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MICROBIOLOGIA (UV)
TEMAS 1-10 MICROBIOLOGA (PRIMER C
UATRIMESTRE)
GOZALBO, DANIEL
CURSO 1516
INTRODUCCIN A LA MICROBIOLOGA
1. CONCEPTO DE MICROBIOLOGA
La microbiologa es una ciencia que estudia los microorganismos desde muchos puntos de vista
(morfologa, fisiologa). El trmino microorganismo no tiene significado taxonmico ya que
abarca un gran nmero de microorganismos. Solo comparten el hecho de que no son visibles al
ojo humano. El grupo de los mamferos s que tiene significado taxonmico.
La microbiologa tiene relacin con otras ciencias, como por ejemplo, con la parasitologa ya
que comparten los microorganismos como objeto de estudio. Tambin est relacionada con la
gentica, bioqumica y biologa molecular debido a que en el avance de estas ciencias se han
estudiado los microorganismos.
La amplificacin se define como las veces que se aumenta el tamao de la imagen. El poder de
amplificacin aumenta 100 veces cuando pasa por el objetivo (100x) y 10 veces cuando
atraviesa la lente ocular (10x). [100 x 10 = 1000]
Poder de resolucin: Es la capacidad para distinguir como separados o distintos dos puntos
que estn adyacentes. Esta capacidad se mide como una distancia d
n sen donde
Otras tinciones:
-La tincin de esporas: Se utiliza en gneros Bacillus y Clostridium. Las esporas se forman
dentro de la bacteria. El colorante entrar en la espora y por lo tanto dentro de la bacteria.
Pero cuando se lava con agua, el colorante se elimina de las bacterias pero no de las esporas.
-La tincin negativa (campo oscuro): Se utiliza un colorante llamado nigrosina que tiene la
caracterstica de no tener afinidad por los microorganismos. En un portaobjetos, cerca de un
extremo se coloca la suspensin del microorganismo y al lado o encima se coloca una gota de
nigrosina. A continuacin se hace una extensin con un portaobjetos, lo desplazamos en la
superficie y la mancha se extiende por toda la superficie. Lo que se pretende obtener con la
extensin es que el colorante se quede en una lmina muy fina y as los microorganismos no lo
tapan, entonces saldr al microscopio un fondo oscuro y los microorganismos iluminados. Es
muy til para la observacin de cpsulas.
Los microorganismos estn por todos lados, por lo tanto los cultivos puros se pueden
contaminar, cosa que no se puede permitir. Por ese motivo cualquier material a utilizar para
manipular organismos puros debe ser estril, con unas condiciones tales que eviten la
contaminacin del material.
Una herramienta es el asa de siembra. La parte final se coloca en la llama de un mechero para
esterilizar el material. Trabajar bien implica no contaminar la muestra ni el propio laboratorio.
Despus de un tiempo se observan puntos, que se van haciendo cada vez ms grandes, siendo
las colonias que se van generando.
-Extensin por la superficie: Se llena toda la superficie de la placa de medio de
microorganismos. Se vuelca la muestra, y se extiende con una barrilla de vidrio o metal,
pasndola por todas las direcciones, con lo cual, conseguimos que la muestra est distribuida
de forma homognea. El problema que tiene es que hay que hacer diluciones hasta que se
obtengan colonias aisladas, con lo cual es algo lioso.
Estos mtodos son muy comunes cuando estamos delante de una muestra con
microorganismos mayoritarios, pero si necesitamos cultivos puros de microorganismos
minoritarios estas tcnicas no son eficientes. Para ello, son necesarios otros mtodos:
-Enriquecimiento del microorganismo: Para conseguir un aumento de la cantidad de
microorganismos minoritarios vamos a realizar un cultivo en un medio donde las
condiciones sean favorables para el microorganismo minoritario. Cuando hayamos
conseguido aumentar las proporciones del microorganismo minoritario (siendo ahora
mayoritario) podremos utilizar uno de los mtodos anteriores. Para poder realizar este
mtodo es necesario conocer con exactitud cules son las condiciones favorables para
el microorganismo minoritario.
-Aislamiento directo de un microorganismo: Cuando cojo una colonia, indirectamente
cojo un microorganismo, esto se hace en el micromanipulador. Debo poner todos los
nutrientes que necesita. Muchos microorganismos se pueden cultivar artificialmente,
pero en la naturaleza hay microorganismos que no son cultivables artificialmente.
Otra observacin es que hay microorganismos que son imposibles de cultivar sin clulas
presentes, un ejemplo son las rickettsias, bacterias patgenas que parasitan
1.
Tamao de la colonia.
2.
3.
Textura o consistencia: Colonias mucosas o secas. Las colonias mucosas son aquellas
que al cogerlas con el asa de siembra tienen adherido una sustancia viscosa. En las
colonias secas no se pueden coger con el asa de siembra.
4.
5.
6.
En medio lquido:
1.
Turbidez del medio: A mayor cantidad de bacterias, ms turbio ser el medio lquido.
2.
3.
Olor: Amplia variedad de olores, muchas enterobacterias tienen un olor fecal. Otros
microorganismos como la sachnomyes cerevisine tienen un olor agradable.
II.
Cubrir el medio slido con aceite mineral esterilizado: Se suele realizar en tubos
de ensayo con agar slido inclinado. Al aadir una capa de aceite evitamos que se
mezcle con el medio y protege al organismo del oxgeno (reaccin de oxidacin) y
la desecacin y se deja en una cmara fra hasta 4C.
III.
Liofilizacin: Este mtodo es esencial para preservar las caractersticas del cultivo
puro. Se trata de la congelacin del producto y la posterior introduccin en una
cmara de vaco para realizar la separacin del agua por sublimacin. Se elimina el
agua desde el estado slido al gaseoso sin pasar por el estado lquido (a baja
presin y temperatura). En el vaco, a -80C, el agua pasa de estado slido a vapor
mediante un aparato llamado liofilizador. Se consigue eliminar prcticamente la
totalidad del agua libre contenida en el producto original, pero preservando la
estructura molecular de la sustancia liofilizada. As, los microorganismos son
viables durante dcadas.
IV.
ESTRUCTURA BACTERIANA
La estructura de una bacteria es muy parecida a la de una arquea.
1. MORFOLOGA DE LAS BACTERIAS
Normalmente cada especie de bacteria tiene su morfologa definida, excepto casos
particulares que se llaman bacterias pleomrficas (que no tienen forma definida, tienen
formas ms o menos irregulares, todas parecidas pero no siguen un patrn). Tambin la
morfologa puede variar un poco en funcin de las condiciones de cultivo, sobre todo en lo que
se refiere al tamao de la bacteria (en condiciones ptimas tienen un tamao y en no ptimas
otros).
Las bacterias tienen morfologa definida, y bsicamente tienen dos formas principales:
-Bacterias esfricas: Cocos
-Bacterias alargadas: Bacilos: Hay bacilos cortos y largos. En algunos casos los bacilos son muy
cortos y al verlos al microscopio se puede dudar. A veces, para definir estos bacilos cortos se
emplea el trmino cocobacilo.
Estas son las formas ms frecuentes, aunque hay otras:
-Espirilos: Helicoidales.
Espiroquetas: Bacterias finas y muy largas que estn enrolladas en espiral.
-En forma de rin.
Vibriones: Bacilos curvados.
Despus tenemos otras formas an menos frecuentes:
-Bacterias muy alargadas.
-Bacterias con extensiones o apndices.
Tambin existen otros aspectos que definen a las bacterias, como el tamao:
Sabemos que el tamao es microscpico, pero podemos encontrar bacterias de diferentes
tamaos. La mayor parte de las bacterias tienen un tamao entre 0.5 -2 micras. Aunque hay
bacterias ms pequeas, que pueden tener un cuarto de micra. No obstante, hay bacterias
ms grandes.
Los virus son muy simples y tienen un tamao mucho ms pequeo que las bacterias. Por otro
lado, tenemos el resto de microorganismos, microorganismos eucariotas, que en general son
de mayor tamao, puesto que son clulas eucariotas y tienen compartimientos extracelulares
(ncleo, mitocondria, aparato de Golgi).
Gram positiva:
positiva Su
u pared celular es una estructura homognea, que se ve
uniforme en toda la superficie. Es bastante gruesa (400 A), mientras que la
membrana plasmtica puede medir ms o menos unos 80 A. Rodea a la
clula en toda la superficie.
Gram negativa:
negativ La pared celular
elular es ms fina y ms complicada porque
presenta
ta varias capas. Tenemos la membrana plasmtica,
plasmtica, membrana
mem
externa
(que solo est en Gram negativas), y entre las dos membranas
branas existe el
periplasma o espacio periplsmico. La capa dee murena aqu es mucho ms
fina (20 A), no obstante,
obstante la funcin es la misma.
Estos enlaces no se forman al 100% pero en Gram positivos la frecuencia es muy elevada.
Lipopolisacrido: Puede dividirse en dos partes, una parte lipdica y otra parte
polisacardica. Sin embargo, en la parte polisacardica hay dos partes, el antgeno O, y
el ncleo interno. El ncleo interno sirve de puente entre la parte lipdica y el antgeno
O. El antgeno O, es una molcula antignica (En las Gram positivas son los cidos
teicoicos) y es especfica de especies.
En las Gram negativas tambin encontramos el espacio periplsmico, que est entre la
murena y la membrana externa, hay cationes bivalentes, enzimas hidrolticos,
hidrolticos protenas
implicadas en la captacin de nutrientes,
nutri
etc
Pelos: Son ms gruesos y ms largos, pero menos numerosos que las fimbrias.
Son de naturaleza proteica. No son responsables de la movilidad de las clulas,
tienen como funciones la adhesin y el reconocimiento de bacterifagos. El
pelo sexual (la pili) permite un proceso de intercambio de material gentico
denominado conjugacin bacteriana.
Es una explicacin muy compleja, una manera de explicar el proceso sera la siguiente:
Cada 20 min la poblacin se duplica, pero al cromosoma le cuesta 35 min replicarse. Esto es
posible porque la frecuencia de llegada la establece la de salida. Si una clula se divide cada 20
min, cada 20 min empieza a replicarse un cromosoma, antes de acabar un ciclo de replicacin
empieza otro. Si la replicacin empieza cada 20 min, cada 20 min acabar una replicacin
como la replicacin es ms larga. Cada 20 min el cromosoma empieza a replicarse.
- Vacuolas de gas: Acumulan gas, pero son de naturaleza proteica, no son membranas, tiene la
capacidad de que en su interior se acumule gas. Est presente en bacterias acuticas y les sirve
para controlar su densidad.
- Carboxisomas: Es una estructura regular, polidrica, y est formada por protenas. Es la
estructura donde tiene lugar la fijacin del CO2 que es una fuente de carbono inorgnica que
puede sintetizar azcares en plantas. Esto lo realizan las bacterias auttrofas que son capaces
de incorporar el CO2 a la materia orgnica.
- Tambin existen unas estructuras especializadas en la captacin de luz presentes en bacterias
fotosintticas.
CUBIERTAS
REFRINGENCIA
DPA
ACTIVIDAD METABLICA
RESISTENCIA
CAPACIDAD TINTORIAL
AGUA
ESPORA
MUCHAS
MUCHA
SI
POCA
MUCHA
POCA
POCA
CLULA VEGETATIVA
NORMAL
NORMAL
NO
NORMAL
POCA
NORMAL
NORMAL
NUTRICIN
Una bacteria crece y se divide, esto se debe porque ocurren en su interior reacciones. Este
conjunto de reacciones que posibilitan el crecimiento y divisin de la bacteria se denomina
metabolismo.
Cuando una bacteria crece se sintetizan todas las estructuras y componentes celulares, es por
eso que las reacciones del metabolismo son rutas de sntesis, es decir, anabolismo. Esta
biosntesis consume energa (ATP). Esto obliga a la clula a hacer otras reacciones de
degradacin de molculas para obtener energa, catabolismo.
En microbiologa daremos las de catabolismo, en bioqumica las de anabolismo.
1. QU ES UN NUTRIENTE?
Los nutrientes son molculas que la bacteria necesita coger del medio y utiliza para rutas del
metabolismo, ya sea rutas anablicas como catablicas. Para que una bacteria crezca debe
tener todos los nutrientes necesarios.
Los requerimientos nutricionales de las bacterias dependen de la composicin qumica del
microorganismo o de la bacteria, y el segundo factor es la capacidad de biosntesis de la
bacteria. Una bacteria requiere los nutrientes que estn en su estructura, al igual que
cualquier clula viva. Todos los aminocidos tienen su ruta de biosntesis.
Las bacterias que tienen una elevada capacidad de biosntesis son poco exigentes
nutricionalmente, ellas se pueden sintetizar los compuestos necesarios. Y viceversa.
NUTRIENTES QUE HAY QUE PONER AL MEDIO DE CULTIVO:
MACRONUTRIENTES:
Si a una clula se le quita el agua se queda un componente seco que es el 70%
aproximadamente.
Del peso seco el 95% son CHONPS, el 5% elementos metlicos como K, Mg, Ca, Na, Fe.
MICRONUTRIENTES:
Cr, Mn, Co, Cu, Mo, Zn.
Tan poca cantidad que no hace falta echarlos al medio cultivo, si esta contaminado.
El agua no solo es el nutriente ms importante sino que es el ms abundante, todos los
nutrientes o casi todos son hidrosolubles, es el medio donde ocurren las actividades
metablicas. Aporta adems H y O se pueden incorporar a las molculas del microorganismo
por relaciones de hidrlisis. Cuando un enlace se rompe se hidroliza, se incorpora una
molcula de agua.
NITROGENO:
AZUFRE:
La fuente as habitual es el sulfato (SO42-) pero algunas utilizan el sulfuro (S2-), tambin hay
fuente de sulfuro orgnica, por ejemplo los aminocidos (la cistena, la metionina).
o
FSFORO
Las bacterias tienen como clasificacin una clasificacin final de las dos anteriores:
CLASES DE ORGANISMOS SEGN SU TIPO DE NUTRICIN
FOTTROFOS
QUIMITROFOS
LITTROFOS
(Auttrofos)
ORGANTROFOS
(Hetertrofos)
FOTOLITTROFOS
Bacterias fotosintticas del
azufre y todos los vegetales
con clorofila.
FOTOORGANTROFOS
Bacterias purpreas no
sulfurosas
QUIMIOLITTROFOS
Bacterias quimiosintticas
QUIMIOORGANTROFOS
Muchas bacterias, todos los
animales y todos los hongos
Fotoautrtofos: Utilizan la energa de la luz solar para fijar el CO2 (fuente de carbono
materia inorgnica).
Fotohetertrofos: tiene como fuente de energa la luz y, como fuente de carbono, la
materia orgnica.
Quimioauttrofos:
Litoauttrofos: Son los ms abundantes y viven en ecosistemas minerales, en
ausencia de materia orgnica y la energa la obtienen de oxidar molculas
inorgnicas. Tienen un bajo rendimiento y proliferan al no tener competencia.
Organoauttrofos:
Quimiohetertrofos:
Litohetertrofos
Organohetertrofos: Ms abundantes, las mismas molculas sirven para
fuente de carbono y fuente de energa.
Para cultivar un microorganismo no solo hacen falta los nutrientes, hacen falta otros
requerimientos fisicoqumicos para que los microorganismos puedan crecer, son varios:
-Presencia de O2
-Presin osmtica
-Temperatura
-pH
-Luz
-CO2
Segn su origen:
Segn la composicin:
Segn la utilidad:
METABOLISMO
El anabolismo es que a partir de compuestos muy simples se sintetizan componentes, estos
reaccionan entre s, son procesos de biosntesis y son bastante parecidos en todos los seres
vivos.
En el catabolismo se produce ATP que los microorganismos necesitan. El ATP sirve en el
transporte activo de nutrientes, para los flagelos.
Microorganismos quimiohetertrofos: Obtienen energa a partir de la oxidacin de molculas
orgnicas.
2. RESPIRACIN ANAEROBIA
Cuando se respira anaerbicamente, las 6 molculas de glucosa se oxidan a 6 molculas de CO 2
(igual que en la aerobia), los electrones van al cofactor que se reduce y los lleva al
transportador, pero el aceptor final de la cadena de transporte NO es el oxgeno
(anaerobia=oxgeno no interviene), entonces no se forma agua. El aceptor final puede ser
cualquier molcula que est oxidada, una molcula reducida no puede ser aceptor porque no
puede reducirse ms. Un ejemplo es el nitrato, otro el nitrito, las bacterias anaerobias cogen el
nitrato del suelo que es esencial para las plantas, son bacterias desnitrificantes y son
perjudiciales para las plantas por quitarles los nitratos. Otro ejemplo es el Fe 3+. Como no se
forma agua, se forma un producto en funcin a la molcula correspondiente que acta como
aceptor final de electrones.
Hay otro aspecto importante en la respiracin anaerobia, es que el aceptor final debe tener un
potencial de reduccin menor al del oxgeno. Es decir, puede tener tambin un potencial de
reduccin menor al de un determinado transportador de tal manera que no hace falta que sea
el ltimo transportador el que le ceda los electrones al aceptor final, ya que no sera reducirse,
sino oxidarse, puede ser ms corta la cadena de transporte, y por lo tanto, enviar menor
protones fuera.
Fermentacin heterolctica: Se obtiene lctico, pero tambin etanol y CO2. Este tipo
de fermentacin la hacen muchas bacterias, las ms importantes son las bacterias
lcticas. El yogur se obtiene por la fermentacin lctica de la leche, proceso realizado
por estas bacterias.
Nuestras clulas tambin pueden fermentar en los casos en los que no tenemos oxgeno. Al
hacer mucho ejercicio, podemos llegar a realizar la fermentacin lctica, el lactato se acumula y
precipita, dndonos la sensacin de agujetas.
Los littrofos son auttrofos y anaerobios: La sustancia inorgnica reducida se oxida, esos
electrones van a la cadena de transporte de electrones produciendo ATP. Necesitan mucho
poder reductor. Una caracterstica importante de los litotrofos en general es que en el
anabolismo utilizan el CO2 como fuente de carbono, sin embargo, no sirve como fuente de
energa. El proceso por el cual el CO2 se incorpora a materia orgnica es el ciclo de Calvin, este
proceso consume energa y aparte consume electrones. Esto se debe a que este proceso es
justo lo contrario que en la respiracin.
La molcula que se oxida puede ser distinta, la cadena de electrones se inicia en el potencial
redox de la molcula que se oxida, tiene que cederle los electrones a una molcula con un
potencial redox menor, la consecuencia es que la cadena respiratoria es ms corta que si la
molcula que se oxida fuese el oxgeno.
En un transporte inverso de electrones, los electrones van de la molcula que tienen ms
afinidad a la que tiene menos, de manera que iran cada vez a una molcula con un potencial
de reduccin menor, de tal forma que se consume energa. Estos organismos viven en unas
condiciones desfavorables y no tienen competencia.
CRECIMIENTO MICROBIANO
Se trata del crecimiento de las poblaciones microbianas, como crece individualmente un
microorganismo.
El crecimiento de la poblacin microbiana se debe a que las clulas individuales crecen y se
dividen. Pueden crecer de varias maneras, tenemos varios modelos:
1. Divisin binaria o biparticin: Bacterias, protozoos, algas y algunas levaduras. La
bacteria con rutas catablicas obtiene energa, se va haciendo grande hasta un tamao
crtico en el que se divide tras la aparicin de un tabique, de tal manera que las dos
bacterias son idnticas a la primera que se ha dividido.
2. Gemacin: La mayor parte de las levaduras, que son organismos unicelulares
eucariotas. En un punto determinado de la superficie empieza a emitir una yema o
gema, esta yema empieza a hacerse grande hasta tener un tamao considerable,
entonces se forma un tabique entre la yema y la clula, se separan y la yema pasa a ser
una clula hija y la clula de la que proviene para a llamarse clula madre. Donde se
forma el tabique y se separan queda una marca, se llama cicatriz de gemacin. La
clula madre puede producir ms clulas hijas, y de la misma manera ir acumulando
cicatrices de gemacin.
La fluidez de una membrana tambin depende de la temperatura del medio.. Una bicapa puede
pasar de estar en forma lquida y viscosa a una forma ms ordenada y cristalina, perdiendo
pues sus propiedades de movimiento. Si la temperatura es suficiente baja (fro),
(fro) la membrana
se solidifica y pierde su caracterstica de permeabilidad selectiva ya que las protenas dejan de
ser funcionales. En cambio, si la temperatura es muy alta,
alta las protenas pueden llegar a
desnaturalizarse.
El fro conserva, el calor destruye.
destruye
Si yo cultivo un microorganismo a una temperatura subptima,
subptima, este alcanzara la fase
logartmica o exponencial.
2. pH
Cada microorganismo tiene su rango de pH para poder crecer.
pH mnimo: pH por debajo del cual el microorganismo no crece.
pH mxima: pH por encima del cual el microorganismo no crece.
pH ptimo: pH donde la velocidad de crecimiento del microorganismo es ptima.
Podemos clasificar los microorganismos
microorganismo segn el pH al que crecen:
Neutrfilos: Crecen a pH neutros.
Acidfilos:: Crecen a pH cidos.
Basfilos:: Crecen a pH bsicos.
(No confundir estos trminos con los del sistema inmunitario)
3. PRESIN OSMTICA
La pared celular protege
tege a los microorganismos de los cambios de presin osmtica del medio
que la rodea.
Es un mtodo de conservacin de alimentos. Los alimentos con una gran cantidad de sal o de
azcar no se contaminan ya que si cae un microorganismo, este pierde agua y se deshidrata.
En cambio hay microorganismos que pueden crecer en condiciones salinas muy altas. Son los
halfilos y hay dos tipos:
Halfilos facultativos: Que
ue pueden crecer en condiciones
con
sin laa elevada concentracin salina.
See adaptan a ambas condiciones.
Halfilos estrictos: See han adaptado tan bien a vivir con altas concentraciones salinas que
nicamente pueden crecer en estas condiciones.
condiciones
Osmfilos: Microorganismos que prefieren
prefieren altas concentraciones de solutos orgnicos en el
exterior celular.
Segn su metabolismo:
-Aerobios estrictos: Respiracin aerobia.
-Anaerobios estrictos: Respiracin anaerobia.
-Anaerobios facultativos: Sin oxgeno es respiracin anaerobia o fermentacin, y con oxgeno
es respiracin aerobia.
Adaptan su metabolismo pero, Es posible que existan microorganismos que no tengan ni
catalasa ni superxido dismutasa, pero para ellos, el oxgeno es txico?
S que existen porque, para empezar no tienen ni H2O2 ni O2-, entonces no tienen cadena de
transporte de electrones, entonces aunque haya oxgeno nunca utilizan el oxgeno como
aceptor electrnico. Entonces son organismos que consiguen la energa por fermentacin. Se
les llaman anaerobios aerotolerantes: No adaptan su metabolismo, siempre fermentan.
El cultivo de organismos anaerobios estrictos hay que hacerlo en una atmsfera sin oxgeno,
adems de los dems parmetros que hay que tener en cuenta para hacer un cultivo
Hay tres mtodos, que se suelen combinar por lo menos dos.
El primer mtodo consiste en aadir a los medios de cultivo sustancias reductoras como la
cistena, el sulfuro de sodio (Na2S), el cido ascarbato, el tioglicolato, etc Disminuyen el
potencial redox bajo, como con sustancias reductoras el oxgeno se consume oxidando a las
molculas dichas anteriormente.
El tercer mtodo es cubrir el medio con parafina que evita el contacto con la atmsfera.
La sequedad inhibe el crecimiento y mata a los microorganismos, unos son sensibles y mueren
enseguida, y otros aguantan un poco ms. Hay unos microorganismos que se llaman xerfilos
que son un poco ms resistentes a la sequedad.
1. EL CALOR
En el calor
alor o temperatura elevada:
Aire caliente (horno Pasteur): Se dejan durante 3 horas a 180C. Por debajo de 140C.
En un principio las esporas son resistentes.
Limitacin: No se puede meter en el horno los medios lquidos porque sino hervira y
se secara todo. Solo sirve para materiales que no contengan agua como el material de
vidrio.
Incineracin o flameado: Se trata de quemar la muestra esterilizada. Esterilizacin
automtica: Se utiliza para eliminar restos biolgicos contaminados con patgenos
peligrosos. Un ejemplo es la esterilizacin del asa de siembra.
Hay una variacin de la autoclave que es el vapor fluyente.. Cuando hay que estabilizar por
calor hmedo, se inyecta a los grandes equipos vapor a sobrepresin. Esto imita
mita el efecto de la
autoclave.
Pasteurizacin: Pasteur prob a calentar el vino para evitar que se hiciese malo.
Consiste en aplicar un calor moderado durante
durante un periodo no muy largo. La
L idea es
destruir a los microorganismos pero preservando intactas las caractersticas orgnicas
del producto, es decir, creando un equilibrio.
equilibrio Por ejemplo, a 80C,, durante quince
minutos, se destruyen los microorganismos vegetativamente pero no se destruyen las
esporas. Un calentamiento ms suave a mayor tiempo (60C durante treinta minutos)
puede llegar a eliminar todos los patgenos pero sin esterilizar el producto. La
pasteurizacin de la leche se realiza para eliminar la carga microbiana o por lo menos,
muchos microorganismos y no las esporas, garantizando la
la duracin del producto. La
pasteurizacin flash consiste en calentar la leche a 72 C sin esterilizarla, sin eliminar
sus esporas bacterianas.
Uperizacin: Este s que es un mtodo de esterilizacin,
esterilizacin, es un tratamiento a 120C
120
entre 1 y 20 minutos.. Como es tan rpido, no se altera mucho el producto. El problema
de este mtodo es que la industria que lo realiza debe tener un equipamiento
adecuado y costoso,, cosa que encarece un poco el proceso.
AGENTES FSICOS
Los rayos X: Son difciles de manipular, son letales para toda forma de vida.
Los rayos Gamma (): Son muy penetrantes, atraviesan grandes espesores. Se utilizan
para esterilizar paquetes con alimentos empaquetados.
3. AGENTES QUMICOS
Los agentes qumicos se emplean en desinfeccin y antisepsia, y tambin como conservantes
de alimentos, y para el tratamiento de enfermedades infecciosas (quimioterpicos).
Desinfeccin: Un desinfectante es una sustancia qumica que desinfecta, que destruye a los
microorganismos pero no siempre a las esporas. La ebullicin es un agente fsico que
desinfecta pero no esteriliza. Los desinfectantes son bastante txicos, ya que no distinguen
entre los microorganismos y nuestras clulas, por ese motivo, normalmente se aplican sobre
un material inerte o inanimado. Por eso se dice que no tienen toxicidad selectiva. Los
antispticos son un grupo de desinfectantes ms suaves, que se pueden colocar sobre la piel y
aplicar en las heridas. Evita que los microorganismos proliferen los tejidos, tienen toxicidad
selectiva.
Quimioterapia: Cura las enfermedades infecciosas mediante las sustancias qumicas. Los
quimioterpicos antimicrobianos son estas sustancias qumicas. Tienen que destruir al
microorganismo sin que afecte a nuestras clulas, tienen toxicidad selectiva.
Jabones naturales: Sales sdicas/potsicas de cidos grasos de cadena larga con una
base. El cido graso + la base forma agua con la cadena larga carbonada COO-Na. La
parte del cido graso con el grupo carboxilo negativo es la que tiene la actividad
detergente. Disuelven los lpidos de membrana, desinfectan y lavan. Estas molculas
tienen algunos inconvenientes, la actividad detergente (antimicrobiana) reside en el
anin, entonces cuando ocurre deben emplearse medios cidos. Los grupos carboxilos
que son cidos dbiles en medio cido cogen un protn y se desactivan, pierden su
actividad. O en aguas pesadas con calcio y magnesio tambin pierden sus propiedades.
Detergentes sintticos: Actan exactamente igual que los jabones pero son de origen
sinttico formado en el laboratorio. La parte que tiene actividad tensoactiva y de
detergente puede ser el anin o el catin. Desnaturalizan protenas, al alterar su
conformacin o inactivar enzimas.
cidos y bases fuertes: Se usan muy poco ya que son muy corrosivos. Causan la
hidrlisis de los enlaces celulares. No son antispticos y se usan a nivel de laboratorio.
Alcoholes: Etanol o isopropanol son los nicos que se utilizan como desinfectantes. No
se utilizan alcoholes ms largos porque tienen problemas de solubilidad. Son efectivos
cuando estn en solucin acuosa en concentraciones de 70-80%. No destruyen las
esporas. Tambin disuelven lpidos. Son antispticos.
Metales pesados: La parte activa son los cationes. El mercurio, la plata y el cobre.
Desinfeccin de piscinas para la proliferacin de algas. El nitrato de plata tambin se
utiliza para la oftalmina gonococida geonatal, gonorrea..
AGENTES QUIMIOTERPICOS
La quimioterapia es el empleo de sustancias qumicas para el tratamiento de de las
enfermedades causadas por los microorganismos (enfermedades infecciosas).
Quimioterpico: Sustancia qumica que se suministra a personas para curar las enfermedades.
1. CLASIFICACIN DE LOS AGENTES QUIMIOTERPICOS
Segn su origen se clasifican en:
Naturales: De origen natural, puede provenir de las plantas como la quinina para
tratar la malaria. Tambin pueden provenir de fondos marinos para los productos
farmacuticos. Los ms importantes son los antibiticos, que es un grupo de
quimioterpicos naturales fabricados por los propios microorganismos, que tienen
actividad microbiana.
Sintticos: Molculas de sntesis qumica en el laboratorio. Estas sustancias entran en
nuestro cuerpo y tienen que cumplir muchos requisitos. Desde el punto de vista
microbiolgico el requisito ms importante es el de la toxicidad selectiva. Tienen que
ser txicos para los microorganismos e inculos para las personas (que no afecte a las
clulas eucariotas). La toxicidad selectiva se debe a que cada quimioterpico acta
sobre un microorganismo inhibindolo porque acta sobre una estructura o ruta
metablica tpica de los microorganismos, y este sitio por donde acta el
quimioterpico cuya diana est solo sobre los microorganismos y no sobre nuestras
clulas, a esto se le llama toxicidad selectiva. Por si las tiene sobre todas las clulas no
tendr toxicidad selectiva.
Si un antibitico acta sobre una estructura que solo est en microorganismos, tendr
toxicidad selectiva.
4. EL ESPECTRO DE ACCIN
El espectro de accin de un antibitico es el conjunto de microorganismos que son afectados
por dicho antibitico. Un antibitico con un amplio espectro de accin acta sobre muchos
microorganismos y, si tiene un reducido espectro de accin acta frente a un reducido nmero
de microorganismos. El espectro de accin depende de la presencia de diana (para que un
antibitico acte ha de haber una diana) y la accesibilidad (que la diana sea accesible al
antibitico).
En los hongos:
-Gnero Streptomyces
-Gnero Penicillium:
-Gnero Micromonospora
-Gnero Cephalosporium
-Gnero Bacillus
Si actan sobre la subunidad pequea (30s): Los inhibidores son los aminoglucosdicos
(estreptomicina, neomicina, kanamicina) y tetraciclinas.
Si actan sobre la subunidad grande (50s): Los inhibidores son el cloramfenicol,
eritromicina (antibiticos macrlidos), lincomicina, etc
Factores de resistencia (factores R): Genes que codifican las protenas responsables
de la resistencia, que se encuentran en plsmidos. Los plsmidos son molculas de
ADN circular independientes al ADN de la bacteria, y que tienen un origen de
replicacin propio. Los plsmidos se transfieren por conjugacin entre bacterias, eso
hace que la resistencia se transmita de una bacteria a otra y que no sea de forma
hereditaria.