Anda di halaman 1dari 30

Agitacin y aereacin

INTRODUCCION
Cualquiera que sea el tipo de microorganismo, un biorreactor debe permit ir un contacto tan bueno
como sea posible ent re las dos fases, bitica y abitica del sistema. El buen desempeo del
proceso para que se logre la cintica ptima est asociado a los fenmenos de transferencia entre
las clulas y el medio de cultivo. Se trata en primer lugar de transferencia de masa, del medio
exterior a la clula: la transferencia del sustrato y de los compuestos del medio necesarios para el
crecimiento microbiano, y en direccin contraria, los productos del metabolismo.
Para que estos flujos de materia se den adecuadamente la distribucin de las clulas en el medio
debe ser lo mejor posible.
En el caso de microorganismos filamentosos creciendo en forma de pellets o pelotas, debidas al
alargamiento simtrico de los filamentos en t odas direcciones a partir de un punto, la trans ferencia
de masa hacia el interior se realiza con dific ultad y slo en la periferia de los pelets hay act ividad
microbiana mxima. Esto tambin puede pres entarse en el caso de microorganismos unicelulares
que hacinan.
Las clulas microbianas y los hacinamientos celulares tienden a sedimentarse o a flotar,
dependiendo del tipo de microorganismo y de la edad del c ultivo. De esto resulta un
heterogeneidad perjudicial para el buen desarrollo del proceso: en la zona no ocupada por la masa
celular el sustrato no es consumido, mientras que en la zona donde se acumula la masa celular se
consume mucho sustrato y su concentracinen esta zona es muy baja, por lo que la rapidez de
crecimiento dismimuye y, por otro lado s e acumulan los productos del mestabolismo microbiano,
incrementando su efecto inhibidor sobre el crecimiento celular.
En los procesos aerbicos de fermentacin, es necesario un suministro adec uado de ox geno, que
satisfaga los requerimientos metablicos de los organismos empleados. Es decir, se establece una
demanda de ox geno que es esencial satisfacer a travs de la aereacin y mezclado del cultivo.

El oxgeno disuelto en el medio de fermentacin es un nutrimento t an import ante como lo son la


fuente de carbono, la fuente de nitrgeno y las sales minerales. Sin embargo, a diferencia de estas,
el ox geno es un elemento de muy baja solubilidad en agua: a 25C y en contacto con aire a la
presin atmosfrica a nivel del mar, tiene una solubilidad de 8.43 ppm (Lee,1992).

En

comparacin, otro compuesto usado ampliamente en fermentaciones, la glucosa, tiene una


solubilidad en agua a 17. 5C de 820 000 ppm (Perry, 1 992). No obstant e su baja solubilidad, la
demanda metablica de ox geno de los microorganismos aerobios es alta (del orden de 1 g/L -hr),
pudiendo variar considerablemente dependiendo de los microorganismos (Lee, 1992), por lo que
es necesario suministrarlo continuamente a fin de evit ar su agotamiento o deficiencia parcial.

El oxgeno se transfiere de una fase gas eosa (aire) a una fase lquida (medio de fermentacin) y de
sta una fase slida (microorganismos aislados o en agregados celulares, en suspensin), siendo
un factor de suma importancia la velocidad a la que se trans fiera a travs de estas fases, ya que
esta velocidad puede regir la de la cintica de toda la fermentacin y para que el sistema no est
limitado por oxgeno, la rapidez de sumistro de ber ser, al menos, igual a la demanda por parte de
los microorganismos.

Ahora bien, la velocidad de trans ferencia de ox geno en un fermentador est determinada por el
coeficiente global de transferencia de oxgeno, k La, que depende en gran medida de las
caractersticas fsicas y de operacin del mismo y, determina la capacidad de t rans ferencia de
oxgeno del ferment ador, por lo que se comprende que es de gran importancia la medicin de kLa
y la relacin que guarda con las variables de operacin y diseo del ferment ador.
A lo anterior, es necesario agregar que el kLa es el criterio de escalamiento ms comnment e
empleado para pasar fermentadores de una escala determinada a otra mayor, en procesos
aerobios.
Para medir la velocidad de t rans ferencia de ox geno existen varias tcnicas, mismas que se
describirn ms adelante, entre ellas el mtodo qumico ideado por Cooper, Fernstrohm y Miller en
1944 (Oxidacin de sulfito de sodio).

El crecimiento microbiano es globalmente exotrmico. Por tanto, el biorreactor debe facilitar la


transferencia de calor, del medio hacia las cluas al principio; despus, al contrario, debe disipar el
calor producido por el crecimeinto microbiano. La distribucin homognea de las clulas en el
medio de cultivo, evit a tambin sobrec alentamientos locales peligrosos, dada la sensibilidad al
calor de los procesos microbiolgicos.
La cantidad de calor producido durante una fermentacin s e puede evaluar a t ravs de un balance
termodinmico del proces os de crecimiento microbiano, mediante tcnicas micromtricas, o
finalment e en forma emprica. As, Cooney y col.(1969) establecieron que el desprendimiento de
calor es proporcional al cons umo de oxigeno. Se ha encontrado que se producen 3.44 Kcal/g de
oxgeno consumido. Esto permite calcular la capacidad de evacuacin de calor del biorreactor.
La homogeneidad de las suspensiones celulares se obtienen en la prctica industrial en diferentes
formas.

Los requierimient os de facilitar la homogeneidad del medio, la trasferencia de masa, el suminstro


de de oxgeno y la transferencia de calor se logra a travs de las operaciones de agitacin y
aereacin.

Transferencia de Oxgeno
Funciones del oxgeno en la fermentacin
El oxgeno juega un papel fundamental como receptor final de electrones y protones producidos en
las reacciones de oxidacin en el metabolismo productor de energa.
El oxgeno interviene en ciertos mecanismos de regulacin del metabolismo en forma directa como
inductor o como represor de la s ant esis de enzimas respiratorias, pero tambin en el metabolismo
energtico. Cuando el crecimiento microbiano se realiza sobre
un sustrato menos oxidado que la biomasa, que es el caso de los sustratos glucosdicos y
forzozamente de los hidrocarburos, el ox geno desempea un papel de sutrato: sirve para la
edificacin de constituyentes celulares.
Finalmente en el curso de la aereacin de c ultivos microbianos, ciertos productos del metabolismo,
tales como el CO2, se eliminan del cultivo por arrastre y salen junto con el O 2 no consumido.

Proceso de transferencia de oxgeno


Como se mencion anteriormente, el oxgeno se transfiere de una las burbujas gaseosas (aire) a
una fase lquida (medio de fermentacin) y de sta una fase slida (microorganismos aislados o en
agregados celulares, en suspensin).
El mecanismo total de la t rans ferencia se puede dividir en una serie de pasos o et apas (Fig. 1) de
la manera siguiente:
1. Trans ferencia difusional del ox geno a travs de la pelcula de gas
2. A travs de la pelcula de lquido que rodea las burbujas de aire
3. Recorrido a travs del seno de la solucin
4. A travs de la pelcula de lquido que rodea la clula y
5. El oxgeno penet ra al interior de cluladonde ocurre la reaccin bioqumica intracelular.

Figura 1. Etapas de la transferencia de o xgeno.


Existen varias teoras para explicar la trans ferencia de oxgeno desde lass burbujas hacia las
clulas. A continuacin se describen las ms importantes.

Teora de la difusin continua


Esta teora considera que hay una difusin continua en rgimen estacionario, entre la fase gaseosa
y la fase lquida (fig.1) a travs de una nica pelcula de poco espesor, en rgimen estacionario.

Figura 2. Transferenci a de oxgeno segn la teora de la difusin continua

La ap licacin de la ley de Fick a este proceso de transferencia unidimensional, conduce a la siguiente


expresin:

dCL
= KL a C * - CL
dt
en la cual
KL representa el coeficiente de transferencia de masa (en m/s) y e s igual a la relacin
entre el coeficiente de difusin del oxgeno a travs de la pelcula de agua y el
espe sor de la pelcula
C* corresponde a la concentarcin de oxgeno disuleto en equilibrio ocn el gas de la burbuja.
a es la superficie especfica de transferencia, en m2 / m3 .

Teora de la doble pelcula laminar


Esta teora establece que en el interior de la burbula de gasse establece un gradientede concentracin (o de
presiones parciales) de o xgeno a causa de la presencia de una pelcula gaseosa. El o xgeno gaseoso en la
interfase est en equilibrio con el liquido d isuelto en la interfase. La presin parcial del o xgeno gaseoso en la
interfase es Pi y la concentracin del o xgeno disuelto en la interfase en Ci. En el seno del lquido se esta blece
un gradiente de concentracin de oxgeno disuelto, debido a la presencia de una pelcula lquida a travs de
la cual d iofunde el o xgeno hacia el lquido.

Esta toera establece que el eqauilibrio ent re el oxgeno de la fase gaseosa y de la fase l quida es
instantneo y la trans ferencia se da en estado estable.
La ecuacin que representa la transferencia de oxgeno puede escribirse en funcin de la fase
lquida o la gaseosa como sigue:

Por ot ra part e, se ha demostrado que la resistencia mayor a la transferemcia de masa, la opone la


pelcula de lquido que rodea las burbujas de aire. P ero esto slo ocurre en el caso de organismos
unicelulares; en los agregados celulares (esfrulas) la dif usin a t ravs del agregado mismo
constituye el paso controlante (Quintero, 1990).

La velocidad de trans ferencia de oxgeno se puede expresar as (Quintero, 1990):

Velocidad de
transferencia

Coeficiente de rea fuerza


=
X
X

transferencia interfasial impulsora

(1)

En el caso de absorcin de gases en lquidos mediante burbujeo de gas, la resistencia total est
representada prcticamente por la pelcula de lquido, por lo que el coeficiente de trans ferencia
ser el coeficient e global de transferencia de masa del lado de lquido, kL.
La fuerza impulsora en la ecuacin anterior la diferencia entre las concentraciones de oxgeno de
ambos lados de la pelcula. La concentracin de ox geno en la interfase gas -pelcula lquida es casi
igual a su solubilidad, C*. Denotando la concentracin de oxgeno en la interfase pelcula lquida lquido, y asumiendo que ser la misma que en ste, por CL; y el rea interfacial, por a:

dmo
= k'L a C * - CL
dt
donde

dmo dt

(2)

expresa la rapidez de transferencia de masa de oxgeno desde la fase gaseosa a

la lquida.
Cuando la ecuacin (2) se expresa por unidad de volumen se convierte en:

Na =kLa (C* - CL )
en donde:

kL =

(3)

kL
V

y Na es la velocidad de trans ferencia de ox geno por unidad de volumen.

La ecuacin (3) representa cuantitativamente la transfere ncia de oxgeno de la fase gas eosa a la
lquida. La Tabla 1, indica diferentes unidades de k La. Los valores reales de C* se encuentran
alrededor de 8 ppm; CL puede llegar a ser, en teora, cero, pero en fermentaciones reales aparece
una concentracin crtica para cada microorganismo, (entre 10 y 20 % de C*). Si se deja que la

concentracin de ox geno disuelto en el agua baje a dicho valor, ocasiona una disminucin en la
velocidad es pecfica de consumo del organismo y altera su metabolismo (Quintero, 1990).

Tabla 1. Diferentes unidades de k La.

Velocidad de transferencia Gradiente de Coeficiente de


por unidad de volumen, concentracin, transferencia,
C
Na
kLa
lb O2 / ft3 - hr

lb O2 / ft3

hr-1

g O2 / m3 - hr

g O2 / m3 ppm

hr-1

mM O2 / L - hr

mM O2 / L

hr-1

lb O2 / ft3 - hr

atm

lb O2 / ft3-hr-atm

mM O2 / L - hr

atm

mM O2 / L-hr-atm

ADAPTADO DE: (Quintero, 1990).

El clculo de C* se hace de acuerdo a la Ley de Henry, (Perry, 1992), que expresa lo siguient e:

X=

Po2
H

(4)

en donde X es la fraccin molar del soluto en la fase lquida, po2 es la presin parcial del solut o en
la fase de gas, y H es la c onstante de Henri para el Oxgeno en agua (la cual es funcin de la
temperatura).
Dada la baja solubilidad del oxgeno en el agua, puede considerarse la solucin como agua
solament e.
La presin parcial del oxgeno, pO2, en el aire est dada por:

pO2 YO2 P
siendo

YO2

la fraccin molar del oxgeno en el aire, igual a 0.21 de acuerdo a la composicin

molar del aire (79 % de N2 y 21 % de O2 para fines prcticos), y P, la presin total del aire, igual a
la presin atmosfrica (que es de 0.81 atm en la Cd. de Celaya, Gto. : valor promedio, ya que vara
segn las condiciones climatolgicas) (Servicio Meteorolgico Nacional, Comisin Nacional del
Agua).

Tabla 2. Solubilidad del O2 en agua a diferentes


temperaturas
Temperatura
( C )

a la presin de 0.81 atm.


H X 10-4
C*
(atm/frac.mol) (mM O2 / L)

S*
(mg O2 / L)

24.0

4.306

0.219

7.023

24.5

4.343

0.218

6.963

25.0

4.380

0.216

6.904

25.5

4.417

0.214

6.846

26.0

4.454

0.212

6.789

26.5

4.491

0.210

6.734

27.0

4.528

0.209

6.678

27.5

4.565

0.207

6.624

28.0

4.602

0.205

6.571

28.5

4.639

0.204

6.519

29.0

4.676

0.202

6.467

29.5

4.713

0.200

6.416

30.0

4.750

0.199

6.366

30.5

4.782

0.198

6.324

31.0

4.814

0.196

6.282

31.5

4.846

0.195

6.240

32

4.878

0.194

6.199

Determinacin experimental del k La


Se han desarrollado un gran nmero de mtodos para medir la capacidad de t rans ferencia de
oxgeno en un fermentador; todos ellos se pueden aplicar con buenos resultados dentro de lmites
restringidos de operacin.
Todas las tcnicas se basan en un balance de ox geno, ya s ea de todo el sistema o de la
fermentacin en particular.
Al realizar un balance de ox geno en la fase lquida (oxgeno disuelto), cuando estn presentes los
microorganismos que utilizan oxgeno, se obtiene la siguente expresin:

dCL
= k La C * - CL - QO 2 X
dt
donde

(5)

dCL/dt es la rapidez de variacin de la concentracin de oxgeno disuelto, C* es la

concentracin de saturacin de ox geno en el tiempo t, CL es la concentracin de ox geno disuelto


en el lquido, kLa es el coeficiente volumtrico de transferencia de oxgeno (hr

-1

), QO2 es la

rapidez espec fica de consumo de oxgeno (mMO 2 / g de clula-hr) y X es la concentracin del


microorganismo ( g de clula / L ).

El trmino

k La C* - CL

representa la capacidad del sistema de aereacin del fermentador de

suministrar ox geno a la fas e lquida.

La Figura que se muestra a continuacin, muestra esquemticamente las variables que intervienen
en la medicin (dependiendo de la t cnica seleccionada). Cualquier tc nica que se utilice depende
sensiblemente del sistema medidor de ox geno (en el lquido o en el gas); en l radica en muc has
ocasiones el principal problema para la evaluacin de la trans ferencia de oxgeno.

Figura 3. Diagrama de los elementos necesarios para la determinacin de oxgeno.

Las tcnicas utilizadas ms comnmente

para la determinacin del kL a en los si stemas de

fermentacin, se basan en dos tipos de medicin:


1. Medicin Indirecta
a. Oxidacin de sulfito.
b. Tcnic a de eliminacin de gas.
2. Medicin Directa.
a. Balance de ox geno en el sistema.
b. Tcnic a dinmica.

Mtodo Indirecto
Esta determinacin se denomina indirecta porque se lleva a cabo en sistemas donde no se est
efectuando una fermentacin; los valores obtenidos slo indican un orden de magnitud y se
emplean para hacer comparaciones entre diferentes reactores que operan en condiciones
similares. En este caso el trmino correspondiente a la utilizacin de oxgeno por el
microorganismo, QO2 X de la ecuacin (5) vale 0, por lo que sta se transforma en:

(dC/ dt ) = k La (C* - CL )

(6)

De aqu simplemente se despeja el k La y se evala una vez determinados los otros factores que
aparecen en la expresin:

k La

dC/dt
C* - CL

(7)

Mtodo del sulfito (Lee, 1992)


El mtodo de la oxidacin del sulfito de sodio (Cooper et al, 1944) est basado en la oxidacin del
sulfito de sodio a sulfato de sodio en presencia de un catalizador (Cu++ Co++):

Cu++
2Na2S O3 +O2 --------------->

2Na2S O4

Co++

Esta reaccin tiene las siguientes caractersticas a considerar:

1. La velocidad de reaccin es independiente de la c oncent racin de s ulfito de sodio en la solucin


dentro de los valores comprendidos entre 0.04 a 1 N.

2. La velocidad de esta reaccin es mucho mayor que la velocidad de trans ferencia de oxgeno
desde las burbujas de aire hacia el seno de la solucin, por lo tanto, la velocidad de oxidacin
est controlada solamente por la velocidad de transferencia de masa de oxgeno.

Bsicamente, esta tcnica consiste en lo siguiente:


1.

Se carga el fermentador con una solucin valorada de sulfito de sodio, que contiene iones de
++

Cu
2.

++

o de Co

Al tiempo cero, se inicia la aereacin de la solucin en el fermentador a unas condiciones de


turbulencia (flujo de aire y velocidad de agitacin) dadas.
Con el transcurso del tiempo el oxgeno se transfiere del gas (aire) al lquido, oxidando
gradualment e al sulfito de manera instantnea.

3.

A diferentes tiempos s e toma una muestra de la solucin de sulfito en en fermentador para


determinar la concentracin residual de sulfito.

10

Los autores propusieron una doble titulacin con con yodo en exceso y tiosulfato de sodio),
para la valoracin de sulfito de sodio residual.
Por supuesto la rapidez de desaparicin del sulfito de sodio en el medio es una medidad
indirecta de la rapidez de transferencia de oxgeno hacia el medio lquido.
4.

Para la determinacin de la velocidad de desaparicin de sulfito se puede graficar la


concentracin residual de ste cont ra el tiempo.

La pendiente de sta curva representa la

rapidez de desaparicin de sulfito. Asimismo se conocer la velocidad con la que el oxgeno se


transfiri (Na) al medio.
De la expresin 6, se puede notar que la rapidez de transferencia de oxgeno, k La (C* - CL ) es
igual a (dC/dt ).

k La =

De este modo:

Na / (C*-CL)

(8)

Considerando que la reaccin de oxidacin del s ulfito es extremadamente rpida, todo el


oxgeno que llega a la fase lquida, es inmediatamente cons umido por la reaccin, de modo
que no habr oxgeno en solucin, es decir, CL = 0. Como la concentracin de oxgeno en la
interfase (C*) es una constante fsica, se puede calcular el coeficiente volumtrico de
transferencia de oxgeno (k La) como sigue:

k La =

Na / C*

(9)

Las reacciones que ocurren en la titulacin (valoracin con yodo en exceso y tiosulfat o de sodio)
son:

Na2SO4+ I2+H2O

2Na2S2 O3+I2

------------------>
almidn como
------------------>
indicador

Na2SO4+2HI

Na2S4O6 +2NaI

La tcnica de la oxidacin de sulfito de sodio es de muc ha ay uda para comparar el funcionamient o


de fermentadores y para el estudio de los efectos del escalamiento y las condiciones de operacin.

Tcnica de eliminacin de gas o mtodo esttico


Las bases de esta tcnica son muy similares a las de la oxidacin de sulfito; QO 2 X = 0 por lo que
es aplicable la ec uacin (6). La separacin de variables e integracin de esta ecuacin da el
siguiente resultado:

11

C * - CL2
= - k L a t 2 - t 1
ln
C * - CL1 )

(10)

Si se establece que la concentracin de oxgeno disuelto, CL1 es cero al tiempoinicial t1 = 0 y la


ecuacin (10) adopta la forma siguiente:

ln1 L = - kL a t
C *

(11)

La Figura 3, indica los pasos necesarios para efectuar una medicin: eliminacin del oxgeno
mediante burbujeo de nitrgeno en lugar de aire; una vez que C L es igual a 0, se airea de nuevo y
se toman mediciones de CL a diferentes tiempos. Si se grafican estos valores de acuerdo con la
ecuacin (10) se obtiene la Figura 4, en la que se observa claramente que la pendiente es igual a k La.

Fig. 3 Mtodo de eliminacin de ox geno.

12

Fig. 4 Determinacin de k La

Medicin Directa o mtodo dinmico


Como la medicin directa se realiza con fermentaciones reales, tanto intermit entes como continuas,
el valor obtenido es ms representativo del sistema en cuestin. S egn la opinin actual, para
efectuar el escalamiento de una fermentacin es necesario mant ener en todas las escalas valores
similares de la concentracin de oxgeno disuelto y de la velocidad de transferencia de oxgeno,
por lo que la medicin directa de k La es un instrumento muy til, tanto en la operacin como en el
escalamient o de procesos de fermentacin.

Balance de oxgeno en el sistema (Quintero, 1990).

De acuerdo con la Figura 2, , al realizar el balance de oxgeno en el fermentador se tiene:

g0 y 0 - g1y 1 - VQO2 X

V (dCL/dt )

(11)

En el estado estacionario del cultivo continuo, o cuando C L vara muy poco (caso del cultivo
intermitente), las ecuaciones (6) y (11) se convierten en (12) y (13) respectivamente:

k La (C* - CL )

QO2 X

(12)

g0 y 0 - g1 y 1

VQO2 X

(13)

Combinando ambas resulta:

k La

= [(g0 y 0 - g1 y 1 ) / V ( C* - CL )]

(14)

Los valores V, g0 , g1 , y 0 , y 1 se miden de acuerdo con la Figura 2 (de acuerdo con esta figura, las
unidades de g0 y g1 son de L/hr, pero para que las ec uaciones (11)-(14) s ean dimensionalment e

13

consistentes, g0 y g1 debern expresarse en mM aire/hr. Se denomina Na o cons umo de oxgeno


a:

Na = [(g0 y 0 - g1 y 1 ) / V ] =[g0 (y 0 - y 1 ) / V]

(15)

en general g0 = g1

Para la determinacin de k La basta conocer Na y el valor de CL medido por el electrodo. Pero


cuando el t amao del ferment ador es mayor de 50 L es necesario calcular (C* - CL ) promedio,
pues la concentracin de saturacin de oxgeno disuelto en el lquido en el fondo del tanque vara
sustancialmente respecto a la concentracin de s aturacin en la parte superior. De lo anterior se
pueden derivar dos criterios:

Fermentadores pequeos:

k La=[Na / (C* - CL )]

(16)

Fermentadores mayores de 50 L :

(C* - CL )promedio =

(C*1 - C*0) / ln [(C*1 - CL1 ) / (C*0 - CL0 )]

donde C*0 y C*1 es la concentracin de saturacin de oxgeno en el fondo del tanque y en la part e
superior de ste, respectivamente, y CL0 y CL1 es la concentracin de oxgeno dis uelto en la part e
inferior y superior del tanque respectivamente.

Por lo tanto:

k La = Na /

( (C*1 - C*0) / ln [(C*1 - CL1 ) / (C*0 - CL0 )] ) (17)

Tcnica Dinmica. Rgimen no estacionario


Este mtodo utiliza la respuesta transitoria de un electrodo medidor de oxgeno disuelto a los
cambios en la conc entracin del oxgeno disuelto. El mtodo dinmico se bas a en la ecuacin (6);
las mediciones se hacen utilizando un electrodo de respuesta rpida ( de 5 a 10 segundos ) y una
concentracin celular conocida.

14

La secuencia de la operacin es la siguient e:

1. Se suspende la ent rada de aire y se grafica el decremento en la concentracin de oxgeno


contra el tiempo. En esta situacin:

-(dC/dt )

QO2 X

(18)

2. Se determina Q O2 X a partir de la pendiente de la grfica.

3. Antes de que CL alc ance el valor crtico de la concentracin de oxgeno, C crt , se inicia de nuevo
la aereacin y se grafica CL contra el tiempo. Se c alcula dC/ dt en observaciones suc esivas,
que en esta condicin es igual a:

k La (C* - CL ) - QO2 X

La Figura 5, indica la secuencia de operaciones necesaria para la determinacin dinmica. Es muy


importante no llevar el cultivo hasta el valor crtico pues de hacerlo habra que conocer la
dependencia de QO2 respecto a la concentracin de ox geno disuelto en ese int ervalo. Al aplicar
esta tcnica se presentan algunos problemas prcticos, como el tiempo de respuesta del electrodo,
la aereacin superficial, la concentracin celular y la escala de operacin. El tiempo de respuesta
del electrdo es crtico para la determinacin de valores de k La. La aereacin superficial puede
convertir la recta que aparece en la fase I en una curva y que su pendiente dependa de la rapidez
del impulsor. La concentracin celular afecta la pendiente -Q O2 X por estar directamente asociada;
cuando X es muy baja en general la estimacin de k La es pobre pero la de QO2 X es buena, y lo
contrario es cierto en el caso de X alta..

Una vez obtenida la Figura 5, es factible res olver la ecuacin (6). Rearreglndola se llega a la
ecuacin (19):

CL= C* - [ ( 1 / k La ) (dC/dt + QO2 X ]

(19)

Graficndose CL vers us dCL/dt , se obtiene la Figura 6. La pendiente de la lnea recta es igual a 1/k La; la ordenada al origen es C*.

15

Fig. 5 Tcnica Dinmica (rgimen no permanente).

Fig. 6 Solucin de la ec. (6) usando diferenciales


obtenidas por la tcnica dinmica.

Correlaciones para estimar k La.


La Tabla 3, resume las correlaciones

entre k La y las variables de operacin y diseo de un

fermentador ms importantes desarrolladas en los ltimos 30 aos. Casi todas ellas se basan en la
oxidacin de sulfito y por lo mismo sirven slo como gua. Por lo general el valor de k La obtenido
por sulfito es dos a t res veces may or a los obtenidos por los mtodos directos (ya mencionados
anteriormente), aunque no siempre es as .
Para fluidos no newtonianos las correlaciones deben aplicars e con mucho cuidado, pues se deben
corregir por un factor de viscosidad que no ha sido estudiado con detalle.
Las unidades de cada correlacin son diferentes y, en el caso de quererlas usar deber recurrirse a
la fuente original para tener las dimensiones correctas.
De tales correlaciones se pueden sacar las siguientes conclus iones:
1. El k La se ha expresado como funcin de variables de operacin y diseo (P / V, Vs, N, etc.);
2. Tienen un int ervalo de volmenes en que son vlidas;
3. Ninguna de ellas es adimensional.

16

17

Tabla 3. Correlaciones para estimar k La.

AUTOR
Cooper
Richards
Fukuda
Hospodka
Taguchi
Humphrey
Westerteb
Hatch

PV = Pg / V ;
= gas hold -up
* diferencia de

CORRELACION

TIPO DE FERMENTACION

kLa = 0.0635 PV 0.095 VS 0.67


kLa = K PV 0.4 VS 0.5 N0.5
kla = (2 + 2.8 Ni ) PV0.56 VS0.7 N0.5 X 10-3
kLa = 0.56 PV 0.72 VS 0.11
kLa = 1.78 PV 0.33 VS 0.56
kLa = (+ (N4/3 Di 1/4 VS 1/2 )
kLa = K [ (1 - / H (NDi - N0 Di ) (T/)1/2
NoDi = (g / )1/4 ( k1 + k2 T/ Di )
kLa = K VS0.65
Ni = nmero de impulsores; K, , , k1 ,
*; H = altura del lquido; T = dimetro del tanque ;
volumen producida por retencin de gas.

Sulfito
Sulfito
Sulfito
C. utilis
Endomyces
Sulfito
Sulfito
C. utilis
C. intermedia

kLa
kg mol / hr-m3 -atm
mM O2 / L-min-atm
mM O2 / L-min-atm
min-1
min-1
mM O2 / L-min-atm
hr-1
mM O2 / L-hr-atm

k2 = constantes.
Di = dimetro del impulsor.

ADAPTADO DE: (Quintero, 1990).

Consumo de energa por agitacin y aereacin en sistemas de


fermentacin
Los procesos de fermentacin requieren de energa para producir agitacin y mezclado en la fase
lquida de un reactor. El mezclado se lleva a cabo por dos mecanismos: la rotacin de un impulsor
y el burbujeo de aire en el tanque. En el primer caso la velocidad con que la energa es consumida,
o sea la potencia, no slo depende del tipo de impulsor utilizado, o de la velocidad de rotacin sino,
adems, de las caractersticas fsicas del fluido, de la geometra del tanque y de la ubicacin y el
tamao relativo de todos los componentes del sistema. P ara caracterizar el comportamiento de un
impulsor debe considerarse el medio ambient e integral en que ste opera.
Cuando un impulsor gira en un fluido, se establece un patrn de flujo que solamente puede
alterarse por un cambio en la ent rada de energa al sistema variando la velocidad de rot acin del
impulsor. P ara evaluar el comportamiento del proceso que ocurre en el tanque agitado es
necesario, por lo tant o, medir la entrada de energa total al fermentador ( a travs de la flecha) y
conocer adems la cantidad de energa transmitida al fluido, ya que de ello depende en muc has
ocasiones la velocidad del proceso de trans ferencia.
En los casos en que el sistema no es aereado se han podido determinar correlaciones bastantes
exactas para el c lculo de la pot encia necesaria (la informacin disponible es muy extensa). Como
en los fluidos aereados todava no se han podido ent ender perfectamente los diversos efectos del
flujo gaseoso, se ha tenido que depender de correlaciones empricas.

18

La energa recibida por el fementador a travs de las burbujas de aire ha sido evaluada utilizando
los principios bsicos de ingeniera, y se ha encont rado que su contribucin es pequea.

Fluidos Newtonianos. Sistemas no aereados


Absorcin de Potencia
El concepto de agitacin mecnica impartida a fluidos Newtonianos fue abordada por Rushton y
colaboradores en 1950. Ellos encont raron que la absorcin de potencia puede caracterizarse por
un nmero adimensional (Nmero de potencia, Np). Este nmero represent a la relacin entre la
fuerza externa ejercida y la fuerza de inercia del fluido.

Matemticamente, se expresa de la siguiente manera:

Np

Po gc
N 3 Di 5

(20)

donde Np es el nmero de potencia (adimensional), P0 es la potencia externa provenient e del


agitador , gc es el factor de conversin de la ley de newton , N es la velocidad rotacional del
impulsor , Di es el dimetro del impuls or , y es la densidad del fluido.
El movimiento de un fluido en un tanque agitado tambin puede ser caracteriz ado mediante un
nmero adimensional, siendo este el nmero de Reynolds aplicado a la agitacin, N Re , el cual
representa la relacin entre la fuerza de inercia y la viscosidad para fluidos en movimiento. Para
impulsores en tanques agitados, el nmero de Reynolds se define como (Wang, 1979):

(21)

donde N Re es el nmero de Reynolds del impulsor (adimensional), Di es el dimetro del impulsor,


N es la velocidad rotacional del impulsor , es la densidad del fluido, y es la viscosidad del
mismo.
Usando estos dos nmeros adimensionales, Rusht on y colaboradores (1950) demostraron
experimentalmente que las caractersticas de absorcin de potencia pueden ser correlacionadas
en una amplia gama de condiciones de operacin y para varios tipos de impulsores, como se
muestra en la Figura 7. Como se observa en esta figura, en la regin correspondiente a flujo
laminar (NRe < 10) el nmero de potencia disminuye en proporcin inversa al nmero de Rey nolds.

19

Matemticamente, esto se expresa como:


-m

Np = K 1 (N Re )

siendo m=1.0 para flujo laminar.

Fig. 7 Correlacin del nmero de Reynolds y el nmero de potencia para diferentes impulsores.

Esta relacin indica que la potencia impartida al lquido puede ser relacionada con las variables de
operacin de la siguiente manera:
2

P0 (N Di )
Para el flujo de fluidos dentro de la regin de transicin, no hay una relacin regular entre el
4

nmero de potencia y el nmero de Reynolds. E n la regin de flujo t urbulento (N Re > 10 ), que es


la ms import ante desde el punto de vista prctico (ya que se requiere de esta turbulencia para que
haya un buen mezclado y una mejor transferencia de masa y calor), el nmero de potencia es
constante, es decir que es independiente del nmero de Reynolds:
Np = K2 = constante
y rearreglando,
3

P0 = K2N Di

(22)

20

Se puede obs ervar que us ando la correlacin entre el nmer o de pot encia y el nmero de
Reynolds, como se muestra en la Figura 7, es posible estimar el consumo de potencia para la
agitacin a cualquier condicin de operacin deseada.
Se pueden emplear las ecuaciones siguientes para el c lculo Nmero de potencia para los tipos
principales de impulsores en rgimen turbulento:
3

P0 = 0.035N Di

3.7

P0 = 0.0085 N Di
3

P0 = 0.25 N Di

2.2

W B0.8 R0.4 J 0.3

3.7

W B0.8 R0.4 J 0.3

W L1.5 B0 .8 R0.4 J0.3

Turbinas abiertas de hojas planas

Turbinas abiertas de hojas curvas

Turbinas de disco

Donde:
W= Ancho de la hoja del impulsor
B= N mero de hojas del impulsor
R= N mero de bafles
J= Ancho del bafle
Estas ecuaciones se derivaron a partir de las correlaciones y datos originales de Rushton et al (1950) de los
datos

Potencia en fermentadores con impulsores mltiples


En los tanques de fermentacin a gran escala es frecuentemente nec esario el empleo de mltiples
agitadores para proveer la potencia suficiente para lograr la absorcin de oxgeno des eada, siendo
el espaciamient o entre los impulsores un factor important e a considerar en el aprovechamiento de
la energa. Richards (1964) mostr que cuando los impulsores mltiples estn estrechament e
espaciados la potencia no es aprovechada al mximo. Por ejemplo, cuando entre los impulsores
existe un espacio menor que el dimetro del impulsor, la pot encia absorbida es solamente el 80 %
de la mxima, adems de que esto resulta en un mezclado pobre del fluido en el fermentador.
Cuando el espacio entre los impulsores es de una a dos veces el dimetro del impulsor ocurre la
mxima absorcin de potencia y el mezclado se ve favorecido. E n general, el espacio adecuado
entre un impulsor y otro deber ser:

Di < Hi < 2Di

(23)

y el nmero de impulsores puede determinarse usando la regla siguiente:

[(HL - Di) / Di] > Nmero de impulsores > [(HL - 2Di ) / Di]

(24)

donde Di es el dimetro del impulsor en cm, Hi es el espacio entre los impulsores en cm, y H L es
la altura del lquido en el tanque en cm (Wang, 1979).

21

Fukuda y colaboradores (1968) obtuvieron la relacin que existe entre el nmero de potencia y el
nmero de impulsores, como se muestra en la Figura 8,. Los datos de esta figura fueron obtenidos
para agua en fermentadores estndar con mltiples agitadores de turbina con un volumen de
operacin de 4 200 litros. Cuando los impulsores estn propiamente es paciados, es claro que la
potencia absorbida por un caldo de fermentacin utilizando impulsores mltiples es directament e
proporcional al nmero de impulsores.

Fig. 8 Relacin del nmero de impulsores con el nmero de pot encia.

Fluidos Newtonianos. Sistemas aereados


Cuando a un sistema agitado s e le burbujea un gas (generalmente aire), el consumo de energa
disminuye; esto ha sido demostrado con bastante amplitud en la literat ura. Sin embargo, las
variaciones encontradas debido a las geometras y a los fluidos utilizados son considerables, y
hasta ahora no se ha encont rado una explicacin total al fenmeno.

El decremento de la potencia consumida se debe princ ipalmente a que el valor de la densidad del
lquido, en particular alrededor del impulsor disminuye debido a la existencia de burbujas. Por ello,
en un sistema aereado los requerimientos de energa para la agitacin dependern de la manera
en que interaccionen la burbuja y el impulsor (Quintero, 1990).

Definiendo los siguientes trminos:

Hr = volumen de gas / (volumen de gas + volumen de lquido)


Hr =Vg / (Vg + VL )

(25)

22

Comnmente a la relacin expresada por Hr se le llama hold up. Suponiendo que el lquido es
una dispersin de burbujas, el sistema se comportar como un lquido de una densidad g menor
que la densidad del lquido. Para tal caso se puede mostrar que:

(1 - Hr)

(26)

Para un sistema y velocidad dados ocurre que:

Pg / P0 =

1 - Hr

(27)

donde P g es la potencia del sistema aereado.

Esta relacin forma un mtodo conveniente para medir el efecto del gas en la disminucin de la
potencia. Como indica la ecuacin (27), la relacin P g / P0 ser alterada por cualquier variable que
afecte a Hr. Para un sistema dado (fluido y geometra definidos) es evidente que existe una
relacin compleja entre Hr y N, P g , y el flujo del gas. Otros factores que tambin afectan son el
diseo del impulsor y del distribuidor gaseoso, el tamao de la burbuja, la viscosidad del lquido, la
tensin superficial, los slidos suspendidos, etc., (Quintero, 1990).

A fin de estimar la absorcin de potencia en tanques agitados de fermentacin bajo aereacin,


Oyama y Endoh (1955) introdujeron el concepto de nmero de aereacin, N a. Este nmero
representa la relacin entre la velocidad superficial del gas y la velocidad en la punta del impulsor.
Matemticamente se expresa de la siguiente manera (Wang, 1979):
2

Na= (Q / Di ) / (Ndi)

(28)

=Velocidad superficial del gas / velocidad en la punta del impulsor

donde Na es el nmero de aereacin (adimensional), Q es el flujo volumtrico del aire, Di es el


dimetro del impulsor y N es la velocidad del impulsor.

As mismo correlacionaron el trmino P g / P0 (pot encia con aereacin entre potencia sin aereacin)
con el nmero de aereacin para diferentes tipos de impulsor, como se muestra en la Figura 9.
Esta correlacin tiene sus limit aciones; Michel y Miller (1962) encontraron que no poda ser us ada
cuando las variables de operacin como el dimetro del impulsor, la velocidad del impulsor y el
flujo de aire variaban dentro de un gran intervalo. Esto los condujo a examinar ot ra manera de
relacionar la absorcin de potencia en los sistemas aereados de fermentacin.

23

Fig. 9 Nmero de aereacin contra la relacin P g / P0 para diferentes tipos de impulsores.

Estos investigadores desarrollaron entonces una c orrelacin de gran utilidad e importancia, pues la
obtuvieron utilizando sistemas geomtricos no similares, en escala industrial (100-40 000 l), y
encontraron que dentro del intervalo de propiedades fsicas probadas del lquido se obedeca la
siguiente correlacin (Quintero, 1990):
2

0.56 0.45

Pg = C (P 0 N Di / Q

(29)

para:

=
=
=

0.8 - 1.65 g / cm
0.9 - 100 cp
27 - 72 dinas / cm

donde P g es la potencia requerida para la aereacin , P 0 es la pot encia requerida sin aereacin,
N es la velocidad del impulsor, Di es el dimetro del impulsor, Q es el flujo volumtrico del aire, y C
es una constante (en funcin de la geometra del fermentador), y es la tensin superficial. En la

24

Figura 10, se muestra la correlacin de Michel y Miller para la estimacin de la potencia requerida
en la aereacin.

Fig. 10 Correlacin de Michel y Miller para la estimacin de P g.

Fluidos no Newtonianos
Un fluido newtoniano es aquel que produce una relacin lineal ent re el es fuerzo de corte ( y la
velocidad de corte (dv/ dy), (Quintero, 1990):

=(dv/dy)

(30)

en donde es la constante de proporcionalidad, que es igual a la viscosidad, v es la velocidad y, y


es la distancia.

Ejemplos de este comportamiento son el agua, los disolventes, y las soluciones microbianas
diluidas. Los fluidos no newtonianos son aquell os que no siguen una relacin lineal del tipo de la
ecuacin (30). S e puede utilizar una expresin general, la ley del exponente, para describir las
caractersticas de algunos fluidos, entre ellos los de naturalez a pseudoplstica (Quintero, 1990):

=k (dv/dy)n

(31)

donde k es el ndice de consistencia y n es el ndice del comportamiento del flujo.

Los valores de k y n pueden obtenerse a partir de una grfica log

vs log (dv/ dy).,(Quintero,

1990).Cuando n = 1, entonces la ecuacin (31) se simplific a, convirtindose en la ecuacin (30), y


k =

25

La Figura 11 presenta en forma esquemtica las ecuaciones (30) y (31). Para un valor particular de
la velocidad de corte, correspondiente a una velocidad de rotacin e impulsor particulares, se
puede calcular una viscosidad aparente, a, como si el fluido fuese newtoniano.
El problema que plantea este mtodo es que a no es constante y depende del valor de (dv/ dy)
escogido, c omo s e muestra en la Figura 11. Adems de que n y k estn en funcin del tiempo del
cultivo, lo que hace que la determinacin sea ms insegura. Este mtodo puede utilizars e, con
fines de operacin pero no de escalamiento, en una fermentacin particular cuando no se conocen
las constantes de la ecuacin (31).

La Figura 12, es la grfica o btenida aplicando el concept o de viscosidad aparente cuando se


conocen las constantes de la ecuacin (31). En la regin turbulenta, Np es constante y si el N Re
modificado es mayor de 10

se pueden aplicar los criterios previamente expuestos. Finalment e

Aiba y asociados describen ot ro mtodo para calcular la potencia en fluidos no newt onianos. Pero,
en general, la det erminacin sigue siendo emprica por lo que es necesario investigar esta rea.

Fig. 11 Caractersticas de los fluidos y determinacin de a


en fluidos no newtonianos (pseudoplsticos).

26

Fig. 12 Relacin entre el nmero de potencia y el nmero de


Reynolds modificado para fluidos no newtonianos sin airear.

kLa como criterio de escalamiento


El problema del paso de una escala a ot ra (escalamient o) es uno de los de mayor importancia no
slo en fermentacin sino en la industria en general.
En el caso de la fermentacin aerbica el predecir resultados a escala de produccin basados en el
escalamient o de datos obtenidos en el laboratorio o en la planta pilot o requiere de un anlisis
cuidadoso de cada una de las escalas, tanto en sus variables fisicoqumicas como biolgic as.

Por lo general en el laboratorio se opera con matraces agitados (- 500 ml) o pequeos
fermentadores, donde se buscan nuevos productos, se estudian mecanismos de control y se
mejoran las cepas de produccin. En la planta piloto (5 -500 l) se estudian efectos de aereacin,
temperatura y control de pH; en muchos casos los fermentadores cuentan con instrumentos para
conectarse a una computadora con objeto de estudiar la dinmica del cultivo y, de ser posible,
establecer un control por retroalimentacin. Los fermentadores de produccin (5000 a 400000 l)
deben operar siguiendo un calendario fijo; adems, se trata de llevar el proces o a lo ms
econmic o (Quintero, 1990).

Cuando se tienen equipos dados y se pretende trasladar las condiciones de operacin de uno a
otro (revoluciones por minuto, cantidad de aire por minuto, potencia por unidad de volumen), lo
importante es establecer relaciones ent re las variables que aseguren

la similitud en el medio

ambiente al cambiar de escala.

En la prctica se han escogido varios criterios para efectuar el cambio de escala, todos ellos
basados en resultados empricos. Estos son (Wang, 1979):

1. Coeficient e volumtrico de transferencia de oxgeno, k La.


2. Velocidad de la punta del impulsor , NDi.
3. Potencia por unidad de volumen, P g / V.
4. Tiempo de mezclado.
5. Nmero de Reynolds, N Re.

27

En los casos donde el oxgeno disuelto es uno de los factores de control importantes, el k La es un
buen criterio de escalamient o. Es de primordial importancia seleccionar un k La de operacin, ya
que la pregunta clave en el escalamiento es: Qu valor de k La es el adecuado para el diseo?. La
respuesta es que es aquel que asegure resultados satisfactorios. En la may ora de las
fermentaciones, el rendimiento y la productividad tienden a incrementarse al mximo con un
aumento de k La. Como se muestra en la Figura 13, el rendimiento se inc rementa rpidamente al
principio con un incremento de k La y entonces tiende a nivelarse. Estudios de optimizacin han
mostrado generalmente que el punto ptimo de operacin es cercano al quiebre en la curva.

Adems debe determinarse la relacin entre el k La, la velocidad de aereacin, la velocidad de


agitacin y la escala. Si es posible esta relacin deber estar basada en los datos obtenidos para
el medio del proceso o para un medio cuyas caractersticas reolgicas sean similares a las de este.

Fig. 13 Seleccin de k La ptimo para el escalamiento .

El uso del k La como criterio de escalamiento, presenta algunas dificultades por las siguientes
razones:

a) el k La cambia durante el transcurso de la fermentacin,

28

b) las correlaciones de k La solo son vlidas dentro de ciert os lmites y para geometras particulares
y,
c) el mtodo de det erminacin de k La.

El k La vara durante la fermentacin por varias razones, entre ellas por el aumento de la
viscosidad, los problemas de espuma y el aument o de la concentracin celular. Es decir, si se
emplea como criterio k La, deben especificarse las condiciones ambientales y tipo de fermentacin
en que se determin este, pues puede ocurrir que se escoja un k La menor que el nec esario y al
hacer el cambio de escala, descubrir que no es suficient e.

Los mtodos de determinacin de k La varan bastante por lo que a la transferencia de oxgeno se


refiere. Se considera que en general los k La determinados por oxidacin de s ulfito s on 2 o 3 veces
mayores que el real. Emplear el mt odo dinmico en fermentadores grandes es difcil porque
existen periodos de transicin antes de que se establezca un periodo libre de burbujas para poder
determinar Q O2 X y despus volver a restablecer el burbujeo de aire. E n ferment adores a escala
industrial el gradiente de concentraciones vara de acuerdo con la profundidad del lquido, por lo
que se recomienda usar un promedio logartmico del gradiente.

A pesar de los problemas anteriores, el k La es uno de los criterios de escalamient o ms adecuados


y comnmente empleados.

En cuanto a los otros criterios de escalamient o: se utiliza la velocidad en la punta del impulsor
constante,

cuando las clulas microbianas o agregados celulares son afectados por grandes

esfuerzos cortantes; el tiempo de mezclado se ha propuesto como una consideracin para el


escalamient o, ms poco se puede hacer para mejorarla en un fermentador grande, porque se
requieren motores demasiado grandes para lograr un mezclado rpido; el nmero de Reynolds,
constante, generalmente no es empleado en el escalamiento de fermentaciones, siendo una de las
razones que no c onsidera el efecto de aereacin sobre los resultados del proceso; finalmente la
potencia por unidad de volumen, al igual que el k La es un criterio comnmente empleado, estando
ambos estrechamente relacionados.

Dado lo extens o del tema y su complejidad, queda fuera del alcanc e de este t rabajo describir el
procedimiento para el escalamiento de fermentaciones basado en mantener constante k La o algn
otro de los criterios mencionados anteriormente, as como tambin el presentar una discusin
acerca de los casos en que es ms conveniente emplear un criterio u otro y, las ventajas y
des ventajas que presentan.

29

30