PROBLEMAS
502
BIBLIOGRAFIA
505
xvr
PROLOGO
salud, la
y sintticas de los microorganismos, y aplica estos conocimientos en la produccin, procesamiento y conservcin de materiales de valor econmico, mediante
agentes biolgicos tales como microorganismos, clulas, enzimas, anticuerpos
y tejidos animales y vegetales.
El presente volumen est escrto como material didctico para el curso
introductorio en lngeniera Bioqumica de la lnea de profundizacin en bioprocesos del nuevo plan curricular de lngeniera Oumica. Los estudiantes que
siguen esta lnea desarrollan normalmente su proyecto de grado en las reas de
lngeniera Ambiental, lngeniera de Alimentos o en lngeniera Bioqufmica.
xvil
con otras asignaturas del plan de estudios tales como balance de materiales,
balance de energa, termodinmica, cintica y fenmenos de transporte con el
objeto de enfatizar las analogas y aplicaciones de la lngeniera oumica en
lngeniera Bioqumica. Asf, por ejemplo, la cintica de las reacciones catalizadas
por enzimas y su aplicacin en el diseo de reactores, la seccin sobre catlisis
enzimtica en fase heterognea y el efecto de la resistencia a la transferencia
de masa, las secciones sobre agitacin, aeracin y dispersin, las secciones de
transferencia de calor y transferencia de masa, la seccin sobre difusin de
oxlgeno en cultivos de tejidos animales y la seccin sobre estrategias de
cambio de escala, demuestran al lector la aplicacin de los principios de la
lngeniera Oumica en el campo de la Biotecnologa.
La aplicacin de los lenguajes de simulacin digital constituye uno de los
aspectos ms importantes de la moderna educacin en lngenierla, La disciplina
lograda mediante el anlisis de un comportamiento complejo, de acuerdo con la
teora disponible, expresada en forma de ecuaciones matemticas, constituye
un
sistema real. Este volumen incluye varios programas, algunos en lSlM, utilizado
como ejemplo de uno de los lenguajes de simulacin continua. Sin embargo,
como su disponibilidad es bastante restringida comparada con la universalidad
de otros lenguajes como el BASlc, los ejemplos en lSlM presentados-en este
texto, excepto uno, son desarrollados simultneaente en GWBASIC, con el
objeto de confrontal estas dos herramientas de clculo, facilitar el estudio de
algunos de los modelos ms importantes en lngeniera Bioqumica y motivar al
lector hacia el desarrollo de nuevos programas.
Esta obra es fruto de la nteraccin entre el Departamento de lngeniera
Oumica y el lnstituto de Biotecnologa de la Universidad Nacionalde Colombia,
y del Seininario sobre Biotecnologa que ininterrumpidamente se ha desarrollado
desde el ao de 1983. Las diferentes llneas de investigacin del lnstituto de
Biotecnologfa
XVIII
xtx
CAPITULO
INTRODUCCION
1.1 LA CELULA
.1
.1
Entre los orgnulos est el ncleo (contiene el genoma celularJ, los mitocondrios
(sitio de sfntesis y tr'ansporte de energaf , los lisosomas {eontienen las enzimas
degradantesl,
El niio
de
GolQ
Lrgsma
-Membraa celular
Relcuro
tleliculo
end@lsnrco
ercoosmico
Svrco bucal
Mrcronceo '
N:.,r
i=
Cromosoma
Nqleo
ilt em bra na
/,z-x'
ucleat
\Qo
v(,
Vacuolas axrenttcias
Crloprqio
o'.
, t);, .
).,(fi-=
o-C)--'='
t* :fii
Tnc@lo
cloolasma
'-
M[Eri
Olostoma
cr,**--l\u,\tltl,r,
r rrrrrr,-r,,
"^.,on"t/"jrrrrr,.
o r ri fij !!*,
'
Vescula
prn6rlsca
Vacuola
o"
Vacuola
contrclil conlrct
Veslibulo.
Eslrgma de
pgreno
Grnulo de azul
Paed cella
Membrana
aloplasmrca
Flib6oms
Grnulo lrgldco
Grnuos de volulina
1.1.2
La informacin gentca
el depositario de la informaein
que
instruye a la clula sobre la disposicin correcta de sus tomos; rnolculas,
cadenas y estructuras, para convertirse en una clula completa, transmitirse de
generacin en generacin, y volver a iniciar el proceso. El ADN e una larga
Tabla
1.1
Las protenas son cadenas moleculares formadas por veinte clases de eslabones,
los aminocidos. El orden, o secuencia de los aminocidos en la cadena es
1.2
METABOLISMO MICROBIAL
La energa obtenida por la clula a partr de las sustancias nutritivas del entorno,
oife la luz solar, es utilizada en la realizacin de trabajo qufmico, en la biosfntesis de las protenas, cidos nucleicos, lfpidos, pbfisacridos y dems
componentes celulares importantes para su desarrollo y replicacin. Tarnkin se
requiere energa para la realizacin de trabajo osmtico, en el transporte de
sustancias nutritivas a travs de la membrana celular y en el trabajo mecnico
de contraccin y locomocin.
Metabolismo es el conjunto de todas las secuencias de reacciones catalizadas
ehzimticamente que ocurren en la'clufa. Cada secuencia se conoce como ruta
metablica y los productos de estas reacciones son los metabolitos. un
adecuado conocimiento de la estequiometrfa de las diferentes rutas metablicas
facilita la aplicacin del anlisis estadstico en la evaluacin de los datos
obtenidos durante el desarrollo de una fermentaci, Tsai y Lee, 1987. Algunos
subproductos del metabolismo celular tales como alcohles, cidos orgnicos
y los aminocidos, son aparentemente innecesarios para la funcin celular,
otros, como los antbitcos y enzimas extracelulares, satisfacen un propsito.
Desde el punto de vista de la Ingeniera Bioqufmica son importantes aquellas
rcciones ceJulares biolgicarnt ' ineficientes' que producen sustancias
biiiulmicas en cantidades sulieriores a lds necesidades de l clula. lnnumerables reacciones mantienen la vida'celular, en la Tabla 1.2 se presenta, a manera
de ejemplo, un resumen de la actividad biosinttica del Eschericha coli. En un
medio de crecimiento rico en nutrientes y bajo condiciones ambientales apropiadas esta bacteria tiene un ciclo de replicacin de veinte minutos, perlodo
durante elcual ocurren con gran precisin, equilibrio y productividad, numerosas
reacciones.
Tabla
1.2 Actividad
Componente
qumico
Poreentaj
de peso
geco
Peso
molecular
aproximado
Nmero de
mo1cu1as
por c1uIa
,I
2-O0O.000-000
RN
10
1.000.000
15 - 000
Protenas
70
60.000
1 .700 . 000
Lfpidos
10
1-000
15.000.000
200.000
39 - 000
Po]-igcridos
Componente
qulmieo
ittolcuIas
sintetizadae
por eegundo
0,00083
Protefnae
Lpidos
PoIi-sacridos
Porcentaj e
de Ia energra
biosinttica
total
2,5
75 .000
3,1
1.400
2.120.OO0
88,0
12 .500
87.500
3,7
65.000
2,'7
'
ARN
Moiculas
de ATP,
gintetizadas
por segundo
60.000
ADN
1.2.1
1-2,5
2'
tr
trtitffi
1.2.1.1
Gluclisis
Figura
1.2
Polisacridos
Protefnas
hexosas
aminocidos
II
Fasel
il
pentosas
1t
lt
gliceraldehldo
3-fosfato
rt
fosfoenolpiruvato
Fase ll
Itr
piruvato
1l
Fase
lll
llr
tt
fumarato
succinatc
CO,
t1 .11
Figura
1.3
tg87)
ATP
t2t
glucosa
glucosa 6-P
=...--
fructosa 6-P
ADP
ATP
dihidroxiacetona 1-P
(s)
fructosa
1,6-P2
NAD*
ADP
(6)
gliceraldehdo 3-P
glicerato
1,3-P2
NADH
HT
(9)
fosfoenol
piruvato
H2O
glicerato
2-P
ADP
110)
ATP
10
prruvato
glicerato 3-P
Figura
1.4
Smbolos: P, fosfato. Las enzimas que actan en la ruta del fosfato pentosa
son: (1) hexoquinasa, (2) glucosa 6 fosfato deshidrogenasa, (3) fosfogluconato
deshidrogenasa, (41 isomerasa, (51 epimerasa, (6) transquetolasa, (7)transaldolasa, (81 transquetolasa. (Ratledge, 1987)
NADP
(1)
glucosa
glucosa 6-P
ribosa 5-P
ribulosa 5-P
gluconato 6-P
xilulosa 5-P
fructosa 6-P
eritrosa 4-P
piruvato
11
1.2.1.2
Respiracin
13
Tabla
i .
1.3
Reductor
Oxidante Poductos
H2
02
'
(SO4)'?-
H2
Compuestos O,
orgnicos
, i'.
Oz '
NH,
,,
9rganlsmo
Hro
:"hidrgeno
HrO
+ 52-
,QO,
Desulfovibrlo
ltrrO
(NOr) - + HrO
Muchas bacEerias
todas 1as plant.as
y animales
ij
I ,
::i
Bacterias .''
ni,trifipant.es
ir,r,,
..,j
(NO;)- '
O,
CompuesEos (NO3)
orgnicos
(NO3);-:'
t.
+ fLO
N, + CO,
Bacterias
denitrificantes
:.
(Fe)
2t
02
Baeterias
nitrif icanEes ';.. "'
1Fe)'*
- i-
FerrobaciTLus
(bacteria del
hierro)
s2-
02
(so{)'?- +
Hro,
rhiobaciflus
,(bgceeria de1
a.zufre)
ii
En los organismos que se desarrollan con acetato, como nica fuente carbona-
da, entra en juego la derivacin del acido glioxflico (lfnea a trazos de la Figura
y otros
1 .6), una variante del ciclo del cido tricarboxflico, formndose succinato
'Muchas
para
ruta
de
otra
disponen
clulas
intermediarios, a partir de acetato.
receptor
degradar glucosa, conocida como ruta del foSfogluconato, El
electrnico de estas reacciones es el nicotinamid-adenfn-dinucletido-fosfato,
NADP. Su forma reducida el NADPH, es uno de los principales reductores en
la sfntesis de molculas ricas en hidrgeno tales como los cidos grasos y el
colesterol.
fosfoenolpiruvato
--->
azcares
ATP
(13)
malato
(10)
aconitrato
oxal-
acetato
(3)
NADH
I
(1 1
fumarato
FADI I
isocitrato
NADH
CO,
Co-A
","",1',,,i1o'[
t7t
succinilCo-A
l(6)
NAD*
15
Las,enzimas que intervienen en el ciclo del cido tricarboxlico son; (1) citrqto
E = Eo
R'T ,nlox'l
n.F
t1.31
lred.l
Donde, Eo, es una constante especal para un sistema dado, conocida como
potencial de electrodo patrn, o fuerza electromotriz patrn; R : 8,314
J.(mol.K)-1: constante de los gases; F:96,485 kJ.(mol.V)'l: constante de
Faraday; r: temperatura absoluta, Ki lox.l y lred.l: concentraciones de las
formas oxidada y reducida del sistema
Un electrodo sumergido en una solucin de un sistema OR forma lo que se
conoce como semipila, cuya diferencia de potencial es imposible de medir, ya
que se trata de un electrodo simple. Para medirla se combina con otra semipila,
obtenindose entonces una pila completa. La diferencia de potencial entre
ambas semipilas se mide con un potencimetro.
En la determinacin del potencial de electrodo de un compuesto se requiere un
electrodo de hidrgeno como patrn de referencia cuyo potencial es arbitrariamente definido como cero. En lugar del electrodo de hidrgeno puede
utilizarse un electrodo de construccin ms sencilla, como el de calomelano,
cuya diferencia de potencial con relacin a la semipila de hidrgeno se conoce
exactamente,
Por consiguiente hay necesidad de definir un nuevo smbolo: En, donde h indica
que elelectrodo de comparacin ha sido calibrado con respecto al de hidrgeno:
En=E'Es
I1.41
E=Eo.yr:*+H
t1.51
"t7
El valor.de E^ vara de acuerdo con el valor de la relacin entre las concentracones de la forma oxidada y la forma reducida. Cuando estas concentraciones son
iguales: E
Eo.
E=
[1,6]
.
(n.F.AE)) =
- n.T.ln K,
11.7t
LG; =
n.F.A,E',
t1.81
^G;=^GA-^G;2
t1.91
- Reacciones cido-base:
Donane de Ptonnes
(===)
tl.101
+ Aceptanfc de protorus
- Reacciones de oxido-reduccin:
tl.11I
e-
+ Acepttre de electrones
mediante el
potencial de reduccin estndar, definido como la fuerza electromotriz, en
Voltios, suministrada por un electrodo en una disolucin de un reductor y de su
oxidante conjugado, cuando la concentracin de ambos es 1 M, a 25oC y pH
7,O.
En la Tabla 1.4 se presenta un resumen de los potenciales de oxirreduccin de
algunas reacciones bioqumicas. En esta Tabla se observa que et acetaldehdo
tiene una tendencia muy alta a perder electrones y oxidarse hasta cido actico,
mientras que el agua tiene muy poca tendencia a perder electrones y formar
oxfgeno molecular,
Cualquier sistema Or? puede ser oxidado por un sistema ms positivo, esto es,
situado en una posicin ms baja en la escala, Debe tenerse presente que frecuentemente se requiere un catalizador con el propsito de lograr una reaccin
entre ambos sistemas. La mayora de los pares electrnicos que ingresan a la
cadena respratoria proviene de algunas enzimas conocidas como deshidrogenasas ligadas a la piridina, catalizadoras de las siguientes reacciones generales:
19
(===)
a1.12)
t1'13I
s'ustrato oxidado + NADPH +
H'
''';i
;-
Tabla
1.4
Reaccin
+ 2H* + 2e ->
zH.',
'2e
!..
ferredoxina- Fe*3
piruvato
-> acetaldehfdo
1e
2H*
+ 2e-->
electrones
- O,7O
-
0;60
H*+1e--)O,5H,
CO,
Direccin
flrjo
- 0,42
formato
co-A
"
+ 2H' + 2e--> malato
- 0,42
- o,41
piruvato + CO,
-.9,33
Contina
20
acetaldehdo
NADPT
+ 2H* + 2e -->
NAD*
+ 2H* + 2e -->
2H*
piruvato +
H-
oxaloacetato
r;,;,j*r.,""
+ 2H* + 2 e-->
+ 2H* + 2e--)
ubiquinona + .?H.
crotonil-Co-A
-i*,o
malato
-,.o.32
ubiquinona-H,
+ 2 H* + 2e ->
butiril-Co-A
o,14
- 0,102
-
succinato
+ 2e -->
63
- 0,19
FADH2
+ 2H* + 2e -->
O,1
0,06
+ 0,03
+ 0,10
+ 0,19
citocromo c-Fe*3
1e
->
citocromo c-Fe*2
. + 0,25
citocromo a-Fe*3
1e
->
citocromo a-Fe*2
+ p,29
:1'
+ 1 e-->
O,5 02
Direccin
flujo
electrones
- o,32
fumarato
+ 2E--> NADH + H*
o-cetosrutarato r
FAD
etanol
NADPH
,Eo'.
pH: 7,0
Voltios
Fe*2
+ 2H* + 2e --)
HrO
+ 0,30
+
O,771
O,816
21
ferroprotenas responsables de la transferencia de electrones en las clulas aerobias, actan secuencialmente en el transporte de electrones desde la coenzima
O hasta el oxgeno molecular. Todos los componentes de la cadena respiratoria
aceptan electrones de los compuestos precedentes en la cadena y los transfieren al siguiente eslabn.
22
Tabla
PRODUCTO
MICROORGANISMO USOS
Butanolacetona
Clostrdium
acetobutylicun
y otros
qumica
2,3 Butanodiol
Bacillus polimixa,
Ent. aerogenes
Solvente, fiumectante,
intermediario qumico
Micrococcus
Adtivo de alimentos
Lisina
Solventes, manufactura
glutamicus
Dihidroxiacetona
G. suboxydans
Acido lctico
Lactobacillus
delbruecckii
Amilasa
bacteriana
Bacillus subtilis
Modificador de almidones,
encolado de papel, desencolado de textiles
Proteasa
bacteriana
B. subtilis
23
Tabla
1.5
Continuacin
PRODUCTO
MICRORGANISMO
usos
Dextrn
L.mesenteroides
Estabilizador de almentos,
sustituto del plasma sanguneo
Sorbosa
G.suboxydans
Cobalamina
olivaceus; Propioni'
bacterium freuden-
reichii
Tratamiento de la anemia
perniciosa; suplemento
alimenticio
Acido
glutmco
Brevibaterium sg.
Aditivo de alimentos
Estreptoquinasaestreptodornasa
Streptococcus
Disolvente de cogulos
sanguneos
Tabla
S.
hemolyticus
PRODUCTO
MCROORGANISMO
Acido ctrico
Aspergillus niger
A.wentii
usos
Productos alimenticios, citratos medicinales, en sangre
p'ara transfusiones
Acido fumrico
Rhizopus nigricans
Acido
glucnico
A.niger
Acido
itacnico
24
A. terreus
Tabla
1.6
Continuacin
USOS
PRODUCTO
MICROORGANISMO
Pectinasas
A.
1-y-hidroxiprogesterona
R. Arrhizus, Rhizopus
nigricans, olros
Acido
giberlico
Acido lctico
R. orizae
Tabla
1.7
wentii
A. aurcus
Agentes clarificantes en la
industra de jugos de frutas
Alimentos y productos
farmacuticos
ANTIBIOTICO
DERIVACION
ESPECTRO
MODO DE
PRODUCIDO
MICROBIANA
PRIMARIO
ACCTON
Ampicilina
Penicillium sp
Bacterias gram
positivas y
gramnegativas
lnhibe sfntesis
de la pared
celular
Streptomyces
nodosus
Varias micosis
causadas por
hongos
lnterfiere la
funcin de la
Bacillus
Bacterias
subtilis
grampositivas
lnhibe sntesis
de la pared celular
S. halstedii
Rickettsias,
bacterias
grampositivas
Amfotricina
Bacitracina
Carbomicina
(Magnamicina)
membrana
lnhibe la
sntess de
protefnas
Cqntina
25
ANTIBIOTICO
DERVACION
ESPECTRO
MODO DE
PRODUCIDO
MICROBIANA
PRIMARIO
ACCTON
Cefalosporina C
Cephalosporium
Bacterias
lnhibe sntess
sp.
grampositivas
de la pared
celular
Cloramfenicol
(Cloromicetina)
S. venezuelae
Amplio
espectro
lnterfiere
sntesis de
protefnas
Clortetraciclina
(Aureomicna)
s_
Amplio
espectro
lnterfiere
sfntesis de
protenas
Colistn
B. colistinus
Pseudomonas
spp.
Deteriora la
aureofaciens
(Colimicina)
membrana
celular
Cicloheximida
(actidiona)
S. griseus
Hongos,
lnhibe sfntesis
especialmente
micosis de las
o" ,ro.r=tn".
.
plantas,*'Cicloserina
Dimetil
S.orchidaceus,
S. lavendulae
Mycobacterium
tuberculosis
lnhibe sntgsis
de la pared
celular
S. aureofaciens
Amplio
espectro
lnterfiere la
sfntesis de
protenas
tetraciclina
mutant
Eritromicina
(lloticina)
S. erythraeus,
Fumagilina
Aspergillus
fumigatus
(Amebacilina)
Rickettsias,
bacterias
grampositivas
Amebas
,'
lnterfiere la
sfntesis de
protenas
lnterfiere la
sntesis de
protenas
Contina
26
ANTIBIOTICO
DERIVACON
ESPECTRO
MODO DE
PRODUCIDO
MICHOBIANA
PRIMARIO
ACCrOr
Griseofulvina
Streptomyces
griseus
Hongos
patgenos
lnterfiere la
sfntesis de la
pared celular
del hongo y del
cido nucleico
Kanamicina
J.
kanomyceticus
Myco-
lnduce slntesis
de protenas
anormales
bacterium
tuberculosis
Bacterias
Lincomicina
grampositvas
Meticilina
lnhibe slntesis
de protenas
Estafilococos'
lnhibe sntess
de la.pared
celular
Bacterias gram
positivas y
gramnegativas; M. tuberculosis
lnduce sntesis
de protenas
anormales
Bacterias
lnhibe
polimerizacin
Neomicina
S. fradiae
Novobiocina
(Catomicina)
S. griseus;
S. niveus
S.,spheroides
grampositivas
S. noursei
Candida
Daa la
intestinal;
hongos
membrana
celular
Rickettsias;
bacterias
grampositivas
lnhibe
sntesis de
protenas
Nistatina
Oleandomicina
s.
Antibioticus
del
ADN
Contina
27
t
ANTIBIOT]CO,
DERIVACION
ESPECT8O
MoDooE
PRODUCIDO
MICROBIANA
PRIMARIO
ACCTON
Oxitetrocielina
S. rimosus
Amplio
espectro
(terramicinal'
Penicllina G
Polimixina B.
Estreptomoia,
'
Vancornicina
BacteriaS"'
grampositivas
lnhibe sntess
de la pared
celular
B. polymixa
Bacterias'"
gramnegativas
Deteiioi la
pared celular
Bacterias gram
lnduce i'
positivas y
protefnas
gramnegatvasi M.
tuberclo:si
anormales
S,
griseus
i'
S. aureofaciens
S. oEntalis
Amplio
espectro
Bactdrias
grampostvas
Neisseria,
tetani('
Cl.
Viomicina
28
lnterfiere la
sntesis de
protenas
chrysogemtm
P.
-{.1
Tetraciclina
,'
S. floridae
lnterfiere la
sntesis de
protenas
lnhibe "
sntesis de
la pared
celular
M.
lnterfiere la
tuberculosis
slntesis de
protefnas
1.4 CONSIDERACONES
Generalmente
etapas:
Breparaci d materias primas; sterlizacin del e@po, del medio de fermentaiOn y dei aire; biosntesis; sfraracirt y'Puificacih O" los pioducios di la
fermentaCin; tratamiento de agua para consumo; tratamento de aguas
residuales, y tratamiento de los residuos slidos y del aire efluente de la planta.
biomolculas susceptbles de degradarse en la etapa de separacin y purificacin, La baja concentracin de producto en el efluente del reactor y la naturaleza
el
y por consiguiente,
29
1.4.1
El biocatalizador
bioqufmica facilitan
la utilizacin de
de las materas primas en productos tiles slo requiere una o dos reacciones
simples. Se prefieren enzimas solubles, si no son costosas o no es necesaria su
remocin del producto final, como en el caso de la hidrlisis del almidn con o
amilasa y glucoamilasa. En el caso contrario se prefiere la utilizacin de enzimas
inmovilizadas,
La poblacin celular se mantiene en estado de crecimiento cuando el producto
deseado es biomasa, como en el caso de produccin de levadura de panadera
o de protelna unicelular, o cuaQdo el producto es extracelular o cuando la forma-
30
- Las clulas de tejldos animales y vegetales son de mayor tamao que las
clulas de bacterias y hongos.
El metabolismo de las clulas animales y vegetales es ms complejo y lento
que el de las clulas microbiales, lo cual se traduce en una menor productividad
31
- .?
'
32
1.4.3
El biorreactor
pH,
intensidad ionica y presin, pero estas condiciones deben controlarse cuidadosamente para prevenir daos en las clulas vivas y dems componentes lbiles
esencales para el Proceso.
Por
prolongados perodos de
retencin.
- La necesidad de mantener un solo tipo de microorganismo y eliminar todos los
microorganismos indeseables impone restricciones adicionales al diseo del
reactor.
33
o multisustrato.
,o
discontinua ldCSTRl. Tambin son muy utilizados los reactores de lecho fijo en
diferentes configuraciones tales como lecho empacado, el reactor con lecho
formado por placas o lminas y el disco rotatorio.
Los reactores impulsados por aire " airlift" utilizan aire para satisfacer la demanda
Los reactores de lecho fijo y los de flujo tapn (PFB) son apropiados para
aquellas reacciones inhibidas por la formacin de producto. Los reactores
agitados mantienen una concentracin uniforme de sustrato y son apropiados
para aquellas reacciones inhibidas por sustrato.
Los reactores pueden ser operados en for'ma contnua o por lotes y como lechos
fijos, lechos fluidizados y tanques agitados. Los reactores operados en rnodo
continuo conducen a una mayor productividad y a una utilzacin ms eficiente
34
formacin de producto.
1.4.4
Esterilizacin
1.4.4.1
Esterlzacin de equipo
35
1.4.4.2
Esterilizacin de medios
En
36
37
1.4.5
38
y purificacin
se fundamenta
39
entre la membrana
los restos celulares mediante una o varias de las siguientes operaciones unitarias: centrfugacin, microfiltracin, ultrafiltracin, destilacin y filtracin (filtro
rotatorio, filtro prensa). Si el producto es soluble se recupera del efluente de la
centrfuga o delfiltrado. Si el producto es insoluble generalmente hay necesidad
de resuspender y centrifugar repetidamente la fase pesada. Cuando no es
Suficiente el lavado con agua se emplean detergentes en Solucin para remover
simultneamente otros contaminantes.
Las etapas de purificacin depbnden del grado de pureza requerido. Generalmente los productos'farmacuticos requieren alta pureza. En otros casos la
purificacin final se lmita a un secado o a una remo6in de solventes'
a travs de membranas
41
42
1.5
1.5.1
El procedimiento de formulacin
43
Expresar:
una
44
1.5.2
45
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Aerstin, F., Street, G., (1978). Applied Chemical Process Design, plenum press,
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Rase, H.
il:
Case
50
51
-t
CAPITULO 2
BALANCE DE MATERIALES
y de los
,<
2.1
2.1, es:
(velocidad de actmulacin de componente i) = (velocidad de entrada de i al
sstema) - (velocidad de salida de i del sistema) + (velocidad de generacin de
... a2.11
componente il - (velocidad de consumo de componente i)
Figura
2.1
Blomosq
Fuente de corbono
Pnoducto
cu2
0xigeno
sistema)
-.-12-31
53
-r
2.2
BALANCE DE ETEMENTOS.OUIMICOS
2.2.1
'r
Las siguiente ecuacin, vlida para medios mnimos, donde.la fuente de carbono
As+AOz=Lr+ACO2+Lp
12.4'l
t2.s1
..:-
1ds
v,=;e
12.61
1 doz
..
lro" =
; dt
54
fz.7.l
.r
Donde, plOzi: velocidad especlfica de consumo de oxfgeno, (mol Or).(mol
clulas.hora)-1
1dx
,r=;A
Donde,
t2.81
1
;
dCOz
t2.91
d,
1do
pr=i
Donde,
/r:
12.101
clulas. hora)-1.
2.2.2
.t lo, = l * Vco, +
Fe
12.111
12.121
Donde, os, oy, o, opi carbono en el ustrato,'en las clulas, en el CO, y en los
55
t2.131
Donde,4: oxfgeno requerido para la combustin del sustrato hasta CO, HrO y
NH, si el sustrato contiene nitrgeno. mol O./mol sustrato; 8: oxlgeno requerido
para la combustin de las clulas:,secas hasta CO2, H2O y NH3, mol Orlmol
clulas; C: oxlgeno requerido para la combustn de los productos hasta COr,
H! y NH., si los productos contienen nitrgeno, mol Orlmol producto,
La Ecuacin t2.131 es tilpara conocer un cociente metablico no determinado
xperimentalmente, Por ejemplo, puede calcularse la velocidad de consumo de
Ejemplo
lx
en una fermentacin
anaeroba
agua,
CH1,e4Oo,2eNo,2E.
Solucin:
bNHr:
cCH,,roOo,rnNo,r,
dCH3CHTOH
+ eCO2 + f H2O
da
ms 7gg&- not
T6tuo
dla W s 1000 linos s O,W kg
d
56
,,, .
: i -
tr
iai
,, _---_t
.,
C:
H:
O:
N:
Y-
'
6a: c+zd+e
12a+ 3b:1,94c+6d+2f
6a=O,29c+d +2e+f
b:0,25c
b : 1,839 mol amonfaco/s
c:7,356mo1 clulas/s
e : 2,644 mol COrls
. ''lr
L'
'/
57
2'3'1
El grado de reduccin de un
compu
ae#fjtrefumO el nmero de
equivalentes de#trones disponibles
por consgu,"^i", .,
dB#
,"
frmula elementar de un compuesto es : c"HnooNn,,,entonces
,
Nu
El
gradodo,r.e&rccisry
er nmero de
Nro, es:
f,
12.141
))"
12.151
disponibles
*-I, J
t2.16I
58
r
El CO2 obtenido a partir del sustrato en el crecimiento anaerobio, sin la presencia
aparente de un aceptante de los electrones, eS por lo menos formalmente, el
Qs.Is =
0.I* * XQr,'L, I
f2.171
Donde, Oo,: velocidad de flujo de producto i; mol.s-l; l-0,: grado de reduccin del
i-simo producto, en (mol electrn disponibfe).(mol producto il1.
Los eiectrones nO conservados en la biomar. ,on transferidOs al aceptante de
electrones:
0 = Os-Is
- 0*.I*
12'181
2-3.3
y el aceptante de los
Ecuacin de crecimiento
, clula, las sustancias nutritvas particu-lares, los sustratos utlizados como fuente
de carbono o de energa, y los pro.ductos del metabolismo:
CHr"O',!{o, + o 02 1
Y' 4rC II t p o,N n,
a NII1
t2-191
i
I
+wH2O+cCO2
59
+
c: coefcientes estequomtrcos para 02, Nl-{r, biomasa, el i-simo producto,
agua y COr, respectivamente; hs, 05, n": tomos de hidrgeno, oxfgeno y
nitrgeno en el sustrato; h, o, flr tomos de hidrgeno, oxgeno y nitrgeno
en las.clulas; ho, ori, ne: tomos de hidrgeno, oxgeno y nitrgeno en el isimo
producto. El superndice c en los factores de rendimiento de sustrato en
1=Y'fls+EY'r{s+c
t2.20t
f2.211
rs=4*s-2.or-3.n,
12.221
I =4+hx-2.o*-3.n*
12.231
o1 =
4 a hpi -
2.oo
3.noi
12.24)
12.251
60
*
abundante y diflcil de medir experimentalmente. En el caso de las fermentaciones aerobias, generalmente Y"pirs es cero, y en el de fermentaciones anaerobias,
o =.0.
An en estos casos, quedan cuatro incgnitas de inters y solo tres ecuaciones
para relaconarlas. Una posible solucin de este problema requiere la determinacin experimental de Y"s, l partr de la representacin grfica de los datos del
carbono celular sintetizado en funcin del carbono en el sustrato consumido.
Otra posible solucin es la determinacin de Y"s, a partir de datos de la
bioqumica molecular.
sustrato, (Lynd,
1'989):
1=Y'fls+EY"rs+f"
12.261
f,G.^o = :-
'dAt?
- :, *
'ptlAT?
12,271
61
Eiemplo
2.2
",,
62
La
C,f~O& + 6 0 2 .+ 36 ADP
3Q P "" 6 C02
38 ATP
siguiente~
44 H2 0
[2.291
GATP =
38 mol ATP
mol glu.
mol glu. cataboliwda 6 mol e
6,33(0,404)
= O, 719 mol e en cl .
1 . + 6,33(0,404)
mol e en'. sustrato
.
. .~Glucos
'>-. a .: .e
-2=4
"
..
Oxgeno:
0 2
r<Ol 2
-2 (2)
= -
1=Y\
- Balance
d~
15
+e=0,719 +e ;e:::
0,2~1
~
nitrgeno, (Ecuacin 2. 21 ):
a=" YXJsnx = 0,719(0,25) = 0,18
63
_,*_=+
0,281,COz
...12.
C6H,2O6
.Ejemplo
1,05 O,
2.3
CH1.s4Oo,3No,r,
2 mol ATP
mol glu. catabozada
mol ATP
mol C
64
'
0'3flg.(0'404)
Y",
#' =
1
+ 0,3ff1.(O,M)
=0.119
wol C cl
t@l C swfrcto
Una forrna de la E
[2.30], expresada con la notacn de la Ecuacin
t2.191, sobre la base de 1 mol de C, es:
CHrO + a,NH3
Y"ro CH1,e4Oo,3No.r,
Y9evs
CH3Oo,s
cCO,
..,(11
- Grado de reduccin:
Glucsa
fs:4 *2-2=4.
CH,O
Celul CH1,s4Oo.3No,;s
Etanol
fo:4+a-0,1,{2) :'6:
CH3Oo,s
tl
de-
balance de C:
: '"*[il l:'
+ Y"pirs.(6
'
-
0,305
cHro + o,o298NH.
b,ttgcH1,;4oo,3N,25
CO2
...12t_
65
'_:--7
- La forma final de la ecuacin de crecimiento se obtiene mediante la multiplicacin de la Ecuacin l2l por el nmero de tomos de carbono en el sustrato:
__
cor-+i2o6
+ 0,17g NH. =
o,714cH1,e4oc,3N o,ru
+ ycrHuoH
+
|||||||||||||||||||||||||
|||||||||||||||||||||||||
|||||||||||||||||||||||||
|||||||||||||||||||||||||
|||||||||||||||||||||||||
|||||||||||||||||||||||||
|||||||||||||||||||||||||
|||||||||||||||||||||||||
?-
2.4
__
ro,
|||||||||||||||||||||||||
nt
|||||||||||||||||||||||||
|||||||||||||||||||||||||
nZ(
Los anlisis de clulas realizados con tcnicas estandarizadas de microcombustin demuestran que no hay una frmula nica para un microorganismo. En la
Tabla 2.1 se muestra como slo 22, de los aproximadamente 100 elementos
qumicos hallados en la corteza terrestre, son componentes esenciales de los
organismos. Los ltimos 6 elementos (& Al, V, Ma, l, Sr) de la Tabla 2.1 , son
esenciales slo para certas especies. Adems, la distribucin de elementos en
los organismos yivos, en la litosfera, y en la atmsfera, es diferente. En la Tabla
2.2 se presenta la composicin elemental de la bacteria Escherichia coli.
El carbono es un elemento gue por su versatilidad para ligarse covalentemente
con otros elementos y formar enlaces simples, dobles y triples, ocupa una
posicin fundamental en la qulmica de los seres vivientes. El carbono al unirse
con otros tomos de carbono forma los esqueletgs lineales, ramificados y
cclicos de las biomo!culas. La asimetra producida por la unin de un to4o de
carbono con cuatro grupos funcionales diferentes tiene consecuencias
biolgicas. En la mayora de las reacciones, altamente especfficas, solo puede
utlizarse un estereoismero del compuesto. El mismo grado de especificidad
de una reaccin se aplica a los ismeros crs y trans que pueden existir en las
biomolculas con enlaces dobles entre carbono y carbono. lArmstrong,
983).
66
rz
fubv\rr()u
-+ '4
*C [i1"-'\1
g(t.c
Tabla 2.2
Composicin
Elemento
,'H
Carbono
Oxfgeno
Nitrgeno
Hidrgeno
Fsforo
Azufre
Potasio
Iones monoat.micos:
Na., K-,
Nlg'-
Ca'-
--?
CI
peso 6eco
50
20
1,4
3
1
1
'1
Sodio
Calcio
ELement,os que se
or5
o,5
Magnesio
encuenEran en Erazas:
Cloro
O,5
Hierro
o,2
o,3
Ot.ros
Zn
B, Al-, v, Mo, I, Si
1973)
:,
Elemento
Bacterias
Fsforo
Azufre
Potasio
2,0
0,2
1, 0
0,1
0,5
Magnesio
Sodio
Calcio
Hierro
Cobre
Manganeso
Molibdeno
Ceniza total
3,0
1,0
-. 4,5
- o,s
- 1,0
0,01 - 1,1
0,02 - 0,2
0,01 - 0,02
0,4
0,1
0'2
0,1
0
,02
0,1
0,1
o, 001- o, o1
-7
-2t
Levaduras
Hongos
2'
4,5
0,5
2,5
0,3
0,5
L,4
0,2
0., 1
0; 01
0,002 0, 0005 q, oool 0,8
0,
1,
0,
0,
01
00
10
01
2,6
0,24
4,0
0,5
0,1
0,3
0,5
0,01
0,007
0,0002
-L0
67
y Mavituna, 19831.
M'cioorganismo Sustrato
limitativo
Bacteria
(1
p
h-1
Bacteria
Frmula qumica
emplrica".
K.
aerogenes
Glicerol
0,
K.
aerogenes
Glicerol
0,.85
2A,7
cH2No,25Oo 5 '
25,5
L'.
cH1,78No 24Oo,33
22,5
cH1,74No,22Oo,43
23,7
cH1,73N0,240o.43
24,O
Leyadura (3)
cHr,66No,13Oo40
Levadura
cHl,7sNo,r 5Oo,s
,(4)
'-.:Candida utitis
Levadura
'1i
cH1,66No'2Oo,27
'
Aerobacter l2l
aerogenes
23,5
23,9
26,9
't-"Gu"o."
0,08
GH1"B2No,;eOo.47
24,O
Candida
utilis
Glucosa
o,45
CH,';oNo,rOo,r.
25,6
Candida
utilis
Etanol
o,06
cH1,82No,1sOo,46
23,9
Candida
utils
'Etanol
0,43
cH,,3aN6,2Oe,55
25.5
Observaciones:.
(f):
68
Eiemplo
2.4
Determinacin de la composicin de un
-1
microorganismo
l'1.
lJ
'i) U.
es:
CH1,s36Oo.2erNo,rr,,
u-l^
Tabta
2.5
Eemplo 2.4.
o/o
Eiemento.
c:
'
v.
PGSo SeCo.,
49,3
moles/mol C
moles/100 g
+10
1,21
0,295
14,5.
1,O3
o,251
8,0
7,94
1,936
3,3
0,1_1
i'/
',:
19,4
,
N.
:
s
.1,:2
1,1
0,03
0,6
0,o3
Na
0,04
'o,o27
9,76.1
'
0:3
7,32,10'3
7,32.10'3
2,44.7;3
Ca
0,6
Mg
0,5
o,o2
4,88.10'3
ct
0,5
0,01
2,44.1o-3
Otros
'1,0
-l-
69
2.5
FACTORES DE RENDIMIENTO:
2.5.1 Rendimiento
de sustrato en bomasa
tYyo= - ^
'
ts
_&
ds
f2.311
dt
Donde, Yr,.: factor de rendimiento de sustrato en bomasa r*, rr: verocidades de
formacin de biomasa y consumo-de sustrato, respeetivamente, g.(litro.hl-r; t
s: concentraciones de biomasa y de sustrato, respectivamente, g.litro-1.
2.5.2 Rendimiento
de oxgeno en bomasa
70
dx
v_l
txlo
'ro-
t.,
__
dt
do
f2.32'l
dr
2.5.3 Rendimiento
de electrones en bomasa
v.r, -MrQ*
-
I"
t2.331
O,
2.5.4
En la Tabla
el
71
Ejemplo
2.5
72
Tabla
2'6
e)
Yxrs
Yr.
Yro
YxE
glg.c
glg
glg.c
1, 03
3,11
3,67
3,77
3,00
Organismo
Sustrato
glg
g/mol
Aerobacter
Maltosa
Manitol
Fructoaa
749,2
95,5
75,1
72 ,7
g1,g
7,28
1,50
1g
7,46
1,11
L,32
77,1,
1, 08
L,
Candida
Glucosa
0,45
0,52
0,42
0 ,40
0,51
PeniciTlium
Gl-ucosa
o,43
Pseudomonas
Glucosa
0,38 68,4
Rhodopseudo- Gfucosa
0,45 91,0
1,!2
!,46
3,37
s0
4,35
0,25
0 ,45
0,18
o,20
0, 18
90, 0
L,25
3,75
53,2
29,7
4L,8
75,6
77,g
10, 5
,62
,75'
0 ,46
o ,49
0,43
0,9:l
0, gg
0,62
0,97
0,37
0,48
0,31
aerogenes
Glucosa
ut.iTis
chrysogenum
f l-uorescens
monas
1,32
1, 05
1, 01
,95
L,
35
3,92
3
,22
0.95 2,93
spheroides
S..,cerevisiae
Glucosa
Aerobacter
Ribosa
Succinato
aerogenes
GIicerol
IJactato
Piruvato
Acet,ato
0,
0, 88
0
1
,66
2,L2
2,gg
1,39
7,79
1,31
2
Contina
73
Tabla
2.6
Continuacin
Yr.
Yo"
Yo"
Yro
Yrr.
g/mol
glg.c
g/g
g/g.e
0,70 2,62
Organismo
Sustrato
glg
Candida
Acetato
0,35 2L,0
0, 90
Pseudomonas
Acetato
,28 L6 ,8
,49 22 ,5
0.,69, 3L,2
0,70
0, 93
1,30
Kl.ebsieLLa Metanof
0,38
]-2,2
1, 01
0,
MethyTomonas Metanolsp.
'0,'4.9
,4
1,,28
0,53. 2,3
Pseudomonas Metanol
sp.
0,4L 13;1
1, 09
o,44 2,lg
MethyTococcus sp.
1,
,34
o,29 2,02
utfis
f-Zuorescens
Etanol-
ntanoI.,
Candida
uti-Lis
sp.
Metano
0
o
15
01 L6,2
,46
2 ,1,0
. 0,42 7,P7
.0,51 2,60
56 2,03
Pseudomonas Metano
sp.
0,80 72,9
1, 06
0,2a 1,60
s eudomona s Metano
sp.
0,50
9,6
0,80
0,
Pseudomonas
0,s5
9,0
0,75
o,77 I,L2
methanica
Metano
19
,-
Ejemplo
2.6
,20
t__t ,, \
calcular los factores de rendimiento en el crecimiento aerobio de Saccharomyces cerevisiae en glucosa y comparar los valores obtenidos con los
correspondientes datos de la Tabla 2.6.
Solucin:
74
: i ='
uH,rO,
kJ
v =rxlo
Yxto
=H, tfft
tt
Tabla 2.6:
2.5.5
Yxr
24
3,75 g clle
dP
dt
y_.=_rr.=_
rt
rs
ds
e.g4l
dt
Donde, rr, r.: velocidades de sntesis de productoo y de consumo de sustrato,
respectivamente, g.(litro.hora)-1 ;s, p: concentracin del sustrato y del producto,
respectivamente, g.litro-1. La evaluacin de Yr,", basada en la estequiometra de
en producto
,,=R+-
12.35t
o"'4
(Yil*- or.4
76
t2.36I
,o
a-alcanos
Etanol
Glucosa
Acido cltrico
Polisacridos
Acido ctco
4,55
Lisina
2,23
2,77
1,96
1,96
1,36
1,42
1,00
1,00
0,70
3,21
3,21
0,66
Estreptomcna
Etanol
Triglicridos
1,64
1,18
..,
0,51
o,72
0,37
Ejemplo
2.7
77
Solucin:
192 glmol
- Sustrato: Etanol:
Peso
C2H6O
molecular:
46 g/mol
: [4. (2) +
- 2lt2 :6
1"12. 1211146 : 0,522
G
2.5.7 coeficiente
: 2,78l9 acido)/{g
etanot}
tas
78
P"="*{"u,
1
2.371
2.5.8
u"={t*Y*'F*
t2.38I
2.5.9
7g
Fo=mo*
{rr.u,
t2.391
Donde,I/o = velocidad especffica de demanda de oxgeno, (mol Or).(g cl.hora)'; mo: coeficiente de mantenimiento (mol Or).(g cl,hora)-1; (Y,,o)u: coeficiente
de rendimiento verdadero del oxgeno, (g cl)/(mol Orl; tty: velocidad especfica
de crecimiento de biomasa, hora-1 ,
2.6
de
de
80
020 3, 93
0, 0s5 4 ,70
0, 095 4 ,75
0,115 4,L4
0, 119 2 ,92
0,
0, 10
o,02
0, 06
,54
2 ,59
0
t l0zl
0,4t4 19,5
0,49t 4l.,5
0,498 63,9
0,462 77 ,8
0 ,422 80 ,7
ttl0,02l Ct
11,
l_
23 ,8
,9
38,2
38,3
32
0,56
0,54
0,5L
0 ,49
0 ,47
o/o
C en '
clulas
(base secal
50,05
49,29
49,70
48 ,98
49 ,9a
Donde;
Determinar:
81
- Balance de carbono
- En la Tabla 2.9 se presentan los resultados del balance de carbono, evaluados
segn la Ecuacin f2.12):
'
,'
c.Fco2
+ up.pp
(1)
Donde, os, oy, os, op; Contenido de C, en sustrato, clulas, CO, y producto,
respectivamente, g Clmol; lts, lte, UlCOrl: velocidad especlfica de consumo de
sustrato, de formacin de producto y de produccin de cor, respectivamente;
mmol/g cl.h; p, : D: velocdad especffic de crecimiento de biomasa y
velocidad de dilucin, respectivamente, h-1.
0,115
h-1:
Pr=;l As
Af =;(s,-r.1,
1
Fs
(10
lttTo
ls = 5,65
mmol etanol
ct.h
:)
os
os.tts
ax
ox.ltx
oc
a2
24 (g.C).(mol etanol)-l
(24)(5,65)
'
':
12 (g C).(mol
CO2)'1
s,c.r(co)
'r e =
''P(CO)=
ZO'aS'ffi#
oe.!e
- Balance de oxgeno:
t.
,i:
tzt
For=A.ltr:B.Fr-g.Ln
,:,
Fx
Fs
ds.lts
dx.Fx
,020
1, 09
0, 05s
0,095
0, 115
0, 1l-9
4,32
5,65
6
',54
,48
,2
6L, O
103 ,7
135,5
155, 5
26
10,
,5
4't ,5
57,5
59, 5
27
5, 95
t2;75"
17,62
20 ,46
20
,52
t0,25
20;7s
3e, s
57 ,64
75 ,48
0,391
0
,'340
,372
0,425
o
0,4.85
83
Tabla
D=
2.10
Fx
plo2l
A.Irs
Q.Fc
(mmolOr).{g cl.h)-1
h-r
0
B.p,
3,27
,62
L2,96
16,95
L9 ,44
,020
0, 055
0,095
0,115
0, ll9
0,87
1, 85
2,85
3,47
3,60
4,5'7
5,53
5,73
A.ps
A.lts
C.ttp
,440
,409
0,427
0 ,469
0,520
7,44
3,72
5,54
7 ,95
10,1
0.96
2,65
c.vP
1, 83
4, 50
7 ,42
9, 00
9,33
Donde:
.
Por tanto:
0,115
h-1;
+ 3 O, :2COz + 3 H2O
=,
= 16,95
mmol
o'
cl.h
1,1
Por tanto:
B = 1,1
'
84
no! oz=!::l=-cl
mol c122,86
g lgfrcnrno]
mol
8,12
H2O
B.tt,
4si2#
t
o,tts -r = s,5o
(O)
77,8^l
O:
8c
0,115 hora-l.
tt(o)
77,8
I
^lrrOr"
CCt.N)r4
It(o) = S,Ol
1 mol
?2,4 lina
ffi
C.lt,
tL(o)=n"*Oh;+,
(31
85
: .i
2.2 Determinacin grfica de los coeficientes de mantenimiento y rendimiento verdadero t'bxgeno, durante el ,crecimento de .S. cerevisiae en un
cultivo continuo limitado por etanol. Ecuacin (3): p(or) vs lJx; Ecuacin (4):
(A./s - C.ltrl vs pr. Ejemplo 2,8.
Figura
- (mmol oxigeno)/(g
ceLh)
,U_
{*:,
2
o
o,o2
0,o4
0,06
0,o8
0,1
0,12
A'.tt"
*, . (o*),"
.11, =
t4t
m.
(Yvo)u
86
: 40,6
(g cl)/(mol Or)
t2
.\_-i
10
\:l
"i'
:\
......'.-----...-....-.--i..-.-\sr---.-..-.....--"""'+'--'
i\i
:\i
i\i
-?---.--..--'-""""'-"'-""'--"""'--'\""'i
"
o
o,4
:ii\
'ii
"'--"
'-'--'--."'----""-"'-"--'1""""
,i:
jri
o,44
""
""' - --"'+":"'
o,48
o,52
o,56
o,6
Cociente res?iratorio, Cr
C.ttp=kr-4-C,
(5)
kr
r, = (Yp)
".ro,
x.m(Y4o)"
87
],
:i
r" =
*(r.^, *(,
#,.r
" r)
1,.
,o=i(kr-k2.Cr).x
-dxdoz-ds-dp
ro"='r=A
dt
'"=-
'r=
modeoxfgeno,consumodesustratoyformacindeproducto,enmol/l,h.
Estas ecuaciones cintcas son indispensables para el control del proceso de
crecimiento de S. cerevisiae en un cultivo continuo limitado por etanol.
2.7
e'n
creci
{ff
p*roceao'#
in.! El medio no
'
del
del
2.7.1
::'
Requerimientos nutrimentales
formacin
de
88
Tabla
2.11 composicin
Antibtcos
Bacitracina
Cefalosporina C
Eritromicina
Penicilin G
Estreptomicina
Acido
Acido
. Acido
Solventes
ctrico
gluBnico
lctico
Acetona
Butanol
Etanol
C6sH1o3N17Or6S
C16H21N3O.S
Ca7H67NO13
'C,6H18N2O4S
C,
H3eN7O12
CuHrO,
C6H12O,
C.H'O.
CaH6O
C4HroO
C2H6O
Vitaininas y amnoiidos
B',,
Rboflavina
Acido glutmico
Lisina
Triptfano
Cu.HrrCoN,oO,oP
Cr7H2oN4O6
CsHsNO4
C6H14N2O2
C1r H12N2O2
2.7.1.3
Requerimientos mnimos
representacin esquemtica de los resultados dq este tipo de ensayo. Eventualmente, a medida que aumenta la concentracin de la sustancia nutritiva, esta
se hace disponible en exceso y alguna otra sustancia se vuelve limitativa del
crecimiento.
90
Fuente de
Fuente de
carbono
energla
Fotolitotrficas
(Autotrficas)
Luz
CO,
Chromatium
Fotoorganotrficas
(Heterotrficas)
Luz
Compuestos
orgnicos
Rhodopseudomonas
Ouimiolitotrficas
(Autotrficas)
Oxidacin de
compuestos
inorgnicos
CO,
Ouimioorganotrfcas
(Heterotrficas)
Oxidacin de
compuestos
orgnicos
Compuestos
orgnicos
Fototrficas
Ouimiotrficas
Thio-
bacillus
Escherichia
9t
Concentracion de celulas
especfcos
:
92
Medios
Clulas
100
100
23
25
776
66
L4
24
20L
't
s9
6s
70
27
15
74
66
4L
47
Fe
8,9
4,9
3,2
3,0
2,5
0,3
Zn
0, 14
Cu
0, 03
0, 05
0, 003
0, 002
0, 006
s
Mg
Na
Ca
cl
Mn
Co
Mo
2.7.2
25
t_1
)-23
20
5
2t
20
2
3
11
29'"
2,2
50
0, 13
0, 04
0,15
0 ,02
0,09
0, 01
26
27
26
13
L7
9
Requerimento de energa
ta ,rnr"",a
93
2.7
.4
Consideracones tcnico-econmcas
94
Matera prima
Precio
Comentarios
US /kg
Fuente de carbono:
Dextrosa monohidrato
0,50
Glucosa
o,32
Jarabe de maz
95o/o, equivalente de
0,40
dextrosa
o,28
Miel de maz
Melazas de remolacha
Melazas de caa
0,09
Aceite de soya
Refinado
0,80
Aceite de maz
Refinado
o,82
Etanol
0,56
0,1 0
o/o
Metanol
0,19
n-alcanos
0,50
Fuente de nitrgeno:
o,20
o,21
Harina de soya
Potena: 44o/o
o,24
Semilla de algodn
0,51
Licor de la
maceracin del maz
Nitrgeno: 4, 5% peso/peso
0,1 5
Caseina
N:
2,40
Sulfato de amonio
Grado tcnico
Nitrato de monio
Amonaco
13,5o/o peso/Peso
o,12
l
0,14
Contina
95
abla 2.1
4 Continuacin
Materia prima
Comentario
Precio
US $/ks
Urea
Grado: agrieultura
N: 460/o
o,20
Levadura
2,40
Suero
o,45
KH2PO4
1,65
K2SO4
Puro, grhulos
2,20
NarHPOo
1,29
MgSOo.THrO
0,33
ZnSOo.THrO
0,50
295,00
Penicilina
25,00
Estreptomicina
49,00
Medio celular
animal, total,
Antiespumante
mayor
1,00
0,75
96
de
2.7.5
Agua
97
y eqripos.
Las aguas con un recuento bacterial menor que 20
agua
especialmente calcio y
2.7.6
Fuentes de carbono
2.7.6.1
Melazas
Remolacha %
Caa
Peao seco
7g
,0
85,
Total de carbohidratos
48,0
58,
0,2
PrO,
CaO
0,01 0,15 -
Mgo
0, 0l_ -
KrO
2,2
0,1
0, 00s-
4r5
0, 001-
sio,
AI2o3 'i{
'r
'
FerO.
28,O
Cenizas
4,O
2,8
0 ,02
0,7
0,1
0,5
o,
]
,02
34,0,
8,0
i it
.,.,.
o/o
78,0 - 95,0
50,0 - 59,0
0,08 - .0,s
0,009- 0,07
0,1s -_ q,8
0,25 - 0,8
0,8 - 2,2
0,05 - 0,3
0,01 - 0,04
0, 0q1- 0,01
28 ,0: - 33;,0
3,5 - 7,5
,
Peso seco
mg.g-r
Glucosa
t.
Fretosa
';'
Maltosa
Sucrosa
.Raf inosa
.Cetosa
0,2 - 0,93
0,33 - r;5g
0,0 - ,1,35
3,Atr = tr6,90
i:
lr^
8."32
4,33
5,35
9,0
99
Maltosa
Hexosas (glucosa y fructosa)
Sucrosa
Dextrina
Otros carbohidratos
Protena
Ceniza
983).
52,2
t9 ,11r8
15, 0
3,8
4,6
1r5
las
prdidas por evaporacin, que pueden alcanzar el 10 o/o del volumen total, y sus
propiedades como sustancia de superficie activa que contribuye a la formacin
la
100
2.7.6.4 Aceites
vegetales
2.7.6.5
Hidrocarbuos
de
de protelna; 0,5
contiene:44 - 47
o/o
o/o
de
sustancias libres de nitrgeno disuelto; 5,5 - 6,0 o/o de cenizas; o,3o/o de calcio;
0,62 - 0,65 % de fsforo; 2,O - 2,5 7o de fosfatos. Los constituyentes
principales son protenas, grasa y fsforo. La torta s obtiene mediante extraccin del aceite del frijol soya y su calidad depende de la fuente del frijol y del
proceso de extraccin.
102
(ardinal y Hedrick,
45,0
948)
rr.
edinocido t de nitrgeuo
Ntes de
Deepue de
Couponente
Agua
55,
htdr6lisis
htclrtr f
Leucina
5,86
,80
sie
N total
2,7
4,5
fsoleucina
3,42
,80
N amino
1,0
1r8
Valina
3,88
,85
Aeido
Sustancias 0,1
reducEoras
Acido
5,0
Ceniza
Acidos
voltiles
9,0
0,1
so,
11,
15,
glutmico
Treonina
t'
1ce{co
lt.
,97
5,.44
Lisina
0,3
Arginina
8,23
q;009 -
'0,
ejta
Ca
Cu0-
0,5
1r5
Histidina
Profina
Penil
Fe
ItIg
0,01 0, 05 -
Mn
o, 004
2,0
3,0
Metionina
Acido
asprtico
Cisteina
Alanina
lr0
2,0
Tirosina
0, 34
Zn
0, 0s
10,
1i.5
0,
001-
,. .9, 05
1r0
alanina
3,0
,9'7
4,75
2,05
1,07
L,6B
1-,22
27 ,'7
0,7'4
103
Componente'
Sin fermentacin
Ictica
Coh fermentacin
lctica
Peso seco
Nit.rgeno total
72,'7
Nitrgeno amino
Sustancias'reductoras
Acido lctico
5,1
7,9
27 ,5
5,0
Cenizas
20 ,8
,5
6,0
2,4
12 ,5
9,7
22,2
52
Tabla
2.21
Componente
Peso seco
Nitrgeno total
Nitrgeno amino
Sustancias reductoras
Carbohidratos no reductores
Total de carbohidratos
104
7o peso/volumen
70,0
4,6
2,0
19,2
4,2
23 ,4
2.7.7.5 Extracto
de levadura
Componente
mg.g-1
Nitrgeno totaf
Nitrgeno amino
Cloruros, como NaC-].
75 34-48
0,7 -
Peso seco
Fosfatos , coro
Carbohidratos
105
13
300
PzOs
38
82
lva
56
30
Ca
0r
Fe
0, 05
Mg
Cu
0, 05
zn
0, 05
Mn
0, 005
Co
0, 005
sis.
fermentables tales como sales inorgnicas, carbohidratos no utlizables, ntrgeno y fsforo. Alfinalizar la fermentacin estos materiales deben separarse de
los productos y tratarse, factor que contribuye a la elevacin de los costos de
control ambiental.
106
2.7.9 Control
ambiental
A:'
g.litro-1
Glucosa
g.litro-1
18,0
3,2
0,39
MgSOo
KH2P04
0, 68
IqHPO4
5,0
0,4
1,2
NACl
0, 008
NaCl-
FeSOn .'lH2O
,002
FeSOo .7H2O
0,02,
CuSOn.sHrO
0, 001
0, 003
CH3-COONa'
15 aminocidos
o, 1- o,
0, 028
0, 0002
4 nucletidos
10 vitaminas
,002
2.10-6 - 2.ao-3
(NH4 )
'SO{
MgSOn.TH2O
ZnSOn -7HzO
CaC1,
CoCIr.
MoO,
SHrO
GLucosa
NHAC1
50,
0
I
,02
40,
0
6
0, 00001
107
2.8
f[
El
Yrtt
o/o
cn la biomas
en el nutrimetfu
elcmento
elmento
12.41t
xF'
xo
Yrtt
12.43t
lnicialmente se asigna un valor de cero a s.. Entonces los valores de s. obtenidos son multiplicados por un factor que oscila entre 1 ,5 y 2, excppto en el
caso del sustrato limitativo (Acevedo, 1987), Otro paso en la formulacin de
medios de cultivo es la deterrinacin de los rendimientos de sustrato en producto, Yr,., (Secciones 2.5.5 y 2.5.6). Un enfoque alternativo es la evaluacin
de Yr," mediante los conceptos sobre electrones disponibleS y grado de
reduccin (Seccin 2.3).
La optimizacin de un medio de cultivo, dado el elevado nmero de variables,
se realiza con la ayuda de procedimientos estadlsticos tales como el de BoxWilson (Box y Wilson, 1951) o elde Plackett-Burman, o mediante mtodos evoItrcionarios, como el Evop Simplex (Sierra y Acosta, 1987).
Ejemplo
2.9
110
6: (g nutri-
+rry,"vv
I \tb
1
N[^-'"
C
,493
c5H1206'
(180)
0, 145
0, 0g
12.l_0-3
(NH4 )
(L32, 'SO4
t)
Na2HP04
" (1-42)
Ca
FE
2L.10-3
9,576
P: 0,218
Pz 78,17
O,'77L
P: 8,48
'1,652
,6.10-3
(\7 4 ,21
I(:
CaCI, -2H2O
ca.0,273
c7:o i48z
Ca.45,5
0,308
5 - l-0-3
IUg:0;099
.S: 0, 130
M9=7,9,8
O,'t[l
(246 ,4)
2.L0-3
FeSOn.TH"O
Fe:0,20).
Fe:100,5
0,139
Cut 0 ,254
0 , L28
C32540
5,51.10-3
,246
Mn;492O
2,84.10-3
Co:
1,13'. 10-4,
MgSOn.TH2O
1.10-4
CuSOn.5HrO
(24e
Mrl
lV: 1,46
Pz 0,178
IqHPO4
,.Q77,9)
Cu
N: 0,21-2
.9: 0,242
Na.0,324
lt47l
Mg
C: O,49 28,747
,194
(0,4).f
= 0,24
5 . L0-s
, g),
MnSOn .4HrO
,449
0,.115
,S:
Iutn:0
.9: 0 ,]-44
(223)
rr
Co
2.L0-6
CoCJ-,.5H,O
(237 ,8)
Co:0,248
C7:0,298
)-24000
Contina
)
111
L234's
s
K
Na
c1
.'
12 - 10-3
11.10-3
5.10-3
5 - 10-3
Otros:
7,85.10
I
i
i
i
Solucin:
1- En los numerales anteriores se analza la necesidad de optimizar el medio de
cultivo y de seleccionar las materias primas por mtodos estadfsticos a partir
de datos obtenidos en el laboratorio y Ia planta piloto despus de un estudio de
la factibilidad tcnco-econmica del proceso.
3- Los elementos H y O, aportados en exceso por elagua y los otros nutrimentos, no figuran en el balance.
4- En la columna 3 figuran las materias primas preseleccionadas y sus respectivos pesos moleculares.
112
g rutrir,rtto _ g clulas
g ebnento g ruttrimenn
g cfulas
8- En la columna 6 figuran los resultados obtenidos al dividir la concentracin
deseada de clulas, 14 (g c|. secas).(litro)-1, por los correspondientes valores
de la columna 5:
14 g cL.
ltro netlio
g ca.
g unilo
g runinento
lito
medio
s NqIPo+ o.gz4 s Na
,.n.,
'
ttttirnottto
lito
mtlb
I,
14 S cL.
litro nudio
cel.
113
K:
0,0529
K=
11.10-3
cL.
'
cL.
'
cL.
PROBTEMAS
114
2.5
2.6
Se utiliza un reactor por lotes para producir cido cftrico a partr de glucosa.
El rendimiento de sustrato en clulas es O,22 (g clulas)/(g glucosa) y el de
2.7
115
B!BLIOGRAFIA
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:{
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McGraw-Hill, New York.
Sierra,
J.A. (1980),"Application of MacroscopicPrinciples to Microbial Metabolism, Biotech. Bioeng., 22, 2457 -251 4.
la
1.
119
CAPITULO 3
TERMODINAMICA DE LOS
PROCESOS BIOOUIMICOS
3.1
PRINCIPIOS DE LA TERMODINAMICA
120
constantes.
3.1
.1
Conservacin de energa
121
A,U=Ur*t-Un,a
t3.11
Donde,
LU = Q -
el sistema;
f3.21
4U=Q"
t3.3I
,U=eo_p.^V
f3.41
b - presin constante:
sin
realizacin de trabajo; oo: calor absorbido bajo presin constante, cuando l'
Finalmente, si
AU=Q-P.LV-fl
t3.51
LU=Q-P.AV
t3.61
W':0:
3.1.2' Entalpa
La energfa interna (U) .de un sistema es un atributo que depende del estado
presente del sistema, por ser una fpncin de estado. No se puede medir e.l valor
Qo=(Ur-Ut*P.Vz-P.Vt)
.?
Qo =
t3.7I
t3.81
la diferencia entre los valores de una propiedad de estado, entre los estados inicial y
final.
H=Qp=Hz-Ht
t3.91
3.1.3
Energa libre
3.1.4
Entropa
124
AG=LII-T.LS
t3.10I
-p37Ea[egr1gutjo
se
convierte en:
125
AG=AU-T.AS
t3.111
AU=A,G+I.As
13.121
,yAlr.,ir]61sorffi
medio,
.r"n,i6ilir_dili*y.!"ro
3.2
126
Figura
"F
el
de un organismo, representacin
esquemtica
Micr oongonismo
al
Ut=v-4u
t3.13I
t3.141
0u=0
tDu:
el calor y la
energa
t3.151
0u=o+(rt.Qr)
Donde, rDo: velocidad de flujo de calor hacia el sistema, kJ.s-1; h,: entalpa molar
parcial, kJ.(mol i)-1; O: velocidad de flujo de masa de i, mol i.s'l.
de
0a=-8,(,'0,)
t3.161
S/
rs
t3.17I
+ 0s
ro=-0s
De acuerdo con la segunda ley de la Termodinmica
t3.18t
.,=t:alg')
128
<o
t3.19I
<D,:
t3.201
Donde, gi: entalpa libre molar parcial, kJ.lmol )-r , defnda como:
&=h-I's,
t3.211
Donde, h,: entalpa molar parcial, kJ.(moli)-1; s,: entropa molarparcial, kJ,(mol
i.K)1.
De las ecuaciones t3.181 y 13.191, y la restriccin impuesta por la segunda ley,
se obtiene;
E(0.8J > 0
f3.221
129
3,3
t3.231
Se expresa como:
L,
Ig.24t
Por esta razniel ltmo trmino de la Ecuacin t3.241 no n"i.iye las concentraciones de agua e H*, an en el caso de que estas dos sustancias sfiguren en
la ecuacin t3.231. El superndice prima denota evaluacin en una solucin
AGo=-R.TlnK,
t3.25I
Donde Kr, es la constante de equilibrio. Esta constante incluye las concentraciones de agua e H*, a pH 7, cuando estas sustancias participan en la reaccin.
Debe tenerse presente que la direccin de una reaccin aislada no indica la
direccin de la ruta metablica. Asl, por ejemplo, en la siguiente reaccin,
(Bailey y Ollis, 1986), el cambio negativo de energfa libre favorece la formacin
de fosfato de dihidro-oxiacetona:
CHO
I
AG"'
CHOH
- - 7,658 kJ/mol
t3.261
cH2o- P
g1
iceraldehfdo-
131
3.3.1
'
fosforilados
algunos compuestos fosforilados. Las reacciones qufmicas exergnicas (variacin de energla libre estndar negativa) se verifican en la direccin en que se
hallan escritas si se inician con todos los componentes en concentracin 1 M.
Tabla
de algunos compuestos
AG'', kJ
Compuesto
Fosf
1.3
oenol-piruvato
67,9
-Difosfo-glicerato
49 ,4
Fosfocreatina
43,1,
AcetiLfosfato
42 ,3
Fosfoarginiha
32 ,2
ATP
30,5
Glucoso-1-fosfaEo
20 ,9
fosfato
Fructoso-
Glucoso-
fosfato
1- f osf
ato de gI iceri
Direccin de
transfelencia
de! grupo fosfato
1_5
,9
13,8
l-o
9,2
132
- .i ?
3.2
Reaccin
Hidrlisis:
- nhtdridoE de cl,do
- EBereE
Acetato de etilo + HrO --> etanol + acetato
Glucoso-5-fosfaEo + HrO -> glucosa + fosfato
- Anldag
Glicilglicina
- Gluc6sidog
- L9,7
- 13,8
-
9,2
- 29,3
ReordenacLn:
- 1,7
+ 3,1
Oxldaci6n:
- 9784,5
133
tos tres ncletidos: ATP, ADP Y AM? representados en la Figura 3.2, estn
presentes en todas'las clulas. La suma de sus concentraciones es relativamente constante, en la niayorfa de las clulas vara entre 5 y 15 mM.
Figura
o- o-
o-
o1l
oil
llt o-P,-.o-P:o_cH,
-g-Poil
1.,
K.,H
OH
O}I
ATP
Complejo de
Mg" y ATP
,MS:'
ttr
llillr
ooo
Ribosa-Adenina
134
3.271
ffi
Asl, por eiehplo, una clula "plenamente cargada" con ATP como
nico
nucletido tiene una carga energtica de 1,0. Si las concentraciones de los tres
nucletidos son iguales:
\ATPI:IADP):IAMP)
y la carga de energa es 0,5, (Bu'lock y Krstiansen, 1987).
,l
En la mayorfa de las clulas el valor de la carga energtica vara entre 0,87 y
0,94. La carga energtica alcanza su mfnimo valor cuando las clulas estn en
la fase exponencial del crecimiento, en este caso el ATP es utlizado tan pronto
como se forma. A medida que la velocidad de crecimiento disminuye, aumenta
la cantidad relativa de ATP, y la mxima carga eriergtca se alcanza cuando las
clulas termidan su crecimiento y todo su ADP y AMP es convertdo en ATP.
La posicin intermedia del trifosfato de adenosina, ATP, en la escala termodin'
mica de energas del enlace fosfato (Tabla 3.1) y la especificidad de las enzimas
l,3difosfoglicerato + ADP
fosfoenolpiruvato
(:=)
+ADP (::)
3fosfoglicerato + ATP
aG"':-18,9kJ
t3.281
piruvato +ATP
AGo'
= - 31,39 kJ
I3'29I
135
...AG"': -21,3kJ
ATP + D-glucosa --hexoquinasa--->
t3.301
ADP + D - glucoso-G-fosfato
...4G"': - 16,7 kJ
t3.311
y D-glucoso-6(Tabla
fosfato, son respectivamente 30,5 y 13,8 kJ,(mol)-J,
3.1). Por consiEn el caso de la reaccin t3.311, los valores de AG"' paraATP
guiente, el cambio de energa libre de esta reaccin es: - 30,5 -(- 13,81
-16,7
KJ,
+ CoA-SH+ATP (::>
cido coenzima
graso A
R.COOH
136
AMP+PPi +
R-CO-S-CoA
Acil-CoA del
cido
graso ---l
...t3.321
PPi
+ H2O ---> 2 Pi
AMP+ATP <::)
3.3.4
2ADP
...t3.34I
...AG'' = - 30,5
kJ/mol
a la
t3.351
t3.361
Donde el valor de la energa libre estndar de hidrtisis del ATP, o del ADP, LG'
: - 30,5 kJ/mol, supone que el pH es 7 ,O; la temperatura 37 oC; que hay iones
Mg2* en exceso, y que los reactivos y productos estn presentes en concentracin lM. EI valor estndar de AGo' = - 30,5 kJ, no es aplicable en las
condiciones de la clula ntacta, donde el pH y la concentracin de Mg2* difieren
'137
--) X + ATP
t3.371
t3.381
X-P + ADP -- E1
La ecuacin t3.351 muestra que la hidrlisis del ATP libera una elevada cantidad
de energfa libre y, al invertir la reaccin y aadir fosfato al ADp, se almacena
energa libre para ser utilzada posteriormentg.
El concepto de intermediario qufmico comn se ilustra a continuacin mediante
R-CHO
138
HOH
--> 2H + R-COO-+ H*
..AGo' = - 29,3 kJ/mol t3.39I
R-CHO
H{PO4)2-
ADP3'
---> 2H + RCOO +
ATP4-
AG'': 0
t3,4OI
Ejemplo
3.1
H(PO4)2-+ H*
-->
+ HOH
AG"': + 29,3 kJ/mol ..t3,41I
ATP4-
2 Piruvato + 2 NADH
+2H'->
2Lactato + 2 NAD*
...13.421
Solucin:
...t3.431
139
Glucosa
...f3.441
Glucosa
...t3.45I
3.4
valor 1 M.
Tabla
3.3
Compuesto
ago
kJ/mol
Acido frmico
Acido actico
Acido palmftsico
Acido ]ctico
Acido glucnico
Acido oxIico
Acido succfnico
acido mIico
Acido cftrico
Glucosa
Metano
Etano
Pentano
Metanol
cH2o2
28L
CxHaO2
94,
c]6H3202
9800
c3H603
L377
2667
c6Ha2o.7
327
1599
c2H2o4
c4H604
L444
2L47
2872
c4H6os
c6H8o7
c6H12o6
8L8
CHn
1467
3385
693
CrH.
CrH.,
cH4o
EtanoI
c2H6o
13 19
GIiceroI
c3H803
l-643
Amonio
NHnt
Acido nitroso
Acido ntrico
Sulfuro de H
Acido sulfuroso
Acido sulfrico
HNO,
Biomasa
cHl,
355
8L,4
7,3
HN03
323
H,S
-249
-507
H2S03
H2SO4
8oo . sNo
,2
54L
236
844
9583
L322
255
876
9989
1359
2593
238
1500
1345
1998
2843
813
14 5 8
3367
682
1308
1629
316
41
246
1493
7329
]-963
2807
892
1-562
3533
728
1369
1663
383
,5
- 32,5
243
-329
-587
536
30
247
-329
-602
56 0
141
3.4.2
Calor de combustin
kl
^fl,=-(115)r mol C
142
kI
AII"=-(115).lVEd
' 'molfucompucsto
^c:=La
Ecuaci
(94,.f + 86,6) k/
twl C e cl comptusto
13.471
t3.48I
de
r, _
A rlzt6
4E
L,H^
'v=
26,8 keal
112,2kJ
elctn
electrn
t3_49I
kJ
.l_*"t gn*
- 112,2
elcctn mol O,
t3.50I
LHo =
- ffi,74
H
mol O, consumido
143
AG"
= -
(485,6).M0
kJ
(3.51J
mol sustrato
AG" = - (435,3).M0
kJ
(3.52]
mol sustrato
Mo=~
32
(3.53)
144
(A HJc =
3,5
CALOR DE REACCION
cultivo industrial es un
ya que este calor
y
fermentador,
un
de
operacin
diseo
aspecto importante del
para
mantener la temperatura ptima de crecidebe removerse continuamente
miento. Sin embargo, la determinacin experimental del calor producido en una
El conocimiento previo de la produccin de calor en-un
a las dificultades
''
producido'durante el )%?ra"
La determinacin indirecta del calor de reaccin,
aalian+a
.,^ l..atana
la entalpa:
anfrlna'
a)
-^^l:-^
- -- -r-.-'---L^^
de
un
balance
se realiza mediante
crecimiento microbial,
-:^-^L:^l
HR =
A I,.(-As)
- AEP.AP -
AII,,AX
t3.s5I
nJ.
(A
13.561
(^ H)" = -
112,2
#r-
elcctrn
mol C cl
t3.571
145
f
t'
il'
J
3.6
3.6.1
Disipacin de energa
f(
,L,V
r\
(.
<
{
\
{
\
*
T.tr, = (a c'')r.(0r.I,
0x.Ix
'*.)
)'A-'
t3.581
D=+=(Le")r.
t3.59I
3.6.2
Eficiencia termodnmca
146
de biomasa, como:
rlr
(Le')
=
(ag")",
cx
t3.601
+D
crecimiento
anaerobio, los valores de (Ag"'le son mayores que los de (Ah"')e, (Tabla 3.4).
Si adems se considera que la disipacin total es similar, tanto en los procesos
aerobios como en los anaerobios, entonces la produccin de calor por unidad de
147
(Ag.'lro: cambio de entalpla libre baio condlciones modificadas (la entalpa del
agua se toma como la del agua lquida libre y la concentracin de H* es la
corres-pondiente a pH 7; (Roels, 1987).
Sustrato
Aeeptante de
Ios electroneg
o2
111,5
LzL ,3
]-t4 ,1
u2
L18,I
Metano
o2
Metanol
EtanoI
o2
icerol
Acido Ictico
Gl
Glucosa
ecldo succfnico
Acido ctrico
Acido m1ico
Acido frmico
Acido succnico
lcido succfnico
Acido succfnico
Affru
kl (nol
o2
w2
o2
o2
o,
v2
(NO3)- -->
(NO2)- -->
N2
114,1
1t6 ,7
L06 ,6
109,1
110,8
127,5
100,6
N2
A9"'.i
Y4a
electr6n) 9/e
101, 6
1]-3,7
109, 0
l]-6 ,4
110, 1
118,5
]-07,L
111, 0
LL2,t
118,0
100,6
727,0
107,1
,56
2,27
, 2 ,l'7
3,55
,26
,84
2 ,90
3,09
, 3, 18
3
3
3,t7
2,28
2 ,77-
Glucosa,
Glucosa
Glucoga
CO, (etanol) *
CO, (cido lctico)
CO, (propinico/
2,9
2,9
7,6
t2,9
2,76
3,26
0,88
0,81
7,48
Glucosa
cido actico)
Co, (metano/
cido actico)
6r7
i4 ,4
1, 63
-2 ,0
3,9
0,36
0, 91
0 ,27
0 ,4L
Gfuconato
Acido actico
Metanol
Acido frmico
Acido propinico
o2
106,6
7L7
o2
CO, (metano)
CO, (metano)
@, (mtano)
CO, (metano)
9r
l-5,0
-2 ,3
|I
9,5
8r3
t2;0
: 16,4
4,0
148
LHar, = AIr.(-As)
- E t'ttr't'P
t3.611
AHor=Atrf+AHr'LX
Donde, aH"or: calor generado por catabolismo, kJ/litro; aH^: calor de reaccin,
kJ.litro-l; aHx , aHs, AHr: calor de combustin de las clulas, sustrato y producto, respectvamente, kJ.(mol)-1; Ax, As, Ap: concentracin de clulas, sustrato
y producto, respectivamente, mol/litro.
La ecuacin t3,61lexpresada sobre la base de 1 mol Cse convierte en:
(LHc^)" = (AEJc
- E(yow)c.(A,rrr)c
13.621
rlx
gs)"-(LH)c
=
13.631
(r*d".(Hr)c + (AflJs
El calor de reaccin por mol de C en el susirato consumido depende de la
eficiencia energtca del crecimiento microbial y de la energa potencialmente
disponible para crecimiento, (AH.or)":
(LH),
= (1
- r)-(Aflc.J.
t3.64I
149
Ejemplo
glucosa
clulas
etanol
+ 3,84 O, +
O,29 NH3
1,95
..,t3.OSl
"
CHr,72Oo,ooNo,,r
clulas
+ 1,82 O, + O, 15 NH3 =
1,O3
CHr,72Oo,44No,r5
kJ
...t3.67I
LHx
150
no =
afl^
Ejemplo
3.3 Determinacin
: 4 + 1,72 - l0,44ll2l
- (0,15)(3)
4,39
1,1 Oz
H2O
aHx
aH"
- (115)(4,39)
- 504,85 kJ/mol
AHx: AHo:
-1448,74l'1',1,1)
= -493,6kJ/mol
151
: ,
Tabla 3.5 Determinacin del calor de combustin de las clulas, AHr, y del calor
aH"
o1,
Ecuacl.n
kil,/mol
k/1ttro
.
6s]
96
,3
fa.bIa
aH,
aP
fu/mol
mo1,/1itro rnol/liEro
1359
J.663
1,3
3 .3
2807
0,59
[3
.56]
2005,1
2807
1, e5
13.67)
8s3,s
L369
1,03
PeEo
k,r/mol
[3
6s]
36s
41:-;Z
[3.56]
f.3
,9
.57)
s00
AH,
c1u1ae
g/mo1
23
,7s
22,86
22
,86
l1t
0,43
-\
AO
AHo
mol/litro
k/ro1
15,41
L7,.99 I s,84
s22,2
21,,88
469 ,2
1.82
3.6
Tabla
Coulueeto
N"o O, para
Eeu. conbuetl6n:
12..L41
moleg
: c.H,,o" 24
Etanol: C,H.O t2
Glicerol: C=H'O. 14
Gl-ucosa
Biomasa
152
3
3,5
otros
Calor de cobuEtin
k/nol
Ecu.
t3 .471
27 50
.?807
1369 1380
7663 1610
Tabla
3
.3
Ecu.
t3 .50I
2692
,4
L346,2
7570,6
cH1,r2oo,44No,1s
4'39
---
arr
[3
Eeuacln At!
de
1'1
550
504'8
493'6
De acuerdo con Baileyry Ollis (1986), el peso de las clulas secas, evaluado
expermentalmente, incluye aproximadamente un 10% de cenizas. Por tanto:
AHx
AHx
- 19,43 kJ/g
3.4
Eiemplo
0,65
1,92 O, + 0,21
C2H6O
+ 0,215
C3HBO3
el
H2O
105O,7 kJ
't53
:l
AH.
(AH.l.(-As) -
AHp.Ap - AHx.Ax
sustrato etanol
- 1.28(365,9 +
41
1,2112
.-
AHR
1O62,26kJ
c[ulas
3.8
y t3.61I
consttuyen la pase de los factores de rendimiento de energa en biomasa:
LHR=
^flr.(-As)
-XL,Hr.h,p - AH,.Lx
LH"^, = Alls.(-As)
-t
[Ecu.3.55]
AHr.p
t3.61I
Atn=AIl+LHx.Lx
154
3.8.1
*k
t3.681
(Ynrl*
Lx
Arr.(-As) - E
tH,tp -
LH*.Ax
(Ysol*=ffi
t3.691
t3.70t
155
Generalmente los hidrocarburos producen ms calor que las especies parcialmente oxigenadas-. ,fsl, Oor ejemplo: (Yvrrl",rr^,o ) (Y)ys16
Por consiguiente, los reactores que contienen sustratos con mayor grado de
reduccin requieren mayores remociones de calor, aspecto muy importante en
el estudio de factibilidad econmica de un proceso (Bailey y Ollis, 1986).
El calor de reaccin,
el
.^HR = LHo.LOz
t3.71I
*ol o'
kI
- ffi.74
' mol 02. Lo^' Iitro
3.8.2
define como:
(Yo),
Lx
LHr,+ AHx.Lx
13.721
"(Ytr),
156
A
LH*.Ax + AIls.(-As)
LHp.LP
Yilt
t3.73I
Donde, Ax, As, Ap; concentracin de clulas, sustrato y producto, respectivamente, g.litro-l; AHx, AHs, AHr: calor de combustin de las clulas, sustrato y
producto, respectvamente, kJ.g-t; Yro, Yr,.: rendimiento de sustrato en ctulas
y de sustrato en producto, respectivamente, g.(g sustratol'1, En un medio
complejo prcticamente toda la fuente de carbono es utilzada en la produccin
de energfa y una porcin muy pequea de la fuente de carbono es asimilada en
clulas (Bauchop y Elsden, 1960). En un medio mfnimo una porcin de la fuente
de carbono es metabolizada por las vas bosntticas y el resto por las vfas
catablicas.
La fraccin del sustrato convertido en clulas es:
(As)ce =
2
c1
f3.74t
^,
(As)." =
' 'q
6t
r _ uz.Ax)
c1.AsJ
t
t3.751
(LHc^)^= aas.as.(, -
Z "r,)
E,
ta,.tp
t3.761
157
(Yxu),
A
AHur + L,H*.Ax
13.77t
yrt,
AHx.Yx^ a
AII
3.8.3 Factores
( Yrw )o,
Ax
AHr.(-As)-Etnr.tp
A.r
LII^ + AH*.Ax
t3.781
Ynt
Afl, - E AHr.Y$
Donde, aH^: calor de reaccin o calor producido durante el crecimiento,
kJ.(ltro).1; AHs, AHp y AFlr: calor de combustin del sustrato, los productos y
las clulas, respectivamente, kJ/mol; As, 4p y Ax; concentraein del sustrato,
los productos y las clulas, respectivamente, rnol/l; Ys, YpTs: rendimiento de
sustrat en clulas y de sustrato en'producto, respectivamente, g. (g sustrato)-1 .
El factor de rendimiento basado en la energa liberada por catabolismo, en el
crecimiento aerobio sin formacin de productos no celulares, se puede calcular
a partrde la siguiente ecuacin obtenida alreemplazar Ia Ecuacin t3.71len la
Ecuacin t3.781:
158
(Ysr)"
LH^
A,H- + ------"
^ yrto
Ejemplo
3.5 Evaluacin
'
t3.791
CH1,72Oo,44No,ts
H2O
853,9. kJ
- Datos:
- calor de combustin del sustrato:
aHs':
1-369 kJ/mol'
500,1 kJ/mol,
(Tabla 3.3)
(Tabla 3.5)
853,9 kJ/litro.
1 mol/litro.
Ax
1,03 mol/litro.
(1,03/1
,821:0,567
mol cllmol O,
Solucin:
-Rendimientobasadoenelcalorqueacompaaelcrecimientomicrobial,(calor
de reaccin), (Ecuacin 3.68):
(1,03 nnl
(Ynul^
c04fi3
=O'O27699f ';
(Yno)*=
ffi.ou,
cl
= O.O27S s
= 1369(1,Gt).(22,86)
(1,03).(500,1)
H
-
Yr{t
tY \ -Vxlktlt LHx.Ygs * aIIs
160
(1,03).(22,86)
(500,1).(1.03) +
= o.O12S
1369
cl
!r,t-Y"
Vr)am
LH"
(1,09).(22,86)
1369
-E
Aflr.yw
= O.OflZ
,c!l
kt
t3'791:
Este factor tambin se puede calcular a partr de la Ecuacin
(Y*,)o,
W,74 kJlmol 02
0,566 mol cltmol O"
(Yw\o,
= 7.73.10-a
(Yru\o, = O,O1T1
g.8.4
,86
y 12'6 (g clulas
Bauchop y Elsden (1960), obtuvieron valores entre 8'3
generacin de ATP en el
secasl/(mol ATP), para los rendimientos basados en la
donde prcticacrecimiento aerobio de microorganismos en medios complejos,
produccin
de energfa' El
mente toda la fuente de carbono es utilizada en la
sustrato
nmero de moles de ATP sintetizados por mol de carbono en el
partir
del
conocimiento
a
calculable
catabolizado, o ganancia de ATP, G1p, eS
en un orden
de la ruta catablica. Los valores de GATP varan aproximadamente
cada micro'
de magnitud, segrfn el sustrato y el metabolismo de energfa de
organismo.
161
3.8.5 Factor
yxun =
to,s
ffi
@,4,2)
mol C
ct{.
12gc
t3.801
3.8.6
El
mol C
O.44
'
cl'
mol ATP
162
Las clulas consumen sustrato para asimilarlo en masa celular, proveer energla
para la sfntesis celular y proveer energa para mantenimiento. El trmino mante-
As =
AsuarcroN
+ ASro"*
* ASrum*',,,noo
t3'811
Donde, As: concentracin del sustrato, g.litro-1 , Esta ecuacin es vlida para
organismos quimiotrofos, que utilizan el mismo sustrato como fuente de carbono
y de energa. Si la ecuacin anterior se divide por la concentracin de biomasa,
Ax, en (g clulas secas)/litro, por ejemplo, se obtiene:
1_1*A"*4"
(Yn), (r*rr), a*,
Ax*
3.821
3.8.8
Qlw -
frATP +
t3.83I
3.9
BALANCE DE ENERGIA
Las clulas consumen los sustratos que proveen la energa y las materias primas
requeridas para la sntesis de nueva masa adicional. La energa libre de las sustancias nutritivas utilizadas es mayor que la de las clulas y productos del meta-
t3.841
(:
kJ.s-
'). El trmino qr* describe el calor asociado con el crecimiento y mantenimiento de los microorganismos y tambin con la formacin de productos.
- qoo: velocidad de generacin de calor por agitacin mecnica y por aspersin
de gses.
qrc=E
!!P
t3.85r
Donde, l/: volumen ocupado por el caldo, litros; c,: concentracin de componente kg.litro-1; H,: entalpfa del componente i, kJ.(k0)'1; t: tiempo, s.
e^, =
Mr(C)".#
t3.86I
Donde, M,: masa total del caldo de fermentacin, kg; 7: temperatura, oC; (Cr)-;
capacidad calorfica media del caldo, kJ.(kg.oC)-1.
En el caso de un reactor continuo de mezcla completa
(CSIA
ta gcuacOn t3.85I
se convierte en:
Q,tc=Fu.G)^.Fq-T4)
t3.871
Donde, Fr: velocidad de flujo de masa del caldo, kg.s-t; To,, Trr: Temperatura
media, del afluente al reactor y del efluente, respectivamente, oC.
165
Qc.
fermentacin. El trmino q"., incluye los efectos sobre el calor sensible del
equipo producidos por los cambios de temperatura.
3.9.2
eam =
(FMi.H)s
- D (FMi.H)p
t3.871
Donde, Fr,: velocidad de flujo de masa de componente 4 kg/s; H,: entalpa del
i-simo componente, kJ.(kg)-l; Los subfndices s y p se refieren al sustrato y a
los productos, respectivamente. Los productos pueden ser celulares (biomasa)
y no celulares. La Ecuacin [3.87], expresada en trminos del calor de reaccin,
se convierte en:
166
husr =
V'AH*'r,
t3'88I
t3.89I
lotes
,wr
Y.lt.r.
t3.90t
167
:2
'
aerobo en un reactor
contnuo
-a
986) es:
(Ydu)R.(cMr)
= V.tr*,
t3.91I
= (",
- ").r.(Y,) -
xrk.V
ryY
Donde,
168
= F,
- s)'D'(rrJ (Yao)*
'ft,
r3.e21
-,
reactor
- Tr)
t3.93I
Donde, Qrurr, Qre, q,nr: calor generado por metabolismo, calor generado por
agitacin y dispersin de gases y calor intercambiado, respectivamente, kW (:
kJ.s'1); Fro: velocidad de flujo de masa de agua, kg.s-'; cro: calor especlfico del
agua, kJ.kg-1 oC-l ' Trr, Tro: temperaturas del agua efluente y afluente, respectivamente, al intercambiador, oC. En el tiempo t = B se desconecta el intercambiador, q,* - 0.
El calor generado por metabolismo se acumula en el sistema
balance de energa, aplicable en esta etapa del ensayo es:
Qtur + Qrc'=
y la ecuacin
de
Q,rc
t3.94I
dT V.
= LIIn.ts
Qtc = V.Cp.
dt
169
Donde, qo":calor acumulado en elreactor, kw; dr/dt: variacin de-la temperatura del caldo de fermentacin con el tiempo, oc.s-t, es la pendiente de la curva
de la Figura 3.3 entre t : B y t : c; cr: capacidad calorfica global del reacror,
kJ.litro-l.o6-t, (Tabla 3.h; v: volumen delcaldo, litros; rr:velocidad de consumo
de sustrato, (mol C en sustrato).litro-l.s-l; AH^: calorde reaccin, kJ.(mol Cen
sustrato)-1
t",
es:
{3.9st
Lrc=4m
Medio,
Calor
Gapacidad
especlfico
calorlfica
kJ.(kg. "G1.1
kJ.(litro.9,C)-1
Caldo de fermentacin
4,186
4,228
Material de vidrio
0,837
0,290
Material de acero
0,502
o,039
170
4,504
Reqctor
Intercqnblodor
Figura 3,3
Tierrpo
Figura 3.4
Solucin:
1- Eeuacin de.recimiento, (Ejemplo 2.2l,:
C6H'2O6
CH1,e4Oo,3No,ru
1,69
CO,
NH3
0,719 cH1,s4oo.3No,r,
0,281
"n
co2
...(11
A ''
...i.21
microbial
Donde:
{AHs)"
: l-2807tl : - 467,83
CHr,e4Oo,3No,2E
4,59
3,49): ,
AH *,,
(AHx)"
= (- 1l2,2kJlelectrn).{4,59 electrn/mol
C)
172
l.
.rt
(- 97,54).(6)
- 585,24 kJ.(mol
glu)-1
..
..(gl
<
(AHcAr)": (AH5}"-E(Yoys)".(AHpi).
.,.(4)
(AHs)"
= - 467,83 kJ.(mol
C en glucosa)
(Y4)c'(^II)c
(rryJ..$H)" + (A,H)
'l
(0,719),(515) =0.79
n'' _ (0,719).(510
+ 97,il
6 - Rendimiento de electrones en biomasa:
De acuerdo con la Ecuacin (2). elrendimiento de sustrato en biomasa es: (Y,51,
= O,719
s cl
elecon dirynibl por
nnl C cn gfu.
D=+ =t^e\. (#
D=
',)
173
,r
114,9
mol C
W
cl
0,719 mol
mol C
C cl
glu
82
kJ
mol C glacosa
Donde, M,: peso molecular de las clulas, 22,24 (g c|. secas).(mol C en cl)-l;
Ag"': cambio de entalpa por la transferencia de un mol de electrones entre el
sustrato y el oxfgeno: 118,5 kJ.(mol electrn)-1 (Tabla 3.4); Yr,ro: factor de
rendimiento de los electrones dispoibles, (4 g cl).(molelectrn)-1; l-r: grado de
reduccin de la biomasa: (4,59 electrones disponibles).(mol C en clulas)-1.
rlr
(as')cx
(Ago)"* + D
(Ag')cx = 94,4.fr *
86,6
.,.(Ecu- 3,481
519,9
519.9
n- = -------l-lJL" 519,9 + 114,9 = O-[lB.
174
Solucin:
1- La ecuacin de crecimiento (Ejemplo 2.3), es:
C6H12OB
.,
...(1
CHr,s4Oo,3No,2s
+ 0,576
3-
El calor de reaccin,
(Ecuacin 3.56), es:
(AHB).
Donde, (Yx,.l.
CH3O.,5
+ 0,305
CO2
...121
(AHslc - (Yr/slc.(AHp)6 -
(Ys)6.(AHx)c
..(31
(Yp,s)"
(AHslc
: l- 2807til : - 467,83
(AHplc
f^ :
4"
kJ'(mol C en glucosa)-l
C en etanol)''
CH1,e4Oo,3No,2s
4,59
(AHx)c
(-
11
2,2kJlelectrn){4,59 electrn/mol O
- 51 5 kJ.(mol Cen
cl}-1
175
AHcAr)c
(AHs). - (Yp/s)c.(AHp)c
(AHnlc
(Yx/s).{AHxlc
"'l4l
(AHcAr)c
: -
: - 12,27 + t- (515).(0,119)I
Cl-1.
t^
_
(Yxs)c.$Hx)c + (Aa""
(0,119).(515) =on??
- vr(,go
tv
| vdBtc
0,119 mot
y_
lDc-
176
O,ffigcl
por nol C en glacosa
elctrn disponiblc
: , '*
,=+=(as.)u#
=
r4
H
- 9.s
- .(2''24 - 4.s9) = - 2TG.52
nolCcl
\0,66
)
rr =
(Lgolcx
(A,g")"* + D
(s")cx = 9l,4.Ix *
86,6
.....(r. 3.18)
,,=gffi=o'65
519.9
177
PROBLEMAS
3.1
3.2
ES:
Glucosa
..,(1)
't78
+ 2CO,
,,,121
Glucosa
,,,(21
sin oxidacin neta, y estos dos moles de ATP representan el mximo rendimiento alcanzado (fosforilacin a nivel de sustratol.
La Ecuacin (1 ) puede descomponerse en dos procesos:
a- oxidacin de la glucosa: Glucosa
+ 6 O, ---> 6 CO2 +
6H2O
3.6 Calcular el factor de rendimiento de glucosa en clulas, basado en la energa total disponible en el medio mnimo, a partir de la siguiente ecuacin estequiorntrica del crecimiento anaerobio de Saccharomyces cerevisiae,lBattley,
1960):
CBH12O6
glucosa
O,12 NH,
0,59
Cl=ll,7sOo,ouNo,,
clulas
+ 0,43
CaHBO3
+ 1,3 C2H6O
etanol
"1,54
CO, + 96,3 kJ
glicerol
y el factor de rendimiento
y.
3.5
28
24
20
16
12
a
4
o,t
o,2
0,0
0,4
0,6
0,6
0,7
0,a
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I r :':
1184
CAPITULO 4
4.1
TNTRODUCCTON
Las enzimas son protenas elaboradas por las clulas a paftir de aminocidos.
Cada enzima es una molcula especializada catalizadora nicamente de un tpo
especfico de reaccin qumica. Secuencias de reacciones enzimticas son
185
Tabla
4.1
Ca2t
Colagenasa
Lipasa
Nucleasa micrococal
Co2 *
Cu2* (Cu*
Fe2* o Fe3*
Galactosa oxidasa
Catalasa
Citocromos
Peroxidasa
Mg3t
Mn2*
Arginasa
Nat
Zn2*
Alcohol deshidrogenasa
Fosfatasa alcalina
Carboxipeptidasa
186
4.1.2
4.1.3 Clasificacin
Crueger y Crueger, 1984, clasifica las enzimas disponibles comercialmente en:
- Enzimas industriales tales como amilasas, proteasas, glucosa isomerasa, lipasa,
catalasas, y penicilin-acilasas.
d;l hidrgeno.
Tabla
4.2
4.1.4 lmportancia
industria!
Tbbla
4.3
Nombre
Aplicacin y comentarios
Fuente
Diastasa
Malta
Takadiastasa
Aspergillus
orizae
Amilasa
Bacillus
subtils
188
Fuente
Aplicacin y comentarios
Amilasa cido
resistente'
Aspergillus niger
Amiloglucosidasa
Rhizopus niveus,
A.niger. Endomicopsis fibuliger
Produccin de glucosa
Tripsina
Pncreas de
animal
Pepsina
Estmago de
animal
carnes
Estmago de
Usos mdicos
a-Ouimiotripsina
animal
Cuajo
Estmago de
ternero
Manufactura de queso
Proteasa del
pncreas
Pncreas de animal
Papalna
Papaya
Bromelina,
Pia, higo
ficina
Proteasas microbiales
Proteasa
A.
Proteasa
A. niger
Proteasa
B. subtilis
orizae
ptimo: 7,O
Continrla
189
Fuente
Aplicacin y comentarios
Proteasa
Septomyces
gnseus
Varidasa
streptococcus sp.
Uso mdico.Lederle
Prof ibrinolsina
Penicilinasa
B. subtilis,
B. cereus
Glucosa
oxidasa
Aspergillus niger,
Dee O, Dee G
Glucosa
tsomerasa
Actinoplanes
missourensis
Penicillium
chrysogenum
Hialuronidasa
Lipasa
Animales,
bacterias
Uso mdico
Pncreas,
mohos
lRhizopusl
Citocromo c
Brocades
Levadura
lCandidal
Catalasa
Esterilizacin de leche
Oueratinasa
Streptomyces
fradiae
b l-ostodi-esterasa
Acido adenlico
A.
orizae
deaminasa
Contina
190
Fuente
Aplicacin y comentarios
Cuajo mcrobial
Mucor sp.
Naringinasa'
Aspergillus niger
Laccasa
Coriolus
versicolor
Secado de lacas.
Celulasa
Trichoderma
koningi
Trichoderma
viride
lnvertasa
Saccharomyces
cerevisiae
Pectinasa
A. orizae
A. niger
A. flavus
4.2
ACTIVIDAD ENZIMATICA
=l #L. = I'r=o
t4.1I
P: P.YS:
so'
Ejemplo
4.1 Determinacin
de la actividad de la enzima B-
glucosidasa
192
se
Calcular: (1) La velocidad inicial de la reaccin; (21 La actividad de la Bglucosidasa expresada como la cantidad de enzima que produce 1 (pmol
glucosa)/minuto.
Tabla
4.4
Tiempo en minutos
0, 05
0,23
0,38
0 ,52
t-, 03
10
15
30
Affi
4.2.2
*3
= (o,o4sg).(so
= o,o45e
n[
##f
= 2,288
W,
Nmero de recambio
193'
: ,.
_ Glucoso producido,
enzima
micromol/ml.
^c-'
0.5
o.4
0.3
Q.2
0.1
10
15
Ejemplo
4.2
Rcconbio
(ticmpol.(noUcub de ewimal
194
mal s+rao
minuto.mol etuims
3@.333,3
Reaccin
lntervalo de los
valores de /V informados, entfe 0 y
370C
Ribonucleasa
- 2.10-3
Tripsina
Hidrlisis de pptidos
3.10-3
- 1 .102
Papaina
Hidrlisis de pptidos
8.10'2
Bromlna
Hidrlisis de pptidos
4.10-3 - 0,5
Anhidrasa
carbnica
Hidratacin reversible
de los compuestos de
carbonilo
9.10'1 .6.105
Fumarato
L-malato
Hro
hidratasa
fumarato +
.103 (hacia la
derecha)
quierda)
Catalizador sHo
Reaccin
so2 - Al2o3
(impregnado)
Destilacin
fraccionada
del cumeno
3.10-8
2.104
420
Zeolita
decationizada
Destilacin
fraccionada
del cumeno
325
Deshidrogena-
7.10-11
102
vro,
10e
108
Temperatura,
oc.
25
25
25
350
xeno
Cu.Au
tratado
cin de HCOrH
Alcl3-Al2o3
lsomerizacin
de n-hexano
Deshidrogena-
(lquido)
2.107
3.1010
1.10'2
1,5.10-2
25
327
25
60
19s
4.2.3 lnfluencia
enzima
depende de numerosos enlaces dbiles no covalentes. Por esta razn la enzima
tiende a perder su conformacin o a desnaturalizarse, La actividad especfica de
una enzima es perturbada por factores ambientales como pH, temperatura, los
esfuerzos cortantes, la intensidad inica del medio y el estado de la enzima en
el reactor (en solucn, o inmovilizada sobre un soporte). Estos factores deben
4.2.3.1
pH
4.2.3.2 Temperatura
too
Actividod relativo, %
ao
60
40
20
o
17
pH
ft
= .r{.exP-
(#,)
f4.21
197
Ejemplo
4.3
La
- La ecuacin
198
::t
lnt, = ln,lr-{fi
lntz=ln
por tanto.' Ea
EA
"- nJ,
2,303 (og
&-log tt)
R.. IT1 +
-
(1t
T2
Figura
7.9
t7
1.5
2.9
3.
3.2
3.3
3.4
3.5
3.6
J.7
3.8
k, : 2,4i
1lTl-
3,25.10-3
: 2,1'
1lT1
3,61.10-3
log k,
199
: ''
= - 15.956
8,314J.mo|-l.K-1, *
J.mol-1.
log
kz: 2,2i
1lT2
log
k,: 1,7'
llT
j:
2,985.103
2,94.103
de
activacin:
E=-212.746J.mo|'1
La energfa de inactivacin
4.3
de
Eo:
15.955,9 + 212.746
228.70"1,9 J.mol-l
200
s--k-->
t4,31
ES
S+E (--kr--
ES
t4.3.al
ES ---k.--) P+E
t4.3.bl
Donde: S, P, ES, E, indican el sustrato, el producto, el complejo enzimasustrato, y la enzima respectvamente. La ecuacin anterior supone que cada
molcula de enzima acomoda slo una molcula de sustrato, aunque hay
moiculas de enzimas con varios sitios activos disponibles para ligarse con
mriltiples molculas de sustrato,
Sise supone que la ecuacin t4.3.al est en equilibrio, o en otras palabras, que
equilibrio se logra rpidamente si se-compara con la menor velocidad de'la
reaccin [4.3.b], la velocidad de la reaccin [4.3], es:
'el
rs=
-#=rr=#
=kr(cs)=r
14.41
eo=e+(es)
t4.51
=fs*fs
t4.61
201
fr. en la Ecuacin
14.41, se obtiene:
r = h.e"-fo
f4.71
e.s=k_kc,s
t4.81
K1
_
t,-
t4.9t
fts*s
Vx's
t4.101
Kr*s
vv = 4-e"
14.11'-L
202
t-Vu
f4.12t
=Vu's
Ku
t4.131
20
oo
ao
60
40
20
12
I
6
3
concentrocion de sustroto, mg/ml
En la Figura
4.4 se representa
15
203
1 *Ku
r - Vx Vus
4.141
!-Ku * 1"
rVaVM
14.151
r=Vu - KuL
s
t4.161
valores menos exactos. Por esta razn no debe utilizarse, con estos datos, el
ajuste de valores por mfimos cuadrados
errores.
205
Ejemplo
4.4
Solucin:
- Los datos de la Tabla 4.6 son representados grfieamente^en las Figuras 4.4,
4.6,.4.7 y 4.8.
- De
206
Tabla 4.6 Datos de la hidrlisis del almidn con o-amilasa, Dawes, 1967 r:
velocidad relativa de la hidrlisis; s: concentracn del sustrato, mg/ml.
1/s
1lt
s/r
r/s
10r_, 0
0, 080
0,124
,2
,4
90, 0
82 ,7
0,089
0, 111
0 ,]-23
0, 158
,04
8,74
10,27
79,1-
0, 178
io,g
0,,234
0,28].
Q ,427
1,000
0,0099
0, 0L01
0,0108
0, 0111
0 ,072].
0 ,0L26
0, 0141
0, 0154
0,0193
L2,56
L7- ,24
9, OO'
8,)-2
6,33
5 ,61
4 ,28
3, 55
2,34
1,00
98
92
55,0
51 ,7
28 ,8
0, 114
0, 097'
0,090
0.076
0, 071
0,050
0, 055
0, 045
0, 035
0..n0347
,.#f
1r-, 08
13,05
7-4,)-O
].6,56
]-8,26
22, Q9
28,80
ii
4.6
Representacin grfica de Linewaver-Burk de los datos experimentales obtenidos por Dawes (1967) en la hidrlisis del almidn con a-amilasa'
Figura
1,/,
o.o3
o.o2
o.o I
-o.4
-o.2
l/Km
0.4
o.2
1/s, ml/mg
o.6
207
1925, aplicable al complejo intermedio, ES, es vlido para reacciones en un sidtema cerrado, siempre que so > >
eo. La reaccin 4.3.a, no alcanza elequilibrio sila velocidad de descomposicin
del compleio ES, hsta producto y enzima libre, es rpida, comparada con la
veloeidad de disociacin de ES, hasta E + S.
El modelo propuesto por Briggs y Haldane,
4.7
0.
l4
0.12
o.1
--i-...--
0.08
0.06
0.04
'm/Vrnax
o.o2
o
-2
-4
- Km
208
4
6
s, mg/ml
to
12
14
o,3
Si;ustrato,
Producto
Enzima,
Enzima, Complejo
Cometeio ES
o,o3
210
t4.19I
14.1 11,
Klt
kz*h
=
k"
= t. + --:
"t,
k1
14.201
Ky,
es igual
de
ks;
"
dS
Vx.s
dt
Ka*s
*, ,.(|) .
t:
".
0, s
-s=Vil.t
so,
Yt : t, con s = 9, s
f4.211
211
fabla
4.7
:MENTEN,SIM
'
S:
SO
ES
P:
PO
ESO
DYNAMIC
E: EO-ES : Balance de materiales
:Constantes
K3-VM/EO; K3:VM/EO:1
K1
:10/(0,1)=100
: Ecuaciones diferenciales
K2*ES-Kl *E*S; Ecuacion 14.171
ES' : K1 *E"S-(K2 + K3l"ES: Ecuacion t4.181
P' : K3*ES: Ecuacion [4.4]
S'=-1 *P'
S':
212
S VAL
Tabla
4.8
1O REM MENTEN.BAS
160T2:1OO
170 REM lntervalo de impresion de los resultados: T3
180T3=10
190 PRINT "MENTEN.BAS"
2OO PRINT
210
220
230
240
250
260
270
280
PRINT
PRINT "T: variable independiente (tiemo, minutos)"
PRINT "Valor final de , 2="T2
PRINT "T1: paso de integracion, T1 =";T1
PRINT "T3; intervalo de impresion, T3-";T3
PRTNT
213
: .;
'
214
:0
690 NEXT T5
7oo rB: 1 :GoTo 720
710 REM ECUACIONES DIFERENCIALES:
72O
73O
ll2l:
K1
*(E0-O(2))'O(1l-lK2+ K3)"O(2)
790NN=NN+1
8OO RETURN
S + E---k,---)
ES
S + E <--k2----
ES
ES--k3---> E +
4.221
ES(---ko--. E+P
La velocidad de esta reaccin es:
=-'i ds
dt' =h.s.c-k.@l
t4'231
215
14.24t
i -
i;
,:',
'.
.n::
Ecuacin
La ecuacin de balance de materiales para la enzima,
'1
I
'
[4.5], es:
(es)+:@o
Y, de acuerdo con las dos ecuaciones anterores:
14.25t
r =tq.".[r, VN
Kx
1i
Donde: V, =
(rs)]
- k.(*1"''
VP
jltrr
f4 26t
KP
P
--'+
Ka KP
[Ecu. 4.1 1]
kr.eo
-K*-\:
Vr=fk^ .Yu
h
fEcu. 4.201
K, =
k.
t.k"
t4.271
216
Eiemplo
4.5
fructosa.
El reactor se alimenta, durante su instalacin, a azn de 6 ml/s,.con una mezcla
:
compuesta por 36 Yo len peso) de glucosa pura (densidad de partcula: p,
o/o
dela
1544 kg/m3, y agua pura (p : 1000 kg.m3) encontrndose que el24
glucosa es convertida en fructosa.
Solucin:
1. Velocidad de la reaccin.
La isomerizacin de glucosa hasta fructosa es una reaccin enzmtica reversible
catalzada por la enzima glucosa isomerasa. En condiciones de equilibrio la
- Vp.p
Kr+s+P
Vu.s
En el equilibrio,
r = 0, por tanto:
sE.Vy
= P6'Ve
(1)
l2l
So:S+P
(3)
217
.\:.:'j6.
r \'-,..,.
Kr.+ ,
-',
,=-J"-.["-o.(",-")]
\
' Kx+sot
\,'
ds
dt
vx
Klt *
so
,:
.ls. -
l.
(5t
c)
Donde:
i.
Q=-:-=
P"
Adems: s
so, ofl
t:
0; s = s, o t
tI
: t.
Portanto:
,,trx *.s,
(6t
,,
h!'--" =:'',
s.b-c Ko+so t=k,.t
2.'volumentai'tn
r = f,.a2t
'218
.'i,:.'::i,
.1.,
t,
r' | 1'f-l
f.{o.geslz.o,
, :; ".-
..
zs = 2,41.10-s ms
3. Tiempo de retencin
v
t=L=
2.41
-"'==4O1
6.1n-3
.7
s,
0,38 kg gfu.
*
1w ks.m-3
-o
"-=
0,64 kB agua
looo kg
= g.73.16-4 m3
22-s
0'S ,=412,3kg.^-"
g,7g.lo-4
6):
:.
O,52
's= ---:---l
-p. 0,48 = 1,08B '
=k'.4O1,7
:;
b'v,
K*+so
Donde
- 2,OOS| I
L,
, = 4123 g.(litrol-r
219
vy = o34
d;
412,310,9
))
458,1
"
o/o
de glucosa en fructosa:
0,6.so:
rn@
.:"@f=l't*'I,--'t
r = 1038.34
Kr:
Q = 2,g2
=tz)sto-s
141 litres''
oa
. 10-s litro
9. lnactivacin de la enzima.
.i
--
*Ko = -
ko.t =
o'7?.3'k'
11
tp = 5,4.10-s
Ko
- tp.fl)
(ilo\-1
220
4.6
1. Velocidad de reaccin.
La ecuacin de velocidad aplicable a este proceso es la Ecuacin (6) del Ejemplo
))
Krrr
K, = 0,9 g.litro-l; V,
,t'=0,7196t t=2,49s
221
S.fiempo de reaccinco[rgspondier-e a so =
:i
Kur
o,9
s.l{1ro]r1.
,'.1,ro='k,.t=#*#,
.
k'=
0,3958
,,_'
t = 4,53 s
1,792 =
*,., = 2'o9-'o'lP.,
0,9+9
t'=0,07196i t=24,9s
,,: .,
1OO.K^
:,rl
-r
1,7e2=fr'.r= 2'ffi';0#.,
9O g.{litro)
i"i
.:!
1".
i.
'
a ':; :
. t,
k'=7,837.1O-s; t
r,
=228,7 s
,1_::-.
i..,
.,
= 2,083'0,u2
+
0,0
412,N
,,
x'=t..,7?7,{-3i r = 10,3#s
Este tiempo de reaccin es igual J,tempo de retencin en el reactor de flujo
continuo descrito en el Ejemplo anterior.
.tr.ir
tz?2
_l
competitva
ES
E+
ES
I (==:)
--k-->
EI
P+
KS
t4.281
Donde, S, E, ES, l, El, P: representan elsustrato, la enzima, el compleio enzmasustrato, el inhibidor, el complejo enzima-inhibidor y el producto, respectivamente; K., K,: constantes de disociacin de los complejos enzima-sustrato y
enzima-inhibidor, respectivamente.
La ecuacin de balance de materiales de la enzima es:
co=e+(cd)+(es)
t4.291
1--fB*fa*Fs
fr=
e
eo
ifer=*rrr= ?
t4.301
fs=1-(fw*f'')
223
=-ds
.dtd
.:
. -:,
,.1t
,ifs
,
=
Its
=+=k.co.f6,
O.ls,
:.r'
i'..
tF.r =
: !
,.)
l,
Urr,
De
.\
fs*fn=f"-l
'o
'u 'D (rr" *-!-l
Kr)
t4.321
'i
,,!
t4.33I
+- s
x.
i
:- ,-,.*
,t
\i j arr"-il
:t_
'it-
r = k.eo.fu =
li
".r,
Kn"
224
Vv's
cr.s
s+K*
(r
,)
! *; (' .)
f4.341
Donde,Vr:k.eo,(Ecuacin4.14t.; Kr.:constantedeMichaelis.modificadapara
inhibicin competitva. Elefecto de la inhibicin competitiva es aumentar el valor
de la constante aparente de Michaells, sin alterar el valor de la velocidad
mxima, Vr, de la reaccin.
no compettiva
S + E (::=)
E+I
(===)
-" ='
ES
EI
?
+.e
EIS
rA)
Ks
t4.35.a1
t4.35.bI
Ks
t4.35.c]
t4.35.dI
eo=+(ci)+1s)+(eis)
t4.36I
225
Va's
.t| +-
Kr Vaxc-s
Ks*s - Ks*s
a4.371
Donde:
14.37.A1
Donde, Vrr.: es la mxima velocidad de la reaccin. La inhibicin rio compettiva disminuye la velocidad mxima, Vr, por el factor (1 + i/Kr) sin afectar el
valor de la constante aparente de Michaelis.
Ejemplo
4.7
226
10, 00
,0
7! ,4
62 ,5
7'7
7,70
5,26
4 ,55
3,33
2 ,0,4
58, 9
57 ,4
38,9
1,89
L,67
1/s
1l
0, 10
0, 13
0,19
0,22
0,013
0, 014
0, 016
o,ol7
0,30,
0, 019
,49
o, 13
0,50
,0
34,2
37
,026
,0 , 027
0
,029
,.?o
1,/,
o.o3
o.o2
o.o1
o.2
-o.2
7
248
0.4
/s, m//mg
,i
El intercepto sobre
Krvr
3,57 mg/ml.
4.34, es:,
i'
Krc
=r,.(1 .
t ={s,sz).(r.?)
Kt = 8,34 nglrnl
Tabla
33,30
20, 00
L2 ,90
10, 00
6 ,06
3,,.64
,82
,84
1,60
t ,43
I
l_16 , 0
109,0
L02 ,0
85, 5
'7]- ,5
55,6
4'l ,6
35, 5
32,2
29,5
1ls
0,030
0, 050
0 ,077
0, 100
0, 165
0,275
0.355
0, 543
0
,625
,599
llt
8,62,L0
9,17.10-3
9,80.10-'
11,70.10-3
13,99.10-3
17, 98 . 1o''
21, 00 .10-'
28, 09.10-3
31, 05.10-3
33, 90 .10-3
229
1/r
o,o3
o,o2
o.o
o.2
0.4
1/s, ml/mg
4.11 puede observarse como la presencia de a-dextrina origina un
mayor valor de la pendiente y un menor valor del intercepto sobre el eje l,/s, sin
En la Figura
afectar el valor del intercepto sobre el eje I /r. Por consiguiente, la inhibicin es
competitiva. El intercepto sobre eleie l/r, de las dos curvas de la Figura 4.11,
es (1/V") : O,OO77. Por tanto: V,u : 129,9 (sin inhibidorl.
230
S+
E--->
S+
ES
--->
ES
SES
t4.38.a]
kl
k2
ES -k-->E+P
t4.38.b]
t4.38.c]
Donde, S, E, ES, SES, P: representan el sustrato, la enzima, el complejo enzimasustrato, el Complejo Sustrato-enzma-Sustrato, y el producto, fespectvamente;
del
n=c+(es)+(ses)
't4.391
obtiene:
,r-=f*frs*fses
231
lsl
r Kr.V*
Vx
t4.431
d, =o
ds
--
"
(+
.i. r)'( 3 . +)
Paa: = O :,s=.scn
ds
k1
V'-:='s2k2
Por
4.4 REACTORES
14.41
ENZIMATICOS
233
t4.46t
F
Donde, V: volumen til del reactor, litros; F: caudal, (litros)/minuto.
Ejemplo
4.8
obtenida
fructuosa:
C6H12O6
sacarosa
(PM : 342,31
glucosa
(PM.
180,16)
c6H12o6
fructosa
(PM : 18O,16)
14.471
235
: /'
'Vn
0'99 gi(litro'minuto)
K, : 123 gr/litro
Kr = 177 gllitro
Los programas INVTSAl .SlM e INVTSAl .BAS producen resultados similares, los
4'13'
:IVTSAl,SIM
:Cinetica de la invertasa a bajas concentraciones
:de sustrato. Modelo de Michaelis-Menten
:Simulacion de un reactor ideal de flujo tapon
CONSTANT
CONSTANT
CONSTANT
CONSTANT
CONSTANT
CONSTANT
CONSTANT
CONSTANT
KM
VM
:0.99: g glucosa/(litro.minuto)
23: g/litro
:'177 : g/litro
V0=4000: Volumen efectivo del reactor, litros
P0:840O: Demanda de producto, kgidia
S0 = 80: g sacarosa/litro
T0 = 0.1 E-4:Tiempo inicial, minutos
Kl
CINT:
O.O1
SIM
INITIAL
S=S0
V: V0
T:TO
DYNAMIC
S'= RS
*2lKlll: Ecuacion de Andrews, 14.421
RS =-VM*S/(KM + S + (S*
X:100"(SO-S)/S0: Porcentaje de conversion de sacarosa
P :2* 1 80. 1 6"(S0-S)/342.3: Producto, gilitro
236
F:Y
PD
VAL
vAL
TFIN =
NOCI
600.00
1000.0
4.12
1O REM INVTSA1.BAS
VM:,99
110K|:177
100
120 P0:8400
130 V0:4000
140 S0:80
150 REM PASO DE INTEGRACION: T1
160 T1 :.01
170 REM VALOR FINAL DE LA VARIABLE INDEPENDIENTE: T2
180 T2:600
190 REM INTERVALO DE IMPRESION DE LOS RESULTADOS: T3
200 T3:20
210 PRINT "INVTSAI .BAS"
220 PRINT
230 PRINT "Cinetica de la invertasa a bajas concentraciones de sustrato"
240 PRINT
250 PRTNT
260 PRINT "T: variable independiente (tiempo)"
270 PRINT "Valor final de , ) =";f 2
237
: '
238
"
;CS;SPC(3)
840 NN:NN+
850 RETURN
4.5
; NUM;SPC(31;' PD
"P
239
25
200
150
'1
00
50
100
200
300
Trempo de rele
4.5.1
nc io
400
n,
m in
500
utos
o imidazol. Otra
la unin covalente con la enzima, son los soportes naturales tales como
la
240
4.13
100
Co ncentracro n, g/ lrtro
'r
00
200
300
400
50c
241
242
/Vr=fr./.(s,-s)
14.481
r"
K".c.(so - s)
Yu.S
=
Ky+
f4.491
1-z
B.z
DA =1+B.Z
t4.50I
243
Donde
Z=~;
so
Donde, el nmero de Damkhler, DA, es la relacin entre la mxima velocidad
de reaccin y la velocidad de transferencia de masa.
En el caso de DA < < 1 predomina la velocidad de transferencia de masa sobre
la velocidad de la reaccin y la reaccin global es controlada por la reaccin
enzimtica:
[4.511
[4.521
TJ =
V.11.S
B.Z
K 11 +s
1 + B.Z
B
1 +B
V.w.SB
KM +ss
[4.531
244
4.5.4
4.5.5
Balance de materia
(-
4,-R1^ (
#
"
=
r"
#a-r-n'z),+df,)
(4.n.R2.dn)-r,
f4.541
,,.[^'.4)
'I d/r*.*r l*'.*)l
\ di*l=R2-rs
dR
245
Y en el lmite cuando dR
-.)
(n'.e )=n,..-
D-.d
"dR\
dR)
'' (#.*#)=,,
t4.s5I
de
Michaelis-Menten
ta velcdad de consumo de sustrato, si se supone que la cintica ntrQseea de
'
Vu=e.P.g
:':
d"z
dtr
246
z - n?.r,
*zT dz
= 9.2
dT
1+B.Z Ds.s,
y se expresa
el
r4.s7l
Z=
B= s
T=R
KL'
Ro
( v" \'o
3
R'
l\Ds.rf
t4.s8l
(4\=o
\dr )
. en r=R"
Ro
.'1
Z=1 ,enT=1
Donde, R": radio crftco; la concentracin de sustrato es
0 en R
Rc.
vn=+''(#)*-o,
t4.59t
3.s..Dt (2 \
vn=_#l=
|
^ R \drltr-t
t4.601
247
Yy.o
Kr+so
Yx.Bo
1+Bo
t4.61I
Ro'.v* nl .vu.n"
t2=g4.Kr=
e
g-Dr*,
Vv=
9.S2.Dr.s,
f4.621
n3-n,
"-
*?"4
t4.6sl
(**),=,
14.64t
fl
'*H"]
248
4.9
Solucin:
La Ecuacin 14.571, ecuacin diferencial no lineal, se resuelve convirtiendola en
dos ecuaciones diferenciales simultneas de primer orden:
dY
9.2.02
{T
-=
1+B.Z
- 2.r
T
t4.651
dz
dT
=y
R^
.sRY=O,'RsoR
enT=-!i Z=ZO=-2,cn T=--Y=TO
Z=1,en T=1 ,Donde: Z=!so
Donde R": radio crtco; ZO
Sc/S".
249
-?
Thiele, Q, y de la relacin BO
Tabla
4.13
1:THlELEl.SlM
2:
3
Enzimas inmovilizadas
10 1 SIM;INTERACT;RESET;GOTO t
11 INITIAL
12 Y:0
1
T:TO
14ZO:ZO+AF
'5 Z:ZO
16 B:BO
17 DYNAMIC
250
".
,i
de
sustrato
t4.66I
KM
\\r
\
\:\
\\
:\ \
!\
Ll!!j.::.i:
-t--l
::ail
l"i"i"i'l{
o,ot
o,o1
o,1
-E-BO-t
252
to
Modulo de Thlele
--+-8O.6
-4-AO -tO
100
14.711
t''e*),,=,,
'
4.5.8
_ 3.0r.coth (3.Q,)-
14.721
la
rs
t4.73)
KM
*2
d.R2,
ds
-Ko =O
.R dR Ds
,q,1+l
:'i, i
s > 0. Donde la concentracin de sustrato s est limitada a medida
queRtiendeaceroys: soen R: Ro; Ro: radiodelapartculaesfrica. Por
consiguiente:
,
Vlida para
1 K".R:
14
s, 6 s,.D, l,2
254
_'.| )
)
-,
[4.75t
EI radio crftco R" por debajo del cual s vale cero se obtiene mediante el
reemplazo de (s/s") : 0 en la ecuacin anterior:
6.s-.4-
&=R.11-----s-i
r,''u
\12
I
f4.76t
14.771
14.78t
f,.".nl,.x,
=1-l-t
rR
r
t4'7el
r=1_['H)-
t4.801
PROBLEMAS
255
20
100
40
80
60
.Tiempo de reoccron, mrn.
120
140
4.2
---) ES
ES --- k, ---) E + S
E
+S
---k,,
ES ---kr---) E+P+O
E+
EP
'
-!
P---ko---)
--- k,
---)
EP
P
r
256
4.3
+ S ---k,
---) ES
ES --- k, ---) E + S
ES --- k. --) EP + O
EP --- ko ---) E + P
E + P --- k,
---)
EP
Donde, E, S, P, O: indican enzima libre, lactosa, galactosa y glucosa rbspectivamente. En este modelo primero se libera glucosa a partr del complejo enzimasustrato, y luego se libera galactosa a partr del complejo enzima-galactosa.
4.4
257
mmol/litro
mmol/{litro.minuto)
Sin inhibidor
3,2
4,9
6,2
8,0
9,5
111
148
r43
766
200
Con inhibidor
59
7l
91
L11
r25
4.5
Menten: a) por el mtodo de Lineweaver-Burk; bl por el mtodo de EadieHofstee; c) por el mtodo de Langmuir-Hanes; c) Dor elmtodo de Dickensheets
et al., (Ecuacin 4.43l..
Realizar un anlisis de regresin con los ltimos 5 datos de la tabla y calcular la
constante de inhibicin, K,, de la_ecuacin de Dickensheets et al., 1977, (Ecua-
cin 4.43)
258
Bailey,
J.
Dixon, M., and Webb, E. C. (1964), "Enzimes," 2nd. ed., p-55, Academic
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.:
:
:
!.
lbodvyard": J. :d3 985).,,,So .." lmmo.Dilized ag$s and,,e,BzrpFs.r, 4q. practcal
approach," J. Woodq#rd, led.l.il[hr|{,ess, W*hing@r,. epio3 - 12.
.
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,,il,l,..n..',iofi...l,1,.,..
f_r '
2"62
262
'tlj
CAPITULO 5
A medida que las clulas crecen se acumulan en el medio los productos finales
del metabolismo celular, Frecuentemente, estos componentes alteran el pH y
la reologfa del medio, factores decisivos sobre la actividad celular y los mecanismos de transporte. Adems, la poblacin celular en crecimiento es heterognea,
y en cualquier momento, en cada punto del fermentador, coexisten clulas de
5.1
La masa de una muestra se expresa como biomasa seca, esto es, la masa
residual obtenida despus de.someter la muestra a, un procedimiento estandarizado de secado, por la dificultad tcnca para remover el agua adherida a la
superficie de un biomateral, sin retirarle tam.bin el agua interior.. La densidad
de un biomaterial es la calltidad de biomasa seca presente, por unidad de volumen de biomaterial hmedo. Generalmente, el,agua constituye aproxinladamente el 8O% de la masa total y la densidad verdadera de un biomaterial, o
sea, la masa total por unidad de volumen de biomaterial hmedo, es similar a la
del agua. Por consiguiente, la densidad de un biomaterial es aproximadamente
200 kg.m-3 y su volumen especfico es aproximadamente 0,005 m3.kg-l, (Fredrickson y Hu, 1989).
5.1.2
264
5.1.3 Velocidad
especfica
lx
1dx
xdtx^
t5.11
1.& =1.r^
xro
5.21
to,
h-1;
1b
1
u,=;'=;'',
i
4.
t5'3I
Donde, pr: velocidad especfica de formacin de producto, hora-l; p: concentracin,del producto, (g producto).litro-1; rr: velocidad de formacin de producto,
g.litro-l.h-l.
266
Ejemplo
5.1
En las FigurEs 5.2, 5.3 y 5.4, se presentan los resultados obtenidos en una
fermentacin alcohlica, Borzani, 1975. Calcular las velocidades especfficas de
crecimiento de levadura, consumo de azcar y produccin de etanol en el
tiempot:5horas.
Figura 5.2 Representacin grfica de los resultados obtenidos en una fermentacin alcohlica. Variacin de la concentracin de levadura, Borzani, 1975.
X, g/titro
4s6'
Tiempo,
X vs t
:h
'--- dx/dt
3,45 g.litro-1.
La concentracjn de clulas en el instante = 5 horas, es: x
Figura
la
velocidad
de
crecimiento
De acuerdo con la Ecuacin t5.11y la
[5.2],
de levadura es:
dx _ (3,9
dt
(1t
litro.(6
267
i1,
lrx
djf,33
3,45
0,126 -r
Figura 5.3 Representacn grfica de los resultados obtenidos en una fermentan alboh6lica.'variacin de ta concentracin de sustrato. Borzani, 197s,
34567
Tiempo, h
S ys t
---- ds/dt,
rt'=#
|
( .
=2' -t
,'1,-
268
(3)
t5.4I
k.x
seca).litro-r; r*:
p* > >
!x,
a la Ecuacin
[5.4].
v-=+*=*u"o
x=xo.en t=tue i t,=x,n t=t
Por tanto:
= r,.Xp
15.51
[pr. (r - tun))
- h")]
15.61
t : t; No:
270
dM
Donde:
b. =
# i
bz =1.(36.n
.pul'F
t5.81
Portonto: M=(
"r^-?)t'
5.2
5..2.1 Temperatura
272
Tabla
5.1 Periodo
1
956.
Bacteria
Temperatura Periodq
Medio
oC
Caldo
37
B. thennophiTus Caldo
, 55'
BaciTTus
mycoideis
de
reprodccin
minutos
28
18,3
Escherichia coli
Cafdo
Leche
37
37
t7
Lactobacllus
Leche
37
65-
87
M. tubercuTosis
Sinttico
37
192 -
932
Rhizobium
Japonicum
Sales minerales
+ levadura
25
344 - 46].
12,5
acidophiTTus
Extracto
manitol
StaphyTococcus caldo:
37
2'7 -
aureus
Streptococcus
lactis
Caldo + lactosa
leche
37
37
48
26
Trepoema
Testculos de
37
1980
paTTidum
conej o
273
5.2.2 Energa
de activacin
v=A.exp
(*) -r,.r* e)
t5.9I
Temperatra oC
Gtupo
Mfnimo
Termfilos
40
45
Mesfilos
10
r5
Sicrfilos obligados
-5
-5
Facultativos
274
Optimo
55 75
Mximo
60
80
30
15
25
35
19
30
47
45
18
30
22
35
El agua es el
Algunas propiedades del agua tales como el punto de fusin, el punto de ebullicin, la presin de vapor y la presin osmtica, conocidas como propiedades
coligativas, son modificadas por la presenciade solutos disueltos. La disolucin
de un peso molecular gramo (1 mol) de un soluto ideal en 1000 gramos de agua
(disolucin 1 molal), a presin atmosfrica normal, disminuye el punto de
congelacin del agua en 1,86 oC, eleva 0,543 oC el puntb de ebullicin, y
ejerce una presin osmtica de 22,4 atmsferas, Un soluto ideal no se disocia
en dos o ms componentes, ni se asocia para disminuir el nmero total de part
culas. Las leyes coligativas solo se cumplen con exactitud en soluciones muy
diluidas,
Los efectos de los solutos sobre las propiedades del agua tienen una importancia
biolgica considerable. Asf, por ejemplo, los peces pueden permanecer activos
a temperaturas de congelacin, y la presencia en la sangre de solutos incapaces
de atravesar membranas como en el caso de las proteinas, confiere a la sangre
una presin osmtca mayor que la del fluido.extracelular rl el agua presente en
este fludo tiende a difundirse hacia los capilares sangufneos.
275
A,
I!p_
ts.10I
Donde, Pr: presin del vapor de agua de una solucin a una temperatura dada;
Pw-Ps
Pv
n+N
[5.11]
Donde, n: nmero de moles de soluto; y': nlero de moles de agua en la solucin. Cuando el soluto es un electrlito, se reemplaza z.rl e lugar de n, donde
z es el nmero de iones por molcula. Cuando el soluto no se comporta
idealmente, se reeemplaza Q.z.n, en lugar de n, donde Q es el coeficiente
osmtico.
5.2.4 Tonicidad,
osmola!dad y osmolardad
276
0,95 las bacterias no crecen y para valores de la actividad del agua, A*, por
debajo de 0,7 no crecen los mohos. En la Tabla 5.3 se presentan datos del
valor ptimo de la actividad del agua, y su Correspondiente tonicidad, para el
crecimiento de algunos microorganismos.
Tabla
5.3
optimo
Mlnimo
optimo
0,999
0,960
0,05
2,30
KlebsieTTa aerogenes
,999
0,950
o,
05
2,9O
,994
0,950
0,,28
,994
0,860
o,28
A,4O
AspergiTTue niger
,975
0,860
l,2a
AepergiTTus ansteTodilni
0,950
0,700
2,Ls
19,80
cluJa's f, de ratn
0, 99s
0, 993
0,30
0,40
SaTmoneTTa
S
neryort
Mximo
,90
,40
* Osmolalidad real
277
l,-n
5.2.5
pH
mediante la expresin:
K*=ln-llon l= 1..10-14
t5.121
frl t-l
t5.131
IHA)
En la Tabla 5.4 se presentan los valores de pH de algunos fluidos. Se observa
que el jugo gstrico, los refrescos a base de cola y el jugo de limn tienen un
pH bastante bajo.
Los cidos dbles como el ion amonio manifiestan una alta afinidad por sus pro-
278
Vet'ocldad relatlva
0,7
o,8
o,9
log.,o
pH
pK'. bg
(pK':
especie
t5.14I
Los fluidos intra y extracelulares de los organismos vivos contienen pares con-
279
Tabla
5.4
Fluido
Plasma sangulneo
7,O - 7,5
7,4
Fluido interstical
7,4
Agua de mar
Fluidos intracelulares
Msculo
6,1
Hlgado
6,9
Jugo gstrico
Jugo pancreco
1,2 - 3,O
7,8 - 8,O
Saliva
6,35 - 6,85
Leche de vaca
6,6
O'ina
Zumo de tomate
4,3
Zumo de toronja
3,2
2,8
Zumo de limn
2,3
-8
Elvalor ptimo de pH, entendido como el valor para el cual la velocidad de crecimiento es mxima, vara entre 6,5 y 7,5 para bacterias, entre 4 y 5 para
fevaduras, y entre 5 y 7 paramohos. En la Tabla 5.5 se presentan los valores
mnimo, ptimo y mximo, para el desarrollo de algunas especies de bacterias.
El pH del medio de cultivo cambia como respuesta a la actividad microbial: se
genera H* durante la demanda de NHo*; se consume H*, en el metabolismo de
NO.-; se consume H* en la utilizacin de aminocidos, como fuente de carbono.
280
Tabla
5.5
Lmite
inferior
Bacteria
Optimo
Lmite
superior
0, 5
2, o -
4,o - 4,5
5,4 - 6,3
7 -
4,2
7,O - 7'5
9,3
5,5
7'i O - 7 .5
8,
ChTorobium TimicoTa
6,0
5,8
7'O
Thermug aquatieue
6,0
'7,5 - 7,8
9,5
ThiobaciTTus thiooxidans
Acetobacter
aceti
StaphyTococcus aureus
Azotobacter
spp.
,5
Generalmente hay un valor del pH del medio para el cual la veloqidad de un bioproceso es mxma. Valores de pH menores que el mximo estimulan la velocidad y valores mayores la inhiben. Humphrey 11977 , 1 978) presenta la siguiente
ecuacin:
28'l
fi = fmax
1r,.s(r.*.8)
t5.151
r,=r,*[t
Donde:
5.3
so + s.1 .@Hl x
"2.bfl\2.,)
t5.16I
q: coeficientes de un polinomio.
282
y segregado.
Sin
']
5.3.1 lnfluencia
5.3.1
.1 Modelo de Monod
!d,
xdt
I
o
^
lLx
'ds
-
--
dt
= llu
s+Ks
dx
Yus dt
t5.1 7I
t5.181
Donde, s: concentracin del sustrato limitante, (g).litro-l ; r": velocidad de consumo de sustrato, (g sustrato).(litro.hora)-'; Yxi":factor de rendimiento de sustrato en producto, (g clulas).(g sustrato)-1; x: concentracin de biomasa, (g
clulas secas).litro 1; p*: velocidad especfica de crecimiento, h-'; /rr: velocidad
especfica mxima de crecimiento, h-l ; K": constante de saturacin, g.litro-l; K.:
283
de
organlsmo (genua)
Escherichia
Escherichia
Escherichia
AspergiTlus
Candida
Escherichia
Saccharomyces
Pseudomonas
Pseudomonas
KTebeieLla
Escherchia
KTebsieLLa
Klebsiefla
KfebsielTa
Candida
Candida
AspergiTTus
Escherichia
'Escherichia
Cryptococcus
284
Sustrato
glucosa
manitol
glucosa
glucosa
glicerol
lactosa
glucosa
met,anol
meLano
Co,
iones fosfato
iones magnesio
iones potasio
iones sulfato
gxgeno
oxfgeno
arginina
tript,of ano
tr:iptof ano
Eiamina
Kr, mg,/Itro
6,8 .10-'z
2,0
4,0
5,0
4,5
20,0
25,o
0,7
0,4
0,4
a,6
5,6 .10-l
3,9.10-1
2,:l
4,5.10
4,2.10
I
2
5, 0.10-l
1, 1 . 10-3
,9 .!0'4
L,4 .10-1
Px =
'
Ks * sn
t5.19I
bg
---IrPr-Px
= ,r.logs
- log,
t5.19.a]
es L log
Kt.
285
.)
5.3.1.3 Modelo de Contois y Fuiimoto
pll.I,jls
ts.zol
Fr=Fv
['
-"'e()
'u"'
Monod,
286
= k'(vx - F, )o
15'221
r-
k :, l/fu*Kt; p: coftstante
p:
1.
los
15.231
m y p, correspon'
Monod
t/rx
Moser
1-t/n
)- + L/n
Teissier
n/ (K")'/"
l/K*
Contois
t/ (K,.x)
Konak
k. p,
247
f5.24t
[x = ]la,
Ks*
1; Las dems
Donde, so: concentracin inicial del sustrato limitante, (mg).litro
variables tenen el mismo significado que en el modelo de Monod, Ecuaciones
f5.17 y 5.181.
5,3.3
co, conocido tambin como perfodo de latencia o perfodo lag, puede calcularse
por el mtodo de Hinshelwood (1946), o de Lodge v Hinshelwood'(1943):
tt=t-
1x
Fr
--ln
-xo
288
t5.2sI
t:
tr; x:
5.3.4
fx=
t5.261
ff=u*'*'['*t)
5.3.5
--
-ds - 1 -r-^
dt Yn,
- -dx = px.x ^
kD.X
15.27.a|
.5.27.bl
289
19 cluias)/(O
1 = L*
Vx * ko lr.s
f5.28t
Fa
Ko=Kl+K,
f5.291
290
1
il" * ("rJ.u,
IEcu.2.37l
sustrato)-1.
Figura
5.6
291
Ko, es el correspondiente al
t5.301
5.4
5.4.1
292
5.4.1.2
mg.litro-1.
293
5.4.1.3
Modelo de Andrews
'^ '-
[5'31]
'
r*K*''
Ks
Donde, !x, !i velocidad especfica y velocidad especfica mxima de crecimiento; Kr: constante de saturacin, mg/litro; K,.: constante de inhbcin por sustra-
mg,litro-1
lr,
se'obtiene
*=o=py.(,.+.*)'(_:.*)
.
De dondc
s = (K"
. Xo)'o
-:,
15-.32'l
,
'
lu
5)'o
1 + 2,1-
(r"
/
\
)
294
t5.33r"
5.4.1.4
En algunos casos el patrn de la inhibicin por sustrato difire del expresado por
la
sci
)L
= Fu-
Kt*s
Kr.(s - S.
t5.34I
Vx=Va-f,t.(p-Kz)
Donde,
0;
ts.3sl
.h-1;
295
*'*;"1'-r.r,
\
-.cx)l
cr,r:
r5.s6,
mxima concentracin de
=r"'t'[
t5'37]
ptoducto. \
y Wilkie, 1977,
\t/2
rr=rc.ll*'c
cx)I
296
t5.381
5.4.3.
Represin catablca
(,*".[r.)
t5.391
5.5
5.5.1.
y de productos extracelulares,
del sustrato demasiado grandes para atravesar la pared celular. Los polisacridos como la celulosa y el almidn, cumplen funciones estructurales en la agregaoin de clulas, y como reserva de alimentos. Los metaboltos especales como
'/
298
biomasa.
de
1:
Tipo
2:
(Yn*).r*
(Yrt*).
dx.
&
t5.401
299
1dP
=r=
rp
v,,il.! ff=vri.v*
(Yrts).""
= (Yry, ).
ds
t5.411
t5.42)
s.r
Ks *s
15.441
300
rt = x'Ky
t5.451
de
5.5.2.3
f = fr.
(Y^) + K,
t5.461
5.6
301
dt
_ Pu-b.r)
Ks*s
dsldx
dr Y*1, df
15.171
15.181
de anlisis
x=o+Y*lr Gr-")
5.47t
302
#*
l*o
ts.481
ds __
dt
+ffi[r'
* *"'(s' -s)]
Kr+s
.ds=- P, la
Jo
1. s .1Lnfi., +a.dll
'.
-t ln- =D.
.
-so
o..=
!s!.
rrr.
-c
t5.491
[5.50]
t5.511
xo
b=1
+ Yrr. s,]
+=l=: [x,
Yv*'Kr t "
t5.521
"=#["*r'r'"']
t5i53I
=(so-s)
t5.541
b-1
ts.55I
303
_1 *sa
Ks=
t5.561
b-1
t5.57I
Yr6=a.xo
Los parmetros cnticos de la ecuacin de Monod,
/ y
Ks, no pueden
- Michaelis-Menten
dP
d,
fx's
_-,r- - Kr*,
t5.581
- Monod
!d* =! 'fx=
xdt x
lr. s
Ks*s
t5.591
R2=
(n.E;.r - E.Ey )2
I n.Ex2 - (E* f )l".Dy' -(Ey]
15.601
Donde:
-_ln(1
+a.d)
t
304
t5.61I
t5.62I
et al., 1983.
El progiama C:\GWBASIC\MONOD.BAS, resumido en la Tabla
5.12, constituye
un ejemplo de la aplicacin del mtodo integral de anlisis de datos en la
evaluacin de los parmetros cintcos de la Ecuacin de Monod.
305
- El procedimiento
polinomios de la forma:
t5.63I
t: variable independiente.
r, y de la velocidad
de
- Lineweaver-Burk:
1_ 1 *5r
lL Fx Vus
ts.64l
las
- Langmuir:
sKsl
l
306
Va
+-.s
Fu
ts.651
- Eadie-Hofstee:
l=prr- fs .tr"
t5.66I
Ejemplo
de ra Ecuacin
de Monod a partir de datos experimentales
.5.8
/
f
ABCDEF
dx/dt
LD-Z
.o,52
q. 86
r;19'
l;1r3
t.74
2,06
2,37
2,48
15,54
L9 ,25
22,og
23,07
L7 ,43
5,40
L,O2
7_
22,5
28 , q
35,3
4L,L
48 ,2
53,0
54,4
54,5
60,5
,2
36,5'
25,5
11, 0
3,1
0,4
49
dx/dt
s.promedio
SPLINE
15,90
,63
22,2s
23,92
20 ,,20,
9,a2
1_,66.
54,90
L9
42 ,85
31,00
1,A,Zs
7 , 05
7,,15
,2
OEIiTKL.
d/dt
P_Iom
LD-Z
'
14,500
L7 ,395
20 ,670
22,58O
20 ,250
l_1,415
3,270
dx/dt
Prom.
(t/s)
t4,o70
L7,765
20 ,950
23,l.05
22,060
L4,660
5,390
0,0149
o, 0182
0 , 0233
o,0323'
0, 0548
0,1418
0,5?t4
x prom.
LL
LD-Z
tL
SPIJINE
SPIJINE
19,00,
25" 55
31, 95
38,20
44,65
50, 50
53,10
o,75j.2
0,6808
0 ,5459
0:,5g,!1
o, 4535
o ,2256
o,os98
0,7405
o, ais:
O
6560
0,6C48
,4s4t
,28s7
0,1004
0
0
Contina
308
(a/ p)
(t/
TrD-Z
SPI,INE
1,310
L,469
L ,546
L,692
2 ,205
4 ,433
L6,'129
0,0113
L,524
0, 0151
0, 0191
o
ot24
, 0249
0, 0320
,4s2
,963
I
p
o,
1, 653
2, O24
9
(tt/
(p/ a)
frD-Z
tt)
1, 350
1, 438
P.
, 0342
(e/ p)'
LD-Z
E)
SPIJINE
88;121
80,638
66 ,234
52,445
40,240
3L,251_
29 ,276
0, 01:_0
o , oL27
0, 0153
0, 0195
o,
o27!
0, 0411
O
, O.S?4
Prom.
L/ .t. prom.
IDZ-SPfr
prom.
IJDZ -
PIJ
o,752
1, 330
0,
0, 688
0, 651
L,453
1,535
L,672
0,0152
0,598
o ,'47 4
o,258
o;o8o
2,Lt4
'3,942
]-3,,346
y.)
eO, 814
78,958
55,318
5'1 ,
253
36,938
24,334
1,7 ,43s
LEZ-SPL
le/
.SPIJINE
0112
0, 0125
o, 0193
, 0260
0, 0355
0, 0458
o
/e
s/ pprom.
LDZ-SPL
89 ,467
79,798
65,?75
5)-,849
38, 589
27,'192
23
,355
Observaciones:
- Columnas F, G, H: Valores promedo de las columnas C, D y E, respectivamente; Columna l: Recfproco de los valores de la columna
F.
309
Tabla
R2
ErY
ErrX
75,4252
27,73AA.
21-,5820
o, 0990
sPL
t,1699
LDZ
O,8026
PROM O,9862.
O , 0492
0,1,769
O,0678
0, 9998
O,9992
0,9998
0,3559
0,L364
SPIJ 16,2L30
LDZ 24,9965
PROM 20,6048
0,8319
2,3695
1,,3236
Eadie-Hofstee,
Eeuacin [5.66]
0,9992
0, 9916
0,9978
!,1_278
0, 9560
1, 0419
0,0138
O, 0394
0
, 0220
sPI+. 9,8723
'
Observaciones:
Y:lntetceptoconelejoY;Y:var.iab1edependiante',:.'
1-;
.,
'I
..
-,
Err
310
:1
'v
--
l
l
l
promedio de crecimiento.
columnas
velocidad
dependiente:
..+,
spline
Leduy y za)ic
Promedio
rr = 0,8548
Fu = 1,2459
ru = 1,014
= 0,886'7
Pr
Promedio
ltu=9,9598
F = 1,0450
spline
Leduy y zalie
Promedio
= 0,8723
Pr = 1 ,0725
llu = 0,9483
Fu
Ks = 13,185
IG = 34,560
IG = 21 ,884
R: 0'9999
R = 0,9996
R=0
'9999
G = L4'376
IG' = 26 't47
Ks =\9,776
R = 0'9996
R = 0 '9958
IG = 13,72t
Ks = '27,439
Iq = L8,8a7
R - 0,9984
R = 0' 9810
spline
Leduy y zajic
R=0'9989
R:0'9982
311
:,
,
;
gttos valores coinciden con loi informados por Herbert et al., 1956:
Yx/s : 0,53 g/g;lrrrr : 0,85 (hora)-l; K, = 12,3 mg/litro.
de medio)
Tabla
,
r
i
;
i
I
i
'
;
i
;
4o,PRINT
50 PRINT "REFERENCIAS:"
60 PRINT
70 PRINT "Gates, W.E., y Marlar, J.T., Water Poll."
80 PRINT "Contro! Fed. 40: R 469, 1968"
90 PRINT
100 PRINT'Moser, A., Bioprocess Technology, Kinetics"
110 PRINT "and Reactors, Springer Verlag, 1988"
120 PRINT
130 PRINT "Ong, S.L., Biotechnol. Bioeng. 25: 2347, 1983"
140 PRINT
'150 PRINT "Reklaitis, G.V., Ravindran, A. and Ragsdell,"
t60 PRINT "K.M., Engineering Optimization, Methods and"
170 PRINT "Applications, John Wiley & Sons. 1983"
180 PRINT
t 90 PRINT "Rolz Carlos, Curso: lngenieria de'RQacciones"
2O0 PRINT "y Procesos Biologicos. lnsttuto Centroamericano"
210 PRINT "de lnvestigacion y Tecnologia lndustrial,'lcaiti,"
220 PRINT "Programa: MOINTXS.BAS, 1989"
312
DE
230 PRINT
240 PRINT "PULSE ENTER !"
250 ANS : INPUTS(1)
260 CLS
270FOR X:1 TO 10000
280 NEXT X
290 CLS:KEY OFF
3oo GosuB 1o5o
310 CLS
320 WHILE CMD < >3
330 0N CMD GOTO 360,640
340 WEND
350 GOTO 1030
360 PAGINAo/o =1
370 GOSUB 1200
380 REM SUMINISTRAR DATOS Y CONSTANTES
390 PR!NT
400 INPUT "Conc.inicial de biomasa y sustrato ";CXo,CSo
410 PRINT
42O INPUT "Numero de pares de datos, incluir datos para t=0 ";N
430 PRINT
440 l=N
450 Dt M CS(t),T(t), CX(t l,X(t),y(t),A (t), E1 (tl,XX(D,TTill
460 FOR l:1 TO N
470 INPUT "Conc. bio.masa, sustrato, tiempo ";CX(l),CS(l),T(l)
48O NEXT
490 PRINT.,
500 cLS
510 REM ESCRIBIR LOS DATOS EXPERIMENTALES LEIDOS
520 PRINT SPC(1 0);"DATOS EXPERIMENTALES"
530 PRINT
540 PRINT SPC(5);"Conc.biomasa";SPC(5);"Conc.sustrato";SPC(5);"Tiempo"
550 PRINT
560F1$:"
,
###.##"
570 FOR l=1 TO
580
v
590 NEXT I
600 PRINT
610 PRINT "PULSE ENTER t"
313
:.
"
710FORt:1TON
72O
730
X(t):LOG(1 +Ap*(CSo-CS(|)l)/Tfl)
Yfl) : LOc(CSfl)/CSo)/Tfl)
740 NEXT I
750 REM SUBRUTINA DE AJUSTE POR MINIMOS
760
770
780
790
800
810
L:2
:.5
GOSUB 1740
GosuB 1230
REM CALCULO DE MUMAX Y KS
830
840
850
860
870
CUADRADOS
)-1
y es: ";yE
88O PRINT
'
,,
1O2O
1O3O
1O4O
1O5O
WEND
1060
1070
1080
1090
END
11OO PRINT
50
160
1 170
1 180
1 190
1
BEEP
SPC(40);
';
-?
PARTES
IGUALES
1430 tF M1 >M0 THEN E1(t):-El(t)/2
1440 REM SI LA VARIANZA DISMINUYE, AUMENTE E1(I)
1520M:M+1
1530 IF L2:O THEN RETURN
1 540 IF ABS((11 -LzIILZI < E THEN RETURN
1550 REM SI ALCANZA ESTE PUNTO, SE REOUIERE OTRO PASO
1 560 L1 :12
1570 GOTO 1300
15BO REM SUBRUTINA DE GENERACION DE RESIDUAL
590 L2:0
600 FOR J:1 TO N
1610 X:X(J)
1620 REM OBTENCION DE LA FUNCION
1630 GOSUB 1690
*
1 640 L2 : L2 + (Y(J)-Y) (Y(J )-Y)
1650 NEXT J
1660 D=SOR(L2|(N-L))
1670 RETURN
1680 REM SUBRUTINA DE FUNCIONES
1690 Y:A(11"X-A(2)
1
1
17OO RETURN
- ) -.
fO CLS
20 PRINT "LEDUYZAJ.BAS: METODO DIFERENCIAL DE ANALISIS"
30 PRINT
40 PRINT "PROCEDIMIENTO GEOMETRICO DE DIFERENCIACION DE UNA"
FUNCION EXPERIMENTAL EN UN PUNTO
50 PRINT "
60 PRINT
70 PRINT
tr
80 PRINT "REFERENCIAS:
90 PRINT
100 PRINT'Leduy, A.L.,y Zajic, J.E., Biotechnol, Bioeng.
1 1O PRINT " 1 5: 805, 1 973
120 PRINT
130 PR|NT "Oner, M.D., et al., Biotechnol. Bioeng. "
140 PRINT "28:902, 1986
150 PRINT
rr
160 PRINT "Rolz Carlos, lnstituto Centroamericano de
170 PRINT "lnvestigacion y;fecnologia lndustrial. lCAlTl "
180 PRINT "Curso de lngenieria de Reacciones y Procesos rr
190 PRINT "Biologicos, Guatemala, 1989. Programa: DIFLEZ.BAS"
'ir
2OO PRINT
DE
BIOMASA "
EXPERI-
!'
317
: ,
{'i
38O PR]NT
39O INPUT "Numero de valores de la variable dependiente ";V
4OO PRINT
41O
W:V+3
480 CLS
490 PRINT SPC(1 6l;'DATOS EXPERIMENTALES"
5OO PRINT
550
PRINT USING
Fl9;l,TETA(l),CX{l)
560 NEXT I
570 PRINT
58O PRINT "PULSE ENTER !"
690
7oo NEXT I
71O PRINT
2r
81O PRINT
820
830
840
850
PRINT
PRINT
j60
870
BEEP
060
1O7O TETAC(|+
1):
))-ZMMO(|
Tabla
5.14
987.
1O CLS;KEY OFF
EXPERIMENTALES
II
32O
NEXT
370
NEXT
380 CLOSE
390 GOTO 480
400 oPEN "1",#1,N
4lO
INPUT #1,NUM
#1,YDATA(I)
460
470
480
490
CLOSE
ANS = INPUTS(1)
N=NUM:CLS
PRINT "RESULTADOS"
5OO PRINT
510 PRINT
560 PRINT
570 DIM A(N),8(N),C(N},D(N), P(N), O(N),R(N},S(N), STEPSIZE(N}
580 REM XDATA(n!, YDATA(nI son arreglos de n puntos de datos
59O REM A(N),8(N),C(Nl,D(Nl son arreglos de coeficientes polinomiales
600 REM en la forma f(x)=1+b(i)+x+c(i)*x^2*d(i)*x^3
610 REM PASO 1 DEL ALGORITMO
620 O(0) : 1 :O(N) : 1 :R(0) :0:S(0) =0:S(N) :0:C(N) :0
630 FOR !=O TO N:A(l):YDATA(I):NEXT I
640 REM PASO 2 DEL ALGORITMO
650 FORr:0TON-1
660 STEPSIZE(I) : XDATA(I + 1)-XDATA(|)
6"70
NEXT
690 FOR|:1TON-1
: i
7OO
A(I.
71
1)
P(l):3"((A(l+1)*STEPSIZE(l-1))-(A(ll*(XDATA(l+1)-XDATA(l-1)))+(-
*STEPSZE(I))I/(STEPSIZE(I-1 *STEPSIZE(I)}
}
720
730 S(r) : (p()-(srEpstzEfl-1)"s0-1 ))t/o(l)
740 NEXT
I
1)
2*C(J))/3)
830
840
850
NEXT
860 END
5.7
5.7.1
"
rr=v-x = P'x'
&*
t5.67I
1d*
=\
,
[4=far=t_to
JJ
'x
[5'68]
,o
Ejemplo
5.3 Simulacin
realiza mediante el
programa C:\GWBASIC\HERBERTl .BAS, resumido en la Tabla 5.1 5.
323
- La Figura 5.7 es una representacin grica de la variacin de las concentraciones de glicerol y de microorganismos con respecto al tiempo de retencin
: INPUT$(1
130 NN=1
140 REM Escribir las constantes: UMX:1/hora;KS:g/litro
150 REM Y:g microorganismos/g glicerol
160 REM S0: g glicerol/litro; X0: g microorganismos/litro
170 UMX:.85
180 KS:.0123
190 Y:.53
200 REM Paso de integracion: T1
210 T1 : .01
220 REM Valor final de la variable independbnte: T2
230 T2:3.5
240 REM lntervalo de impresion de los resultados: T3
250 T3:.1
260 PRINT "HERBERTl .BAS"
270 REIU Simulacion del crecimiento por lotes sin formacion de producto
280 PRINT
290 PRINT "T: variable independiente (tiempo, horas)"
324
\=
7OO FOR
T5:1 TO N
77O
U:
"l(2l.:";ll2l
810 NN:NN+1
820 RETURN
326
Figura
'i
5.8
El
l/Rx
o,5
1,5
5.7.2
por un extremo, las clulas crecen a medida que avanzan dentro del reactor, y
las clulas junto con los productos del metabolismo salen por el extremo opuesto. La ausencia de agitacin impide la mezcla completa del contenido del
reactor. La concentracin de clulas, de sustrato y de producto vara en las
direccines axial y radial. Si el reactor es operado en condiciones estables y se
desprecia la variacin de la concentracin en la direccin radial, entonces estas
concentraciones cambian con respecto a la poscin axial dentro del reactor pero
permanecen constantes en cada punto con respecto al tiempo. Las concentraciones en cada punto del reactor en la direccin axial son similares a las alcanzadas en un fermentador por lotes en igual tiempo de residencia.
321
--
t5.691
5.7.3
328
Figura
5.9
completa (CSTR).
CSTR
Entradas
Salidas
Crecimiento
F.x^-F.x+V.rx
Y.4
&
Acumulacin
t5.701
f=-
x
tx
t5.711
329
del crecimiento de Aerobacter cloacae, con et programa: C:\GWBASIC\HERBERTl .BAS. Eltiempo de retencn requerido en un reactor continuo de mezcla
completa (CSTRI para alcanzar una concentracn de producto x, corresponde
alrea de un rectngulo de anchura X = 1,687 (g producto)/litro y altura 1/r*
: 1,947 (litro.hora)/g.
7/Rx
o,5
Concentracion de biomasa,
1,6
g,/l
tro
330
f5.721
curva, corresponde
a la
equivalente:
t5-73I
c,,: concentra-
332
Donde, C,.: grado de conversin del sustrato; sio: concentracin inicial del
sustrato r, en el tempo f : 0; sit: concentracin final del Sustrato en el tiempo
t : t. La definicin del grado de conversin (Ecuacin 5.74) supone que el
volumen de lquido en el reactor permanece constante.
1,5
o,5
Sustrato
o
^oF
o,5
o,75
1,25
Tlempo de retencion, horas
1
1,5
1,75
333
En algunos casos
Pv=
ci"
(P)"n
t5.75I
5.7.5
Uno de los mtodos empleados con mayor frecuencia en la operacin semicontinua de fermentadores es la "operacin de un reactor por lotes con atimentacin
continua (fed-batch) ilustrado en la Figura 5.13. Sila concentracin delalimento es alta el volumen efectivo del caldo en el reactor no cambia apreciablemente.
A causa de la baja solubilidad deloxfgeno, la operacin semicontinua, en el caso
de fermentaciones aerbicas, incluye generalmente la modalidad de alimentacin
continua de aire o de oxgeno.
Figura
5.13
o.
334
:.'
- Alimentacin con caudal controlado por alguna respuesta del sistema como,
por ejemplo, el cociente respiratorio, la composicin de los gases efluentes, o
la concentracin de algn producto,
- Alimentacin
o en lotes repetidos.
clclica
Ejemplo
5.4 Simulacin
Solucin
:
,t-
335
: .,
20 PRINT "HERBERT2.BAS"
30 PRINT
40 PRINT "Cinetica de crecimiento de Aerobacter cloacae"
50 PRINT
60 PRINT
70 PRINT "CRECIMIENTO POR LOTES SIN FORMACION DE PRODUCTO"
CON ALIMENTACION CONTINUA"
80 PRINT "
90 PRINT' SiN FORMACION DE PRODUCTOS NO CELULARES"
1OO PRINT.
=,
44O PRINT
45O PRINT "T: tiempo, horas"
460 PRINT 'V: volumen del caldo, litros"
470 PRINT "X: concentracion de celulas, g/litro"
480 PRINT "S: concentracion de glicerol, g/ltro"
490 PRINT "MS: masa de sustrato, g"
500 PRINT "MX: masa de celulas,g
510 REM Numero de ecuaciones diferenciales:
520 N:5
53O REM condiciones iniciales: Ol :S;O(2):X; O(3): volumen
s40 0(1):s0
550 O(2):X0
560 0(3t:v0
570 0(4):V0*S0
58O
O(5):V0*X0
:0
7OO NEXT T5
710
T:T +1112:T8:2:GOTO
T5:1 TO N
860
72O.FOR
730
740
750
760
\i
T8=3:GOTO 860
FOR T5=1 TO N
77OT7=T1*|(T5):T0(T5)=T0(T5)+2*T7:OIT5)=T6(T5)+T7
337
780 NEXT T5
790 TB :4:T:f +T1|2:GOTO 860
BOO FOR
T5:1 TO N
:'
960PRlNTSpC(3); "T
;T;SPC(3); "V : ";O(3);SPC(3); "X = ";O(2);SpC(3);'S
";O (1 );SPC(31;"MS : ";O(41;SpC(3);"MX= ";O(5)
97O
NN:NN+1
980 RETURN
5.7.6
338
'programa:
C:\GWBASIC\HERAERT2.BAS.
!1
Masa, gramos
, ---------------
Vol
..:
2000
600
000
500
.5
45
Tlempo, hors
Figura
5.15
CSTR
Fltroclon tongenctol
339
t5.76t
dr
Donde, F: afluente
el
E =3=P ;l=
FD
!;,=#,i=,
ls.771
B;
B.&
t.lt,o -
15.781
B
340
vtrls -
-s
| . = +.(s
- ")
t5.791
3,5
i,
2,5
l::i
tili
1,5
tlvldad, g/(litroihora)
.-.:::__--___]]
vidad, g/(litr
46
O,5, lp
B.D
: Bltl.
341
5.7.7
Fermentadores en serie
(clulas),
X, n el perfodo de crecimiento estaconario, se logra mayor productividad en
(1/rx).rn.o,
342
Figura
Xe
Se
Pe
CSTR
5.7.8
343
to
1/Rx
0,6
Concentracion
1
de biomasa,
1,5
g,z/i
tro
1
t,6
0,6
Concentracion de blomhsa, 9,4/tro
344
5.20 Representacin esquemtica de algunos reactores de columna: Acolumna de burbujeo; B- columna de platos perforados; C- columna con
Figura
ptotos
Are
rforodos
Colurno con
recnculqclon
Alre
345
Figura 5.21 Representacin esquemtica de algunos reactores de columna: AReactor con circulacin lfquida inducida por aire; B- Columna de burbujeo de
seccin transversal variable; C- Reactor con circulacin lfquida inducida por
agitacin mecnica.
Reqcton 'or-ltFt'
Coturnq de burbuJeo
Clrculoclon lnducldq de seccton tronsversql
Atre
Chculocon nducdo
Atre
346
5.2
pr,
Ks
Yxvs, mediante
Monod, 1958.
Tiempo, horas
15,
,54
0, 90
23 ,0
I,23
l-,58
l_, 95
2 ,33
2,70
#-5.3
Concentracin de
clulas, mg/litro
5
30,0
38,8
48 ,5
58,3
6t ,3
62 ,5
Concentracin de
lactosa, mg/litro
151,0
L23 ,0
105,0
75 ,0
43,s
74 ,5
3,5
0,s
&5.4
5.5
348
5.12
rx = (p
- kr).*
[Ecu. 5.27.b]
rs=ms.x.(r*)
tEcu. 2.37I
5.14 simular
Fa
t*&*1
ks
3s0
tEcu. 5.31I
la
la
5.15
s
K,
Kn,
"-
K_
_l
y producto en
[Ecu. 5.37]
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X2;b?0d. '"1" .
.,.i
.'Jr
1. New York:
Jap.,30,42.
r:
r
,d
.t
'
355
1\
CAPITULO 6
ESTERILIZACION
6.1 INTRODUGCION
prdida irreversible de su capacidad de reproduccin en el ambiente considerado, pero no significa la inactivacin de las enzimas celulares y de las toxnas.
DE MICROORGANISMOS
357
Figura
'
- I - -r
esporas
10
de la poblacin inicialde
ji
1
968..
N,lNoti,.,..:
o,
o,ol
l,OOOE-03
t,oooE-04
|,oooE-05
t,oooE-06
t,oooE-o7
20
'
30
40
50
Tlempo
60.
i
'
70
80
#=-*"'*
.rv
tn_=
No
Vlida para
T=
- Ko't
'
f de qstet6.11
t6.21
constante.
358
Figura
6.2
o,
1.
o,o
l,OOOE-03
t,oooE-04
l,OOOE-06
6.2.1
Ku:
16.31
t6.41
la pendiente,
pcttdictttc
u(
=
ED =
2
= 34456,6'tr'
--Eo
(A4fi,6).(8,314) = 2EO4t2 J
gtol
N/No
360
6.4
Figura
al., 1973.
10
-.
-.
-............
- -
-.. -. - :
i
---
-'.
-.. -..
---.-...-........-'-'+.-........-1'..-
- -
---
1- - -
t.
i.+..,-..
i-
.-.+....-.-'---.....-.."....
o1
o,o
2,54
2,56
2,58
2,6
2,62
2,64
2,66
361
Tabla
6.1
cal/gmol
Acido flico
Alcohol d-pgntot.enil
Destruccin de vit.amina
Hidrocforuro de t.iamina
Ciancobalamina
B,
Destruccin de ribofl-avina
Desnat.uralizacin de peroxidasa
- Pardeado o reaccin de Maillard
entrerproterias y carbohidratos :
Bacilfus stearothermophi)us
Anaerobio putr,efactivo NCE 3679
eabi-Z-Lus
subtiTis
CTostridium botulinum
J/gmol
16800
21000
21000
22000
23100
92092
96697
23600
23500
987 90
987 90
31200
130603
283392
303066
677 00
72400
76000
82000
0325
87 906
87 906
1813 6
343252
Eltiempo requerido para la reduccin fraccional de la poblacin de microorganismos a cualquier temperatura deseada se calcula a partir de las ecuaciones [6.2]
y t6.31:
Y=ln
362
No
lV
= Ko.t = Ko,.r.exP
t6.5I
v
La eneiga de activacin, Ep, y el coeficiente de Arrhenius, Kpo, caracterizan la
destruccin de un microorganismo dado bajo las condiciones del ensayo.
oc
Tiempo en minutos
requerido para
alcanzar una
relacin N/No
100
110
t20
130
140
150
Prdida de tiamina
o/o
10-16,
843
75
7,6
0,8s1
0,107
0, 015
99
89
,99
27
10
3
1
La Figura 6.6 enfatiza elhecho de que una llnea recta no siempre indica una sola
especie de microorganismos. En este caso la especie B, ms resistente al calor,
36s
16
Figura
6.6
tooo
te;s
20 26. 30
fiemBo, minutos
40
35
45
100
10
o510
364
50
20
25
Tlempo, minutos
15
30
35
v = tn
t6.61
t6.71
Y sos@nimiento = Ko.ts
16.81
nimiento, oC.
El diseo de los ciclos de esterilizacin se fundamenta en los valores de la
energla de activacin, Ep, y del coeficiente de Arrhenius, Koo, del microorganismo formador de esporas ms resistentes probablemente presente en el medio.
En la pictica este mtodo es muy adecuado para eliminar microorganismos muy
resstentes tales como el B. stearothermophitus s el Clostridiurn botulinum. La
inaitivacin dg esporas depende de la naturaleza del medio en el cual se
calientan. En general, no solo hay que esterilizar un lquido sino preservar
smultneamente su valor nutritivo como ocurre con los caldos de fermentacin,
Chopra et al., 1981.
365
Y=Koni*(
?).
t6.9t
Generalmente los sistemas de esterilizacin por lotes incluyen por lo menos una
de las siguientes fuentes de calor: burbujeo de vapor vivo a travs del medio,
calefaccin elctrica y calentamiento o enfriamiento con un intercambiador.
t40
Temperatura,
para
C,
120
too
Calentamlen
i,riaml'ento
ao
60
40
20
o
40
80
160
366
Dotde: , =
R.T,
"
Contina
367
Tblar
6.3 Continuacin
Lineal creciente:
Dottdc:_____
c=
Donde
En
es la integral
ED
R'To
exponencial:
,.,0=|(+)
tG
l4l
Tabla
6.4
- Burbujeo de vapor,
(hiperblical:
,
T=Tol1 *; o.t\
1 I *b.t)
t6.151
o=J!-;
=*
M.CP.T,' M'
- Calefaccin elctrica, (lineal):
T=7.11
o \ +a.d
a=
M.cp-To
16.16I
Continria
368
* b.e-o")
U.A
To-7"
M.C,
Tc
a=-'.o=
16.171
Tr
(1 + b.e-"'); b
To
=
Tr^
t6.18I
TF'
6.3
369
6.3.1
primas
6.3.2
Generalmente el perodo de incremento rpido en el valor de la reduccin fraccional de microorganismos est limtado al punto de esterilizacin que ocurre
alrededor de 100 oC y se comete un error muy pequeo al considerar lineales
las curvas de calentamiento y enfriamiento alrededor de 100 oC. Adems, se
pueden despreciar las secciones de estas curvas por debajo de 1 00 oC, ya que
la esterilizacin por debaio de esta temperatura no es apreciable. Si se tienen en
cuenta estas aproximaciones y se supone una velocidad de calentamiento de
de
La Tabla
Ko
= Kna.exe(
#)
Y=tn*=",,
oC/minuto:
lEcu. 6.31
IEcu. 6.5I
Ejemplo
6.1
'fabh.6.5.
:r;
Toc
kr.t:
Ko minuto-l
acumulado
r_
101
1-02
103
L04
109
1r,0
11
tt2
113
+L4
9.r
18
L,3'?3
tL9
L,715
1,20
].2.L,
722
L23
t24
L25
L26
t27
L28
129
130
i3i2
1"25ii-l-'
:I.ti 1,611
3,313
4,
-
2 ,1,40
, 3,,319,
,126
5,359' '
7, gg0
9,755
L2 ,054
L4 ,903
18,391
6
8
: 2,666,.
4
""
2,055
2 ,613
!s8
1-L7
r_
'
,444
0,700
0,877
1,099
1L5
116
0, 07
0, 110
0,139
Q,L75
' 0,222
o ,'i8 o
0, 353
108
,079
,12L
0,175
0,244
0,331
0,44L
0,580
0,756
0 ,979.
0
0, 059
105
106
107
t-
-----0 ,046
0,o20,
0 ,026
0, 033
0 ,042
0, 054
00
'
l_90
',2,-1,8
,66a
,376
10, 516
13,182
.16,501
20 ,627
25,752
32,lLL
,99]49,746
61, 810
76,71,3
95, 1'04'
39
" 'i
:i
6,6.t01{
ffi.fi,t.,,0r
orgaaisnos
- se supone
v totat=rn
*=ln
ffi
=4t,st
cohttarnicro = (lg,1gzr.#
= 16,32
y sosunimicno
=v total _y catcn. _y crfriam.
Vsosr. = /rc,33 _ 16,92 _ 11,90 ko.t
=
Donde er varor de Ko se evara a ra
temperatura de sostenimiento de 121 0c.
373
vl*'=91
,=
Ejemplo
6.2
KD
2'666
=5,89
ef
minutos
agl+tgl
miento.
Solucin
Ko
Ko
v = rl
.\
'z
':
= 1,85 mitutos
l
374
5,89 - 1,85
4,04 minutos.
Ejemplo
6.3
Suponer ahora que por ampliacin de la planta se desea construir un fermentador similar al del Ejemplo 6.1 pero de 180.00O litros de capacidad. Los ciclos
de calentminto y enfriamiento sern realizados en 30 minutos y 24 minutos
respectivamente. Calcular el valor del perodo de sostenimiento a 121 oC.
r,
1'99'1^o-.tt
0,0001
= 44,43
Por consiguiente:
Y calent. =13,182.
Y nfr. = (13,182)
V sosf. = 44,43
l=
6.4
18,83
30
21
= 18,83
.ff = t,oo
15,06 = 10,54
K.t
10,54
= 3,95 minutos
2,666
ESTERILIZACION CONTINUA
vacin de estas reacc.iones laterales indeseables (Tabta 6,'l ) son menores que
las requeridas por la reaccin de esterilizacin. Con el propsito de prevenir la
alteracin de los componentes susceptibles del medio, el proceso de esterilizacin debe realizarse a la mayor temperatura posible durante el menor tiempo,
ffeifer y Vojnovich, (1952); Jacobs et al., 1923.
de
de agua al medio, seguida del paso del fluido caliente por la seccin de
sostenimiento y su posterior enfriamiento instantneo con la ayuda de una
vlvula de expansin. El sistema de esterilizacin por inyeccin de vapor puede
agregar exceso de agua al medio y favorecer la formacin de espuma.
En el sistema de esterilizacin continua, mediante inyeccin de vapor de agua
(Figura 6,8), el medio caliente fluye en condiciones adiabticas por la seccin
de sostenimiento diseada como un tubo largo, Pick, 1982. El tiempo promedio
376
tr=
t5.191
uM
fili
urvr:
velocidad
Vs=ln&
=Ko.t"
16.20
vs
= K,o.eXp
( ,%) -
377
organismos =
eliminados
organismos
que entfan
or9anrsmos
que salen
t6.211
La diferencia entre el nmero de microorganismos que entran y los que salen por
Figura
6.8
Voco
Volvulo
de
exponsioi
Seccon
de sostennento
Enfrodor
Instonto
Itedo
sterl
378
La diferencia entre el nmero de microorganismos que entran y los que salen por
dispersin axial es:
- D. s.
!(
-[ - o.s.4.
dxL
b dr\- r. s.4\,]
dx)
t6.23I
de
4b.*)-+")
e\ tu) &
-Ko.n=o
16.241
Donde, Kr: velocidad especifica de muerte, s-1; n: concentracin de microorganismos, (nmero de microorganismos)/m3.
Wehner y Wilhelm, 1956, presentan la siguiente ecuacin como solucin a la
Ecuacin f6.241:
"=(,
DAM =
K^.L
_zuM
[6.25]
= Nmero dc Dm,hlr
379
Pr=
ryl
= Nnrero de Peclt
D/(u,d)
1Q
\I:
\!
i\
\.i
)'-"'
o,
100000
10000
1000
100000
Reynolds
Ejemplo
6.4
3,068
N/No
l,OOOE- t 2
t,oooE- t 3
t,oooE-
14
l,OOOE- 15
l,OOOE- 16
l,OOOE- 1 7
l,OOOE- 1A
l,OOOE- 19
140
(Kd,L)/u
381
Solucin
,,
"
0,41
'
!'
'
&=rCrOO4.O
-,i
mo
lpra
- Microorganism s viables
no=1,7.toezr-3.
no=1,226.1012
_,i
"
t.+tefi.z+
ffln
t= ?,,,h*=
1,384.10-rg
- Criterio de diseo
'nl, = tn
lt
- tn7'2N'10t'
= 29.61
Kr= 1,51,.10s's----1.
- Perfodo de sostenimiento
382
au
- Dimetro de la tuberfa
(3,068).
(0,02il)
= 0,oT79 m
o,41
& ='*o
m?:u*
i(0,07le)2
ua =0,@6 mls
- Longitud de la seccin de sostenimiento:
'
1,23. 10-3
- De la Figura 6.9:
D
;n"
Pra
RE = 5i446
'
es:
'
- Nmero de Peclet
Para el primer estmativo se supone una longiilO de la seccin "
to:L:14m.
'
*","nimien-
P=+=W=.os.l
383
- Nmero de Damkhler
0,188s-1-14rn
D,,,=Ko'L
=30.6
M uM - 0,086
m/s
179,7 V Drrur
es:
r"Or"r,d.
longitudL:16m:
Pz=2o5,4 i.
Dut=
y de la Figura 6.3:
n
no
6.5
ESTERILIZACION DE AIRE
En el aire existen microorganismos iables generalmente asociados con partlculas ms grandes como polvo o polen. Las diminutas gotas que salen deltracto
respiratorio al toser, o an al conversar, son transportadores muy efectivos de
microorganismos patgenos.
384
Segn Aiba et al., 1973, las bacterias y esporas detectadas con mayor frecuencia en elaire son:. Aerobacter aerogenes, Bacillus cereus, Bacillus licheniformis,
Bacittus megaterium, Bacitlus mycoides, Bacillus subtilis, Micrcoccus aureus,
Proteus vulgaris, y las esporas de: 8. megaterium, B. mycoides y B.subtilis. El
tamao de estos microorganismos vara desde O,5 - 2,1 pm de anchura, hasta
0,5 - 26 pm de longitud.
6.5.1
el gas
7
385
o , n=i.(3r)'
21,2
rlq = prz
4,.6s
mln hr
=21,2m3
mo de aire cstril
hoa
6.5.2 Esterilizacin
En muchos casos el.calor generado por la compresin es suficiente para esteriliqar el aire, de manera que no se requierpn otros medios de eliminacin de
microorganismos, Bruckshaw, 1973. El aire requerido para la aeracin de fermentadores se comprime hasta 344,6 - 413,6 kpa (b0 - 60 psig), presin reque-
386
y las prdidas en
rz=r,(f
t6.26I
)+
Donde: r: relacn entre los calores especficos del aire a presin constante y
volumen constante; r: 1,3 para compresin politrpica.
As, por ejemplo, la temperatura alcanzada mediante compresin politrpca del
aire en las condiciones de Bogot (presin localatmosirica:10,83 psi; temperatura 1 5 oC) hasta 1 50 psig, es:
z2=(zra.
ls).(%#q
Tz =
)'*
= sos,7
r(
2i2'7'c
Se ha demostrado que las temperatura del aire inferiores a 2OO oC son de poco
- El aire normalmente debe comprimirse hasta una presin tres o cuatro veces
mayor que la requerida por el proceso.
- Un sistema de almacenamiento de aire, tipo serpentn, debe mantener el aire
a elevada temperatura durante un tiempo adecuado.
As por ejemplo, la longitud de tubera aislada, de 15 cm de dimetro interior,
requerida para almacenar 21,2 lm3 de aire)/(minuto) durante 30 segundos, es:
21,24
H.30s
f,.{o,rs ^)r.t
L = 599,84 m
387
En este caso el aire se hace fluir por el espacio anular entre dos cilindros
concntricos de hierro. El cilindro interior se calienta con un quemador de gas.
Estos hornos, que tambin pueden ser elctricos, slo son tiles para pequeos
flujos de gas hasta 30 litros/minuto. Se han diseado hornos elctricos donde
elaire se calienta hasta 700 oC en un tlempo de 0,4 segundos, con un consumo
de potencia de 1,8 kW/(100 litros/minutol.
En este caso el aire fluye, separado del gas caliente, por serpentines o tubos,
para prevenir la contaminacin de los productos de la combustin o el agotarniento del oxfgeno. Las dificultades para disear y mantener una unidad de esta
clase son considerables y los costos de capital y operacin son elevados. Por
6.5.3
Filtracin
388
Los filtros fibrosos de papel, algodn, lana de vidrio y lana mineral, no presentan
esta barrera impenetrable a los microorganismos, los espacios entre fibras son
bajas prdidas de presin, Chen, 1955; Davies, 1973; Decker et al., 1962;
Decker et al., 1957, Conway, 1984; Esta eficiencia se explica por el hecho de
que los microorganismos generalmente estn asociados con partfculas de mayor
tamao.
Figura
6.11
389
Tabla
Dimetro de fibra,
pm
<6
68 o/o
Distrbucin
12
27 o/o
6-
18
4o/o
12 -
18 - 24
1
'o/o
El medio filtrante Stilmed AST/13 tene una densidad aparente de 1 92,3 kg/m3.
En la Tabla 6.7 se presentan datos de la prdida de presin del aire a travs de
este medo.
Tabla6.7Prdidadepresindelaireenunlechoempacadoconlanamineral,
(Stilmed ASTi 13), Richards" 1968.
Velocidad
del aire
m/s
0, 15*
,23
0,30
0,38
0 ,45
0,60
Espesor
"12,7 mm
7,5
tt,2
,9
78,'t
22 ,4
29 ,9
74
L2,t
,7
,4
33,2
L8
25
390
PTFE (politetrafluoroetleno).
Figura
6.12
+
6.8 se presentan datos sobre la relacin entre Ios caudales de agua
y
y de aire sus correspondientes prdidas de presin en un-a vela de "Celloton".
Este material, similar a la porcelana, se obtiene a elevada temperatura por la
recristalizacin de una mezcla de ahf mina y slice, produciendose una estructura
muy poiosa (porosidad e = O,4). La limpieza de la vela se realiza con cidos,
con detergentes, o mediante ignicin en un horno. La esterlizacin de la vela se
realiza con vapor, con aire caliente o en autoclave.
En la Tabla
391
de poro
pm
1
1
1
2
2
2
2
Prdida
de presin
psl
Caudal
de agua
litros/hora
Caudal
de aire
litrosiminuto
14
ZU
5
,45
,77
18, 90
7 ,55
o 2
4,L6
18 ,37
10
15
15 ,7-2
22 ,08
30,24
,64
,29
22 ,6s
30,88
10
15
1-5
de cellosa. Los llquidos que pasan por el filtro membrana deben ser prefiltrados. El agua sale de estos filtros libre de sustancias orgnicas, iones y pirgenos. La retencin bacteriana de las membranas es alta, hasta 107 bacterias/cm2.
Las membranas se ensamblan en portacartuchos de acero inoxidable. Hay
membranas hidrfobas y tambin hidrfilas. Las hidrfobas tienen la ventaja de
no obstaculizar el flujo de aire despus de permanecer en un autoclave a 138
oC, o del paso del vapor de agua.
392
6.6
difusividad pequea pero finita que significa una velocidad finita de recoleccin.
Este movimiento de la partfcula se denomina movimiento Browniano.
- lntercepcin: Se supone que todas las partlculas que siguen lfneas de corriente
que pasan a una distancia menor que la mitad del dimetro de partcula, dpl2,
al
fluido rodear la fibra son insuficientes para evitar que la partcula por su inercia,
haga impacto sobre la superficie del colector y sea retenida.
- Gravitacin: La diferencia de densidades entre la partcula y elfluido origina el
desplazamiento de la partlcula dentro del fluido y su posterior retencn al salir
de la lfnea de corriente.
393
.l K''z )*
srB = o.s
-'' '[r, .dF.dp.U)
16.271
,
- lntercepcin
p, = (1,,
(* I
t6.28I
- lmpacto
,t6.291
- Gravitacin
t6.30I
fluido,kg/m3.
i,
g, = (o,e). [(r,$.
Adems las'ecuaciones para
13,
tLr]N.(:,PEF
)-4
**-LP<1ipw=!L4rso
394
t6.31I
16.321
de
t6.331
* 9t*
P = 2,g.K;1F,P;4 * O,62.P61
* 1=ij'o.2.rn
(r *Rr) - r +(r *R.)-2]
2'Ku L \
t6.341
!r(n')o .
]
;*[" (-, ,^", f + 1,24.(K u)-trz
.r
r-ttz. (R
{^*)'."')
")at
13a2
I[ =--lna--+d,-'244
t6.351
F*9*Fu=
t6.36I
z,9.x;tts.r;4 * Kit.nfr.lt - c
395
9r=9s*9t*9u*Fzr*Fe
16.371
t6.38I
Ejemplo
6.5
'
396
P,M
R.T
=(!#f
uo',.szs
ur".x
H t,t273 * 2OlK
bnol.K '
8,314
3_
1,217
+m'
2.
Nmero de Reynolds:
^ dn.U-,pE=-=
lc
Xc =0'592<
*=#4=ffi;
l
DP = 3,865 '10-t1
,,=#=ffi=r3.o6s,eo>50
D-
5.
Parmetro de Kuwabara:
'-
6.
Ev=-
tn, - I.
" - =o,941
.',
7.
i =0,(Bo
j'
Euacin [6,361:
g
,,ir
* Fr * Fa=12,S.iO,SA)-I4.(113.065,g8-zs
*(o,923)-f .rO,oqer.t0,962|=2,$14.10-e
'
397
8.
rM =
ug7s.tffi
Eficiencia de recoleccin
)'o
o,orro
por gravitacin:
pn= (1@
- f ,2171.9,9.(0,6r.10-92 =2,364.10-5
18.(1,8.10-t).(0,O)
10.
0r
= 0,0197
r.(rs.t0-6
0,001
I; = 0,52
Los filtros de fibra de vidrio son los ms ulilizados en esterilizacin de aire para
398
co*
rc
.9.-dr.
2-p.L.r.0 - d^
t6.39I
Ejemplo
6.6
A P =#05,3
^p
(,-g-!ALf,A7
Pa
estl = 0,6s4 ps
399
Coeticiente de friccion
Reynolds
PROBLEMAS
400
6.2
6.3
6.4
401
: .i
anterior.
el
BBLIOGRAFIA
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filtration concepts and applications," Curr. Res., 5: 1105-112.
405
CAPITULO 7
FENOMENOS DE TRANSPORTE
EN BIOPROCESOS
7.1
406
7.1.1
Fluidos Newtonihnos
cin:
tz -
17.11
Donde, rxz: componente del tensor esfuerzo cor.tante en el plano XZ, N/m2;
{dv./dx}: gradiente de velocidad del caldo, (m/s}/m; p: viscosidad del caldo,
kg.(m.s) '.
La ecuacin anteior puede ser generalizada para incluir ftuidos con material
suspendido o con macromolculas disueltas:
E--
17.2t
407
Figura
7.1 Reogramas
Cue
Plqstlco
Blnghorn
de
Cass
luldo
Newtonlono
Esfuerzo
cortqnte
Futdo
drtot
Fludo
pseudoplos tlco
Grodlente de ve[ocldod
Roels
408
17.51
7.1.4.
Cuerpo de Casson
'1
("=)'P
l*=1
7.2
"(*)'
("")'o . *"
(*)"
K"'("t1P'(*)' -K:
t7.61
17.71
410
gas dispersado.
Las prdidas por friccin en sellos, cojinetes, bandas y poleas, generan calor y
7.2.1 Evaluacin
411
P = I.Vu.er.oos$
17.81
t7.9t
P=(r),f
Donde, r: momento de torsin. N.m;
u:
_f
412
2.s.
Ms
P
P
t7.10I
17
.111
Donde, F: caudal de gas, m3 s-'; pg: densidad del gas, kg/m3; Por.: presin
absoluta, Pa, (Pa : N.m-2):
7.2.1.2 Agitacin
,r"."nr"
413
utilizan este tpo de reactor estn la de cido ctrico, cido lctico, enzimas,
esteroides y levadura para panificacin.
Los fermentadores de recirculacin ms utilizados son el reactor de circulacin
de
414
tipo hlice marina son utlzados cuando se requiere bajo corte y bajas transferencias de oxgeno.
La relacin (H/Dr) entre la profundidad del llquido en elreactor y el dimetro del
mismo vara entre 2:1 y 3:1 . En la prctica Europea se prefiere una relacin 3:1 ,
sobre el fondo del tanque igual a 1,5 dimetros de impulsor (E : 1,5 Dol y el
segundo impulsor se instala a 1,5 Do sobre el primero. Cuando se'instalan'3
impulsores, la distancia (E) a partir del fondo del tanque, y entre impulsores se
reduce generalmente a 1 dimetro de impulsor.
Figwa
7.2
II
k- Do+t
-Dt+l
fr
EI
II
415
7.2.2 Agitacin
rl\r,+,
r, ,...,r"]
P=8"
p^=
iFr=ol'D^
- p.no -Dt"
=iRe=n'D^2'P
F
I
17.121
s,=N,',=l:s,=l
s,=l,tr=*,t"=l
Donde, Po : nmero de potencia; Re: nmero de Reynolds; Fr: nmero de
Froude; S,, Sr, S., So, S., S.: factores de forma; P: potencia requerida para rotar
un impulsor dado a una determinada velocidad, W; g": factor de conversin de
la Ley de Newton (1 kg.m.s'2.N-'); p = densidad del fluido, kg,m-3; n
416
velocidad del impulsor, revoluciones s-l; l.r = viscosidad del fluido, kg.m-1.s'1;
Do: dimetro del impulsor, m; Dr: dimetro del tanque, m; g : 9,8 m.s-2:
aceleracin de la gravedad; E: altura del impulsor sobre el fondo del tanque, m;
L: longitud de las aspas del impulsor, m; W: anchura de las aspas, m; J: anchura
de las pantallas deflectoras, m.
La Ecuacin f7 .121, vlida para agitacin de fludos Newtonianos no gaseados,
generalmente se representa en forma grfica (Figuras 7.3 V 7 .41 para diversos
tipos de impulsores, diferentes configuraciones (factores de forma) y condiciones de operacin (McCabe y Smith, 1976; Wang, 1979; Perry y Chilton,
1973t.
Figura
t00
Funcion de potencio
-l'-i. t'-t
o
{--1.1.+
t0
,.\
e1
\l
-l
+i *i
'i rfi
t4
iil
\ l-{
?.!.v. t.9:
i l
to
1000
700
too00
ts<
+
1
00000
Reynolds
: .i
: P". La curva B se
P'8'
: F^=n"'D^
g
p.ns.D| 'R
Po='
'Q=Pr.Fi^i
7.3 y
t7:131
Figura 7.4 Functn de potencia, (D, versus Reynolds para hlices de 3 aspas.
McCabe y Smith, 1976,
.i
to0
_a\a_
'.4:::.t
.le,tti dr.o16.sri.slFfr
-3i:P-qfg,i?:ili
.EL:..il.
drk
s.P..a:12I
_'
\\
...t\.
t\\
10
'ai
(Uts9i9
i i
\^i..
'ii
\-.--.
-*-: iX
==+:M
it
=
0.1
t0
100
1000
j::iri:i:i1
*+
10000
100000
Reynolds
418
m= a-looRe
'
t7.141
Donde:
ab
1
1,7
0
2,3
Curva
40
1g
Figura
7.3
7.4
7.4
7.4
B
B
18
1g
gaseados
la
17.15t
419
Donde, Fo: caudal de gas, m3.s-',; Do: dimetro del impulsor, m; n: velocidad del
impulsor, revoluciones.s-1; n,Do: velocidad en la punta del impulsor, m.s'1.
En los cultivos de microorganismos miceliales se encuentra generalmente que
las clulas sufren dao cuando la velocidad en la punta del impulsor es mayor
que 5 m.s-t, (Lynd, 1989). La relacin entre los consumos de potencia en un
sistema gaseado y en el mismo sistema sin gasear, Pn/P, varla entre 1,0 y 0,3'
wang et al., (1979), presentan la relacin, Po/P, en funcin del nmero de
deracin, A., para el impulsor de turbina de hojas planas:
PG
0,65
= 0,35 *
t7.16I
1 + (f 6,67)-,
bsio+ =
Donde:
*,
&
+,
n,
17.171
?,j,
= K.P2
n. D
^3
ecuacin:
t7.18t
^-o'$]o'
420
Ejemplo
7.1
placas
- Volumen de licor:
V = !;(O,gq2.(O,gg) = 0,762
mg
- Caudal de aire:
- O,4.LO:762) = S,0g.l0-o
^60
F,
msls
- Nrimero de Reynolds:
Rr
3.(0,$)2.(997,0q
8,904.10-4
P = 6.(997,08).(3)0.(0,33): = 6s2,1
- Nmero de Froude:
FR =
n2.D,
I
---a
9,8
= 0,303
421
- Nmero de aeracin:
(5,08.10-1
=O.M7
3.(0,$)3
.As =
- 0,1471
Pc = (0,7126).(632,1) = 450,4 W
La potencia disipada en el llquido gaseado, {Ecuacin 7.16}, es:
&=o.gs*
P
0,65
1+(16,67)-(O,U7)
=o.T1u
Pc = 6O,V144}.(632,f) =.451,6
, )'
R*=D^".o"-.^.pl
rt
(0,1).X" \6.n + 2)
t7.1gl
422
Po=k.(fut)"
(+)'(#)'
17.201
w:
impulsor.
anchura del
un
comportamiento pseudoplstico.
Tabla
.1
Rer.:
<10
10 - 50
32
-0r
11
b
c
-7,7
0,4
-o ,4
-L,7
0,5
17
.2oj. (Tguchi
>50
9
-0,0s
-1,2
o, 9'
gaseados no Newtonianos
423
e = Kt -lr2.n.
o^3 -F,{-o's'
]o'45
t7.211
OonO", K,,: constante que depende de la geometra del sstema y de las unidades
utilizadas. Los mismos autores recomiendan la siguiente ecuacin para la zonas
laminar y de transicin:
P
c=
t7.221
7.3
de
A" = n'DrH
f7.23t
425
Ar=n.d.Ls=t2.d.Dr.n,
17.241
.Donde, A": rea de transferencia de calor del serpentn interno, mr; d: dimetro
externo del tubo del serpentn, m; Ls: longitud del serpentfn, mi Ls : n. D..n.; D.:
dimetro del serpentn, m.
Generalmente: Ds : 0,9.Dr, para serpentines sencillos de una sola hilera; Dr:
dimetro del reactor; n. : (H./e) + 1 : nmero de espiras del serpentn; H":
altura del serpentn, m. Usualmente: Hs =- 0,8.H; H: attura ocupada por el caldo
de fermentacin dentro del reactor; e: separacin entre espiras adyacentes, m.
Frecuentemente e vara entre 2d y 4d.
En la Figura.7.5.c, se muestra esquemtcamente-el intercambiador fle doble
tubo, el flujo puede ser en paralelo o en contracorriente y cualquiera de los dos
fluidos puede ocuparelespacio anularo el tubo interior. El equipo mostraflo;en
la Figura 7 .5.d, es un intercambiador de un paso por Ia coraza y dos, puatro, o
cualquier mltplo de pasos por los tubos. Elequipo mostrado en la Figura.7,5"e,
es un intercambiador con dos pasos por la coraza y cuatro, ocho, o cualquier
mltiplo de pasos por los tubos.
En la Figura 7.6 sq,representa esquemtiemente la variacin de la temperatura
de los fluidos calente y fro con Ia distancia, medida a partir de la entrada de
fluido fro, en un intercambiador de doble tubo. En figura 7.6.b, se observa que
la temperatura de salida del fluido fro es necesariamente menor que la temperatura de'salida del fluido caliente. El calor transferido es menor que el posible
con flujo en contracorriente en el mismo equipo, y por esta razn el flujo en
paralelo se utiliza raramente en un intercambiador de un slo paso.
426
Figura
7.5
:l-Dt
A
x-Dt +
Reocton con
conlso extenno
Reoctor
con
senpentln hterno
Intencqhbodon de
tubro doble
fco
Tfe
TFe
.Tfo
Tce,
427
Tco
ftudo coltente
T
Fluido colente
AT2
ftudo Pro
Tce
A:
Tf
Tf
ATI
fq
Tfo
Dstoncio
Dstonco
b- flujo en paralelo
a-flujo en contracorriente
7.3.2
[are
ftudo
Balance de energa
ewr = Fxr-(Hr"
428
Ho) = Fn.(Ho
Hu)
t7.251
Donde, q,,ur: velocidad de transferencia de caior, kW; Frr, Fr.: velocidad de flujo
Qiy=Fap-crr.(fo
Tr )=Fo"'c"r'(To
- Tu\
17
'261
Donde, T6, T6E: Temperaturas del fluido caliente, afluente y efluente, respectioC, En
vamente, oC; Tr, Tr.: Temperaturas afluente y efluente del fluido fro,
la Ecuacin t7.2d los calores especficos se evalan a la temperatura media
aritmtca entre las temperaturas de entrada y de salida def fluido: crr: calor
espectfico del fluido fro, kJ (kg.oC)-1; Cr": calor especfico del fluido calente.
La velocidad de transferencia de calor por unidad de rea se denomina fluio de
calor y se expresa en unidades de potencia por unidad de rea (W.m-'z) de la
ftnn
17.271
429
hi
A,.ln (r.lr,)
Z.r.L.k
Ao
v.2at
ho
Aol
Ai
-t_
Donde, Ao
hi
7.291
ho
2.n.ro.L: rea exteror del tubo interior, m2; ro: radio exterior del
tubo interior; L: longitud total de la tubera doble, m; A, : 2.n.r,.L: rea interior
del tubo interior; r,: radio interior del tubo interior; k; conductividad trmica de
la pared deltubo interior, kw.(m.oC) 1 ; ho: coeficiente de transferencia de calor
por conveccin, o coeficiente de pelcula, por el lado exterior del tubo interior,
kW,(m2 oC)-1; hi: coeficiente de pelcula por el lado interior del tubo interior,
Las ecuaciones disponibles en la literatura para la evaluacin de coeficientes de
transferencia de calor dependen de las condiciones del flujo, de la geometra y
del
mecanismo de transferencia,
430
LTM
LT2
LT.
ln'
LTz
LT1
=
17.301
enn J (I.A.Ft.^Ty
17.311
Donde, F': factor de correccin de la diferencia media logartmica de temperatura, Holman (1976), Kern (195O). Los fluidos microbiales forman ocasionalmente
7.3.4
ho'D,
= 0.74.(R,l)*.
trrl'r. ( -r
)''''
t7.32)
pr=n'Dtz'P i pr=F"-cp
pk
Donde, h": coeficiente de pelcula entre el lfquido en et reactor y la superficie
nterior del iecipiente encamisado, W.m-2. oCi ; Re nmero de Reynolds; pr:
nmero de Prandtl; Do: dimetro del impulsor, m; D.: dimetro del tanque; p:
viscosidad del lfquido a la temperatura media aritmtica, kg.m-'.s-'; lpi viscosidad del lquido a la temperatura de la pared; k: conductividad trmica del lquido,
W.m-''.oC-t; cr: calor especfico del lquido, J.kg''.oC''i p: densidad del lquido,
kg.m-3;
la
ho'Dr
0,44.;y
rJ, ()"'
t7.33I
ho'D,
= a.R"N.P,1F.
17.341
432
tgiador
Superflcle
Turbina
Turbina
Camisa
PaIeLa
P.aleta
AncJa
Camisa'
Serpent,f n
Camisa
Camisa
Serpent n
H1
H1
Coeficiente
,62
1,50
0, 35
0 ,87
0 ,46
0 ,54
0,83
0
Serpentfn
ice
ice
Cuando los llquidos son muy viscosos se utiliza un agitador de tipo ancla, Uhl
y Gray (1966):
ho'Dr
= K.R,o.P,o*
()''"
t7.3sI
7.3.5
Oldshue y Gretton, (1954), recomiendan la siguiente ecuacin para el calentamiento o enfriamiento de lquidos en un reactor equipado con pantallas deflectoras, un serpentln helicoidal y un impulsor de turbina:
hr'do
= (0,14.R:'l
'=P*l'{*l'(-1)'
17.361
Donde:
433
Rc= ".D1.p
i pr =tP
vertcales
o,(x) ne*
.P:"
(+i'"
v.cp
k
Donde, no: nmero de haces de tubos; ho: coeficiente de pelfcula entre la superficie de los tubos y el llquido en W.m-2.oC-1. El trabajo de Dunlap y Rushton
dernuestra que en el caso de seis haces de tubos, formado cada uno por tres
tubos de tamao do/D1 = 0,031, (do: dimetro exterior de los tubos; Dr:
dimetro del tanque), los tubos verticales originan una prdida equivalente al 75
o/o
434
de placa veftical
7.3.7 Reactores con serpentnes
Y Small' (1978):
R. > 4.103
t7.38I
+ =to,mrzl.n3'*."r".(l
4
< 1,4.103
=(o,rzaa).n:'* r:*
Dor.dc: Re =
+,
t7.391
[tl
n -' u?
Llanchuradelaplaca;ho:coeficientedepelfculaentrelasuperficiedelaplaca
viscosidad del llquido a
p: densidad a"rr"r, * m't. /,:
m.2oc.l;
w
lquido,
v el
''s
de pelfcula' kg'm
Li"rp"t.,ura
media
raspada
.S.Slntercambiadores de superficie
eje rotatorio'
435
La superficie exterior del tubo central est en contacto con vapor de agua o con
Dr.v'P
a7.401
;Pr=+
7.3.9
enfriamiento de un caldo de
f7.411
436
fluido frfo; /n: masa del caldo en el reactor, kg; co: calor especfico a presin
constante, J.kg''.oC-l; f: tiempo, s.
Si el fluido caliente es un medio de temperatura constante, como en el caso de
l-m-
T"
T"
- To
- Tru
m.cD,tT
17.42t
u.A
Donde, Tc: temperatura del fluido caliente; Tr: temperatura del fluido fro'
- Trrt
To - To
Tc^
Fw.crp
R't-1
c.cpc
K1
(u.\
K.=eXDl
I --''
\Fn''o
tr
7.431
Donde, cp, cp6l calores especficos a presin constante del fluido fro y del fluido
o6-t ' Frr: velocidad de flujo de masa de
caliente (caldo), respectivamente, J kg-t
Ejemplo
7.2
de turbna de seis hojas planas, (Do : Dr/3 : 1,33 m), montados sobre el
mismo eie que gira a 0,8 rps. El tanque de 12,8 m de altura se alimenta con
437
licor; 5- Calor entregado al licor por la dispersin del aire; 6- Calor total
generado en el reactor; 7- Coeficiente de transferencia de calor entre el lquido
en el reactor y la superficie interior del recipiente encamisado; B- Coeficiente de
transferencia de calgr erltre el lquido en el reactor y la superficie exterior del
serpentn; 9- Area de transferencia de calor requerida por el sistema de camisa;
10- Area de transferencia de calor requerida por el sistema de serpentn
Solucin:
1- Area de transferencia de calor disponible por el sistema de camisa, Ecuacin
f7.231:
: 2.d:
0,0508
7,17 m
Hs': 0,8.H -
1 pulgada
(O,8).(8,96 m)
- Nmero de espiras:
,ro=fl,
" e +l=
438
7,17 +1=142
0,0508
esoias
0,0254 m
m
nl
= 3,2 m
.,
= ,2.d.Ds.ns = 2.(0,0?#1.@,2.(1421
i,
115,9 m2
- Volumen de licor:
'ns
v,
=lfd2,6
X,(4)2.(s,go)
'
s- = ,*t
o,
-ffi
36oo
4 = Q1,1
kW
:r
Iirros
-"i
s\"-'-*'
'12.6@)
qoorr:
- Caudal de aire:
.l
'.r
D =- 0,4.(112,6)= u'lo
o,
-8r^aE m-F
--b-
- Nmero de Reynolds:
n_ =
"
0,8.(1,)2.1120
0,216
=77.
- Por consiguiente, O
P = 6.(1120).(0,8)3.(1,33)s = 14118,5 w
439
- Nmero de Froude:
Fn=
o2,Q*
= 0,087
9,8
- Nmero de aeracin:
F^
0,75
A-=
=o.gga
-2.
(f}*.*3'"'.
(+
)',*.
Pc = (0,45).(14f!18,5) = W2
bsrc
.1P^
,og,o = -
t,
q*7
;t
?=0,*.
+ (16,67).(0,398)
= 0,4.35 .i -.
P6 = (0,435).(1.818,5) =.6221.5 W
- Potencia disipada por los tres impulsores:
3.(6440,2) = 19.320,6
. ,:
4rto
=.
1?:1?
-0,172
kw-,
=.
n, = &-L
= 2,51
L 1+.o,ozil nz
4'
mls
v^
= o'76
t+
msls
*t'
o,o6 nls
'
'b''I
P.M t t4z |--,z
R.T (8,g14lu.hnot-r.tr-t.(25 + 273)K
p = 2,5 kg-^-"
m.
= o.r5 .25
'--as't9s
= 1,075
&
ur=
= B,e6
P.-
,, =
,,#frO
g"
r = ge.i,go
441
po = 2O,2
,1+i.ff,.*)^^
lEcu. 7.10I
, = ((ge,sl,'t (o,oet').r,rru .
("#_:-'.
ffi]f)'r'ezs
= 1'728'7 w
7- Coeficiente de transferencia de calor entre el lquido en el reactor y la superficie interior del recipiente encamisado:
- Nmero de Prandtl:
P_
'f
442
_ (o'216).(2E36) = 1392,2
0,4
"" -
(0,74).-(o'441
.n?.p)F
!t3,21
m2."c
u. =
W^:,
ho
r?*(+)o'i(0,%2s4[s
= '1156,2
A = 227,8 m2 >
18)
112,6 m2
= 547.150 W = ho.A.AT =
A = 67,6 m2 <
(1
.1#,2)-A.(25
113,9
18)
r2
es
443
7.4
TRANSFERENCA DE MASA
7.4.1 lntroduccin
dc"
=
dt
Kfi.(C.- C)
f7.41
dad de demanda de oxgeno lOURl, para una diferencia dada de concentraciones, (C- - C.), mediante la modificacin de algunas condiciones delproceso tales
como la velocidad del impulsor, o el cadal de gas. Una alimentacin de aire
rico en oxgeno aumenta el vlor de C-.
444
ci=
P(o)
f7,451
H(O2,7\)
Temperatura
oc
0
mmol,Orllitro
2,!8
10
15
20
1,70
1_ ,54
1,38
25
1-,26
30
35
7,76
1,09
1,03
40
mg Orllitro
69 ,8
54 ,5
49 ,3
44,2
40, 3
37
34
,9
,9
33,
lnternational Critical Tables, Vol lll, p.271 , McGraw-Hill Book Co', New York,
1928.
445
0,242 mmol O,
litro
c.
= 0,242
O" a mg Oz
litro .
mmol 02
mmol
eL--
= 7,75
mg Oz
tro
7.7.
Los valores d saturacih de oxgeno disuelto en agua expuesta a aire saturado
con agua a presiones diferentes de 760 mm Hg., son calculados a partir de los
c = P-'p
C* 760-p
t7.46t
446
5000
Presin de
vapor mm Hg
10000
14,6
14,2
13,8
13,5
13,"1
5
6
12,8
12,5
12,2
1,9
1,6
1,3
I
I
10
11
1,1
12
13
10,8
10,6
10,4
10,2
14
15
16'
17
18
10,o
9,7
9,5
9,4
9,2
9,0
13,0
12,6
12,3
12,7
12,O
12,4
11 ,7
11 ,4
11 ,1
6
6
13,8
13,4
13,1
12,1
1,8
1 1,5
11,2
1 1,0
10,7
10,5
10,3
1
10,1
9,9
9,7
9,5
9,3
9,1
''
10,9
'l 0,6
10,4
10,1
5
5
7
7
8
8
9,9
10
s,7
11
11
9,5
9,3
9,1
12
13
s,0
14
8,8
8,6
8,5
8,3
15
16
17
8,1
19
8,8
8,7
8,9
8,7
8,6
8,4
8,3
I,O
20
8,5
8,1
7,7
22
25
26
27
8,4
8,0
7,6
24
8,2
7,4
28
7,9
7,8
7,6
7,8
7,7
1,5
19
20
21
22
23
24
29
30
8,1
18
7,9
7,1
25
27
28
7,4
7,O
30
7,3
6,9
32
7,3
447
oC, con
Asl, por ejemplo, la concentracin de oxgeno disuelto en agua a 15
'na concentracin de cloruros de 2000 mg/litro, en un tanque a una presin
manom&trica de 8 psig, en un sitio donde la presin baromtrica es 11 psi. se
calcula. en los siguientes pasos:
- La concentrciOn de oxgeno disuelto en agua a 15 oC, con una concentracin
C- =
1O.2
(10,2
- 9'4'2000 5000
c = ro . fe82'3 -
13)
[760-13)
= 992,3 mm Hg
= re.gz
mg Oz
to
Welocdo.d
espectFtco.
de
consLrr,o cle
oxlgeno
Concentro.clon
crltlco.
Concentro.con
448
de
o><geno disLlelto
Tabla
7.4
Concentracin
0,0
0,s
1r0
2,0
7-,25
mo1/Iitro
Tabla
,27
l,2L
)-
,1-6
L,L2
7.5
L,26
7-
1,26
1- ,07
0,89
,12
I ,02
0 ,71-
Organismos
Temperatura
oc
Azotobacter sp.
Escherichia coli
Saccharomyces sp.
30
37
30
24
Concent,racin crtica
de O, disuelto en
mmol Or/1iEro
0, 018
0, 008
0, 004
0 ,022
449
.de oxgeno
7.4.2.1 Mtodo
dC"
=
dt
Kra.C'
17.471
450
7.4.2.2 Mtodo
parmetios:
volumen del caldo en el fermentador, Vr, litros; caudal de aire afluente, O,
litros/s; caudal de gases efluentes, Or; presin absoluta de los gases efluentes,
PE; temperatura del afluente, To, K; temperatura de los gases efluentes, T.;
fraccin molar del oxfgeno en el aire afluente, Yo, mol Orlmol aire; fraccin
molar del oxgeno en los gases efluentes, Yr. La demanda de oxgeno se calcula
a partr de las siguientes ecuaciones:
n=-P.V
R.T
t7.481
Donde, n: gramos molde Or; R: constante de los gases, R : 0,08206 (atmsfera.litro)i(gmol.K); P: presin absoluta, atmsferas; V: volumen, litros; T:
temperatura absoluta, K.
n I Ie^.P^.Y^- eE.PE.YE]
1=l'la
Donde,
Or = V/U
Oe
orR. =
Ve/t;
dc"
dt
n/t
r,
17.49t
(gmol Or)/s.
t lQ^'p^'v^
RL TA -
QE'PE'YEI.
TE )V,
17.50]
451
C'-C,
(c'-c"l^-(c. -cr),
t7.51I
452
t7.441:
AR
dC,
dt
R.(c'- c)
Ecu- 7-Utl
f7.52t
C
d
d
ton
t=t
Tiempo
----+
453
ln (cx
c)
pendien t e,
Kl.o
iernpo ---------+
(1
/K.a). Taguchi y
454
7.4.2.4 Mtodo
dinmico
dc.
lt(Oz)x
t7.531
"
La aeracin se reinicia en el punto B (Figura 7.1O!. y la concentracin de oxgeno
disuelto aumenta hasta alcanzar el valor inicial, El incremento observado de la
:-.
c,=ci-+(+
-no,).r)
t7.551
455
ian
,d
pendienter
Tienpo
..-
pendiEnte
dC/
456
dt, + rtr?
fermentadores:
457
t7.56I
Dorrde: Sherwood
Graslnf
*you,
Schni
DAB
Dil.p".s-t
=
[tc
P"'Dt
lc
2,5 mm:
Slrc = 0,42.(Sch)lP.
(eratts
17.571
entre2y2600
litros:
K,a
0,026(l)"'.,:,'
t7.58I
Van't iliet, (1979) recomiendala siguiente ecuaciri para evaluar K,-a, con una
aproximabin entre 20 y 40 o/o, n el caso de transferencia de'oxgeno en
soluiones de electrlitos fuertes, no coalescentes, en fermentadores agitados
mecnicamente cuyo volumen vara entre 2 y 4400 litros:
458
K,a = oo02.(l)"
.r:,
t7.591
Las ecuaciones [7.58] y t7.591 son aplicables en reactores provistos con diversos tipos de agitadores, diferentes valores de la relacin entre el dimetro del
impulsor
*," = * (+)''*',*'
.""=.-(+)
t7.601
: ptanra pitoto
t7.61I
y de las
unidades empleadas.
La Ecuacin t7.601 se conoce como ecuacin de Cooper et al., (1944), quienes
evaluaron el coeficiente de transferencia de masa por el mtodo de oxidacn del
(*
oo'tt
.,
o'ett.
1'r
17.621
)''62
459
H=(#i" ,
7.4.4
(+)
='*(#)"
t7.63I
K,A
Kt=L
17.641
a= 6.
De
t7.651
Donde, rp: fraccin volumtrica del gas en la fase dispersa lholdupl; Drr:
dimetro medio de Sauter:
460
rl,
Dg=
n.dl
n.dl
t7.661
Donde, d,: dimetro de las burbujas; Ho: altura ocupada por el lquido aerado:
Ho:
Figura
Sstemq de nedcon
Bolbo
de Ftu3o
/'
Lineo de succon
Detector
rogeno
det nivel
de tlquido
de hurbuos
Pontqtlq
deftectorq
CSTR
461
7.4.5
7.4.5.1
. r-r o,"[4,=)'^[f)'^'[)
=
t7.671
u= vs+vl
462
t7.681
7.4.5.2
0,5
t7.69t
Donde, v.: velocidad superficial, m/s; v. : FolA; Fo: caudal de gas, m3/s; A:
rea transversat de la'columna, m2; u.: velocidad de flotacin de las burbujas,
mlsi o: tensin superficial, kg/s?; PrAy': potencia entregada por impulsor y por
unidad de volumen en la dispersin gas-lfquido, Wm3; p": densidad del lquido,
kg/m3.
El dimetro medio de Sauter, Drr, de las burbujas de aire en la ecuacin anterior
De. =
O,U,''(?)
17.70t
Donde todos los trminos tienen el mismo significado y las mismas unidades que
en la Ecuacin t7.691.
'
(t
=',*'(+)o'o
'02'"'"
"'(;n*
17.711
Donde todos los trminos tienen el mismo significado y las mismas unidades que
en la Ecuacin t7,691,
463
.'u.o9,"
17.721
D1
*-=+=o'194'Fl'75 i
Vlida para nmeros de
Fa=
n2.D^
FR
f7.731
<
2,0
Donde, N^: nmero de redispersin; F^: caudal de gas, m3/s; n:velocidad del
impulsor, s-1; Do: dimetro del impulsor, m; g: aceleracin de la gravedad, 9,8
m/s2. Zlokarnik y Judat, 1967, encontraron tambin la siguiente relacin vlida
para nmeros de Froude entre 0,5 y 1:
Po'!"
,s.D1.p,
464
= 1,36.F,0'ffi
17.741
p,_: densidad
Ejemplo
7.3
v, = 5'08'10-s
= G,6.io-o
].to,ssf
4
s
465
7.69);
Il
lO,OzrSz0,6
a'
uz
Donde, u1
= 0,1578.0,5
* 8,47.10-3 i u2 =
U = o,o4
4,1s
.|, .-J9,.oJr"')n'
t(#)o'n{so''oe)"1
4- Aea de la superficie de separaein gas-lquido, a, (Ecacin 7.65):
o = t=.v =
D
49'.r}
4,25.10'
= 56,48 m-1
='
;8,904.10-1
(997,08).(2,5.10-e)
=357.2
=l,N+
466
t1 -"r"
(n,zs.to-3)3.(997,0E).(9,8).(997,08
1,29)
= 941.48s,7
x.L.(4'25.10-3)
2,5.10-e
= 0,42. (7,2)
0'5.
(941 .485,7)
1r3
Kt = 4'58'10-4 Y
Ku
K,-a, (Ecuacin
7.64l:
.../
467
cin, diseado para cultivo contnuo y por lotes, y equipado con sistemas de
controt de pH, temperatura y velocidad de agitacin, Duarte, A., Alarcn, J.F,
Pieros, E.R. (19931. Los ensayos fueron realizados en la fase de produccin
de cidos (fase acidognica) y no en la fase de produccin de solventes (fase
solventognica), correspondiente a la fase estacionaria del crecimiento, con el
propsito de evaluar los gases producidos durante la fermentacin.
El lnsttuto de Biotecnologa de la Universidad Nacional de Colombia, inici en
Tabla
7.6
1-2
1:9
*:
0C.
37
2OO rpm.
2,1 litros/minuto
minutos
l-5
40
m1 .
I
468
litros
r'
medio:
- Activacin de la cepa:
469
E.,
(1989).
litiel de
130
caa
K2HPO4
(cido p-aminobenzoico)
Extracto dd levadura'
Fuente de minerales
Agua, en cantidad suficiente para. -.
FueEte de ninerales:
PABA
NaMo4 -2H2O
CuSOn.5HrO
CoCl-, .6H2O
MgSOr.HrO
CaCI, .2H2O
HrSO, concentrado
FeC13.5HzO
1,8 g
3mg
5g
4mI
90q m1
2,4
a,7
0,24
1g
1,5
28 .,.
2'7
l-000
s
g
g
S
mI
g
mI
El
medo puro y 1,2 litros de medio con clulas activas (preinculo). Ests
cantdades corresponden a una relacin vomenes de 9:1'
470
lnicialmente se preparan en un matraz 120 ml de medio vegetatvo; la composicon de este medio es siniilar a la del medio fermentativo (Tabla 7.7), pero con
80 g de miel de caa en lugar de 130 g. Posteriormente el matraz con medio
vegetatvo es inoculado con la cepa activa contenida en uno de los tubos.
Entonces, en un matraz de 2litros se preparan 1 ,1 litros de medio fermentativo
(Tabla 7 .71 y se procede a inocularlo con 1 20 ml del matfaz con clulas en su
fase exponencial de crecimiento. Dumar y Granados, (1987), establecieron un
tiempo de 20 horas para lograr la densidad adecuada para inocular el medio de
fermentacin. El medio se calienta en el fermentador hasta la temperatura
ptima de crecimiento celular (37oC), antes nocularlo'
- 2. Toma de muestras.
471
Figura
7.13
Tomq de
ruestros
de gos
Line o
de
liquido
2.2 Muestras
gaseosas.
s,e
el ".nal""
embudo hacia abajo para llenar la
472
Figura
7.14
Vqtvut
Medidon
de
dos vlqs
VolvuIo
de dos
conqtes
dsco
Bureto
Botet(o
tomo -
nluestnos
Topon
inyectobte
(
Enbudo
de vidrlo
Penlt(q
etostico
So(ucion
de jobon
Monguero
f texbte
Tan pronto como el gas desaloia el lquido de la botella, deben equilibrarse los
niveles del improvisado manmetro formado por la manguera flexible que
conecta la botella con el embudo mediante una adecuada manipulacin del
embudo, Cuando se logra e! equilibrio se cerran la vlvulas de la botella, se
cambia la posicin de la vlvula de dos niveles, se desaloja el lquido presente
en el embudo y se reemplaza la botella tomamuestra. El anlisis de las muestras
se realiza mediante cromatogratla de gases, Stambuk, J., (1970),
473
5-
3.
4.
Resultados
474
Tabla
7.8 Rendimiento
Pementac6n y"l"
CO,
E2
yn/,
EnaayoABCDE
1
2
3
4
0,094
0,095
0, 064
0, 100
0,77
,2o
0, 14
0,18
0
0,59
0, 54
0 ,72
o,42
,46
0,29
0,30
0
o,7o
0,1808
0
, L772
0,2653
0 ,2960
Observaciones:
,.
475
0,28.
(1982).
y
Walton Martin,
diente a H, entre O,46 y
Figura
7.15
81216
Tiempo de fermehtacion, horas
476
| ,t
.1
Figura
7.16
70
60
50
40
30
20
to
o
o4aP162024
Tiempo de fermentaclon, horas
Figura
3,5
7.17
3
2,5
2
1,5
o,5
o4812
162024
Tiempo de fermentaclon, horas
47V
;,
Figura
1,2
7.18
(e
acetona,
F-1
o,g
o,6
o,4
tr
o,2
o4a262024
Tiernpo de fermentAcion, horas
o,4
.------.---.+----.-.-.
o,O
o,2
-""'.'-.'^i------:---------
o,7
.-.-i-.---l------..---
O---
o4a2162024
Tiempo da fermentecion, horas
f,78
Figura
COr,
250
200
150
too
50
o
8t216
Tlemp de,farmentaoion, horas
7.21
Figuta
20
t8
Composicin de los gases producidos en la fermentacin acetobutllica. Alarcn, J.F, Pieros, E.R. (19891.
16
t4
- . ' {-
12
.-..t......-..'..-.... ----...+...--
---
.---.....
.....-..} ..
'
10
..i..-...-.......-............i......-............-......i..-............-,.....
a
6
4
2
o
....t
-.....-l
ll-/::
t--::
----...".--.-.-.i..----.--...--.-.---.--....--.-...--...,...i..-.-.-........-..--i-
44P62024
Tiempo de fermentacion, horas
479
:'
de
tedos animates
-r
7.4.7.1 Condiciones ambientales tpicas
Una de las principales tendencas de la lngenierfa .Bioqumica es la creciente
utilizacin de tejidos vegetales y de tejidos animales de humanos, monos,
bovinos, ratones e insectos. El motivo fundamental es la investigacin de las
respuestas de un cultivo puro, sometido a condiciones cuidadosamente controladas, a la accin de hormonas, factores de crecimiento y drogas.
Tabla
7.9 Condiciones
i3";",l.3.e:z
pH
Elsfuerzos cortantes por agitacj-n
Osmolalidad deI medio de creeimiento
oc.)
7 - 7,s
< 20 dinas/cm'
21O - 350 mosm.
Nutrientes:
Concentracin de oxlgeno disuelto
30 - 80 t saturacin
de ai-re
O,l - 4 g/l-tro
0,5 - 2 mM
Coneentracin de glucosa
Gfutamina
Residuos:
Concentracin de ion amonio
Relacin cido lctico/J-actato
< 4 mM
no es crtica
control-a pH
Crecimiento:
vel-ocidad especfica
de crecmiento,
si se
480
En otros casos las clulas se cultivan para obtener algn producto como clulas
#
7.4.7.2.1 Reactores agtados
una desventaja de estos reactores eg la baja concentracin del caldo (5.105 6.106 clulas/ml; 10 - 500 mg de anticuerpos monoclonates/litro). En el cultivo
por perfusin estas concentracones pueden aumentarse en un orden de magnitud mediante la retencin de las clulas en el reactor por mtodos mecnicos
tales como mallas cillndricas de acero inoxidable acopladas al impulsor y en
algunos casos medante sedimentadores y equipos externos de ultrafiltracin.
482
Figura
7.22
topon
Fro.sco
^(:*),=
17.751
- o.n.(#),.,, + rOr.A.6y
17.76t
483
ffi
: .i
(+)
=(+\ . 914).u,
d! )r*q \dv ), dv \v
\
if
17.77t
Por consiguiente:
40)=, (#)
t-a
17.781
17'791
c=.a.12*b.!+e
Donde, d, b ai constantes.
Por consiguiente:
.' -,i
'
&" =2'.o
=2.a-v+b
,
-''',
"
=
dy
Or, -''
d'c
(dc/yl
,:
r-.7.8dl
c : 0, en y : h, (Figura 7.22l.;
.:
a_(g) : b=_2.a.y"=
2.D'D
rlozl
,2.DD .z _
r(oz)
.h2
,*!
t7.ell
* e=O
'i 1
, = '!o:)
-ft - v)2
2'D
t7 '82t
Las otras condiciones de frontera son: c : c- en y : 0. Donde: c-: concentracin de ofgeno en la sqperficie de separacin entre medio y aire, mmol Orlml.
484
una concentracin de
Ejemplo
7.5
=(+*+)'.
t7.83t
(ar)2
3600
hora
485
(y')
)-
Donde la prfundidad
Por
o = mr.Bo.ooo
No
# #^,
= 24.w
2- Punto de confluenca
-,
",
= 24,O00.erg(0@4.t)
horas.
t = .73,83
'r
Por consiguiente:
:.,,
cry:r
,6 nl
cm2
'
t'
r(or)
g,U.fi'#
ml
.,
1,0D,.1O-'^!n,?
c'
O,95.0
,Z)u=
0,19
o"'"
^!lilo
r,!.Pr' .'
1000 m,
i'
c*=r,9.10o4-o"
486
-.
'
31
miutos
a travs de capilares
y los capilares del sistema circulatorio de los animales indujo a Knazek et al',
1972, a cultivar clulas animales en reactores de fibras huecas. Estas fibras (de
tracetato de celulosa, poliamidas aromticas, copolmero acrlico, polisulfona o
por
de carbonato de silicn) son estructuras cilfndricas anisotrpicas compuestas
una pequea capa activa interna lO,1 '2 pmde espesor) y una capa esponjosa
gruesa (50 - 85 pm de espesor) que acta como soporte' Las fibras (dimetro
que
interno: 40 - 2oo l/ml tienen poros con dimetros del orden de nanmetros
permiten la retencin de especies con pesos moleculares entre 300 y 300'O00'
Figura
7.23
'
'(#)-'=
- o'(#L.o* * r(o)'A'6R
Dotde:A=2..r-L
488
f7.841
t7.851
:,
i-
Por consiguiente:
| *\
^( \
D.lr.
- =*)'= o'V';)'
*
'
"
''' (c.2)'6r
17'861
,_
P+
dosprmero""^'&*;",.:ffi;.;t:il:
El valor de la derivada en
r7B't
Por consiguiente:
!q)
(o)
\s = r-(-q"-. 1RdR)
[n'
t7.881
r(o)'R
!h.L\
dr[ dR) D
t7.891
dc -(Or).R *c,
dr
2.D
t7.90I
c=o
en
R=xo
y. (#t=*o=o
t7.ett
t7.921
489
r tO^\.R2
t7.931
'=il-'+ct'lnR+c2
Las otras condiciones de frontera son: c : e* en Fl : R", Donde: c*: concentracin de oxlgeno en la superficie interior de la fibra, mmol Orlml. Por consiguien-
'
c*
(oz).R?
- 4.D - '(oz)'Rl
2.D
,o
[7 41
c,
t7.951
490
7.5
CAMBIO DE ESCALA
proceso.
491
Algunos autores como Finn, 1967; Aiba et al., 1 973; Oldshue, 1 983 y Charles,
1985; consideran que los mtodos de transferencia de calor generalmente son
diferentes a nivel de laboratorio y a nivel de planta de produccin y analizan una
concentracn constante,
Entre los criterios de cambio de escala utilizados con mayor xito estn potencia
por unidad de volumen, tiempo de mezcla, coeficiente volumtrico de transferencia de masa y velocidad de la punta del impulsor. La aplicacin de estos criterios
requiere un profundo conocimiento del proceso y partcularmente del paso
7.5,1 Agitacin
g,
V-o,sl
t7.961
r.
Esta ecuacin significa que a nvel de laboratorio,Y = 0,1 m3, las potencias
tfpcas son de 10 - 15 W/litro. A nivel de planta piloto, Y = 1- 5 m3, las
potencias son de 6 - 8 W/litro, y nivel industrial se aplican potencias de 1 - 2,5
Wlitro. Einsele tambin estableci los siguientes criterios:
80 y 100 segundos.
492
misma capacidad e idnticos factores geomtricos, pero el caldo es pseudoplstico con un ndice de comportamiento de flujo, m = O,5, y un ndice de
consistencia, K : 2 N.m-2.s-o'5. El consumo de potencia en la agitacin del
caldo aerado (O : 20 m3/minuto), calculado segn las Ecuaciones 7.21 v 7.22
es 83,5 kW. Este ltimo valor es inferior al observado bajo condiciones similares. En la prctica hay necesidad de realizar ensayos con caldos reales de
fermentacin a escala de laboratorio, de banco y de planta piloto, con el
propsito de obtener los criterios de cambio de escala en cada caso especffico
y aplicar racionalmente las ecuaciones disponibles.
7.5.2
Transferenca de calor
493
las
en
La generacin de calor
mientras el rea de transferencia de calor vara de acuerdo ctin (Dr)2. Por consiguiente un sistema de camisa, suficiente para mantener un reactor de laboratorio
en condiciones isotrmicas, debe, reemplazarse, por ejemplo, por un sistema de
serpentn interno o externo, para calentar un digestor de lodos de,aguas residuales, o refrigerar un reactor industral para la produccin de protena unicelular.
Generalmente
el
transferencia de calor que la camisa, pero ocupa un considerable volumen, interfiere los patrones de flujo y origina problemas de limpieza y esterilizacin.
Adems los escapes por pequeos agujeros frecuentemente constituyen un serio
problema de contaminacin. Tambin, en muchos casos se ha observado la
disminucin del coeficiente de transferencia de calor por la formacin de zonas
donde se acumulan los microorganismos.
y un serpentn
depende de la fermentacin
especfica, del comportamiento reolgico del caldo y de los detalles de diseo
del tanque y del sistema de agitacin, A escala industrial la liberacin de
grandes cargas calorfficas, como en el proceso de produccin de protena
unicelular (SCP) desarrollado por la compaa lCl(El reactor es una columnade
7 m de dimetro y 60 m de altura con un volumen efectivo de 1560 m3, Bailey
y Ollis, 1986) los serpentines internos no alcanzan a remover el calor producido
y deben ser reemplazados por un intercambiador externo,
494
de
las
termoflicas
cepas
la
mayorfa
de
Desafortunadamente
calor.
de
transferencia
son menos productivaS que sus correspondientes mesoflicas, pero este no es
495
7.5.3
Transferenca de masa
K,a u,
(+)" v!
f7.97'l
vr:
velocidad superficial,
O/A; O: caudal de gas, m3/s; A: rea transversal
de fa columna, m2: PnlV: potencia entregada por impulsor y por unidad de
volumen en la dispersin gas-lquido, W/m3. Estas ecuaciones deducidas
emprcamente usualmente no son aplicables en situaciones apreciablemente
diferentes de las condiciones para las cuafes fueron deducidas
Herbst et al., 1992, y Solomon, 1980, recopitaron ecuaciones y datos de la
literatura relacionados con la evaluacin delcoeficiente KLa en el caso de fluidos
KIn u
lL-^
t7.98I
reactor de 100 litros y en otro de 10.000 litros. En este caso los dems
parmetros no pueden controlarse y toman valores diferentes de los originales
(Tabla 7.10) a medida que cambia el volumen del sistema.
Eiemplo
7.6
Oo:
caudal de aire alimentado al reactor, m3/s; Oo/V: relacin entre el caudal de aire
alimentado y el volumen de licor, s-t, o en v.v.m, (volumen de aire por volumen
de licor por minuto); n.Do: velocidad de la punta del impulsor, m/s; Rr, nmero
de Reynolds.
Utilizar los siguientes criterios de cambio de escala: 1- Potencia por unidad de
volumen constante en ambos reactores; 2- Velocidad del impulsor igual en
ambos reactores; 3- Velocidad de la punta del impulsor igual en ambos
reactores; 4- Nmero de Reynolds igual en ambos reactores; y evaluar el efecto
de cada criterio sobre los dems parmetros del sistema.
Solucin.
498
+=4$=1oo;
100
,vP
ad,,ts:
v a ol a ),
Drn=(1))1F=4,A4
El dimetro del impulsor del reactor de 10 m3 es 4,64 veces mayor que el
dimetro correspondiente del reactor de 0,1 m3,
+ d nl .oln=nf,. ol,n
(1) . (1) = o3.
G,ilF
ns = 0,36
La velocidad de giro del impulsor del reactor
= 36
El reactor de 10 m3 requiere un caudal de aire 36 veces mayor que el correspondiente al reactor de 0,1 m3.
de
10.000 litros:
499
0,1
m3.
R,
o.
el
Tabla
7.10 Comportamiento
de escala.
Reactor de
100 litroa
R6acEor de
10.000 litroe
ED
A
1
P/v
100
2t5t
2t,5
0,27-5
2L,5
0,21
0,0021
n1
0,36
0,2L
0,0464
DA1
4,64
4,64
4,64
4,64
36
Qo1
100
Q"/Y
n.Do
)-,67
RE1
500
,36
7,15
2t,s
4,54
0; 215
4,64
0,215
2L,5
4,63
.1
,0464
ne = O'215
- Los dems
no.Dl, = nc.(4,64)2
nn =
Q'Q$!
- Los dems
PROBLEMAS
7.1
502
7.2Un reactr de mezcla completa (D, : 1,2 m) se llena con agua hasta una
altura H = 0,8 m. El tanque est equipado con 4 pantallas deflectoras de
7.3
s03
velocidad superficial del aire, m/s; B- La velocidad superficial del aire correspondiente al punto de redispersin, m/s; 9- La velocidad en la punta del impulsor;
cuya
c=c'
en
n=& , #=O
en R=O
'(o")
o.(1"- . ? L\
[n' R dR)
Tambin:
c=c* -'=(':).(^:-*')
6.D
504
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Welty,
J.
1277-1305. -
..
514
INDICE DE MATERIAS
Aceites vegetales
101
258
Agitacin de fluidos
Newtonianos no gaseados
Newtonianos gaseados . . . .
no Newtonianos no gaseados
gaseados no Newtonanos
Agua
tonicidad
.........
actividad
actividad y
277
275
influencia sobre la
velocidad relativa de
410
diversos bioprocesos
279
422
419
422
diseo de
medios
97
423
Agitacin, aeracin
cambio de escala
410
492
evaluacin de la potencia
entregada al fluido
421
y dispersin
Almidn, hidrlisis
conq-amilasa...r .
con maltosa
con c-dextrina
2O7
228
229
Aminocidos en el licor
de maceracin de
mafz
103
Anlisis en la evaluacin
de parmetros cinticos
Aire
calentamiento directo
calentamiento indirecto
compresin politrpica
388
388
386
385
dispersin en sistemas
462
463
384
386
388
esterilizacn
por calor
por filtracin
diferencial
integral
.....
3O2
termodinmico del
metabolismo microbial
126
Antibiticos producidos
por bacterias y hongos . . . . .
25
Aplicaciones
de la lngenierfa Bioqufmica . .
22
de los lenguajes de
simulacin en ingeniera
Azcar de caa, simulacn
3O5
delahidrlisis
....
43
.:
235
de vidrio
Bacterias
lecho empacado
con lana mineral
en una vela de "Celloton" . .
390
.
productos ndustrales
produccin de antibioticos, .
23
25
392
perodo de reproduccin
de varias especies
tipos de nutricin
273
91
515
Biomasa
valores de pH para
el desarrollo
Balance de
281
energa
decrecimiento...
288
164
Calor
rea de
.. .
transferencia
425
171
Calor. coeficiente
influencia de la concentracin
sobre la velocidad especfica
114
materiales
52
de la biomasa,
determinacin
consideraciones sobre
cintica y simulacin
reactores
de'elementos qulmicos
de
detransferencia...
Calor de combustin
de las clulas
429
142
152
1
50,1 52
322
145
Calor de reaccin
54
en una fermentacin
anaerobia
56
Calor generado
de carbono durante el
crecimiento de S. cereu
iae
de oxgeno durante el
crecimiento de S. cerevisiae . .
83
. 84
.......
disponibles
decarbono yoxgeno
de electrones
en catlisis enzimtica
en fase heterognea
57
245
q0
cinticas
captulo 1 . ... .
captu|o2....
46
116
capftulo 3
181
captu|o5....
capftulo6....
captu|o1....
351
4O2
505
30
Biocatalizador
Biomasa
modelos cinticos no
estructurados para crecimiento
516
169
150
166
167
55
formulacin de ecuaciones
Bibliografa
por metabolsmo
por mol de 02 .
por actividad metablicr .
:
282
Calor, produccin
bajo represin por
glucosa . .
53
55
durante el crecimiento
microbial
C br transferido
enfermentacin...
en un reactor aerbico
en cambio de escala
encondcionesinestables...
agitacin
comportamientodevarlables.
transferenciadecalor
transferencia de masa
424
437
493
436
491
492
498
493
496
Capacidad calorfica
enfermentacin...
17O
Carbono
balance
55
balance durante el crecimiento
83
de S. cerevisiae
89
fuentes
9
Catabolismo y anabolismo
Catlisis enzimtica
en fase heterognea
balance de
materia
sustrato
consumo de
239
245
246,249
qumicos
fsicos
Clulas
cultivo
24O
242
2
representacin esquemtca . . . .
31
de mamfferos
condiciones ambientales . . .
'
. 480
filtracin a travs de membranas 41
informacin gentica
3
productos intracelulares
39
productos e)Gracelulares . . . . . 40
representacin esquemtica . . . . 3
ruptura
......
40
separacin
39
tipos bsicos
2
Ciclos
del cido tricarboxflico
15
de esterilizacin, dseo
37O
energtco de las clulas . . . 134
Cintica
de las reacciones
catalizadas por enzimas . . . . . 185
modelos cinticos
2OO
de la destruccin de
microorganismos mediante
calor htlmedo
357
Cintica
evaluacin de parmetros
a partir de datos
experimentales . , ' .
modelos cinticos
noestructurados ....
y
productos
consumo de sustrato
formacin de
263
282
crecimiento
modelos cinticos para
la formacin de producto
292
297
Clasificacin de microorganismos
del reino protista
de mantenimiento,
determinacin grfica
86
Arrhenius
Cofactores y coenzimas
Columnas de burbujeo
359
de
186
343
Composicin
melazas de remolacha y caa
99
105
extracto de levadura
extracto de malta en polvo
100
extfactodesalvadoyaceitede
semillas
104
. 103
103
67
coli
Compresin politrpica
elemental del E.
386
Concentracin
de nutrimento y
concentracin de
clulas
de sustrato y velocidad de
una reaccin enzimtica . . .
Conservacin de
301
energla
Consumo de potencia
por agitacin
92
203
121
421
517
Control ambiental,
medios de cultivo
Diseo de un bioproceso
i : .. . . . .
107
de antibiticos
207
229
228
348
Datos experimentales de
la velocidad inicial de
la reaccin de hidrlisis
de acetil colina
141
39
,,O,
42
40
Diseo de medios de
crecimiento y produccin
88
consideraciones tcnco
econmicas
94
97
17O
264
69
Difusin de oxgeno
fuentes de carbono
aceites vegetales
alcoholes sintticos
licor de sulfito .
melazas, cebada y
extracto de malta
hidrocarburos
enfrascosT......
ejemplo
..:,:.::
482
a travs de capilares
Diseo de ciclos
de esterilizacn
518
clulas
41
productos ntracelulares
39
productos extracelulares . . . . 40
purificacin final del producto -
ruptura de clulas
.
Densidad de la biomasa . . .
equrpo
.. ..
258
esterilizacin
atravsdemembranas
recuperacin de antibiticos
y protenas medante
intercambio inico
Datos termodinmicos
de algunos compuestos
representatvos
Determinacin de la frmula
de un microorganismo tpco .
42
filtracin de clulas
separacin de
38
extraccin llquido-lquido
con o-amilasa
el biocatalizador .
el biorreactor
separacin y purificaoin
de productos de la
ingenierla bioqumica.
68
Datos de la hidrlisis
del almidn
Diseo de un bioproceso
consideracones generales . . .
cultivos de clulas y teiidos . .
36
37
480
Datos
en presencia de o-dextrina . .
en presencia de maltosa
medios
de aire
98
101
'
100
1O0
98
r01
485
fuentes de nitrgeno
487
inorgnicas y sintticas
101
370
extracto fermentado de
salvado y aceite de semillas
1O4
29
31
30
33
35
35
extracto de levadura
licor de maceracin de maz
licor de papa
torta de soya
105
102
102
102
requerimientos
nutrimentales
88
Diseo de medios de
crecimiento y produccin
requerimiento de:
elementos
mfnimos
especficos
de energa
ambientales
medios de cultivo definidos .
control ambiental
89
90
92
93
94
106
107
Diseo preliminar de
un medio de cultivo
Disipacin de energa y
eficiencia termodinmica . . .
110
146
Disipacin de calor y
de entalpfa libre
148
disponibles
57
Embden-Meyerhof-Parnas 8
Energta
balance
general
164
171
"74
disipacin
146
Energfa libre
124
estndar
130
Dispersin
412
de gases
compuestos
de aire en sistemas
sin agitacin mecnica
462
fosforilados
biolgicamente importantes .
de aire en sistemas
133
463
59
62
Entalpa
137
123
64
Entner-Doudoroff
Ecuaciones cnticas,
formulacin a partr del
balance de materiales de
un cultivo contnuo
Entropa
80
"t2
124
Enzimas
actividad de la enzima
Eficiencia de la clula
en el proceso de captura
de energfa en la reduccin
del piruvato hasta lactato . ,
132
...
actividad enzimtica
Sglucosidasa
192
291
139
heterognea
239
185
149
.
54
56
clasificacin
cofactores y coenzimas
187
186
519
' !.
Enzimas
Enzimas
226
energfas de activacn
e inactivacin.
198
2O4
ambientales
pH .. .
temperatura
importancia industrial
rsoenzrmas y enzrmas
alostricas
Michaelis-Menten :
Briggs-Haldan .
.
...
Michaelis-Menten para
'una reaccin enzirntica
reversible
196
-196
196
188
187
200
. ': 200
208
215
Enzimas, modelos de
inhibicin
competitva
no competitiva.
por sustrato.
223
225
231
nmero de recambio , . . . 193,194
reactores enzimticos
233
pr lotes
234
continuo de flujo tapn . . . . . 234
relacin entre el caudal
empacado.
simulacin de la hidrlisis
del azcar de caa por
accin de la enzima inverfasa 235
simulacin del modelo de
Michaelis Menten.
212
191
Esterilizacin
lotes
continua
diseo de ciclos
por
energa de activacin
y coeficiente de Arrhenius. .
359
Esterilizacin
mediante calentamiento
directo por inyeccin
de vapor.
376
reduccin fraccional
de la poblacin de
microorganismos
362
seleccin del
microorganismo de
370
diseo.
Esterlzacin de aire
calor .
compresin politrpica
calentamiento rlirecto
calentamiento indirecto
con gases combustibles
384
386
396
388
388
217
filtros fibrosos
393
eficiencia de fibra
espesor de un lecho
empacado con fibras
393
devidrio
524
369
375
370
eficiencia de los
y el grado de conversin,
en la isomerizacin de
'glucosa, en un reactor
relacin entre la
concentracin de sustrato
y el tempo de reaccin,
en un reactor por lotes,
empacado con enzima
....396
Factor de rendimiento
Esterilizacin de aire
'
388
389
filtracin
filtros empacados
filtros de vela
filtros de membrana
391
43
Evaluacin
de entalpa y calor
de combustin
410
aeracin
por catabolsmo .
158
energla tctal
disponible en el medio
156
equlvalencia de los
factores de rendimiento
72
evaluacin en la produccin
de cido cltrico
77
Evaluacin de rendimientos
basados en energa
159
generacin de ATP
mximo de ATP en cluias
467
Evaluacin
de rendimientos
basados en energa
159
Extraccin lfquido-lfquido
de antbitcos
42
104
Extracto de levadura
105
Factores de rendimiento
de
de
de
de
de
en
78
79
140
de la potencia entregada
al fluido por agitacin y
cftrico
en medios mfnimos
en medios complejos
energla liberada
498
Etapas en el planteamiento
y la solucin de un modelo . .
74
392
en el crecimiento aerobio
de S- cerevisiae
electrones en biomasa
energa en biomasa
oxgeno en biomasa . ., . sustrato en biomasa
sustrato en producto
el crccimiento aerobio
70
161
163
mximo de sustrato
en producto
rendimiento verdadero
verdadero del oxlgeno
76
163
79
Fenmenos de transporte en
bioprocesos
reologa del caldo
agitacin, aeracin
y dispersin
406
406
410
424
transferenca de calor
transferencia de masa
Fermentacin aceto-butnca
composicin de los gases
consumo de sustrato
crecimiento de biomasa
produccin de acetona
produccin de butanol
produccin de etanol
produccin de gases, CO2 e
444
479
477
476
478
477
H,
478
479
71
154
.
70
70
75
Fermentacin aerobia
171
balance de energfa
ecuacin de crecimiento . . . . . 71
factores de rendimiento 71.74
7'.|
521
Fermentacin aerobia
formulacin de ecuaciones
'
-
Formacin de producto,
modelos asociados al
Fermentacin anaerobia
balance de elementos qumicos 56
balance de energa
174
ecuacin de crecimiento . . . . . 64
Fermentadoresen sete . . . . . . 343
Filtracin
deaire
..........
388
de clulas a travs de
300
parcialmente asociados al
crecimiento: rodelo de
Luedeking y Piret .. . . .. ,
vela
fibrosos
...:..
301
Formulacindecuaciones
clulas de S. cerevisiae . .
eficiencia de los
i.
Filtros
de
no asociados al
crecimiento microbial
filtros
391
Formulacin de medios
I
393
Fuentes
.... . 80
decarbono
gg
de nitrgeno
empacados
.. i :,.......:..
prdida de presin en
filtros de fibra de vidrio . . . r
389
161
398
Gluclisis
Fluidos
Newtonianos
4Oi
agitacin de fluidos
no
gaseados
416
agitacin de fluidos
gaseados
419
Fluidos no Newtonianos
agitacin de fluidos
no gaseados
422
agitacin de fluidos
gaseados
deCasson
Glucosa
171
174
153
isomerizacin en un reactor
empacado
Grado de reduccin
58
Hidrocarburos
101
109
258
con glucoamilasa
en un reactor por
522
217
423
409
.. :.....
410
Formacin de producto, moderos
'' 297
cntcos
,cuerpo
lotes
,.
r.
256
f'
cono-amilasa....
Melazas de remolacha
.,
204
2O7,2Og
y caa,
composicin
Metabolsrno, microbial
anlisis termodinmico . . . . .
maltosa.
228
a-dextrina
procesos de produccin
de energa
gluclisis
12A
23O
rutas metablicas:
Embden-Meyerhof -Parnas
del fosfato-pentosa
nvertasa.
99
235
Entner-Doudoroff .
I
11
respiracin
12
13
13
pro9rama:
C:\|SIM\|NVTSA1.S|M.
progfama:
C:\GWBASIC\INVTSAI.BAS-
236
237
259
lntermediario qufmico
del
138
alostricas
187
Lenguajes de simulacin,
aplicacin en ingenierfa
43
102
102
100
95
.
106
108
cebada. monosacridos y
oligosacaridos ,; .
reduccin
16
Medios de crecimiento
diseo
Microorganismos
composicin elemental
88
66
determinacin de la
composicin
69
45
Licor
de maceracin de malz
de papa
de sulfito
16
reacciones de oxidacin
y produccin,
lsoenzimas y enzimas
y fosforilacin
oxidativa
Hidrlisis de sacarosa
con invertasa, velocidad
inicial de la reaccin
comn, principio
transporte electrnco
99
Modelos cinticos
de las reacciones
catalizadas por enzimas
de Michaelis-Menten . .. .
de Briggs-Haldarie
200
2OO,2O4
208
Michaelis-Menten
reaccin enzimtica
reversible
215
extracto de malta,
composicin
100
523
- .,
Monosacridos y oligosacridos
en la cebada
Modelos cinticos no
estructurados
Para
crecimiento de biomasa,
consumo de sustrato
yformacindeproducto. 282
283
de Monod
285
de Moser
286
de Contois y Fujimoto
286
de Teissier
286 "
de Konak
287
de Kargi y Shuler
... 288
deMeyrath .....'
... 288
deHinshelwood ..
289
de La Motta
289
de muerte microbial.
289
de Chiu
290
de Moser y Steiner
de metabolisrno endgeno . . . 29O
Modelos cinticos para la
inhibicin del crecimiento
292
294
295
de inhibicin por producto . . . 295
de Holzberg
295
296
de Ghose y Tyagi
deJerusalimsky..
296
296
de Bazua y Wilkie
de represin catablca
297
de Andrews
de Tseng y Waymann
Modelos cnticos
para la formacin
de producto
Nitrgeno, fuentes
inorgnicasysintticas.....
101
recambio
193,194
Parmetroscinticos,
evaluacinapartirde
datos
experimentales
de la ecuacin de Monod. . .
301
308
Parmetros de la ecuacin
de Michaelis-Menten
evaluacin grfica.
2O4
evaluacin en la hidrlisis
del almidn.
206
Prdida de presin
398,309
en un lecho empacado
con lana mineral
en una vela de
297
99
390
"Celloton" . . 392
Perodo
de adaptacin
asociado al
crecimiento
microbial.
no asociado al
crecimiento microbial'
parcialmente asocado
al crecimiento: modelo de
Luedeking y Piret
299
3O0
301
de calentamiento
y perodo de sostenimiento .
Modelo de Miehaelis-Menten,
simulacin. Programa:
C:\GWBASIC\MENTEN.BAS
524
213
271
de replicacin de los
organismosfilamentosos....
Modelo de Michaelis-Menten,
Programa:
C:\ISIM\MENTEN.SIM 2'12
374
de replicacin de bacterias
y levaduras
de replicacin de E.
simulacin.
de sostenimiento en una
fermentacin por lotes.
de sostenimiento, influencia
del volumen del caldo
pH . .
271
coli . .. ....
371
375
191,218
pH
280
281
197
pH de algunos fluidos
280
valores de pH para el
desarrollo de bacterias
281
38,41
40
estructurados
297
295
inhibicin
Productos industriales
derivados de bacterias. . . . . .
23
24
39
metablicos de bacterias
antibiticos.
25
Programa:
Problemas
Capltulo
Capltulo
Capftulo
Captulo
Capftulo
Productos de la ingenierfa
bioqulmica,
purificacin
extracelulares
114
178
255
4
6
347
400
Capltulo 7
502
Proceso aerobio
ecuacin de crecimiento . . . .
de produccin de levadura
a partir de glucosa
Proceso anaerobio
ecuacin de crecimiento . . . .
62
171
glucosa
64
'174
Productividad y
grado de conversin
330
mxima, en un reactor
continuo de mezcla
completa
C:\GWBASIC\HERBERTl.BAS 324
C:\GWBASIC\HERBERT2.BAS 336
C:\ISIM\MENTEN.SIM 212
. 213
C:\lSlM\lNVTSAl.SlM 236
C;\GWBASIC\INVTSA1.BAS. . 237
C:\OUATTRO\MONOD.WOI .
308
C:\GWBASIC\MONOD.BAS . . 312
C:\GWBASIC\LEDUYZAJ.BAS 317
C:\GWBASIC\SPLINE.BAS. . . 32O
C:\lSlM\THlELEl.StM 25o
C:\GWBASIC\MENTEN.BAS .
Prlogo
Reactor
......
33
a escala de laboratorio,
evaluacin de los gases
producidos durante la
fermentacin
467
aerbico, transferencia
de calor
(CSTRI
437
328
aerbico, transferencia
demasa
Productos
clasif icacin
......465
298
agitado
de la fermentacin,
composicin qufmica . . . . . .
xvu
90
415,482
346
525
Reactor
tapn
168
327
328
467
transporte de oxfgeno en
biorreactores para el
cultivo de tejidos animales
480
Fleduccin fraccional
de la poblacin
'de microorganismos
...
342,343
sustrato en biomas . . .
enzimticos
233
de electrones en biomasa
en el crecimiento aerobio
lotes
234,322
reaccin
en serie
Rendimiento
Reactores
pof
'
334
contrnua.
234,321
.'.... 328
(CSTR)
'
contnuo de mezcla
completa con rcirculcn 338
en serie
342
343
con camrsa
con serpentn
con tubos verticales
con serpentines de
placavertical
....
431
433
434
':
435
transferencia de calor
en un reactor aerbico
transferencia de masa
en un reactor aerbico
526
435
437
465
,..;..
en el crecimiento aerobio
de S. cerevisiae . . . . . .
70
71
71
72
74
de sustrato en producto
mximo de sustrato en producto
75
76
77
coeficiente verdadero en
medios mnimos
verdadero en medios complejos
verdadero del oxgeno
78
19
79
'
Rendimiento
de energa en biomasa
'
,154
enelmedio
intercambiadores de
superficie raspada
70
., 70
oxlgenoenbiomasa....
equivalencias
contnuo
362
221
.............
'
basado en la energla
liberada por catabolismo ,.
156
,,'
. .
evaluacin de rendimientos
basados en energfa
en la generacin de"ATP . . .
158
59
161
Termodinmica, energa
libre estndar
130
de hidrlisis de algunos
compuestos fosforilados . . .
Transferencia de calor
en fermentacin
en un reactor
132
aerbico
437
de algunas reacciones
biolgicamente
importantes
133
Termodinmica de los
procesos bioqumicos
431
..,433
434
serpentines de placa
vertical
ciclo energtico
435
raspada
Transferencia de masa
superficie
delasclulas....
134
137
evaluacin de entalpa
y calor de combustin
140
datos termodinmicos
de algunos compuestos
representativos
43 5
444
coeficente de
transferencia de oxgeno,
determinacin
450
450
141
145
balance de oxfgeno
mtodo esttico
mtodo dinmico
455
coeficiente de
transferencia de
457
142
calor de combustin
calor de reaccn
disipacin de energa
eficiencia termodinmica .
146
eficiencia energtica
del crecimiento microbiat'. . .
149
.y
camisa
serpentn
tubosverticales...
451
452
masa
evaluacin
460
fraccin volumtrica
determinacin del calor de
combustin de las clulas
y otros compuestos
Thiele, modulo
249
2
Transferencia de calor
eir fermentacin
424
rea de transferencia
balance de energa
425
428
coeficiente de
transferencia de calor
528
429
.
436
462
difusin de oxgeno
enfrascosT...
482,485
difusin de oxgeflo
en condiciones inestables
en recipientes agitados . . . .
dispersa
a travs de
capilares :., . .
,
487
462
463
465
467
\
t.-,
Velocidad especffica
Transferencia de masa
de consumo de sustrato,
crecimiento de biomasa
y formacin de
y gaseosas y evaluacin
producto
. 468
transporte de oxgeno
en biorreactores para
el cultivo de tejidos
animales
\r,
enzima
480
de crecimiento de biomasa .
de crecimiento:
influencia de la
concentracin
de biomasa,
Modelo de
Meyrath
54
266
288
191
-.
529