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FACULDADE TOMAZ DE AQUINO

ENFERMAGEM - MICROBIOLOGIA

Quem so os invasores?

Introduo Microbiologia
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Animais
Quem so os invasores?

Fungos
Vegetais

5 Reinos de
Seres Vivos
Protozorios
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Bactrias
4

Microbiologia Clnica
 Histrico

Anton van Leeuwenhoeck (1632 - 1723)

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Louis Pasteur (1822 - 1895)


Inexistncia da gerao espontnea
Teoria microbiana das doenas
Fermentao, decomposio de
alime ntos
Pasteurizao
Descrio de bactrias associadas s doenas
(Staphylococcus, Streptococcus)
Vacina anti-rbica
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Robert Koch (1843 - 1910)


Estudo do antraz - Postulados de Koch
Tcnicas para obteno de culturas puras

Postulados
de Koch

Placas de Petri
Tcnicas de colorao
Estudos com Mycobacterium tuberculosis
Descrio de Vibrio cholerae
Trypanosoma, Babesia
1905 - Prmio Nobel de Medicina

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Importncia dos microrganismos e da


Microbiologia na Medicina

Importncia histrica das doenas


infecciosas

Microbiota normal - 1014 microrganismos


500 a 1000 esp cies
Cerca de 3% dos microrganismos conhecidos => Patognicos
Oportunistas
Multi-resistncia
Microbiologia: Descrio de agente s etiolgicos
Vias de transmisso
Medidas de tratamento e preveno
Desenvolvimento de vacinas
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Egito (3180 a.C,) - Pestilncia


Guerra de Tria (1900 a.C.) - Peste Bubnica
Roma (565 a.C.) - Varola e Peste Bubnica
Aglomeraes em cidades emergentes
Condies sanitrias
Comrcio internacional
Idade Mdia: Varola, Sfilis, Clera, Peste
1346 - Peste - 25 milhes de mortes
Rota da seda
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Peste: 1720 a 1722 - Europa


1892 - China
1896 - ndia
1812 - Napoleo - 220.000 mortes (tifo, pneumonia
e disenteria)
II Guerra Mundial - Penicilina
Atualmente?
Doenas infecciosas emergentes
Organismos multi-resistentes

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Patgenos microbianos e/ou doenas infecciosas


recentemente descritos
1977: Ebola, Legionella pneumophila, Criptosporidium parvum
Campylobacter jejuni
1981: Sndrome do choque txico (Staphylococcus aureus)
1982: Colite hemorrgica (Escherichia coli O157:H7), Doena
de Lyme (Borrelia burgdorferi), Helicobacter pylori
1983: HIV
1989: Hepatite C
1992: Vibrio cholerae O139
1993: Colite por enterococos vancomicina resistentes
1994: Ehrlichia spp.
1995: Fasciite necrosante (Streptococcus A), Hantavirose
(descrita no Congo, 1951)
1997: Vrus H5N1 da gripe aviria
1999: Encefalite (vrus West Nile - descrito em 1937)
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2001: Antraz - Bioterrorismo
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Fatores que contribuem para a emergncia de


doenas infecciosas

Microbiologia
-

MICROBIOLOGIA: o estudo dos

Alterae s ecolgicas - doena de Lyme

microrganismos.

Comportamento (sexual, uso de drogas) - AIDS

Microrganismos: so as formas de vida que,

originalmente, s poderiam ser vistas com o

Viagens areas - Disperso de microrganismos

auxlio do microscpio (ptico e eletrnico).

Produo de alime ntos e m larga escala - EHEC

Esses microorganismos incluem: bactrias,

Uso indiscriminado de antimicrobianos - re sistncia

fungos, vrus, protozorios, algas unicelulares,

Condies sanitrias - Clera

virides e prons.

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Importncia atual das doenas infecciosas

Microbiologia Clnica
 Ramo da microbiologia clnica

responsvel pelo diagnstico e tratamento


de microorganismos patognicos

 So utilizadas tcnicas de cultivo,

isolamento, identificao e teste de


sensibilidade s drogas

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Principais causas de morte em pases em desenvolvimento

Infeces
Cncer
Perinatal e maternal
Circulatria
Respiratria
Acidentes ou outros

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PROCESSAMENTO DOS ESPCIMES


 Adequao da amostra - stio de coleta,
quantidade e qualidade
 Coleta - Sem contaminao
 Transporte - Acondicionamento, Identificao
 Inoculao em meios de cultura Enriquecimento, Seletivos ou Diferenciais
 Isolamento do patgeno - Semeadura por
esgotamento, com incubao a 35C, em
aerobiose ou anaerobiose

Atividades
desempenhadas
pelo
Microbiologista
Clnico

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PROCESSAMENTO DOS ESPCIMES

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Semeadura por esgotamento

 Exame inicial aps 24 horas


 Anlise macroscpica do crescimento
 Anlise microscpica
 Caracterizao do microrganismo - anlises
bioqumicas, sorolgicas, moleculares
 Anlise do perfil de resistncia a
antimicrobianos
 Liberao do Laudo
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Incubao em condies
de anaerobiose

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Anlise macroscpica do crescimento

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Anlise microscpica

Culturas puras

Colorao de Gram

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Outras tcnicas de colorao

Colorao de Ziehl-Nielsen

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30

Caracterizao bioqumica
Caracterizao
bioqumica

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Determinao da sensibilidade aos


antimicrobianos

Difuso em
gar - Kirby &
Bauer

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Macrodiluies

MIC
g/mL

100

MB
C
33

50

25

12.5

6.25

3.12

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controle

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E-Test

Microdiluies

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Caracterizao sorolgica

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ELISA

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38

39

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40

41

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Western blot

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Anlises moleculares
PCR
Geometric
Amplification

20
st
1 cycle
21
nd
2 cycle
2
2
nth cycle

2n
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Ateno!!!

TAXONOMIA BACTERIANA
 Utilizao

do sistema binomial
 Os sufixos para ordem e famlia so ales e -aceae, respectivamente.
 Gneros e espcies possuem
diversas denominaes
 A classificao bacteriana
encontrada no Bergeys Manual of
Systematic Bacteriology.
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Exerccio

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 A classificao baseada em similaridades na

Famlia
 Burkholderia Gnero
 Neisseriaceae Famlia
 Bacillales
Ordem
 Haemophilus Gnero
 Clostriadiales Ordem
 Pseudomonas aeruginosa Espcie

seqncia de RNAr.
 Cada diviso separada em classes (7 classes
bacterianas), ordens, famlias, gneros,
espcies.
 Uma espcie bacteriana definida como uma
populao de clulas com caractersticas
similares, que se diferem das outras espcies
com base em varias caractersticas.
45

Taxonomia bacteriana

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Os 3 domnios

 O Bergeys Manual of Determinative

Bacteriology tem sido uma referencia


amplamente utilizada.
 No classifica as bactrias de acordo com
sua relao evolutiva
 Fornece esquemas de identificao com base
em critrios tais como composio da parede
celular, morfologia, colorao diferencial,
necessidades de oxignio e testes
bioqumicos.
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Monera ou Bacteria
 Filo: Firmicutes
 Classe: Bacilli
 Ordem: Bacillales
 Famlia: Bacillaceae
 Gnero: Bacillus
 Espcie: B. anthracis
 Sistema binominal: Bacillus anthracis

Taxonomia bacteriana

 Bartonellaceae

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 Reino:

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 Os eucariontes foram agrupados no

domnio Eucarya e os procariontes foram


divididos em dois domnios de acordo com
a estrutura das membranas lipidicas,
molculas de RNA transportador e
sensibilidade a antibiticos: Archaea e
Eubacteria.

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ALGUMAS CARACTERISTICAS DE
Archaea, Eubacteria e Eucarya

Os 3 domnios
 As tcnicas de biologia molecular e

bioqumica revelaram que existem dois tipos


de clulas procariticas.
 Os 3 domnios so diferenciados sobretudo
por caractersticas baseadas na biologia
molecular como:




Ala do RNAr, liga-se protena ribossomal


Cdon inicial para sntese de protenas
Brao comum do RNAt (uma seqncia de bases
especfica de eucariotos e eubactrias)

Archeae

Eubacteria

Eucarya

Tipo de
clula

Procarionte

Procarionte

Eucarionte

PC

Composio Peptideoglic. Composio


varivel, sem
varivel,
peptideoglic.
carboidratos

Memb.
Lipdica

Cadeias de C
c/ glicerol e
ligao ter

Sensibilidade No
a antibiticos

Cadeias de C
c/ glicerol e
ligao ster

Cadeias de C
c/ glicerol e
ligao ster

Sim

No

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Procariontes X Eucariontes







Ausncia de ncleo
organizado
Ribossomos
Maioria com PC rgida
com peptideoglicano
DNA circular
Presena de plasmdeos
Diversas formas de
replicao








Ncleo organizado
Diversas organelas
Raramente PC, e
quando presente
constituda de
outras substncias
DNA retilneo
Replicao por
mitose

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VRUS
 Parasitas intracelulares obrigatrios
 No possuem metabolismo prprio
 DNA ou RNA (nunca os 2 tipos)
 Utilizam a clula infectada para produzir

novas estruturas virais

 Associados infeces em plantas,

animais, fungos e at mesmo bactrias


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Microscopia eletrnica das partculas do


vrus da hepatite A, isoladas em fezes
humanas.

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Estrutura Viral
 Capsdeo: cpsula protica que

envolve o cido nuclico


 Nucleocapsdeo: capsdeo +
DNA ou RNA
 Capsmero: unidades
protecas do capsdeo
 Outras especficas
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Morfologia geral dos vrus


 Vrus helicoidais: longos bastes rgidos

ou flexveis

 Vrus polidricos: vrias faces iguais


 Vrus envelopados: geralmente esfricos,

formados pelo capsdeo


 Vrus complexos: possuem estruturas
adicionais
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Reproduo ou Replicao Viral


 ciclo ltico: onde o genoma viral passa a

comandar o metabolismo bacteriano e a


formar vrios DNAs ou RNAs virais e
cpsulas proticas, que se organizam
formando novos vrus que podem infectar
novas clulas, reiniciando o ciclo

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Reproduo ou Replicao Viral


 ciclo lisognico: o DNA ou RNA viral se

incorpora no DNA do hospedeiro, e no


interfere no metabolismo da clula, que se
reproduz normalmente, transmitindo o
DNA viral s geraes celulares
posteriores
 Ex.: HTLV

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Qual o reino dos vrus?

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BACTRIAS

NO SO AGRUPADOS EM REINO
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Morfologia e Estrutura
 Formas:

 So seres vivos microscpicos, ou seja,

s podem ser vistos com auxlio do


microscpio.
 Podem viver isolados e livres ou formando
colnias.
 So procariontes (no possuem sistema
de endomembranas) com o material
gentico disperso no citoplasma.

 cocos: clulas esfricas


 bacilos: clulas cilndricas em forma de

bastonetes
 espirilos: clulas espiraladas em forma de
S
 outras: quadrticas, estreladas,
pleomrficas...

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Morfologia e Estrutura
 Dimenses:
 diplococos: cocos agrupados aos pares
 estreptococos: cocos agrupados em

cadeias

 estafilococos: cocos agrupados

irregularmente lembrando cachos de uva

 sarcinas (arranjos cbicos): se dispem

em forma de cubo em grupos de 8 clulas.


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Crescimento Bacteriano

Crescimento Bacteriano

 Refere-se mais a um aumento do nmero

de organismos do que seu aumento em


tamanho.
 Colnias de clulas viveis suprimento
de nutrientes gua - espao limitada
por produtos txicos produzidos, alm de
condies adversas.

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 Consideraes Gerais:

O crescimento um somatrio dos


processos metablicos progressivos, que
normalmente
conduz

diviso
(reproduo) com concomitante produo
de clulas-filhas a partir d uma bactria

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 Fase Inicial (Lag): Clulas aumentam de

 Fase Estacionria: Crescimento comea

tamanho, porm no aumenta o nmero


de indivduos na populao,
metabolicamente muito ativas e esto
sintetizando novo protoplasma.

a diminuir depois de vrias horas.


Exausto de nutrientes e produo de
produtos txicos. Equilbrio entre a taxa de
morte e a taxa de divises na populao.

 Fase Logartmica Ou Exponencial:

 Fase de declnio: A taxa de morte

Clulas se dividem firmemente num ritmo


constante. O crescimento mximo
durante esta fase, aumentando o nmero
de indivduos.
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comea a exceder a taxa de divises


ocasionando um decrscimo no nmero
de bactrias viveis.
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Curva de crescimento

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Temperatura de Incubao
 Os

diferentes
microrganismos
apresentam, conforme seu habitat natural,
diferentes timos de temperatura, onde
suas enzimas esto na forma mais ativa.
Assim, obedecida essa temperatura ideal,
o tempo de gerao ser menor.

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Natureza do Meio

Aerao do meio

 Em geral, o desenvolvimento bacteriano

mais eficiente em meios complexos do


que em meios quimicamente definidos.
 Assim, as contribuies do meio de
cultura para a velocidade de crescimento
so sua concentrao e presena de
todos os nutrientes essenciais.
 Meios especficos
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 A influncia da

presena ou no de
oxignio no meio depende diretamente
das vias pelas quais os microrganismos
obtm energia.





Aerbios estritos
Aerbios facultativos fermentativos
Anaerbios estritos
Microaerfilos
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Concentrao de ons
Hidrognio

Natureza do Organismo

 O pH do meio de cultura um fator muito

importante para a atividade enzimtica.


 De maneira geral, o pH neutro requerido
para o melhor desenvolvimento da cultura
em termos de velocidade.
 Porm, dentro de certos limites, uma
alterao
de
pH
no
afeta
consideravelmente o tempo de gerao.
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Fonte de Carbono

 Dependendo

das
caractersticas
metablicas do microrganismo, seu tempo
de gerao ser maior ou menor.
 Gerao a partir de 20 minutos
 Foi notado que mesmo microrganismos
altamente patognicos tm seu tempo de
gerao
diminudo
quando
em
desenvolvimento in vivo.
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Tipo de energia

 Autotrficos utilizam exclusivamente

 Fototrficos utilizam energia luminosa,

 Heterotrficos utilizam outros compostos

 Quimiotrficos utilizam energia contida

CO2

fotossintetizantes

como fonte de carbono

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em substncias qumicas

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Substrato oxidvel

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Combinaes

 Organotrficas utilizam substrato

 Autotrficas Fotolitotrficas

orgnico

 Autotrficas Quimiolitotrficas
 Litotrficas utilizam substrato inorgnico

 Heterotrficas Fotorganotrficas
 Heterotrficas Quimiorganotrficas

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Reproduo e Crescimento


Fisso Binria reproduo por diviso em 2


clulas filhas idnticas clula me.

Esporos clula reprodutora assexuada capaz


de germinar dando origem a novo organismo.
Forma de resistncia de algumas bactrias e
outros microorganismos.

Brotamento reproduo assexuada iniciando


como uma protuberncia na clula me que
cresce para se formar
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numa
Junior clula filha
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Reproduo e Crescimento

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FUNGOS

 Conjugao troca de material gentico

entre duas bactrias.




 seres eucariontes, uni ou multicelulares,

uninucleados (leveduras) ou
multinucleados (filamentosos e
cogumelos) e hetertrofos por absoro.
 Alimentam-se de matria orgnica, animal
ou vegetal, morta ou em estado de
decomposio.
 So encontrados em ambientes midos, e
fixos ao substrato.

Contribui para a variabilidade gentica sem


aumentar o nmero de indivduos e contribui
para o aparecimento de mutaes.

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FUNGOS


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So popularmente conhecidos por bolores,


mofos, fermentos, levedos, orelhas-de-pau,
cogumelos de chapu (champignon).
Muitos fungos so potencialmente venenosos
levando a dores abdominais, distrbios mentais
e neurolgicos, irritaes epiteliais...
As doenas causadas por fungos (MICOSES)
em humanos podem ser superficiais, cutneas,
subcutneas e sistmicas ou profundas.
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2 tipos morfolgicos:
Hifas e Leveduras

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Estrutura e morfologia:



100

Estrutura e morfologia:

O corpo dos fungos formado por numerosos


filamentos denominados HIFAS.
As hifas podem ser SEPTADAS ou
ASSEPTADAS e formam um emaranhado que
se chama MICLIO.
As formas livres que se desenvolvem
principalmente em ambientes midos so
chamadas de LEVEDURAS.

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 Os miclios desenvolvem-se geralmente

dentro do substrato onde o fungo se fixa.

 Alguns miclios podem desenvolver

formaes que emergem do substrato,


tornando-se visveis: so os chamados
CORPOS DE FRUTIFICAO,
popularmente conhecidos como
COGUMELOS

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Hifas
 ASSEPTADAS X SEPTADAS
 HIALINAS (Claras) X DEMCEAS

(Escuras)

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104

Reproduo Fungos







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A reproduo dos fungos feita por ESPOROS, no


havendo formao de gametas.
Existem esporos assexuados e sexuados.
Os sexuados envolvem a fuso de ncleos seguida
de divises.
Os assexuados so carregados pelo vento ou gua
at atingirem um substrato onde se fixam e
germinam.
Existem fungos que podem produzir os dois tipos
de esporos em seus ciclos de vida.
As leveduras podem se reproduzir assexuadamente
por brotamento.
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105

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106

Protozorios
 Unicelulares
 Eucariontes
 Vida livre ou parasitas
 Isolados ou formando colnias
 Habitam gua e solo
 Se alimentam de bactrias e pequenas

partculas presentes no ambiente

 Poucas causam doenas


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108

18

Morfologia






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Cistos
Alguns produzem uma
cpsula protetora
(encistamento)
Falta de alimento,
oxignio ou umidade
Presena de toxidade no
ambiente

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109

Cistos

110

Megaclon (mal
de Chagas)

Morfologia


Trofozoto
Estgio vegetativo
com metabolismo
ativo
 Intensa
reproduo e
formao de
cistos


Trofozoto

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111

Vrus

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Fungos
e
Protozorios

Bactrias

<

112

<

eucariticas
<Clulas
(animais, vegetais)
113

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114

19

Leveduras (fungos) e hemcias

Trypanossoma (protozorio) e
hemcias

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Aplicaes da Microbiologia
 Indstria, Medicamentos
 Engenharia gentica
 Ambiental
 Alimentos
 gua
 etc

Clnica e Diagnstico
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