Anda di halaman 1dari 4

[Type text]

BAB III
METODOLOGI
III.1

Alat dan Bahan

A.
1.
a.
b.
c.

Imobilisasi Sel
Bahan
Satu tabung biaka murni Acetobactrer aceti berumur 2-4 hari.
Air garam steril 500 mL
Media aktivasi / starter dengan komposisi:
Bacto pepto 2%
Ekstrak ragi 0,5%
Glukosa 2%
Aquadest
d. Natrium alginate 8% 150 mL
e. Larutan CaCl2 2% dalam 4 labu Erlenmeyer 250 mL
f. Agar agar dan jeli 1:1 (2,5 gr yang masing masing 1,25 gram)
2.
a.
b.
c.
d.
e.
f.
g.
h.
i.

Alat
Erlenmeyer 250 mL
Spuit (perangkat suntik) steril / jarum ose
Pembakar spirtus
Penangas
Batang pengaduk
Hot Plate
Beaker Glass 100 ml
Beaker Glass 500 ml
Cawan Petri

B.
1.
a.
b.

Evaluasi Kinerja Sel Imobilisasi Dalam Reaktor Kolom


Bahan
Imobilisasi sel Acetobacter aceti.
500 mL media produksi asam asetat steril untuk uji mikroba Acetobacter aceti dengan
komposisi :
Ethanol 7-10%

[Type text]

[Type text]

Glukosa 2 %
NH4NO3 2 %
KH2PO4 0,1 %
MgSO4.7H2O 0,02 %
c. NaOH 0.5 N
d. Indikator PP
2. Alat
a. Hot plate
b. Magnetic stirrer
c. Pipet tetes
d. Indikator universal
e. Pipet ukur 5 ml
f. Buret 50 ml
g. Stopwatch
h. Penjepit kayu

[Type text]

[Type text]

a.
b.

III.2

Rancangan Kerja

A. Imobilisasi Sel
1. Penanaman bakteri pada media aktifasi
c.
d. Pipet 5 mL air garam steril
e.
f.
g. Masukkan dan kocok dalam biakan murni
h. Acetobacter aceti
i.
j.
k. Tuang air garam berisi bakateri dalam
l. 50 mL media aktifasi
m.
n. Inkubasi selama 4-6 jam pada suhu 30oC
o.
p.
1. Pembuatan Natrium Alginat
q.
r. Timbang natrium alginate sebanyak 12 gram
s.
t.
u.
v. Campurkan denganaquadest sebanyak 150 mL
w.
x.
y.
Aduk hingga mengental
z.
aa.
ab. Pasteurisasi pada suhu 80oC selama 10 menit
ac.
1. Pembuatan Beads
ad.
ae. Campurkan media aktivasi dan larutan natrium alginate
af.
ag.
ah. Suntikkan campuran kedalam larutan
ai. CaCl2 untuk membentuk beads
aj.
ak. Biarkan selama 1 jam lalu bilas
al. dengan aquadest
am.
an.
ao. Stabilkan pada larutan CaCl2 2% pada suhu 4oC
ap. selama 12 jam
[Type text]

[Type text]

aq.
ar. Karena kelompok kami mengalami kegagalan dalam pembuatan beads, maka media
di ganti menjadi agar agar dan jeli
as. Timbang agar agar dan jeli 1:1
at. (1,25 gr Jeli &1,25 gr agar agar) dengan konsentrasi 10%
au.
av.

Larutkan dalam aquadest 25 ml

aw.
ax. Panaskan dalam penangas air pada suhu 60 - 80 C
ay.
az.

Aduk, jangan biarkan agar agar mengeras

ba.
bb. Tunggu sampai suhu sedikit turun, tetap aduk
bc.
bd.
be. Campurkan bakteri yang sudah di tanam (25ml)
bf. ke dalam agar agar di cawan petri
bg.
bh.

Tunggu sampai terihat ada matriks / gumpalan


bi.

bj. Karena keterbatasan waktu dan perbedaan sedikit metoda, setelah 30 menit beads

di pindahkan kedalam Erlenmeyer dan di aduk menggunakan magnetic stirrer dengan


kecepatan sangat pelan. Setiap 10 menit di ambil samplenya sebanyak 5 ml untuk di
titrasi menggunakan indicator pp 2 tetes dan di titrasi menggunakan NaOH untuk
mengetahui pH asam asetat yang terbentuk.

[Type text]