1.1.

Tujuan
1. Mahasiswa dapat mengerjakan pengenceran dan dapat menginokulasi
mikroorganisme dengan cara metode tuang dan gores.
2. Mahasiswa dapat mengerjakan cara pemeliharaan kultur cair dan kultur padat.
2. ALAT DAN BAHAN
2.1.
Alat
1. Cawan petri
2. Gelas Objek
3. Tabung reaksi
4. Erlenmeyer
5. Pipet volume
6. Timbangan (Neraca analitik)
7. Autoklaf
8. Inkubator
9. Lampu spirtus (bunsen)
2.2.
Bahan
1. Air mineral
2. Cendol
3. Roti
4. Tepung beras
5. Jahe bubuk
6. Kunyit bubuk
7. Alkohol
8. Larutan pengencer NaCl fis 0,85%
9. Media NA (Nutrient Agar)
10. Media PDA (Potato Dextrose Agar)
11. Media PCA (Plate Count Agar)
12. Media LB (Lactose Broth)
13. Kapas dan kasa
14. Kertas sampul
15. Spirtus
III.

Prosedur

3.1. Perlakuan Pendahuluan

1. Siapkan sampel yaitu air, cendol, roti, tepung beras, jahe bubuk, dan kunyit bubuk
2. Untuk bahan non rempah, masukkan bahan tersebut ke dalam tabung pengencer,
sedangkan untuk bahan rempah, lakukan pengenceran dalam tabung reaksi lalu
panaskan
3.2 Pengenceran
1. Tuangkan 9 ml NaCl Fis ke dalam 5 buah tabung reaksi
2. Lakukan pengenceran sampel

3. Ambil 1 ml larutan sampel di tabung pertama, lalu tuangkan ke tabung kedua, lalu
ambil 1 ml larutan sampel di tabung kedua, lalu tuangkan ke tabung ketiga, lakukan
hal serupa untuk tabung keempat dan kelima, tetapi pipet volume yang digunakan
untuk tiap pengenceran harus berbeda-beda
3.2.1 Metode Gores
1. Tuangkan medium PCA cair ke dalam cawan petri steril, dekat Bunsen, tunggu
2.
3.
4.
5.
6.
7.
3.2.2
1.

hingga media PCA beku

Sterilkan ose loop
Ambil suspense sample 10-1 dengan ose
Goreskan pada media PCA
Inkubasi
Pilih koloni untuk diteliti
Amati
Metode Agar Tuang
Tuangkan larutan sampel 10-4 masing-masing 1 ml kedalam 2 cawan petri dan

tuangkan larutan sampel 10-5 masing-masing 1 ml kedalam 2 cawan petri

2. Tuangkan medium NA untuk 1 cawan petri berisi larutan sampel 10 -4 dan 1 cawan
perti larutan sampel 10-5
3. Tuangkan medium PDA untuk 1 cawan petri berisi larutan sampel 10 -4 dan 1 cawan
4.
3.3
1.
2.
3.
4.
3.4
3.4.1
1.
2.
3.
4.
5.
3.4.2
1.
2.
3.
4.

perti larutan sampel 10-5

Inkubasi, lalu hitung jumlah koloni dengan kolonimeter
Pemeliharaan Kultur Cair
Tuangkan LB kedalam tabung reaksisekitar
Masukkan suspense dengan ose
Inkubasi
Amati
Pemeliharaan Kultur Padat
Agar Miring
Masukkan medium NA kedalam tabung reaksi steril
Miringkan sedikit tabung reaksi
Tunggu hingga NA beku
Ambil suspensi dengan ose loop
Goreskan suspense diatas NA secara zig-zag
Agar Tegak
Masukkan medium NA kedalam tabung reaksi steril
Tunggu hingga NA beku
Ambil suspensi dengan ose tegak
Goreskan suspense diatas NA dengan cara menusukannya kedalam NA hingga tengah