Laporan Resmi Nata Kel 4 Rabu

LAPORAN RESMI
PRAKTIKUM BIOPROSES
Materi :
NATA de LAPPACEUM
Oleh :
Kurnia Amalia
21030114120090
Virantika Wiji Pangestu
21030114120058
Yosia Nada T
21030114120097
LABORATORIUM MIKROBIOLOGI INDUSTRI

JURUSAN TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
2016
NATA de LAPPACEUM
HALAMAN PENGESAHAN
Laporan Resmi Praktikum Bioproses dengan materi Nata de Lappaceum yang disusun
oleh :
Kelompok
: 4/Rabu
Nama
: Kurnia Amalia
(21030114130185)
Virantika Wiji Pangestu
(21030114120058)
Yosia Nada T
(21030114120103)
Telah diterima dan disetujui pada :

Hari
Tanggal
Semarang,
Dosen Pembimbing
Pranata Laboratorium Pendidikan
Ir. Kristinah Haryani, M.T

NIP. 196402141991022002
Jufriyah, S.T.
NIP 197001091997032001
Laboratorium Mikrobiologi Industri
Mei 2016
Asisten Pengampu,
Lyan Dea Sagita

NIM 21030113120056
ii
NATA de LAPPACEUM
RINGKASAN
Nata berasal dari bahasa Spanyol yang apabila diterjemahkan kedalam bahasa
latin menjadi natare yang berarti terapung-apung (Susanti, 2005). Nata termasuk
produk fermentasi. Tujuan dari praktikum ini antara lain yaitu untuk mengkaji proses
pembentukan nata dari sari rambutan dengan cara fermentasi dan untuk mengkaji
hasil yang diperoleh dengan berbagai nutrisi, pH dan penutup yang digunakan.
Nata dibentuk oleh spesies bakteri asam asetat pada permukaan cairan yang
mengandung gula, sari buah, atau ekstrak tanaman lain. Bahan baku yang digunakan
pada percobaan ini adalah sari rambutan. Starter Penggunaan starter merupakan
syarat yang sangat penting, yang bertujuan untuk memperbanyak jumlah bakteri
Acetobacter xylinum yang menghasilkan enzim pembentuk nata. Kemudian hal-hal
yang berpengaruh pada proses pembentukan nata antara lain bahan baku, pH, suhu,
kebutuhan oksigen, penutup dan lama fermentasi.
Bahan yang digunakan pada praktikum ini antara lain sari rambutan, NH4SO4,
MgSO4, KH2PO4, urea, Acetobacter xylinum, Tropicana slim CH3COOH dan NaOH.
Sedangkan alat yang digunakan antara lain kompor listrik, beaker glass, autoclave,
gelas ukur, pengaduk dan inkubator. Hal pertama yang dilakukan pada praktikum ini
adalah membuat nata dan dilanjutkan dengan menganalisa glukosa pada bahan.
Percobaaan pembuatan nata de lappacium ini menghasilkan penurunan kadar
glukosa, penurunan densitas, terjadi perubahan pH awal dan pH akhir dan perbedaan
hasil akhir masing masing variabel dengan adanya pengaruh dari perbedaan penutup
medium fermentasi, perbedaan pH awal fermentasi, dan perbedaan banyaknya bakteri
Acetobacter xylinum yang ditambahkan saat fermentasi.
Hasil percobaan pembuatan nata de lappacium ini kurang berhasil, oleh
karena itu dibutuhkan saran seperti menjaga pH agar dalam kondisi asam,
penambahan bakteri Acetobacter xylinum sesuai kondisi optimumnya, menjaga agar
kondisi fermentasi dalam keadaan tidak terkena cahaya matahari secara langsung.
Kata kunci : Acetobacter xylinum, glukosa, nata, sari rambutan
iii
NATA de LAPPACEUM
SUMMARY
Nata is derived from the Spanish language, which when translated into Latin became
"natare" which means floating (Susanti, 2005). Nata including fermentation products. The
purpose of this lab, among others, to examine the process of formation of nata sari rambutan by
fermentation and to examine the results obtained with various nutrients, pH and cover used.
Nata formed by species of acetic acid bacteria on the surface of a liquid containing
sugar, fruit juice, or other plant extracts. Raw materials used in this experiment is an extract of
rambutan. Starter Use of starter is a very important requirement, which aims to increase the
number of bacteria Acetobacter xylinum that produce nata-forming enzyme. Then the things that
affect the process of formation of nata among other raw materials, pH, temperature, oxygen
consumption, cover and fermentation time.
Materials used in this lab include rambutan juice, NH4SO4, MgSO4, KH2PO4, urea,
Acetobacter xylinum, Tropicana slim CH3COOH and NaOH. While the tools used include
electric stove, glass beaker, autoclave, measuring cups, stirrers and incubators. The first thing
to do in this lab is to make nata and continued by analyzing glucose in the material.
Experiment is making nata de lappacium This results in decreased glucose levels,
reduction in density, change the initial pH and the final pH and the difference in the final
outcome of each variable with the influence of differences in cover fermentation medium,
differences in initial pH of fermentation, and differences in the number of bacteria Acetobacter
xylinum added when fermentation.
The results of the experiment of making nata de lappacium is less successful, therefore it
takes suggestions as to maintain the pH in acidic conditions, the addition of bacteria
Acetobacter xylinum corresponding optimum condition, keep the fermentation conditions in a
state not exposed to direct sunlight
Keywords : Acetobacter xylinum, glucose, nata, rambutan juice.
iv
NATA de LAPPACEUM
PRAKATA
Puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala limpahan rahmat, karunia dan
hidayah-Nya sehingga Penulis dapat menyelesaikan Laporan Resmi Praktikum
Bioproses materi Nata de Lappaceum.
Dalam laporan ini Penulis meyakini sepenuhnya bahwa tidaklah mungkin
menyelesaiakan makalah ini tanpa doa, bantuan dan dukungan baik secara langsung
maupun tidak langsung. Pada kesempatan ini Penulis ingin memberikan ucapan terima
kasih kepada :
1. Dr. Hadiyanto, M.T. selaku penanggung jawab Laboratorium Mikrobiologi
Industri.
2. Ir. Kristinah Haryati, M.T. selaku dosen pembimbing materi nata
Laboratorium Mikrobiologi Industri.
3. Jufriyah, ST selaku Pranata Laboratorium Pendidikan Laboratorium
Mikrobiologi Industri .
4. Eko Nur Widodo selaku koordinator Laboratorium Mikrobiologi Industri.
5. Lyan Dea Sagita selaku asisten pembimbing materi nata Laboratorium
Mikrobiologi Industri.
6. Asisten Laboratorium Mikrobiologi Industri.
7. Teman teman angkatan 2014 Teknik Kimia Fakultas Teknik Universitas
Diponegoro, serta berbagai pihak lainnya.
Penulis meyakini bahwa laporan ini jauh dari kesempurnaan. Mohon maaf
apabila terdapat kekurangan bahkan kesalahan. Penulis mengharapkan kritik dan saran
yang membangun dari semua pihak berkaitan dengan laporan ini. Akhir kata, semoga
laporan ini dapat bermanfaat bagi semua pihak dan dapat berguna sebagai bahan
penambah ilmu pengetahuan.
Semarang, 19 Mei 2016
Penulis
NATA de LAPPACEUM
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ......................................................................................................... i

HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................................... ii
RINGKASAN .................................................................................................................. iii
SUMMARY .................................................................................................................... iv
PRAKATA ........................................................................................................................ v
DAFTAR ISI .................................................................................................................... vi
DAFTAR TABEL .......................................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................................... ix
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................................... x
BAB 1 PENDAHULUAN ................................................................................................ 1
1.1 Latar Belakang ....................................................................................................... 1
1.2 Perumusan Masalah ................................................................................................ 1
1.3 Tujuan Praktikum ................................................................................................... 1
1.4 Manfaat Praktikum ................................................................................................. 2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................................... 3
2.1 Pengertian Nata ...................................................................................................... 3
2.2 Spesifikasi Bahan Baku .......................................................................................... 3
2.3 Landasan Teori ...................................................................................................... 5
2.4 Hal-Hal yang Berpengaruh pada Fermentasi Nata ................................................. 9
2.5 Fungsi Masing-Masing Reagen ........................................................................... 11
2.6 Reaksi Pembentukan Nata ................................................................................... 12
2.7 Sumber-sumber Nitrogen .................................................................................... 13
2.8 Perbedaan Selulosa Tumbuhan dan Bakteri ........................................................ 14
2.9 Teori Fehling ....................................................................................................... 15
BAB III METODOLOGI PERCOBAAN ...................................................................... 18
3.1 Rancangan Praktikum........................................................................................... 18
3.2 Bahan dan Alat Yang Digunakan ......................................................................... 19
3.3 Gambar Rangkaian Alat ....................................................................................... 19
3.4 Cara Kerja............................................................................................................. 20
vi
NATA de LAPPACEUM
BAB IV HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN .............................................. 22
4.1 Fenomena Kadar Glukosa .................................................................................... 22
4.2 Fenomena pH ....................................................................................................... 23
4.3 Fenomena Densitas .............................................................................................. 24
4.4 Pengaruh Sumber Nitrogen pada Proses Pembuatan Nata ................................... 25
4.5 Pengaruh Perbedaan Penutup pada Proses Pembuatan Nata ................................ 26
4.6 Pengaruh Perbedaan pH pada Proses Fermentasi ................................................. 28
4.7 Pengaruh Banyaknya Acetobacter xylinum ......................................................... 29
BAB V PENUTUP ......................................................................................................... 31
5.1 Kesimpulan .......................................................................................................... 31
5.2 Saran ..................................................................................................................... 32
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................................... 33
LAMPIRAN
LEMBAR ASISTENSI
vii
NATA de LAPPACEUM
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Kandungan gizi buah rambutan ........................................................................ 9

Tabel 4.1 Perbandingan nutrisi dalam sumber nitrogen pada masing-masing variabel ..26
viii
NATA de LAPPACEUM
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Tahap-tahap pertumbuhan Acetobacter xylinum ........................................... 6

Gambar 2.2 Fase adaptasi ................................................................................................ 7
Gambar 2.3 Fase pertumbuhan awal ................................................................................. 7
Gambar 2.4 Fase pertumbuhan eksponensial .................................................................... 8
Gambar 2.5 Fase pertumbuhan diperlambat ..................................................................... 8
Gambar 2.6.Fase stasioner ................................................................................................ 9
Gambar 2.7 Fase menuju kematian .................................................................................. 9
Gambar 2.8 Fase kematian ............................................................................................... 9
Gambar 2.9 Reaksi glukosa dalam bentuk diubah dalam bentuk oleh enzim
isomerase ...................................................................................................... 12
Gambar 2.10 Reaksi pembentukan disakarida dengan ikatan glikosida ........................ 13
Gambar 2.11 Reaksi polimerasi disakarida menhadi glukosa ....................................... 13
Gambar 3.1 Skema rancangan percobaan ....................................................................... 19
Gambar 3.2 Rangkaian alat titrasi ................................................................................... 19
Gambar 4.1 Fenomena kadar glukosa ............................................................................ 22
Gambar 4.2 Fenomena pH .............................................................................................. 23
Gambar 4.3 Fenomena densitas ...................................................................................... 24
Gambar 4.4 Variabel 1 dengan sumber nitrogen Ammonium Sulfat (NH4)2SO4 .......... 25
Gambar 4.5 Variabel 2 dengan sumber nitrogen Urea (CO(NH2)2 ................................ 25
Gambar 4.6 Variabel 2 dengan penutup medium fermentasi daun pisang .................... 26
Gambar 4.7 Variabel 3 dengan penutup medium fermentasi kertas .............................. 27
Gambar 4.8 Variabel 2 dengan pH awal 4,5 ................................................................... 27
Gambar 4.9 Variabel 4 dengan pH awal 2 ..................................................................... 27
Gambar 4.10 Variabel 5 dengan Acetobacter xylinum 18%V ........................................ 27
Gambar 4.11 Variabel 6 dengan Acetobacter xylinum 20%V ........................................ 28
ix
NATA de LAPPACEUM
DAFTAR LAMPIRAN
Data Percobaan (Laporan Sementara) ........................................................................... A-1

Lembar Perhitungan ..................................................................................................... B-1
Data Pendukung ........................................................................................................... C-1
Prosedur Analisa ........................................................................................................... D-1
Lembar Kuantitas Reagen ............................................................................................. E-1
NATA de LAPPACEUM
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang

Nata adalah termasuk produk fermentasi. Nata dibentuk oleh spesies bakteri
asam asetat pada permukaan cairan yang mengandung gula, sari buah, atau
ekstrak tanaman lain (Lapuz et. al., 1967). Beberapa spesies yang termasuk
bakteri asam asetat dapat membentuk selulosa, namun selama ini yang paling
banyak dipelajari adalah Acetobacter xylinum (Swissa et. al., 1980). Rambuatan
adalah buah yang dapat diolah menjadi berbagai macam bahan makanan. Salah
satunya adalah dapat digunakan sebagai bahan pembuatan nata. Produk yang
dihasilkan dari olahan nata ini disebut sebagai Nata de lappaceum. Yaitu nata
yang berasal dari sari rambutan. Proses pembuatan nata dari sari rambutan ini
dengan menggunakan bakteri Acetobacter xylinum (Suwarno, 2009).
1.2 Perumusan Masalah
Proses pembuatan Nata de lappaceum atau nata yang dibuat dengan bahan
sari rambutan adalah dengan cara fermentasi. Dengan menggunakan bakteri
Acetobacter xylinum dapat mengubah glukosan menjadi selulosa yaitu nata yang
terbentuk setelah proses fermentasi. Dengan adanya percobaan pembuatan Nata
De lappaceum ini akan diketahui pengaruh sumber nutrogen, perbedaan pH dan
perbedaan jumlah bakteri Acetobacter xylinum pada proses fermentasi terhadap
nata yang dihasilkan.
1.3 Tujuan Praktikum
1. Mengkaji proses pembuatan nata dari sari rambutan dengan cara fermentasi.
2. Mengkaji hasil yang diperoleh dengan berbagai variabel yaitu sumber
nitrogen (ammonium sulfat dan urea), perbedaan pH awal fermentasi (pH 4,5
dan pH 2), perbedaan banyaknya bakteri Acetobacter xylinum yang
ditambahkan (18%V dan 20% V), serta jenis penutup (kertas koran dan daun
pisang).
NATA de LAPPACEUM
I.4 Manfaat Praktikum
1. Praktikan mampu mengkaji proses pembuatan nata dari sari rambutan dengan
cara fermentasi.
2. Praktikan mampu mengkaji hasil yang diperoleh dengan berbagai variabel
yaitu sumber nitrogen (ammonium sulfat dan urea), perbedaan pH awal
fermentasi (pH 4,5 dan pH 2), perbedaan banyaknya bakteri Acetobacter
xylinum yang ditambahkan (18%V dan 20% V), serta jenis penutup (kertas
koran dan daun pisang).
NATA de LAPPACEUM
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Pengertian Nata

Nata berasal dari bahasa Spanyol yang apabila diterjemahkan kedalam bahasa
latin menjadi natare yang berarti terapung-apung (Susanti, 2005). Nata termasuk
produk fermentasi. Nata dibentuk oleh spesies bakteri asam asetat pada permukaan
cairan yang mengandung gula, sari buah, atau ekstrak tanaman lain (Lapuz et. al.,
1967). Beberapa spesies yang termasuk bakteri asam asetat dapat membentuk
selulosa, namun selama ini yang paling banyak dipelajari adalah Acetobacter
xylinum (Swissa et. al., 1980). Ada beberapa genre bakteri yang anggotanya dikenal
sebagai
penghasil
selulosa,
di
antaranya
yaitu
Acetobacter,
Aerobacter,
Azotobacter, Agrobacterium, Achromobacter Gluconacetobacter, Rhizobium,

Sarcina, dan Salmonella (Sarkono, 2015).
Nata adalah kumpulan sel bakteri (selulosa) yang mempunyai tekstur kenyal,
putih dan menyerupai gel yang terapung pada bagian permukaan cairan (nata tidak
tumbuh di dalam cairan). Bahan yang dapat digunakan sebagai media untuk
pembuatan nata adalah dari tumbuhan sehingga produknya dapat dikonsumsi. Bahan
yang biasa digunakan antara lain adalah air kelapa (nata de coco), sari rambutan
(nata de lappaceum), ekstrak nanas (nata de pina), dan kedelai (nata de soya) serta
bahan lain yang mengandung glukosa. Mikroba yang aktif dalam pembuatan nata
adalah bakteri pembentuk asam asetat yaitu Acetobacter xylinum. Mikroba ini dapat
mengubah gula menjadi selulosa. Jalinan selulosa inilah yang membuat nata
berwarna putih (Winarno 2004).
2.2 Spesifikasi Bahan Baku
Rambutan adalah tanaman tropis yang tergolong ke dalam suku lerak-lerakan
atau Sapindaceae, berasal dari daerah kepulauan di Asia Tenggara. Kata "rambutan"
berasal dari bentuk buahnya yang mempunyai kulit menyerupai rambut.
NATA de LAPPACEUM
Klasifikasi rambutan :
Kingdom
: Plantae (Tumbuhan)
Subkingdom : Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)

Super Divisi : Spermatophyta (Menghasilkan biji)
Divisi
: Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)
Kelas
: Magnoliopsida (berkeping dua/dikotil)
Sub Kelas
: Rosidae
Ordo
: Sapindales
Famili
: Sapindaceae
Genus
: Nephelium
Spesies
: Nephelium lappaceum L.
Kandungan gizi buah rambutan :

Tabel 2.1 Kandungan gizi buah rambutan
Gizi
Kandungan
Energi
343kJ (82 kcal)
Karbohidrat
20,87 g
Serat
0,9 g
Lemak
0,21 g
Protein
0,65 g
Thiamine (vit. B1)
0.013 mg (1%)
Riboflavin (vit. B2)
0.022 mg (2%)
Niacin (vit. B3)
1.352 mg (9%)
Vitamin B6
0.02 mg (2%)
Vitamin C
4.9 mg (6%)
Manfaat buah rambutan antara lain :

1. Anti Kanker
Rambutan mengandung antioksidan. Studi yang dilakukan oleh University of Chiang
Mai di Thailand menemukan bahwa buah, biji dan kulit rambutan mengandung
NATA de LAPPACEUM
antioksidan kuat yang disebut flavonoid. Beberapa jenis flavonoid diyakini mampu
mengurangi kolesterol, bersifat anti kanker dan anti inflamasi.
2. Melindungi dari efek Radikal Bebas
Salah satu senyawa dalam kulit rambutan adalah asam Galia. Senyawa ini bertindak
sebagai penangkal radikal bebas.
3. Kaya Vitamin C
Rambutan kaya vitamin C. Jika seseorang mengkonsumsi 10 sampai 12 buah
rambutan, maka dia memperoleh 75-90 mg asam askorbat, dua kali lebih banyak dari
jumlah yang disarankan dalam menu sehari-hari. Selain berfungsi sebagai anti-oksidan,
vitamin C dapat mencegah kerusakan sel dan membantu penyerapan zat besi.
4. Pembentukan Darah
Buah rambutan yang manis ini mengandung sejumlah kecil tembaga. Zat ini diperlukan
sebagai pembentuk dari sel darah putih dan sel-sel darah merah. Selain itu, rambutan
juga mengandung zat besi yang dapat mencegah terjadinya anemia.
5. Pencernaan yang sehat
Rambutan juga memiliki serat yang dapat membantu agar terhindar dari sembelit.
Selain itu, rambutan juga dapat mematikan parasit dalam usus dan membantu
meringankan gelaja penyakit diare pada manusia (Santoso, 2007).
2.3 Landasan Teori
1. Teori Acetobacter xylinum
Starter nata adalah Acetobacter xylinum. Penggunaan starter merupakan syarat
yang sangat penting, yang bertujuan untuk memperbanyak jumlah bakteri
Acetobacter xylinum yang menghasilkan enzim pembentuk nata. Bakteri Acetobacter
xylinum tergolong familia Pseudomonas dan genus Acetobacter. Berbentuk bulat
dengan panjang 2 mikron, biasanya terdapat sebagai sel tunggal atau kadang kadang
berikatan dengan sel lain membentuk ikatan seperti rantai. Pembentukan nata
memerlukan starter sebanyak 10-20% dari volume media sebagai starter mikroba
(Saragih, 2004).
NATA de LAPPACEUM
a)
Sifat fisiologi
Bakteri ini dapat membentuk asam dari glukosa, etil dan propil alkohol, tidak
membentuk senyawa busuk yang beracun dari hasil peruraian protein (indol) dan
mempunyai kemampuan mengoksidasi asam asetat menjadi CO2 dan H2O. Sifat yang
paling menonjol dari bakteri ini adalah memiliki kemampuan untuk mempolimerisasi
glukosa sehingga menjadi selulosa. Selanjutnya, selulosa tersebut membentuk matrik
yang dikenal sebagai nata.
b) Fase Pertumbuhan
Bakteri Acetobacter xylinum mengalami beberapa fase pertumbuhan sel yaitu
fase adaptasi, fase pertumbuhan awal, fase pertumbuhan eksponensial, fase
pertumbuhan lambat, fase pertumbuhan tetap, fase menuju kematian, dan fase
kematian (Wirjosentono, 2011).
Gambar 2.1 Tahap-tahap pertumbuhan Acetobacter xylinum

c) Fase Adaptasi
Begitu dipindahkan ke media baru, bakteri Acetobacter xylinum tidak langsung
tumbuh dan berkembang. Pada fase ini, bakteri akan terlebih dahulu menyesuaikan
diri dengan substrat dan kondisi lingkungan barunya. Fase adaptasi bagi Acetobacter
xylinum dicapai antara 0 24 jam atau 1 hari sejak inokulasi.
NATA de LAPPACEUM
Gambar 2.2 Fase adaptasi

d) Fase Pertumbuhan Awal
Pada fase ini, sel mulai membelah dengan kecepatan rendah. Fase ini menandai
diawalinya fase pertumbuhan eksponensial. Fase ini dilalui dalam beberapa jam.
Gambar 2.3 Fase pertumbuhan awal

e) Fase Pertumbuhan Eksponensial
Fase ini disebut juga sebagai fase pertumbuhan logaritmik, yang ditandai dengan
pertumbuhan yang sangat cepat. Untuk bakteri Acetobacter xylinum, fase ini dicapai
dalam waktu antara 1- 5 hari tergantung pada kondisi lingkungan. Pada fase ini juga,
bakteri mengeluarkan enzim ekstraseluler polimerase sebanyakbanyaknya, untuk
menyusun polimer glukosa menjadi selulosa.
NATA de LAPPACEUM
Gambar 2.4 Fase pertumbuhan eksponensial

f) Fase Pertumbuhan Diperlambat
Pada fase ini, terjadi pertumbuhan yang diperlambat karena ketersediaan nutrisi
yang telah berkurang, terdapatnya metabolit yang bersifat toksik yang dapat
menghambat pertumbuhan bakteri, dan umur sel yang telah tua.
Gambar 2.5 Fase pertumbuhan diperlambat

g)
Fase Stasioner
Pada fase ini, jumlah sel yang tumbuh relatif sama dengan jumlah sel yang mati.
Penyebabnya adalah di dalam media terjadi kekurangan nutrisi, pengaruh metabolit

toksik lebih besar, dan umur sel semakin tua. Namun pada fase ini, sel akan lebih tahan
terhadap kondisi lingkungan yang ekstrim jika dibandingkan dengan ketahanannya
pada fase lain. Matrik nata lebih banyak diproduksi pada fase ini.
Gambar 2.6 Fase stasioner

h) Fase Menuju Kematian
Pada fase ini, bakteri mulai mengalami kematian karena nutrisi telah habis dan sel
kehilangan banyak energi cadangannya.
NATA de LAPPACEUM
Gambar 2.7 Fase menuju kematian

i) Fase Kematian
Pada fase ini, sel dengan cepat mengalami kematian, dan hampir merupakan
kebalikan dari fase logaritmik. Sel mengalami lisis dan melepaskan komponen yang
terdapat di dalamnya.
Gambar 2.8 Fase kematian

2.4 Hal hal yang Berpengaruh pada Fermentasi Nata
1. Pemilihan Bahan
Bahan-bahan dasar yang digunakan dalam pembuatan nata harus memenuhi kualitas
baik, hal ini bertujuan agar nata yang dihasilkan kualitasnya baik (Putriana, 2016).
Pada praktikum ini digunakan sari rambutan sebagai bahan baku pembuatan nata.
2. pH atau Keasaman
Metabolisme Acetobakter xylinum selama fermentasi dipengaruhi oleh keasaman
media. Hal ini disebabkan membran sel bakteri bersifat permeabel terhadap ion
hidrogen maupun ion hidroksil, sehingga perubahan keasaman media fermentasi
akan mempengaruhi sitoplasma sel bakteri. pH optimum pembuatan nata berkisar
antara 4-5 (Putriana, 2016). Pada praktikum ini pH media diatur menjadi 4,5 dan 2.
3. Suhu
Suhu yang dibutuhkan dalam pembuatan nata adalah suhu kamar (28C - 31C)
karena Acetobacter xylinum merupakan bakteri mesofil yang dapat hidup pada suhu
(25 40oC) (Putriana, 2016).
NATA de LAPPACEUM
4. Kebutuhan Oksigen
Bakteri nata Acetobacter xylinum merupakan mikroba anaerobik fakultatif yang
hanya membutuhkan sedikit oksigen. Maka dari itu pada proses fermentasi, larutan
media ditutup karena tidak boleh terekena udara langsung (Pambayun, 2002).
5. Penutup
Selama proses fermentasi wadah harus tertutup rapat agar kotoran yang terbawa
udara luar tidak dapat mencemari proses fermentasi (Putriana, 2016). Pada
praktikum ini digunakan kertas koran dan daun pisang sebagai penutup.
6. Lama Fermentasi
Pada kondisi yang sesuai, lapisan nata terbentuk dipermukaan media akan terlihat
pada hari ketiga sampai keempat pemeraman. Secara perlahan-lahan dalam jangka
waktu 8-14 hari lapisan tersebut semakin menebal (Putriana, 2016). Pada praktikum
ini lama waktu fermentasi yaitu 6 hari.
7. Sumber Karbon
Menurut penelitian yang dilakukan oleh Hamad, dkk (2011), sumber karbon dari
monosakarida dan disakarida akan menghasilkan nata yang lebih banyak
dibandingkan dengan sumber karbon polisakarida. Hal ini dikarenakan reaksi
hidrolisa polisakarida lebih komplek sehingga membutuhkan waktu yang lebih lama
untuk mendapatkan hasil glukosa.
8. Sumber Nitrogen
Menurut Intan dkk (2010), penggunaan sumber nitrogen anorganik pada pembuatan
nata de coco lebih menguntungkan dibandingkan dengan nitrogen organik karena
lebih murah, mudah larut dan selektif bagi mikroorganisme lain dan aman untuk
dikonsumsi.
9. Sanitasi
Bekerja dengan mikroorganisme dituntut adanya tingkat sanitasi yang tinggi.
Sanitasi meliputi : sanitasi perorangan, lingkungan dan peralatan, harus dikontrol
dan dijaga agar bakteri tidak terkontaminasi (Putriana, 2016).
10
NATA de LAPPACEUM
2.5 Fungsi Masing-Masing Reagen
1. KH2PO4
Monopotasium fosfat merupakan suatu senyawa yang berperan sebagai
media suatu jenis mikroba autotrof (Wahyudi, 2003). Kegunaan senyawa ini
dalam praktikum nata adalah sebagai sumber dari nutrien mikro yang dibutuhkan
untuk metabolisme sel oleh mikroba yaitu potasium dan fosfat (Khoirunisa dkk.,
2012)
2. MgSO4
Magnesium Sulfat merupakan suatu senyawa penyumbang nutrient mikro
dan sebagai media suatu jenis mikroba autotrof (Wahyudi,2003). Nutrien yang
disumbangkan oleh magnesium sulfat yaitu berupa nutrien magnesium yang
dibutuhkan dalam perkembangan bakteri (Khoirunisa dkk., 2012).
3. Ammonium Sulfat
Senyawa ammonium sulfat merupakan salah satu penyumbang nutrien
makro yang sangat berpengaruh dalam pertumbuhan bakteri. Nutrien yang
disumbangkan oleh senyawa ammonium sulfat yaitu merupakan nutrien nitrogen
(N) yang akan membantu pertumbuhan bakteri dan merangsang terbentuknya
struktur nata yang tebal kompak (Wahyudi, 2003).
4. Acetobacter xylinum
Bakteri Acetobacter xylinum merupakan bakteri yang ditambahkan sebagai
starter produksi nata. Bakteri ini berperan dalam pembentukan gel atau pellicle
(Indarti, dkk., 2011).
5. Sukrosa
Sukrosa merupakan nutrien makro sebagai sumber utama glukosa, dimana
glukosa berasal dari reaksi hidrolisis antara sukrosa dan air. Glukosa merupakan
nutrient penting yang dibutuhkan oleh bakteri untuk berkembang biak (Indarti
dkk., 2011). Sukrosa sebagai sumber karbon yang berperan dalam penyusunan
sel-sel bakteri dan sebagai sumber energi (Wulan, dkk., 2009).
11
NATA de LAPPACEUM
2.6 Reaksi Pembentukan Nata
Reaksi yang terjadi pada pembuatan nata setelah fermentasi akan
membentuk gel pada permukaan media cairnya. Gel yang terbentuk ini disebut
pellicle. Proses terbentuknya pellicle merupakan rangkaian aktifitas bakteri
Acetobacter xylinum dengan nutrien yang ada pada media cair. Dalam penelitian
ini nutrien yang mengandung glukosa adalah Tropicana slim. Glukosa terbentuk
melalui reaksi hidrolisis sukrosa dengan air (Indarti dkk., 2011).
Glukosa yang berperan dalam pembentukan selulosa adalah glukosa dalam
bentuk sehingga semua glukosa yang ada dalam bentuk akan diubah dalam
bentuk melalui enzim isomerase yang berada pada bakteri Acetobacter
xylinum. Perubahan pada bentuk terjadi pada gugus OH pada atom C-1 seperti
yang dapat dilihat pada Gambar 2.9 (Indarti dkk., 2011).
Gambar 2.9 Reaksi glukosa dalam bentuk diubah dalam bentuk oleh enzim
isomerase
Tahap berikutnya glukosa berikatan dengan glukosa yang lain melalui
ikatan 1,4 - glikosida. Ikatan ini terjadi antara gugus OH pada atom C-1 dari
satu glukosa dengan gugus OH pada atom C-4 dari glukosa yang lain seperti
yang dapat dilihat pada gambar 2.10 (Indarti dkk., 2011).
12
NATA de LAPPACEUM
glukosa
glukosa
disakarida
Gambar 2.10 Reaksi pembentukan disakarida dengan ikatan glikosida

Tahap terakhir adalah tahap polimerisasi yaitu pembentukan selulosa.
Polimerisasi ini terjadi melalui enzim polimerisasi yang ada pada bakteri
Acetobacter xylinum. Secara fisik pembentukan selulosa adalah terbentuknya
pellicle. Dengan demikian ketebalan yang berbeda pada variasi waktu inkubasi
berkaitan proses polimerisasi oleh aktifitas bakteri yang terus berlangsung seperti
yang dilihat pada Gambar 2.11 (Indarti dkk., 2011).
disakarida
Gambar 2.11 Reaksi polimerisasi disakarida menjadi glukosa.

2.7 Sumber Sumber Nitrogen
1. Ammonium Sulfat (NH4)2SO4) atau ZA
Berbentuk Kristal, berwarna putih, abu-abu, kebiru-biruan atau kuning tetapi paling
banyak berwarna putih seperti gula pasir. Senyawa ini mengandung nitrogen
sebanyak 20,4-21% bersifat higroskopis dan baru akan menyerap air bila
kelembaban nisbi 80% pada 30oC (Hardjowigono, 1987).
13
NATA de LAPPACEUM
Ammonium sulfat merupakan sumber nitrogen bagi tanaman yang paling banyak
digunakan di Indonesia sebagai pupuk. Ammonium sulfat dapat pula digunakan
sebagai sumber nitrogen untuk membantu pertumbuhan Acetobacter xylinum pada
proses pembuatan pelikel selulosa bakteri (Steinkraus dkk., 1983)
2. Urea (CO(NH2)2)
Urea mengandung 46% Nitrogen, karena kandungan N yang tinggi menyebabkan
urea menjadi sangat higroskopis. Urea sangat mudah larut dalam air dan bereaksi
cepat, juga mudah menguap dalam bentuk ammonia. Karena memiliki kandungan
nitrogen yang tinggi maka urea dapat dijadikan sebagai sumber nitrogen bagi
bakteri Acetobacter xylinum pada proses pembentukan selulosa bakteri (Marianto,
2002).
3. Yeast Ekstrak
Yeast extract terbuat dari ragi pengembang roti atau pembuat alkohol. Yeast extract
mengandung asam amino yang lengkap & vitamin (B complex). Yeast ekstrak
merupakan sumber nutrisi dalam media pembuatan selulosa.
Dari ketiga sumber nitrogen di atas, sumber nitrogen urea menghasilkan hasil yang
lebih baik dan paling sering digunakan dalam pembuatan nata, karena kandungan
nitrogennya tinggi dapat digunakan sebagai sumber nutrisi oleh bakteri Acetobacter
xylinum untuk memperoleh selulosa (Yoshinaga dkk., 1997).
2.8 Perbedaan Selulosa Tumbuhan dan Bakteri
Selulosa merupakan komponen utama dari dinding sel tumbuhan. Selain
ditemukan alami ternyata selulosa mampu diproduksi oleh bakteri atau dikenal dengan
istilah bioselulosa atau selulosa bakteri. Selulosa tumbuhan dan selulosa bakteri
memiliki struktur kimia yang sama, namun sifat fisik dan kimianya berbeda. Salah satu
keunggulan utama selulosa bakteri adalah kemurniannya yang tinggi jika dibandingkan
dengan selulosa tumbuhan yang menghasilkan lignin dan produk hemiselulosa lainnya
(Bielecki dkk., 2006). Selulosa bakteri diproduksi oleh bakteri penghasil asam asetat.
Diameter dari bioselulosa atau selulosa bakteri sekitar 1/100 dari diameter selulosa
tumbuhan (Panesar dkk., 2005).
14
NATA de LAPPACEUM
Selulosa yang dihasilkan dari proses fermentasi merupakan sejenis polisakarida
mikrobial yang tersusun oleh serat-serat selulosa yang dihasilkan oleh Acetobacter
xylinum, subspesies dari Acetobacter aceti, bakteri gram negatif, berbentuk batang
dan non pathogen. Pada proses metabolismenya selaput selulosa terbentuk oleh
aktivitas Acetobacter xylinum terhadap glukosa. Karbohidrat pada medium dipecah
menjadi glukosa yang kemudian berikatan dengan asam lemak (Guanosin trifosfat)
membentuk prekursor penciri selulosa oleh enzim selulosa sintase kemudian
dikeluarkan kelingkungan membentuk jalinan selulosa pada permukaan medium
(Chng dan Muhamad, 2010). Meskipun banyak jenis bakteri seperti Agrobacterium,
Pseudomonas, Rhizobium, dan Sarcina yang mampu mensintesis selulosa bakteri,
namun Acetobacter dapat menghasilkan kapasitas produksi selulosa tertinggi (Aydin
dan Aksoy, 2009).
2.9 Teori Fehling
Larutan Fehling ialah suatu larutan yang digunakan dalam uji kimia untuk
membedakan antara karbohidrat larut dalam air dan gugus fungsional keton, dan
sebagai suatu uji untuk monosakarida. Uji ini dikembangkan oleh ahli kimia Jerman
Herman von Fehling pada tahun 1849.
Pembuatan Larutan Fehling
Larutan Fehling selalu dibuat segar di laboratorium. Larutan ini semula dibuat
sebagai dua larutan yang terpisah, yang dikenal dengan Fehling A dan Fehling B.
Fehling A adalah larutan encer berwarna biru dari tembaga(II) sulfat, sedang Fehling B
adalah larutan jernih dari kalium natrium tartrat encer (jugas dikenal sebagai garam
Rochelle) dan basa kuat (biasanya natrium hidroksida).
Volume yang sama dari dua campuran dicampurkan untuk memperoleh larutan
final Fehling, yang berwarna biru gelap. Dalam campuran akhir ini, ion tartrat encer
dari khelat garam Rochelle yang terlarut dengan ion Cu2+ dari tembaga(II) sulfat yang
terlarut, sebagai ligan bidentat memberikan kompleks bis-tartrato-kuprat(II)4-. Ion
tartrat, dengan mengomplekskan tembaga mencegah pembentukan Cu(OH)2 dari
reaksi CuSO4.2H2O dan NaOH yang ada dalam larutan.
15
NATA de LAPPACEUM
Jadi cara membuat larutan ini adalah:
Larutan Fehling A: Timbang 69,3 gr kupri sulfat hidrat CuSO4.5H2O dan larutkan
dalam 1 liter akuades. Supaya larutan menjadi jernih tambahkan 1 tetes atau 2 tetes
H2SO4 pekat. Perbandingan dapat diperbesar atau diperkecil.
Larutan Fehling B: Timbang 346 gr Kalium-Natrium-Tartrat dan 100 gr NaOH
larutkan dalam 1 liter akuades (perbandingan dapat diperbesar atau diperkecil). Bila
akan digunakan Fehling A + Fehling B dalam volume yang sama.
Kegunaan Larutan Fehling
Fehling dapat digunakan untuk menentukan apakah suatu senyawa mengandung
karbonil aldehid atau keton. Kompleks bistartratokuprate(II) dalam larutan Fehling
merupakan bahan pengoksidasi dan reagen aktif dalam uji tersebut. Senyawa yang
akan diuji ditambahkan ke larutan Fehling dan campuran ini dipanaskan. Aldehida
yang teroksidasi, memberikan hasil yang positif, namun keton tidak bereaksi, kecuali
mereka adalah alfa-hidroksiketon.
Kompleks bistartratokuprat(II) mengoksidasi aldehid pada satu anion karboksilat,
dan dalam proses ion tembaga(II) dari kompleks ini direduksi menjadi ion tembaga(I).
Oksida tembaga(I) yang merah kemudian mengendap dari campuran reaksi, yang
menunjukkan hasil positif, yaitu reaksi redoks telah berlangsung (ini adalah hasil
positif yang sama dengan larutan Benedict). Sebuah hasil yang negatif apabila tidak
terjadi endapan merah; ini penting untuk diperhatikan bahwa fehling tidak akan bekerja
dengan aldehid aromatik; sehingga reagen Tollens harus digunakan.
Uji Fehling dapat digunakan sebagai uji generik untuk monosakarida. Hal ini akan
memberikan hasil positif untuk monosakarida aldosa (karena gugus aledehida dapat
dioksidasi) tetapi juga untuk monosakarisa ketosa, karena mereka diubah menjadi
aldosa oleh basa dalam reagen tersebut, dan kemudian memberikan hasil positif. Untuk
alasan ini, reagen fehling kadang-kadang disebut sebagai uji umum untuk
monosakarida.
Reagen fehling dapat digunakan untuk menunjukkan glukosa dalam urin,
sehingga mendeteksi diabetes. Penggunaan lainnya adalah dalam pemecahan pati untuk
16
NATA de LAPPACEUM
mengubahnya menjadi sirup glukosa dan maltodekstrin untuk mengukur jumlah gula
pereduksi, sehingga dapat mengungkapkan setara dekstrosa (DE) dari gula pati.
Uji fehling ini digunakan untuk mengetahui adanya kandungan gula pereduksi
dalam karbohidrat. Gula pereduksi adalah karbohidrat yang dapat mereduksi senyawa
pengoksidasi lemah seperti Cu dalam pereaksi fehling. Agar berfungsi sebagai gula
pereduksi, karbohidrat harus mempunyai fungsi aldehid atau gugus fungsi hemi asetal
yang dapat membuka menjadi aldehid.
Reaksi yang terjadi sebagai berikut :
CuSO4 + 2KOH --> Cu(OH)2 + K2SO4
Cu(OH)2 dipanaskan --> CuO + [[H2O]]
D-glukosa + 2 CuO dipanaskan --> D-asam glukonat + Cu2O (mengendap).
Dalam pembahasan ini larutan sample yang diuji adalah larutan sari rambutan
Apabila larutan sample ditambah pereaksi fehling (A+B) dan kemudian dipanaskan
dan dititrasi dengan glukosa standar sampai menghasilkan warna biru hampir hilang
kemudian ditambahkan 2 tetes MB dan di titrasi kembali dengan glukosa standar
sambil dipanaskan hingga warna biru menjadi merah bata (Handoyo, 2009).
17
NATA de LAPPACEUM
BAB III
METODOLOGI PERCOBAAN
3.1 Rancangan Praktikum

3.1.1 Skema Rancangan Percobaan
Persiapan Bahan Baku :
Sterilisasi dengan pendidihan
Sterilisasi
Pengaturan pH
Sterilisasi Alat :
Menggunakan Autoclave
Penambahan Nutrien
Penambahan Acetobacter xylinum
Fermentasi selama 6 hari
Analisa: pH, , kadar glukosa

Gambar 3.1 Skema rancangan percobaan
3.1.2 Variabel Operasi
Variabel Tetap :
a. Bahan baku sari rambutan
b. KH2PO4 2 gram.
c. MgSO4 2 gram.
d. Tropicana slim 19,94 gram
Varibel Berubah :
a. pH
: 4,5
2
b. Sumber Nitrogen
: Ammonium Sulfat 2 gram

Urea 2 gram
18
NATA de LAPPACEUM
c. Penutup
: Kertas koran
Daun pisang
d. Penambahan bakteri : Acetobacter xylinum 18%V

Acetobacter xylinum 20%V
3.2 Bahan dan Alat yang Digunakan
3.2.1 Bahan
1 Sari rambutan 882 ml
5 KH2PO4 12 gram
2 NH4SO4 6 gram
6 Tropicana slim 79,96 gram
3 CO(NH2)2 6 gram
7 Acetobacter xylinum 198 ml
4 MgSO4 12 gram
8 NaOH & CH3COOH secukupnya
3.2.2 Alat
1 Kompor listrik
2 Beaker glass
3 Autoclave
4 Gelas ukur
5 Pengaduk
6 Buret, statif, klem
3.3 Gambar Rangkaian Alat
Gambar 3.2 Rangkaian alat titrasi

19
NATA de LAPPACEUM
3.4 Cara Kerja
3.4.1 Pembuatan Nata
1. Saring sari rambutan
2. Didihkan, setelah dingin tambahkan nutrien antara lain KH2PO4, MgSO4,
Tropicana slim dan Ammonium sulfat/Urea
3. Atur pH sampai 4,5 dan 2 menggunakan CH3COOH dan NaOH.
4. Masukkan kedalam beaker glass.
5. Tambahkan starter Acetobacter xylinum 18%V dan 20%V.
6. Fermentasikan pada 30oC selama 6 hari.
7. Panen nata yang terbentuk
8. Cuci nata dan keringkan
9. Timbang nata
3.4.2 Analisa Glukosa
3.4.2.1 Pembuatan glukosa standar
1. Ambil 2,5 gram glukosa anhidrit
2. Encerkan hingga 1000 ml
3.4.2.2 Standarisasi kadar glukosa
1. Ambil 5 ml glukosa standar, encerkan hingga 100 ml, ambil 5 ml,
netralkan pHnya
2. Tambahkan 5 ml fehling A dan 5 ml fehling B
3. Panaskan hingga 60 70 oC
4. Titrasi dengan glukosa standar sambil dipanaskan 60 70 oC
sampai warna biru hampir hilang, lalu tambahkan 2 tetes MB
5. Titrasi kembali dengan glukosa standar sambil dipanaskan 60 70
o
C sampai warna biru menjadi merah bata
6. Catat kebutuhan titran (F)

3.4.2.3 Menghitung kadar glukosa bahan
1. Ambil 5 ml bahan, encerkan hingga 100 ml, ambil 5 ml lalu
netralkan pHnya
20
NATA de LAPPACEUM
2. Tambahkan 5 ml fehling A dan 5 ml fehling B, dan tambahkan 5
ml glukosa standar yang telah diencerkan
3. Panaskan hingga 60 70 oC
4. Titrasi dengan glukosa standar sambil dipanaskan 60 70 oC
5. Titrasi kembali dengan glukosa standar sambil dipanaskan 60 70
o
C sampai warna biru menjadi merah bata
6. Catat kebutuhan titran (M)
%S =
21
NATA de LAPPACEUM
BAB IV
HASIL PERCOBAAN DAN PEMBAHASAN
4.1 Fenomena Kadar Glukosa
Gambar 4.1 Fenomena kadar glukosa

Dari gambar di atas, diketahui bahwa nilai %S (kandungan glukosa) pada
proses fermentasi Nata de lappaceum sebelum dan sesudah fermentasi berbeda.
Nilai %S awal selalu lebih besar dibandingkan dengan kandungan glukosa akhir
pada setiap variabel. Hal ini disebabkan karena di awal atau hari ke-0 belum adanya
proses fermentasi oleh bakteri Acetobacter xylinum, sedangkan di akhir nilai
kandungan glukosa mengalami penurunan dengan adanya pemakaian sumber
karbon sebagai energi oleh bakteri fermentasi tersebut untuk mempolimerisasikan
glukosa menjadi selulosa karena pada dasarnya nata adalah selulosa yang dihasilkan
oleh fermentasi bakteri Acetobacter xyinum. Oleh karena itu semakin lama waktu
fermentasi, kadar glukosa yang terbentuk semakin berkurang (Edria dkk., 2008).
22
NATA de LAPPACEUM
4.2 Fenomena pH
Gambar 4.2 Fenomena pH

Dari gambar di atas, terlihat bahwa terjadi perubahan pH sebelum dan sesudah
fermentasi. Pada variabel 1,2,3,5 dan 6 pH awal adalah 4,5 dan menjadi lebih asam
di akhir fermentasi. Sedangkan pada variabel 4 terjadi perubahan pH dari 2 menjadi
3. Hal ini disebabkan karena proses fermentasi oleh bakteri Acetobacter xylinum
terjadi pada pH optimum keadaan asam sesuai di literature yaitu 3-4. Setiap
perubahan kecil pH dapat menyebabkan perbedaan besar pada kecepatan beberapa
reaksi enzimatik. Penurunan pH pada variabel 1,2,3,5 dan 6 terjadi akibat fermentasi
karbohidrat menjadi asam sehingga semakin lama fermentasinya maka akan
semakin cenderung terjasi penurunan pH medium (Hubeis, 1996). Sedangkan pada
variabel 4 terjadi kenaikan pH dari 2 ke 3, hal ini disebabkan karena bakteri
Acetobacter xylinum mempunyai tiga enzim yang aktif yaitu enzim kinase, enzim
ekstraseluler selulosa polymerase, dan enzim protein sintetase yang aktif di keadaan
asam dengan pH 3-6 yang berfungsi untuk membentuk benang-benang selulosa
(nata) dan untuk mengubah makanan yang mengandung C,H,O dan N menjadi
protein (Mendel, 2004). Sehingga terjadi kenaikan pH dari pH 2 ke pH 3 untuk
mencapai keaktifan dari enzim tersebut.
23
NATA de LAPPACEUM
4.3 Fenomena Densitas
Gambar 4.3 Fernomena densitas

Dari gambar di atas, ditunjukkan bahwa pada proses pembuatan nata
mengalami penurunan densitas untuk semua variabel. Densitas setelah fermentasi
lebih rendah dibandingkan sebelum fermentasi, hal ini disebabkan oleh
berkurangnya kandungan gula dalam larutan dikarenakan adanya pemakaian sumber
karbon sebagai energi oleh bakteri fermentasi tersebut untuk mempolimerisasikan
glukosa menjadi selulosa. Kandungan gula dalam medium fermentasi tersebut
terukur sebagai kadar glukosa selama proses fermentasi (Edria dkk., 2008).
Penurunan densitas juga dapat terjadi dengan berkurangnya kandungan
nutrient lain seperti ammonium sulfat dan urea yang dapat digunakan sebagai
sumber nitrogen untuk membantu pertumbuhan Acetobacter xylinum pada proses
pembuatan pelikel selulosa bakteri selama proses fermentasi (Steinkraus dkk.,
1983).
Nata dibentuk oleh spesies bakteri asam asetat pada permukaan cairan yang
mengandung gula, sari buah, atau ekstrak tanaman lain (Lapuz et al., 1967). Ditinjau
dari densitas asam asetat yaitu 1,049 gr/ml, densitas pada awal fermentasi lebih
besar karena pada awal fermentasi belum ada asam asetat yang terbentuk dan
mengalami penurunan pada akhir fermentasi, karena ada asam asetat yang terbentuk
walaupun dalam percobaan tidak ada nata yang terbentuk, hal yang terjadi
diakibatkan ketika proses fermentasi, Acetobacter xylinum merubah glukosa pada
sari rambutan menjadi alkohol dan gas CO2 sehingga massa pada media fermentasi
24
NATA de LAPPACEUM
berkurang karena nutrisi yang ada pada media fermentasi telah disintesis oleh
bakteri Acetobacter xylinum (Deriven, 2015).
4.4 Pengaruh Sumber Nitrogen pada Proses Pembuatan Nata
Gambar 4.4 Variabel 1 dengan sumber nitrogen ammonium sulfat (NH4)2SO4)
Gambar 4.5 Variabel 2 dengan sumber nitrogen urea (CO(NH2)2)

Dari gambar diatas, terlihat bahwa hasil pembuatan nata dengan sumber
nitrogen dari urea lebih bagus dibandingkan dengan sumber nitrogen dari
ammonium sulfat. Hal ini disebabkan karena jumlah nitrogen dapat meningkatkan
jumlah selulosa. Ketika urea memberikan sumber nitrogen yang lebih besar yaitu
46% dibandingkan dengan ammonium sulfat yaitu 20,4-21% , sehingga selulosa
yang terbentuk menjadi lebih besar pula (Hardjowigono, 1987).
25
NATA de LAPPACEUM
Tabel 4.1 Perbandingan nutrisi dalam sumber nitrogen pada masing-masing variabel
Kandungan
Ammonium
Urea
sulfat
Nitrogen
21%
46%
Sulfur
24%
Karbon
20%
Air
1%
0,5%
Ketika nata yang dihasilkan lebih berat maka kecenderungan air yang
terkandung di dalamnya semakin sedikit, hal ini menunjukkan bahwa jumlah nitrogen
memberikan kontribusi terhadap selulosa yang dihasilkan. Sehingga pada variabel 2
dengan sumber nitrogen urea menunjukkan hasil yang lebih baik dibandingkan variabel
1 dengan sumber nitrogen dari ammonium sulfat ditinjau dari kadar glukosa pada akhir
fermentasi variabel 2 lebih sedikit dari variabel 1 (Yoshinaga dkk., 1997).
4.5 Pengaruh Perbedaan penutup pada proses pembuatan Nata
Gambar 4.6 Variabel 2 dengan penutup medium fermentasi daun pisang
26
NATA de LAPPACEUM
Gambar 4.7 Variabel 3 dengan penutup medium fermentasi kertas

Dari gambar di atas, dilihat bahwa hasil dari fermentasi proses pembuatan nata
dengan penutup daun pisang lebih baik dibandingkan dengan penutup menggunakan
kertas. Dalam percobaan pembuatan nata ini menggunakan bakteri Accetobacter
xylinum yang merupakan bakteri aerob yang dapat mengoksidasi asam asetat menjadi
CO2 dan H2O. Sifat yang paling menonjol dari bakteri ini adalah memiliki kemampuan
untuk mempolimerisasi glukosa sehingga menjadi selulosa. Selanjutnya, selulosa
tersebut membentuk matrik yang dikenal sebagai nata. Namun Accetobacter xylinum
juga mempunyai sifat mudah rusak dan tidak suka cahaya (Mendel, 2014).
Pembuatan nata ini menggunakan penutup medium fermentasi dengan daun
pisang pada variabel 2 dan menggunakan penutup kertas pada variabel 3. Dengan hasil
variabel 2 lebih baik dibandingkan dengan variabel 3 seperti pada gambar di atas, yaitu
selulosa yang dihasilkan pada variabel 2 lebih banyak dari variabel 3. Hal ini
dikarenakan pori-pori pada daun pisang lebih besar dibandingkan dengan pori-pori
pada kertas koran yaitu sekitar 2,49 m untuk daun pisang dan 2.23 m untuk kertas
koran. Hal tersebut dikarenakan fermentasi Acetobacter xylinum tidak boleh
berlangsung pada tempat yang terlalu rapat. Untuk mencukupi kebutuhan oksigen pada
ruang fermentasi nata harus tersedia cukup ventilasi. Namun aliran udara tidak boleh
langsung kontak dengan permukaan nata (Pambayun, 2002).
Selain itu penggunaan kertas koran bagi penutup nata juga tidak baik. Menurut
Suwaidah, dkk (2014), bahaya yang ditimbulkan dari kertas bekas adalah adanya
kemungkinan kontaminasi mikroorganisme yang sudah berada pada kertas bekas,
27
NATA de LAPPACEUM
sehingga dapat merusak produk pangan. Pada tinta kertas koran juga mengandung
timbal yang dapat perpindah pada produk dan berbahaya bagi makhluk hidup jika
terkonsumsi (Suwaidah, dkk., 2014).
4.6 Pengaruh perbedaan pH pada proses fermentasi
Gambar 4.8 Variabel 2 dengan pH awal 4,5
Gambar 4.9 Variabel 4 dengan pH awal 2

Dari gambar di atas, dilihat bahwa adanya perbedaan hasil fermentasi pada
proses pembuatan nata variabel 2 dan variabel 4. Variabel 2 dengan pH fermentasi
4,5 terlihat lebih bagus dibandingkan variabel 4 dengan pH 2. Hal ini terjadi karena
pH dapat mempengaruhi proses fermentasi pada pembuatan nata. Nata terbentuk
dengan adanya selulosa yang dihasilkan oleh bakteri Acetobacter xylinum pada proses
fermentasi. Sedangkan pH optimum untuk pembentukan nata adalah 3.5-7.5 dan
bakteri Acetobacter xylinum bekerja optimum pada pH 3-4 (Mendel, 2004).
28
NATA de LAPPACEUM
Aktivitas bakteri Acetobacter xylinum sangat dipengaruhi oleh kondisi
lingkungan dengan pH. Jika kondisi lingkungan terlalu basa maka akan mengganggu
metabolisme selnya, pada proses metabolismenya selaput selulosa ini terbentuk oleh
aktivitas Acetobacter xylinum terhadap glukosa pada keadaan asam. Karbohidrat pada
medium dipecah menjadi glukosa yang kemudian berikatan dengan asam lemak
(Guanosin trifosfat) membentuk selulosa oleh enzim selulosa sintetase. Begitu pula
sebaliknya jika kondisi lingkungan terlalu asam, kerja bakteri ini tidak berjalan
optimal. Namun pada percobaan pembuatan nata di atas, variabel 2 dengan pH 4,5
menghasilkan kadar glukosa yang lebih besar dari variabel 4 dengan pH 2. Hal ini
dikarenakan pada saat titrasi, suhu variabel 2 melebihi 70oC, sehingga TAT atau titik
akhir titrasi yang terbentuk lebih cepat sehingga menyebabkan titran pada variabel 2
lebih banyak dibandingkan titran pada variabel 4 sehingga kadar glukosa yang
dihasilkan lebih besar (Arianti, 2014).
4.7 Pengaruh banyaknya Acetobacter xylinum
Gambar 4.10 Variabel 5 dengan Acetobacter xyllinum 18%V
29
NATA de LAPPACEUM
Gambar 4.11 Variabel 6 dengan Acetobacter xyllinum 20%V

Dari gambar di atas, dilihat bahwa hasil dari percobaan pembuatan nata
variabel 5 dengan jumlah Acetobacter xylinum 18% V lebih baik dibandingkan
variabel 6 dengan jumlah Acetobacter xylinum 20%. Banyaknya bakteri Acetobacter
xylinum yang ditambahkan pada proses fermentasi pembuatan nata dapat
mempengaruhi hasil dari pembuatan nata. Ketebalan nata merupakan banyaknya gula
(sukrosa) yang dapat diubah oleh bakteri Acetobacter xylinum sehingga yang terbentuk
juga semakin tinggi (Hidayat dkk., 2013). Sedangkan bakteri Acetobacter xylinum
yang dapat mengambil glukosa dari larutan gula kemudian digabungkan dengan asam
lemak dan keluar bersama enzim yang mempolimerisasikan glukosa menjadi selulosa
ini bekerja efektif pada kondisi lingkungan dengan pH 3-4 dan pada keaadan optimum
jumlah bakteri Acetobacter xylinum pada proses pembuatan nata. Pada percobaan ini,
kondisi bakteri Acetobacter xylinum 18%V lebih tumbuh optimum karena pada
variabel 5 penurunan kadar glukosa lebih banyak sehingga nata yang terbentuk lebih
banyak dibandingkan dengan penurunan kadar glukosa pada variabel 6 dengan jumlah
Acetobacter xylinum 20%V dimana nata yang terbentuk lebih sedikit. Hal ini
dikarenakan berkurangnya saingan Acetobacter xylinum dalam mendapatkan nutrient
dari sumber nutrisi yang digunakan, sehingga dapat disimpulkan jumlah bakteri
Acetobacter xylinum dapat mempengaruhi banyaknya nata yang terbentuk (Hestrin
dkk., 1958).
30
NATA de LAPPACEUM
BAB V
PENUTUP
5.1 Kesimpulan
1. Kadar glukosa (%S) pada pembuatan nata de lappaceum awal lebih besar
dibandingkan kadar glukosa akhir karena di awal belum adanya proses
fermentasi oleh bakteri Acetobacter xylinum.
2. Pebedaan pH awal dan akhir pada pembuatan nata de lappacium berubah ke
keadaan optimum yaitu pH 4 karena bakteri Acetobacter xylinum mempunyai
tiga enzim yang aktif yaitu enzim kinase, enzim ekstraseluler selulosa
polymerase, dan enzim protein sintetase yang aktif di keadaan asam dengan pH
3-6.
3. Densitas pada pembuatan nata de lappacium awal lebih besar dibandingkan
densitas akhir karena pada awal fermentasi belum ada asam asetat yang
terbentuk dan mengalami penurunan pada akhir fermentasi, karena ada asam
asetat yang terbentuk walaupun dalam percobaan tidak ada nata yang terbentuk.
4. Sumber nitrogen urea (CO(NH2)2) menghasilkan nata lebih baik dibandingkan
dengan sumber nitrogen ammonium sulfat (NH4SO4) karena jumlah nitrogen
dapat meningkatkan jumlah selulosa.
5. Medium
fermentasi
pembuatan
nata
de
lappacium
dengan
penutup
menggunakan daun pisang lebih baik dibandingkan medium fermentasi dengan

penutup kertas fermentasi Acetobacter xylinum tidak boleh berlangsung pada
tempat yang terlalu rapat.
6. pH pembuatan nata de lappacium 4,5 menghasilkan nata yang lebih baik
dibandingkan dengan pH 2 karena pada saat titrasi, suhu variabel 2 melebihi
70oC, sehingga TAT atau titik akhir titrasi yang terbentuk lebih cepat.
7. Jumlah bakteri Acetobacter xylinum 18%V menghasilkan nata yang lebih baik
dibandingkan dengan jumlah bakteri Acetobacter xylinum 20%V karena
berkurangnya saingan Acetobacter xylinum dalam mendapatkan nutrient dari
sumber nutrisi yang digunakan.
31
NATA de LAPPACEUM
5.2 Saran
1. Sebaiknya menggunakan sumber nitrogen dengan kadar yang tinggi sebagai
nutrisi pada proses fermentasi pembuatan nata.
2. pH proses pembuatan nata dijaga agar dalam keadaan asam.
3. Penutup medium fermentasi yang digunakan menggunakan penutup yang sukar
menyerap cahaya.
4. Bakteri Acetobacter xylinum yang digunakan berjumlah optimum sesuai dengan
%V yang digunakan.
5. Tempatkan bakteri Acetobacter xylinum pada keadaan yang kurang cahaya.
32
NATA de LAPPACEUM
DAFTAR PUSTAKA
Arianti, 2014. Pengaruh Suhu terhadap Titik Akhir Titrasi. Universitas Sulawesi Utara.
Aydin dan Aksoy, 2009. Perbedaan Selulosa Tumbuhan dan Selulosa Bakteri.
Semarang.
Deriven, 2015. Pengaruh Densitas terhadap Pertumbuhan Bakteri Acetobacter xylinum.
Surabaya.
Dreecold and Cumn. Industrial Mikrobiology 2nd ed Mc. Graw Hill book Inc, New
York.
Edria dkk., 2008. Jurnal Pembuatan Nata de Pina Universitas Lambung Mangkurat.
Handoyo, 2009. Jurnal Penelitian Pembuatan Nata de Coco dengan Proses Fermentasi.
Malang. Universitas Brawijaya
Hardjowigono, 1987. Kandungan Sumber Nitrogen Bagi Bakteri Acetobakter xylinum.
Kalimantan Utara.
Haryanti, S. 2010. Jumlah dan Distribusi Stomata pada Daun Beberapa Spesies
Tanaman Dikotil dan Monokotil. Buletin Anatomi dan Fisiologi Vol XVIII, No. 2.
Hestrin dkk., 1958. Katakteristik Acetobacter xylinum. Adelaide. University of Adelaide
Hidayat dkk., 2013. Pengaruh Acetobacter xylinum pada Proses Pembuatan Nata de
Coco. Jogjakarta. Jurnal Teknik Pangan.
Holmstad, R., Antoine, C., Silvy, J., Costa, A.P., dan Antoine, J. 2012. Modelling The
Paper Sheet Structure According To The Equivalent Pore Concept. Norwegian
Pulp and Paper Research Institute, PFI, Norway.
Hubeis, 1996. Kebutuhan Yeast Ekstrak pada Pembuatan Nata de Coco. Jakarta Pusat
Lapuz, M. M., Gollardo E.G., & Palo M.A. 1967. The Organism and
CultureRequirements,
Characteristics
and
Identity.
The
Philippine
J.
Science.98:191 109.
Mendel, 2004. Nata de Coco Fermentation. New York University.
Nungki, 2010. Laporan Nata de Pina. Semarang. Laboratorium Mikrobiologi Industri.
Pambayun, Putri, 2002. Proses Pembuatan Nata de Leri dengan Menggunakan Bakteri
Acetobacter xylinum. Jakarta. Jurnal Teknik Kimia.
33
NATA de LAPPACEUM
Steinkraus dkk., 1983. Process of Fermentation Yeast Extract Engineering. University
of Washington.
Suryani, 2005. Laporan nata de Leri. Semarang. Jurnal Teknik Kimia No 1, Vol,19,
Januari 2013.
Suwaidah dkk., 2014. Laporan Nata de Coco. Sumatera Utara. Universitas Sumatera
Utara.
Swissa, M., Aloni, Y., Weinhouse, H. &Benziman, M. 1980. Intermediary step in
Acetobacterxylinum Cellulose Synthesis Studies whit whole Cells and Cell Free
Preparation of the Wild Type and A Celluloses Mutant. J.Bacteriol. 143: 1142
1150.
Yoshinaga dkk., 1999. Sifat Fisik Nata de Coco dari Berbagai Sumber Nitrogen. FT
Unhawas Semarang.
34
LAPORAN SEMENTARA
PRAKTIKUM BIOPROSES
Materi :
NATA de LAPPACEUM
GROUP
: 4-RABU
ANGGOTA : 1. KURNIA AMALIA
NIM:21030114140122
2. VIRANTIKA WIJI PANGESTU NIM:21030114120026

3. YOSIA NADA T.
NIM:21030114140140

TEKNIK KIMIA FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS DIPONEGORO
SEMARANG
A-1
I.
TUJUAN PERCOBAAN
1. Mengkaji proses pembuatan nata dari sari rambutan dengan cara fermentasi.
2. Mengkaji hasil yang diperoleh dengan berbagai variabel yaitu sumber
nitrogen (ammonium sulfat dan urea), perbedaan pH awal fermentasi (pH 4,5
dan pH 2), perbedaan banyaknya bakteri Acetobacter xylinum yang
ditambahkan (18%V dan 20% V), serta jenis penutup (kertas koran dan daun
pisang).
II. PERCOBAAN
2.1 Bahan yang Digunakan
1. Sari getah pepaya 5 gram
2. Sari buah nanas 60 ml
3. Etnol 40 ml
4. Cystein 3 gram
5. Celitw 7.5 gram
6. Nacl 4 gram dan (NH4)2SO4 2 gram
7. NaOH/CH3COOH
8. Aquadest 45 ml
9. Induser enzim
2.2 Alat yang Dipakai
1. Beaker glass
8. Termometer
2. Centrifuge
9. Gelas Ukur
3. Cuvet
10. Pengaduk
4. Kertas saring
11. Stopwatch
5. Magnetic stirer
12. Timbangan
6. Tabung reaksi
13. Indikator pH
7. Erlenmeyer Penghisap
14. Kompor listrik
A-2
2.3 Cara Kerja

2.3.1 Pembuatan Nata
1.
Saring sari rambutan
2.
Didihkan, setelah dingin tambahkan nutrien antara lain KH2PO4,

MgSO4, Tropicanaslim dan Ammonium sulfat/Urea
3.
Atur pH sampai 4,5 dan 2 menggunakan CH3COOH dan NaOH.
4.
Masukkan kedalam beaker glass.
5.
Tambahkan starter Acetobacter xylinum 18%V dan 20%V
6.
Fermentasikan pada 30oC selama 6 hari.
7.
Panen nata yang terbentuk
8.
Cuci nata dan keringkan
9.
Timbang nata
2.3.1 Analisa Glukosa

2.3.1.1Pembuatan glukosa standar
1. Ambil 2,5 gram glukosa anhidrit
2. Encerkan hingga 1000 ml
2.3.1.2 Standarisasi kadar glukosa
1.
Ambil 5 ml glukosa standar, encerkan hingga 100 ml, ambil 5

ml, netralkan pHnya
2.
Tambahkan 5 ml fehling A dan 5 ml fehling B
3.
Panaskan hingga 60 70 oC
4.
Titrasi dengan glukosa standar sambil dipanaskan 60 70 oC

5.
Titrasi kembali dengan glukosa standar sambil dipanaskan 60

70 oC sampai warna biru menjadi merah bata
6.
Catat kebutuhan titran (F)
2.3.2 Menghitung kadar glukosa bahan

1.
Ambil 5 ml bahan, encerkan hingga 100 ml, ambil 5 ml lalu netralkan

pHnya
2.
Tambahkan 5 ml fehling A dan 5 ml fehling B, dan tambahkan 5 ml

glukosa standar yang telah diencerkan
3.
Panaskan hingga 60 70 oC
4.
Titrasi dengan glukosa standar sambil dipanaskan 60 70 oC sampai

warna biru hampir hilang, lalu tambahkan 2 tetes MB
A-3
5. Titrasi kembali dengan glukosa standar sambil dipanaskan 60 70 oC

sampai warna biru menjadi merah bata
6. Catat kebutuhan titran (M)
%S =
2.4 Hasil Percobaan
Variabel
Tinggi Nata de Lappaceum (cm)

Hari 1
Hari 5
Massa Nata de
Lappaceum saat
Hari 6
panen (gr)
1
0,2
0,1
0,14
0,2
0,5
0,1
11,16
0,1
0,5
0,1
10,58
0,1
3,86
0,15
0,5
0,1
2,34
0,1
0,3
0,1
0,35
Variabel
ANALISA GLUKOSA
awal
akhir
(gr/ml)
(gr/ml)
1.108
1,0489
25,2
1.108
1,068
1.108
%S awal
%S akhir
Vol titran
Vol titran
awal (ml)
akhir (ml)
8,58
17
22,5
25,2
7,49
17
23,5
1,0737
25,2
5,12
17
26
1.108
1,079
25,2
3,98
17
27,2
1.108
1,078
25,2
3,25
17
28
1.108
1,028
25,2
6,5
17
24,5
MENGETAHUI,
PRAKTIKAN
Kurnia Viran
Yosia
ASISTEN
Lyan Dea Sagita

NIM 21030113120056
A-4
LEMBAR PERHITUNGAN
1. Kadar Glukosa Awal

a. Variabel 1
F = 45 mL
M = 17 mL
%S
=
=
= 25,2 %
b. Variabel 2
F = 45 mL
M = 17 mL
%S
=
=
= 25,2 %
c. Variabel 3
F = 45 mL
M = 17 mL
%S
=
=
= 25,2 %
d.
Variabel 4
F = 45mL
M = 17 mL
%S
=
=
= 25,2 %
B-1
e. Variabel 5
F = 45mL
M = 17 mL
%S
=
=
= 25,2 %
f. Variabel 6
F = 45mL
M = 17 mL
%S
=
=
= 25,2 %
2. Kadar Glukosa Akhir

a. Variabel 1
F = 31,5 mL
M = 22,5mL
%S
=
= 8,39 %
b. Variabel 2
F = 31,5 mL
M = 23,5mL
%S
= 7,45 %
B-2
c. Variabel 3
F = 31,5 mL
M = 26 mL
%S
=
=
= 5, 12 %
d. Variabel 4
F = 31,5 mL
M = 27,2 mL
%S
=
=
=4%
d. Variabel 5
F = 31,5 mL
M = 28 mL
%S
= 3,26%
e. Variabel 6
F = 31,5 mL
M = 24,5 mL
%S
= 6,5%
B-3
3. Densitas Awal
1. Variabel 1
W picnometer = 20,02 gr
W picnometer + sampel = 49,65 gr
V picnometer = 26,74 mL
=
2. Variabel 2
=
3. Variabel 3
=
4. Variabel 4
B-4
5. Variabel 5
=
6. Variabel 6
=
4. Densitas Akhir
1. Variabel 1
W picnometer + sampel = 85 gr
=
2. Variabel 2
B-5
3.
Variabel 3
=
4. Variabel 4
=
2. Variabel 5
=
3. Variabel 6
B-6
5. Perhitungan sumber karbon (Tropicana slim)
B-7
DATA PENDUKUNG
Berikut adalah fakta nutrisi buah Rambutan

Nilai Gizi per 100 g buah rambutan segar
Sumber: USDA
Energi 343 kJ (82 kcal)
Mineral
Karbohidrat 20.87 g
Calcium 22 mg (2%)
Serat 0.9 g
Iron 0.35 mg (3%)
Lemak 0.21 g
Magnesium 7 mg (2%)
Protein 0.65 g
Manganese 0.343 mg (16%)
Phosphorus 9 mg (1%)
Vitamin
Thiamine (vit. B1) 0.013 mg (1%)
Potassium 42 mg (1%)
Riboflavin (vit. B2) 0.022 mg (2%)
Sodium 11 mg (1%)
Niacin (vit. B3) 1.352 mg (9%)
Zinc 0.08 mg (1%)
Vitamin B6 0.02 mg (2%)
Folate (vit. B9) 8 mg (2%)
Vitamin C 4.9 mg (6%)
Manfaat Buah Rambutan untuk Kesehatan

1. Anti Kanker
Rambutan mengandung antioksidan. Studi yang dilakukan oleh University of Chiang
Mai di Thailand menemukan bahwa buah, biji dan kulit rambutan mengandung
antioksidan kuat yang disebut flavonoid. Beberapa jenis flavonoid diyakini mampu
mengurangi kolesterol, bersifat anti kanker dan anti inflamasi.
2. Melindungi dari efek Radikal Bebas

Salah satu senyawa dalam kulit rambutan adalah asam Galia. Senyawa ini bertindak
sebagai penangkal radikal bebas.
3. Kaya Vitamin C
Rambutan kaya vitamin C. Jika seseorang mengkonsumsi 10 sampai 12 buah
rambutan, maka dia memperoleh 75-90 mg asam askorbat, dua kali lebih banyak dari
jumlah yang disarankan dalam menu sehari-hari. Selain berfungsi sebagai antioksidan, vitamin C dapat mencegah kerusakan sel dan membantu penyerapan zat
besi.
4. Pembentukan Darah
Buah rambutan yang manis ini mengandung sejumlah kecil tembaga. Zat ini
diperlukan sebagai pembentuk dari sel darah putih dan sel-sel darah merah. Selain
itu, rambutan juga mengandung zat besi yang dapat mencegah terjadinya anemia.
5. Pencernaan yang sehat

Rambutan juga memiliki serat yang dapat membantu agar terhindar dari sembelit.
Selain itu, rambutan juga dapat mematikan parasit dalam usus dan membantu
meringankan gejala diare.
- See more at: http://www.tipscaramanfaat.com/kandungan-nutrisi-dan-manfaatrambutan-untuk-kesehatan-818.html#sthash.2Ef4NfpG.dpuf
C-1
Uji Fehling
Digunakan untuk menunjukkan adanya karbohidrat reduksi.
Uji positif ditandai dengan warna merah bata
Prosedur kerja
a. Masukkan 2 mL pereaksi Fehling ke dalam tabung reaksi.
b. Tambahkan 1 mL larutan glukosa 2% ke dalam tabung reaksi tersebut.
c. Panaskan campuran tersebut pada pembakar spiritus.
d. Ulangi langkah a c untuk, sukrosa, amilum dan selulosa.
Pemanasan dalam reaksi ini bertujuan agar gugus aldehida pada sampel terbongkar
ikatannya dan dapat bereaksi dengan ion OH- membentuk asam karboksilat. Cu2O
(endapan merah bata) yang terbentuk merupakan hasil sampingan dari reaksi
pembentukan asam karboksilat.
Hasil percobaan
Dalam percobaan Uji Fehling, sampel Glukosa , Sukrosa, Amilum dan Selulosa yang
diuji dengan pereaksi Fehling (Fehling A + Fehling B) pada masing-masing tabung
dan kemudian dipanaskan , maka Glukosa dan Sukrosa akan menghasilkan endapan
merah bata. Hal yang menyebabkan dihasilkannya endapan merah bata ini karena ini
berasal dari Fehling yang memiliki ion Cu2+ direduksi menjadi ion Cu+ yang dalam
suasana basa akan diendapkan berwarna merah bata (Cu2O). Sedangkan pada sampel
amilum dan selulosa yang diuji dengan pereaksi Fehling (Fehling A + Fehling B) dan
kemudian dipanaskan ternyata larutan berwarna biru dengan sedikit endapan merah
bata.
Hal ini disebabkan karena amilum merupakan polisakarida yang tidak dapat bereaksi
positif dengan Fehling. Amilum bukan gula pereduksi yang tidak mempunyai gugus
aldehid dan keton bebas, sehingga tidak terjadi oksidasi antara amilum + larutan
Fehling, maka tidak terbentuk endapan dan larutan tetap berwarna biru setelah
dipanaskan. Begitupula dengan Selulosa yang merupakan polisakarida yang tidak
dapat bereaksi positif dengan fehling. Reaksi yang terjadi:
CuSO4 + 2KOH --> Cu(OH)2 + K2SO4.
Cu(OH)2 dipanaskan --> CuO + [[H2O]].
D-glukosa + 2 CuO dipanaskan --> D-asam glukonat + Cu2O (mengendap).
C-2
PROSEDUR ANALISA
1. Pembuatan lautan fehling

Larutan Fehling A:
1. Timbang 69,3 gr kupri sulfat hidrat CuSO4.5H2O dan
2. larutkan dalam 1 liter akuades.
3. Supaya larutan menjadi jernih tambahkan 1 tetes atau 2 tetes H2SO4
pekat. Perbandingan dapat diperbesar atau diperkecil.
Larutan Fehling B:
1. Timbang 346 gr Kalium-Natrium-Tartrat
2. Timbang 100 gr NaOH larutkan dalam 1 liter akuades (perbandingan
dapoat diperbesar atau diperkecil).
2. Kalibrasi picnometer
1. Timbang picnometer kosong
2. Isi picnometer dengan air
3. Tentukan suhu ruang (30oC), kemudian lihat pada tabel untuk
menentukan air yaitu 0,998 gr/l.
4. Timbang picnometer yang telah diisi air
5. Menghitung volume picnometer dengan rumus :
3. Perhitungan densitas
1. Timbang picnometer kosong.
2. Isi picnometer dengan larutan sampel.
3. Timbang picnometer yang telah diisi larutas sampel.
4. Menghitung densitas sampel dengan rumus:
D-1
4. Autoclave
Sterilisasi alat-alat percobaan menggunakan uap dengan cara:
1. Isi autoclave dengan air.
2. Masukkan alat yang di autovlave dengan dilapisi kertas.
3. Pasangkan pegas sesuai tempatnya.
4. Tutup dan kunci autoclave.
5. Nyalakan autoclave dan atur suhu tinggi suhu tinggi 120oC.
6. Waktu operasi kurang lebih 15 menit.
7. Matikan autoclave kemudian buka kunci penutup dan ambil alat yang telah
di autoclave.
D-2
LEMBAR KUANTITAS REAGEN

TEKNIK KIMIA UNIVERSITAS DIPONEGORO
PRAKTIKUM KE
MATERI
HARI/TANGGAL
KELOMPOK
NAMA
:3
: NATA de LAPPACEUM
: RABU, 23 MARET 2016
: 4 / RABU
:1. KURNIA AMALIA
2. VIRANTIKA WIJI PANGSTU
3. YOSIA NADA T
ASISTEN
KUANTITAS REAGEN
: LYAN DEA SAGITA
Basis 180 ml
Sari rambutan
Ammonium sulfat @2gr
MgSO4 @2gr
KH2PO4 @2gr
Tropicana slim @10%
CO(NH2) @2gr
A.xylinum
18%V 18%V 18%V 18%V 18%V 20%V
Penutup
DP
DP
Kertas
DP
DP
DP
pH
4,5
4,5
4,5
4,5
4,5
Praktikum = pH awal, awal, dan %S awal

PL
= ukur tinggi nata
Panen
= Timbang berat nata + foto nata,
pH akhir, akhir, %S akhir
Waktu Fermentasi = 6x24 jam
pH CH3COOH, NaOH
TUGAS TAMBAHAN
Perhitungan sumber karbon

(gr/ml) x basis (ml) = a gram
a gram x % = b gram dimasukkan
medium fermentasi
1. Reaksi pembentukan nata

2. Sumber-sumber yang dapat digunakan sebagai nutrisi pembentukan nata dan bandingkan
(minimal 3)
3. Beda selulosa tumbuhan dan selulosa A.xylinum
4. Teori Fehling
Semarang, 20 Maret 2016

Asisten
Lyan Dea Sagita

NIM. 21030113120056
E-1
LEMBAR ASISTENSI
DIPERIKSA
KETERANGAN
NO
TANGGAL
1.
19 Mei 2016
1. Font Judul 14
2. Cek halaman judul sampai
daftar isi
2.
20 Mei 2016
1. Format tabulasi dan

spacing
2. Perbaikan daftar gambar
3.
21 Mei 2016
ACC
TANDA TANGAN

Bahasa

Selamat datang di Scribd!

Laporan Resmi Nata Kel 4 Rabu

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Deskripsi:

Data diunggah

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Deskripsi:

Hak Cipta:

Format Tersedia

Laporan Resmi Nata Kel 4 Rabu

Diunggah oleh

Deskripsi:

Hak Cipta:

Format Tersedia

Judul terkait

LAPORAN RESMI

Virantika Wiji Pangestu

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI INDUSTRI

Virantika Wiji Pangestu

Telah diterima dan disetujui pada :

Pranata Laboratorium Pendidikan

Ir. Kristinah Haryani, M.T

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Lyan Dea Sagita

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Keywords : Acetobacter xylinum, glucose, nata, rambutan juice.

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Semarang, 19 Mei 2016

HALAMAN JUDUL ......................................................................................................... i

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Tabel 2.1 Kandungan gizi buah rambutan ........................................................................ 9

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Gambar 2.1 Tahap-tahap pertumbuhan Acetobacter xylinum ........................................... 6

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Data Percobaan (Laporan Sementara) ........................................................................... A-1

Laboratorium Mikrobiologi Industri

1.1 Latar Belakang

Laboratorium Mikrobiologi Industri

2.1 Pengertian Nata

Azotobacter, Agrobacterium, Achromobacter Gluconacetobacter, Rhizobium,

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Subkingdom : Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)

: Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)

: Magnoliopsida (berkeping dua/dikotil)

Kandungan gizi buah rambutan :

343kJ (82 kcal)

Thiamine (vit. B1)

Riboflavin (vit. B2)

Niacin (vit. B3)

Manfaat buah rambutan antara lain :

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Gambar 2.1 Tahap-tahap pertumbuhan Acetobacter xylinum

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Gambar 2.2 Fase adaptasi

Gambar 2.3 Fase pertumbuhan awal

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Gambar 2.4 Fase pertumbuhan eksponensial

Gambar 2.5 Fase pertumbuhan diperlambat

Penyebabnya adalah di dalam media terjadi kekurangan nutrisi, pengaruh metabolit

Gambar 2.6 Fase stasioner

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Gambar 2.7 Fase menuju kematian

Gambar 2.8 Fase kematian

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Gambar 2.10 Reaksi pembentukan disakarida dengan ikatan glikosida

Gambar 2.11 Reaksi polimerisasi disakarida menjadi glukosa.

Laboratorium Mikrobiologi Industri

Laboratorium Mikrobiologi Industri