penjepit dengan piring berlekuk menghadap ke dalam dan aman dengan memperketat sekrup
2.3.2 Bahan dan Peralatan
Stok larutan dari bagian 2.2.2
50 ml dan 125ml termos lengan sisi
Hoefer SE 250, SE 260, atau mini VE mini-gel unit elektroforesis
dengan piring, sisir, dan ruang.
SE 245 dual-gel penuangan tegak.
Pipet dan pipettors
Pasokan daya EPS 301
Pracetak gel juga dapat digunakan dan tersedia dari beberapa
manufaktur. 2.3.3
1.
Gbr 2.12 Tempatkan perakitan penjepit
dalam buaian casting, sekrup sisi menghadap ke luar. dalam posisi ini gel akan palung terlihat pelat kaca persegi panjang. Masukkan sisir dan menutup sandwich gel dengan memutar kedua sisir 1800
Untuk satuan miniVE, Rakit sandwich
sehingga kaca dan ruang yang selaras. Tempatkan sandwich datar pada modul elektroforesis dengan piring berlekuk ke belakang dan takik di atas. (A) Periksa untuk memastikan bahwa pelat kaca dan ruang yang rata dengan kaki panduan di bagian bawah modul. Sambil memegang sandwich di tempat, geser setiap penjepit ke posisi dan perlahan kencangkan sekrup jari ketat. (B) Periksa keselarasan tepi bawah sandwich dan menyesuaikan kaca dan ruang untuk memastikan bahwa tepi bawah benar-benar mengalir. Selesaikan dengan mengencangkan sekrup ketat jari. tingkatkan pelat penyegelan ke tempat sampai tab terlibat dalam kedudukan paling atas. (C) kastor berdiri tegak atau menggantung dari ruang miniVE. Persiapkan solusi gel dan tuangkan gel sesuai instruksi SE 250 / SE 260.
Prosedur Persiapan penanganan gel
Untuk setiap sandwich, memilih salah satu alumina berlekuk (SE 2250 atau SE 260) atau satu piring kaca berlekuk (miniVE) satu piring kaca persegi panjang, dan dua ruang. Jangan menggunakan piring yang terkelupas. Letakkan piring berlekuk pada permukaan yang datar dan tempat satu ruang bersama setiap tepi yang membentang sepanjang sisi takik (di "telinga"). Cocokan dengan piring kaca ke ruang. Puncak T dari sisa ruang di sepanjang sisi sandwich gel. pada permukaan yang datar, selaraskan sisi dengan ruang dan juga bagian bawah. 2. Pegang sandwich dengan sisi datar dengan kuat antara ibu jari dan jarijari. dengan piring berlekuk menghadapi blok belakang dengan jelas, geser sandwich ke dalam perakitan penjepit, memastikan tepi bawah sisa sandwich pada permukaan datar. masukkan Hoefer ruang pasangan untuk menyetel kembali ruang yang mungkin berpindah. 3. Sambil memegang sandwich di tempatnya, amankan itu dengan mempererat semua enam tekanan bar sekrup jari dengan erat. (untuk mencegah kerusakan kaca, jangan terlalu erat). 4. Periksa sandwich bawah untuk meyakinkan baik piring dan ruang yang selaras dan bahkan sampai tepi bawah akan terletak pada permukaan datar. (Sandwich harus kelihatan menonjol di bawah blok belakang; posisi ini membantu memastikan segel telah lengkap.) Sesuaikan jika diperlukan. 5. Tempat perakitan penjepit dalam tempat penuangan, sekrup sisi menghadap keluar. Dalam posisi ini gel dengan menjadi terlihat melewati pelat kaca persegi panjang. 6. Masukkan sisir ke dalam lubang di setiap sisi baki penuangan sehingga panah (akhir pendek) menunjuk ke atas. Segel sandwich dengan memutar kedua sisir 1800 sehingga panah menunjuk ke bawah (gbr 2.12) Tuangkan gel 7. menyiapkan solusi gel menyelesaikan dalam botol 125 ml vakum sebagai menjelaskan dalam tabel 2.5 kecuali menghilangkan TEMED dan amonium persulfat. Juga, lihat tabel 2.6 untuk konsentrasi akrilamida yang direkomendasikan
