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METODOS:

Se realiza el examen macroscopico de la muestra


A)
B)
C)
D)
E)
F)

Presion: 90-18 mm en decbito lateral


Color: Agua roca
Aspecto: Trasparente
Coagulacin: carente
Densidad: 1.007
pH: 7.40-7.50
Despues se realiza el examen citoquimico

Albumina 10 30 mg/dl
Glucosa 40 80 mg/dl
Lactato deshidrogenasa (LDH) Equivalente a conc. Serica
Proteinas 12 60 mg/dl
Prealbumina 2 7%
Albumina 56 76%
Alfa-1-globulina 2 7%
Alfa-2-globulina 4 12%
Beta globulina 8 18%
Gamma globulina 3 12%
Recuento celular (linf y Mon) < 5 cel/ul
Xantocromia Negativa

Despues se centrifuga la muestra para realizar una tincin de gram, una tincion
de Ziehl-Neelsen y un cultivo
TINCION DE GRAM
Fundamento
La reaccin a la tincin de Gram est basada en la diferencia en la
composicin qumica de la pared celular bacteriana. Las bacterias
Grampositivas tienen una gruesa capa de peptidoglicano o murena, mientras
que esta capa es ms fina en las Gram-negativas y est rodeada por una
bicapa lipdica externa. El Peptidoglicano es un polisacrido formado por dos
subunidades qumicas, N-acetilglucosamina y acido Nacetilmurmico.
Procedimiento
1. Se coloca una pequea gota de agua en el centro de un portaobjetos
limpio.
2. Tomar, en condiciones aspticas, una pequea cantidad de sedimento
y transferirlo a la gota de agua.
3. Remover la mezcla con el asa de siembra hasta formar una
suspensin homognea que quede bastante extendida para facilitar su
secado.
4. Permita que los frotis se sequen al aire y luego fjelos con calor.

5. Tia con cristal violeta agregando suficiente colorante y deje que acte
durante 1 minuto.
6. Lave suavemente con agua.
7. Inunde suavemente con el mordiente, yodo de Gram, y deje actuar
durante 1 minuto.
8. Lave suavemente con agua.
9. Decolore con alcohol etlico al 95%.
10. Lave suavemente con agua.
11. Agregue la safranina para la tincin de contraste.
12. Lave suavemente con agua.
13. Seque la preparacin.
14. Examine al microscopio con el objetivo 100X de inmersin de aceite.
TINCION DE ZIEHL-NEELSEN
Fundamento
Las paredes celulares de ciertos parsitos y bacterias contienen cidos grasos
(cidos miclicos) de cadena larga (50 a 90 tomos de carbono) que les
confieren la propiedad de resistir la decoloracn con alcohol-cido, despus de
la tincin con colorantes bsicos. Por esto se denominan cido-alcohol
resistentes.
Procedimiento
1. Se fija los portaobjetos al calor con la muestra.
2. Se cubre el frotis con el reactivo de colorante de carbolfuscina y
secalienta con suavidad hasta la aparicin de vapores durante 1 minuto
mediante flameo por debajo de la rejilla de sostn con un mechero
degas.
3. Se deja actuar el colorante sobre el portaobjetos durante 4-5minutos, sin
calentar.
4. Se lavan los frotis con agua destilada y se los inclina para eliminar
elexceso de agua.
5. Se decoloran con acido alcohol al 3,0 % durante 2 minutos. Se lavan los
frotis con agua destilada y se los inclina para escurrir el resto deagua.
6. Se cubren los frotis con reactivo de azul de metileno durante 1 minuto.
7. Se lavan con agua destilada y se dejan secar al aire.
8. Se examinan con aceite de inmersin en bsqueda de BAAR
CULTIVO DE LIQUIDO CEFALORRAQUDEO
Diseminar por estras en toda la superficie de los medios slidos. Introducir el
agar sangre de carnero y el agar chocolate en jarro hmedo con candela
encendida (anaerobiosis). Incubar todos los medios a 36C de 24 a 48 horas.
Si hay desarrollo bacteriano identificar colonias.

DISCUSION DE RESULTADOS

La muestra presento macroscpicamente un color normal pero un aspecto


ligeramente turbio lo que puede indicar presencia de microorganismos.
En el examen citolgico hay presencia de polimorfonucleares y monocitos, las
protenas se encuentran elevadas y la glucosa disminuida lo que demuestra la
presencia de bacterias en la muestra.
En la tincin de gram se demostr la presencia de bacterias gram negativas
con mayor presencia de staphylococcus
En la tincin de Ziehl-Neelsen no se observo nada lo que indica ausencia de
bacterias acido-alcohol resistentes como M. Tuberculosis
En el cultivo no se mostro presencia de colonias lo que puede deberse a que el
tiempo de incubacin era menor al necesario, ya que comnmente se requiere
de 24 a 48 horas para el crecimiento.
Tambien puede deberse a que el paciente recibi tratamiento de antibiticos
antes de realizarle la puncion lumbar lo que impidi el crecimiento de colonias
O bien pudo haber sido que la muestra paso demasiado tiempo a temperatura
ambiente
Segn los resultados presentados por los diferentes exmenes se puede
sospechar de diferentes bacterias que pueden estar causando la patologa del
paciente:

Neisseria meningitidis
Enterobacterias
Staphylococcus spp
Neisseria gonorrhoeae

Se podria sospechar de una meningitis bacteriana


pero el examen
macroscpico no corresponde ya que en esta presenta un aspecto turbio

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