Obtencin
La primera pregunta que nos planteamos cuando tenemos que hacer un anlisis de sangre es qu tipo de
aguja debo emplear, en que tipo de tubo tengo que recogerlo, qu cantidad de sangre se necesitar?
El uso de palomillas o agujas y el distinto calibre de las
mismas, lo mismo que el volumen de las jeringuillas y la
eleccin de la vena depender en ocasiones del tamao
del animal al que vamos a extraer la sangre.
Figura 3 Cdigo
Internacional de
colores para recogida
de tubos
(Norma ISO 6740)
14
Anticoagulante
Modo de
accin
Cantidad/ ml
sangre
EDTA Na o K
Quelante
Calcio
1-2 mg/ml
Inhibe paso
protrombinatrombina
20 U/ml
Citrato sdico
Quelante
calcio
Sol. 3,8%:
1vol.citrato/ 9
vol. sangre
Fluoruro
Sdico
Inhibe
gluclisis
Heparina Na,K,
Li, Li,NH4
2-4mg/ml
Color
tapn
Ventajas
Inconvenientes
Utilizacin
Conserva
morfologa
clulas
sanguneas
Interfiere
determinaciones
bioqumicas
Hemograma
Parsitos
hemticos
LILA
Desaconsejable
hematologa
Perfiles
bioqumicos
VERDE
Hemostasia
Conserva
factores
lbiles
coagulacin
algunas horas
Coagulacin
AZUL
Conservador
de la
glucosa
Desaconsejable
en otras
determinaciones
bioqumicas
Deter. de la
glucosa
GRIS
Bioqumica
Inmunologa
ROJO
Conserva
pH sanguneo
Sin
anticoagulante
Hemograma
&M&%5"FTFMBOUJDPBHVMBOUFRVFNFKPSDPOTFSWBMBTDlulas sanguneas.
5VCPEFUBQOMJMBMMFWB&%5"TEJDPPQPUTJDPTFVTB
para la realizacin de hemogramas y estudio de clulas
y parsitos hemticos.
5VCPEFUBQOB[VMMMFWBDJUSBUPTEJDPZTFVUJMJ[BQBSB
pruebas de coagulacin.
El tubo de tapn gris lleva fluoruro sdico y se utiliza
para determinacin de glucosa.
5VCP EF UBQO SPKP OP MMFWB OJOHO UJQP EF BOUJcoagulante. Con l obtenemos suero para pruebas de
bioqumica, hormonas e inmunologa.
Fig.4
Tubos de
EDTA
15
Trabajo cientfico
Mtodos
&O DBTP EF VTBS UVCPT 5BQWBM QPEFNPT RVJUBS MB BHVKB F
JOUSPEVDJSFONCPMPQPSFMPSJGJDJPTVQFSJPS 'JH
FTNVZDmodo pero si lo vamos a remitir al laboratorio, la sangre puede
salirse y no os podis imaginar lo que cunde una gota de sangre
'JH
FOVOTPCSFZOPQPEJTJNBHJOBSPTDPNPMMFHBFMUVCP
o tubos que le acompaan al laboratorio pues sigue goteando.
.JSBEFOFMUVCPTJFNQSFMBTFBMIBTUBEPOEFIBZRVF
llenarlo de sangre.
Figura 9
Figura 5
SI
Figura 6
Figura 8
NO
Figura 10
Por favor quitad el tapn, os llevar unos segundos ms y
hacedlo como si fuera un tubo de tapn hermtico (Fig.10).
4J FM WPMVNFO EF TBOHSF FT NFOPS TF OPT QSPEVDJSO
Hemlisis, crenacin de los hemates, falsas disminucioOFTEFMIFNBUPDSJUP
7$.ZGBMTPTBVNFOUPTEF$$.)
Identificacin
Figura 7 El
tubo de la
izquierda
tiene poco
volumen de
sangre y el
de la derecha
demasiada por
lo que se ha
formado un
cogulo.
Es importantsimo identificar los tubos con los datos del animal al que realizaremos el anlisis antes incluso de depositar
la sangre en l. Evitaremos as un posible error preanaltico
que puede complicarse en el laboratorio. (Figura 11)
Si adems acompaamos a las muestras identificadas de
un protocolo facilitaremos mucho el trabajo al laboratoSJP
JOEJDBOEP
t
t
t
t
t
t
NO
16
Trabajo cientfico
Figura 10
NO
La contaminacin con el
lquido de fluidoterapia
producir una dilucin de
la muestra e incluso contaminacin de la misma
si el fluido lleva potasio
produciendo hiperkalemia
(Fig. 16).
Conservacin:
Lo ideal son dos horas desde la obtencin de la muestra
a temperatura ambiente o 24 horas en nevera a 4 C para no alterar los valores del hemograma.
+".4JOUSPEVDJSFOFMDPOHFMBEPS
Figura 16
NO
4J FM WPMVNFO EF TBOHSF FT NFOPS TF OPT QSPEVDJSO
Hemlisis, creacin de los hemates (Fig. 15), falsas disNJOVDJPOFT EFM IFNBUPDSJUP
7$. Z GBMTPT BVNFOUPT
EF$$.)
Figura 12
NO
Pruebas de bioqumica
Las podemos hacer prcticamente todas en suero, en
plasma tambin siempre que el anticoagulante no interfiera en la prueba.
18
Los tubos de suero no llevan ningn tipo de anticoagulante y el tapn es de color rojo, segn las norma ISO
'JH
&O FM NFSDBEP IBZ UVCPT TJO BOUJDPBHVlante que no siguen esta norma y hay tapones de todos
MPT DPMPSFT 5FOFNPT RVF BTFHVSBSOPT RVF FM UVCP FMFgido para suero no lleve anticoagulante de ningn tipo.
Para inmunologa el tubo de eleccin es el de suero lo
mismo que para la determinacin de hormonas.
Suero
t 3JFTHPEFIFNMJTJTNBZPSRVFFOTVFSP
t $FOUSJGVHBDJOUSBTDPBHVMBDJO
t .VFTUSBJEOFBQBSBMBNBZPSBEFQSVFCBTCJPRVmicas e inmunolgicas
t /PDPOUJFOFGJCSJOHFOP
Si la sangre la recogemos en tubo de heparina litio podemos centrifugarla inmediatamente despus para la
obtencin del plasma.
Plasma
t 3JFTHPEFIFNMJTJTNFOPSRVFFOTVFSP
t $FOUSJGVHBDJOJONFEJBUB
t &OQSVFCBTCJPRVNJDBTQPTJCMFJOUFSGFSFODJBDPOBOticoagulante (mnimas con heparina Litio)
t $POUJFOFGJCSJOHFOP
4FDPOTFSWBEBTB$ZDPOHFMBEPBo$EVSBOUF
mucho tiempo
Fig. 18
Fig.19
El microtubo de la Fig. 18 se dej en posicin horizontal el de
la Fig. 19 en posicin vertical, en los dos se ve el coagulo y su
retraccin.
Si la sangre no desuera bien, esto suele ser lo habitual,
DFOUSJGVHBSFNPT B SQN EVSBOUF NJnutos.
19
20 25 C
6 das
1 da
3 das
Solo muestra
reciente
10 das
6 das
1 da
4 C
6 das
7 das
7 das
-20 C
Varios meses
1 mes
1 mes
10 das
6 das
1 da
8 meses
4 meses
Varios meses
10%actividad
7 das
en 7 d.
1 mes
2 das
7 das
Varios meses
5 das
10 das
1 mes
1 da
2 das
1 mes
Varios meses
1 da
3 das
6 meses
Trabajo cientfico
Determinacin de glucosa
miccin espontnea, sonda o cistocentesis y especialmente cuando se trate de urocultivos, en cuyo caso el
frasco o tubo deber ser estril.
Anlisis de heces
-PJEFBMTPOMPTBOMJTJTTFSJBEPTEFBEBTFODBTPEF
diagnstico de giardias por ejemplo.
Si no lo hacemos siguiendo
este protocolo no podremos valorar la glucosa pues
se produce un consumo de
esta por parte de los hemates.
Coagulacin
Fig. 20 Tubos de fluoruro
Na
Lquidos orgnicos
La sangre se recoger en un
tubo de citrato sdico, tubo
de tapn azul (Fig. 21).
Citologas
Refrigerar un mximo de 2
horas o congelar a -20 C.
Urianlisis
Mtodos: Podemos
realizarla de dos for3FDPNFOEBNPT/064"3GSBTDPTEFPSJOBQBSBSFNJUJS NBT 1VODJO DPO
la muestra al laboratorio, a no ser que sean hermticos aguja fina o punes preferible remitirla en tubos. Durante el transporte DJOoBTQJSBDJO DPO
suelen ser frecuentes los accidentes.
aguja fina.
Para el urianlisis solo son necesarios 5 10 ml de orina.
$POWJFOF JOEJDBS MB GPSNB EF SFDPHJEB EF MB NVFTUSB
Fig. 22
22
Fig. 22
Fig. 24
Fig. 25
Tamao
El tamao ideal
de la muestra seria de 1cm x 1cm aproximadamente. En caso de muestras de
mayor tamao deberemos hacer cortes cada 1,5 cms perpendiculares al eje mayor o tomar varias muestras incluyendo los
mrgenes de extirpacin (Fig. 25).
Fijacin
'PSNPMBM4FQSFQBSBDPOQBSUFEFGPSNBMEFIEP
BM
QBSUFTEFBHVB UBNCJOQVFEFTVCTUJUVJSTFFM
Hacemos la extensin inmediatamente por el procedi- BHVBQPSTPMVDJOTBMJOBGJTJPMHJDBBM
)BZPUSBTGSNJFOUP EF TRVBTI P BQMBTUBNJFOUP 'JH
&T EFDJS
mulas pero esta es la ms comn.
ponemos sobre el porta que contiene la gota otro porta
formando una cruz con el anterior y lo deslizamos sua- Recipientes
ve y rpidamente.
Existen distintos tipos de recipientes, la nica condicin es
Dejamos secar y fijamos con metanol.
RVFTFBIFSNUJDPZBEFDVBEPQBSBMBNVFTUSB 'JHZ
Lo remitimos al laboratorio sin teir. Se enviarn en
porta- preparaciones de plstico o envueltas en papel absorbente para acolcharlas.
Biopsias
Materiales: Bistur, tijeras, pinzas, punch, frascos hermticos, fijador (Fig.24).
Fig. 26
23
Trabajo cientfico
Fig. 27
Volumen de fijador
Deber superar el volumen de la muestra en una proporDJOP
Figura 28
Se debe sumergir el material en el fijador y no a la inversa para evitar el contacto de esta con las paredes y el
fondo del recipiente, evitando que se adhiera.
Si la muestra flotara (pulmn) la sumergiremos totalmente en el fijador.
NO
Figura 29
NO
t &MWPMVNFOEFMGJKBEPSOPFTFMBEFDVBEP
t -BNVFTUSBOPFTUGJMFUFBEBFOQPSDJPOFTEF
DNT
est entera.
t /PFTUFUJRVFUBEPPJEFOUJGJDBEPFMGSBTDP
Duracin de la fijacin
(FOFSBMNFOUFMBTNVFTUSBTFTUOGJKBEBTBMBTIPras de haberlas introducido en el fijador.
Figura 29
t &MGSBTDPFTEFQMTUJDPZIFSNUJDPQFSPEFNBTJBEP
pequeo para la muestra.
t -BNVFTUSBOPFTUGJMFUFBEBFOQPSDJPOFTEF
DN
t /PIBZGJKBEPSFOFMGSBTDP
FTUWBDP
Protocolo
Las muestras debern ir acompaadas de un protocoMPDPO
t
t
t
t
t
t
Bibliografa
1.
#VTI#..BOVBMEFM-BCPSBUPSJP7FUFSJOBSJPEF"OMJTJT$MOJDPT
Ed. Acribia
2.
$PXFMM 3-
5BZMFS 3% %JBHOPTUJD $ZUPMPHZ PG EPH BOE DBU &E
"NFSJDBO7FUFSJOBSZQVCMJDBUJPOT
*OD
4.
5.
Errores
%BWJETPIO*)FOSZ+#%JBHOTUJDPDMOJDPQPSFMMBCPSBUPSJP&E
4BMWBUFEJDJO
6.
Figura 28
t /PFTBDPOTFKBCMFFMVTPEFGSBTDPTEFDSJTUBMQVFTEVrante el transporte pueden ocurrir accidentes.
.BSUOF[EF.FSMP
&"UMBTEFDJUPMPHBDMOJDBEFMQFSSPZFMHBUP
&E4FSWFU
4UFWFO&8FJTCSPEFi5IF)JTUPQBUIPMPHZMBCPSBUPSZJO%JBHOPTJT
PG/FPQMBTJBw
24