FARMACIA Y BIOQUMICA

Farmacognosia

ASIGNATURA:
REA

Laboratorio

PROFESOR

DOCUMENTO

Gua de prctica

PRCTICA N

QF Alberto Canelo Blas

FECHA

/ 2016

TTULO DE LA PRCTICA
PRCTICA N 2

INVESTIGACIN DE ESPECIES VEGETALES: CARACTERSTICAS

MORFOLGICAS, HISTOLGICAS Y TAMIZAJE FITOQUMICO
INTRODUCCIN
Si bien la medicina moderna est bien desarrollada en la mayor parte del mundo, grandes sectores de la poblacin de los pases en
desarrollo todava dependen de los profesionales tradicionales, las plantas medicinales y los medicamentos herbarios para su atencin
primaria. Es ms, durante los ltimos decenios, el inters del pblico en las terapias naturales ha aumentado enormemente en los pases
industrializados, y se halla en expansin el uso de plantas medicinales y medicamentos herbarios.
Las muchas y diversas formas de los productos medicinales tradicionales han evolucionado frente a entornos ampliamente diferentes en
lo etnolgico, cultural, climtico, geogrfico y aun filosfico.
Evaluar estos productos y asegurar su inocuidad y eficacia mediante el registro y la reglamentacin plantean importantes desafos.
La finalidad de esta prctica es conocer procedimientos bsicos recomendados para iniciarse en el proceso de investigacin de
especies vegetales. As, queda establecido que los criterios para la seleccin de las hierbas medicinales esenciales deben ser
principalmente la seguridad, la eficacia, las necesidades en asuntos de salud y la disponibilidad de suministros. Sobre la base de la lista
aprobada de plantas medicinales de cada pas, la poltica debe indicar claramente cmo se asegurara el suministro de dichas plantas. El
procedimiento de suministro debe comprender recoleccin, cultivo, produccin y elaboracin locales, importaciones y preservacin de la
flora nacional.
En un sistema nacional de garanta de la calidad, es preciso fijar normas y reglamentos a fin de asegurar la calidad de todas las plantas
medicinales y sus preparativos que estn disponibles en el mercado. Las normas contienen un captulo especial dedicado a los criterios
para la investigacin sobre los medicamentos herbarios tradicionales y criterios para su uso racional. Como la mayora de los
medicamentos herbarios todava necesitan estudiarse cientficamente, los Estados Miembros han estado procurando obtener la
cooperacin de la OMS en la identificacin de medicamentos herbarios inocuos y eficaces para su utilizacin en los sistemas nacionales
de atencin de salud.
Con el fin de elaborar criterios y principios generales que guen la labor de investigacin sobre la evaluacin de los medicamentos
herbarios, la Oficina Regional de la OMS para el Pacfico Occidental organiz, en 1992, una reunin de expertos para formular normas
para la investigacin sobre estos medicamentos. Se han incorporado a estas normas principios cientficos bsicos y los requisitos
especiales relacionados con su uso en la prctica tradicional, cuyos objetivos principales son asegurar la inocuidad y eficacia de dichos
medicamentos, promover su uso racional y proporcionar criterios de investigacin para su evaluacin. Las normas proporcionan una
base para que los Estados Miembros formulen sus propias normas de investigacin y para el intercambio de experiencias de
investigacin y otra informacin de manera que pueden acumularse un conjunto de datos confiables para la validacin de los
medicamentos herbarios. La adopcin de dicha poltica tena el propsito de ayudar a superar las barreras legales contra el uso de
medicamentos herbarios.
Los enfoques de investigacin deben diferenciar entre los medicamentos herbarios con una larga experiencia documentada y aquellas
cuyo uso "tradicional" todava no se ha establecido. De conformidad con las Normas de la OMS para la Evaluacin de los Medicamentos
Herbarios (OMS/TRM/91.4), al realizar la investigacin debe considerarse, como regla general, la experiencia tradicional en la
preparacin respectiva, que incluye el uso de larga data as como los antecedentes mdicos, histricos y etnolgicos.
Los medicamentos herbarios tienen dos caractersticas especiales que los distinguen de los medicamentos qumicos: el uso de hierbas
sin elaborar y el uso prolongado. Una nica hierba puede contener muchos constituyentes naturales; una combinacin de hierbas, an
ms. La experiencia seala que el uso de plantas medicinales enteras y sus extractos tienen beneficios reales a largo plazo, ya que los
componentes de las mismas actan conjuntamente unos con otros. Sin embargo, hay muy poca investigacin sobre las plantas enteras
porque el proceso de aprobacin de medicamentos no da cabida a mezclas indiferenciadas de productos qumicos naturales, la funcin
colectiva de los cuales es incierta. Aislar cada principio activo de cada hierba sera inmensamente lento a un costo insostenible y es casi
imposible en el caso de las preparaciones.
El resumen y las recomendaciones de la Sexta ICDRA impulsaron a la OMS a que siguiera elaborando monografas farmacopicas de
los medicamentos herbarios sobre la base de las Normas para la Evaluacin de los Medicamentos Herbarios. En respuesta a la solicitud
de los Estados Miembros, el Programa de Medicina Tradicional de la OMS decidi preparar un documento tcnico, titulado "Monografas
de la OMS sobre Plantas Medicinales Seleccionadas", para la atencin primaria de salud. La informacin contenida en las monografas
comprende dos partes: la Parte I consta de resmenes de las caractersticas botnicas, los principales componentes qumicos activos y

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el control de calidad de cada planta; la Parte II consta de resmenes de las aplicaciones clnicas, la farmacologa, la posologa, las
contraindicaciones y precauciones posibles, y las reacciones adversas potenciales.
Considerando la parte I, en la presente prctica se determinar las caractersticas botnicas yt los principales componentes qumicos de
especies vegetales peruanas.
OBJETIVOS:

Iniciarse en la investigacin de plantas medicinales mediante la determinacin de las caractersticas macroscpicas, microscpicas
y los componentes qumicos existentes en sus rganos correspondientes.
Definir el proyecto de investigacin de una especie vegetal peruana.

MATERIALES:

Planta medicinal u rgano a investigar.

Lupas
Hoja de afeitar
Reglas
Placas Petri
Lminas y laminillas, gotero, estiletes
Hoja de afeitar nueva, papel lente.
Microscopio

Cmara Fotogrfica
Tubos de ensayo
Gradillas
Mecheros
Cocinilla
Goteros
Pipetas
Propipetas
Gradillas
Beakers
Balanza

REACTIVOS

Safranina

Lugol

Hipoclorito de Sodio,

Etanol al 96 %

Agua destilada

Reactivo de Molisch

Reactivo de Fehling

FeCl3 en cristales

Gelatina em polvo

Iodo resublimado

Yoduro de K

Reactivo de Dragendorf

Reactivo de Mayer

Reactuivo de Betrand

Reactivo de Sonneschein

NaOH 10 %

cido pcrico

PROCEDIMIENTO:
Utilizando la especie vegetal a investigar, realice el estudio de:
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS
Realizar el Anlisis Macroscpico, organolptico (olor, sabor, color, textura) de los diferentes rganos de la especie vegetal a investigar.
Tabla Nro. 1. Anlisis macroscpico, caractersticas organolpticas de
Raz, Tallo, Hoja, Flor, Fruto y Semilla
Carcter
Organolptico
rgano

Color

Olor

Sabor

Textura

Otras

de la especie
Observaciones
Raz
Tallo
Hoja
Flor
Fruto
Semilla
CARACTERSTICAS HISTOLGICAS
Realizar el anlisis microscpico de la especie vegetal a estudiar con ayuda de la histoqumica y
identificar los diferentes tipos de tejido presentes en la especie.

Tabla Nro. 2. Anlisis microscpico, Citologa e Histologa de

Raz, Tallo, Hoja, Flor, Fruto y Semilla
rgano de
la Especie
vegetal
Raz
Tallo
Hoja
Flor
Fruto
Semilla

Tipo de Corte

Histoqumica
(Tcnica de Tincin)
Fresco, Safranina y Lugol
Fresco y Safranina
Fresco y Safranina
Fresco, Safranina y Lugol
Fresco y Safranina
Fresco, Safranina
Lugol
Fresco,
Safranina y Lugol
Fresco y Lugol

Observacin

OBSERVACIONES DE LA PRCTICA N 4
CONTROL BOTNICO DE LA ESPECIE VEGETAL MEDICINAL
MORGOLOGA VEGETAL CITOLOGA e HISTOLOGA, (Raz, Tallo, Hojas, Flor, Fruto y Semilla),

Muestra
Raz
Observacin

Muestra
Tallo
Observacin

Muestra
Hoja
Observacin

Muestra
Flor
Observacin

Muestra
Semilla
Observacin

Muestra
Fruto
Observacin

Dibuje o esquematice sus observaciones

FECHA:......./.........../........

TAMIZAJE FITOQUMICO
El tamizaje fitoqumico o Screening fitoqumico es una de las etapas iniciales de la investigacin
fitoqumica, que permite determinar cualitativamente los principales grupos de constituyentes qumicos de
la planta, a partir del cual se puede orientar las extracciones y/o el fraccionamiento de los extractos
eligiendo los grupos de mayor inters para el investigador.
Preparacin del extracto acuoso y etanlico de la especie a investigar para hacer los anlisis cualitativos
correspondientes:
1. Preparar el extracto acuoso de 20 g de la especie medicinal en 100 mL de agua destilada y llevar a
decoccin en BM por 15 minutos y realizar el tamizaje fitoqumico.
2. Preparar con 20 g de la especie medicinal el extracto etanlico en 100 mL (etanol de 96) en
maceracin por 7 das para realizar el tamizaje fitoqumico.
EXTRACTO ACUOSO:
Utilizando gotas o ml del extracto acuoso, colocar en tubos de ensayo y determinar presencia de
metabolitos primarios o secundarios.
IDENTIFICACIN DE COMPONENTES QUMICOS DERIVADOS DEL METABOLISMO
PRIMARIO
GLCIDOS:
1)

Reaccin de Molisch
a) Gotas de muestra problema + gotas de S. R. de Molisch A (alfa naftol 2% en alcohol),
b) Agitar + H2SO4 conc. por las paredes del tubo
c) Aparicin de anillo color violeta es reaccin (+) para carbohidratos (azcares).

2)

Reaccin de Antrona
a) Gotas de muestra problema + gotas de S.R. de Antrona (antrona en H2SO4 conc. al 2%)
b) Aparicin de anillo verde es (+) para carbohidratos (azcares).

3)

Reaccin de Fehling
a) Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Fehling A + gotas S. R. Felhing B+ calor por 5-7 minutos en
bao mara.
b) Aparicin de pp color rojo ladrillo es (+) para carbohidratos (azcares reductores).

4)

Reaccin de Benedict
a) Gotas de muestra problema + gotas de S.R. de Benedict
b) Calentar por 5-7 minutos en bao mara
c) La aparicin de un pp color rojo ladrillo. (+) para carbohidratos (azcares reductores).

5)

-Reaccin de Brown
a) Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Hidrxido de sodio al 10%
b) Calentar hasta obtener coloracin amarilla, luego agregar 1 gota de + cido pcrico 2%
c) Se obtendr una coloracin parda por formacin de cido picrmico.
d) Esto indica reaccin (+) para carbohidratos (azcares reductores).

IDENTIFICACIN DE COMPONENTES QUMICOS DERIVADOS DEL METABOLISMO

SECUNDARIO
6)

Compuestos fenlicos:

Gotas de muestra problema + gotas de FeCl3 (Sol. al 1% en agua o alcohol)

La aparicin de color verde o azul es una reaccin (+) para presencia de compuestos fenlicos, taninos.

7)

Taninos:
a) Reaccin de Gelatina
Gotas de muestra problema + gotas de S.R. gelatina
Aparicin de pp blanco indica reaccin (+) para presencia de Taninos
b)

8)

Reaccin de Agua de Bromo

Gotas de muestra problema + gotas de agua de bromopp. taninos condensados y no pp taninos hidrolizables. (+)
Taninos

Flavonoides
Reaccin de Shinoda

Gotas de muestra problema + S.R. Shinoda (Mg metlico + gotas de HCl conc).

Aparicin de color rojo indica reaccin (+) para presencia de flavonoides, chalconas, auronas; catequina e isoflavona no
dan color.

9)

Esteroides y/o Triterpenoides

Reaccin de Lieberman-Burchard

Gotas de muestra problema + S.R. de Lieberman-Burchard (gotas de cloroformo + gotas de Anhdrido

Actico + gotas de H2SO4 conc)

Aparicin de color verde, azul, naranja, rojo indica reaccin (+) para presencia de esteroides y triterpenoides.

10)

Quinonas
Reaccin de Borntrager

Gotas de muestra problema + S.R. Borntrager (gotas de hidrxido de sodio 5%)

Aparicin de color rojo (+) quinonas

11)

Alcaloides
Reaccin de Dragendorff

Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Dragendorff

Aparicin de pp naranja o rojo naranja es (+) para alcaloides (medio ligeramente cido).

Reaccin de Mayer

Gotas de muestra problema + gotas de R. Mayer

Aparicin de pp. blanco.(+) alcaloides

Reaccin de Sonnenschein

Gotas de muestra problema (+) gotas de reactivo de Sonneschein

Aparicin de pp es reaccin (+) para presencia de alcaloides

Reaccin de Bertrand

12)

Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Bertrand

Aparicin de pp blanco es (+) para presencia de alcaloides

Antocianinas
Reaccin de Rosenheim

Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Rosenheim (S.R. Yodo Yodurada)

Aparicin de color rojo oscuro es reaccin (+) para antocianinas.

13)

Grupo Carbonilo
Reaccin de Hidroxilamina

Gotas de muestra problema + gotas de S.R. hidroxilamina

Aparicin de pp coloreado es reaccin (+) para presencia de grupo carbonilo.

14)

Saponinas

Reaccin para Saponinas

1 g de muestra problema + 10 mL de agua destilada. Agitar fuertemente por 1 minutoproduccin de espuma por 15
minutos de 0.5 a 1 cm (+) presencia de saponinas.
15)

Glicsidos
Reaccin de Vainillna sulfrica

Gotas de muestra problema + gotas de S.R. Vainilln sulfrico

Aparicin de color rojizo violceo en anillo de interfase indica reaccin (+) para presencia de Glicsidos.

**Los resultados de los tamizajes fitoqumicos nos dan una referencia de la composicin qumica de una planta que se est
investigando (no es determinante), lo cual nos ayudar a profundizar en la Investigacin al realizar el fraccionamiento y el
aislamiento de los constituyentes qumicos.
ACTIVIDAD DE INVESTIGACIN BIBLIOGRFICA

Desarrolle un Flujograma de las etapas para realizar un estudio Botnico en especies vegetales con uso medicinal.
Presentacin del Proyecto de Investigacin

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Libros:
1. SORIA, R., CARHUAPOMA, M. 2005. Manual de prcticas de Botnica General y Sistemtica. Lima
2. SOUKUP, J. 1971. Vocabulario de Nombres Vulgares de Plantas Peruanas, Ed. Salesiana, Lima.
3. STRASBURGER, E. NOLL, F. 2004. Tratado de Botnica. 35 ed. Ediciones Omega. Barcelona.
4. THOMAS-DOMNECH, J.M. 1997. Atlas Temtico de Botnica. Barcelona.
5. TOSCO U. 1993 Atlas de Botnica. Edit. Barcelona.
6. VALDIZAN H.; MALDONADO A. 1922. La Medicina Popular Peruana Imp. Torres Aguirre, Lima.
7. VALLA, J. 2011. Botnica. Morfologa de las plantas superiores. Primera Edicin. Editorial Hemisferio Sur.
8. VENTURA, O. 2010. Las Plantas Aromticas y Medicinales. Primera Edicin. Lima
9. VILLAR, U. 2004. Fitoterapia. Primera Edicin. Editorial Acribia. Zaragoza
10. WEBERBAUER A. 1945. El Mundo Vegetal de los Andes Peruanos. Ministerio de Agricultura. Lima.
11. Flora de China: http://flora.huh.harvard.edu/china/
12. Journal of Natural Products: http://www.journalofnaturalproducts.com/
13. Nature Medicine: http://www.nature.com/nm/index.html
14. Phytochemistry: http://www.journals.elsevier.com/phytochemistry/
15. Raintree's Tropical Plant Database: http://www.rain-tree.com/plistbot.htm#.Ux9nDD95NPI
16. Revista peruana de biologa: http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/index.php/rpb
17. Revistas de investigacin UNMSM: http://revistasinvestigacion.unmsm.edu.pe/
18. Bruneton, J. Farmacognosia Fitoqumica Plantas Medicinales. 3ra. Ed. Acribia, Zaragoza, Espaa 2001.
19. Treasse, G., Evans, W. Pharmacognosy. Ed. BailliereTindall, Londres 1994.
20.Reynaud, Jol. La flora del farmacutico. Espaa, 2002.
RESULTADOS DE LA PRCTICA N 02
A. Utilizando el cuadro A, complete el cuadro B con sus resultados, segn las Reacciones del Tamizaje fitoqumico
Cuadro A
METABOLITO
REACCIN
PROCEDIMIENTO
REACCIN POSITIVA
Molish
X gotas de MP+ III gotas de Molish agitar+ III
(alfa naftol 2% en
Anillo violeta
gotas de H2SO4 CC
alcohol)
Antrona
(antrona en
X gotas de MP + III gotas de Antrona
Coloracin verde
CARBOHIDRATOS H2SO4 cc al 2% )
Fehling
(A: CuSO4; B:
tartrato mixto de
X gotas de MP + III gotas de Fehling A+ III
Coloracin rojo ladrillo
potasio y sodio
gotas de Fehling B + calentar en B.M
(KNaC4H4O64H2
O))
COMPUESTOS
FeCl3
X gotas de MP + III gotas de FeCl3 10 %
Coloracin verde o azul
FENLICOS
TANINOS
Gelatina
X gotas de MP + III gotas de gelatina
Precipitado denso blanco

FLAVONOIDES

Shinoda

X gotas de MP + 1-2 virutas de Mg metlico +

III gotas de HCl cc

Chalconas, auronas,
isoflavanonas: No hay
coloracin.
Isoflavanonas: Amarillo
rojizo.
Flavanonoles: Rojo a
magenta.
Flavonas y flavonoles:
Amarillo a rojo

ANTOCIANINAS Y
FLAVONOIDES
CATQUICOS
AMINOCIDOS
LIBRES Y
GRUPOS AMINO

Rosenheim
(Sol. Yodo
Yodurada)

X gotas de MP + III gotas de Rosenheim

Coloracin rojo oscuro

Ninhidrina(0.1% en
etanol)

X gotas de MP + III gotas de ninhidrina +

calentar en B.M 10 min.

Coloracin violcea

X gotas de MP + evaporar el solvente B.M + V

gotas de HCl 10%+ III gotas de Dragendorff

Precipitadonaranja

X gotas de MP + evaporar el solvente B.M + V

gotas de HCl 10%+ + III gotas de Mayer

Precipitado blanco

ALCALOIDES

Dragendorff
(yoduro potsicobismtico )
Mayer (yoduro
potsico
mercrico)
Bertrand (cido
silco-tngstico)
Sonnenschein
(cido
fosfomolbdico)

NAFTAQUINONAS,
ANTRAQUINONAS
Y ANTRANONAS

Borntrager
(NaOH 5%)

TRITERPENOIDES
Y ESTEROIDES

LiebermanBurchard

SAPONINAS

Generacin de
espuma

GLICSIDOS

Baljet

LACTONAS

Legal

CUMARINAS

NH4OH cc
NaOH 10%

X gotas de MP + evaporar el solvente B.M + V

gotas de HCl 10%+ + III gotas de Bertrand
X gotas de MP + evaporar el solvente B.M + V
gotas de HCl 10%++ III gotas de
Sonnenschein

Precipitado blanco

X gotas de MP + III gotas de Borntrager

Coloracinroja

X gotas de MP + llevar a sequedad en B.M +

X gotas de cloroformo+ III gotas de anhdrido
actico+ H2SO4 cc en zona (por las paredes de
tubo) sin agitar.
1 mL de MP + 5 mL de agua destilada + agitar
fuertemente por 1 min.
X gotas de MP + V gotas de cido pcrico 1 %
+ V gotas de NaOH al 5 %.
X gotas de MP + V gotas de denitroprusiato
de sodio 0.5% + V gotas de KOH 2N.
X gotas de MP + papel humedecido con
NH4OH cc NaOH 10% en boca de tubo +
calentar por 5 min

Precipitado amarillo-verdoso

Esteroides: verde-azul
Triterpenoides: rojo-naranja
Formacin de 0.5 a 1 cm de
espuma estable por 15 min.
Coloracin anaranjada
Coloracin rojo oscuro
Fluorescencia celeste

Especie vegetal ______________________________________________________

Droga______________________________________________________________
B. Anlisis organolptico:
Color:
Olor:
Sabor:
METABOLITO
CARBOHIDRATOS

REACCIN
Molish
(alfa naftol 2% en alcohol)
Fehling
(A: CuSO4; B: tartrato
mixto de potasio y sodio

Cuadro B
PROCEDIMIENTO
X gotas de MP+ III gotas de Molish agitar+
III gotas de H2SO4 CC
X gotas de MP + III gotas de Fehling A+ III
gotas de Fehling B + calentar en B.M

REACCIN POSITIVA

(KNaC4H4O64H2O))
COMPUESTOS
FENLICOS
TANINOS

FeCl3

X gotas de MP + III gotas de FeCl3 10 %

Gelatina

X gotas de MP + III gotas de gelatina

X gotas de MP + 1-2 virutas de Mg
metlico + III gotas de HCl cc

FLAVONOIDES

Shinoda

ANTOCIANINAS Y
FLAVONOIDES
CATQUICOS

Rosenheim
(Sol. Yodo Yodurada)
Dragendorff
(yoduro potsicobismtico )
Mayer (yoduro potsico
mercrico)

ALCALOIDES
Bertrand (cido silcotngstico)
Sonnenschein
(cido fosfomolbdico)
SAPONINAS

Generacin de espuma

GLICSIDOS

Baljet

CUMARINAS

NH4OH cc
NaOH 10%

X gotas de MP + III gotas de Rosenheim

X gotas de MP + evaporar el solvente B.M
+ V gotas de HCl 10%+ III gotas de
Dragendorff
X gotas de MP + evaporar el solvente B.M
+ V gotas de HCl 10%+ + III gotas de
Mayer
X gotas de MP + evaporar el solvente B.M
+ V gotas de HCl 10%+ + III gotas de
Bertrand
X gotas de MP + evaporar el solvente B.M
+ V gotas de HCl 10%++ III gotas de
Sonnenschein
1 mL de MP + 5 mL de agua destilada +
agitar fuertemente por 1 min.
X gotas de MP + V gotas de cido pcrico
1 % + V gotas de NaOH al 5 %.
X gotas de MP + papel humedecido con
NH4OH cc NaOH 10% en boca de tubo +
calentar por 5 min

LEYENDA: (-) Nulo (-) poco (+) Leve (++) moderado (+++) abundante
ACTIVIDAD DE INVESTIGACIN BIBLIOGRFICA
1)

Fundamente las reacciones ms importantes que reacciones qumicas se dan en el Tamizaje Fitoqumico.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1.

Villar del Fresno, A. Farmacognosia General. Ed. Sntesis, SA. Madrid, Espaa 1999.

2.

Treasse, G., Evans, W. Pharmacognosy. Ed. BailliereTindall, Londres 1994.

3.

Gattuso, Gattuso. Manual de Procedimientos para el Anlisis de Drogas en Polvo. 1ra ed. Argentina: Editorial Universidad
Nacional de Rosario Urquiza.1999.

4.

Bruneton, J. Farmacognosia, Fitoqumica, Plantas medicinales 2 Ed. Acribia, Zaragoza, Espaa. 2001.

5.

Kuklinski, C. Farmacognosia, Estudio de las drogas y sustancias medicamentosas de origen natural. Ed. Omega, Barcelona,
Espaa 2003.

6.

Sharapin N. Fundamentos de Tecnologa de Productos Fitoteraputicos Santa fe Bogota Colombia 2000.

7.

Miranda M. Mtodos de Anlisis de Drogas y Extractos, Habana Cuba 2002.

Lock de Ugaz. Investigacin Fitoqumica, Mtodos en el estudio de productos naturales [en lnea]. Per: Editorial Pontificia
Universidad Catlica del Per; 1994. [Fecha de acceso 27 de junio de 2013]. URL disponible en:
http://books.google.com.pe/books?
id=N36g2QOccXkC&pg=PA287&dq=prueba+con+dragendorff&hl=es&sa=X&ei=d7bNUazRHsjX4AS9oYBQ&ved=0CEAQ6AEwB
A#v=onepage&q=prueba%20con%20dragendorff&f=fals