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Fotosntesis Reacciones de luz.

LA VIDA EN LA TIERRA ULTIMAMENTE DEPENDE DE LA ENERGA derivada del


sol. La fotosntesis es el nico proceso de importancia biolgica que puede
cosechar esta energa. Adems, una gran parte de los recursos energticos del
planeta es el resultado de la actividad fotosinttica en tiempos recientes o
antiguos (combustibles fsiles). Este captulo presenta los principios fsicos
bsicos que subyacen al almacenamiento de energa fotosinttica y la
comprensin actual de la estructura y funcin del aparato fotosinttico
(Blankenship 2002).
El trmino fotosntesis significa literalmente "sntesis usando luz". Como
veremos en este captulo, los organismos fotosintticos utilizan la energa solar
para sintetizar compuestos de carbono que no pueden formarse sin la entrada
de energa. Ms especficamente, la energa de luz impulsa la sntesis de
carbohidratos de dixido de carbono y agua con la generacin de oxgeno:
La energa almacenada en estas molculas puede ser utilizada ms tarde para
impulsar los procesos celulares en la planta y puede servir como fuente de
energa para todas las formas de vida.
Este captulo trata del papel de la luz en la fotosntesis, la estructura del
aparato fotosinttico y los procesos que comienzan con la excitacin de la
clorofila por la luz y culminan en la sntesis de ATP y NADPH.
FOTOSNTESIS EN PLANTAS SUPERIORES
El tejido fotosinttico ms activo en las plantas superiores es el mesfilo de las
hojas. Las clulas de mesfilo tienen muchos cloroplastos, que contienen los
pigmentos verdes especializados que absorben la luz, las clorofilas. En la
fotosntesis, la planta utiliza la energa solar para oxidar el agua, liberando as
el oxgeno, y para reducir el dixido de carbono, formando as grandes
compuestos de carbono, principalmente azcares. La serie compleja de
reacciones que culminan en la reduccin de CO2 incluyen las reacciones de
tilacoides y las reacciones de fijacin de carbono.
Las reacciones tilacoides de la fotosntesis tienen lugar en las membranas
internas especializadas de los cloroplastos llamados tilacoides (vase el
captulo 1). Los productos finales de estas reacciones tilacoides son los
compuestos de alta energa ATP y NADPH, que se utilizan para la sntesis de
azcares en las reacciones de fijacin de carbono. Estos procesos tienen lugar
en el estroma de los cloroplastos, la regin acuosa que rodea a los tilakoides.
Las reacciones tilacoides de la fotosntesis son el tema de este captulo; Las
reacciones de fijacin de carbono se discuten en el captulo 8.
En el cloroplasto, la energa luminosa se convierte en energa qumica por dos
unidades funcionales diferentes llamadas fotosistemas. La energa luminosa
absorbida se utiliza para la transferencia de electrones a travs de una serie de
compuestos que actan como donadores de electrones y aceptores de
electrones. La mayora de los electrones finalmente reducen NADP + a NADPH

y oxidan H2O a O2. La energa de la luz tambin se utiliza para generar una
fuerza motriz del protn (vase el captulo 6) a travs de la membrana del
tilacoide, que se utiliza para sintetizar el ATP.
CONCEPTOS GENERALES
En esta seccin vamos a explorar los conceptos esenciales que proporcionan
una base para la comprensin de la fotosntesis. Estos conceptos incluyen la
naturaleza de la luz, las propiedades de los pigmentos y los diversos papeles
de los pigmentos.

La luz tiene caractersticas de una partcula y una onda


Atriumph de la fsica a principios del siglo XX fue la comprensin de que la luz
tiene propiedades de partculas y ondas. Awave (Figura 7.1) se caracteriza por
una longitud de onda, designada por la letra griega lambda (l), que es la
distancia entre crestas de onda sucesivas. La frecuencia, representada por la
letra griega nu (n), es el nmero de crestas de onda que pasan a un
observador en un tiempo dado. Una simple ecuacin relaciona la longitud de
onda, la frecuencia y la velocidad de cualquier onda:
Donde c es la velocidad de la onda - en el presente caso, la velocidad de la luz
(3.0 108 m s-1). La onda luminosa es una onda electromagntica transversal
(lado a lado), en la cual tanto los campos elctricos como los magnticos
oscilan perpendicularmente a la direccin de propagacin de la onda ya 90
con respecto a cada uno.
La luz es tambin una partcula, a la que llamamos un fotn. Cada fotn
contiene una cantidad de energa que se llama un quantum (quanta plural). El
contenido energtico de la luz no es continuo sino que se entrega en estos
paquetes discretos, los cuantos. La energa (E) de un fotn depende de la
frecuencia de la luz segn una relacin conocida como ley de Planck:
Donde h es la constante de Planck (6.626 10-34 J s).
La luz del sol es como una lluvia de fotones de diferentes frecuencias. Nuestros
ojos son sensibles a slo un pequeo rango de frecuencias, la regin de luz
visible del espectro electromagntico (Figura 7.2). La luz de frecuencias
ligeramente ms altas (o longitudes de onda ms cortas) est en la regin
ultravioleta del espectro, y la luz de frecuencias ligeramente ms bajas (o
longitudes de onda ms largas) est en la regin infrarroja. La salida del sol se
muestra en la figura 7.3, junto con la densidad de energa que golpea la
superficie de la Tierra. El espectro de absorcin de la clorofila a (curva C en la
figura 7.3) indica aproximadamente
La porcin de la salida solar que es utilizada por las plantas.
Un espectro de absorcin (espectro plural) muestra la cantidad de energa
luminosa absorbida o absorbida por una molcula o sustancia en funcin de la

longitud de onda de la luz. El espectro de absorcin para una sustancia


particular en un disolvente no absorbente puede determinarse mediante un
espectrofotmetro como se ilustra en la figura 7.4. Espectrofotometra, la
tcnica utilizada para medir la absorcin de luz por una muestra, se discute
ms completamente en el Tema Web 7.1.

Cuando las molculas absorben o emiten luz, cambian su estado electrnico


La clorofila aparece verde a nuestros ojos porque absorbe la luz principalmente
en las partes rojas y azules del espectro, por lo que slo parte de la luz
enriquecida en longitudes de onda verdes (aproximadamente 550 nm) se
refleja en nuestros ojos (ver Figura 7.3). La absorcin de la luz est
representada por la ecuacin 7.3, en la cual la clorofila (Chl) en su estado de
energa ms baja, o tierra, absorbe un fotn (representado por hn) y hace una
transicin a un estado de mayor energa o excitado
La absorcin de la luz azul excita la clorofila a un estado de energa superior a
la absorcin de la luz roja porque la energa de los fotones es mayor cuando su
longitud de onda es corta. En el estado excitado ms alto, la clorofila es
extremadamente inestable, entrega muy rpidamente parte de su energa al
entorno como calor y entra en el estado excitado ms bajo, donde puede ser
estable durante un mximo de varios nanosegundos (10-9 s). Debido a esta
inestabilidad inherente del estado excitado, cualquier proceso que capte su
energa debe ser extremadamente rpido.
En el estado excitado ms bajo, la clorofila excitada tiene cuatro vas
alternativas para disponer de su energa disponible.
1. La clorofila excitada puede volver a emitir un fotn y volver a su estado
fundamental, un proceso conocido como fluorescencia. Cuando lo hace, la
longitud de onda de la fluorescencia es ligeramente ms larga (y de menor
energa) que la longitud de onda de absorcin porque una porcin de la energa
de excitacin se convierte en calor antes de que se emita el fotn fluorescente.
Las clorofilas fluorescen en la regin roja del espectro.
2. La clorofila excitada puede volver a su estado fundamental convirtiendo
directamente su energa de excitacin en calor, sin emisin de un fotn.
3. La clorofila puede participar en la transferencia de energa, durante la cual
una clorofila excitada transfiere su energa a otra molcula.
4. Un cuarto proceso es la fotoqumica, en la que la energa del estado excitado
provoca reacciones qumicas. Las reacciones fotoqumicas de la fotosntesis se
encuentran entre las reacciones qumicas ms rpidas. Esta velocidad extrema
es necesaria para que la fotoqumica compita con las otras tres reacciones
posibles del estado excitado que acabamos de describir.
Los pigmentos
fotosntesis

fotosintticos

absorben

la

luz

que

potencia

la

La energa de la luz solar es absorbida primero por los pigmentos de la planta.


Todos los pigmentos activos en la fotosntesis se encuentran en el cloroplasto.
Las estructuras y los espectros de absorcin de varios pigmentos fotosintticos
se muestran en las figuras 7.6 y 7.7, respectivamente. Las clorofilas y
bacterioclorofilas (pigmentos que se encuentran en ciertas bacterias) son los
pigmentos tpicos de los organismos fotosintticos, pero todos los organismos
contienen una mezcla de ms de un tipo de pigmento, cada uno sirviendo una
funcin especfica.
Las clorofilas a y b son abundantes en las plantas verdes, ycyd se encuentran
en algunos protistas y cianobacterias. Se han encontrado varios tipos
diferentes de bacterioclorofila; El tipo a es el ms ampliamente distribuido. El
Tema 7.2 muestra la distribucin de pigmentos en diferentes tipos de
organismos fotosintticos.
Todas las clorofilas tienen una compleja estructura de anillo que est
qumicamente relacionada con los grupos de tipo porfirina que se encuentran
en la hemoglobina y los citocromos (ver Figura 7.6A). Adems, una cola larga
de hidrocarburo est casi siempre unida a la estructura de anillo. La cola ancla
la clorofila a la porcin hidrofbica de su ambiente. La estructura del anillo
contiene algunos electrones ligeramente encuadernados y es la parte de la
molcula involucrada en las transiciones electrnicas y las reacciones redox.
Los diferentes tipos de carotenoides encontrados en los organismos
fotosintticos son todas molculas lineales con mltiples enlaces conjugados
mltiples (vase la figura 7.6B). Las bandas de absorcin en la regin de 400 a
500 nm dan a los carotenoides su color naranja caracterstico. El color de las
zanahorias, por ejemplo, se debe al carotenoide -caroteno, cuya estructura y
espectro de absorcin se muestran en las figuras 7.6 y 7.7, respectivamente.
Los carotenoides se encuentran en todos los organismos fotosintticos, excepto
en los mutantes incapaces de vivir fuera del laboratorio. Los carotenoides son
constituyentes integrales del tilacoide
Membrana y se asocian generalmente ntimamente con la antena y las
protenas del pigmento del centro de la reaccin. La luz absorbida por los
carotenoides se transfiere a la clorofila para la fotosntesis; Debido a este papel
se les llama pigmentos accesorios.
EXPERIMENTOS CLAVE EN LA COMPRENSIN DE LA FOTOSNTESIS
Establecer la ecuacin qumica general de la fotosntesis requiere varios
cientos de aos y las contribuciones de muchos cientficos (referencias de la
literatura para los acontecimientos histricos se pueden encontrar en el sitio
web). En 1771, Joseph Priestley observ que una ramita de menta que creca
en el aire en la que se haba quemado una vela, mejor el aire para que otra
vela pudiera quemarse. Haba descubierto oxgeno
Evolucin por las plantas. Un holands, Jan Ingenhousz, document el papel
esencial de la luz en la fotosntesis en 1779. Otros cientficos establecieron los

papeles de CO2 y H2O y mostraron que la materia orgnica, especficamente


los carbohidratos, es un producto de la fotosntesis junto con el oxgeno. A
finales del siglo XIX, la reaccin qumica global equilibrada para la fotosntesis
podra escribirse de la siguiente manera:
Donde C6H12O6 representa un azcar simple tal como glucosa. Como se ver
en el captulo 8, la glucosa no es el producto real de las reacciones de fijacin
de carbono. Sin embargo, la energa para los productos reales es
aproximadamente la misma, por lo que la representacin de la glucosa en la
ecuacin 7.4 debe ser considerada como una conveniencia, pero no tomada
literalmente.
Las reacciones qumicas de la fotosntesis son complejas. De hecho, se han
identificado al menos 50 etapas de reaccin intermedias, e indudablemente se
descubrirn etapas adicionales. Una pista temprana a la naturaleza qumica del
proceso qumico esencial de la fotosntesis vino en los aos 20 de
investigaciones de bacterias fotosintticas que no produjeron el oxgeno como
producto final. De sus estudios sobre estas bacterias, C. B. van Niel concluy
que la fotosntesis es un proceso redox (reduccin-oxidacin). Esta conclusin
ha sido confirmada y ha servido como un concepto fundamental sobre el cual
se han basado todas las investigaciones posteriores sobre la fotosntesis.
Ahora nos referimos a la relacin entre la actividad fotosinttica y el espectro
de luz absorbida. Vamos a discutir algunos de los experimentos crticos que
han contribuido a nuestra comprensin actual de la fotosntesis, y vamos a
considerar las ecuaciones para las reacciones qumicas esenciales de la
fotosntesis.
Los espectros de accin relacionan la absorcin de luz con la actividad
fotosinttica
El uso de espectros de accin ha sido fundamental para el desarrollo de
nuestra comprensin actual de la fotosntesis. Un espectro de accin
representa la magnitud de una respuesta de un sistema biolgico a la luz, en
funcin de la longitud de onda. Por ejemplo, un espectro de accin para la
fotosntesis puede construirse a partir de mediciones de la evolucin del
oxgeno a diferentes longitudes de onda (Figura 7.8). A menudo, un espectro de
accin puede identificar el cromforo (pigmento) responsable de un fenmeno
particular inducido por la luz.
Algunos de los primeros espectros de accin fueron medidos por T. W.
Engelmann a finales de 1800 (Figura 7.9). Engelmann us un prisma para
dispersar la luz del sol en un arco iris que se dej caer sobre un filamento de
algas acuticas. Se introdujo en el sistema una poblacin de bacterias que
buscan O2. Las bacterias se congregaron en las regiones de los filamentos que
ms evolucionaron en O2. Estas fueron las regiones iluminadas por la luz azul y
la luz roja, que son fuertemente absorbidos por la clorofila. Hoy en da, los
espectros de accin se pueden medir en espectrgrafos de tamao de
habitacin en los que un inmenso monocromador baa las muestras

experimentales en luz monocromtica. Pero el principio del experimento es el


mismo que el de los experimentos de Engelmann.
Los espectros de accin fueron muy importantes para el descubrimiento de dos
fotosistemas distintos que operan en organismos fotosintticos que
evolucionan con O2. Antes de introducir los dos fotossistemas, sin embargo,
necesitamos describir las antenas recolectoras de luz y las necesidades
energticas de la fotosntesis.
La fotosntesis tiene lugar en complejos que contienen antenas de
recoleccin de luz y centros de reaccin fotoqumica.
Una parte de la energa luminosa absorbida por las clorofilas y los carotenoides
se almacena finalmente como energa qumica a travs de la formacin de
enlaces qumicos. Esta conversin de energa de una forma a otra es un
proceso complejo que depende de la cooperacin entre muchas molculas de
pigmento y un grupo de protenas de transferencia de electrones.
La mayora de los pigmentos sirven como un complejo de antenas, recogiendo
luz y transfiriendo la energa al complejo del centro de reaccin, donde tienen
lugar las reacciones qumicas de oxidacin y reduccin que conducen al
almacenamiento de energa a largo plazo (Figura 7.10). Las estructuras
moleculares de algunos de los complejos antena y centro de reaccin se
discuten ms adelante en el captulo.
Cmo se beneficia la planta de esta divisin del trabajo entre la antena y los
pigmentos del centro de reaccin? Incluso en luz solar intensa, una molcula
de clorofila absorbe slo unos pocos
Fotones cada segundo. Si cada clorofila tuviera un centro de reaccin completo
asociado con l, las enzimas que componen este sistema estaran inactivas la
mayor parte del tiempo, slo ocasionalmente activadas por absorcin de
fotones. Sin embargo, si muchos pigmentos pueden enviar energa a un centro
de reaccin comn, el sistema se mantiene activo una gran fraccin del
tiempo.
En 1932, Robert Emerson y William Arnold realizaron un experimento clave que
proporcion la primera evidencia para la cooperacin de muchas molculas de
clorofila en la conversin de energa durante la fotosntesis. Presentaron muy
breves (10-5 s) destellos de luz a una suspensin de la alga verde Chlorella
pyrenoidosa y midieron la cantidad de oxgeno producido. Los destellos se
separaron unos 0,1 s, tiempo que Emerson y Arnold haban determinado en
trabajos anteriores era suficiente para que las etapas enzimticas del proceso
se completaran antes de la llegada del siguiente destello. Los investigadores
variaron la energa de los destellos y encontraron que a altas energas la
produccin de oxgeno no aumentaba cuando se produca un destello ms
intenso: el sistema fotosinttico estaba saturado de luz (Figura 7.11).
En su medicin de la relacin entre la produccin de oxgeno y la energa
instantnea, Emerson y Arnold se sorprendieron al descubrir que bajo

condiciones saturantes, slo se produca una molcula de oxgeno para cada


2500 molculas de clorofila en la muestra. Ahora sabemos que varios cientos
de pigmentos estn asociados con cada centro de reaccin y que cada centro
de reaccin debe operar cuatro veces para producir una molcula de oxgeno,
de ah el valor de 2500 clorofilas por O2.
Los centros de reaccin y la mayora de los complejos de antena son
componentes integrales de la membrana fotosinttica. En organismos
eucariotas fotosintticos, estas membranas se encuentran dentro del
cloroplasto; En los procariotas fotosintticos, el sitio de la fotosntesis es la
membrana plasmtica o membranas derivadas de ella.
La grfica que se muestra en la figura 7.11 nos permite calcular otro parmetro
importante de las reacciones de luz de la fotosntesis, el rendimiento cuntico.
El rendimiento cuntico de la fotosntesis () se define como sigue:
En la parte lineal (baja intensidad de luz) de la curva, un aumento en el nmero
de fotones estimula un aumento proporcional en la evolucin del oxgeno. As,
la pendiente de la Curva mide el rendimiento cuntico para la produccin de
oxgeno. El rendimiento cuntico para un proceso particular puede variar de 0
(si ese proceso no responde a la luz) a 1,0 (si cada fotn absorbido contribuye
al proceso). Una discusin ms detallada de los rendimientos cunticos se
puede encontrar en el Tema Web 7.3.
En los cloroplastos funcionales mantenidos en luz tenue, el rendimiento
cuntico de la fotoqumica es de aproximadamente 0,95, el rendimiento
cuntico de la fluorescencia es 0,05 o menor, y los rendimientos cunticos de
otros procesos son insignificantes. La gran mayora de las molculas de la
clorofila excitada conduce a la fotoqumica.
La reaccin qumica de la fotosntesis es impulsada por la luz
Es importante darse cuenta de que el equilibrio para la reaccin qumica
mostrado en la Ecuacin 7.4 est muy lejos en la direccin de los reactivos. La
constante de equilibrio para la Ecuacin 7.4, calculada a partir de las energas
libres de formacin tabuladas para cada uno de los compuestos involucrados,
es de aproximadamente 10-500. Este nmero es tan cercano a cero que uno
puede estar bastante seguro de que en toda la historia del universo ninguna
molcula de glucosa se ha formado espontneamente a partir de H2O y CO2
sin la energa externa que se proporciona. La energa necesaria para impulsar
la reaccin fotosinttica proviene de la luz. He aqu una forma ms simple de la
ecuacin 7.4:
Donde (CH2O) es un sexto de una molcula de glucosa. Alrededor de nueve o
diez fotones de luz son necesarios para impulsar la reaccin de la ecuacin 7.6.
Aunque el rendimiento cuntico fotoqumico en condiciones ptimas es casi el
100%, la eficiencia de la conversin de la luz en energa qumica es mucho
menor. Si se absorbe la luz roja de longitud de onda 680 nm, la entrada total de
energa (vase la Ecuacin 7.2) es de 1760 kJ por mol de oxgeno formado. Esta

cantidad de energa es ms que suficiente para impulsar la reaccin en la


Ecuacin 7.6, que tiene un cambio de energa libre de estado normalizado de
+467 kJ mol-1. La eficiencia de la conversin de la energa luminosa a la
longitud de onda ptima en
La energa qumica es por lo tanto aproximadamente el 27%, que es
notablemente alta para un sistema de conversin de energa. La mayor parte
de esta energa almacenada se utiliza para procesos de mantenimiento celular;
La cantidad desviada a la formacin de biomasa es menos (vase la figura 9.2).
No hay conflicto entre el hecho de que la eficiencia cuntica fotoqumica
(rendimiento cuntico) es casi 1 (100%) y la eficiencia de conversin de
energa es slo el 27%. La eficiencia cuntica es una medida de la fraccin de
fotones absorbidos que se dedican a la fotoqumica; La eficiencia energtica es
una medida de la cantidad de energa
Los fotones absorbidos son almacenados como productos qumicos. Los
nmeros indican que casi todos los fotones absorbidos se dedican a la
fotoqumica, pero slo alrededor de una cuarta parte de la energa en cada
fotn se almacena, convirtindose el resto en calor.
La luz impulsa la reduccin del NADP y la formacin de ATP
El proceso general de la fotosntesis es una reaccin qumica redox, en la que
los electrones se eliminan de una especie qumica, con lo que se oxida, y se
agrega a otra especie, reducindola as. En 1937, Robert Hill encontr que a la
luz, aislados de los cloroplastos thylakoids reducir una variedad de
compuestos, como las sales de hierro. Estos compuestos sirven como oxidantes
en lugar de CO2, como muestra la siguiente ecuacin:
Desde entonces se ha demostrado que muchos compuestos actan como
aceptores artificiales de electrones en lo que ha llegado a conocerse como la
reaccin de Hill. Su uso ha sido invaluable para elucidar las reacciones que
preceden a la reduccin del carbono.
Ahora sabemos que durante el funcionamiento normal del sistema
fotosinttico, la luz reduce nicotinamida adenina dinucletido fosfato (NADP),
que a su vez sirve como agente reductor para la fijacin de carbono en el ciclo
de Calvin (vase el captulo 8). El ATP tambin se forma durante el flujo de
electrones desde el agua hasta el NADP, y tambin, se utiliza en la reduccin
de carbono. Las reacciones qumicas en las que el agua se oxida a oxgeno, el
NADP se reduce y el ATP se forma son conocidas como reacciones de tilacoides
porque casi todas las reacciones hasta la reduccin de NADP tienen lugar
dentro de los tilakoides. Las reacciones de fijacin y reduccin de carbono se
denominan reacciones de estroma porque las reacciones de reduccin de
carbono tienen lugar en la regin acuosa del cloroplasto, el estroma. Aunque
esta divisin es algo arbitraria, es conceptualmente til.
Los organismos que evolucionan con oxgeno tienen dos sistemas
fotogrficos que funcionan en serie

A finales de la dcada de 1950, varios experimentos estaban desconcertando a


los cientficos que estudiaron la fotosntesis. Uno de estos experimentos
llevados a cabo por Emerson, midi el rendimiento cuntico de la fotosntesis
como una funcin de la longitud de onda y revel un efecto conocido como
gota roja (Figura 7.12).
Si se mide el rendimiento cuntico para las longitudes de onda a las que la
clorofila absorbe la luz, los valores encontrados en la mayor parte del rango
son bastante constantes, lo que indica que cualquier fotn absorbido por la
clorofila u otros pigmentos es tan efectivo como cualquier otro fotn en la
fotosntesis. Sin embargo, el rendimiento disminuye drsticamente en la regin
de color rojo lejano de la absorcin de clorofila (mayor de 680 nm).
Esta cada no puede ser causada por una disminucin en la absorcin de
clorofila porque el rendimiento cuntico mide solamente la luz que realmente
ha sido absorbida. Por lo tanto, la luz con una longitud de onda mayor que 680
nm es mucho menos eficiente que la luz de longitudes de onda ms cortas.
Otro resultado experimental desconcertante fue el efecto de realce, tambin
descubierto por Emerson. Medi la tasa de fotosntesis por separado con luz de
dos longitudes de onda diferentes y luego utiliz los dos haces
simultneamente (Figura 7.13). Cuando la luz roja y la luz roja lejana se dieron
juntos, la tasa de fotosntesis fue mayor que la suma de las tasas individuales.
Esta fue una observacin sorprendente y sorprendente.
Estas observaciones fueron finalmente explicadas por experimentos llevados a
cabo en los aos sesenta (ver Tema 7.4) que condujeron al descubrimiento de
que dos complejos fotoqumicos, ahora conocidos como fotosistemas I y II (PSI
y PSII), operan en serie para llevar a cabo el almacenamiento temprano de
energa Reacciones de la fotosntesis.
El fotosistema I absorbe preferentemente la luz roja lejana de longitudes de
onda superiores a 680 nm; El fotosistema II absorbe preferentemente luz roja
de 680 nm y es conducido muy pobremente por luz roja lejana. Esta
dependencia de la longitud de onda explica el efecto de realce y el efecto gota
roja. Otra diferencia entre los fotossistemas es que
El fotosistema I produce un reductor fuerte, capaz de reducir NADP +, y un
oxidante dbil.
El fotosistema II produce un oxidante muy fuerte, capaz de oxidar el agua, y
un reductor ms dbil que el producido por el fotosistema I.
El reductor producido por el fotosistema II reduce el oxidante producido por el
fotosistema I. Estas propiedades de los dos fotosistemas se muestran
esquemticamente en la figura 7.14.
El esquema de fotosntesis representado en la figura 7.14, llamado el esquema
Z (para zigzag), se ha convertido en la base para entender los organismos
fotosintticos que evolucionan con O2 (oxgeno). Representa el funcionamiento

de dos fotosistemas fsicamente y qumicamente distintos (I y II), cada uno con


sus propios pigmentos de antena y centro de reaccin fotoqumica. Los dos
fotosistemas estn unidos por una cadena de transporte de electrones.
ORGANIZACIN DEL APARATO FOTOSINTTICO
En la seccin anterior se explican algunos de los principios fsicos subyacentes
a la fotosntesis, algunos aspectos de los papeles funcionales de diversos
pigmentos y algunas de las reacciones qumicas llevadas a cabo por los
organismos fotosintticos. Ahora nos referimos a la arquitectura del aparato
fotosinttico ya la estructura de sus componentes.
El cloroplasto es el sitio de la fotosntesis
En los eucariotas fotosintticos, la fotosntesis tiene lugar en el organelo
subcelular conocido como el cloroplasto. La figura 7.15 muestra una
micrografa electrnica de transmisin de una seccin delgada de un
cloroplasto de guisantes. El aspecto ms llamativo de la estructura del
cloroplasto es el extenso sistema de membranas internas conocidas como
tilacoides. Toda la clorofila est contenida dentro de este sistema de
membrana, que es el sitio de las reacciones de luz de la fotosntesis.
Las reacciones de reduccin de carbono, que son catalizadas por enzimas
solubles en agua, tienen lugar en el estroma (estroma plural), la regin del
cloroplasto fuera de los tilakoides. La mayora de los tilacoides parecen estar
estrechamente asociados entre s. Estas membranas apiladas son conocidas
como grana lamellae (lmina singular, cada pila se llama granum), y las
membranas expuestas en las que el apilamiento est ausente se conocen
como lamelas de estroma.
Dos membranas separadas, compuestas cada una de una bicapa lipdica y
juntas conocidas como envolvente, rodean la mayora de los tipos de
cloroplastos (Figura 7.16). Este sistema de doble membrana contiene una
variedad de sistemas de transporte de metabolitos.
El cloroplasto tambin contiene su propio ADN, ARN y ribosomas. Muchas de
las protenas del cloroplasto son productos de transcripcin y traduccin dentro
del propio cloroplasto, mientras que otras son codificadas por el ADN nuclear,
sintetizadas en ribosomas citoplasmticos, y luego importadas al cloroplasto.
Esta notable divisin del trabajo,
Que se extienden en muchos casos a diferentes subunidades del mismo
complejo enzimtico, se discutirn con ms detalle ms adelante en este
captulo. Para algunas estructuras dinmicas de los cloroplastos vase Web
Essay 7.1.
Los Thylakoids contienen las protenas integrales de la membrana
Una amplia variedad de protenas esenciales para la fotosntesis se incrustan
en el tilacoide

Membranas En muchos casos, porciones de estas protenas se extienden en las


regiones acuosas en ambos lados de los tilakoides. Estas protenas de
membrana integrales contienen una gran proporcin de aminocidos
hidrfobos y por lo tanto son mucho ms estables en un medio no acuoso tal
como la porcin de hidrocarburo de la membrana (vase la figura 1.5A). Los
centros de reaccin, los complejos de antena pigmento-protena y la mayora
de las enzimas de transporte de electrones son todas protenas de membrana
integrales. En todos los casos conocidos, las protenas de membrana integrales
del cloroplasto tienen una orientacin nica dentro de la membrana. Las
protenas de la membrana tilacoide tienen una regin que apunta hacia el lado
estromal de la membrana y la otra orientada hacia la parte interior del
tilacoide, conocida como lumen (vanse las Figuras 7.16 y 7.17).
Las clorofilas y los pigmentos accesorios de recoleccin de luz en la membrana
tilacoide estn siempre asociados de una manera no covalente pero altamente
especfica con las protenas. Tanto la antena como las clorofilas del centro de
reaccin estn asociadas con protenas que estn organizadas dentro de la
membrana para optimizar la transferencia de energa en los complejos de
antenas y la transferencia de electrones en los centros de reaccin, al tiempo
que minimizan los procesos de despilfarro.
Los sistemas de fotosistemas I y II se separan espacialmente en la
membrana de Thylakoid
El centro de reaccin de PSII, junto con sus clorofilas de antena y protenas de
transporte de electrones asociadas, se localiza predominantemente en las
laminillas de grana (Figura 7.18) (AllenY Forsberg 2001).
El centro de reaccin PSI y sus pigmentos de antena asociados y protenas de
transferencia de electrones, as como la enzima factor de acoplamiento que
cataliza la formacin de ATP,
Se encuentran casi exclusivamente en las lminas de estroma y en los bordes
de las lminas de grana. El complejo citocromo b6f de la cadena de transporte
de electrones que conecta los dos fotossistemas (vase la figura 7.21) se
distribuye uniformemente entre estroma y grana.
As, los dos eventos fotoqumicos que tienen lugar en la fotosntesis que
evoluciona con O2 estn espacialmente separados. Esta separacin implica
que uno o ms de los portadores de electrones que funcionan entre los
fotosistemas se difunde de la regin grana de la membrana a la regin del
estroma, donde los electrones son entregados al fotosistema I.
En PSII, la oxidacin de dos molculas de agua produce cuatro electrones,
cuatro protones y un solo O2 (vase la ecuacin 7.8). Los protones producidos
por esta oxidacin del agua tambin deben ser capaces de difundirse a la
regin del estroma, donde se sintetiza el ATP. El papel funcional de esta gran
separacin (entre decenas de nanmetros) entre los sistemas fotosensores I y
II no est del todo claro, pero se cree que mejora la eficiencia de la distribucin
de energa entre los dos fotossistemas (Trissl y Wilhelm, 1993;

La separacin espacial entre los fotosistemas I y II indica que no se requiere


una estequiometra estricta de uno a uno entre los dos fotosistemas. En
cambio, los centros de reaccin PSII alimentan equivalentes reductores en un
conjunto intermedio comn de portadores de electrones solubles
(plastoquinona), que se describir con detalle ms adelante en el captulo. Los
centros de reaccin PSI eliminan los equivalentes reductores del conjunto
comn, en lugar de cualquier complejo de centro de reaccin PSII especfico.
La mayora de las mediciones de las cantidades relativas de los fotosistemas I y
II han demostrado que hay un exceso de fotosistema II en los cloroplastos. Ms
comnmente, la proporcin de PSII a PSI es de aproximadamente 1,5: 1, pero
puede cambiar cuando las plantas se cultivan en diferentes condiciones de luz.
Las bacterias fotosintticas anoxigenicas tienen un centro de reaccin
similar al de Photosystem II
Los organismos no-O2-evolutivos (anoxygenic), tales como las bacterias
fotosintticas prpura de los gneros Rhodobacter y Rhodopseudomonas,
contienen solamente un nico photosystem. Estos organismos ms simples han
sido muy tiles para estudios estructurales y funcionales detallados que han
contribuido a una mejor comprensin de la fotosntesis oxigenada.
Hartmut Michel, Johann Deisenhofer, Robert Huber y colaboradores en Munich
resolvieron la estructura tridimensional del centro de reaccin de la bacteria
fotosinttica prpura Rhodopseudomonas viridis (Deisenhofer y Michel 1989).
Este logro histrico, en el que se otorg el Premio Nobel en 1988, fue la
primera determinacin estructural de rayos X de alta resolucin para una
protena de membrana integral y la primera determinacin estructural para un
complejo de centro de reaccin (vanse las figuras 7.5.A y 7.5 .B en el Tema
Web 7.5). El anlisis detallado de estas estructuras, junto con la caracterizacin
de numerosos mutantes, ha revelado muchos de los principios implicados en
los procesos de almacenamiento de energa llevados a cabo por todos los
centros de reaccin.
Se cree que la estructura del centro de reaccin bacteriana es similar en
muchos aspectos a la que se encuentra en el fotosistema II de organismos que
evolucionan con el oxgeno, especialmente en la porcin aceptor de electrones
de la cadena. Las protenas que forman el ncleo del centro de reaccin
bacteriana son relativamente similares en secuencia a sus contrapartes del
fotosistema II, lo que implica una relacin evolutiva.
RGANIZACIN DE LOS SISTEMAS DE ANTENA ABSORBENTES DE LUZ
Los sistemas de antenas de diferentes clases de organismos fotosintticos son
notablemente variados, en contraste con los centros de reaccin, que parecen
ser similares en organismos incluso distantes. La variedad de complejos de
antenas refleja la adaptacin evolutiva a los diversos ambientes en los que
viven los diferentes organismos, as como la necesidad de equilibrar la entrada
de energa en los dos fotossistemas (Grossman et al 1995, Green y Durnford
1996).

Los sistemas de antenas funcionan para suministrar energa eficientemente a


los centros de reaccin con los que estn asociados (van Grondelle et al., 1994,
Pullerits y Sundstrm 1996). El tamao del sistema de antena vara
considerablemente en diferentes organismos, desde un mnimo de 20 a 30
bacterioclorofilas por centro de reaccin en algunas bacterias fotosintticas,
hasta generalmente 200 a 300 clorofilas por centro de reaccin en plantas
superiores, hasta unos pocos miles de pigmentos por centro de reaccin En
algunos tipos de algas y bacterias. Las estructuras moleculares de los
pigmentos de antena son tambin muy diversas, aunque todas ellas estn
asociadas de alguna manera con la membrana fotosinttica.
Se piensa que el mecanismo fsico por el cual la energa de excitacin es
transportada desde la clorofila que absorbe la luz al centro de reaccin es una
transferencia de resonancia. Mediante este mecanismo la energa de excitacin
se transfiere de una molcula a otra mediante un proceso no radiactivo.
Una analoga til para la transferencia de resonancia es la transferencia de
energa entre dos diapasones. Si un diapasn es golpeado y colocado
apropiadamente cerca de otro, el segundo diapasn recibe energa del primero
y comienza a vibrar. Como en la transferencia de energa de resonancia en
complejos de antena, la eficiencia de la transferencia de energa entre los dos
diapasones depende de su distancia entre s y su orientacin relativa, as como
sus pasos o frecuencias de vibracin.
La transferencia de energa en los complejos de antena es muy eficiente:
Aproximadamente 95 a 99% de los fotones absorbidos por los pigmentos de la
antena tienen su energa transferida al centro de reaccin, donde puede ser
utilizada para la fotoqumica. Ah
Es una diferencia importante entre la transferencia de energa entre los
pigmentos en la antena y la transferencia de electrones que se produce en el
centro de reaccin: Mientras que la transferencia de energa es un fenmeno
puramente fsico, la transferencia de electrones implica cambios qumicos en
las molculas.
La Antena Encierra Energa al Centro de Reaccin
La secuencia de pigmentos dentro de la antena que canaliza la energa
absorbida hacia el centro de reaccin tiene mximos de absorcin que se
desplazan progresivamente hacia longitudes de onda rojas ms largas (Figura
7.19). Este cambio rojo en el mximo de absorcin significa que la energa del
estado excitado es algo ms baja ms cerca del centro de reaccin que en las
porciones ms perifricas del sistema de antena.
Como resultado de esta disposicin, cuando la excitacin se transfiere, por
ejemplo, a partir de una molcula de clorofila b que absorbe al mximo a 650
nm a una molcula de clorofila que absorbe al mximo a 670 nm, la diferencia
de energa entre estas dos clorofilas excitadas se pierde para el medio
ambiente Como calor.

Para que la excitacin se transfiera de nuevo a la clorofila b, la energa perdida


como calor tendra que ser reabastecida. La probabilidad de transferencia
inversa es
Ms pequeo simplemente porque la energa trmica no es suficiente para
compensar el dficit entre los pigmentos de menor energa y los de mayor
energa. Este efecto da al proceso de captura de energa un grado de
direccionalidad o irreversibilidad y hace que la entrega de excitacin al centro
de reaccin sea ms eficiente. En esencia, el sistema sacrifica cierta energa de
cada cuanto para que casi todos los cuantos puedan ser atrapados por el
centro de reaccin.
Muchos complejos de antenas tienen un motivo estructural comn
En todos los organismos fotosintticos eucariticos que contienen clorofila a y
clorofila b, las protenas antenas ms abundantes son miembros de una gran
familia de protenas estructuralmente relacionadas. Algunas de estas protenas
se asocian principalmente con el fotosistema II y se denominan II (LHCII)
protenas de recoleccin ligera; Otros estn asociados con el fotosistema I y se
llaman protenas LHCI. Estos complejos de antena tambin se conocen como
protenas de antena de la clorofila a / b (Paulsen 1995; Green y Durnford 1996).
La estructura de una de las protenas LHCII ha sido determinada por una
combinacin de microscopa electrnica y cristalografa electrnica (Figura
7.20) (Khlbrandt et al., 1994). La protena contiene tres regiones helicoidales y une alrededor de 15 molculas de clorofila a y b, as como
algunos carotenoides. Slo algunos de estos pigmentos son visibles en la
estructura resuelta. La estructura de las protenas LHCI an no se ha
determinado, pero es probablemente similar a la de las protenas LHCII. Todas
estas protenas tienen similitud de secuencia significativa y son casi
ciertamente descendientes de una protena ancestral comn (Grossman et al.,
1995, Green y Durnford 1996).
La luz absorbida por los carotenoides o clorofila b en las protenas LHC se
transfiere rpidamente a la clorofila a y luego a otros pigmentos de antena que
estn ntimamente asociados con el centro de reaccin. El complejo LHCII
tambin est involucrado en procesos regulatorios, los cuales sern discutidos
ms adelante en el captulo.
MECANISMOS DE TRANSPORTE ELECTRNICO
Algunas de las pruebas que llevaron a la idea de dos reacciones fotoqumicas
que operan en serie se discuti anteriormente en este captulo. Aqu vamos a
considerar en detalle las reacciones qumicas involucradas en la transferencia
de electrones durante la fotosntesis. Discutiremos la excitacin de la clorofila
por la luz y la reduccin del primer aceptor de electrones, el flujo de electrones
a travs de los fotosistemas II e I, la oxidacin del agua como fuente primaria
de electrones y la reduccin del aceptor final de electrones (NADP +) . El
mecanismo quimiosmtico que media la sntesis de ATP se discutir en detalle

ms adelante en el captulo (vase "Transporte de protones y sntesis de ATP


en el cloroplasto").
Los electrones expulsados de la clorofila viajan a travs de una serie de
portadores de electrones organizados en el "Z Scheme"
La Figura 7.21 muestra una versin actual del esquema Z, en la que todos los
portadores de electrones que funcionan en el flujo de electrones de H2O a
NADP + estn dispuestos verticalmente en sus potenciales redox de punto
medio (ver Tema 7.6 para ms detalles). Los componentes conocidos por
reaccionar entre s estn conectados por flechas, por lo que el esquema Z es
realmente una sntesis de informacin tanto cintica como termodinmica. Las
grandes flechas verticales representan la entrada de energa luminosa en el
sistema.
Los fotones excitan la clorofila especializada de los centros de reaccin (P680
para PSII y P700 para PSI), y un electrn es expulsado. El electrn pasa a travs
de una serie de portadores de electrones y eventualmente reduce P700 (para
electrones de PSII) o NADP + (para electrones de PSI). Gran parte de la
siguiente discusin describe los viajes de estos electrones y la naturaleza de
sus portadores.
Casi todos los procesos qumicos que componen las reacciones de luz de la
fotosntesis son llevados a cabo por cuatro complejos de protenas principales:
el fotosistema II, el complejo citocromo b6f, el fotosistema I y la ATP sintasa.
Estos cuatro complejos integrales de membrana estn orientados
vectorialmente en la membrana tilacoide para funcionar como sigue (Figura
7.22):
Photosystem II oxida el agua a O2 en el lumen del tilacoide y en el proceso
libera protones en el lumen.
El citocromo b6f recibe electrones de PSII y los entrega a PSI. Tambin
transporta protones adicionales en el lumen del estroma.
El fotosistema I reduce el NADP + al NADPH en el estroma por la accin de la
ferredoxina (Fd) y la flavoprotena ferredoxina-NADP reductasa (FNR).
La ATP sintasa produce ATP a medida que los protones se difunden de nuevo
a travs de l desde el lumen hacia el estroma.
La energa es capturada cuando una clorofila excitada reduce una
molcula de aceptor de electrones
Como se ha comentado anteriormente, la funcin de la luz consiste en excitar
una clorofila especializada en el centro de reaccin, ya sea por absorcin
directa o, ms frecuentemente, por transferencia de energa desde un
pigmento de antena. Este proceso de excitacin puede ser visto como la
promocin de un electrn de la orbital llena de energa ms alta de la clorofila
a la energa ms baja no llenada orbital (Figura 7.23). El electrn en el orbital

superior est ligeramente ligado a la clorofila y se pierde fcilmente si una


molcula que puede aceptar el electrn est cerca.
La primera reaccin que convierte la energa del electrn en energa qumica,
es decir, el evento fotoqumico primario, es la transferencia de un electrn del
estado excitado de una clorofila en el centro de reaccin a una molcula
aceptor. Una manera equivalente de ver este proceso es que el fotn absorbido
provoca un reordenamiento de electrones en la clorofila del centro de reaccin,
seguido de un proceso de transferencia de electrones en el que parte de la
energa del fotn es capturada en forma de energa redox.
Inmediatamente despus del evento fotoqumico, la clorofila del centro de
reaccin est en un estado oxidado (carente de electrones, o cargada
positivamente) y la molcula receptora de electrones cercana se reduce (rico
en electrones, o cargado negativamente). los
Sistema est ahora en una coyuntura crtica. El orbital de menor energa de la
clorofila de centro de reaccin oxidada cargada positivamente que se muestra
en la figura 7.23 tiene una vacante y puede aceptar un electrn. Si la molcula
aceptor devuelve su electrn a la clorofila del centro de reaccin, el sistema
volver al estado que exista antes de la excitacin de la luz, y toda la energa
absorbida se convertir en calor.
Sin embargo, este proceso de recombinacin intil no parece ocurrir en ningn
grado sustancial en los centros de reaccin funcionales. En su lugar, el aceptor
transfiere su electrn extra a un aceptor secundario y as sucesivamente en la
cadena de transporte de electrones. El centro de reaccin oxidado de la
clorofila que haba donado un electrn se reduce de nuevo por un donante
secundario, que a su vez se reduce mediante un donador terciario. En las
plantas, el donador de electrones ltimo es H2O, y el aceptor de electrones
ltimo es NADP + (vase la figura 7.21).
La esencia del almacenamiento de energa fotosinttica es, por tanto, la
transferencia inicial de un electrn de una clorofila excitada a una molcula
aceptor, seguida de una serie muy rpida de reacciones qumicas secundarias
que separan las cargas positivas y negativas. Estas reacciones secundarias
separan las cargas en lados opuestos de la membrana tilacoide en
aproximadamente 200 picosegundos (1 picosegundo = 10-12 s).
Con las cargas as separadas, la reaccin de inversin es muchos rdenes de
magnitud ms lenta, y la energa se ha capturado. Cada una de las
transferencias de electrones secundarios se acompaa de una prdida de
alguna energa, por lo que el proceso es efectivamente irreversible. El
rendimiento cuntico para la produccin de productos estables en centros de
reaccin purificados a partir de bacterias fotosintticas se ha medido como 1,0;
Es decir, cada fotn produce productos estables, y no se producen reacciones
de inversin.
Aunque estos tipos de mediciones no se han realizado en centros de reaccin
purificados de plantas superiores, los requerimientos cunticos medidos para la

produccin de O2 en condiciones ptimas (luz de baja intensidad) indican que


los valores de los eventos fotoqumicos primarios son muy cercanos a 1,0. La
estructura del centro de reaccin parece estar extremadamente ajustada para
tasas mximas de reacciones productivas y tasas mnimas de reacciones de
desperdicio de energa.
El Centro de Reaccin Las Clorofilas de los Dos Fotosistemas Absorben
a Diferentes Longitudes de Onda
Como se coment anteriormente en el captulo, PSI y PSII tienen caractersticas
de absorcin distintas. Mediciones precisas de los mximos de absorcin fueron
posibles gracias a cambios pticos en las clorofilas del centro de reaccin en
los estados reducido y oxidado. La clorofila del centro de reaccin est
transitoriamente en un estado oxidado despus de perder un electrn y antes
de ser re-reducida por su donador de electrones.
En el estado oxidado, se pierde o blanquea la fuerte absorbancia de la luz en la
regin roja del espectro que es caracterstica de las clorofilas. Por lo tanto, es
posible monitorear el estado redox de estas clorofilas mediante mediciones de
absorbancia ptica resueltas en el tiempo en las que este blanqueo es
monitoreado directamente (ver Tema Web 7.1).
Utilizando estas tcnicas, Bessel Kok encontr que la clorofila del centro de
reaccin del fotosistema I absorbe al mximo a 700 nm en su estado reducido.
Por consiguiente, esta clorofila se denomina P700 (el P significa pigmento). H.
T. Witt y compaeros de trabajo encontraron el transitorio ptico anlogo del
fotosistema II a 680 nm, por lo que su clorofila del centro de reaccin se conoce
como P680. Anteriormente, Louis Duysens haba identificado la bacterioclorofila
del centro de reaccin de las bacterias fotosintticas prpura como P870.
La estructura de rayos X del centro de reaccin bacteriana (vanse las figuras
7.5.A y 7.5.B en el Tema Web 7.5) indica claramente que P870 es un par
estrechamente acoplado o dmero de bacterioclorofilas, en lugar de una sola
molcula. El donante primario del fotosistema I, P700, es un dmero de
molculas de clorofila a. Photosystem II tambin contiene un dmero de
clorofilas, aunque el donante primario, P680, no puede residir enteramente en
estos pigmentos. En el estado oxidado, las clorofilas del centro de reaccin
contienen un electrn sin apareamiento. Las molculas con electrones no
apareados a menudo pueden ser detectadas por una tcnica de resonancia
magntica conocida como resonancia de spin de electrones (ESR). Los estudios
de ESR, junto con las mediciones espectroscpicas ya descritas, han llevado al
descubrimiento de muchos portadores de electrones intermedios en el campo
fotosinttico Sistema de transporte de electrones.
El Centro de Reaccin de Photosystem
Multisubunitario Pigmento-Protena

II

es

un

Complejo

El fotosistema II est contenido en un supercompleto de protenas


multisubunidades (figura 7.24) (Barber et al., 1999). En las plantas superiores,
el supercompleto de protenas multisubunidades tiene dos centros de reaccin

completos y algunos complejos de antena. El ncleo del centro de reaccin


consta de dos protenas de membrana conocidas como D1 y D2, as como otras
protenas, como se muestra en la Figura 7.25 (Zouni et al., 2001).
La clorofila del donante primario (P680), clorofilas adicionales, carotenoides,
feofitinas y plastoquinonas (dos aceptores de electrones descritos en la
siguiente seccin) se unen a las protenas de membrana D1 y D2. Estas
protenas tienen cierta similitud de secuencia con los pptidos L y M de las
bacterias prpuras. Otras protenas sirven como complejos de antena o estn
implicadas en la evolucin del oxgeno. Algunos, como el citocromo b559, no
tienen funcin conocida, pero pueden estar involucrados en un ciclo de
proteccin alrededor del fotosistema II.
El agua es oxidado al oxgeno por Photosystem II
El agua se oxida de acuerdo con la siguiente reaccin qumica (Hoganson y
Babcock 1997):
Esta ecuacin indica que cuatro electrones se eliminan de dos molculas de
agua, generando una molcula de oxgeno y cuatro iones de hidrgeno. (Para
ms informacin sobre las reacciones de oxidacin-reduccin, consulte el
Captulo 2 en el sitio web y el Tema Web 7.6).
El agua es una molcula muy estable. La oxidacin del agua para formar
oxgeno molecular es muy difcil, y el complejo fotosinttico que evita el
oxgeno es el nico sistema bioqumico conocido que lleva a cabo esta
reaccin. La evolucin del oxgeno fotosinttico es tambin la fuente de casi
todo el oxgeno en la atmsfera de la Tierra.
El mecanismo qumico de la oxidacin fotosinttica del agua an no se conoce,
aunque muchos estudios han proporcionado una cantidad sustancial de
informacin sobre el proceso (ver Tema 7.7 y Figura 7.26). Los protones
producidos por la oxidacin del agua se liberan en el lumen del tilacoide, no
directamente en el compartimiento estromal (vase la figura 7.22). Se liberan
en el lumen debido a la naturaleza vectorial de la membrana y al hecho de que
el complejo que evoluciona con el oxgeno est localizado en la superficie
interior del tilacoide. Estos protones son finalmente transferidos de la luz al
estroma por translocacin a travs de la ATP sintasa. De esta manera, los
protones liberados durante la oxidacin del agua contribuyen al potencial
electroqumico que conduce a la formacin de ATP.
Se sabe desde hace muchos aos que el manganeso (Mn) es un cofactor
esencial en el proceso de oxidacin del agua (vase el captulo 5), y una
hiptesis clsica en la investigacin de la fotosntesis postula que los iones Mn
sufren una serie de oxidaciones, conocidas como S , Y estn etiquetados como
S0, S1, S2, S3 y S4 (vase el Tema Web 7.7), que quizs estn ligados a la
oxidacin de H2O y la generacin de O2 (vase la figura 7.26). Esta hiptesis
ha recibido un fuerte apoyo de una variedad de experimentos, especialmente
los estudios de absorcin de rayos X y ESR, los cuales detectan el manganeso
directamente (Yachandra et al., 1996). Los experimentos analticos indican que

cuatro iones Mn estn asociados con cada complejo que evoluciona con el
oxgeno. Otros experimentos han demostrado que los iones Cl2 y Ca2 + son
esenciales para la evolucin de O2 (ver Figura 7.26 y Tema Web 7.7).
Un portador de electrones, generalmente identificado como Yz, funciona entre
el complejo que evoluciona con el oxgeno y el P680 (vanse las figuras 7.21 y
7.26). Para funcionar en esta regin, Yz necesita tener una tendencia muy
fuerte a retener sus electrones. Esta especie ha sido identificada como un
radical formado a partir de un residuo de tirosina en la protena D1 del centro
de reaccin PSII.
Feofitina y dos quinonas aceptan electrones de Photosystem II
La evidencia de estudios espectrales y ESR indica que la feofitina acta como
un aceptor temprano en el fotosistema II, seguido por un complejo de dos
plastoquinonas en proximidad cercana a un tomo de hierro. La feofitina es una
clorofila en la que la
tomo de magnesio ha sido sustituido por dos tomos de hidrgeno. Este
cambio qumico da fefitotin propiedades qumicas y espectrales que son
ligeramente diferentes de los de la clorofila. No se conoce la disposicin precisa
de los portadores en el complejo aceptor de electrones, pero es probablemente
muy similar a la del centro de reaccin de las bacterias prpuras (para ms
detalles, vase la Figura 7.5.B en el Tema Web 7.5).
Dos plastoquinonas (QA y QB) estn unidas al centro de reaccin y reciben
electrones de ffetitin de forma secuencial (Okamura et al., 2000). La
transferencia de los dos electrones a QB lo reduce a QB 2, y el QB 2 reducido
toma dos protones del lado estroma del medio, produciendo una
plastohidroquinona completamente reducida (QH2) (Figura 7.27). La
plastohidroquinona se disocia entonces del complejo del centro de reaccin y
entra en la porcin de hidrocarburo de la membrana, donde a su vez transfiere
sus electrones al complejo citocromo b6f. A diferencia de los grandes complejos
proteicos de la membrana tilacoide, la hidroquinona es una pequea molcula
no polar que se difunde fcilmente en el ncleo no polar de la bicapa de
membrana.
El flujo de electrones a travs del complejo Cytochrome b6f tambin
transporta protones
El complejo citocromo b6f es una gran protena multisubunitaria con varios
grupos protsicos (Cramer et al., 1996; Berry et al., 2000). Contiene dos hemes
del tipo b y un hemo del tipo (citocromo f). En los citocromos de tipo c, el hemo
est unido covalentemente al pptido; En los citocromos del tipo b, el grupo
protohmico qumicamente similar no est unido covalentemente (Figura 7.28).
Adems, el complejo contiene una protena de hierro-azufre Rieske (llamada as
por el cientfico que la descubri), en la que dos tomos de hierro estn unidos
por dos tomos de azufre.

Se han determinado las estructuras del citocromo f y el correspondiente


complejo del citocromo bc1 y sugieren un mecanismo para el flujo de
electrones y protones. La manera exacta por la cual los electrones y los
protones fluyen a travs del complejo del cytochrome b6 f todava no se
entiende completamente, pero un mecanismo conocido como el ciclo de Q
explica la mayora de las observaciones. En este mecanismo, se oxida la
plastohidroquinona (QH2), y uno de los dos electrones pasa a lo largo de una
cadena de transporte de electrones lineales hacia el fotosistema I, mientras
que el otro electrn pasa por un proceso cclico que aumenta el nmero de
protones bombeados a travs de la membrana. 7.29).
En la cadena de transporte de electrones lineales, la protena Rieske oxidada
(FeSR) acepta un electrn de la plastohidroquinona (QH2) y la transfiere al
citocromo f (vase la figura 7.29A). El citocromo f transfiere entonces un
electrn a la protena de cobre de color azul plastocianina (PC), que a su vez
reduce el P700 oxidado de PSI. En la parte cclica del proceso (vase la figura
7.29B), la plastosemiquinona (vase la figura 7.27) transfiere
Su otro electrn a uno de los hemes del tipo b, liberando sus dos protones al
lado lumenal de la membrana. El hemo de tipo b transfiere su electrn a travs
del segundo hemo de tipo b a una molcula de quinona oxidada, reducindola
a la forma semiquinona cerca de la superficie estromal del complejo. Otra
secuencia similar de flujo de electrones reduce completamente la
plastoquinona, que recoge protones del lado estromal de la membrana y se
libera del complejo b6f como plastohidroquinona.
El resultado neto de dos volmenes del complejo es que dos electrones se
transfieren a P700, dos plastohidroquinonas se oxidan a la forma de quinona, y
una plastoquinona oxidada se reduce a la forma de hidroquinona. Adems,
cuatro protones se transfieren desde el estroma al lado lumenal de la
membrana.
Mediante este mecanismo, el flujo de electrones que conecta el lado aceptor
del centro de reaccin PSII al lado donante del centro de reaccin PSI tambin
da lugar a un potencial electroqumico a travs de la membrana, debido en
parte a las diferencias de concentracin H + en los dos lados de la membrana.
Este potencial electroqumico se utiliza para impulsar la sntesis de ATP. El flujo
de electrones cclicos a travs del citocromo b y plastoquinona aumenta el
nmero de protones bombeados por electrn ms all de lo que podra lograrse
en una secuencia estrictamente lineal.
Plastoquinona y Plastocyanin Carry Electrons entre Photosystems II y I
La ubicacin de los dos fotosistemas en diferentes sitios en las membranas de
los tilacoides requiere que al menos un componente sea capaz de moverse a lo
largo o dentro de la membrana para entregar electrones producidos por el
fotosistema II al fotosistema I. El citocromo b6f Complejo se distribuye por igual
entre las regiones grana y estroma de las membranas, pero su gran tamao
hace que sea poco probable que sea el portador mvil. En su lugar, se piensa

que la plastoquinona o la plastocianina, o posiblemente ambas, sirven como


portadores mviles para conectar los dos fotosistemas.
La plastocianina es una protena pequea (10,5 kDa), soluble en agua, que
contiene cobre que transfiere electrones entre el complejo citocromo b6f y
P700. Esta protena se encuentra en el espacio lumenal (vase la figura 7.29).
En ciertas algas verdes y cianobacterias, a veces se encuentra un citocromo de
tipo c en lugar de plastocianina; Que de estas dos protenas se sintetiza
depende de la cantidad de cobre disponible para el organismo.
El centro de reaccin de Photosystem I reduce el NADP +
El complejo del centro de reaccin PSI es un complejo multisubunitario grande
(Figura 7.30) (Jordan et al., 2001). En contraste con PSII, una antena de ncleo
que consta de aproximadamente 100 clorofilas es una parte del centro de
reaccin PSI, P700. La antena de ncleo y P700 estn unidas a dos protenas,
PsaA y PsaB, con masas moleculares en el rango de 66 a 70 kDa (Brettel 1997;
Chitnis 2001, vase tambin Tema Web 7.8).
Los pigmentos de la antena forman un tazn que rodea a los cofactores de
transferencia de electrones, que estn en el centro del complejo. En su forma
reducida, los portadores de electrones que funcionan en la regin aceptor del
fotosistema I son todos agentes reductores extremadamente fuertes. Estas
especies reducidas son muy inestables y por tanto difciles de identificar. La
evidencia indica que uno de estos aceptores tempranos es una molcula de la
clorofila, y otro es una especie de la quinona, phylloquinone, tambin conocida
como vitamina K1. Otros aceptores de electrones incluyen una serie de tres
protenas de hierro-azufre asociadas a la membrana, o ferredoxinas unidas,
tambin conocidas como centros Fe-S FeSX, FeSA y FeSB (ver Figura 7.30). Fe-S
centro X es parte de la protena de unin a P700; Los centros A y B residen en
una protena de 8 kDa que es parte del complejo del centro de reaccin PSI.
Los electrones son transferidos a travs de los centros A y B a la ferredoxina
(Fd), una pequea protena de hierro-azufre soluble en agua (ver Figuras 7.21 y
7.30).
La flavoprotena ferredoxina-NADP reductasa (FNR) asociada a la membrana
reduce NADP + a NADPH, completando as la secuencia de transporte de
electrones no cclicos que comienza con la oxidacin del agua (Karplus et al.,
1991).
Adems de la reduccin del NADP +, la ferredoxina reducida producida por el
fotosistema I tiene varias otras funciones en el cloroplasto, como el suministro
de reductores para reducir el nitrato y la regulacin de algunas de las enzimas
de fijacin de carbono (vase el captulo 8).
El flujo de electrones cclicos genera ATP pero no NADPH
Algunos de los complejos del citocromo b6f se encuentran en la regin del
estroma de la membrana, donde se encuentra el fotosistema I. Bajo ciertas
condiciones, se sabe que tiene lugar el flujo de electrones cclicos desde el lado

reductor del fotosistema I, a travs del complejo b6f y de vuelta a P700. Este
flujo de electrones cclicos se acopla al bombeo de protones en el lumen, que
puede utilizarse para la sntesis de ATP pero no oxida el agua ni reduce el NADP
+. El flujo de electrones cclicos es especialmente importante como fuente de
ATP en los cloroplastos de vaina de haz de algunas plantas que realizan la
fijacin de carbono C4 (vase el captulo 8).
Algunos herbicidas bloquean el flujo de electrones
El uso de herbicidas para matar plantas no deseadas est muy extendido en la
agricultura moderna. Se han desarrollado muchas clases diferentes de
herbicidas, y actan bloqueando el aminocido, los carotenoides o la
biosntesis de lpidos o alterando la divisin celular.
Otros herbicidas, como la DCMU (diclorofenildimetilurea) y el paraquat,
bloquean el flujo fotosinttico de electrones (Figura 7.31). DCMU tambin se
conoce como diuron.
El paraquat ha adquirido notoriedad pblica por su uso en cultivos de
marihuana. Muchos herbicidas, entre ellos DCMU, actan bloqueando el flujo
de electrones en los aceptores de quinona del fotosistema II, compitiendo por
el sitio de unin de plastoquinona que es normalmente ocupado por QB. Otros
herbicidas, como el paraquat, actan aceptando electrones de los primeros
aceptores del fotosistema I y luego reaccionando con oxgeno a formar
superxido, O2-, una especie que es muy perjudicial para los componentes del
cloroplasto, especialmente los lpidos.
TRANSPORTE DE PROTON Y SNTESIS DE ATP EN EL CLOROPLAST
En las secciones anteriores aprendimos cmo la energa luminosa capturada se
usa para reducir NADP + a NADPH. Otra fraccin de la energa luminosa
capturada se utiliza para la sntesis de ATP dependiente de la luz, que se
conoce como fotofosforilacin. Este proceso fue descubierto por Daniel Arnon y
sus compaeros de trabajo en los aos cincuenta. En condiciones celulares
normales, la fotofosforilacin requiere flujo de electrones, aunque en algunas
condiciones el flujo de electrones y la fotofosforilacin pueden tener lugar
independientemente entre s. Se dice que el flujo de electrones sin fosforilacin
asociada est desacoplado.
Actualmente se acepta ampliamente que la fotofosforilacin funciona a travs
del mecanismo quimiosmtico, propuesto por primera vez en 1960 por Peter
Mitchell. El mismo mecanismo general impulsa la fosforilacin durante la
respiracin aerbica en las bacterias y las mitocondrias (vase el captulo 11),
as como la transferencia de muchos iones y metabolitos a travs de las
membranas (vase el captulo 6). La quimiosmosis parece ser un aspecto
unificador de los procesos de membrana en todas las formas de vida.
En el captulo 6 se discuti el papel de las ATPasas en la quimiosmosis y el
transporte de iones en la membrana plasmtica de la clula. El ATP utilizado
por la membrana plasmtica ATPasa es Sintetizado por fotofosforilacin en el

cloroplasto y fosforilacin oxidativa en la mitocondria. Aqu nos interesa la


quimiosmosis y las diferencias de concentracin de protones transmembrana
usadas para producir ATP en el cloroplasto.
El principio bsico de la quimiosmosis es que las diferencias de concentracin
de iones y las diferencias de potencial elctrico a travs de las membranas son
una fuente de energa libre que puede ser utilizada por la clula. Como se
describe en la segunda ley de termodinmica (vase el captulo 2 en el sitio
web para una discusin detallada), cualquier distribucin no uniforme de la
materia o la energa representa una fuente de energa. Las diferencias en el
potencial qumico de cualquier especie molecular cuyas concentraciones no
son las mismas en lados opuestos de una membrana proporcionan tal fuente
de energa.
La naturaleza asimtrica de la membrana fotosinttica y el hecho de que el
flujo de protones de un lado de la membrana al otro acompaa el flujo de
electrones se discuti anteriormente. La direccin de la translocacin del
protn es tal que el estroma se vuelve ms alcalino (menos iones H +) y la luz
se vuelve ms cida (ms iones H +) como resultado del transporte de
electrones (vanse las figuras 7.22 y 7.29).
Algunas de las pruebas tempranas que respaldan un mecanismo
quimiosmtico de la formacin de ATP fotosinttica fueron proporcionadas por
un elegante experimento llevado a cabo por Andr Jagendorf y colaboradores
(Figura 7.32). Suspendieron los tilacoides del cloroplasto en un tampn de pH
4, y el tampn se difundi a travs de la membrana, haciendo que el interior,
as como el exterior, del tilacoide se equilibraran a este pH cido. A
continuacin, transfirieron rpidamente los tilakoides a un tampn de pH 8,
creando as una diferencia de pH de 4 unidades a travs de la membrana de
tilacoide, con el interior cido con respecto al exterior.
Ellos encontraron que grandes cantidades de ATP se formaron a partir de ADP y
Pi por este proceso, sin entrada de luz o transporte de electrones. Este
resultado apoya las predicciones de la hiptesis quimiosmtica, descrita en los
prrafos que siguen.
Mitchell propuso que la energa total disponible para la sntesis de ATP, a la que
llam la fuerza motriz del protn (p), es la suma de un potencial qumico
protnico y un potencial elctrico transmembrana. Estos dos componentes de
la fuerza motriz del protn desde el exterior de la membrana hacia el interior
estn dados por la siguiente ecuacin:
Donde E es el potencial elctrico transmembrana, y pHi - pHo (o pH) es la
diferencia de pH a travs de la membrana. La constante de proporcionalidad (a
25 C) es de 59 mV por unidad de pH, por lo que una diferencia de pH
transmembrana de 1 unidad de pH es equivalente a un potencial de membrana
de 59 mV.
En condiciones de transporte de electrones en estado estacionario en los
cloroplastos, el potencial elctrico de la membrana es bastante pequeo

debido al movimiento inico a travs de la membrana, por lo que p se


construye casi enteramente por pH. La estequiometra de protones
translocados por ATP sintetizado recientemente se ha encontrado que son
cuatro iones H + por ATP (Haraux y De Kouchkovsky 1998).
Adems de la necesidad de portadores de electrones mviles discutidos
anteriormente, la distribucin desigual de los fotosistemas II e I y de la ATP
sintasa en la membrana del tilacoide (ver Figura 7.18) plantea algunos desafos
para la formacin de ATP. La ATP sintasa se encuentra slo en las lminas
estroma y en los bordes de las pilas grana. Los protones bombeados a travs
de la membrana por el complejo del citocromo b6f o los protones producidos
por la oxidacin del agua en el medio de la grana deben moverse lateralmente
hasta varias decenas de nanmetros para alcanzar la ATP sintasa.
El ATP es sintetizado por un complejo enzimtico grande (400 kDa) conocido
por varios nombres: ATP sintasa, ATPasa (despus de la reaccin inversa de la
hidrlisis ATP) y CFo-CF1 (Boyer 1997). Esta enzima se compone de dos partes:
una porcin hidrfoba ligada a la membrana llamada CFo y una porcin que
sobresale en el estroma llamado CF1 (Figura 7.33).
CFo parece formar un canal a travs de la membrana a travs del cual los
protones pueden pasar. CF1 se compone de varios pptidos, incluyendo tres
copias de cada uno de los pptidos y dispuestos alternativamente de
manera similar a las secciones de una naranja. Mientras que los sitios
catalticos se localizan en gran parte en el polipptido , se cree que muchos
de los otros pptidos tienen funciones primordialmente reguladoras. CF1 es la
porcin del complejo que sintetiza ATP.
La estructura molecular de la ATP sintasa mitocondrial ha sido determinada por
cristalografa de rayos X (Stock et al., 1999). Aunque existen diferencias
significativas entre el cloroplasto y las enzimas mitocondriales, tienen la misma
arquitectura general y probablemente sitios idnticos. De hecho, hay
similitudes notables en la forma en que el flujo de electrones est acoplado a la
translocacin de protones en cloroplastos, mitocondrias y bacterias moradas
(Figura 7.34). Otro aspecto notable del mecanismo de la ATP sintasa es que el
tallo interno y probablemente gran parte de la porcin CFo de la enzima giran
durante la catlisis (Yasuda et al., 2001). La enzima es en realidad un pequeo
motor molecular (ver Temas Web 7.9 y 11.4).
REPARACIN Y REGULACIN DE LA MAQUINARIA FOTOSINTTICA
Los sistemas fotosintticos enfrentan un reto especial. Estn diseados para
absorber grandes cantidades de energa luminosa y procesarla en energa
qumica. A nivel molecular, la energa en un fotn puede ser daina,
particularmente en condiciones desfavorables. En exceso, la energa luminosa
puede conducir a la produccin de especies txicas, como el superxido, el
oxgeno singlete y el perxido, y el dao puede ocurrir si la energa luminosa
no se disipa de manera segura (Horton et al., 1996, Mller et al. 2001). Por lo

tanto, los organismos fotosintticos contienen mecanismos complejos de


regulacin y reparacin.
Algunos de estos mecanismos regulan el flujo de energa en el sistema de
antena, para evitar el exceso de excitacin de los centros de reaccin y
asegurarse de que los dos fotosistemas son igualmente impulsados. Aunque
son muy eficaces, estos procesos no son completamente seguros contra fallos,
ya veces se producen compuestos txicos.
Se necesitan mecanismos adicionales para disipar estos compuestos, en
particular, especies txicas de oxgeno. A pesar de estos mecanismos de
proteccin y barrido, pueden producirse daos y se requieren mecanismos
adicionales para reparar el sistema. La figura 7.35 ofrece una visin general de
los diversos niveles de los sistemas de regulacin y reparacin.
Los carotenoides sirven como agentes fotoprotectores
Adems de su papel como pigmentos accesorios, los carotenoides desempean
un papel esencial en la fotoproteccin. La membrana fotosinttica puede ser
fcilmente daada por las grandes cantidades de energa absorbida por los
pigmentos si esta energa no puede almacenarse por fotoqumica; Es por eso
que se necesita un mecanismo de proteccin. El mecanismo de fotoproteccin
puede ser pensado como una vlvula de seguridad, ventilando el exceso de
energa antes de que pueda daar el organismo. Cuando la energa
almacenada en clorofilas en el estado excitado se disipa rpidamente por
transferencia de excitacin o fotoqumica, se dice que el estado excitado se
extingue.
Si el estado excitado de la clorofila no se enfra rpidamente por transferencia
de excitacin o fotoqumica, puede reaccionar con oxgeno molecular para
formar un estado excitado de oxgeno conocido como oxgeno singlete (1O2 *).
El oxgeno singlete extremadamente reactivo pasa a reaccionar con y daar
muchos componentes celulares, especialmente los lpidos. Los carotenoides
ejercen su accin fotoprotectora apagando rpidamente el estado excitado de
la clorofila. El estado excitado de los carotenoides no tiene suficiente energa
para formar oxgeno singlete, por lo que se descompone de nuevo a su estado
fundamental, mientras que pierde su energa como calor.
Los organismos mutantes que carecen de carotenoides no pueden vivir en
presencia de oxgeno ligero y molecular, una situacin bastante difcil para un
organismo fotosinttico que evoluciona con O2. Para las bacterias
fotosintticas que no producen O2, los mutantes que carecen de carotenoides
pueden mantenerse en condiciones de laboratorio si se excluye el oxgeno del
medio de crecimiento.
Recientemente se encontr que los carotenoides desempean un papel en el
enfriamiento no ftoqumico, que es un segundo mecanismo protector y
regulador.
Algunos Xanthophylls tambin participan en la disipacin de energa

El enfriamiento no filoqumico, un proceso principal que regula el suministro de


energa de excitacin al centro de reaccin, puede ser pensado como un
"mando de volumen" que ajusta el flujo de excitaciones al centro de reaccin
PSII a un nivel manejable, dependiendo de la intensidad de la luz y otros
Condiciones. El proceso parece ser una parte esencial de la regulacin de los
sistemas de antenas en la mayora de las algas y plantas.El enfriamiento no
filoqumico es el apagado de la fluorescencia de la clorofila (vase la Figura
7.5) por procesos distintos de la fotoqumica. Como resultado de la noUna gran fraccin de las excitaciones en el sistema de antena causadas por la
intensa iluminacin se apagan mediante la conversin en calor (Krause y Weis
1991). Se cree que el enfriamiento no filoqumico est involucrado en la
proteccin
La maquinaria fotosinttica contra la sobreexcitacin y el dao
subsiguiente.
El mecanismo molecular de la extincin no fsmica no se conoce bien, aunque
est claro que el pH del lumen tilacoide y el estado de agregacin de los
complejos de antena son factores importantes. Tres carotenoides, llamados
xantofilas, estn involucrados en el enfriamiento no ftoqumico: violaxantina,
antheraxantina y zeaxantina (Figura 7.36).
En alta luz, la violaxantina se convierte en zeaxantina, va la antralaxantina
intermedia, por la enzima violaxantina de epoxidasa. Cuando la intensidad de
la luz disminuye, el proceso se invierte. La unin de protones y zeaxantina a Se
cree que las protenas de la antena de recoleccin de luz producen cambios
conformacionales que conducen al enfriamiento ya la disipacin del calor
(Demmig Adams y Adams 1992, Horton et al., 1996). El enfriamiento no
filoqumico parece estar asociado preferentemente Con un complejo de antena
perifrica del fotosistema II, la protena PsbS (Li et al., 2000).
El centro de reaccin Photosystem II es fcilmente daado
Otro efecto que parece ser un factor principal en la estabilidad del aparato
fotosinttico es la fotoinhibicin, que ocurre cuando el exceso de excitacin
que llega a la PSII Centro de reaccin conduce a su inactivacin y dao (Long et
al., 1994). La fotoinhibicin es un conjunto complejo de procesos moleculares,
definido como la inhibicin de la fotosntesis por el exceso de luz. Como se ver
en detalle en el captulo 9, la fotoinhibicin es reversible en etapas tempranas.
Sin embargo, la inhibicin prolongada da lugar a daos en el sistema de tal
manera que el centro de reaccin PSII debe desmontarse y repararse (Melis
1999). El objetivo principal de este dao es la protena D1 que forma parte del
complejo del centro de reaccin PSII (vase la figura 7.24). Cuando D1 es
daado por exceso de luz, debe ser retirado de la membrana y reemplazado
por un nuevo
Sintetizada. Los otros componentes del centro de reaccin PSII no se daan por
el exceso de excitacin y se piensa que se reciclan, por lo que la protena D1 es
el nico componente que necesita ser sintetizado.

El fotosistema I est protegido contra las especies activas de oxgeno


El fotosistema I es particularmente vulnerable a los daos causados por las
especies de oxgeno activo. El aceptor de ferredoxina de PSI es un reductor
muy fuerte que puede reducir fcilmente el oxgeno molecular para formar
superxido (O2 -). Esta reduccin compite con la canalizacin normal de
electrones a la reduccin de NADP + y otros procesos. Superxido es una de
una serie de especies de oxgeno activo que puede ser muy perjudicial para las
membranas biolgicas. El superxido formado de esta manera puede ser
eliminado por la accin de una serie de enzimas, incluyendo superxido
dismutasa y ascorbato peroxidasa (Asada 1999).
El apilamiento de Thylakoid permite la particin de energa entre los
Photosystems
El hecho de que la fotosntesis en plantas superiores sea impulsada por dos
fotossistemas con diferentes propiedades de absorcin de la luz plantea un
problema especial. Si la velocidad de suministro de energa a PSI y PSII no se
ajusta con precisin y las condiciones son tales que la tasa de fotosntesis est
limitada por la luz disponible (baja intensidad de luz), la velocidad de flujo de
electrones ser limitada por el fotosistema que est recibiendo menos energia.
En la situacin ms eficiente, la entrada de energa sera la misma para ambos
fotossistemas. Sin embargo, ninguna disposicin nica de pigmentos satisface
este requisito, ya que en diferentes momentos del da la intensidad de la luz y
la distribucin espectral tienden a favorecer un fotossistema u otro (Trissl y
Wilhelm 1993; Allen y Forsberg 2001).
Este problema puede ser resuelto por un mecanismo que cambia la energa de
un fotosistema a otro en respuesta a diferentes condiciones. Se ha demostrado
que un mecanismo de regulacin de este tipo opera en diferentes condiciones
experimentales. La observacin de que el rendimiento cuntico total de la
fotosntesis es casi independiente de la longitud de onda (vase la figura 7.12)
sugiere claramente que dicho mecanismo existe.
Las membranas de Thylakoid contienen una protena quinasa que puede
fosforilar un residuo especfico de treonina en la superficie de LHCII, una de las
protenas de pigmento de antena ligadas a membrana descritas anteriormente
en el captulo (ver Figura 7.20). Cuando LHCII no est fosforilado, entrega ms
energa al fotosistema II, y cuando est fosforilado, entrega ms energa al
fotosistema I (Haldrup et al., 2001).
La quinasa se activa cuando la plastoquinona, uno de los portadores de
electrones entre PSI y PSII, se acumula en el estado reducido. La plastoquinona
reducida se acumula cuando PSII se activa ms frecuentemente que PSI. El
LHCII fosforilado migra entonces fuera de las regiones apiladas de la
membrana hacia las regiones no apiladas (vase la figura 7.18),
probablemente debido a interacciones repulsivas con cargas negativas en
membranas adyacentes.

La migracin lateral de LHCII desplaza el balance de energa hacia el


fotosistema I, que se encuentra en las lminas de estroma, y lejos del
fotosistema II, que se encuentra en las membranas apiladas de la grana. Esta
situacin se denomina estado 2. Si la plastoquinona se oxida ms debido al
exceso de excitacin del fotosistema I, la quinasa es
Se desactiva y el nivel de fosforilacin de LHCII disminuye por la accin de una
fosfatasa unida a la membrana. LHCII luego regresa a la grana y el sistema
est en estado 1. El resultado neto es un control muy preciso de la distribucin
de energa entre los fotossistemas, permitiendo el uso ms eficiente de la
energa disponible.
GENTICA,
ASAMBLEA
FOTOSINTTICOS

EVOLUCIN

DE

LOS

SISTEMAS

Los cloroplastos tienen su propia maquinaria de ADN, ARNm y sntesis de


protenas, pero algunas protenas del cloroplasto son codificadas por genes
nucleares e importadas al cloroplasto.
En esta seccin consideraremos la gentica, el montaje y la evolucin de los
principales componentes del cloroplasto.
Se han secuenciado los genomas de cloroplasto, cianobacterias y
nucleares
Se han secuenciado los genomas completos del cloroplasto de varios
organismos. El ADN del cloroplasto es circular y vara en tamao de 120 a 160
kilobases. El genoma del cloroplasto contiene secuencias codificantes para
aproximadamente 120 protenas. Algunas de estas secuencias de ADN
codifican protenas que an no se han caracterizado. No es seguro si todos
estos genes se transcriben en mRNA y se traduce en protena, pero parece
probable que algunas protenas cloroplsicas an no se han identificado. 138
Captulo 7
El genoma completo de la cianobacteria Synechocystis (cepa PCC 6803) y la
planta superior Arabidopsis se han secuenciado, y los genomas de cultivo
importante
Plantas como el arroz y el maz han sido completadas (Kotani y Tabata 1998,
Arabidopsis Genome Initiative 2000). Los datos genmicos para el ADN
cloroplstico y nuclear proporcionarn nuevos conocimientos sobre el
mecanismo de la fotosntesis, as como muchos otros procesos vegetales.
Los genes del cloroplasto exhiben patrones no-mendelianos de
herencia
Los cloroplastos y las mitocondrias se reproducen por divisin y no por sntesis
de novo. Este modo de reproduccin no es sorprendente, ya que estos
orgnulos contienen informacin gentica que no est presente en el ncleo.
Durante la divisin celular, los cloroplastos se dividen entre las dos clulas
hijas. En la mayora de las plantas sexuales, sin embargo, slo la planta

materna aporta cloroplastos al cigoto. En estas plantas, el patrn mendeliano


normal de herencia no se aplica a los genes codificados con cloroplasto porque
la descendencia recibe cloroplastos de un solo progenitor. El resultado es la
herencia no mendeliana, o materna. Numerosos rasgos se heredan de esta
manera; Un ejemplo es el rasgo de resistencia al herbicida discutido en el Tema
Web 7.10.
Muchas protenas del cloroplastos son importadas del citoplasma
Las protenas del cloroplasto pueden ser codificadas por el ADN cloroplstico o
nuclear. Las protenas codificadas por cloroplasto se sintetizan en ribosomas de
cloroplasto; Las protenas codificadas en el ncleo se sintetizan en ribosomas
citoplasmticos y luego se transportan al cloroplasto. Muchos genes nucleares
contienen intrones, es decir, secuencias de bases que no codifican protenas. El
mRNA se procesa para eliminar los intrones, y las protenas se sintetizan en el
citoplasma.
Los genes necesarios para la funcin del cloroplasto se distribuyen en el ncleo
y en el genoma del cloroplasto sin patrn evidente, pero ambos conjuntos son
esenciales para la viabilidad del cloroplasto. Algunos genes cloroplastos son
necesarios para otras funciones celulares, como la sntesis de hemo y lpidos.
El control de la expresin de los genes nucleares que codifican las protenas del
cloroplasto es complejo, implicando una regulacin dependiente de la luz
mediada tanto por el fitocromo (vase el captulo 17) como por la luz azul
(vase el captulo 18), as como otros factores (Bruick y Mayfield, 1999;
Wollman et al., 1999).
El transporte de protenas del cloroplasto que se sintetizan en el citoplasma es
un proceso estrictamente regulado (Chen y Schnell 1999). Por ejemplo, la
enzima rubisco (ver
Captulo 8), que funciona en la fijacin de carbono, tiene dos tipos de
subunidades, una subunidad grande codificada por cloroplasto y una pequea
subunidad codificada por el ncleo. Las pequeas subunidades de rubisco se
sintetizan en el citoplasma y se transportan
Cloroplasto, donde se ensambla la enzima. En este y otros casos conocidos, las
protenas de cloroplasto codificadas en el ncleo se sintetizan como protenas
precursoras que contienen una secuencia de aminocidos N-terminal conocida
como pptido de trnsito. Esta secuencia terminal dirige la protena precursora
al cloroplasto, facilita su paso a travs de las membranas de la envoltura
exterior y interior y es
Entonces cortado apagado. La plastocianina portadora de electrones es una
protena soluble en agua que est codificada en el ncleo pero funciona en la
luz del cloroplasto. Por lo tanto, debe
Cruzar tres membranas para llegar a su destino en el lumen. El pptido de
trnsito de la plastocianina es muy grande y se procesa en ms de una etapa.

La Biosntesis y Desglose de la Clorofila Son Caminos Complejos


Las clorofilas son molculas complejas exquisitamente adecuadas para la
absorcin de luz, la transferencia de energa y las funciones de transferencia de
electrones que realizan en la fotosntesis (vase la figura 7.6). Como todas las
otras biomolculas, las clorofilas se hacen por una va biosinttica en la que se
utilizan molculas simples como bloques de construccin para ensamblar
molculas ms complejas (Porra 1997, Beale 1999).
Cada paso en la va biosinttica se cataliza enzimticamente. La va
biosinttica de la clorofila consta de ms de una docena de pasos (ver Tema
Web 7.11). El proceso se puede dividir en varias fases (Figura 7.37), cada una
de las cuales se puede considerar por separado, pero que en la clula estn
altamente coordinadas y reguladas. Esta regulacin es esencial porque la
clorofila libre y muchos de los compuestos biosintticos
Los productos intermedios estn daando a los componentes celulares. El dao
se debe en gran medida a que las clorofilas absorben la luz eficientemente,
pero en ausencia de protenas acompaantes, carecen de un camino para la
eliminacin de la energa, con el resultado de que se forma oxgeno singlete
txico.
La va de descomposicin de la clorofila en las hojas senescentes es muy
diferente de la va biosinttica (Matile et al., 1996). El primer paso es la
eliminacin del phytol
Cola por una enzima conocida como clorofilasa, seguido de la eliminacin del
magnesio por la de-quelatatasa de magnesio. A continuacin, la estructura de
porfirina se abre mediante una enzima oxigenasa dependiente de oxgeno para
formar un tetrapirrol de cadena abierta.
El tetrapirrol se modifica adicionalmente para formar productos incoloros
solubles en agua. Estos metabolitos incoloros son luego exportados del
cloroplasto senescente y transportados a la vacuola, donde se almacenan
permanentemente.
Los metabolitos de la clorofila no se procesan ni reciclan ms, aunque las
protenas asociadas a ellos en el cloroplasto se reciclan posteriormente en
nuevas protenas. Se piensa que el reciclaje de protenas es importante para la
economa de nitrgeno de la planta.
Los organismos fotosintticos complejos han evolucionado desde
formas ms simples
El complicado aparato fotosinttico encontrado en las plantas y las algas es el
producto final de una larga secuencia evolutiva. Mucho se puede aprender
acerca de este proceso evolutivo a partir del anlisis de fotos fotosintticas
procariotas ms simples
Organismos, incluyendo
cianobacterias.

las

bacterias

fotosintticas

anoxignicas

las

El cloroplasto es un organelo celular semiautnomo, con su propio ADN y un


aparato completo de sntesis de protenas. Muchas de las protenas que
componen el aparato fotosinttico, as como todas las clorofilas y lpidos, se
sintetizan en el cloroplasto. Otras protenas son importadas del citoplasma y
son codificadas por genes nucleares. Cmo ocurri esta curiosa divisin del
trabajo? La mayora de los expertos ahora estn de acuerdo en que el
cloroplasto es el descendiente de una relacin simbitica entre una
cianobacteria y una clula eucaritica no fotosinttica simple. Este tipo de
relacin se llama endosimbiosis (Cavalier-Smith 2000).
Originalmente la cianobacteria era capaz de vida independiente, pero con el
tiempo gran parte de su informacin gentica necesaria para las funciones
celulares normales se perdi, y una cantidad sustancial de informacin
necesaria para sintetizar el aparato fotosinttico fue transferido al ncleo. As,
el cloroplasto ya no era capaz De la vida fuera de su anfitrin y finalmente se
convirti en una parte integral de la clula.
En algunos tipos de algas, se cree que los cloroplastos han surgido por
endosimbiosis de organismos fotosintticos eucariotas (Palmer y Delwiche
1996). En estos organismos el cloroplasto est rodeado por tres y en algunos
casos cuatro membranas, que se cree que son restos de las membranas
plasmticas de los organismos anteriores. Tambin se cree que las
mitocondrias se originaron por endosimbiosis en un evento separado mucho
antes que la formacin de cloroplastos.
Las respuestas a otras preguntas relacionadas con la evolucin de la
fotosntesis son menos claras. Estos incluyen la naturaleza de los sistemas
fotossintticos ms antiguos, cmo los dos fotosistemas se unieron y el origen
evolutivo del complejo de evolucin del oxgeno (Blankenship y Hartman, 1998;
Xiong et al., 2000).
RESUMEN
La fotosntesis es el almacenamiento de energa solar realizado por plantas,
algas y bacterias fotosintticas. Los fotones absorbidos excitan molculas de
clorofila, y estas clorofilas excitadas pueden disponer de esta energa como
calor, fluorescencia, transferencia de energa o fotoqumica. La luz se absorbe
principalmente en los complejos de antenas, que comprenden clorofilas,
pigmentos accesorios y protenas y se encuentran en las membranas de los
tilacoides del cloroplasto.
Los pigmentos fotosintticos de la antena transferen la energa a un complejo
especializado de la clorofila-protena conocido como centro de la reaccin. El
centro de reaccin contiene complejos de protenas multisubunidades y cientos
o, en algunos organismos,
Miles de clorofilas. Los complejos de antena y los centros de reaccin son
componentes integrales de la membrana tilacoide. El centro de reaccin inicia
una serie compleja de reacciones qumicas que capturan energa en forma de
sustancia qumica

cautiverio.
La relacin entre la cantidad de quanta absorbida y el rendimiento de un
producto fotoqumico realizado en una reaccin dependiente de la luz viene
dada por el rendimiento cuntico. El rendimiento cuntico de las primeras
etapas de la fotosntesis es de aproximadamente 0,95, lo que indica que casi
todos los fotones absorbidos producen una separacin de carga en el centro de
reaccin.
Las plantas y algunos procariotas fotosintticos tienen dos centros de accin, el
fotosistema I y el fotosistema II, que funcionan en serie. Los dos fotosistemas
estn separados espacialmente: PSI se encuentra exclusivamente en las
membranas de estroma no apiladas, PSII en gran parte en las membranas
grana apiladas. Las clorofilas del centro de reaccin de PSI absorben al mximo
a 700 nm, las de PSII a 680 nm. Los fotosistemas II y I llevan a cabo el
transporte de electrones no cclicos, oxidan el agua a oxgeno molecular y
reducen el NADP + a NADPH. Es enrgicamente muy difcil oxidar el agua para
formar oxgeno molecular, y el sistema fotosinttico que evoluciona con el
oxgeno es el nico sistema bioqumico conocido que puede oxidar el agua,
proporcionando as casi todo el oxgeno en la Tierra
atmsfera. La fotooxidacin del agua es modelada por el mecanismo del
estado S de cinco pasos. El manganeso es un cofactor esencial en el proceso
de oxidacin del agua, y los cinco estados S parecen representar sucesivos
estados oxidados de una enzima que contiene manganeso.
Un residuo de tirosina de la protena D1 del centro de reaccin PSII funciona
como un portador de electrones entre el complejo de oxigenacin y P680. La
feofitina y las dos plastoquinonas son portadores de electrones entre P680 y el
gran complejo del citocromo b6f. La plastocianina es el portador de electrones
entre el citocromo b6f y P700. Los portadores de electrones que aceptan
electrones de P700 son muy fuertes reduciendo , E incluyen una quinona y tres
protenas de hierro-azufre ligadas a la membrana conocidas como ferredoxinas
unidas. El flujo de electrones termina con la reduccin de NADP + a NADPH por
una membrana, la ferrodoxina-NADP reductasa.
Una parte de la energa de los fotones tambin se almacena inicialmente como
energa potencial-qumica, en gran parte en forma de una diferencia del pH a
travs de la membrana del thylakoid. Esta energa es
Rpidamente convertido en energa qumica durante la formacin de ATP por
accin de un complejo enzimtico conocido como ATP sintasa. La
fotofosforilacin de ADP por el ATP
Sintasa es impulsada por un mecanismo quimiosmtico. El flujo fotosinttico de
electrones se acopla a la translocacin del protn a travs de la membrana del
tilacoide, y el estroma se vuelve ms alcalino y el lumen ms cido. Este
gradiente de protones

Conduce la sntesis de ATP con una estequiometra de cuatro iones H + por ATP.
NADPH y ATP formados por las reacciones de luz proporcionan la energa para
la reduccin de carbono.
El exceso de energa luminosa puede daar los sistemas fotosintticos, y varios
mecanismos minimizan dicho dao. Los carotenoides actan como agentes
fotoprotectores
Enfriamiento del estado excitado de la clorofila. Los cambios en el estado
fosforilado de las protenas del pigmento de la antena pueden cambiar la
distribucin de energa entre los fotosistemas I y II cuando hay un desequilibrio
entre la energa absorbida por cada fotosistema. El ciclo de xantofila tambin
contribuye a la disipacin del exceso de energa mediante el apagado no
fsmico.
Los cloroplastos contienen ADN y codifican y sintetizan algunas de las
protenas que son esenciales para la fotosntesis. Las protenas adicionales son
codificadas por el ADN nuclear, sintetizado en el citosol, e importado en el
cloroplasto. Las clorofilas se sintetizan en una va biosinttica que implica ms
de una docena de pasos, cada uno de los cuales est muy cuidadosamente
regulado. Una vez sintetizadas, las protenas y los pigmentos se ensamblan en
la membrana de thylakoid