Anda di halaman 1dari 67

LAPORAN RESMI

PRAKTIKUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

Materi
SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

Oleh :
Kelompok

: 6 / Senin Pagi

Arisiani Melatika

NIM : 21030114120057

Dwi Purwati

NIM : 21030114120089

Ebersa Desry Surbakti

NIM : 21030114130207

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1


JURUSAN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2014

LAPORAN RESMI
PRAKTIKUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

Materi
SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

Oleh :
Kelompok

: 6 / Senin Pagi

Arisiani Melatika

NIM : 21030114120057

Dwi Purwati

NIM : 21030114120089

Ebersa Desry Surbakti

NIM : 21030114130207

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1


JURUSAN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2014

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
HALAMAN PENGESAHAN

1. Materi Praktikum

: Spektrofotometri Organik

2. Kelompok

: VI / Senin Pagi

3. Anggota
1. Nama Lengkap

: Arisiani Melatika

NIM

: 21030114120057

Jurusan

: Teknik Kimia

Universitas

: Universitas Diponegoro

2. Nama Lengkap

: Dwi Purwati

NIM

: 21030114120089

Jurusan

: Teknik Kimia

Universitas

: Universitas Diponegoro

3. Nama Lengkap

: Ebersa Desry Surbakti

NIM

: 21030114130207

Jurusan

: Teknik Kimia

Universitas

: Universitas Diponegoro

Telah disetujui dan disahkan oleh Asisten Pembimbing pada:


Hari

Tanggal

:
Semarang, Desember 2014
Asisten Laboratorium PDTK I

Gabriella Emma P.

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

ii

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
PRAKATA

Puji dan syukur kami panjatkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa oleh karena
berkat dan rahmat-Nya praktikan dapat menyelesaikan Laporan Resmi Praktikum
Dasar Teknik Kimia I. Oleh karena berkat dan rahmat-Nya pula praktikan dapat
menyelesaikan delapan materi praktikum dengan baik dan lancar tanpa suatu
hambatan yang berarti.
Pada kesempatan ini praktikan ingin mengucapkan terima kasih kepada dosen
yang membimbing selama proses praktikum dasar teknik kimia I dan kesediaan para
dosen untuk memberi pretest materi sebelum praktikum. Praktikan mengucapkan
terima kasih kepada bapak dan ibu laboran yang mendampingi kami di laboratorium.
Tak lupa praktikan juga mengucapkan terima kasih kepada para asisten laboratorium
yang dengan tulus dan setia mendampingi dan membantu praktikan dalam proses
praktikum dasar teknik kimia I dari awal hingga akhir.
Laporan resmi praktikum dasar teknik kimia ini berisi materi Spektrofotometri
Organik. Laporan ini berisi hasil dari praktikum yang praktikan lakukan di praktikum
dasar teknik kimia I.
Praktikan berharap semoga laporan ini dapat berkenan di hati pembaca dan
bisa bermanfaat bagi pembaca. Praktikan memohon maaf apabila ada salah kata
ataupun hal-hal yang kurang berkenan di hati pembaca.

Semarang, 18 Desember 2014

Penyusun

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

iii

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL
HALAMAN PENGESAHAN................................................................................... ii
PRAKATA ............................................................................................................... iii
DAFTAR ISI............................................................................................................. iv
DAFTAR TABEL.................................................................................................... vi
DAFTAR GAMBAR.............................................................................................. vii
INTISARI................................................................................................................... 1
SUMMARY.............................................................................................................. 2
BAB I PENDAHULUAN
I.1 Latar Belakang..........................................................................................3
I.2 Tujuan Percobaan..................................................................................... 3
I.3 Manfaat Percobaan................................................................................... 3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
II.1 Pengertian................................................................................................ 4
II.2 Teori Spektrum Sinar Tampak dan Warna Komplementer................... 5
II.3 Hukum Lambert Beer........................................................................... 5
II.4 Metode Analisis Spektrofotometri.......................................................... 6
II.5 Pengertian dan Aplikasi Antosianin dalam Industri............................... 7
BAB III METODE PERCOBAAN
III.1 Bahan dan Alat yang Digunakan
III.1.1 Bahan..................................................................................... 8
III.1.2 Alat......................................................................................... 8
III.2 Gambar Alat.......................................................................................... 8
III.3 Keterangan Alat.................................................................................... 9
III.4 Cara Kerja
III.4.1 Kalibrasi Alat......................................................................... 9
III.4.2 Menentukan Kadar Antosianin Total
dalam Larutan....................................................................... 10

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

iv

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

BAB IV HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN


IV.1 Hasil Perrcobaan.................................................................................. 12
IV.2 Pembahasan
IV.2.1 Fenomena Antosianin pada pH 1 dan
4,5........................................................................................ 13
IV.2.2 Aplikasi Antosianin dalam Industri........................................ 13
IV.2.3 Metode Pengambilan Antosianin............................................14
IV.2.4 Kesuaian Hukum Lambert-Beer............................................. 14
IV.2.5 Perbandingan Panjang Gelombang......................................... 15
IV.2.6 Perhitungan Konsentrasi......................................................... 16
IV.2.7 Perbandingan Konsentrasi dengan Referensi......................... 16
BAB V PENUTUP
V.1 Kesimpulan............................................................................................. 17
V.2 Saran....................................................................................................... 17
DAFTAR PUSTAKA.............................................................................................. 18
LAMPIRAN A
Lembar Perhitungan Spektrofotometri Organik.......................................... A-1
LAMPIRAN B
Lembar Kuantitas Reagen............................................................................ B-1
LAMPIRAN C
Laporan Sementara...................................................................................... C-1
LAMPIRAN D
Referensi Spektrofotometri Organik........................................................... D-1
LEMBAR ASISTENSI

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Jenis Spektrofotometer ............................................................................... 5


Tabel 2.2 Spektrum Sinar Tampak dan Warna Kompelementer ............................... 6
Tabel 4.1 Penentuan Panjang Gelombang Antosianin ............................................. 14
Tabel 4.2 Data Percobaan pada pH 1 ....................................................................... 14
Tabel 4.3 Data Percobaan pada pH 4,5 .................................................................... 15
Tabel 4.4 Konsentrasi Antosianin ............................................................................ 15

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

vi

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
DAFTAR GAMBAR

Gambar 3.1 Spektrofotometer OPTIMA SP 300 ................................................... 10


Gambar 3.2 Cuvet ..................................................................................................... 10
Gambar 3.3 Beaker Glass ......................................................................................... 10
Gambar 3.4 Pipet Ukur ............................................................................................. 10
Gambar 3.5 Tabung Reaksi ..................................................................................... 10
Gambar 3.6 Rak Tabung Reaksi ............................................................................... 10
Gambar 3.7 pH meter ............................................................................................... 10

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

vii

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
INTISARI

Spektrofotometri digunakan untuk menganalisa konsentrasi suatu zat di


dalam larutan berdasarkan absorbansi terhadap warna dari larutan pada panjang
gelombang tertentu. Tujuan percobaan ini adalah menentukan panjang gelombang
optimum antosianin, menentukan kurva hubungan konsentrasi antosianin vs
absorbansi pada panjang gelombang optimum dan menentukan konsentrasi
antosianin pada sampel metode spektrofotometri dengan spektrofotometer.
Spektrfotometri digunakan untuk ilmu yang mengacu pada absorbansi, emisi,
scattering dan cahaya dari molekul, ion, atom. Persentase transmitan adalah
pembanding antara intensitas cahaya yang keluar dari sampel terhadap intensitas
yang masuk. Sedangkan absorbansi merupakan besaran yang menyatakan
banyaknya intensitas cahaya yang diserap oleh suatu benda. Sebuah benda memiliki
sifat untuk mengabsorbansi dan menentukan warna tertentu. Hukum Lamber-Beer
menjadi dasar aspek kuantitatif spektrofotometri yang sama konsentrasi dihitung
berdasarkan persamaan. Tiga teknik yang bisa dipakai dalam analisis
spektrofotometri yaitu metode standar tunggal, kurva kalibrasi dan adisi standar.
Beberapa alat yang digunakan spektrofotometer optima sp 300, 2 buah
beaker glass 250 ml, 6 tabung reaksi beserta 1 rak tabung reaksi, 1 pipet volume
10cc, pH meter dan 4 buah beaker glass 50 cc. bahan yang digunakan yaitu air
demin, kcl 20 ml, Natrium Asetat 10 ml dan sampel. Cara kerjanya meliputi kalibrasi
alat kemudian menentukan kadar antosianin total dalam larutan.
Pembahasan yang dibahas yaitu mengenai fenomena pengaturan pH = 1 dan
pH = 4,5, aplikasi antosianin dalam industry, metode pengambilan antosianin,
perbandingan panjang gelombang optimum dan konsentrasi dengan referensi.
Kesimpulan dan saran yang bisa diambil yaitu aplikasi antosianin dalam
industri yaitu ekstraksi pewarna alami dari buah arben dan efektivitas penggunaan
jenis pelarut dan asam dalam proses ekstraksi. Saran yang bisa diambil yaitu
membuat ekstrak/teh rosella harus dengan perbandingan yang tepat agar larutan
tidak terlalu encer atau terlalu pekat.

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
SUMMARY

Spectrophotometry is used to analyze the concentration of a substance in a


solution based on the absorbance of the color of the solution at a specific wavelength.
The purpose of this experiment is to determine the optimum wavelength anthocyanin,
determine the relationship curve anthocyanin concentration vs. absorbance at a
wavelength of optimum and determine the concentration of anthocyanins in the
samples spectrophotometric method with a spectrophotometer.
Spectrophotometer is used for science that refers to the absorbance, emission,
and scattering of light from molecules, ions, atoms. The percentage transmittance is
a comparison between the intensity of light emitted from the sample to the intensity
of the incoming. While the magnitude of absorbance intensity that states the amount
of light absorbed by an object. An object has properties for mengabsorbansi and
determine a specific color. Lamber-Beer law became the basis of the quantitative
aspects of the same spectrophotometric concentration was calculated based on the
equation. Three techniques that can be used in the spectrophotometric analysis is a
single standard method, the calibration curve and standard addition.
Some of the tools used spectrophotometer optima sp 300, 2 pieces 250 ml
glass beaker, 6 test tubes along with one test tube rack, 1 pipette volume of 10cc, pH
meters and 4 pieces of 50 cc glass beaker. materials used are water demin, pic 20 ml,
10 ml of Sodium Acetate and samples. How it works includes calibration tool then
determines the total anthocyanin content in the solution.
Discussion discussed, namely the phenomenon of adjusting the pH = 1 and
pH = 4.5, the application of anthocyanins in the industry, anthocyanin retrieval
methods, comparison of the optimum wavelength and concentration by reference.
Conclusions and suggestions that could be taken, namely the application of
anthocyanins in the industrial extraction of natural dyes from fruit Arben and
effectiveness of the use of the type of solvent and acid in the extraction process.
Suggestions that can be taken is to make extracts / roselle tea proper comparison
should be with that solution is not too thin or too thick..

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
BAB I
PENDAHULUAN

I.1 Latar Belakang


Spektofotometri dapat digunakan untuk menganalisa konsentrasi suatu zat di
dalam larutan berdasarkan absorbansi terhadap warna dari larutan pada panjang
gelombang tertentu. Metode spektofotometri melakukan absorbansi larutan standar
pada berbagai konsentrasi. Larutan standar terdiriri dari berbagai tingkat rendah
sampai konsentrasi tinggi. Keuntungan utama dalam pemilihan metode ini adalah
metode ini merupakan metode yang sangat sederhana untuk menetapkan kuantitas
yang sangat kecil.
Aplikasi spektofotometri salah satunya adalah menentukan panjang
gelombang optimum antosianin, menentukan kurva hubungan konsentrasi antosianin
vs absorbansi pada panjang gelombang optimum, dan menentukan konsentrasi
antosianin pada sampel metode spektrofotometri dengan spektrofotometer.

I.2 Tujuan Percobaan


1. Menentukan

panjang

gelombang

optimum

antosianin

metode

spektrofotometri dengan spektrofotometer


2. Menentukan hubungan konsentrasi antosianin vs absorbansi pada panjang
gelombang optimumnya metode spektrofotometri dengan spektrofotometer.
3. Menentukan konsentrasi antosianin pada sampel metode spektrofotometri
dengan spektrofotometer

I.3 Manfaat Percobaan


1. Mampu menentukan panjang gelombang optimmum antosianin metode
spektrofotometri dengan spektrofotometer

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
2. Mampu menentukan kurva hubungan kensentrasi antosianin vs absorbansi
pada panjang gelombang optimumnya metode spektrofotometri dengan
spektrofotometer
3. Mampu menentukan kurva konsentrasi antosianin pada sampel metode
spektrofotometri dengan spektrofotomer

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

II.1 Pengertian
Spektrofotometri adalah kata yang digunakan untuk ilmu yang mengacu pada
adsorbsi, emisi, scatering, dan cahaya dari molekul, ion, atom.spektrofotometri
(teknik spektroscopy) merupakan metode analisa untuk menentukan identitas suatu
komponen/konsentrasi dalam larutan yang didasarkan pada pengukuran serapan sinar
monokromatis di suatu larutan berwarna ataupun tidak berwarna. Jenis
spektrodotometer diklasifikasikan sesuai tabel 2.1.
Tabel 2.1 Jenis Spektrofotometer
NO

Jenis Sinar Panjang

Panjang Gelombang

Transisi

UV

10-180-350 nm

Elektronik (ev)

Visibel

350-700 nm

Elektronik (ev)

770-2500 nm

Vibrasi Molekul

2,5-50 m

Vibrasi Molekul

50-1000 m

Vibrasi Molekul

IR

Persen Transmitan adalah pembanding antara intensitas cahaya yang keluar


dari samel terhadap intensitas yang masuk, dinyatakan dengan rumus :
% T = I / ox 100%..........................................................................

(1)

Sedang absorbansi merupakan besaran yang menyatakan banyaknya


intensitas cahaya yang diserap oleh suatu benda dan dinyatakan dengan rumus
A = log 1/T
= - log (I/Io)
= 2 log % T.............................................................................. (2)

II.2 Teori Spektrum Sinar Tampak Dan Warna Komplementer

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
Sebuah benda memiliki sifat untuk mengabsaorbsi dan memantulkan warna

tertentu.warna yang dipantulkan oleh benda ke mata disebut warna komplementer,


sedangkan warna yang diserap oleh suatu benda disebut warna terarbsorbsi. Berikut
hubungan warna komplementer dan warna terarbsorbsi dapat dilihat pada tabel 2.2
Tabel 2.2 Spektrum Sinar Tampak dan Warna Komplementer (Vogel 1989)
Panjang Gelombang (cm)

Warna Terarbsorbsi

Warna Komplementer (terlihat)

400-435

Violet

Kuning-Hijau

435-800

Biru

Kuning

480-490

Hijau-Biru

Oranye

490-500

Biru-Hijau

Merah

500-560

Hijau

Ungu

560-580

Kuning-Hijau

Violet

580-595

Kuning

Biru

595-610

Oranye

Hijau-Biru

610-750

Merah

Biru-Hijau

II.3 Hukum Lambert Beer


Menurut hukum Lambert, serapan berbanding lurus terhadap ketebalan sel (b)
yang disinari, dengan bertambahnya sel, maka serapan akan bertambah
A = k.b............................................................................................ (3)
Menurut Beer, yang berlaku untuk radiasi monokromatis dalam larutan yang
sangat encer , serapan berbanding lurus dengan konsentrasi
A = k.c............................................................................................

(4)

Jika Konsentrasi bertambah, jumlah molekul yang dilalui berkas sinar akan
bertambah, sehingga serapan juga bertambah. Kedua persamaan ini digabungkan
dalam Hukum Lambert Beer pada persamaan (3),maka diperoleh bahwa serapan
berbanding lurus dengan konsentrasi dan ketebalan sel yang dapat ditulis dengan
persamaan
A = k.c.b.........................................................................................

(5)

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
Umumnya digunakan dua satuan C (konsentrasi zat yang menyerap) yang

berlainan, yaitu gram per liter atau mol per liter. Nilai tetapan (k) dalam hukum
Lambert-Beer tergantung pada sistem konsentrasi mana yang digunakan. Bila c
dalam gram per liter, tetapan disebut absortivitas (a) dan bila dalam mol per liter,
tetapan tersebut adalah absortivitas molar (). Sehingga, hukum Lambert-Beer dapat
dinyatakan dengan rumus:
A = a.b.c.........................................................................................

(6)

Atau
A = .b.c.........................................................................................
Dengan

(7)

A = absorbans
a = absortivitas
b = ketebalan sel
c = konsentrasi
= absortivitas molar

Hukum Lambert-Beer menjadi aspek dasar kuantitatif spektrofotometri yang


mana konsentrasi dapat dihitung berdasarkan persamaan (6) diatas. Absortivitas (a)
merupakan konstanta yang tidak tergantung pada konsentrasi, tebal kuvet, dan
intensitas radiasi yang mengenai larutan sampel. Absortivitas tergantung pada suhu,
pelarut, struktur molekul, dan panjang gelombang radiasi. (Day and Underwood,
1999; Rohman, 2007)

II.4 Metode Analisis Spektrofotometri


Ada tiga teknik yang biasa dipakai dalam analisis secara spektrofotometri.
Ketiga teknik tersebut adalah metode standar tunggal, metode kurva kalibrasi,
metode adisi standar. Pada praktikum ini, metode yang digunakan adalah metode
Kurva Kalibrasi.
Metode Kurva Kalibrasi
Dalam metode ini dibuat suatu seri larutan standar dengan berbagai
konsentrasi dan aborbansi dari larutan tersebut diukur dengan AAS. Langkah
selanjutnya adalah membuat grafik antara konsentrasi (c) dengan absorbansi (A)

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

yang akan merupakan garis lurus melewati titik nol dengan slope = .b atau slope =
a.b. konsentrasi larutan sampel dapat dicari setelah absorbansi larutan sampel diukur
dan diintrapolasi ke dalam kurva kalibrasi atau dimasukkan ke dalam persamaan
garis lurus yang diperoleh dengan menggunakan program regresi linear pada kurva
kalibrasi.

II.5 Pengertian dan Aplikasi Antosianin dalam Industri.


Antosianin merupakan zat warna yang berperan memberikan warna merah
berpotensi menjadi pewarna alami untuk pangan dan dapat dijadikan alternatif
pengganti sintetis yang lebih aman bagi kesehatan. Antosianin merupakan pigmen
berwarna merah, ungu, dan biru yang biasa terdapat pada jenis tanaman. Antosianin
dapat menggantikan penggunaan pearna sintetik rhodamin B, carmoisin, dan
amaranth sebagai pewarna merah pada produk pangan. An-tosianin adalah suatu
kelas dari senyawa fl avanoid yang secara luas terbagi dalam polifenol tumbuhan.
Flavanol, flavon-3-ol, fl avanon, dan fl avanol adalah kelas tambahan fl avanoid yang
berada dalam oksidasi dari antosianin. Antosianin stabil pada Ph 3,5 dan suhu 50 ,
mempunyai berat molekul 207,08 g/mol dan rumus molekul

O.

Antosianin merupakan pewarna alami yang tersebar luas dalam tumbuhan


( bunga, buah-buahan, sayuran, dan ubi-ubian ). Antosianin sebagai pewarna alami
dapat diklasifikasikan pada minuman ringan, permen, dan produk berbasis susu
seperti yoghurt dan keju ( Anonymous, 2004 ). Menurut Maya dan Tu (1994)
antosianin cocok untuk mewarnai makanan dengan pH asam, hal ini terkait dengan
kestabilan antosianin dalam kondisi asam. Hal ekstraksi (antosianin) angat cocok
untuk diklasifikasikan pada bahan pangan yang berlabel food grade dan untuk
industri farmasi.

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
BAB III
METODOLOGI PERCOBAAAN

III.1 Bahan dan Alat yang Digunakan


III.1.1 Bahan
1. Air demin secukupnya
2. KCL 20 ml
3. Natrium Asetat
4. Sampel

III.1.2 Alat
1. Spektrofotometer Optima sp-300 beserta 2 buah cuvet
2. 12 buah beaker glass 250 ml
3. 6 tabung reaksi beserta 1 rak tabung reaksi
4. 1 pipet ukur 10 cc
5. pH meter
6. 4 buah beaker glass 50 cc

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

III.2 Gambar Alat

Gambar 3.1
Spektrofotometer Optima
Sp-300

Gambar 3.2
Cuvet

Gambar 3.3
Beaker Glass

Gambar 3.4
Pipet Ukur

Gambar 3.5
Tabung Reaksi

Gambar 3.6
Rak Tabung Reaksi

Gambar 3.7
Ph Meter

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

10

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

III.3 Keterangan Alat


1. Spektrofotometer

: sebagai alat yang digunakan untuk mengukur


absorbansi dengan cara melewatkan cahaya dengan
panjang gelombang tertentu pada suatu objek kaca
atau kuarsa yang disebut kuvet

2. Cuvet

: wadah larutan yang dimasukkan ke dalam


spektrofotometer

3. Beaker Glass

: untuk menampung dan mencampur larutan

4. Pipet ukur

: untuk mengambil larutan dengan ketepatan

5. Tabung reaksi

: untuk mencampurkan larutan dengan zat/larutan lain

6. Rak tabung reaksi

: rak tempat menaruh tabung reaksi

7. pH meter

: untuk mengukur derajat pH suatu larutan

III.4 Cara Kerja


III.4.1 Kalibrasi Alat
1. OPTIMA SP-300 dihubungkan dengan sumber listrik
2. OPTIMA SP-300 dihubungkan dengan tombol ON/OFF dibelakang mesin
dan memanaskannya 5-10 menit
3. Dengan tombol 5, mode pembacaan transmitansi (T) diatur
4. Dengan tombol 7, skala diatur sampai pembacaan absorban tak berhingga
(transmitan = 0)
5. Penentuan panjang gelombang ( ) pada 480 nm dengan tombol 2
6. Pelarut murni aquadest dimasukkan dalam cuvet dan ditempatkan dalam alat
1
7. Tombol 6 diatur sampai skala menunjukkan absorbansi = 0 (transmitan =
100%)
8. OPTIMA SP-300 siap dipakai

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

11

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
9. Cuvet diisi dengan larutan sampel

bagian, bagian luar cuvet dibersihkan,

kemudiandimasukkan ke dalam tempat sampel, dan ditutup kembali,


pembacaan skala transmitan dan absorbans dihitung, A = 2 log %T
10. Panjang gelombang dinaikkan 10 nm dengan menggunakan tombol (2),
diulangi langkah 6 sampai 9
11. Dibuat kurva hubungan antara absorbansi versus panjang gelombang,
kemudian ditentukan nilai panjang gelombang optimum untuk jenis larutan
target

III.4.2 Menentukan kadar anotsianin total dalam larutan


1. Dibuat larutan KCl 0,025 M sebagai larutan buffer pH 1. Kemudian diukur
pHnya dan diatur pH supaya sama dengan 1 dengan larutan HCl
2. Dibuat larutan Natrium Asetat (

) 0,4 M.kemudian diukur

pHnya dan diatur pHnya supaya larutan mempunyai Ph 4,5 dengan


menggunakan larutan HCl
3. Diambil 1 buah beaker glass 50 cc dan diisi dengan larutan no.2 sebanyak 5
ml dengan pipet ukur. pH larutan dibuat sama dengan 1 dengan
menambahkan larutan buffer KCl dengan pipet ukur dan dihitung berapa
jumlah volume yang telah ditambahkan sehingga pH = 1. Hal serupa
dilakukan untuk sampel no. 3,4,5, dan 6
4. Diatur panjang gelombang pada 700 nm. Kemudian dilakukan kalibrasi alat
langkah 1-6 (dilakuka untuk setiap pergantian panjang gelombang). Setelah
itu, dimasukkan larutan no.2 dengan pH = 1ke dalam cuvet hingga

bagian.

Catat % transmitan dan dihitung absorbansinya, begitu juga untuk sampel


no.3,4,5, dan 6
5. Diatur panjang gelombang pada 700 nm. Kemudian dilakukan kalibrasi alat
langkah 1-6 (dilakukan untuk setiap pergantian panjang gelombang). Setelah
itu, dimasukkan larutan no.2 dengan pH = 1 ke dalam cuvet hingga

bagian.

Catat % transmitan dan dihitung absorbansinya, begitu juga untuk sampel


no.3,4,5, dan 6
6. Diulangi langkah 1-5 dengan membuat pH larutan sama dengan 4,5 dengan
menambahkan larutan buffer Na Asetat

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

12

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
7. Dihitung konsentrasi Antosianin dengan rumus :

C=

...................................................................

(8)

Dengan = C = konsentrasi antosianin (mg/l)


A

= (A 520 A 700) pH 1 (A 520 A 700) pH 4,5

MW = bobot molekul = 449,2 gram/mol


DF = faktor pengenceran
E

= 26900 L/mol cm

1000
b

= konversi dari gram ke mgr

= panjang sel atau cuvet (cm)

8. Dibuat persamaan Beer untuk konsentrasi antosianin, dengan persamaan :

A = k.c............................................................................................

(9)

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

13

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

BAB IV
HASIL DATA PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN

IV.1. Hasil Data Percobaan


IV.1 Penentuan panjang gelombang optimum antosianin
Tabel 4.1.1. Menentukan Optimum
No.

(nm)

%T

1.

480

3,1

1,508

2.

490

2,4

1,619

3.

500

1,8

1,745

4.

510

1,6

1,96

5.

520

1,5

1,824

6.

530

1,6

1,796

7.

540

1,9

1,721

8.

550

3,9

1,409

9.

560

9,6

1,018

Tabel 4.1.2. Larutan Rosella basis 10 ml pada optimum


No.

V antosianin V aquadest

%T

1.

0 ml

10 ml

100

2.

2 ml

8 ml

48,2

0,317

4,8353

3.

4 ml

6 ml

12,1

0,917

11,01

4.

6 ml

4 ml

4,2

1,376

9,783

5.

8 ml

2 ml

2,3

1,638

20,574

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

14

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
Tabel 4.1.3. Faktor Pengenceran Larutan Rosella
No.

pH = 1

pH = 2

DF

V1

V2

DF

V1

V2

DF

Rata-rata

1.

5 ml

5 ml

2.

20

5 ml

6 ml

1,2

5ml

5,4 ml 1,08

1,14

3.

40

5 ml

6,4 ml 1,28

5 ml

5,2 ml 1,04

1,16

4.

60

5 ml

8,8 ml 1,26

5 ml

5,2 ml 1,04

1,4

5.

80

5 ml

8 ml

5 ml

7 ml

1,5

1,6

1,4

Tabel 4.1.4. Pengukuran Absorbansi Pada = 520 nm dan = 700 nm


pH = 1
No.

pH = 4,5

= 520nm = 700nm

= 520nm = 700nm

rata

%T

%T

%T

%T

A -rata

1.

2.

20

44,6

0,351 94,6

0,024 78

0,108 92,9

0,319 0,1287

3.

40

16

0,796 94,2

0,026 58,3

0,234 92,8

0,032 0,2721

4.

60

11,9

0,924 93,3

0,030 30,5

0,515 91,3

0,039 0,3771

5.

80

1,222 92,7

0,033 39,0

0,409 909

0,041 0,4269

IV.2. Pembahasan
IV.2.1. Fenomena Antosianin pada pH = 1 dan pH = 4,5
Penetapan antosianin dilakukan dengan metode perbedaan pH yaitu
pH = 1 dan pH = 4,5. Pada pH = 1, antosianin berbentuk senyawa oxonium,
keadaan semakin asam apalagi mendekati pH = 1 akan menyebabkan
banyaknya pigmen antosianin berada dalam bentuk kation flavilium atau
oxinum yang berwarna dan pengukuran absorbansi akan menunjukkan
jumlah antosianin yang lebih besar. Pada pH = 4,5 yakni pada asam lemah,

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

15

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
kation flavilium berubah bentuk yang lebih stabil bermiketal yang tak
berwarna dan bentuk kalkon. Pada percobaan pH = 4,5 membuat larutan
berwarna tidak sepekat pH = 1 karena telah terjadi degradasi warna, sebab
antosianin lebih stabil dalam asam daripada alkali atau netral.
( hayati, E.k, 2012 )

IV.2.2. Aplikasi Antosianin dalam Industri


1. Campuran Antosianin dalam produk obat
Sesuai namanya, antosianin memberikan warna pada bunga, buah dan daun
tumbuhan hijau dan telah banyak digunakan sebagai pewarna alami. Selain
berfungsi sebagai pewarna alami, antosianin juga dimanfaatkan sebagai
campuran dalam pembuatan obat karena manfaatnya sebagai antioksidan.
Antioksidan adalah zat penghancur atau penangkal radikal bebas. Fungsi
antosianin sebagai antioksidan di dalam tubuh sehingga dapat mencegah
terjadinya auterisklerosis. Penyakit penyumbatan pembuluh darah. Antosianin
bekerja menghambat proses aterogenesis dengan mengoksidasi lemak jahat
dalam tubuh yaitu hipoprotein densitas rendah. Oleh karena manfaat sebagai
oksidan maka digunakan sebagai campuran dalam pembuatan obat.
( Loretha, 2012 )
IV.2.3. Metode Pengambilan Antosianin
1. Metode Ekstraksi
Ekstraksi merupakan dilakukan dengan mengontakkan padatan dengan
pelarut sehingga diperoleh larutan yang diinginkan yang kemudian
dipisahkan dari padatan sisanya. Pada saat pengontakkan terjadi, mekanisme
yang berlangsung adalah peristiwa pelarutan dan difusi. Pelarutan merupakan
peristiwa penguraian suatu molekul zat menjadi komponennya, baik berupa
molekul-molekul atom maupun ion-ion, karena pengaruh pelarut cair yang
melingkupinya.

Partikel-partikel

yang

terlarutkan

ini

berkumpul

di

permukaan antara (interface) padatan dan terlarut. Bila peristiwa pelarutan


masih berlangsung, maka terjadi difusi partikel-partikel zat terlarut dari
lapisan antara fase menembus lapisan permukaan pelarut dan masuk ke dalam
badan pelarut dimana zat terdistribusikan merata. Jadi difusi terjadi di fase

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

16

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
padat diikuti fase cair. Peristiwa ini terus berlangsung sehingga keadaan
setimbang tercapai.
(Bird et al, 1980)
2. Metode Evaporasi
Evaporasi adalah menguapkan cairan yang ada pada larutan, sehingga
diperoleh suatu larutan yang lebih pekat (thick liquor). Alat untuk melakukan
evaporasi adalah evaporator. Evaporator merupakan suatu alat yang
digunakan untuk mengevaporasi sebagian atau seluruh pelarut dari suatu
larutan. Hasilanya biasanya berupa zat padat atau konsentrat dari larutan. Jika
hasilnya zat padat panas yang dibutuhkan untuk penguapan larutan harus di
supply ke suspensi zat padat pada larutan. Jika yidak alat tersebut
diklasifikasikan sebagai pengering.
(Rosdiana dan Stevanus, 2009)

IV.2.4. Kesesuaian Hukum Lambert-Beer dengan Persamaan Absorbansi dan


Konsentrasi
Hukum lambert-beer menyatakan bahwa semakin besar konsentrasi larutan,
maka nilai absorbansinya semakin besar. Hasil percobaan kelompok kami sesuai
dengan hukum lambert-beer yaitu semakin besar absorbansi semakin besar pula
konsentrasi tersebut. Artinya absorbansi dengan konsentrasi berbanding lurus.
Dengan persamaan :
A = . b. c

atau

A= a.b.c

Semakin besar konsentrasi makan semakin besar pula molekul-molekul tiap


volumenya sehingga akan menghalangi cahaya yang lewat dan akan menggangu
dalam hal penyerapan larutan oleh cahaya, akibatnya transmitannya kecil dan
absorbansinya besar.
(Anonim, 2013)

IV.2.5. Perbandingan Panjang Gelombang Optimum Antosianin yang


ditemukan Praktikum dengan Refensi
Berdasarkan hasil percobaan yang telah kami lakukan, panjang
gelombang optimum antosianin adalah 520 nm. Karena pada saat panjang
gelombang 520 nm absorbansinya menunjukkan nilai yang paling besar.

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

17

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
Sedangkan berdasarkan panjang gelombang optimum yang terdapat pada
referensi yaitu sekitar 512 516 nm. Ini tidak terlalu jauh dengan panjang
gelombang optimum yang ditemukan oleh praktikan yang pada = 520nm.
( Hermawan, 2012 )

IV.2.6. Perhitungan Konsentrasi


Diketahui
A pada 35% = 0,8015
A pada 45% = 0,950
Persamaan y = 0,0399x + 0,0439
A. Konsentrasi pada 35%
y

0,0399x + 0,0439

0,815 =

0,0399x + 0,0439

0,7711 =

0,0399x

19,32 ppm

B. Konsentrasi pada 45%


y

0,0399x + 0,0439

0,950

0,0399x + 0,0439

0,9061 =

0,0399x

22,709 ppm

IV.2.7. Perbandingan Konsentrasi dengan Konsentrasi Referensi


Konsentrasi yang kami dapat dengan persen rosella 35% dab 45% adalah
19,32 ppm dan 22,709 ppm. Sedangkan konsentrasi pada referensi yaitu 75,164 ppm.

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

18

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

Ini sangat jauh berbeda karena perbedaan perlakuan pada treatment sampelnya. Pada
referensi dipanaskan 300C sedangkan pada percobaan yang dilakukan tidak
dipanaskan.

IV.2.8. Grafik Percobaan

Absorbansi

2
1,5
1
0,5
0
460

480

500

520

540

560

580

Panjang Gelombang

Grafik 4.2.1. Hubungan Panjang Gelombang dengan Absorbansi


1
y = 0,0399x + 0,0439
R = 0,9707

Absorbansi

0,8
0,6
0,4
0,2
0
0

10

15

20

25

Konsentrasi (x)

Grafik 4.2.2. Hubungan Konsentrasi dengan Absorbansi

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

19

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
BAB V
PENUTUP

V.1. Kesimpulan
1. Fenomena antosianin pada pH=1 dan pH=4,5 antosianin akan lebih stabil
dalam asam.
2. Aplikasi antosianin pada industri yaitu campuran antosianin sebagai bahan
pembuatan obat.
3. Metode pengambilan antosianin ada dua metode yaitu metode ektraksi dan
evaporasi.
4. Hukum Lambert-Beer menyatakan bahwa absorbansi berbanding lurus
dengan konsentrasi
5. Panjang gelombang optimum dan hasil percobaan dengan referensi tidak jauh
berbeda yaotu 520 nm untuk hasil percobaan dan 512-516 nm dari referensi.
6. Konsentrasi antosianin yang ditemukan praktikan yaitu 19,32 ppm pada 35%
antosianin dan 22, 709 ppm pada 45% sedangkan konsentrasi referensi yaitu
75,164 ppm.

V.2. Saran
1. Mencuci kuvet terlebih dahulu agar cahaya yang diserap bisa optimal
2. Dalam pengaturan pH harus tepat, karena kalau tidak tepat akan menganggu
transmitan yang dihasilkan.
3. Membuat ekstrak/the rosella harus dengan perbandingan yang tepat agar tidak
terlalu pekat atau tidak terlalu encer.
4. Dalam kalibrasi alat menggunakan aquades harus tepat dan dalam pergantian
aquadest dengan sampel juga harus dilakukan dengan cepat agar tidak ada
cahaya yang masuk.
5. Semua alat-alat harus dicuci sebelum atau sesudah dipakai agar tidak terjadi
kontaminasi dengan bahan-bahan yang lain.

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

20

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
DAFTAR PUSTAKA

Anonim. 2013. Hukum Lambert Beer Universitas Sumatera Utara.


Anonim. 2013. Spektrofotometri serapan UV Vis .
Barners, K.W., dkk. 2005. Determinan Ofatalmorometric Antosianin Pigmen
Content of Fruit Juice , Beverage, Natural Colorants, and Louse bythe pH
Differential Groggins, pH.1950. unitprosesinorganiksyntesis . 5 ed. PP. 700 783
Mc. Graw Hillbook Company. Inc, New York.
Handayani, Prima Astuti dan Asri Rahmawati. 2012. Pemanfaatan Kulit Buah
Naga (Dragon Fruit) Sebagai Pewarna Alami Makanan Pengganti Pewarna
Sintetis Program Studi Teknik Kimia, Fakultas Teknik, Universitas Negeri
Semarang.
J. Pharm. 2006. Solubilizationandquantificationolycopeneinaqueousmediathe Form
of Cyclodextrin Binari System. Diakses tanggal 4 Mei 2013.
Kerr, R.W., 1950. Chemystri and Industri of Starch, 2 & d, PP 375 403.
Academic Press, Inc, Newyork.
Kusumawati, Dewi Ramadhani. 2010. Spektrofotometri Serapan Atom (SSA)
Laboratorium Teknik Analisis Radiometri dan Spektrofotometri Serapan
Atom Pusat Teknologi Nuklir Bahan dan Radiometri.
Method Collaboration Study, Journal of AOA cinternational, vol 85, rb.5 PP 1269
1278.
Munkramin, Baso. 2012. Spektrofotometri Absorbansi dan Konsentrasi (Hukum
Lambert Beer). Diakses tanggal 27 April 2013.
Penelope, Perkins Veanic. 2002. Composition of Orange, Yellow, and Red Fleshes
Watermelon
Vogel, 1989. Textbook of Quantitative Chemical Analysis. Longman Scientific and
Technical. PP 645 675, Great Britain.
Woodman, A. 1941 . Food Analysis . 4 ed. PP 246 261, Mc Graw Hill Book
Company Inc. New York.
Yudiono, Kukuk. 2011. Ekstraksi Antosianin dari Ubi Jalar Ungu (Ipomea batalas
cv. Ayamurasaki) dengan Teknik Ekstraksi Subcritical Water . Jurusan
Teknologi Hail Pertanian Universitas Katolik Widya Karya Malang.

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA I

21

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
LEMBAR PERHITUNGAN

1. Menentukan panjang gelombang optimum antosianin larutan rosella


Tabel.4.2.1. penentuan panjang gelombang optimum antosianin larutan
rosella
Panjang Gelombang (nm)

%T

Absorbansi

480

3,1

1,508

490

2,4

1,619

500

1,8

1,745

510

1,6

1,796

520

1,5

1,824

530

1,6

1,796

540

1,9

1,721

550

3,9

1,409

560

9,6

1,018

Berdasarkan tabel 1, untuk menetukan panjang gelombang optimum dapat


dilihat dari nilai absorbansi yang paling besar. Nilai absorbansi yang paling
besar adalah 1,824 jatuh pada panjang gelombang 520 nm. jadi, panjang
gelombang optimum antosianin dalam larutan rosella adalah 520 nm.

2. Menentukan grafik hubungan konsentrasi antosianin vs absorbansi pada

Absorbansi

panjang gelombang optimum


1
0,9
0,8
0,7
0,6
0,5
0,4
0,3
0,2
0,1
0

y = 0,0399x + 0,0439
R = 0,9707

10

15

20

25

Konsentrasi (x)

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

A-1

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

Tabel.4.2.2. Larutan Antosianin basis 10 ml


No.

V antosianin

V aquades

%T

10

100

48,2

0,317

1,341

12,1

0,917

3,947

4,2

1,376

7,148

2,3

1,638

9,117

Tabel.4.2.3. Data Percobaan pada pH 1


Volume (ml)

Volume (ml)

No.
Sampel

Sampel

Aquadest Awal Akhir

%T
DF

Absorbansi

520

700

nm

nm

=520

=700

nm

nm

0,351

0,024

10

1,2

6,4

1,28

94,2

0,796

0,026

8,8

1,76 11,9 93,3

0,924

0,030

1,6

1,222

0,033

44,6 94,6
16

92,7

Tabel 4.2.4. Data Percobaan Pada pH 4,5


Volume (ml)

Volume (ml)

No.
Sampel Sampel Aquadest Awal Akhir

%T
DF

Absorbansi

520

700

nm

nm

=520

=700

nm

nm

100

5,4

1,08

78

92,9

0,108

0,035

5,2

1,04 58,3 92,8

0,234

0,0324

5,2

1,04 30,5 91,3

0,515

0,0395

1,4

0,409

0,0414

79,3 90,9

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

A-2

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
Menghitung A
A = (A 520 A 700) pH 1 (A 520 A 700) pH 4,5
A1 = (0,351 0,024) (0,108 0,035) = 0,254
A2 = (0,796 0,026) (0,234 0,0324) = 0,5684
A3 = (0,924 0,030) (0,515 0,0395) = 0,4185
A4 = (1,222 0,033) (0,409 0,0414) = 0,8214
Menghitung konsentrasi antosianin

Menghitung konsentrasi pada 35% dan 45%


a. Absorbansi pada 35% adalah 0,815
y = 0,0399x + 0,0439
0,815=0,0399x+0,0439
x= 19,32 ppm

b. Absorbansi pada 45% adalah 0,950


y = 0,0399x + 0,0439
0,950=0,0399x+0,0439
x= 22,709 ppm

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

A-3

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

LAPORAN SEMENTARA
PRAKTIKUM DASAR TEKNIK KIMIA 1
Materi :
SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

Oleh :
Kelompok

: 6 / Senin Pagi

Arisiani Melatika

NIM : 21030114120057

Dwi Purwati

NIM : 21030114120089

Ebersa Desry Surbakti

NIM : 21030114130207

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1


JURUSAN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2014

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

B-1

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

I. TUJUAN PERCOBAAN
1. Menetukan panjang gelombang optimum Antosianin metode spektrofotometri
dengan spektrofotometer
2. Menentukan panjang gelombang konsentrasi antosianin vs absorbansi pada
panjang gelombang optimumnya metode spektrofotometri dengan
spektrofotometer
3. Menentukan konsentrasi pada sampel metode spektrofotometri dengan
spektrofotometer
II. PERCOBAAN
II.1 Bahan Yang Digunakan
1. Air denim secukupnya
2. KCl 20 ml
3. Natrium Asetat
4. Sampel ( rebusan Rosella)
II.2 Alat Yang Dipakai
1. Spektrofotometer OPTIMA SP-300 beseta 2 buah cuvet
2. 6 buah Beaker Glass 250 ml
3. 6 Tabung reaksi beserta 1 rak tabung reaksi
4. 1 pipet ukur 10 cc
5. pH meter
6. 4 buah Beaker Glass 50 cc
7. 2 buah Cuvet
2.3 Cara Kerja
A. Kalibrasi Alat
1. OPTIMA SP-300 dihubungkan dengan sumber listrik
2. OPTIMA SP-300 dihubungkan dengan tombol ON/OFF dibelakang mesin dan
memanaskannya 5-10 menit
3. Dengan tombol 5, mode pembacaan transmitansi (T) diatur
4. Dengan tombol 7, skala diatur sampai pembacaan absorban tak berhingga
(transmitan = 0)
5. Penentuan panjang gelombang ( ) pada 480 nm dengan tombol 2

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

B-2

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
6. Pelarut murni aquadest dimasukkan dalam cuvet dan ditempatkan dalam alat 1
7. Tombol 6 diatur sampai skala menunjukkan absorbansi = 0 (transmitan = 100%)
8. OPTIMA SP-300 siap dipakai
9. Cuvet diisi dengan larutan sampel

bagian, bagian luar cuvet dibersihkan,

kemudiandimasukkan ke dalam tempat sampel, dan ditutup kembali, pembacaan


skala transmitan dan absorbans dihitung, A = 2 log %T
10. Panjang gelombang dinaikkan 10 nm dengan menggunakan tombol (2), diulangi
langkah 6 sampai 9
11. Dibuat kurva hubungan antara absorbansi versus panjang gelombang, kemudian
ditentukan nilai panjang gelombang optimum untuk jenis larutan target
C. Menentukan kadar anotsianin total dalam larutan
1. Dibuat larutan KCl 0,025 M sebagai larutan buffer pH 1. Kemudian diukur
pHnya dan diatur pH supaya sama dengan 1 dengan larutan HCl
2. Dibuat larutan Natrium Asetat (

) 0,4 M.kemudian diukur

pHnya dan diatur pHnya supaya larutan mempunyai Ph 4,5 dengan


menggunakan larutan HCl
3. Diambil 1 buah beaker glass 50 cc dan diisi dengan larutan no.2 sebanyak 5 ml
dengan pipet ukur. pH larutan dibuat sama dengan 1 dengan menambahkan
larutan buffer KCl dengan pipet ukur dan dihitung berapa jumlah volume yang
telah ditambahkan sehingga pH = 1. Hal serupa dilakukan untuk sampel no.
3,4,5, dan 6
4. Diatur panjang gelombang pada 700 nm. Kemudian dilakukan kalibrasi alat
langkah 1-6 (dilakuka untuk setiap pergantian panjang gelombang). Setelah itu,
dimasukkan larutan no.2 dengan pH = 1ke dalam cuvet hingga

bagian.

Catat % transmitan dan dihitung absorbansinya, begitu juga untuk sampel


no.3,4,5, dan 6
5. Diatur panjang gelombang pada 700 nm. Kemudian dilakukan kalibrasi alat
langkah 1-6 (dilakukan untuk setiap pergantian panjang gelombang). Setelah itu,
dimasukkan larutan no.2 dengan pH = 1 ke dalam cuvet hingga

bagian.

Catat % transmitan dan dihitung absorbansinya, begitu juga untuk sampel


no.3,4,5, dan 6
6. Diulangi langkah 1-5 dengan membuat pH larutan sama dengan 4,5 dengan
menambahkan larutan buffer Na Asetat
7. Dihitung konsentrasi Antosianin dengan rumus :

C=

................................................................... (8)

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

B-3

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

Dengan = C

= konsentrasi antosianin (mg/l)

= (A 520 A 700) pH 1 (A 520 A 700) pH 4,5

MW

= bobot molekul = 449,2 gram/mol

DF

= faktor pengenceran
E

= 26900 L/mol cm

1000

= konversi dari gram ke mg

= panjang sel atau cuvet (cm)

8. Dibuat persamaan Beer untuk konsentrasi antosianin, dengan persamaan :

A = k.c............................................................................................ (9)

2.4 Hasil Percobaan

Menentukan panjang gelombang optimum


Tabel.1. Larutan Antosianin basis 10 ml

Panjang Gelombang (nm)

%T

Absorbansi

480

3,1

1,508

490

2,4

1,619

500

1,8

1,745

510

1,6

1,796

520

1,5

1,824

530

1,6

1,796

540

1,9

1,721

550

3,9

1,409

560

9,6

1,018

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

B-4

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

Tabel.2. Data Percobaan pada pH 1


No.

V antosianin

V aquades

%T

10

100

48,2

0,317

1,341

12,1

0,917

3,947

4,2

1,376

7,148

2,3

1,638

9,117

Tabel.3. Data Percobaan Pada pH 4,5

Volume (ml)

Volume (ml)

No.
Sampel

Sampel

Aquadest Awal Akhir

%T
DF

Absorbansi

520

700

nm

nm

=520

=700

nm

nm

0,351

0,024

10

1,2

6,4

1,28

94,2

0,796

0,026

8,8

1,76 11,9 93,3

0,924

0,030

1,6

1,222

0,033

44,6 94,6
16

92,7

Tabel. 4 Faktor Pengenceran


Volume (ml)

Volume (ml)

No.
Sampel Sampel Aquadest Awal Akhir

%T
DF

Absorbansi

520

700

nm

nm

=520

=700

nm

nm

100

5,4

1,08

78

92,9

0,108

0,035

5,2

1,04 58,3 92,8

0,234

0,0324

5,2

1,04 30,5 91,3

0,515

0,0395

1,4

0,409

0,0414

79,3 90,9

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

B-5

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
Menghitung A
A

= (A 520 A 700) pH 1 (A 520 A 700) pH 4,5

A1

= (0,351 0,024) (0,108 0,035) = 0,254

A2

= (0,796 0,026) (0,234 0,0324) = 0,5684

A3

= (0,924 0,030) (0,515 0,0395) = 0,4185

A4

= (1,222 0,033) (0,409 0,0414) = 0,8214

Menghitung konsentrasi antosianin

Menghitung konsentrasi pada 35% dan 45%


a. Absorbansi pada 35% adalah 0,815
y = 0,0399x + 0,0439
0,815=0,0399x+0,0439
x= 19,32 ppm
b. Absorbansi pada 45% adalah 0,950
y = 0,0399x + 0,0439
0,950=0,0399x+0,0439
x= 22,709 ppm

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

B-6

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
LEMBAR KUANTITAS REAGEN

MATERI

: Spektrofotometri Organik

HARI / TANGGAL

: Rabu / 12 November 2014

NAMA

: Ebersa Desry Surbakti


Dwi Purwati
Arisiani Melatika

ASISTEN

: Gabriella Emma

KUANTITAS REAGEN
NO
JENIS REAGEN
1. Ekstrak Rosella
2. Buffer KCl
3. Buffer Na asetat

KUANTITAS
100 ml

TUGAS TAMBAHAN :

CATATAN :
Rosella 0,20,40,60,80 %

2014 2014

Basis 10 ml

SEMARANG, 10 November
ASISTEN

Grabiella Emma

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

C-1

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

D-1

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

D-2

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

B-6

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

D-4

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

D-5

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

JURNAL KIMIA 6 (2), JULI 2012 : 138-147

KONSENTRASI TOTAL SENYAWA ANTOSIANIN EKSTRAK KELOPAK


BUNGA ROSELLA (Hibiscus sabdariffa L.) : PENGARUH TEMPERATUR DAN pH

Hayati, E.K.1), Budi, U.S.2), Hermawan, R.1)


Jurusan Kimia UIN Maulana Malik Ibrahim Malang
BALITTAS

ABSTRAK

Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa L.), dikenal masyarakat sebagai tanaman yang dimanfaatkan untuk teh
dan berpotensi sebagai pewarna alami. Tujuan dari penelitian ini adalah: (1) untuk mengetahui laju degradasi
antosianin akibat pengaruh pemanasan dengan variasi suhu terhadap konsentrasi total dan kestabilan warna senyawa
antosianin ekstrak kelopak bunga rosella (Hibiscus sabdariffa L), (2) untuk mengetahui kestabilan antosianin akibat
pengaruh pH terhadap konsentrasi total senyawa antosianin ekstrak kelopak bunga rosella (Hibiscus sabdariffa L).
Penelitian ini dilakukan dengan mengekstraksi sampel dengan pelarut asam sitrat 2%. Ekstrak pekat yang
diperoleh digunakan untuk uji stabilitas warna terhadap suhu pemanasan dan pH selama proses penyimpanan selama
30 hari dan perubahan warna.
Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak kelopak bunga rosella (Hibiscus sabdariffa L)
mengalami penurunan konsentrasi pada suhu 80C. Laju degradasi konsentrasi antosianin adalah mengikuti
persamaan r = 0,014T 1,169 dengan nilai konsentrasi terendah 32,916 mg/L.

Kata Kunci : Rosella (Hibiscus sabdariffa L.), antosianin, degradasi, suhu, pH

ABSTRACT

Recently, Roselle (Hibiscus sabdariffa L.) has been used for tea. Based on this background, research was
conducted with the aims: (1) To determine the rate of anthocyanin degradation heating of the roselle calyx extract
(Hibiscus sabdariffa L.), (2) To determine the effects of changes during storage on the stability and total
concentration of anthicyanin.
This research was conducted by extracting the sample with 2% citric acid. Concentrated extract was used to
test the stability upon heating temperature, pH during the storage process for 30 days.
The results of this study indicate that extracts of roselle calyx (Hibiscus sabdariffa L.) experienced a
decrease in concentration at 80C. The anthocyanin degradation rate followed the equation of r = 0.014T 1.169
with the lowest concentration of 32.916 mg / L.
Keywords : Roselle (Hibiscus sabdariffa L.), anthocyanins, degradation, temperature, pH

PENDAHULUAN
Penentuan bahan makanan pada
umumnya sangat bergantung pada beberapa
faktor antara lain cita rasa, warna, tekstur, dan
nilai gizi dan mikrobiologis. Tetapi, faktor yang
paling mudah diamati secara visual dan kadangkadang sangat menentukan adalah warna

(Winarno, 2004). Hampir semua bahan makanan


olahan saat ini menggunakan pewarna, yang
tanpa kita sadari pewarna tersebut banyak
berasaldaribahan-bahankimiadan
menimbulkan dampak negatif terhadap tubuh.
Pada dasarnya, banyak tanaman ataupun
tumbuhan yang dapat dimanfaatkan sebagai
pewarna alami, salah satunya adalah bunga

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

B-6

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

rosella. Senyawa antosianin merupakan sumber


pewarna alami yang terdapat pada kelopak bunga
rosella dan hampir pada semua tumbuhan yang
memberikan pigmen berwarna kuat dan apabila
dilarukan dalam air akan menimbulkan warna
merah, jingga, ungu, dan biru (Nollet, 1996).
Antosianin merupakan salah satu
senyawa yang terkandung pada kelopak bunga
rosella dan perlu dikaji lebih mendalam baik
fungsi dan kegunaannya bagi tubuh ataupun zatzat makanan. Kestabilan warna senyawa
antosianin dipengaruhi oleh pH atau tingkat
keasaman, dan akan lebih stabil apabila dalan
suasana asam atau pH yang rendah (Belitz and
Grosch, 1999).
Kestabilan antosianin juga dipengaruhi
oleh suhu. Laju kerusakan (degradasi) antosianin
cenderungmeningkatselamaproses
penyimpanan yang diiringi dengan kenaikan
suhu. Degradasi termal menyebabkan hilangnya
warna pada antosianin yang akhirnya terjadi
pencoklatan. Laju termal degradasi mengikuti
kinetika orde pertama. Kenaikan suhu bersamaan
dengan pH menyebabkan degradasi antosianin
pada buah cherri (Rein, 2005).
Berdasarkan latar belakang tersebut,
peneliti melakukan penelitian tentang analisis
konsentrasi dan kestabilan warna antosianin
yang terdapat pada ekstrak bunga rosella.
Penelitian ini terfokus pada pengaruh temperatur
dan pH terhadap total konsentrasi dan kestabilan
warna senyawa antosianin ekstrak kelopak bunga
rosella (Hibiscus sabdariffa L.).

MATERI DAN METODE


Pelaksanaan Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan
Agustus sampai November tahun 2010 di
Laboratorium Jurusan Kimia UIN Maulana
Malik Ibrahim, BALITTAS, dan THP
Brawijaya.

Bahan-bahan kimia yang digunakan


adalah aquadest, asam sitrat, HCl, KCl, NaSitrat, Na-Asetat anhidrat, Na2HPO4.2H2O dan
Asam Sitrat.
Peralatan
Alat-alat yang digunakan dalam
penelitian ini adalah, seperangkat alat gelas,
pisau atau alat pemotong, blender, timbangan
analitik, kertas saring, sentrifuge, shaker, oven,
waterbath, Spektrofotometer UV-Vis Varian
Cary 50, dan Color reader Minolta CR 10, pH
meter.
Cara Kerja
Preparasi Sampel
Sampel kelopak bunga rosella yang akan
dianalisis sebelumnya dilakukan sortasi atau
pemilihan. Kelopak bunga rosella yang masih
baik selanjutnya dicuci pada air yang mengalir
hingga diperkirakan kotoran (tanah, debu dan
sebagainya) sudah hilang. Selanjutnya ditiriskan
dan dikeringkan pada suhu 50oC selama 36 jam.

Ekstraksi Sampel Kelopak Bunga Rosella


Menggunakan Metode Maserasi (Saona dan
Wrolstad, 2001)
Sampel kering diblender selama 5 menit
dan ditimbang sebanyak 50 g. Dilakukan
maserasi dalam beaker gelas 500 mL dengan
pelarut asam sitrat 2%. Pengocokan dilakukan
pada kecepatan 200 rpm dan dibiarkan selama 10
jam pada ruang gelap dan suhu ruangan
memucat. Sebelum dan setelah penambahan
sampel, pelarut diukur keasamannya dengan pH
meter. Sampel selanjutnya disaring dengan
corong Buchner.Ekstrak yang diperoleh
disentrifuges dengan kecepatan 2000 rpm selama
10 menit. Residu yang tersisa dimaserasi
kembali dengan perlakuan yang sama sampai
benar-benar pucat dan warnanya memudar.
Ekstrakmaserasipertamayangtelah
disentrifugasi dapat dicampurkan dengan ekstrak
maserasi kedua yang telah disentrifuge.

Bahan
Bahan sampel yang digunakan dalam
penelitian ini adalah kelopak bunga Rosella
(Hibiscus sabdariffa L) dari perkebunan
BALITTAS, Karang Ploso yang sudah
dikeringkan.

Pengukuran Total Antosianin Ekstrak Bunga


Rosela dengan Spektrofotometri UV-Visible
(Guisti dan Wrolstad, 2001 dan Hosseinian,
2008)

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

D-7

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

JURNAL KIMIA 6 (2), JULI 2012 : 138-147

Pengukuran total konsentrasi antosianin


ekstrak kelopak bunga rosella diambil dari
sampel larutan hasil ekstraksi 50 g rosella dalam
500 mL pelarut dilakukan dengan menggunakan
Spektrofotometri UV-Vis pada rentang panjang
gelombang 500-700 nm.
Disiapkan 2 sampel larutan, larutan
pertama adalah larutan untuk pH 1,0
menggunakan buffer KCl dan larutan kedua
untuk pH 4.5 menggunakan buffer Na-Asetat.
Diambil masing-masing 1 mL ekstrak kelopak
bunga rosella dan diencerkan menggunakan
larutan buffer masing-masing sampai volume 10
mL (Faktor pengenceran = 10). Sampel hasil
pengenceranmasing-masingdilakukan
pengukuran absorbansi pada panjang gelombang
500-700 nm dan 700 nm. Untuk menentukan
nilai absorbansinya menggunakan persamaan
berikut:
A = (A vis max A 700) pH 1,0 (A vis max A 700) pH 4,5

dan untuk menentukan total konsentrasinya


dapat menggunakan persamaan berikut:

Uji Stabilitas Terhadap Suhu Pemanasan


(Nugrahan, 2007)
Mula-mula diambil 5 mL ekstrak hasil
maserasi dan diencerkan dengan aquades dalam
labu ukur 250 mL hingga tanda batas. Hasil
pengenceran diambil 10 mL dan dimasukkan
dalam tiga tabung reaksi, masing masing
dengan volume yang sama yaitu 10 mL dan
ditutup dengan alumunium foil. Proses
pemanasan dilakukan dengan menggunakan
waterbath pada suhu bervariasi yaitu 30, 40, 50,
60, 70 dan 80oC dengan waktu pemanasan
selama 30 menit dan dilakukan pengulangan
sebanyak tiga kali. Selanjutnya dilakukan
pengukuran absorbansi pada panjang gelombang
maksimal dan 700 nm dengan cara berikut,
diambil masing-masing 1 mL sampel yang telah
dipanaskan dan diencerkan menggunakan larutan
buffer yaitu, pH 1 dan pH 4,5 sampai volume 10
mL (Faktor pengenceran = 50). Beriktnya
dilakukan penentuan kecerahan warna dengan

color reader. Data absorbansi yang diperoleh


selanjutnya dikonversi mengikuti rumus berikut,

Hasil total konsentrasi terendah pada


salah satu suhu tersebut (30-80oC), selanjutnya
diulangi dengan variasi lama pemanasan
kelipatan 5 menit selama 30 menit mulai dari 0
menit. Selanjutnya, diukur absorbansi dan
dikonversimenjadikonsentrasi.Untuk
mengetahui laju degradasi antosianin, maka
dilakukan perhitungan dengan dicoba pada 3
tingkatan orde, yaitu orde 0, 1, dan 2.
Uji Stabilitas Terhadap Perlakuan Buffer pH
(Nugrahan, 2007)
Proses pelaksanaan uji stabilitas
terhadap buffer pH sebagai berikut, mula-mula
disiapkan ekstrak hasil maserasi. Disiapkan
larutan buffer dengan pH yang bervariasi, yaitu
pH 1 sampai 7. Masing-masing diambil
sebanyak 10 mL, dimasukkan dalam tabung
reaksi dan ditutup dengan aluminium foil.
Ekstrak antosianin sebanyak 1 mL
dimasukkan ke dalam tujuh tabung reaksi yang
telah berisi larutan buffer, ditutup dengan
alumunium foil dan dikocok-kocok hingga
benar-benar homogen. Ketujuh tabung reaksi
tersebut disimpan pada suhu ruang 27oC kedap
cahaya.
Penentuan total antosianin dilakukan
dengan cara pengukuran absorbansi, diambil
masing-masing 5 mL ektrak kelopak rosella.
Sampel hasil pengenceran masing-masing
dilakukan pengukuran absorbansi pada panjang
gelombang maksimal dan 700 nm serta
dilakukan penentuan kecerahan warna dengan
color reader. Kedua perlakuan tersebut
dilakukan setiap 3 hari, yaitu mulai hari ke-0
sampai hari ke-30.
Analisis Hasil
Analisa meliputi total konsentrasi
antosianin, pH, suhu dan intensitas cahaya. Data
yang diperoleh dari hasil penelitian dianalisis
secara deskriptif menggunakan analisa statistik
rancangan acak lengkap satu arah (one way

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

D-8

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK

ISSN 1907-9850

ANOVA) menggunakan aplikasi MINITAB 14


dan Microsoft Exel 2007.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Preparasi Sampel
Kelopak bunga rosella yang masih segar
disortasi dan dipisahkan dari bijinya. selanjutnya
dicuci dengan sedikit air untuk menghilangkan
kotoran dan ditiriskan. Sampel yang diinginkan
dalam penelitian ini adalah kelopak rosella yang
kering.Selanjutnyadilakukanproses
pengeringan yaitu dioven selama kurang lebih 36
jam pada suhu 50oC untuk menghilangkan
sebagian kadar air yang terkandung dan
diharapkantidakmerusakkandungan
senyawanya pada suhu tersebut.
Pengeringandimaksudkanuntuk
mengurangi kadar air, menghentikan reaksi
enzimatis, mencegah tumbuhnya jamur sehingga
dapat disimpan lebih lama dan tidak mudah
rusak serta komposisi kimianya tidak mengalami
perubahan. Kemudian dihaluskan menggunakan
blender.

Ekstraksi Maserasi
Ekstraksi yang digunakan yaitu ekstraksi
maserasi, karena sampel yang digunakan tidak
tahan panas dan pengerjaannya cukup sederhana.
Metode maserasi bertujuan untuk mengambil zat
atau senyawa aktif yang terdapat pada suatu
bahan menggunakan pelarut tertentu. Menurut
Rukmana (1997), dalam mengekstrak zat warna
diperlukan metode yang sesuai dengan sifat
bahan (sumber pigmen), agar dihasilkan
rendemen dan stabilitas pigmen yang tinggi.
Metode ini (maserasi) digunakan dengan
mempertimbangkan sifat senyawa (antosianin)
yang relatif rentan terhadap panas sehingga
dikhawatirkanakanmerusakbahkan
menghilangkan senyawa yang akan dianaliasa.
Perbandingan jumlah sampel dan pelarut
pada proses maserasi sampel ini adalah 1 : 5,
yaitu 50 g sampel dalam 250 mL pelarut asam
sitrat 2%.
Penggunaan asam sitrat sebagai pelarut
karena kondisi pelarut yang semakin asam dapat
menyebabkan banyaknya dinding sel vakuola

yang pecah sehingga pigmen antosianin yang


terekstrak semakin banyak.
Sebelum proses perendaman, hal yang
perlu dilakukan adalah mengukur pH untuk
mengetahui kondisi pH pelarut sebelum dan pada
saat diinteraksikan dengan sampel rosella.
Adapun nilai pH yang diperoleh dari hasil
pengukuran dapat dilihat pada Tabel 1 berikut.
Tabel 1. Kondisi pH pelarut yang digunakan
sebelum dan saat ekstraksi

Ulangan
1
2

Volume
(mL)
250
250

Warna
Ekstrak

pH

Sebelum Sesudah
Merah
2,24
2,51
hati pekat
2,24
2.48
Merah

Setelah pengocokan, sampel disaring


dengan penyaring vakum, ekstrak yang
dihasilkan ditampung (ekstrak 1), sedangkan
residu hasil penyaringan dimaserasi/direndam
kembali dengan pelarut asam sitrat 2%. Ekstrak
dari hasil maserasi pertama disentrifuge untuk
mengendapkan partikel-partikel koloid dan
pengotor dengan kecepatan sentrifuge 2000 rpm
selama 10 menit. Hal serupa juga dilakukan pada
ekstrak hasil maserasi yang kedua, kemudian
ekstrak 1 dan 2 digabung.

Uji Stabilitas Terhadap Pemanasan


Suhu memiliki peranan dan pengaruh
yang sangat penting terhadap kestabilan
antosianin. Menurut Hendry dan Houghton
(1996), suhu penyimpanan maupun suhu proses
pengolahan mempengaruhi degradasi antosianin.
Jadi, pada suhu pengolahan yang tinggi dan
selama penyimpanan akan menyebabkan
degradasi antosianin.
Penetapankonsentrasisenyawa
antosianin dilakukan dengan metode perbedaan
pH (pH Differential) yaitu pH 1,0 dan pH 4,5.
Penetapan konsentrasi antosianin dengan
metode ini dikarenakan pada pH 1,0 antosianin
membentuk senyawa oxonium (kation flavilium)
yang berwarna dan pada pH 4,5 berbentuk
karbinol/hemiketal tak berwarna (Giusti M. M.
and Wrolstad R. E., 2001). Kondisi inilah yang
akan dijadikan acuan untuk menentukan
absorbansidenganmenggunakan

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1

B-6

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
JURNAL KIMIA 6 (2), JULI 2012 : 138-147

spektofotometer Uv-Vis dari masing-masing


ekstrak yang dihasilkan. Perubahan warna pada
antosianin dalam tingkatan pH tertentu
disebabkan sifat antosianin yang memiliki
tingkat kestabilan yang berbeda. Misalnya, pada
pH 1,0 antosianin lebih stabil dan warna lebih

merah dibandingkan pH 4,5 yang kurang stabil


dan hampir tidak berwarna.
Adapun struktur dan perubahan warna
pada antosianin karena perbedaan tingkatan pH
dapat dilihat pada Gambar 1 di bawah ini.

R1

R1
OH

OH
HO

HO

-H+

R2
O

O
R1
O

gly

gly

basa kuinoidal : biru


pH = 7

gly

gly

kation flavilium (bentuk oksonium) :orange ke umgu


pH = 1

-H+

-H2O

R1
OH

R1
HO

OH

O gly

HO

OH

R2
O

R2
O

gly

OH

gly

gly

karbinol pseudobasa (bentuk hemiketal) : tidak berwarna


pH = 4.5

kalkon : tidak berwarna


pH = 4.5

Gambar 1. Struktur antosianin pada kondisi pH yang berbeda (Wrolstad dan Giusti, 2001)

BerdasarkanGambardiatas,
menjelaskan bahwa dalam media air asam,
antosianinberadadalamempatjenis
kesetimbangan, yaitu base kuinonoidal, kation
flavilium atau bentuk oxonium, karbinol atau
pseudobase, dan kalkon. Menurut Francis et al,
(1985) bentuk pigmen antosianin pada kondisi
asam adalah kation flavilium, sementara inti
kation flavilium dari pigmen antosianin
kekurangan elektron sehingga sangat reaktif.
Dari hasil penetapan senyawa antosianin
dengan metode perbedaan pH (pH Differential)
spektroskopi UV-Vis, maka diperoleh data
sebagaimana tertera pada Tabel 2.
Suhu berpengaruh terhadap kestabilan
warna ekstrak rosella. Semakin meningkatnya
suhu pemanasan dapat menyebabkan hilangnya
glikosil pada antosianin dengan hidrolisis ikatan

glikosidik. Aglikon yang dihasilkan kurang stabil


dan menyebabkan hilangnya warna pada
antosianin.

Tabel 2. Konsentrasi senyawa antosianin setiap


suhu pemanasan selama 30 menit
No
1
2
3
4
5
6

Suhu (C)
30
40
50
60
70
80

Konsentrasi (mg/L)
Rata-rata
75,164
71,079
61,866
59,749
59,183
56,231

LABORATORIUM DASAR TEKNIK KIMIA 1 D10

SPEKTROFOTOMETRI ORGANIK
LEMBAR ASISTENSI

DIPERIKSA
NO
TANGGAL
1
18 -12-2014

19-12-2014

KETERANGAN
Perbaiki tabel,
grafik, gambar,
daftar isi dan
header footer

ACC

TANDA TANGAN