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REPORTE DE RESULTADOS

HEMOAGLUTINACIN DIRECTA

Crdenas Chiquillo Roberth Eduardo1, Quevedo


Mojica Hussey Lorduy, Cariilo Pearanda Adriana
Patricia1.
RESULTADOS Y ANALISIS
Imagen 1. Hemaglutinacin directa, con suero A (+) y glbulos rojos al 2% de
tipo B.

C (+): Control Positivo: PBS + Anti-B+ Glbulos rojos B.


S: Suero: PBS + Suero A (+) + Glbulos rojos B.
C (-): Control Negativo: PBS + Glbulos rojos
Una prueba inmunolgica alternativa para el diagnstico de enfermedades es
la tcnica de aglutinacin directa, que es sencilla, econmica y no requiere de
equipos ni de materiales especializados [1]. Adems, se ha observado buena
sensibilidad y especificidad cuando se utiliza conjuntamente con otras tcnicas
inmunolgicas y parasitolgicas, y, dado que esta reaccin detecta anticuerpos
dirigidos contra antgenos de superficie del protozoo, brinda resultados
positivos ms precozmente que otras tcnicas inmunolgicas que identifican
anticuerpos contra antgenos citoplasmticos [2].
Esta es una tcnica que se basa en la reaccin antgeno- anticuerpo y
consisten en la agrupacin de partculas en suspensin formando un
1 . Universidad de Pamplona-Colombia, Facultad de Ciencias Bsicas,
Departamento de Microbiologa.

inmunocomplejo compuesto de un aglutingeno que se encuentra en la


superficie de la partcula (Glbulos rojos) y una aglutinina (Anticuerpo)
produciendo siempre la aglutinacin, o en algunos casos siendo esta
incompleta, que en situaciones desfavorables no producen aglutinacin.
Es importante establecer la diferencia entre la hemoaglutinacin directa y la
hemoaglutinacin indirecta, la tcnica aplicada en el laboratorio se bas en el
principio de la hemoaglutinacin directa usando un antgeno de partculas
pertenecientes a los glbulos rojos que en una suspensin se aglutina
directamente por un anticuerpo provenientes de un suero sanguneo (Imagen
2), a diferencia de la aglutinacin indirecta, (No realizada en este anlisis)
denominada tambin pasiva, se da cuando se aglutinan clulas que poseen
antgenos pasivos en la superficie celular, donde el antgeno no hizo reaccin
directa con el antgeno especfico.
Imagen 2. Principio de Hemoaglutinacin directa.

Fuente: [3]
Formacin de un punto: Reaccin de Hemoaglutinacin negativa.
Formacin de unas capas superpuestas: Reaccin de Hemoaglutinacin Positiva.

Se evidencia en la imagen 1, que en la muestra analizada se obtuvo una


reaccin de hemoaglutinacin positiva hasta el tercer pocillo equivalente a 1/8,
en donde en la dilucin ms alta se observa las capas superpuestas dando
reaccin positiva con el antgeno siendo este equivalente al
ndice de
concentracin de anticuerpos en el suero de tipo A.
Al darse una reaccin positiva las capas superpuestas se da gracias a las
aglutingenos presentes en el glbulos rojos de tipo B, que reaccin con las
aglutininas solubles en el suero de tipo A, pero el cual posee anticuerpos de
tipo B que dan la reaccin antgeno-anticuerpo. A partir del pocillo 4 se
evidencia la reaccin negativa debido a que las diluciones realizadas
disminuyeron la concentracin de anticuerpos hasta la no presencia de los
mismos, capaces de reaccionar con el antgeno superficial de los glbulos

rojos, por ende los glbulos rojos tienden a sedimentarse en fondo de los
pocillos formando un punto en forma de botn.
Los controles tanto negativos como positivos permiten realizar unas
comparaciones que se pueden llevar a cabo en la muestra, en los controles
negativos al no haber la presencia de anticuerpos se observa los puntos
caractersticos por la sedimentacin de los glbulos rojos, a diferencia de los
controles positivos en donde existe la presencia de anticuerpos y por las
diluciones se observa la presencia de los puntos caractersticos una vez que los
anticuerpos comerciales no estn presentes.
Es muy importante la presencia de PBS la cual es una solucin tampn en la
investigacin biolgica, acuosa y salina que contiene cloruro sdico, fosfato
sdico, cloruro de potasio y fosfato de potasio, mientras que los grupos fosfato
mantienen el pH estable, la osmolaridad coincide con la del cuerpo humano[4].
CONCLUSIONES:
La tcnica de hemoaglutinacin directa permite determinar aproximadamente
la concentracin o el ttulo de
anticuerpos presentes en una muestra
problema, y a su vez conocer la interaccin antgeno- anticuerpo mediante
una reaccin visual comparativa. Esta tcnica posee diferentes usos como lo es
la tipificacin de grupos sanguneos y Rh, inmunodiagnostico de enfermedades
parasitarias e infecciosas, en un menor, tiempo a un bajo costo y mediante la
utilizacin de materiales de fcil acceso.
Mediante la implementacin de esta tcnica se logr observar la reaccin
inmunolgica dada entre los anticuerpos presentes de tipo A(Anti-B) los cuales
reaccionaron con los antgenos presentes en la superficie de la membrana de
los glbulos rojos de tipo B, por medio de diluciones seriadas las cuales
permiten detectar visualmente la reaccin inmunologca y por ende lograr
determinar el ndice de concentracin de anticuerpos.
BIBLIOGRAFIA:
[1] Alviarez, Y., Lares, M., Viettri, M., Aguilar, C., Herrera, L., & Ferrer, E. (2014).
Estandarizacin de la tcnica de aglutinacin directa para el inmunodiagnstico
de la enfermedad de Chagas. Biomdica, 34(2).
[2] Mendicino DA, Streiger ML, del Barco ML, Fabbro DL, Bizai ML, Martnez R.
Utilidad de la tcnica de aglutinacin directa en el diagnstico de la infeccin
chagsica. Rev Patol Trop. 2011;40:35-45.
[3] Mesa54dinmuno.blogspot.com.co. (2016). TECNICAS INMUNOLOGICAS.
[online] Available at: http://mesa54dinmuno.blogspot.com.co/2009/05/tecnicasinmunologicas.html [Accessed 29 Oct. 2016].

[4] Scykness.wordpress.com. (2016). cultivo celular | ScyKness. [online]


Available at: https://scykness.wordpress.com/tag/cultivo-celular/ [Accessed 29
Oct. 2016].