Fatores que determinam a reteno em CG

A reteno de um composto em CG ser determinada pelo tempo que

essa substncia passa na fase mvel em relao fase estacionria. Em
CG, essa reteno ser afetada por volatilidade de um composto injetado,
temperatura da coluna e grau em que o composto interage com a fase
estacionria.
A volatilidade de um analito o principal fator que o leva a
permanecer na fase mvel durante uma separao por CG. Reduzir a
temperatura da coluna leva a uma reteno maior, porque isso faz os
analitos injetados serem menos volteis e passarem menos tempo na fase
mvel. Elevar a temperatura produz o efeito oposto, com os analitos
tornando-se mais volteis e se deslocando pela coluna mais depressa
medida que passam mais tempo na fase mvel. Uma medida alternativa de
reteno que revela uma pequena variao de acordo com a temperatura
o ndice de reteno de Kovts. Nesse ndice a reteno de um analito em
uma determinada coluna comparada com reteno observada mesma
temperatura e na mesma coluna para uma srie de n-alcanos usados neste
clculo como compostos de referncia. Outro fator o grau de interao de
uma substncia injetada com a fase estacionria.
Eficincia de coluna em CG
Uma vantagem de usar um gs como fase mvel que a CG produz
uma eficincia muito alta e picos estreitos. Picos acentuados e estreitos
facilitam a medio de pequenas quantidades de analito e permitem que a
CG separe um grande nmero de compostos em uma nica srie. A baixa
densidade dos gases implica que seus analitos podem mover-se depressa
por difuso. A ocorrncia de um alargamento de picos menor torna mais
fcil para a coluna discriminar entre o analito e os demais componentes de
amostra.
Baixa viscosidade outra caracterstica dos gases que promovem a
alta eficincia em CG. Quando a viscosidade diminui em uma fase mvel,
possvel usar uma coluna mais longa.
Cromatografia gasosa, fases mveis e mtodos de eluio
Uma diferena importante entre a CG e as outras tcnicas
cromatogrficas que uma fase mvel gasosa desempenhar poa ou
nenhuma funo na determinao da reteno de um composto. Em vez
disso, a reteno determinada pela volatilidade do composto, pela
temperatura da coluna e pelas interaes de substncias qumicas injetadas
com a fase estacionria. A fase mvel na CG chamada de gs de arraste.
O gs de arraste deve ter sempre um alto grau de pureza para evitar
contaminao ou danos coluna e ao sistema de CG. A fonte desse tipo de
gs tambm deve ser equipada com regulador de presso e controlador de
fluxo.
Se a temperatura aplicada for a mesma por toda a separao, isso se
dar o nome de mtodo isotrmico. Um mtodo isotrmico funciona bem se
a amostra simples ou se tem poucos compostos conhecidos. O ponto forte
dessa abordagem a sua simplicidade. A dificuldade de separar todos os
componentes de uma amostra complexa com uma resoluo adequada e
um perodo de tempo razovel conhecida como problema geral de eluio.
Uma forma de evitar com esse problema resulta em uma abordagem
chamada eluio por gradiente. Um mtodo comum que utilize eluio por
gradiente comear com as condies que permitam aos primeiros
compostos eludos permanecerem na coluna por mais tempo, contribuindo
para que sejam separados de modo mais eficiente.
Suportes e fases estacionrias em CG

As colunas de CG podem ser classificadas em duas grandes

categorias com base no tipo de suporte empregado: recheadas e tubulares
abertas. A coluna recheada preenchida com pequenas partculas de
suporte que atuam como um adsorvente ou so revestidas com a fase
estacionria desejada. Em CG, uma coluna recheada composta por um
tubo de vidro ou metal. Colunas recheadas de CG so teis quando uma
grande quantidade de amostra deve ser separada. Isso ocorre porque as
partculas de suporte recheadas tm uma extensa rea de superfcie que
pode ser usada com grandes quantidades de uma fase estacionria.
Uma coluna tubular aberta e um tubo que tem uma fase estacionria
que reveste sua superfcie interna ou esta anexada a ela. As colunas
tubulares abertas tendem a apresentar graus mais altos de eficincia e
resoluo, limite mais baixos de deteco e separaes mais rpidas do que
as recheadas. Existem trs tipos de coluna tubular aberta: a coluna tubular
aberta com parede revestida (so muito eficientes, mas tem pequena
capacidade de amostra), coluna tubular aberta revestida com suporte (fase
estacionria mais espessa do que a parede revestida, coluna menos
eficiente, maior capacidade de amostra) e a coluna tubular aberta camada
porosa (so as mais teis no mtodo de cromatografia gs - liquido, pois
no possuem revestimento adicional).
Fases estacionrias em CG
Cromatografia gs-slido (CGS) quando um adsorvente slido
usado como fase estacionaria em CG. Nessa tcnica a reteno ocorre por
meio da adsoro dos analitos superfcie do suporte.
Cromatografia gs - liquido aquele em que um revestimento
qumico, ou camada, colocado no suporte e usado como fase estacionria.
(CGL) Os lquidos tm altos pontos de ebulio e baixas volatilidades, o que
lhes permite permanecer dentro da coluna sob as temperaturas um tanto
que costumam serem aplicadas em CG em CG para a injeo Ed amostra e
eluio.
Detectores de CG e manipulao de amostra
O detector de condutividade trmica (TCD) serve para compostos
orgnicos e inorgnicos. Um YCD mede as capacidades que possuem o gs
de arraste de eluio e a mistura de analito de dissipar calor de um
filamento quente. O gs de arraste usado com um TCD deve ter uma
condutividade trmica to diferente quanto possvel da condutividade
trmica de quaisquer compostos a serem detectados.
O detector de ionizao de chama detecta compostos orgnicos
medindo sua capacidade de produzir ons quando queimados em uma
chama. A chama de FID se forma pela queima dos compostos eludos em
uma mistura de hidrognio e ar.
Detectores seletivos detector de nitrognio- fsforo (NPD) que
seletivo na determinao de compostos contendo nitrognio ou fsforo. O
NPD se assemelha a um detector de ionizao de chama j que se baseia na
medio de ons que so produzidos a partir de compostos de eluio.
O detector de captura de eltrons (ECD) detecta composto que
possuem tomos ou grupos eletronegativos em uma estrutura. Tambm
serve para detectar compostos aromticos polinucleares, anidridos e
compostos cabonlicos conjugados.
Cromatografia gasosa/espectrometria cromatografia gasosa
acoplada espectrometria de massa (CG-EM) de massa mede e identifica
analitos que saem de uma coluna de CG. Converte uma parte dos analitos
eludos em ons de fase gasosa que podem ser separados e detectados.
Injeo de amostra e pr-tratamento

Se uma substancia est presente como um gs a concentraes

moderadas a alta, deve ser possvel coletar a amostra diretamente e injetar
esse gs em um sistema de CG. A tcnica pode ser realizada fazendo a
amostra passar atravs de uma vlvula de vedao de gs. No lugar da
vlvula pode-se usar uma seringa com vedao para injetar um volume
conhecido de gs em um sistema de CG.
Amostras lquidas so bastante usadas em CG. Ao usar colunas
capazes de lidar com volumes de amostra um tanto grandes a injeo direta
usa uma micro seringa calibrada para aplicar o volume desejado de amostra
no sistema.
A anlise por headspace outra tcnica que torna possvel evitar a
introduo de gua e de compostos no volteis em um sistema de CG. A
anlise por headspace baseia-se no fato de que os analitos volteis em uma
amostra lquida ou slida tambm estaro presentes na fase gasosa que
localizada acima da amostra. Se uma parte desse vapor for coletada,
poder servir para medir analitos volteis, sem a interferncia de outros
compostos menos volteis que estavam na amostra original.
A CG pode ser adaptada parar lidar com substancias qumicas que
so adsorvidas ou retidas dentro de amostra slidas. Um modo comum de
lidar com esse tipo de anlise primeiro, extrair os compostos de interesse
do material slido. Sendo realizado por extrao liquido-liquido ou extrao
com fluido supercrtico. A seguir os analitos so colocados em um solvente
orgnico e tratados como amostras liquidas.