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Introduo

Cada organismo possui um patrimnio gentico que o torna nico: o seu


DNA. Esta molcula biolgica o suporte da informao gentica que
coordena todas as atividades celulares e transmitida a todas as clulasfilhas. Desta forma, a molcula de DNA (cido desoxirribonucleico), pode ser
comparada a uma longa escada de corda enrolada em torno de um eixo
imaginrio, isto , formada por uma dupla hlice. As "cordas" das escadas
so formadas pela alternncia regular da desoxirribose e de um grupo
fosfato. As duas longas fitas de DNA enrolam-se, estando nucletidos
presentes em ambas as fitas da dupla hlice. Os "degraus" so formados
por um par de bases azotadas, com quatro variantes possveis (A-T, T-A, GC, C-G) que se ligam entre si atravs de pontes de hidrognio. Estas bases
pertencem a duas famlias moleculares - a adenina (A) e a guanina (G) so
as bases pricas, a citosina (C) e a timina (T) so bases pirimdicas.
O DNA controla toda as funes possveis das clulas e essencial para a
existncia da vida, fornecendo instrues para milhes de processos
celulares. E para estudar como estas instrues chegam s clulas
necessrio isolar o DNA e estudar as suas interaes com as protenas e
com o RNA. Neste trabalho laboratorial tnhamos como objetivo separar o
DNA dos outros constituintes celulares do quivi, de modo a conseguir
observar "novelos" de DNA, que so bem visveis a olho nu. Com isso ficouse a conhecer tcnicas de extrao de DNA das clulas e compreender o
processo necessrio para o fazer.
Procedimento
1. Descascou-se e cortou-se o quivi em pequenos fragmentos e colocou-se
no almofariz.
2. Deitou-se o sal e o detergente num gobel com gua destilada, e de
seguida agitou-se suavemente a mistura.
3. Colocou-se a mistura obtida no almofariz e triturou-se.
4. Filtrou-se o produto obtido atravs de papel de filtro, e depois por algodo
hidrfilo.
5. Fez-se escorrer lentamente o lcool refrigerado em quantidade
aproximadamente igual do filtrado ao longo da parede da proveta.
Esperou-se algum tempo e procurou-se observar a formao de duas fases:
a alcolica (superior) e a aquosa (inferior).
Discusso
Para extrair e visualizar o DNA, so necessrios vrios componentes - entre
eles o sal, o detergente e o lcool refrigerado - cada um deles utilizado para
um fim especfico. Tambm se utiliza o almofariz e filtra-se com o papel de
filtro seguido do algodo hidrfilo, que tm todos tambm um papel
importante nesta atividade laboratorial.
O almofariz serviu para esmagar o quivi e assim conseguir romper as
paredes celulares e as membranas citoplasmticas, libertando o contedo

celular, mas sem conseguir romper os ncleos celulares (que onde se


localiza o DNA) por serem demasiado pequenos.
O sal utilizado para ajudar a manter as protenas dissolvidas no lquido
extrado, impedindo que elas precipitem com o DNA. Este tambm d um
ambiente favorvel ao DNA. O grupo fosfato, um dos componentes do DNA,
apresenta elevado nmero de cargas negativas, o que significa que estas
cargas tm tendncia para se repelirem entre elas. O sal ir contribuir com
ies positivos (Na+) que neutralizam a carga negativa impedindo que haja
repulso eltrica entre as molculas de DNA, estabilizando-as, e assim
permitindo a sua agregao de modo a formar filamentos mais espessos e
compridos que so visveis mais facilmente.
O detergente tem como principal funo dissolver as gorduras, logo ir
tambm dissolver as membranas nucleares, que so constitudas pela
camada fosfolipdica, tornando-se ento possvel obter o DNA (que se
encontra no ncleo).
De seguida filtra-se a mistura de quivi, detergente, sal e gua destilada
com papel de filtro e algodo hidrfilo, com esta filtrao sucessiva
possvel separar as paredes celulares e as membranas citoplasmticas do
restante contedo celular, nomeadamente dos ncleos.
Seguido da filtrao, foi utilizado o lcool refrigerado, possibilitando assim
a separao do DNA, e desta forma estas molculas dos filamentos de DNA
ascendem para fase alcolica e surgem mais prximas da superfcie. Isto
acontece porque o DNA menos denso que a gua e que a mistura, e o
lcool menos denso que a gua, fazendo assim com que o DNA se mova
lentamente para a superfcie, em direo ao lcool, e assim deixando
aparecer os pequenos filamentos. Foi utilizado o lcool refrigerado porque
quanto mais gelado o lcool estiver, menos solvel vai estar o DNA.
Depois deste processo conseguimos visualizar a olho nu milhes de
cadeias de molculas de DNA aglomeradas, o que s possvel quando
vistas desta maneira, porque molculas individuais possuem um tamanho
microscpico.
Concluso
Este trabalho laboratorial teve como objetivo extrair o DNA de um quivi a
partir de alguns processos, que resultaram com sucesso.
Depois de seguir o procedimento experimental, conseguiu-se obter o DNA
do quivi num tubo de ensaio sobre a forma de um "novelo" a olho nu,
enquanto estava suspenso em lcool. Com isto pde-se concluir que a
molcula de DNA pouco solvel, pouco densa e que as suas ligaes de
pontes de hidrognio so fracas energeticamente.
No fim da atividade o objetivo principal pretendido foi cumprido, isto ,
extrair e visualizar molculas de DNA a olho nu, e ficar a conhecer
processos para o fazer.

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