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GUIA DOS MTODOS DE

REFERNCIA

MICROBIOLOGIA PARA GUA

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

BIOKAR Diagnstico coloca o seu conhecimento sua disposio para fornecer


solues simples e rpidas para atender suas necessidades.
Os laboratrios de microbiologia devem obedecer os critrios regulamentares que esto
em constante evoluo, e por isso que ns oferecemos este guia de mtodos de
referncia para ajud-lo diariamente na aplicao das normas s suas atividades.

SUMRIO:
C:
Coliformes e coliformes termorresistentes

Pesquisa e Contagem

Pgina 3

(Semeadura em meio lquido NPP)

E:
Enterococcus intestinais

Pesquisa e Contagem

Pgina 4

Pesquisa e Contagem

Pgina 4

Pesquisa e Contagem

Pgina 5

Pesquisa e Contagem

Pgina 6

(Semeadura em meio lquido NPP)

Enterococcus intestinais
(Filtrao por membrana)

Escherichia coli e coliformes


(Filtrao por membrana)

Escherichia coli e coliformes


(Semeadura em meio lquido NPP)

L:
Legionella spp. e Legionella pneumophila

Pesquisa e Contagem

Pgina 7

(Semeadura direta depois de concentrao por centrifugao ou filtrao por membrana)

Legionella

Pesquisa e Contagem

Pgina 8

(Filtrao direta por membrana)

M:
Microrganismos viveis

Contagem

Pgina 8

P:
Pseudomonas aeruginosa
(Filtrao direta por membrana)

Pesquisa e Contagem

Pgina 9

S:
Salmonella spp.
Esporos de bactrias anaerbicas sulfitoredutase e Clostridium sulfito-redutase

Pesquisa

Pgina 10-11

Pesquisa e Contagem

Pgina 12

Esporos de microrganimos anaerbicos


sulfito-redutase (Clostridia) (Enriquecimento
em meio lquido)

Pesquisa e Contagem

Pgina 13

Esporos de microrganimos anaerbicos


sulfito-redutase (Clostridia) (Filtrao por
membrana)

Pesquisa e Contagem

Pgina 13

Staphylococcus patognico

Pesquisa e Contagem

Pgina 14-15

(Filtrao direta por membrana)

ANEXOS:
Anexo A: Outras normas de microbiologia para gua.
Anexo B: Testes para gua.
Anexo C: Mtodos alternativos rpidos para a microbiologia da gua.
Para maiores informaes, entre em contato com a gente.
*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

NF T 90-413
T90-413

Pesquisa e Contagem de Coliformes e Coliformes Termorresistentes


Mtodos gerais para semeadura em meio lquido

(Outubro 1985)
Princpios: - Semeadura da amostra para ensaio recolhida em tubos de meio presuntivo.
- Incubao 30,0 1C por 24 48 horas.
- Repique dos tubos que apresentam um aspecto turvo e presena de gs nos
tubos de confirmao.
- Incubao 37,0 1C por 48 horas para coliformes e 44,0 0,5C para
coliformes termorresistentes.

Meio de Cultura
Soluo de Ringer

Soluo de RINGER 1/4


BR00108 100 tablets

gua destilada

gua destilada estril


BM11508 50 tubos de 18 mL

Diluente

Caldo Lactose

Meios
presuntivos
(1)

Meios de
confirmao
(1)

BIOKAR Diagnstico

Caldo Lactose ou BCP


BK119HA frasco 500g

Caldo Lauril Sulfato de Sdio

Caldo Bile
Brilhante

Lactose

ou

Caldo Lauril-Sulfato Triptose


BK010HA frasco 500g
BM09708 50 tubos 10 mL, com
Duhran (concentrao simples)
BM09808 50 tubos 10 mL, com
Duhran (concentrao dupla)

Caldo Bile Lactose ou Verde


Verde Brilhante (BLBVB)
BK002HA frasco 500g
BM01108 50 tubos 10 mL, com
Duhran

Meio de Schubert (modificado por


Fennel) (3)
(1) Ou escolha do microbiologista.
(2) A triptona uma peptona obtida por digesto pancretica da casena.
(3) Para a pesquisa dos coliformes termorresistentes.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

Conformidade
Total

Total
Total (2)

Total

Total

NF EN ISO 7899-1
T90-432
Pesquisa e Contagem de Enterococcus Intestinais das guas de
superfcie e residuais
Parte 1: Mtodo resumido (NPP) para semeadura em meio lquido
(Maro 1999)
Princpios: - Semeadura da amostra diluda em microplaca contendo o meio de cultura
desidratado.
- Incubao 44,0 0,5C por 36 72 horas.
- Anlise sob radiao UV em 366 m.
Meio de Cultura
Diluente especial (DS)

Diluente
gua destilada

BIOKAR Diagnstico

Conformidade

Sal marinho sinttico


BR00308 frasco 100g
BM08808 50 tubos 18 mL

Total

gua destilada estril


BM11508 50 tubos de 18 mL

Total

Microplaca MUG/SF
BT00308 25 placas opacas

Total

Soluo A

Meio de
cultura
(MUD/SF)

Soluo B
Soluo C
Soluo D

NF EN ISO 7899-1
T90-416

Pesquisa e Contagem de Enterococcus Intestinais


Parte 2: Mtodo de filtrao por membrana

(Agosto 2000)
Princpios: - Filtrao da amostra por membrana e transferncia desta membrana para o
meio seletivo.
- Incubao 36,0 2C por 44 4 horas.
- Confirmao das colnias caractersticas por transferncia da membrana
para um gar pr-aquecido 44C e incubao 44,0 0,5C por 2 horas.
Meio de Cultura

BIOKAR Diagnstico

Diluente

gua destilada

gua destilada estril


BM11508 50 tubos de 18 mL

Meio seletivo

Meio de base Meio de Slanetz e


Bartley

gar de SLANETZ e BARTLEY


(base)
BK129HA frasco 500g

Soluo TTC

Meio completo

Meio de
confirmao

gar bile esculina e azida

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

Suplemento TTC 12,5 mg


BS02608 10 flaconetes
Suplemento TTC 50 mg
BS02708 10 flaconetes
gar de SLANETZ e BARTLEY
BK037HA frasco 500g
BM14608 20 placas de 55 mm
BM09408 120 placas de 55 mm
gar BEA
BM10408 10 flaconetes 100 mL

Conformidade
Total

Total

Total

Total

Total

NF EN ISO 9308-1
T90-414

Pesquisa e Contagem de Escherichia coli e coliformes


Parte 1: Mtodo de filtrao por membrana

(Setembro 2000)
Princpios: - Filtrao da amostra por membrana.
- Para a amostra padro, transferir a membrana para o gar lactose ou TTC
com heptadecil sulfato de sdio
- Incubao 36,0 2C por 21 3 horas.
- Para o ensaio rpido, transferir a membrana para o gar casena de soja e
incubar 36,0 2C por 4 5 horas, em seguida transferir a membrana para o meio TSA
e incubar 44,0 0,5C por 19 20 horas.
- Confirmao das colnias caractersticas por pesquisa de oxidase e produo
de indol.

(1) A triptona uma peptona obtida por digesto pancretica da casena.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

NF EN ISO 9308-3
T90-433
Pesquisa e Contagem de Escherichia coli e de coliformes das guas de
superfcie e residuais
Parte 2: Mtodo resumido (NPP) para semeadura em meio lquido
(Maro 1999)
Princpios: - Semeadura da amostra diluda em microplaca contendo o meio de cultura
desidratado.
- Incubao 44,0 0,5C por 36 72 horas.
- Anlise sob radiao UV em 366 m.
Meio de Cultura
Diluente especial (DS)

Diluente

Meio de
cultura
(MUD/EC)

BIOKAR Diagnstico
Sal marinho sinttico
BR00308 frasco 100g
BM08808 50 tubos 18 mL

Conformidade
Total

gua destilada

gua destilada estril


BM11508 50 tubos de 18 mL

Total

Meio MUG/EC

Microplaca MUG/EC
BT00108 25 placas opacas

Total

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

NF T 90-431
T90-431

Pesquisa e Contagem de Legionella spp. e de Legionella pneumophila


Mtodo para semeadura direta e depois concentrao por
filtrao por membrana ou centrifugao

(Setembro 2003)
Princpios:

- Semeadura da amostra direta em meio seletivo.


- Em paralelo, preparao de um concentrado por filtrao por membrana
com ressuspenso por raspagem ou por ultrassom, ou por centrifugao com a
recuperao do pelete num volume pequeno.
- Descontaminao do concentrado, uma parte por tratamento trmico e a
outra por tratamento cido (1).
- Semeadura e depois descontaminao do concentrado por meio seletivo.
- Incubao por 8 10 dias 36,0 2C.
- Realar a Legionella por repique para pesquisa de bactrias que requerem
L-cistena.
- Realizao de testes imunolgicos para pesquisa de Legionella pneumophila.

(1) para gua suja, a combinao dos dois tratamentos.


(2) A triptona uma peptona obtida por digesto pancretica da casena.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

NF EN ISO 11731-2
T90-430

Pesquisa e Contagem de Legionella


Parte 2: Mtodo de filtrao direta por membrana para guas
com baixa carga bacteriana

(Julho 2008)
Princpios: - Filtrao da amostra por membrana e tratamento do filtro com tampo cido.
- Transferncia do filtro para meio seletivo e incubao 36,0 2C por pelo
menos 10 dias.
- Confirmao por repique para a pesquisa de bactrias exigentes de L-cistena
e ferro.

Meio de Cultura

BIOKAR Diagnstico

Conformidade

Reativo

Tampo cido

Meio GVPC

Meio completo

gar
seletivo
GVPC
para
Legionella
BM07108 20 placas de 90 mm

Total

Meio BCYE sem L-cistena

gar BCYE sem L-cistena


BM07308 20 placas de 90 mm

Total

gar BCYE com L-cistena


BM07208 20 placas de 90 mm

Total

Meios
BCYE

NF EN ISO 6222
T90-401

Meio BCYE sem antibitico

Contagem de microrganismos viveis


Contagem de colnias por semeadura em gar nutritivo

(Julho 1999)
Princpios: - Semeadura em profundidade em meio no seletivo.
- Incubao 36,0C por 44 horas e paralelamente 22,0C por 68 horas.

Meio de Cultura

Diluente
Meio de
cultura

BIOKAR Diagnstico

Conformidade

Se refere norma NF EN ISO 8199


gar com extrato de levedura

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

gar Contagem de Placa (PCA)


sem glicose
BK153HA frasco 500g
BM06808 10 flaconetes 200 mL

Total

NF EN ISO 16266
T90-419

Deteco e Contagem de Pseudomonas aeruginosa


Mtodo de filtrao por membrana

(Agosto 2008)
Princpios: - Filtrao da amostra por membrana ou de uma diluio da amostra.
- Transferncia da membrana para meio seletivo e i ncubao 36,0 2C e
leitura em 22 2 horas e 44 4 horas
- Confirmao das colnias suspeitas por pesquisa de oxidase e teste de
fluorescncia.

Meio de Cultura

Meio
cultura

BIOKAR Diagnstico

de gar base para Pseudomonas gar CN para Pseudomonas

Meios e
reagente de
confirmao

Conformidade

(gar CN)

BK165HA frasco 500g (1)


BM14508 20 placas de 55 mm

Total

Meio de King B

gar KING B
BM10508 7 tubos 7 mL

Total

Caldo de Acetamida

Caldo de Acetamida
BM09508 7 tubos 5 mL

gar Nutritivo

gar Nutritivo 2,5%


BM12508 50 tubos 18 mL

Total
Total (2)

Reagente para a pesquisa de


oxidade

Reagente de Nessler

(1) O meio desidratado necessita da adio de 10 mL de glicerol por litro de meio gar base.
(2) A triptona uma peptona obtida por digesto pancretica da casena.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

NF ISO 19250
T90-435
(Outubro 2010)

Pesquisa de Salmonella spp.

Princpios:

- Pr-enriquecimento 36,0 2C por 18 2 horas. (1)


- Enriquecimento em caldo Rappaport-Vassiliadis com soja 41,5 1C e
caldo Mller-Kauffmann tetrationato-novobiocina 37,0 1C por 24 3 horas.
- Para a deteco de Salmonella com crescimento lento, incubao do caldo
Rappaport-Vassiliadis com soja por 24 3 horas adicionais.
- Isolamento em meio XLD 36,0 2C por 24 3 horas e em um segundo
meio escolha do laboratrio.
- Confirmao por testes bioqumicos e sorolgicos apropriados.

Meio de Cultura

Meio de prenriquecimento

Primeiro
meio de
enriquecimento

EPT (20g/L) (2)


BK131HA frasco 500g
BK131GC embalagem 5 Kg
EPT (25,5g/L) (3)
BK018HA frasco 500g
gua peptonada tamponada (EPT) BK018GC embalagem 5 Kg
BM01008 10 flaconetes 225 mL
BM05608 50 tubos 9 mL
BM05708 10 flaconetes 90 mL
BM13108 3 embalagens 3 L
BM13208 2 embalagens 5 L

Conformidade

Total

Meio base Caldo RappaportVassiliadis de soja (RVS)

Soluo B

Soluo C

Meio completo

Caldo Muller-Kauffamann
tetrationato novobiocina (MKTTn)
(base)

Segundo
meio de
enriquecimento

BIOKAR Diagnstico

Soluo iodo-iodeto
Soluo de novobiocina

Caldo RAPPAPORT-VASSILIADIS
Soja (RVS)
BK148HA frasco 500g
BM07408 50 tubos 10 mL
Caldo
MULLER-KAUFFMANN
tetrationato novobiocina (base
MKTTn sem iodo, novobiocina)
BK169HA frasco 500g
Caldo
MULLER-KAUFFMANN
tetrationato novobiocina (base
MKTTn sem iodo)
BK208HA frasco 500g

Total (4)

Total (5)

Suplemento
Seletivo
Novobiocina 10 mg
BS03308 10 flaconetes qsp 250
mL
Suplemento
Seletivo
Novobiocina 40 mg
BS05608 8 flaconetes qsp 1 L

Total

Meio completo

Meio de
isolamento

gar Xilose Lisina Desoxicolato


(gar XLD)

Caldo
MULLER-KAUFFMANN
tetrationato novobiocina (pronto
para uso)
BM07808 50 tubos 10 mL
gar XLD (ISO 6579)
BK168HA frasco 500g
BM08708 20 placas de 90 mm

Total

Total

(6)
gar Nutritivo

gar frrico com trs acares


(TSI)

Reagente de
confirmao Meio base gar com uria

gar Nutritivo 2%
BK185HA frasco 500g
BM11808 50 tubos 18 mL
gar Nutritivo 2,5%
BM12508 50 tubos 18 mL
gar TSI
BK059HA frasco 500g

Equivalente
Total
(5) (7)

Soluo de uria

Meio de descarboxilao da Llisina

Caldo Selenito Cistina

(Christensen)

(1) volumes maiores podem ser concentrados atravs de filtrao por membrana, depois esta membrana
transferida para a gua peptonada tamponada.
(2) frmula incluindo 90,0 g/L de fosfato dissdico (dodecaidratado) (massa molar 358,14)
(3) frmula incluindo 3,56 g/L de fosfato dissdico anidro (massa molar 141,96)
(4) frmula incluindo cloreto de magnsio anidro em vez da forma hexaidratada descrita.
(5) a triptona uma peptona obtida por digesto pancretica da casena.
(6) suas qualidades intrnsecas sero complementares s do gar XLD e permitirem a deteco de
Salmonella lactose + (que compreende typhi e paratyphi).
(7) taxa de triptona de 14,0 g/L, ao invs de peptona (20) descrita.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

NF T90-415
T90-415

Pesquisa e Contagem dos esporos de bactrias anaerbicas sulfitoredutase e de Clostridium sulfito-redutase


Mtodo geral para incorporao em gar em tubos profundos

(Outubro 1985)
Princpios: - Destruio das formas vegetativas por aquecimento adequado da amostra.
- Semeadura em meio seletivo e incubao sob anaerobiose 37,0 1C por
24 e/ou 48 horas.
- Caracterizao do Clostridium a partir das colnias isoladas.

Meio de Cultura
Soluo de Ringer

Soluo de RINGER 1/4


BR00108 100 tablets

gua destilada

gua destilada estril


BM11508 50 tubos de 18 mL

Diluente

Meios e
reagentes
para a
deteco de
esporos de
bactrias
anaerbicas
sulfitoredutase
Meios e
reagentes
para a
identificao
dos esporos
de
Clostridium
sulfitoredutase

BIOKAR Diagnstico

Conformidade
Total

Total

gar glicose carne de fgado


Sulfito de sdio

gar glicose carne de fgado


BK157HA frasco 500g

Total

Sais de ferro

gar TSC (base)


Meio base gar Triptose-Sulfito BK031HA frasco 500g
BM03908 50 tubos 20 mL
D-cicloserina
BM07708 10 frascos 200 mL
Soluo de D-cicloserina

Suplemento Seletivo Dcicloserina 200 mg


BS00608 10 flaconetes qsp 500
mL

Total (1)

Total

Caldo glicose carne de fgado

Perxido de hidrognio

(1) o texto normativo contem um erro de composio (ausncia de gar): presena de triptona no lugar da
Triptose preconizada.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

NF EN 26461-1/
ISO 6461-1
T90-434

Pesquisa e Contagem dos esporos de microorganismos


anaerbicos sulfito- redutase (Clostridia)
Parte 1: Mtodo para enriquecimento em meio lquido

(Julho 1993)
Princpios: - Inoculao em meio lquido de enriquecimento.
- Incubao sob anaerobiose 37,0 1C por 44 4 horas.
Meio de Cultura

Diluente

BIOKAR Diagnstico

Se refere norma NF EN ISO 8199


Meio de base concentrao
simples

Meio
reforado
Meio de base concentrao dupla
especial para
clostridia
Sulfito de sdio, soluo 4%
(m/m)
(DRCM)
Citrato e ferro III, soluo 7%
(m/m)

NF EN 26461-2/
ISO 6461-2
T90-417

Conformidade

Pesquisa e Contagem dos esporos de microorganismos


anaerbicos sulfito- redutase (Clostridia)
Parte 1: Mtodo por filtrao por membrana

(Julho 1993)
Princpios: - Filtrao da amostra por membrana e transferncia para meio seletivo.
- Incubao 37,0 1C e por 20 2 horas e 44 4 horas.
Meio de Cultura
Meio base gar Nutritivo

gar
ferro
sulfito (1)

Outro meio
seletivo (1)

BIOKAR Diagnstico
gar Nutritivo 2%
BK185HA frasco 500g
BM11808 50 tubos 18 mL
gar Nutritivo 2,5%
BM12508 50 tubos 18 mL

Sulfito de sdio, soluo

Sulfito de ferro III, soluo

gar Sulfito-triptose

gar TSC (base)


BK031HA frasco 500g
BM03908 50 tubos 20 mL
BM07708 10 frascos 200 mL

Conformidade
Equivalente

Total (2)

(1) escolha do laboratrio


(2) o texto normativo contm um erro de composio (ausncia de gar): presena de triptona no lugar
da Triptose preconizada.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

XP T 90-412
T90-412

Pesquisa e Contagem de Staphylococcus patognicos


Mtodo de filtrao por membrana

(Junho 2006)
Princpios: - Filtrao da amostra por membrana e transferncia da mesma para meio
seletivo.
- Incubao 36,0 2C e por 44 4 horas.
- Confirmao pelo teste da coagulase ou pelo teste da aglutinao em latex
ou por exame microbiolgico.
Meio de Cultura
Meio de Chapman com manitol

Meio base gar Baird Parker

Meio
cultura

de

gar CHAPMAN com manitol


BK030HA -frasco 500g
BM14808 20 placas de 55 mm

Total (1)

gar BAIRD-PARKER (base)


BK055HA frasco 500g
BK055GC embalagem 5 Kg

Total (1)

Emulso de gema de ovo e


telurito de potssio
BS06008 10 fraconetes 50 mL

Meio completo

gar BAIRD-PARKER gema de


ovo telurito
BM01808 20 placas de 90 mm
BM09108 120 placas de 90 mm

Meio base gar com plasma de


coelho e fibrinognio (RPF)

Meio de
confirmao

Conformidade

Soluo de telurito de potssio


Emulso de gema de ovo

Soluo de sulfametazina (2)

Meio de
cultura e/ou
confirmao
(3)

BIOKAR Diagnstico

Suplemento
Seletivo
Sulfametazina 25 mg
BS02808 10 flaconetes qsp 500
mL
gar BAIRD-PARKER (base)
BK055HA frasco 500g
BK055GC embalagem 5 Kg

Total

Total (1)

Total

Total (2)

Soluo de telurito de potssio


Soluo de fibrinognio bovino
Soluo de plasma de coelho e
inibidor de tripsina

Suplemento
Seletivo
Coelho
Fibrinognio
BS03408 8 flaconetes qsp 100
mL
BS03808 flaconete qsp 500 mL

Meio completo

gar BAIRD-PARKER
BM06708 - 20 placas de 90 mm
BM15908 - 20 placas de 55 mm
gar BAIRD-PARKER (KIT)
BT00508 6 flaconetes 90 mL
base + 6 flaconetes adicionais
BT01008 6 flaconetes 190 mL
base + 6 flaconetes adicionais

Caldo crebro corao (BCC)

Plasma de coelho

Caldo Crebro Corao


BK015HA frasco 500g
Plasma de coelho liofilizado
BR00208 10 flaconetes para 20
reaes

Total

Total

Total

Total

Total

Reagente de Reagente para teste de


confirmao aglutinao com latex

(1) a triptona uma peptona obtida por digesto pancretica da casena.


(2) adio facultativa, justificada pela suspeita da presena de Proteus.
(3) ambiente favorvel s guas susceptveis a serem contaminadas por uma outra flora que possa
mascarar as colnias pesquisadas.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

ANEXO A: outras normas de referncia em microbiologia da gua

Enterovrus (concentrao
por l de vidro e deteco
por cultura celular)

Pesquisa

XP T 90-451

T 90-451

Maro 1996

Enterovrus humano
(cultura celular pelo
mtodo das placas)

Pesquisa

NF EN 14486

T 90-452

Janeiro 2005

Deteco e contagem de
bacterifagos Parte 1:
Contagem dos
bacterifagos ARN F
especficos.

Contagem

NF EN ISO 10705-1

T 90-440-1

Outubro 2001

Deteco e contagem de
bacterifagos Parte 2:
Contagem dos colifagos
somticos.

Contagem

NF EN ISO 10705-2

T 90-440-2

Outubro 2001

Pesquisa e contagem dos


oocistos de
Cryptosporidium e de
cistos de Giardia.

Pesquisa e
Contagem

NF T90-455

T 90-455

Julho 2001

Legionella e/ou Legionella


pneumophila (PCR)

Deteco e
quantificao

NF T 90-471

T 90-471

Abril 2010

ANEXO B: testes para gua.


Diretrizes gerais para a contagem de
microrganismos por meio de cultura

NF EN ISO 8199

T 90-400

Dezembro 2007

Medida do ndice de substncias ativas


com azul de metileno (SABM) mtodo
para anlise em fluxo contnuo (CFA)

NF EN ISO 16265

T 90-410

Maio 2012

Determinao de pH

NF EN ISO 10523

T 90-418

Maio 2012

Exames bacteriolgicos dos recipientes e


sistemas de armazenamento destinados ao
acondicionamento da gua

PR NF T 90-425

T 90-425

Fevereiro 1992

Exame bacteriolgico das guas de piscina

NF T 90-421

T 90-421

Julho 2006

Guia de amostragem para anlise da


qualidade da gua do meio ambiente
Parte 1: amostragem de guas superficiais.

FD T 90-523-1

T 90-523-1

Fevereiro 2008

Guia de amostragem para anlise da


qualidade da gua do meio ambiente
Parte 2: amostragem de gua residual.

FD T 90-523-2

T 90-523-2

Fevereiro 2008

Guia de amostragem para anlise da


qualidade da gua do meio ambiente
Parte 3: amostragem de guas
subterrneas.

FD T 90-523-3

T 90-523-3

Janeiro 2008

Diretrizes para a validao dos mtodos


microbiolgicos.

FD ENV ISO 13843

T 90-460

Outubro 2001

Controle de qualidade dos meios de cultura


Emenda A1
Emenda A2

NF T 90-461
NF T 90-461/A1
NF T 90-461/A2

T 90-461
T 90-461/A1
T 90-461/A2

Julho 2001
Junho 2005
Maio 2007

Critrios para estabelecer equivalncia


entre os mtodos microbiolgicos.

NF EN ISO 17994

T 90-462

Dezembro 2004

Amostragem para anlises microbiolgicas.

NF EN ISO 19458

T 90-480

Outubro 2006

NF EN ISO 8199
T90-400

Diretrizes gerais para a contagem de microrganismos


por meio de cultura

(Janeiro 2008)
Princpio: semeadura de um volume comum de amostra de gua, em concordncia com
o protocolo da metodologia escolhida em funo da origem da gua e do microrganismo
pesquisado.

Meio de Cultura

BIOKAR Diagnstico

Conformidade

Soluo salina

Diluente

gua peptonada

gua peptonada
BM16408 2 embalagens 5 L

Soluo peptonada salina

Sal-triptona
BK014HA frasco 500g
BM00808 50 tubos 9 mL
BM11408 10 frascos 90 mL
BM13508 3 embalagens 3 L

Soluo
de
concentrao

Ringer,

de Soluo de RINGER 1/4


BR00108 100 tablets
gua destilada estril
BM11508 50 tubos 18 mL

Soluo tampo fosfato

(1) a triptona uma peptona obtida por digesto pancretica da casena.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

Total (1)

Total (1)

Total
Total
-

PR NF T 90-425
T90-425

Exames bacteriolgicos dos recipientes e sistemas de


armazenamento destinado ao acondicionamento da gua

(Fevereiro 1992)
Princpios: - Enxaguar com um diluente, ento cultivar a suspenso obtida aps a filtrao
por membrana, ou para os recipientes transparentes incorporar diretamente os
microrganismos viveis.
- Enxaguar com um diluente, ento cultivar a suspenso obtida aps a filtrao
por membrana.
- Incubao: 20,0 2C por 5 dias para contagem de microrganismos viveis.
37,0 1C por 24 e 48 horas para contagem de coliformes (1).
44,0 0,5C por 24 e 48 horas para contagem de coliformes
termorresistentes (2).

Meio de Cultura

BIOKAR Diagnstico

gua destilada

Diluente (3)
Soluo
de
concentrao

Meio
Cultura

Ringer,

de gar

para a contagem
microrganismos viveis (4)

gar Lactose BCP

Conformidade

gua destilada estril


BM11508 50 tubos 18 mL

Total

de Soluo de RINGER 1/4


BR00108 100 tablets

Total

de gar Contagem de Placa (PCA)


BK144HA frasco 500g
BK144GC embalagem 5 Kg
BM01508 10 flaconetes 100 mL
BM03308 10 flaconetes 200 mL
gar Lactose BCP
BK023HA frasco 500g

Total (5)

Total (5)

(1) se refere norma NF T 90-414.


(2) se refere norma NF T 90-413.
(3) no caso de anlise frascos lavados, para inibir a influncia de desinfetantes halogenados, adicionar
0,16g de tiossulfato de sdio por litro de diluente.
(4) no caso de anlise frascos lavados, para inibir a influncia de desinfetantes halogenados, adicionar 1g
de tiossulfato de sdio por litro de gar.
(5) a triptona uma peptona obtida por digesto pancretica da casena.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

ANEXO C: Mtodo rpido alternativo em microbiologia da gua.

Mtodo COMPASS Ecc gar:


Mtodo de referncia: NF EN ISO 9308-1, pgina 6.

Mtodo de contagem de Escherichia coli e coliformes atravs de filtrao por


membrana das guas de consumo humano.
Princpios: - filtrao por membrana de um volume de amostra.
- transferncia da membrana para o COMPASS Ecc gar e incubar 36
2C por 24 3 horas.

Colnias caractersticas: de
azul prpura que pode ser
rodeada por um halo rosa.

Meio Seletivo

Colnias caractersticas:
cor rosa.

COMPASS Ecc gar frasco 500g BK202HA


COMPASS Ecc gar 20 placas de 90 mm BM15308

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

ANEXO D: Lista dos principais meios de cultura para a microbiologia da gua.

PRODUTO
gar Seletivo Legionella segundo NEN

APRESENTAO
BM08108 20 placas de 90 mm

gar extrato de levedura carvo tamponado BM11208 20 placas de 90 mm


(BCYE) segundo NEN
gar extrato de levedura carvo tamponado BM11308 20 placas de 90 mm
sem L-cistena (BCYE) segundo NEN
gar Bismuto Sulfito

BK004HA frasco 500g

Caldo Selenito-Cistina

BK009HA frasco 500g

gar Prpura Bromocresol Lactose

BK023HA frasco 500g

gar Triptona Sulfito Cicloserina (TSC)

BM07708 10 flaconetes 200 mL


BM03908 50 tubos 20 mL
Meio base desidratado (s/ D-cicloserina)
BK031HA frasco 500g
Suplemento Seletivo D-cicloserina 200 mg
BS00608 kit com 10 frascos
Emulso gema de ovo
BS06608 10 frascos 50 mL

gar SLANETZ e BARTLEY

Meio completo pr-envazado


BM14608 - 20 placas de 55 mm
BM09408 - 120 placas de 55 mm
Meio desidratado (completo)
BK037HA frasco 500g
Meio desidratado (base, s/ TTC)
BK129HA frasco 500g
Suplemento Seletivo TTC 50 mg
BS02708 10 frascos qsp 500 mL

gar EMB (Levine)

BK056HA frasco 500g

gar XLD (Xilose Lisina Desoxicolato)

BK058HA frasco 500g

gar Hektoen Entrico

BK067HA frasco 500g


BM02708 20 unidades 90 mm

Caldo Lactose

BK082HA frasco 500g

gar Verde Brilhante

BK091HA frasco 500g

gar Tergitol 7

Meio completo pr-envazado


BM14708 - 20 placas de 55 mm
BM09308 - 120 placas de 55 mm
Meio base desidratado (s/ TTC)
BK123HA frasco 500g
Suplemento Seletivo TTC 12,5 mg
BS02608 embalagem com 10 frascos

Caldo Peptona tamponada com NaCl pH BK128HA frasco 500g


7,0

Caldo Mller-Kauffmann

Meio pronto para uso (completo, c/ iodo e


novobiocina
BM10608 50 tubos 10 mL
Meio base desidratado (s/iodo nem
novobiocina)
BK10608 frasco 500g
Suplemento Seletivo Novobiocina 10 mg
BS03308 embalagem com 10 frascos
Suplemento Seletivo Novobiocina 40 mg
BS05608 embalagem com 8 frascos

Caldo Rappaport-VASSILIADIS

BK136HA frasco 500g

gar Rose-Gal BCIG

BK142HM frasco 100g


BK142HA frasco 500g

Caldo Rappaport-VASSILIADIS Soja (RVS) Meio pronto para uso


BM07408 50 tubos 10 mL
Meio desidratado
BK148HA frasco 500g
gar Bile Vermelho Violeta (VRBL)

Meio pronto para uso


BM03408 10 flaconetes 100 mL
BM03508 10 flaconetes 200 mL
Meio desidratado
BK152HA frasco 500g
Suplemento Seletivo MUG 50 mg
BS02408 embalagem com 10 frascos

Caldo CN para Pseudomonas

Meio completo pr-envazado


BM0708 - 10 placas de 55 mm
Meio base desidratado (s/ glicerina)
BK165HA frasco 500g

gar BAIRD-PARKER RPF pronto para BM06708 - 20 placas de 90 mm


uso
Caldo Acetamida

BM09508 7 tubos 5 mL

gar King B

BM10508 7 tubos 7 mL

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

Apresentaes
A) gar:

PRONTO:
Placas de Petri (ainda no
disponveis no Brasil):
- Pacote com 120 unidades de
55 e 90 mm;
- Pacote com 20 unidades de
55 e 90 mm;
- Pacote com 10 unidades de
55 e 90 mm.

PRONTO PARA SOLUBILIZAR:

Flaconetes (ainda no
disponveis no Brasil)::
- 10 flaconetes de 100 mL;
- 10 flaconetes de 200 mL;
- 10 flaconetes de 500 mL;

DESIDRATADO:

Frascos:
- Embalagem de 500g;
- Embalagem de 5 Kg.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

Apresentaes
B) Caldos:

PRONTO PARA USO:

Frascos (ainda no
disponveis no Brasil):
- 10 frascos de 90 mL;
- 10 frascos de 100 mL;
- 10 frascos de 200 mL.

Tubos (ainda no
disponveis no Brasil):
- 50 tubos de 9 mL;
- 50 tubos de 10 mL;
- 5 tubos de 5 e 7 mL.

Embalagens flexveis
(ainda no disponveis no
Brasil):
- 3 embalagens de 3L;
- 2 embalagens de 5L.

DESIDRATADO:

Frascos:
- Embalagem de 500g;
- Embalagem de 5 Kg.

*Disponveis no Brasil os meios desidratados.

BIOKAR Diagnostics Qualidade


O Controle de Qualidade da Biokar Diagnostics certifica o desempenho de seus
produtos em conformidade com os padres ISO:

Testes de desempenho;
Condies de transporte;
Testes de esterilidade;
Testes de neutralizao;
Anlises das caractersticas fsico-qumicas (pH, aspecto...).

BIOKAR Diagnostics certificada


de acordo com as normas padro
de gerenciamento ISO 9001:2008.

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produtos nos sites:
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