Fase Individual

Presentado por
Jairo

Lugo Lozano_80108715

Biotecnologa_ 305689_2

Fedra Lorena ortz

(Tutora)

Universidad Nacional Abierta y a Distancia_Unad

Escuela de ciencias Bsicas Tecnologa e ingeniera
Bogot D.C., Septiembre 27 del 2016

Bibliografa
1. Ortiz, F. (2012). Mdulo de Biotecnologa. Universidad Nacional Abierta y a Distancia.
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/305689/Contenido_Biotecnologia_305689_actuali
zado.pdf.
2. Ortiz, F. OVA de Fermentaciones. Universidad Nacional Abierta y a Distancia.
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/305689/ova/index2.html
3. Laboratorio Virtual de Biotecnologa.
http://datateca.unad.edu.co/contenidos/305689/LabVirtual/
A. Plantee la Hiptesis.
Hiptesis 2. Las diferencias en la actividad enzimtica se deben a la presencia de
inhibidores en el medio de cultivo 1.
Datos
Del Laboratorio 2.
Datos Laboratorio 2. Microorganismo ms Efectivo
Peso
del
Peso del Tubo con Cuantificacin
BACTE REPLI
Tubo
Muestra Seca
de biomasa
RIA
CA
vaco
en 10 Ml
en gr/L
caldo
1
5,4
7,02
162
caldo
CEPA A
2
5,6
7,28
168
caldo
3
5,8
7,54
174
caldo
1
6,3
8,82
252
caldo
CEPA B
2
6,7
9,38
268
caldo
3
6,1
8,54
244
caldo1
5,5
8,25
275
CEPA C caldo2
6,3
9,45
315
caldo3
6,0
9,0
300

La Cepa C, es la ms efectiva con porcentajes entre el 27,5% y el 31,5%. En la

produccin de gr/L de biomasa.
Condiciones de dos medios de cultivo con diferentes Sustrato
Las Condiciones de cultivo en los dos casos fueron: 5 das de fermentacin en medio lquido y
agitacin constante de 120 rpm. Se realiz un experimento, en los cuales cada medio de cultivo
se incubo a dos temperaturas diferentes (30C y 35C), con tres replicas. No se control el pH
durante la fermentacin.
Condiciones de los medio de cultivo 1 y 2 para la cepa C.
Sustrato
Fuente de carbono
Fuente de Nitrgeno
Mezcla de Micronutrientes

Medio 1
Medio 2
Harina de Yuca (10 g.L-1) Harina de trigo (10 g.L-1)
Harina de Frijol (5 g.L-1) Harina de Sangre (5 g.L-1)
K (1 ml.L-1)
K (1 ml.L-1)

La Amilasa, se produce mediante fermentacin de sustratos. Durante la produccin es

importante el control de la temperatura, pH y la presencia de compuestos qumicos inactivantes
Los medios de cultivo han facilitado a los microorganismos el desarrollo de enzimas con
propiedades fsico-qumicas muy deseables. La produccin de alfa amilasa puede darse en
medio sumergido o en estado slido o por procedimientos de fermentacin. La concentracin de
metabolitos para el crecimiento de los agentes microbiales es importante. Influye directamente la
composicin del medio as como las fuentes de carbono, de nitrgeno y el contenido de sales
inorgnicas (RAJAGOPALAN Gobinath, KRISHNAN Chandraraj, 2007).
Resultados de la comparacin de los 2 medios de cultivo.
Medio de
cultivo
M1
M1
M2

Temperatur
a de
incubacin
30C
35C
30C

pH final
medio de
cultivo
5.9
5,4
5.9

UA/enzim
tica
5.4
4.6
13.3

M2

35C

5.2

14.2

El Medio 1 a diferentes temperaturas presenta < UA/enzimtica con respecto al

MEDIO 2.
La Amilasa, se produce mediante fermentacin de sustratos. Durante la produccin es importante el
control de la temperatura, pH y la presencia de compuestos qumicos inactivantes.

La antibiosis es uno de los mecanismos de resistencia de las plantas al ataque de insectos, en el

cual estn involucradas protenas de defensa como los inhibidores de -amilasas. Los inhibidores
de -amilasas se encuentran en semillas de leguminosas y gramneas (Richardson 1991) y se han
purificado de semillas de trigo (Triticum aestivum L.), frjol (Phaseolus vulgaris L.), maz (Zea
mays L.) y Amaranthus sp.,

Garanta
Los inhibidores de -amilasas son glicoprotenas de bajo peso molecular que se acumulan en
vacuolas especializadas en la fase media de desarrollo de la semilla. Al ser protenas de semillas,
son excelentes candidatos para ser expresadas heterlogamente en tejidos homlogos como la
semilla del caf, donde ocurre el desarrollo biolgico de la broca. Esto es particularmente
importante porque inhibidores de -amilasas, como el AI de frjol, para poder ser activo, es
necesario que en la semilla ocurran cambios postraduccionales como la glicosilacin y
protelisis, y crear as un sitio de unin a la enzima blanco. Chrispeels (1997) registra que
cuando los genes de protenas de semilla son expresados en plantas heterlogas, los productos de
la trangnesis son correctamente procesados y transportados hasta las vacuolas especializadas
para lo formacin de un inhibidor de amilasas activo. . La actividad mxima del inhibidor se
obtiene en un intervalo de temperatura de entre 22 y 37C. El tiempo de incubacin para la

activacin del inhibidor vara entre 10 minutos a un Ph de 4.5 y entre 40 minutos a 120 minutos
para un pH de 6.9 que es el ptimo para la enzima amilasa. (Marshall y Lauda 1975, Le berre
Anton et al., 1997; Jiang et al., 2008).

Respaldo
Valencia et al. (2000), encontraron mediante ensayos espectrofotomtricos y zimogramas de
inhibicin, que inhibidores de -amilasas de frijol (P. vulgaris y Phaseolus coccineus L.)
bloquean la actividad de las -amilasas de la broca del caf. Los genes de inhibidores de amilasas de frjol (AI) han sido identificados y clonados con el propsito de obtener plantas
transgnicas. Se han obtenido plantas de arveja (Pisum sativum L.) va Agrobacterium
tumefaciens (Smith & Town) que expresan AI, acumulndose de forma estable en sus semillas,
a niveles de 0,8 -1% de expresin. Estudios en campo y bioensayos con semilla de arveja
transgnica ocasionaron 100% de mortalidad de larvas de Bruchus pisorum L. (Coleoptera:
Bruchidae) (Chrispeels 1997; Schroeder et al. 1995).

Cualificador modal: Sin duda