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MICROBIOLOGIA (UV)
TEMAS 1-10 MICROBIOLOGA (PRIMER C
UATRIMESTRE)
GOZALBO, DANIEL

CURSO 1516

MICROBIOLOGA Eric Borrs


TEMA 1

INTRODUCCIN A LA MICROBIOLOGA

1. CONCEPTO DE MICROBIOLOGA
La microbiologa es una ciencia que estudia los microorganismos desde muchos puntos de vista
(morfologa, fisiologa). El trmino microorganismo no tiene significado taxonmico ya que
abarca un gran nmero de microorganismos. Solo comparten el hecho de que no son visibles al
ojo humano. El grupo de los mamferos s que tiene significado taxonmico.
La microbiologa tiene relacin con otras ciencias, como por ejemplo, con la parasitologa ya
que comparten los microorganismos como objeto de estudio. Tambin est relacionada con la
gentica, bioqumica y biologa molecular debido a que en el avance de estas ciencias se han
estudiado los microorganismos.

Dos aspectos de la microbiologa


-Microbiologa como ciencia bsica: nicamente por el placer del saber.
-Microbiologa como ciencia aplicada: Tiene repercusin en la vida de las personas.
Hay aspectos positivos y negativos de los microorganismos. Un aspecto positivo podra ser la
fermentacin, con la cual se pueden obtener determinados productos; y un aspecto negativo el
efecto virulento que tienen algunos microorganismos.

2. RESUMEN HISTRICO DE LA MICROBIOLOGA


Surgi en la segunda mitad del siglo XIX, es una ciencia reciente. Se desarroll tan tarde debido
a la invencin de los instrumentos pticos implicados en el estudio de los microorganismos.
La primera persona en descubrir el mundo bacteriano fue un holands, Antonie Van
Leeuwenhoek (1632 1723). Fue la primera persona en describir los microorganismos (1674),
fabricaba lentes y le daba por observar en ellas. Se tard 200 aos en fabricar unas lentes tan
perfectas.
Se pensaba que a partir de la materia en putrefaccin se generan organismos, lo que recibe el
nombre de generacin espontnea. Al final qued demostrado que era falso. Esa materia
putrefacta (podrida) debera tener huevos para que se generasen organismos. Esto lo demostr
Louis Pasteur (1822 1897)
Mediante experimentos se demostr que el aire est lleno de microorganismos y es por eso
que la materia llega a podrirse. Si se esteriliza una muestra y se asla, puede estar
descontaminado siempre.

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Pasteur tambin demostr que los cambios qumicos que ocurren durante la fermentacin se
deben a la accin de los microorganismos.
Ejemplos:

Uva -> Vino


Leche-> Yogur

Los cambios qumicos se pueden dar tambin a partir de extractos de microorganismos.


Un mdico ingls, Joseph Lister, pens que las infecciones post-quirrgicas estaban provocadas
debido a que el ambiente est contaminado por microorganismos, entonces utiliz la asepsia,
manteniendo descontaminadas dichas zonas.
Asepsia es un trmino mdico que define al conjunto de mtodos aplicados para la
conservacin de la esterilidad.
Robert Koch (1843 1910) demostr que los microorganismos son responsables de las
enfermedades infecciosas. l puso unos criterios para determinar una enfermedad:
POSTULADOS DE KOCH
1.
2.
3.
4.

El microorganismo tiene que estar presente en todos los casos de enfermedad.


El microorganismo debe aislarse en un laboratorio.
Se infecta un animal sano mediante el microorganismo.
El animal debe padecer la enfermedad.

Koch trabaj con Anthrax, una enfermedad infecciosa y grave.


Para evitar una enfermedad hay dos posibilidades, prevencin o curacin.
-Prevencin: Louis Pasteur invent la vacuna.
Jenner (1798) observ que los agricultores en contacto con vacas con viruela no padecan la
enfermedad, o la padecan con poca actividad.
Pasteur retom la observacin de Jenner, si un microorganismo lo inyectas en otro
animal pierde virulencia, adquiere inmunidad. Esta es la tercera aportacin de Pasteur.
-Curacin: Tcnicas bsicas de aislar microorganismos, con el uso de colorantes con
afinidad al microorganismo.
De esta forma se pas a la sntesis de una sustancia capaz de perjudicar al microorganismo, la
sulfanilamida.
Se cre una sustancia de origen natural denominada antibitico, y la primera en crearse fue la
penicilina por Alexander Fleming, la cual inhibe el crecimiento de la bacteria. A partir de este
descubrimiento se fueron descubriendo otros antibiticos.
En la dcada del 1950 se invent el microscopio electrnico, el cual permite ver a 1000
aumentos y con mayor resolucin.
Tambin permite ver unos agentes infecciosos muy simples por primera vez, los virus. A partir
de aqu se enunciaron los dos tipos de organizacin celular, procariotas y eucariotas.

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En 1944, Avery, McLeod y McCarty mediante un experimento concluyeron que el ADN es el
material gentico.
Watson y Crick en el 1951 describieron por primera vez la estructura del ADN. El ADN contiene
los genes, para que se expresen tiene que haber una transcripcin y una transduccin, esto se
investig posteriormente y en la dcada de los 60 se haba descifrado el cdigo gentico. Todos
estos experimentos se llevaron a cabo con bacterias.
La siguiente etapa que llegaron los cientficos fue manipular in vitro el ADN, a esto se le
denomina ingeniera gentica. Cuando estas tcnicas se incluyeron a la microbiologa industrial
clsica, pas a ser microbiologa industrial moderna. La clara diferencia fue que ya se poda
manipular el organismo genticamente, teniendo una actividad artificial o teniendo una
enzima especfica. El ADN recombinante es el ADN artificial procedente de dos especies
distintas.
En la actualidad, la microbiologa tiene muchos puntos de inters, un aspecto importante es el
que hace referencia a las enfermedades infecciosas, por ejemplo, el determinar las fases de la
enfermedad para disear estrategias para curar o prevenir la enfermedad.
El problema de la resistencia a los antibiticos: Se pens que los antibiticos podan curarlo
todo y la poca de las enfermedades infecciosas haba terminado. Pero a medida que un
antibitico se va usando a lo largo del tiempo, las bacterias poco resistentes se eliminan, pero
las muy resistentes proliferan y dejan de ser tiles los antibiticos utilizados y es necesaria la
bsqueda de nuevos antibiticos, cosa en la que la industria farmacutica invierte mucho para
fabricar un antibitico ms potente.

Las tres aportaciones de Pasteur:


1_ La materia que se pudre es porque debe tener huevos de microorganismos.
2_ Los cambios qumicos que ocurren durante la fermentacin se deben a la accin de los
microorganismos.
3_ La vacuna.

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3. EVOLUCIN
Cuando apareci la Tierra no existan los seres vivos, fue una etapa de evolucin qumica,
donde todo fue reaccionando hasta dar molculas complejas, que formaban polmeros. Estos
polmeros desarrollaron la capacidad de autoduplicarse, luego se rodearon de una membrana
lo que dio lugar a un primordio de clula, y finalmente se dio lugar a una clula primitiva, a
partir de la cual se desarrollaron las dems clulas.
Poco a poco se llevo a cabo una etapa de diferenciacin micrbica que dio lugar a tres lneas de
crecimiento distintas:
-Bacteria (posee clulas procariotas)
-Archea (posee clulas procariotas)
-Eukarya (posee clulas eucariotas)
Inicialmente los seres vivos eran unicelulares, luego surgieron los pluricelulares y cada clula
realizaba todas las funciones. Luego las clulas mutaron y se especializaron en diferentes
funciones, formndose as los tejidos, y de ah los microorganismos empezarn a evolucionar
lentamente en algas, plantas hasta la poca de los dinosaurios.

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4. TEORA DE LA ENDOSIMBIOSIS
Explica la relacin entre la mitocondria actual o el cloroplasto actual con las bacterias. Es una
relacin parastica que estableci una clula con ncleo con una bacteria hace millones de
aos.
La clula fagocit a la bacteria, y esa bacteria parasit en la clula tal que las dos clulas no
pueden vivir independientemente. Con el paso del tiempo la bacteria fotosinttica es una
mitocondria. En resumen, una clula adopto otras para poder sobrevivir a los cambios en el
medio. Por ejemplo, no poda producir energa y adopto una mitocondria, la mitocondria se
beneficio con los nutrientes que le daba la otra y por eso hicieron simbiosis, para la
sobrevivencia mutua. Esta hiptesis fue propuesta por Lyn Margulis y se basaba en el parecido
entre la bacteria y la mitocondria. La membrana interna de la mitocondria provendra de la
bacteria, y la externa de la propia clula. Los ribosomas de una clula eucariota son 80s y los de
una clula procariota son 70s, como los de la mitocondria que son 70s.

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TEMA 2

TCNICAS BSICAS DE OBSERVACIN DE MICROORGANISMOS


El ojo humano no puede ver objetos que tengan un tamao menor a 0.1 mm, y los
microorganismo tienen un tamao que est entre 0.5 y 2 o 3 m. Es por ese motivo que se
har uso de un instrumento capaz de observar los objetos invisibles al ojo humano.
Partes de un microscopio:

La amplificacin se define como las veces que se aumenta el tamao de la imagen. El poder de
amplificacin aumenta 100 veces cuando pasa por el objetivo (100x) y 10 veces cuando
atraviesa la lente ocular (10x). [100 x 10 = 1000]
Poder de resolucin: Es la capacidad para distinguir como separados o distintos dos puntos
que estn adyacentes. Esta capacidad se mide como una distancia d

n sen donde

nsen es la apertura numrica.


La distancia se define como la mnima distancia a la que han de estar dos puntos para poder
distinguirlos como separados o como distintos.

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TIPOS DE MICROSCOPA O DE MICROSCOPIOS PTICOS

Microscopa electrnica o microscopio de campo claro: El campo aparece todo


iluminado, si hay alguna partcula la veremos oscura sobre el fondo. Siempre hay que
hacerla en condiciones de poca luz.

Microscopa electrnica o microscopio de campo oscuro: Pasa todo lo contrario que


en la de campo claro, lo observaremos todo oscuro menos los microorganismos, que se
encontrarn iluminados. Se debe a que el condensador hace que los rayos de luz
entren de forma inclinada.

Microscopa o microscopio de contraste de fases: Cuando un rayo de luz atraviesa una


clula, se refracta, pero esta desviacin depende del material que est atravesando, en
funcin de la estructura intracelular, los rayos se desvan ms o menos. Sirve para
distinguir detalles intracelulares.

Microscopa o microscopio de luz ultravioleta: El espectro de emisin del UV est por


debajo del visible y tiene una longitud de onda ms pequea, y por lo tanto, ms
energa, ms poder de resolucin, y por tanto, ms calidad de la imagen. La ventaja
ms importante en la microscopa ultravioleta es que el poder de resolucin es mejor,
ya que la longitud de onda es ms pequea. Sin embargo, tiene inconvenientes, la luz
ultravioleta no traspasa el vidrio, por eso se emplean lentes de cuarzo que son ms
caras; y otro inconveniente es que estamos fuera de la regin visible y no podemos ver
la imagen. El microscopio debe tener un sistema de tipo fotografa o pantalla de
televisin que transforme la imagen.

Microscopa o microscopio de fluorescencia: Que una sustancia sea fluorescente


significa que absorba luz ultravioleta debido a sus caractersticas qumicas, y emite luz
visible (de mayor longitud de onda pero menos energa). Esta microscopa evita los
inconvenientes de la microscopa ultravioleta pero obliga a emplear sustancias
fluorescentes, o fluorocromos. Una aplicacin muy importante est como tcnicas de
inmunofluorescencia que se basa en el empleo de anticuerpos inmunofluorescentes,
cuando el fluorocromo se incorpora al anticuerpo.

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1. OBSERVACIN DE MICROORGANISMOS
-Observacin directa de microorganismos: Este mtodo es muy simple. Consiste en hacer una
suspensin del organismo y colocarla en el portaobjetos. Se observa con un objetivo de 40
aumentos y el ndice de refraccin es del aire. Como los microorganismos estn sin teir, el
80% es agua, por lo tanto, la observacin es difcil de manera que hay que hacerla con poca luz.
Es ms preferible hacer uso de la microscopa de contraste de fases que la de campo claro.
La ventaja es que observamos los organismos vivos y que hay algunas caractersticas que solo
presentan cuando estn vivos. Permite ver el movimiento, tambin permite ver la morfologa
de las bacterias pero es necesario no teir para no modificar la morfologa.
-Observacin de preparaciones teidas: La tincin tiene por objeto aumentar el contraste.
Segn el tipo de tincin encontramos o bien diferencias entre distintos microorganismos o bien
partes de una clula. El inconveniente es que realizar la tincin provoca la muerte del
microorganismo. La observacin mediante la tincin requiere una serie de pasos. Primero se
basa en la fijacin. La fijacin consiste en la desnaturalizacin de las molculas del
microorganismo. Seguidamente va la tincin, luego el lavado de la muestra para eliminar el
exceso de colorante, y luego se puede realizar una decoloracin, y de nuevo una tincin y un
lavado con agua en el caso que se trate de una tincin diferencial. Finalmente, se observa la
muestra con el objetivo de 100x y se utiliza aceite de inmersin para aumentar la calidad de la
observacin.
Un colorante es una sustancia que tiene una composicin qumica que absorbe parte de la luz
visible y muestra el complementario. Tiene afinidad por componentes del microorganismo, es
decir, se tie.
Se clasifican por cargas:

Colorantes bsicos o catinicos, o de carga positiva, se combinan con aquellas


estructuras con carga negativa (cidos nuclicos)
Colorantes cidos o aninicos, o de carga negativa.

Cada colorante utiliza una concentracin determinada y diferente tiempo de actuacin.


Dos tipos de tinciones:

Tincin simple: Se utiliza un solo colorante. Nos da poca informacin, tamao,


morfologa y la distribucin (aislados o agrupados).

Tincin diferencial: Se utiliza ms de un colorante. Permite diferenciar distintos


microorganismos y diferentes partes celulares, unos se quedan teidos de un color y
otros se quedan teidos de otro color. Entre las dos coloraciones se intercala una etapa
de decoloracin.

Dentro de la tincin diferencial encontramos:

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-Tincin de Gram: Es probablemente la tincin ms importante en microbiologa y en


bacteriologa. Sirve para clasificar las bacterias, segn como se tia, como Gram positivas
(violeta o azul) o Gram negativas (rosa o rojo).
Consiste en el mismo procedimiento de tincin: Se coloca un colorante que suele ser violeta,
luego se aade lugol (yodo+yoduro) que no es un colorante, sirve para retener el colorante
violeta. A continuacin, se lava y los microorganismos se encontrarn todos teidos de violeta.
La decoloracin con etanol es el siguiente paso, que se aade durante unos 30 segundos.
En estas condiciones las bacterias Gram negativas extraen el decolorante (se decoloran debido
a que el colorante afecta a su membrana externa, no a su murena, entonces el etanol disuelve
esa membrana externa, dejando a la bacteria sin el color violeta. Las Gram positivas siguen con
el colorante aun habiendo echado el etanol, aunque se pueden decolorar si las dejamos ms
de 30 segundos. Despus se tie con fursiva diluida o safranina (rosa) que teir nicamente
las Gram negativas, entonces se realiza el lavado y se mira al microscopio.
El carcter Gram positivo o Gram negativo va ligado a las paredes celulares. Las bacterias
tienen dos tipos de pared celular, las de Gram positiva que resisten a la decoloracin, y las
Gram negativas no resisten a la decoloracin. Este tipo de tincin hay que hacerlo con un
cultivo joven, viejo no puede ser ya que la pared celular se puede deteriorar.
-Tincin de cido alcohol resistencia (AAR). Se tie primero con un colorante, luego con un
segundo pero la decoloracin se utiliza con una mezcla de alcohol con cido clorhdrico. Se
decoloran todas las bacterias menos unas en concreto que pertenecen al gnero
mycobacterium, que son resistentes a la decoloracin del alcohol con cido clorhdrico ya que
no tienen pared celular. Esta tincin tiene valor diagnstico. Las micobacterias tienen un
elevado contenido en grasas, y esto hace que sean unas bacterias difciles de teir, al tener una
parte hidrfoba. Cuando en condiciones muy potentes conseguimos teirlas, son muy difciles
de destruir, solo con elevadas temperaturas.
-

Otras tinciones:

-La tincin de esporas: Se utiliza en gneros Bacillus y Clostridium. Las esporas se forman
dentro de la bacteria. El colorante entrar en la espora y por lo tanto dentro de la bacteria.
Pero cuando se lava con agua, el colorante se elimina de las bacterias pero no de las esporas.
-La tincin negativa (campo oscuro): Se utiliza un colorante llamado nigrosina que tiene la
caracterstica de no tener afinidad por los microorganismos. En un portaobjetos, cerca de un
extremo se coloca la suspensin del microorganismo y al lado o encima se coloca una gota de
nigrosina. A continuacin se hace una extensin con un portaobjetos, lo desplazamos en la
superficie y la mancha se extiende por toda la superficie. Lo que se pretende obtener con la
extensin es que el colorante se quede en una lmina muy fina y as los microorganismos no lo
tapan, entonces saldr al microscopio un fondo oscuro y los microorganismos iluminados. Es
muy til para la observacin de cpsulas.

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2. CONCEPTO DE MICROORGANISMOS PUROS
El microbilogo tiene la necesidad de trabajar con poblaciones de microorganismos iguales, un
cultivo puro es una poblacin inmensa de microorganismos, pero que son todos iguales. Para
estar seguros de que son idnticos si esa poblacin se origina, se genera a partir de un
microorganismo inicial. El cultivo puro es una necesidad en microbiologa, siempre hay que
trabajar con cultivos puros.
En la naturaleza no hay cultivos puros de microorganismos, son poblaciones mixtas, salvo casos
excepcionales como en una persona enferma. El cultivo puro es un estado artificial de
laboratorio.
Para obtener los cultivos puros hay dos etapas:

La primera es separar el microorganismo que nos interesa del resto.


La segunda es hacer el cultivo.

Los microorganismos estn por todos lados, por lo tanto los cultivos puros se pueden
contaminar, cosa que no se puede permitir. Por ese motivo cualquier material a utilizar para
manipular organismos puros debe ser estril, con unas condiciones tales que eviten la
contaminacin del material.
Una herramienta es el asa de siembra. La parte final se coloca en la llama de un mechero para
esterilizar el material. Trabajar bien implica no contaminar la muestra ni el propio laboratorio.

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3. MTODOS DE OBTENCIN DE CULTIVOS PUROS
-Siembra de placa en estra y superficie: Es el ms simple y utilizado. Normalmente se emplea
el asa de siembra, consiste en coger la muestra y sembrarla en una placa petri con un medio de
cultivo, colocndolo en paralelo haciendo un movimiento de zigzag. A continuacin se flamea
el asa de siembra para esterilizarla, y posteriormente, sembrar la otra parte de la placa tocando
la muestra para arrastrar los microorganismos e ir aislndolos. Se denomina el mtodo de los
tres giros, de manera que se llega a obtener colonias aisladas, donde cada una es un cultivo
puro.

Despus de un tiempo se observan puntos, que se van haciendo cada vez ms grandes, siendo
las colonias que se van generando.
-Extensin por la superficie: Se llena toda la superficie de la placa de medio de
microorganismos. Se vuelca la muestra, y se extiende con una barrilla de vidrio o metal,
pasndola por todas las direcciones, con lo cual, conseguimos que la muestra est distribuida
de forma homognea. El problema que tiene es que hay que hacer diluciones hasta que se
obtengan colonias aisladas, con lo cual es algo lioso.
Estos mtodos son muy comunes cuando estamos delante de una muestra con
microorganismos mayoritarios, pero si necesitamos cultivos puros de microorganismos
minoritarios estas tcnicas no son eficientes. Para ello, son necesarios otros mtodos:
-Enriquecimiento del microorganismo: Para conseguir un aumento de la cantidad de
microorganismos minoritarios vamos a realizar un cultivo en un medio donde las
condiciones sean favorables para el microorganismo minoritario. Cuando hayamos
conseguido aumentar las proporciones del microorganismo minoritario (siendo ahora
mayoritario) podremos utilizar uno de los mtodos anteriores. Para poder realizar este
mtodo es necesario conocer con exactitud cules son las condiciones favorables para
el microorganismo minoritario.
-Aislamiento directo de un microorganismo: Cuando cojo una colonia, indirectamente
cojo un microorganismo, esto se hace en el micromanipulador. Debo poner todos los
nutrientes que necesita. Muchos microorganismos se pueden cultivar artificialmente,
pero en la naturaleza hay microorganismos que no son cultivables artificialmente.
Otra observacin es que hay microorganismos que son imposibles de cultivar sin clulas
presentes, un ejemplo son las rickettsias, bacterias patgenas que parasitan

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intracelularmente. Cultivarla en medios artificialmente no se puede, hay que ponerle una
clula. Lo mismo pasa con los virus, no crecen si no tienen una clula en la que parasitar.

4. CARACTERSTICAS OBSERVABLES EN LOS CULTIVOS PUROS


En medio slido:

1.

Tamao de la colonia.

2.

Borde o margen de la colonia: Pueden ser lisas o rugosas.

3.

Textura o consistencia: Colonias mucosas o secas. Las colonias mucosas son aquellas
que al cogerlas con el asa de siembra tienen adherido una sustancia viscosa. En las
colonias secas no se pueden coger con el asa de siembra.

4.

Altura: Colonias convexas o planas.

5.

ptica: Colonias opacas o translucidas.

6.

Pigmentacin: Algunas bacterias tienen la capacidad de sintetizar pigmentos que


pueden difundirse en el medio o quedarse dentro (pigmento no difusible) por lo que el
pigmento difusible queda coloreado el medio y los no difusibles quedan coloreadas el
microorganismo. La produccin de pigmentos est ligada a factores ambientales, por
normal general, los pigmentos se suelen observar mejor en medios slidos.
Ej: Micrococcus luteus tiene un color amarillo no difusibles. Straphylococcus aureus,
pigmento amarillento no difusible. Serratia marcesiens, pigmento rojo no difusible.
Pseudomonas aeruginosas o pseudomonas fluerescens producen un pigmento verdeamarillento difusible.

En medio lquido:

1.

Turbidez del medio: A mayor cantidad de bacterias, ms turbio ser el medio lquido.

2.

Distribucin del cultivo: Crecimiento homogneo o heterogenia. Si los microorganismos


estn distribuidos por todo el medio es un crecimiento homogneo; si se distribuye
solo en una zona es un crecimiento heterogenia.

3.

Olor: Amplia variedad de olores, muchas enterobacterias tienen un olor fecal. Otros
microorganismos como la sachnomyes cerevisine tienen un olor agradable.

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5. MTODOS DE CONSERVACIN DE MEDIOS PUROS
El mtodo de la conservacin debe mantener intactas las caractersticas del microorganismo.
No existe ningn mejor mtodo, cada microorganismo tiene su mtodo ms adecuado para su
conservacin.
I.

Resiembra peridica: A partir de un cultivo puro siembro el microorganismo, lo


dejo incubar y volver a repetir el mismo proceso. Este mtodo depende de la vida
del microorganismo. Si es poco resistente, se debe realizar ms veces una
resiembra que de un microorganismo de ms resistente.

II.

Cubrir el medio slido con aceite mineral esterilizado: Se suele realizar en tubos
de ensayo con agar slido inclinado. Al aadir una capa de aceite evitamos que se
mezcle con el medio y protege al organismo del oxgeno (reaccin de oxidacin) y
la desecacin y se deja en una cmara fra hasta 4C.

III.

Liofilizacin: Este mtodo es esencial para preservar las caractersticas del cultivo
puro. Se trata de la congelacin del producto y la posterior introduccin en una
cmara de vaco para realizar la separacin del agua por sublimacin. Se elimina el
agua desde el estado slido al gaseoso sin pasar por el estado lquido (a baja
presin y temperatura). En el vaco, a -80C, el agua pasa de estado slido a vapor
mediante un aparato llamado liofilizador. Se consigue eliminar prcticamente la
totalidad del agua libre contenida en el producto original, pero preservando la
estructura molecular de la sustancia liofilizada. As, los microorganismos son
viables durante dcadas.

IV.

Guardar las suspensin del microorganismo mediante congelacin: Se guarda el


microorganismo a bajas temperaturas (-80C, -20C). Se sumerge el
microorganismo en nitrgeno lquido (-196C). El principal problema es que si la
congelacin se hace lentamente se forman cristales de hielo y pueden romperse,
daarse o destruirse estructuras celulares. El dimetilsulfxido (DMSO) se conservan
los virus. Es una sustancia crioprotectora.

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TEMA 3

ESTRUCTURA BACTERIANA
La estructura de una bacteria es muy parecida a la de una arquea.
1. MORFOLOGA DE LAS BACTERIAS
Normalmente cada especie de bacteria tiene su morfologa definida, excepto casos
particulares que se llaman bacterias pleomrficas (que no tienen forma definida, tienen
formas ms o menos irregulares, todas parecidas pero no siguen un patrn). Tambin la
morfologa puede variar un poco en funcin de las condiciones de cultivo, sobre todo en lo que
se refiere al tamao de la bacteria (en condiciones ptimas tienen un tamao y en no ptimas
otros).
Las bacterias tienen morfologa definida, y bsicamente tienen dos formas principales:
-Bacterias esfricas: Cocos
-Bacterias alargadas: Bacilos: Hay bacilos cortos y largos. En algunos casos los bacilos son muy
cortos y al verlos al microscopio se puede dudar. A veces, para definir estos bacilos cortos se
emplea el trmino cocobacilo.
Estas son las formas ms frecuentes, aunque hay otras:
-Espirilos: Helicoidales.
Espiroquetas: Bacterias finas y muy largas que estn enrolladas en espiral.
-En forma de rin.
Vibriones: Bacilos curvados.
Despus tenemos otras formas an menos frecuentes:
-Bacterias muy alargadas.
-Bacterias con extensiones o apndices.

Tambin existen otros aspectos que definen a las bacterias, como el tamao:
Sabemos que el tamao es microscpico, pero podemos encontrar bacterias de diferentes
tamaos. La mayor parte de las bacterias tienen un tamao entre 0.5 -2 micras. Aunque hay
bacterias ms pequeas, que pueden tener un cuarto de micra. No obstante, hay bacterias
ms grandes.
Los virus son muy simples y tienen un tamao mucho ms pequeo que las bacterias. Por otro
lado, tenemos el resto de microorganismos, microorganismos eucariotas, que en general son
de mayor tamao, puesto que son clulas eucariotas y tienen compartimientos extracelulares
(ncleo, mitocondria, aparato de Golgi).

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2. AGRUPACIONES QUEE PUEDE PRESENTAR UNA BACTERIA
Una bacteria se divide por biparticin,
biparticin dando lugar a dos bacterias. Despus de cada divisin,
divisin
las clulass pueden quedar independientes o en funcin de la especie pueden quedar unidas.
unidas
En el caso de los cocos, se pueden dar distintas agrupaciones, puesto que al ser esfricos se
pueden dividir en cualquier plano.
plano La agrupacin
n ms simple son los cocos aislados.
El siguiente grado sera
a cuando se dividen que quedan unidos por parejas (diplococos
diplococos). Cuando
este fenmeno se hace ms marcado, siempre quedan unidos despus de la divisin,
hablamos de cadenas de cocos (estreptococos).
(
Tenemos ms posibilidades:
Cuando el coco se divide en dos unidades perpendiculares
perpendiculares tendremos grupos de cuatro
(ttradas). Cuando
uando los cuatros cocos originados se dividen perpendicularmente se quedaran
otras cuatro clulas llamndose sarcinas o simplemente octetos. Por ltimo,, cuando los cocos
se dividen irregularmente y quedan todos
tod unidos, entonces tenemos unas agrupaciones
irregulares, llamndose estafilococos.
estafilococos
Si pasamos a los bacilos, la situacin es mucho ms simple:
Los bacilos al ser formas alargadas, cuando se dividen siempre se dividen de forma ecuatorial.
Podemos
demos tener bacilos individuales,
individuales diplobacilos (unidos de dos en dos), o estreptobacilos
(unidos en tres).

Componentes dentro de la membrana plasmtica: Ribosomas, material gentico (ADN


cromosomal o extracromosomal), cuerpos de infusin (Que
( ue nunca son orgnulos, sino que son
sustancias que se acumulan dentro del citoplasma).

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Por fuera de la membrana plasmtica
lasmtica aparece la pared celular (estructura rgida
gida que rodea por
fuera la membrana plasmtica
tica y responsable de la morfologa de la clula). Prcticamente
todas las bacterias presentan pared celular.
Hay
ay algunas bacterias que presentan la cpsula.
A parte de estas, tambin pueden presentar estructuras alargadas:
-Numerosas y cortas (fimbrias
as).
-Menos numerosas y largas (pelos
pelos y flagelos).

3. COMPOSICIN QUMICA DE LAS BACTERIAS


El componente ms importante de las bacterias es
e el agua (75% del peso total). Cuando una
bacteria se seca puede llegar a morir.
Por otro lado contiene peso seco (25%): ADN (3-4 %), ARN (10-20%), Lpidos (10%),
Polisacridos (20%), Y Protenas (50%).
No en todas las bacterias se tienen estos clculos, por ejemplo las que tienen cpsula tendrn
mayor nmero de polisacridos, o las que acumulan sustancias de reservas,, esto modificara el
porcentaje).
*El ARN puede variar bastante porque su cantidad tiene que ver con la velocidad de
crecimiento. El ARN en la clula puede ser muy variado (distintos tipos de ARN), aquella
bacteria que crece
rece rpido necesita mayor cantidad de ribosomas que la que crece ms lento.

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4. ESTRUCTURA DE LAS BACTERIAS
Pared celular: Las
as bacterias tienen dos
d modelos de pared celular: Gram positiva o Gram
negativa. El hecho de que sea positiva o negativa depende de su pared celular.
*No debemos confundirnos con las arqueas,, puesto que tienen una pared celular distinta a las
bacterias y no presentan Gram positiva ni negativa.

Gram positiva:
positiva Su
u pared celular es una estructura homognea, que se ve
uniforme en toda la superficie. Es bastante gruesa (400 A), mientras que la
membrana plasmtica puede medir ms o menos unos 80 A. Rodea a la
clula en toda la superficie.

Los componentes mayoritarios es el peptidoglucano (murena), cadenas que


forman una macromolcula que rodea completamente a la bacteria, siendo
responsable de la morfologa y de la resistencia. Aparte de la murena puede haber
protenas asociadas. Otro componente importante son los cidos teicoicos, que
son unos polmeros que estn a nivel
nivel de la pared celular unidos a la murena

acromolcula que forma una coraza que envuelve a toda la pared


p
celular,
Peptidoglucano: Macromolcula
de modo que la clula tiene la forma que tiene la murena.
murena Por lo tanto,, su funcin es
morfolgica.
Est formado por dos partes: Una
U parte polisacardica (parte
arte que se une al glucano), y otra
polipeptdica (formada por aminocidos
minocidos). La parte polisacardica est formada por cadenas
bastante largas formadas a su vez por la alternancia de dos azucares N-acetilglucosamina
N acetilglucosamina
(NAG), N-acetilmuramico
acetilmuramico (NAM).
(NAM) Ambos son monosacridos derivados
erivados de la glucosa (hexosa),
(hexosa)
que presentan
ntan 6 tomos de carbono.
Estos dos azcares estn
tn unidos por enlaces beta 1-4,
1 , alternndose y formando cadenas
polisacridas largas: NAM-NAG
NAG-NAM-NAG-NAM-NAG En cuanto a la parte polipeptdica,
poli
est
formada por cuatro aminocidos
minocidos (L-Ala,
(L
D-GluNH2, L-Lys y D-Ala)
Ala) formando un tetrapptido. El
cuarto aminocido tiene el grupo carboxilo
carboxi libre, y el tercero tiene en la cadena lateral un
grupo amino extra,, entonces se forma un puente peptdico. En microbiologa siempre
encontraremos los aminocidos
minocidos en forma L, pero en el tetrapptido tenemos aminocidos
a
en
forma D.
*Glucotetrapptido
El componente ms importante de la
pared celular es el peptidoglucano
(murena).

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Gram negativa:
negativ La pared celular
elular es ms fina y ms complicada porque
presenta
ta varias capas. Tenemos la membrana plasmtica,
plasmtica, membrana
mem
externa
(que solo est en Gram negativas), y entre las dos membranas
branas existe el
periplasma o espacio periplsmico. La capa dee murena aqu es mucho ms
fina (20 A), no obstante,
obstante la funcin es la misma.

5. MODELO DE PARED CELULAR DE LAS GRAM


5.1 GRAM POSITIVAS
El enlace entre las cadenas distintas se realiza por un puente peptdico de 4 o 5 aminocidos
que une el cuarto aminocido de un tetrapptido con el tercer aminocido de otra cadena de
tetrapptidos. El cuarto aminocido, al ser el ltimo tiene el grupo carboxilo
carboxi terminal libre y es
por donde se une a la otra cadena.

Estos enlaces no se forman al 100% pero en Gram positivos la frecuencia es muy elevada.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


El otro componente que forma parte de las paredes son los cidos teicoicos, son polmeros
cidos de polialcoholes. Son derivados de dos alcoholes, del glicerol (3C con OH en todos) y del
ribitol (5C con OH en todos).
El enlace que une las cadenas de alcoholes se da entre los hidrxidos de los extremos,
formando enlaces fosfodister, el mismo enlace presente en los cidos nuclicos. Estos cidos
teicoicos estn dentro de la murena, y son antignicos. Tambin actan regulando o
controlando la biosntesis de murena.
Los dems grupos hidroxilos de las cadenas de alcoholes, como no estn en los extremos,
pueden unirse a distintas cadenas, como por ejemplo, a diferentes aminocidos.
Hay un grupo denominado cidos lipoteicoicos, que en un extremo est unido a una cadena
lipdica que est a su vez anclada a la membrana lipdica.

5.2 GRAM NEGATIVAS


La capa es mucho ms fina, est formada por muchas menos capas de polisacridos.
La estructura de la murena es parecida a las de Gram positiva, formada por cadenas
polisacridas unidas por enlaces beta 1-4.
Aqu la unin entre el cuarto aminocido entre una cadena polipeptdica y el tercer
aminocido de otra cadena es directa. (Puentes disulfuro).
La funcin de la murena en Gram positivos y Gram negativos es la misma, constituye la
estructura de la pared celular. Por fuera de la murena existe otra estructura denominada
membrana externa, solo se encuentra en las Gram negativas. Est formada por una bicapa
lipdica y otros tres componentes que son:
Protenas: Las ms importantes son las porinas, que actan como poros que permiten
el paso de molculas pequeas, cada tipo de porina solo deja pasar un grupo de
molculas, son semiespecficas.
Lipoprotenas: Situadas entre la murena y la membrana externa, unidas por la parte
proteica a la murena y la capa lipdica se une a la membrana externa.

Lipopolisacrido: Puede dividirse en dos partes, una parte lipdica y otra parte
polisacardica. Sin embargo, en la parte polisacardica hay dos partes, el antgeno O, y
el ncleo interno. El ncleo interno sirve de puente entre la parte lipdica y el antgeno
O. El antgeno O, es una molcula antignica (En las Gram positivas son los cidos
teicoicos) y es especfica de especies.

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El lipopolisacrido tambin se le conoce con el nombre de endotoxina,, ya que es una molcula
txica, la responsable de aumentar la temperatura y desencadenar procesos inflamatorios en
los seres vivos. La bacteria
teria sintetiza una protena txica y la secreta fuera, entonces pasa a ser
una exotoxina. El carcter txico del lipopolisacrido radica en el lpido A.. La presencia de la
membrana externa le da unas caractersticas funcionales.
funcionales La superficie de la bacteria que
interacciona con el exterior es como si estuviese forrada de azcares, por ese motivo les
confiere resistencia a agentes (antibiticos, colorantes, desinfectantes) que solo pueden
atravesar la bicapa lipdica, pero no la membrana
membrana externa que est llena de polisacridos.

En las Gram negativas tambin encontramos el espacio periplsmico, que est entre la
murena y la membrana externa, hay cationes bivalentes, enzimas hidrolticos,
hidrolticos protenas
implicadas en la captacin de nutrientes,
nutri
etc

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6. FUNCIN DE LA PARED CELULAR
La murena es una estructura semirrgida que confiere proteccin a la bacteria,
bacteria sobretodo de la
lisis en medios hipotnicos, tambin tiene funcin morfolgica (la bacteria tiene la misma
forma que la murena).
La murena se puede destruir de dos maneras, mediante un enzima, la lisozima;
lisozima o con algunos
antibiticos (como la penicilina) que impiden la sntesis o degradan la murena. Si se destruye
la murena de una bacteria, en un medio hipotnico entra agua y provoca la lisis de la bacteria,
en cambio sii estn en un medio isotnico y aplicamos el tratamiento con lisozima, la clula
adquiere
iere la forma esfrica que tiene sin la murena, solo sale el protoplasto (clula desnuda).
desnuda)
7. BIOSNTESIS DE LA MURENA
Es un proceso muy complicado, hay que tener en cuenta lo siguiente:
La biosntesis empieza en el citosol y se forman cadenas polisacardicas
polisacardicas con los aminocidos
pero acaba en la matriz extracelular. Para poder atravesar la bicapa lipdica,
lipdica los aminocidos se
unen a un lpido en la membrana que es el encargado de transportar las cadenas hacia fuera
de la clula. Una vez fuera de la clula comienza
comienza la formacin de los enlaces entre las cadenas,
esa formacin del enlace se denomina transpeptidacin.
Durante el crecimiento de una bacteria se produce la biosntesis de murena, la pared celular
tiene que crecer tambin.. Hay un equilibrio entre biosntesis
biosntesis y degradacin que permite que
aun siendo una
na estructura rgida sea lo suficientemente
suficientemente plstica y flexible. La degradacin la
llevan a cabo unas enzimas denominadas autolisinas,
s, de manera suave y ordenada, y por esos
sitios donde se degrada se incorporan
incor
cadenas nuevas. La pared celular, en concreto, la
murena, es un diana ideal para la actuacin de quimioterpicos antibacterianos (sustancia
utilizada para curar infecciones). Se pueden suministrar por va interna ya que son txicos para
las bacteriass pero no para nosotros. Una bacteria que no crece, no tiene biosntesis
biosn
de
murena. La penicilina rompe el equilibrio entre biosntesis y degradacin, solo hace que se
produzca la degradacin.
Las arqueas es un grupo de microorganismos procariotas, con una pared celular distinta a las
bacterias, no tienen murena.

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8. CPSULA BACTERIANA
Las capsulas bacteriana son unas estructuras que no las tienen todas las bacterias. Formadas
por un material que la bacteria origina fuera de la clula, son unas estructuras bastante
grandes, incluso hay bacterias englobadas por una capsula. Segn el grado de compactacin,
cuando la cpsula es ms o menos consistente y el borde est definido, entonces hablamos
propiamente de cpsula. Pero hay casos en los que el material est difuminado, no se sale
dnde empieza y dnde acaba, entonces se habla de capa de mucosas.
Hay algunas bacterias que tienen cpsulas polisacardicas o peptdicas (hay excepciones como
los gneros de Bacilus). Cada especie tiene una composicin definida, y segn ella, hay dos
tipos de cpsulas: Homopolisacardicas (polmero formado por una subunidad concreta)
Heteropolisacardicas (polmero formado por distintas subunidades de azcares).
Funciones: Al envolver por fuera la clula, tiene funcin protectora. La protege de la
desecacin, de la infeccin de fagos, etc Los anticuerpos no reconocen los antgenos si estos
estn tapados por la capsula. Acta como factor de adhesin a las mucosas de las clulas del
hospedador: Para que una bacteria invada nuestro organismo, la infeccin puede quedar a
nivel superficial, pero siempre la etapa inicial debe actuar con mucosa, y tiene que poder
adherirse a los epitelios o mucosas y prolifera y se genera la infeccin. Cpsula como factor de
virulencia.
No es una estructura vital para la bacteria, no la necesita para vivir, solo le hace falta a la
bacteria cuando esta infectando, en un cultivo del laboratorio no le da ninguna ventaja, y
crecen perfectamente.
9. FIMBRIAS, PELOS Y FLAGELOS
Estructuras filamentosas que podemos encontrar en las bacterias, nacen en la superficie de la
clula y se extienden hacia el exterior.

Fimbrias: Son cortas y muy numerosas. Son de naturaleza proteica. Su funcin


es adherirse a las mucosas de nuestro organismo y as poder infectar. Son
antignicas, pueden generar anticuerpos.

Pelos: Son ms gruesos y ms largos, pero menos numerosos que las fimbrias.
Son de naturaleza proteica. No son responsables de la movilidad de las clulas,
tienen como funciones la adhesin y el reconocimiento de bacterifagos. El
pelo sexual (la pili) permite un proceso de intercambio de material gentico
denominado conjugacin bacteriana.

Flagelos: Bastante ms finos y largos. La funcin del flagelo es dotar a la


bacteria del movimiento. Casi todas las bacterias mviles tienen flagelos,
menos las espiroquetas, que su movilidad se debe a otro mecanismo distinto.

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Cada especie bacteriana tiene una distribucin de flagelos que caracteriza dicha especie.
Distribucin atrica (no tiene flagelos, es inmvil), monotrica (un flagelo en un extremo o
lateral) y politricas (ms de un flagelo),
flagelo y a su vez lofotricas (varios
arios flagelos en un extremo),
anfitricas (flagelos
lagelos en los dos extremos), peritricas (por todo el cuerpo). No se ven por
microscopio ptico.
Los flagelos estn firmemente anclados a la clula, al cuerpo basal, y su parte ms externa est
formado por protenas, por una subunidad que se repite, es la flagelina y forma una estructura
helicoidal. Hay una estructura intermedia que se denomina gancho,, que sirve de puente o
unin entre el cuerpo basal cilindro central que atraviesa las distintas capas de la pared y
membrana a travs de cuatro anillos y el flagelo.
Se denomina anillo L a un polisacrido que hay a nivel celular, un anillo P est anclado en el
interior de la murena, y el anillo MS est a nivel de la membrana plasmtica. Los dos anillos
estos estn unidos por unas protenas que constituyen el motor del flagelo.
flagelo. El flagelo est en
contacto con el citosol y la membrana plasmtica, y el cuerpo basal a la bacteria, la murena es
importante para el movimiento.
movimiento Todo est hecho a base de protenas.
Movimiento: El flagelo se mueve como un motor a propulsin, gira como una hlice y al girar
se desplaza. Consume energa, entonces hay un potencial de membrana, un bombeo de
protones de fuera a dentro, ya que fuera hay demasiada cantidad de protones, en cambio,
cambio en
el interior no.

Movimiento anrquico (la bacteria


acteria da vueltas) y rpido: Las bacterias pueden responder a
estmulos externos con movimientos orientados: Taxis. El quimiotaxis es la respuesta a los
cambios en los estmulos. La bacteria detecta en una zona de su hbitat un nutriente, entonces
se desplaza hacia l.
Las bacterias con varios flagelos, estos flagelos tienen que moverse coordinadamente para
permitir el desplazamiento de la bacteria.
La flagelina es una protena, y por lo tanto, un antgeno.

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10. MEMBRANA PLASMTICA
Se encuentra por debajo de la pared celular, es una estructura que est presente en todas las
bacterias y clulas vivas, es fundamental
fundamenta para cualquier clula,, de lo contrario no sera viable.
Su funcin principal es la permeabilidad selectiva.
selectiva La estructura delimita el interior de la clula
con el exterior. Si deja de controlar los cambios de sustancias deja de ser viable.
viable
Modelo del mosaico fluido:: Consiste
Consiste en una bicapa lipdica en la que se encuentran
incrustadas las protenas y dems componentes. Los fosfolpidos
fo
se orientan
tan en forma de
bicapa lipdica. Tiene una regin polar o hidroflica y
otra regin apolar,, con dos cadenas hidrofbicas.
Cada cadena est formada por 14 carbonos.
Hay gran variedad de protenas en la membrana
plasmtica: Una protena transmembrana
ansmembrana o protenas
integrales atravesando la membrana y protenas
perifricas que interaccionan con las integrales y no
se insertan en la membrana lipdica.
lipdica
Una protena muy importante se denomina la ATPasa,, es transmembrana muy compleja, es un
intercambiador de energa,, cambia energa de una forma a otra, a partir de un potencial de
membrana, destruye este potencial
potencia para formar ATP, y al revs. Los otros
tros componentes son los
elementos de la cadena respiratoria.
Otra caracterstica importante es que no tienen esteroles (colesterol), tpicos de las
membranas eucariotas, sin embargo tienen hopanoides,, molculas parecidas a los esteroles
con similar funcin que es la de controlar la fluidez, intercalndose entre
entre medio de la bicapa
lipdica (como el colesterol) restndole fluidez a la bicapa lipdica.
lipdica
Como es una bicapa lipdica, hay pocas molculas que pueden atravesarla, molculas sin carga
o hidrfobas. Para ello la temperatura determina una caracterstica determinante, la fluidez.
Transporte pasivo: Molculas pasan a favor del gradiente de concentracin, sin consumo de
energa. Molculas solubles o carga neta 0.
Transporte activo: Molculas pasan en contra del gradiente de concentracin. Se implica una
protena de canal, de tal forma que se consume energa.
en
Las bacterias modifican la composicin de los fosfolpidos de la membrana para adaptarse a los
cambios de temperatura.
Las micoplasmas no tienen pared celular, necesitan unas membranas muy resistentes, es por
eso que estas bacterias s que tienen esteroles
e
en la membrana.
Las arqueas no tienen fosfolpidos,
fosfolpidos, tienen lpidos derivados del isopreno o isoprenoides, y
adems estos lpidos pueden tener bicapas o formar una monocapa en la que los dos extremos
de los lpidos son hidroflicos.

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11. RIBOSOMAS
El ribosoma es una estructura muy numerosa, una bacteria es un saco repleto de ribosomas.
ribosomas
Tiene dos subunidades, una grande y otra pequea. El ribosoma procariota (bacterias y
arqueas) se dice que es un ribosoma 70s,
70s y el ribosoma eucariota es 80s.. El 80s o 70s es el
coeficiente de sedimentacin, es decir, la velocidad en la que tarda en sedimentar tras una
centrifugacin.
Estn formados por ARN ribosomal, y la principal funcin es la sntesis de protenas
(traduccin).
). El ribosoma codifica los genes, a partir
partir de una secuencia de nucletidos forma
una secuencia de aminocidos.
El ARN-mensajero
mensajero es una molcula muy fina y larga, de tal forma que puede estar siendo
traducido por muchos ribosomas a la vez.
Si tenemos una molcula de ARNm 5-3,
5
en bacterias el ribosoma reconoce directamente el
sitio de inicio de la traduccin. El ribosoma no traduce desde el extremo, sino que hay unas
seales que actan como seales de inicio de la traduccin. El ribosoma 70s tiene capacidad
de reconocer dentro del mensajero el inicio de la traduccin, hasta que llega a una seal de
stop, y se separa. Se traducen protenas diferentes, situadas dentro del mismo mensajero. Es
tpico de bacterias,, se debe a que dentro de un mismo mensajero hay distintas regiones que se
codifican paraa protena como inicio y final de la traduccin.
traduccin. Esto en la clula eucariota no
sucede.
En un mensajero eucariota, 5-3,
5 3, en el ARNm hay un punto de iniciacin cerca del extremo,
pero el ribosoma se engancha en la regin 5 y a partir de ah se desplaza sin
sin traducir nada
hasta que reconoce la seal del inicio de la traduccin,
traduccin y traduce hasta que llega a la seal de
stop. Solo tiene una regin codificante. Las bacterias tienen ms regiones codificantes.
codificantes
Estamos hablando de ribosomas 70s de las bacterias, y 80s de las eucariotas. Sin embargo, las
arqueas tienen 70s, ya que son parecidas a las bacterias estructuralmente, pero
funcionalmente se parecen ms a las 80s. Los antibiticos afectan a las 70s de las bacterias
como la estreptomicina.. En las arqueas no afecta.

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12. CROMOSOMA BACTERIANO
El ADN no est separado del resto de orgnulos, sino que est disperso por el citoplasma. Lo
que ocurre es que cuando se tie de colorantes, se tie una regin central denominada
nucleoide, que es donde se encuentra dicho cromosoma.
Caractersticas:
A nivel de estructura molecular fina: La doble hlice, dos cadenas de ADN
complementarias. Secuencia de nucletidos que tienen la secuencia ribosa-fosfatoribosa-fosfato y en la ribosa se encuentra la base nitrogenada.
Estas cadenas tienen una orientacin, ya que la ribosa tiene 5 tomos de carbono, el
carbono 3 se une al fosfato del siguiente nucletido, y el carbono 5 al fosfato del
anterior nucletido. El ADN es bicatenario. La cadena complementaria es antiparalela.
Es una estructura cerrada y muy ordenada, tambin es fina pero muy larga, ya que
tiene millones de nucletidos, por eso se encuentra superenrrollada.
Es una estructura ordenada, sin histonas, que tienen carga negativa y se estabiliza
unindose a protenas que no son histonas y tienen carga positiva, como las
poliaminas. En la parte central tiene una protena que es el ARN polimerasa, la cual se
encarga de sintetizar ARNm a partir del ADN (transcripcin).
La ADN polimerasa es la que sintetiza ADN, esa protena es un ejemplo de protena
que se expresa siempre en la bacteria.
La etapa ms importante de la etapa de expresin de los genes es la transcripcin. Los
genes pueden variar en funcin de las condiciones, los genes que siempre se expresan
son los genes de expresin constitutiva.
Para que se d la transcripcin, debe haber una replicacin del ADN.
Caractersticas ms importantes de la replicacin:
A partir de un cromosoma, aparecen dos. Aparece en un punto concreto del
cromosoma. La primera etapa es la desestructuracin: Se trata de separar las dos
hebras creando la horquilla de replicacin, eliminando la estructura de
superenrrollamiento para que sean monocatenarias y pueda actuar la ADN
polimerasa.
Es bidireccional, empieza en un punto y va avanzando en las dos direcciones, tambin
es semiconservativa, una cadena se conserva y la otra es nueva.
La ADN polimerasa solo acta en una direccin 3-5 y se sintetiza la complementaria
de 5 a 3.

Es una explicacin muy compleja, una manera de explicar el proceso sera la siguiente:
Cada 20 min la poblacin se duplica, pero al cromosoma le cuesta 35 min replicarse. Esto es
posible porque la frecuencia de llegada la establece la de salida. Si una clula se divide cada 20
min, cada 20 min empieza a replicarse un cromosoma, antes de acabar un ciclo de replicacin
empieza otro. Si la replicacin empieza cada 20 min, cada 20 min acabar una replicacin
como la replicacin es ms larga. Cada 20 min el cromosoma empieza a replicarse.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


En un momento dado tienes un cromosoma que est empezando a replicarse y otro
cromosoma que ya se ha replicado. Entonces cuando la clula se empieza a dividir, el
cromosoma ya est un tiempo replicndose.
La sincronizacin es muy simple, tengo una bacteria con su cromosoma que est unido por un
punto a la membranaa plasmtica, la bacteria empieza a crecer y el cromosoma se replica. El
punto de unin a la membrana tambin se replica, la bacteria va creciendo y esos puntos de
unin van separndose. De manera que cuando acaba la replicacin, los cromosomas estn
separados
ados y luego se forma un tabique.
A parte del cromosoma bacteriano, las bacterias pueden tener informacin gentica
extracromosomal (fuera del cromosoma). Molculas pequeas de ADN bicatenario y cerradas,
que se denominan plsmidos.
plsmidos Los plsmidos le confieren
ren a la bacteria unas caractersticas,
tienen orgenes de replicacin propios y suelen estar en varias copias.

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13. INCLUSIONES CITOPLASMTICAS
Se incluyen unos acmulos de sustancias que forman estructuras dentro del citoplasma
(no son orgnulos). Pueden ser muy variados:
-Sustancias de reserva: Son acmulos de nutrientes que la clula almacena cuando tiene
un exceso de nutrientes. Se acumulan en forma de polmeros insolubles para evitar el
aumento de la concentracin intracelular. Este acmulo es reversible, cuando la bacteria
no tiene suficientes nutrientes puede consumir los nutrientes que almacena. Hay varios
tipos de sustancias de reserva, pero solo definiremos los ms importantes:
Glucgeno: Polmero lineal de glucosa con enlaces 1-4 que forma unos grnulos muy
numerosos de pequeo tamao. Si se tien son visibles con el microscopio, pero por la
microscopa ptica no. Los glucgenos sirven como fuentes de carbono, como fuente
de energa.
Los nutrientes sirven como fuente de energa o para la biosntesis. El glucgeno
cuando es utilizado por la bacteria sirve para degradar la glucosa para la energa o para
la biosntesis.
Grnulos de polo-Beta-Hidroxibutirato: Forma largos polmeros unindose unas a
otras, se une el grupo carboxilo de una molcula al grupo hidroxilo de otra, y el
hidroxilo de esta al carboxilo del anterior. Este polmero se forma cuando la bacteria
tiene un exceso de acetil-CoA que no necesita para la sntesis o para entrar en el ciclo
de Krebs, entonces se sintetiza este polmero. Esta sustancia le sirve de fuente de
carbono y energa.
Grnulos de polifosfato: Estn formados por polmeros de cadenas lineales de
fosfrico o fosfato, se acumulan cuando la bacteria tiene un exceso de ATP. El ATP se
hidroliza (ATP ADP), y uno de los fosfatos que se pierde se acumula en las cadenas
de fosfatos.
Azufre elemental: Hay bacterias que acumulan azufre elemental porque son especiales
para su metabolismo.

- Vacuolas de gas: Acumulan gas, pero son de naturaleza proteica, no son membranas, tiene la
capacidad de que en su interior se acumule gas. Est presente en bacterias acuticas y les sirve
para controlar su densidad.
- Carboxisomas: Es una estructura regular, polidrica, y est formada por protenas. Es la
estructura donde tiene lugar la fijacin del CO2 que es una fuente de carbono inorgnica que
puede sintetizar azcares en plantas. Esto lo realizan las bacterias auttrofas que son capaces
de incorporar el CO2 a la materia orgnica.
- Tambin existen unas estructuras especializadas en la captacin de luz presentes en bacterias
fotosintticas.

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14. ESPORA BACTERIANA
Tambin se denomina endoespora. Son formas de resistencia (no son formas de
multiplicacin) o de supervivencia que se generan dentro de la bacteria.
Cuando una bacteria est en condiciones desfavorables porque le falta algn nutriente o la
temperatura no es la adecuada no pueden esporular.
Solamente unas pocas son capaces de formar esporas, que son las Bacillus y los
Clostridium, ambos son bacilos. Una caracterstica de la esporulacin es que el tamao de
la espora y el sitio donde se genera tienen importancia taxonmica. Tenemos especies en
que la espora se genera en el centro, se denomina espora central. En otras especies la
espora se forma en un extremo, se llama espora terminal. Y en otras no est ni en el
extremo ni en el medio, entonces se llama espora subterminal. En los tres casos, la espora
no es ms grande que el bacilo, la clula no se deforma, entonces la llamamos espora no
deformante. Hay otros casos en los que se deforma y se denomina espora terminal
deformante. Esto es caracterstico de cada especie.
En las tinciones se puede ver la espora fuera de la clula que se asla. La espora es una
forma de vida latente pero que sigue viva. En condiciones en que las formas vegetativas de
la bacteria dejan de funcionar, mueren, las esporas siguen viables y cuando encuentran un
medio en los que crecen se empieza a generar un bacilo. La espora no se multiplica, para
ello tiene que estar en un medio favorable y formar un bacilo que se multiplicara.
Las esporas son resistentes tanto a agentes fsicos como qumicos, son resistentes a las
radiaciones, a la desecacin, que son formas de termoresistencia. La espora es
impermeable a muchas sustancias qumicas, el colorante no tie la espora, tambin resiste
a los desinfectantes. Esto se debe a la estructura y composicin que tiene la espora.
Vamos a ver como es la estructura y la composicin de la espora bacteriana:
La espora bacteriana consta de una serie de capas que no estn presentes en la clula
vegetativa:

La ms externa es el exosporio, capa fina hecha de protenas que envuelven la


espora por fuera, no es demasiado consistente.
Por debajo tenemos la cubierta esporal o cutcula hecha de protenas muy
resistentes mecnicamente y qumicamente, muy rica en puentes disulfuro que so
enlaces covalentes entre residuos de sulfhdrilos presentes en las protenas que
son semejantes a la queratina.
Por debajo esta el crtex o corteza de la espora
que es bastante gruesa formada por murena
modificada o peptidoglucano modificado (no es la
murena a la que estamos acostumbrados).
Por debajo esta el ncleo esporal que es una
celulita en miniatura con murena, membrana y
citoplasma.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


Tiene un bajo contenido en agua entre 10 y 25% del agua de la clula, que es muy viscoso
y concentrado. Es muy abundante el acido dipicolnico que tiene dos grupos carboxilo,
carboxilo y
forma compuestos con el calcio en forma de sal. Este acido est
est en concentraciones
elevadas entre 15 y 20 %.. Esta
sta concentracin le confiere termoresistencia.
termoresistencia
Tienen varias funciones:: Una
Una es proteger al ADN de las radiaciones que afectan mucho a
los cidoss nuclicos, otra funcin es que cuando la espora germina pueden ser utilizados
como nutrientes para germinar.
El metabolismo de la espora es nulo, no consume energa, simplemente resiste, y cuando
est en condiciones favorables, se activa y produce la esporognesis que es la germinacin
de la espora. Al activarse crea la forma vegetativa, se hace ms permeable, entra agua que
hace que se active el metabolismo,
metabolismo, entonces comienza a crecer y dividirse. Estos procesos
son complicados, las bacterias que esporulan
esporulan necesitan muchos genes para codificar las
protenas de este proceso, que es muy complejo.
Dos aspectos relacionados con la esporulacin:
1. Algunas bacterias que esporulan (como Bacillus)) sintetizan antibiticos, se
denominan antibiticos polipeptdicos (no tienen nada que ver con la sntesis proteica).
Estn hechos por la interaccin de varios aminocidos. No se sabe bien que funcin tienen
pero se supone que regulan el proceso de esporulacin
2. En algunas especies de Bacillus, cuando esporulan adems de formarse la espora
forman unas estructuras independientes de la espora, son cuerpos paraesporales.
paraesporales Estn
formados por una protena tienen importancia porque forman un cuerpo esporal cristalino
y esta protena es muy toxica para algunos insectos. La ingieren y la espora se disuelve. Se
utiliza para la lucha biolgica.

MICROBIOLOGA Eric Borrs

DIFERENCIAS (ESPORA Y CLULA VEGETATIVA

CUBIERTAS
REFRINGENCIA
DPA
ACTIVIDAD METABLICA
RESISTENCIA
CAPACIDAD TINTORIAL
AGUA

ESPORA
MUCHAS
MUCHA
SI
POCA
MUCHA
POCA
POCA

CLULA VEGETATIVA
NORMAL
NORMAL
NO
NORMAL
POCA
NORMAL
NORMAL

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TEMA 4

NUTRICIN
Una bacteria crece y se divide, esto se debe porque ocurren en su interior reacciones. Este
conjunto de reacciones que posibilitan el crecimiento y divisin de la bacteria se denomina
metabolismo.
Cuando una bacteria crece se sintetizan todas las estructuras y componentes celulares, es por
eso que las reacciones del metabolismo son rutas de sntesis, es decir, anabolismo. Esta
biosntesis consume energa (ATP). Esto obliga a la clula a hacer otras reacciones de
degradacin de molculas para obtener energa, catabolismo.
En microbiologa daremos las de catabolismo, en bioqumica las de anabolismo.
1. QU ES UN NUTRIENTE?
Los nutrientes son molculas que la bacteria necesita coger del medio y utiliza para rutas del
metabolismo, ya sea rutas anablicas como catablicas. Para que una bacteria crezca debe
tener todos los nutrientes necesarios.
Los requerimientos nutricionales de las bacterias dependen de la composicin qumica del
microorganismo o de la bacteria, y el segundo factor es la capacidad de biosntesis de la
bacteria. Una bacteria requiere los nutrientes que estn en su estructura, al igual que
cualquier clula viva. Todos los aminocidos tienen su ruta de biosntesis.
Las bacterias que tienen una elevada capacidad de biosntesis son poco exigentes
nutricionalmente, ellas se pueden sintetizar los compuestos necesarios. Y viceversa.
NUTRIENTES QUE HAY QUE PONER AL MEDIO DE CULTIVO:
MACRONUTRIENTES:
Si a una clula se le quita el agua se queda un componente seco que es el 70%
aproximadamente.
Del peso seco el 95% son CHONPS, el 5% elementos metlicos como K, Mg, Ca, Na, Fe.
MICRONUTRIENTES:
Cr, Mn, Co, Cu, Mo, Zn.
Tan poca cantidad que no hace falta echarlos al medio cultivo, si esta contaminado.
El agua no solo es el nutriente ms importante sino que es el ms abundante, todos los
nutrientes o casi todos son hidrosolubles, es el medio donde ocurren las actividades
metablicas. Aporta adems H y O se pueden incorporar a las molculas del microorganismo
por relaciones de hidrlisis. Cuando un enlace se rompe se hidroliza, se incorpora una
molcula de agua.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


Hay dos grandes grupos que son:
Fuentes de carbono inorgnico: CO2
Fuente de carbono orgnico: Azcares, cidos grasos, lpidos, aminocidos,
o

NITROGENO:

Molculas o elementos que aportan nitrgeno a los microorganismos. Microorganismos que


utilizan nitrgeno inorgnico como el nitrato (NO3-) o nitrito (NO2-), tambin hay otra fuente
inorgnica de nitrgeno que es el amonio (NH4+).
Tambin hay microorganismos que utilizan el nitrgeno atmosfrico, son las bacterias fijadoras
de nitrgeno, incorporan el nitrgeno atmosfrico.
Las molculas fijadoras de nitrgeno son los aminocidos y, consecuentemente, las protenas
tambin pero las protenas para ser nutrientes se deben degradar en aminocidos y estos ya
son consumidos.
o

AZUFRE:

La fuente as habitual es el sulfato (SO42-) pero algunas utilizan el sulfuro (S2-), tambin hay
fuente de sulfuro orgnica, por ejemplo los aminocidos (la cistena, la metionina).
o

FSFORO

Los fosfatos (PO43-) son la fuente habitual de fsforo.


Hay otra serie de nutrientes que tiene las siguientes caractersticas. Son molculas orgnicas
que hacen falta en muy pequea cantidad pero que con esenciales para la vida, son esenciales
porque son cofactores de reacciones enzimticas, si no estn, se bloquean las reacciones
metablicas, no se pueden sintetizar, un ejemplo muy importante son las vitaminas. Para las
bacterias que pueden sintetizar esa determinada molcula, no sera una vitamina.
Si aslo un microorganismo que no sintetiza la leucina, la leucina no entra en el concepto de
vitamina, ya que se requieren grandes cantidades de leucina para generar protenas.
Factor de crecimiento: Cualquier molcula que la bacteria necesita para crecer y que no puede
sintetizar. Debe estar obligatoriamente en el medio de cultivo. Se necesitan en pequeas
cantidades.
Bacteria o microorganismo prottrofo: Tiene una elevada capacidad de biosntesis. Solo
necesita una fuente de carbono a partir de la cual sintetiza todas las molculas para poder
crecer.
Bacteria o microorganismo auxtrofo: Necesita ms fuentes adems de una fuente de
carbono para poder crecer ya que tiene una baja capacidad de biosntesis. Si la bacteria no
sintetiza leucina, necesita una fuente de carbono y una de leucina.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


2. CLASIFICACIN NUTRICIONAL DE LOS MICROORGANISMOS
Vamos a clasificar a los microorganismos segn cul sea su fuente de energa y su fuente de
carbono para biosntesis (anabolismo).
Segn la fuente primaria de energa: Tenemos dos tipos de microorganismos:

Fottrofos: Obtienen la energa a partir de la luz.


Quimitrofos: Obtienen la energa de la oxidacin de sustancias qumicas. Esta a su
vez depende de si oxidan molculas inorgnicas (littrofos) o molculas orgnicas
(organtrofos).

Segn la fuente de carbono:

Auttrofos Obtienen el carbono del CO2.


Hetertrofos: Obtienen el CO2 a partir de molculas orgnicas.

Las bacterias tienen como clasificacin una clasificacin final de las dos anteriores:
CLASES DE ORGANISMOS SEGN SU TIPO DE NUTRICIN
FOTTROFOS
QUIMITROFOS
LITTROFOS
(Auttrofos)

ORGANTROFOS
(Hetertrofos)

FOTOLITTROFOS
Bacterias fotosintticas del
azufre y todos los vegetales
con clorofila.
FOTOORGANTROFOS
Bacterias purpreas no
sulfurosas

QUIMIOLITTROFOS
Bacterias quimiosintticas

QUIMIOORGANTROFOS
Muchas bacterias, todos los
animales y todos los hongos

Tabla extrada de un libro de biologa

De la combinacin de los dos tipos de clasificacin anteriores, fuente de carbono y segn


obtienen la fuente de energa:
-

Fotoautrtofos: Utilizan la energa de la luz solar para fijar el CO2 (fuente de carbono
materia inorgnica).
Fotohetertrofos: tiene como fuente de energa la luz y, como fuente de carbono, la
materia orgnica.
Quimioauttrofos:
Litoauttrofos: Son los ms abundantes y viven en ecosistemas minerales, en
ausencia de materia orgnica y la energa la obtienen de oxidar molculas
inorgnicas. Tienen un bajo rendimiento y proliferan al no tener competencia.
Organoauttrofos:
Quimiohetertrofos:
Litohetertrofos
Organohetertrofos: Ms abundantes, las mismas molculas sirven para
fuente de carbono y fuente de energa.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


REQUERIMIENTOS FISICOQUMICOS

Para cultivar un microorganismo no solo hacen falta los nutrientes, hacen falta otros
requerimientos fisicoqumicos para que los microorganismos puedan crecer, son varios:
-Presencia de O2

-Presin osmtica

-Temperatura

-pH

-Luz

-CO2

*Se explicar mejor en el prximo tema

3. CLASIFICACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO


Se pueden clasificar segn unos criterios, unos ms importantes que otros.

Segn su origen:

Naturales: Se encuentran en la naturaleza, hoy en da estn en desuso.


Artificiales: Se preparan en el laboratorio, hoy en da todos los medios son artificiales

Segn su estado fsico:

Medios lquidos: Los nutrientes estn disueltos.


Medios slidos: El medio es slido y los nutrientes est disueltos ya que hay agua, lo que pasa
es que tiene una sustancia solidificante, que es el agar, insoluble en agua fra. El agar no puede
ser utilizado por ningn microorganismo, no pueden degradarlo.
Medios semislidos: Simplemente es un medio que tiene menos agar de lo normal.

Segn la composicin:

Medios definidos o sintticos: Medios de los cuales se conoce la composicin cualitativa y


cuantitativa (sabemos que componentes lleva y la composicin de cada uno) estos medios solo
pueden usarse para microorganismos de los cuales conocemos sus requerimientos, ya que son
muy exigentes.
Medios complejos o ricos: No se conoce exactamente la composicin, llevan muchsimos
factores de crecimiento (bases nitrogenadas, aminocidos, vitaminas).

Segn la utilidad:

Medios Selectivos: Es un medio que permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e


inhibe otro. El carcter selectivo del medio se debe a su composicin. La eosina azul de
metileno (EMB) es un medio de cultivo selectivo y diferencial. Inhibe el crecimiento de
bacterias Gram positivas pero no de las Gram negativas y muestra si las Gram negativas que
crecen son o no fermentadoras de lactosa.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


Medios de enriquecimiento: Es un medio rico al que se le aade algn componente para
hacerlo ms rico. En este medio hay bacterias hemolticas que causan la rotura de los glbulos
rojos cuando se enriquece, por ejemplo, el medio con agar sangre. De esta forma, se puede
apreciar alrededor de la bacteria un crculo transparente debido a la rotura de los glbulos
rojos. Lo que nos lleva a diferenciar (el medio es diferencial).
En el medio rico la bacteria minoritaria crece ms que las otras
En el medio de enriquecimiento existen todos aquellos requerimientos nutricionales de
aquellos organismos, hay microorganismos tan sibaritas que no pueden vivir en esos medios,
les falta alguna vitamina para poder vivir, entonces hay que enriquecerlo ms aadiendo
sangre (agar chocolate). En cualquier caso la sangre aporta factores de crecimiento adicionales
que no estaban en el medio original. El agar sangre es un ejemplo de factor indispensable para
el crecimiento de microorganismos exigentes.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


TEMA 5

METABOLISMO
El anabolismo es que a partir de compuestos muy simples se sintetizan componentes, estos
reaccionan entre s, son procesos de biosntesis y son bastante parecidos en todos los seres
vivos.
En el catabolismo se produce ATP que los microorganismos necesitan. El ATP sirve en el
transporte activo de nutrientes, para los flagelos.
Microorganismos quimiohetertrofos: Obtienen energa a partir de la oxidacin de molculas
orgnicas.

-Procesos de obtencin de ATP, adenosn difosfato coge un fosfato y se crea el adenosn


trifosfato, a esto se le llama fosforilacin. Hay dos mecanismos:
Fosforilacin oxidativa: Sntesis de ATP asociada a una cadena respiratoria o cadena de
transporte electrnico.
Fosforilacin a nivel de sustrato: Determinadas reacciones catalizadas por un enzima en las
que participa el ADP, se modifica y se libera ATP.

-Procesos mediante los cuales los quimiohetertrofos obtienen la energa oxidando


materia orgnica.
La respiracin: Tiene dos variantes, puede ser aerobia (con oxgeno) o anaerobia (sin oxgeno).
1. RESPIRACIN AEROBIA
Molculas de glucosa (C6H12O6) sufren una serie de reacciones y se oxidan a pirvico (3C), los
electrones que pierde la glucosa van al NAD + que se reduce en NADH. Las bacterias tienen
varias vas distintas en las que se realiza este proceso, la ms importante es la gluclisis. El
pirvico an se puede oxidar ms, en una etapa en la que entra el CoA y se desprende CO 2,
convirtindose en acetil CoA. Entra en el ciclo de Krebs donde se liberan dos molculas de CO 2
por cada una de acetil CoA. Tambin se reduce un cofactor, el FAD al FADH 2.
La concentracin de cofactores en la clula es baja, sin embargo, a medida que la glucosa se
oxida el cofactor se reduce y tiene que regenerarse, es decir, tiene que ceder los electrones
que van a la cadena respiratoria, de manera que con poco cofactor se puede oxidar gran
cantidad de glucosa.

La cadena respiratoria se realiza en la membrana plasmtica y hay cuatro transportadores, que


van pasando el electrn y va producindose una reaccin redox. Cuando se ceden los
electrones se oxida. Va en sentido redox termodinmicamente favorable. El cofactor (NADH)
cede los electrones al transportador 1 en su forma oxidada, que se reduce este ltimo
transportador y luego se oxida para cedrselos al siguiente transportador (2) y a su vez va
expulsando protones fuera, generando un potencial.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


En la respiracin aerobia el aceptor final es el oxgeno, formndose agua. A medida que
funciona la cadena electrnica, se genera un potencial de membrana, ya que en el citosol hay
un defecto de cargas y en el exterior no. Eso ya es una forma de energa.
La molcula de glucosa se oxida, entonces tendremos los tomos de carbono ms reducidos.
En definitiva:

La glucosa se oxida completamente a 6 molculas de CO 2


Los electrones van a la cadena respiratoria desde el cofactor (NAD - o FAD-) y producen
el agua.

En la membrana los transportadores estn colocados de manera ordenada van pasando de un


transportador a otro en un mecanismo redox. Unos transportadores cogen y ceden electrones
protones, pero en unos los protones los ceden fuera. Hay un bombeo de electrones de dentro
a fuera (defecto de protones dentro y exceso de protones fuera) entonces se forma un
gradiente electroqumico que puede ser utilizado por las bacterias para algunas cosas. Esta
energa de protones es consumida por algunos transportadores destinados en la captacin de
nutrientes, otro caso es el movimiento del flagelo, que necesita consumir energa (no hace falta
que sea consumiendo ATP, pueden consumir directamente el gradiente de protones). En las
rutas metablicas s que la energa procede exclusivamente del ATP.

En la formacin de ATP, interviene un enzima denominado ATPasa, que consume el potencial


de membrana, lo elimina y a cambio sintetiza ATP. Lo que hace es cambiar el tipo de energa (la
energa ni se crea ni se destruye, solo se transforma). Esto es la fosforilacin oxidativa, la
formacin de ATP a partir del gradiente electroqumico. Las bacterias obtienen la mayor parte
por fosforilacin oxidativa, y una pequesima parte por fosforilacin a nivel de sustrato.

MICROBIOLOGA Eric Borrs

A medida que el potencial es


ms alto, tiene mayor
capacidad de coger
electrones

2. RESPIRACIN ANAEROBIA
Cuando se respira anaerbicamente, las 6 molculas de glucosa se oxidan a 6 molculas de CO 2
(igual que en la aerobia), los electrones van al cofactor que se reduce y los lleva al
transportador, pero el aceptor final de la cadena de transporte NO es el oxgeno
(anaerobia=oxgeno no interviene), entonces no se forma agua. El aceptor final puede ser
cualquier molcula que est oxidada, una molcula reducida no puede ser aceptor porque no
puede reducirse ms. Un ejemplo es el nitrato, otro el nitrito, las bacterias anaerobias cogen el
nitrato del suelo que es esencial para las plantas, son bacterias desnitrificantes y son
perjudiciales para las plantas por quitarles los nitratos. Otro ejemplo es el Fe 3+. Como no se
forma agua, se forma un producto en funcin a la molcula correspondiente que acta como
aceptor final de electrones.
Hay otro aspecto importante en la respiracin anaerobia, es que el aceptor final debe tener un
potencial de reduccin menor al del oxgeno. Es decir, puede tener tambin un potencial de
reduccin menor al de un determinado transportador de tal manera que no hace falta que sea
el ltimo transportador el que le ceda los electrones al aceptor final, ya que no sera reducirse,
sino oxidarse, puede ser ms corta la cadena de transporte, y por lo tanto, enviar menor
protones fuera.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


ATPasa: Consume el gradiente de protones y sintetiza ATP, y hacer lo contrario, consumir ATP y
expulsar protones, es un intercambiador de energa. De hecho el nombre ATPasa se debe a que
hidroliza ATP (a la segunda funcin).
Hemos visto que la respiracin aerobia, en la cadena de transporte de electrones los electrones
son cedidos al oxgeno y lo reduce, sin embargo, adems de formar agua tambin puede
formar otros productos que son agua oxigenada (H2O2) o el superxido (O2-) estas son muy
txicas y pueden acabar matando a la bacteria si se acumulan, por ese motivo, las bacterias
con respiracin anaerobia deben tener mecanismos para eliminar estas molculas, y para ello
emplean dos enzimas, que son la catalasa y el superxido dismutasa. Estas son dos enzimas
que se ocupan de eliminar las molculas txicas. La catalasa le quita el oxgeno al agua
oxigenada, formndose agua (H2O2 H2O + O2). El superxido dismutasa produce agua
oxigenada del superxido (2O2- + 2H+ H2O2 + O2).
Las bacterias anaerobias estrictas no tienen estos enzimas ya que en su hbitat no hay oxgeno.
3. FERMENTACIN
Caractersticas ms importantes de la fermentacin:
-No requiere la presencia de oxgeno, pero muchas veces no molesta, hay microorganismos
que fermentan con presencia de oxgeno.
-No hay cadena de transporte electrnico, por lo tanto, no se obtiene ATP por fosforilacin
oxidativa.
-El balance redox es neutro, ni se ganan ni se pierden electrones. En la respiracin, la glucosa
(C6H12O6) se oxidaba a 6 molculas de CO2, de tal forma que haba una prdida de electrones.
>La primera etapa de la fermentacin es la oxidacin parcial de la fuente de energa, la glucosa.
Hay diferentes vas para oxidar la glucosa, la ms famosa es la glucolisis. El producto final de
oxidar glucosa son dos molculas de pirvico. Al ser una oxidacin parcial, los electrones van al
cofactor (NAD+), reducindose, y se forman dos molculas de ATP por fosforilacin a nivel de
sustrato. El NADH reducido tiene que regenerarse, sin embargo, no cede los electrones a la
cadena respiratoria ya que no hay.
>La segunda etapa de la fermentacin es la reduccin del pirvico con los electrones del NADH,
que se transforma en los productos finales de la fermentacin, aqu tampoco se gana ni se
pierde electrones.
Los productos finales se acumulan, y son lo que dan nombre a la fermentacin.
Tipos de fermentacin:
-

Fermentacin homolctica: El producto final de la fermentacin es el cido lctico, el


lctico es igual que el pirvico pero sin un hidrgeno, generando el grupo cido (COO -).

Fermentacin heterolctica: Se obtiene lctico, pero tambin etanol y CO2. Este tipo
de fermentacin la hacen muchas bacterias, las ms importantes son las bacterias
lcticas. El yogur se obtiene por la fermentacin lctica de la leche, proceso realizado
por estas bacterias.

MICROBIOLOGA Eric Borrs

Fermentacin alcohlica: Es bastante parecida a la lctica, pero hay dos etapas.


Primero el grupo carboxi del pirvico se pierde y se forma acetaldehdo, luego se
reduce y se forma el etanol. De tal manera que se obtiene CO2 y etanol. La realizan las
levaduras. Este tipo de fermentacin tiene importancia industrial en la obtencin de
bebidas alcohlicas naturales (cerveza, champn) Fue Pasteur el que se dio cuenta
que la fermentacin ocurre gracias a los microorganismos.

Nuestras clulas tambin pueden fermentar en los casos en los que no tenemos oxgeno. Al
hacer mucho ejercicio, podemos llegar a realizar la fermentacin lctica, el lactato se acumula y
precipita, dndonos la sensacin de agujetas.
Los littrofos son auttrofos y anaerobios: La sustancia inorgnica reducida se oxida, esos
electrones van a la cadena de transporte de electrones produciendo ATP. Necesitan mucho
poder reductor. Una caracterstica importante de los litotrofos en general es que en el
anabolismo utilizan el CO2 como fuente de carbono, sin embargo, no sirve como fuente de
energa. El proceso por el cual el CO2 se incorpora a materia orgnica es el ciclo de Calvin, este
proceso consume energa y aparte consume electrones. Esto se debe a que este proceso es
justo lo contrario que en la respiracin.
La molcula que se oxida puede ser distinta, la cadena de electrones se inicia en el potencial
redox de la molcula que se oxida, tiene que cederle los electrones a una molcula con un
potencial redox menor, la consecuencia es que la cadena respiratoria es ms corta que si la
molcula que se oxida fuese el oxgeno.
En un transporte inverso de electrones, los electrones van de la molcula que tienen ms
afinidad a la que tiene menos, de manera que iran cada vez a una molcula con un potencial
de reduccin menor, de tal forma que se consume energa. Estos organismos viven en unas
condiciones desfavorables y no tienen competencia.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


TEMA 6

CRECIMIENTO MICROBIANO
Se trata del crecimiento de las poblaciones microbianas, como crece individualmente un
microorganismo.
El crecimiento de la poblacin microbiana se debe a que las clulas individuales crecen y se
dividen. Pueden crecer de varias maneras, tenemos varios modelos:
1. Divisin binaria o biparticin: Bacterias, protozoos, algas y algunas levaduras. La
bacteria con rutas catablicas obtiene energa, se va haciendo grande hasta un tamao
crtico en el que se divide tras la aparicin de un tabique, de tal manera que las dos
bacterias son idnticas a la primera que se ha dividido.
2. Gemacin: La mayor parte de las levaduras, que son organismos unicelulares
eucariotas. En un punto determinado de la superficie empieza a emitir una yema o
gema, esta yema empieza a hacerse grande hasta tener un tamao considerable,
entonces se forma un tabique entre la yema y la clula, se separan y la yema pasa a ser
una clula hija y la clula de la que proviene para a llamarse clula madre. Donde se
forma el tabique y se separan queda una marca, se llama cicatriz de gemacin. La
clula madre puede producir ms clulas hijas, y de la misma manera ir acumulando
cicatrices de gemacin.

3. Extensin de hifas: Es caracterstico de los hongos filamentosos. Crece porque el


material de nueva sntesis se incorpora en el pice. El filamento se denomina hifa, y
puede dividirse e ir creciendo por ramificaciones.
Hay microorganismos que pueden presentar dos morfologas, una detrs de otra:
Candida albicans: Al cambiar las condiciones ambientales puede ir cambiando el patrn de
crecimiento, puede empezar creciendo por gemacin y acabar ramificndose formando una
estructura compleja.
1. CRECIMIENTO EN CULTIVO PURO
La caracterstica ms importante en un cultivo puro es que es un crecimiento exponencial.
Cada cultivo tiene una velocidad de crecimiento. La velocidad de crecimiento es el aumento
del nmero de individuos en funcin del tiempo. Vc=dN/dt=k*N (k=cte de velocidad de
crecimiento, depende del microorganismo y las condiciones de cultivo) (N=N de
microorganismos)
El crecimiento exponencial se caracteriza porque cada cierto tiempo T (T= tiempo de
generacin) la poblacin microbiana se duplica. T=ln2/k
Un microorganismo crece ms rpido cuanto menor sea k

MICROBIOLOGA Eric Borrs


2. MTODOS DE RECUENTO DE MICROORGANISMOS
1. Recuento total de microorganismos en una muestra: Es el
ms simple de todos.. Se
S basa en colocar la muestra en un
portaobjetos especial, el cual tiene una cuadrcula
microscpica en la regin central. La distancia que hay entre
el porta y el cubre es muy exacta. Cuando enfocamos y
contamos los microorganismos
microorgani
sabemos el volumen que hay.
(Hacer
Hacer una regla de 3: Si
S tengo 22 microorganismos en X
volumen, en otro volumen tendr Y microorganismos). Es
un recuento directo, se cuentan
cuent tanto clulas vivas como muertas.
2. Recuento de microorganismos viables:
viables A partir de una suspensin o muestra tengo un
matraz de microorganismos, y para saber los vivos o viables se utiliza este mtodo.
mtodo Por
cada microorganismo que crezca se formar una colonia.
colonia. Se hacen una serie de
diluciones de 10 en 10 y ms tarde se siembra en una placa 1 mL de cada solucin. De
esa manera, podemos obtener el nmero de colonias contando las colonias de las
soluciones ms diluidas,
diluid y luego para saber el nmero de colonias
ias en la muestra
original multiplicar por el factor de dilucin. Es decir, se puede saber el total de
colonias a partir de una pequea porcin.
porcin
3. Determinacin de la masa de microorganismos: La masa de microorganismos es
proporcional al nmero (dos
(
millones de microorganismos pesan el doble que un
milln de microorganismos). Primero se separan por filtracin los microorganismos del
medio. Ese filtro tendr las bacterias, pero estar hmedo y no lo podr pesar,
entonces se realiza un secado previo, ya que se necesita obtener el peso en seco.
Tendr que filtrar volmenes relativamente grandes.
4. Medicin de la absorbancia de los cultivos: See emplea luz visible a 600nm. Cuantos
ms microorganismos haya en la muestra, menos luz pasar (ms turbidez),
turbidez) de tal
forma que la absorbancia ser mayor.
mayor Es el mtodo ms til en laboratorios porque
podemos hacer una grfica para cualquier tipo de microorganismo (Eje de Y =
Absorbancia a 600nm; Eje de X= nmero de microorganismos). Se obtendr una recta,
que acabar con
n una curva (la absorbancia acabar siendo constante ya que llegar un
punto que no traspase la luz y seguir en aumento el nmero de microorganismos). El
nmero de microorganismos equivale al peso seco de microorganismos (como en el
apartado anterior).

MICROBIOLOGA Eric Borrs


3. CURVA DE CRECIMIENTO DE UN CULTIVO PURO
Se realiza en unas condiciones determinadas, que favorezcan el crecimiento del
microorganismo. LogN (poblacin) en funcin del tiempo. Tiene varias fases:
Fase 1, Periodo de latencia:: El tiempo va pasando pero sin embargo, la poblacin no aumenta.
Es un periodo de adaptacin metablica y depende del tiempo que tarda la bacteria en
adaptarse.
logartmica Periodo de crecimiento: El tiempo de generacin es
Fase 2 o exponencial o logartmica,
constante,, pero la fase logartmica se acaba en unas pocas horas.
horas. Cuanto ms rpido crece,
crece
ms rpido llega a la fase estacionaria.
estacionaria En un momento dado, ell microorganismo deja de
crecer rpidamente por dos razones:
>La
La falta de nutrientes.
nutrientes
>El
El acmulo de sustancias
sustanc txicas del metabolismo del microorganismo (se crece por
fermentacin alcohlica, entonces se acumula etanol).
Fase 3 o de muerte,, Periodo de estacionamiento: Algunas bacterias, sin nutrientes y con
sustancias txicas, dejan de ser viables, de manera que
que la curva despus de mantenerse
constante desciende (LnN baja). Hay bacterias que se lisan, entonces se puede detectar una
cada de los viables, que depende del microorganismo
micro
y de las condiciones.

Cultivo sincrnico: Todas las clulas estn en la misma


misma fase del ciclo celular, y por lo tanto,
todas se dividen a la vez. Sin embargo, la sincrona no es perfecta, con el paso del tiempo se va
perdiendo. Para conseguir estos cultivos hay que partir de inculos
in culos que estn en el mismo
punto del ciclo celular.
El cultivo sincrnico es necesario para cosas relacionadas con el ciclo celular.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


Interesa a escala industrial tener un cultivo que no pare de crecer, que sea contnuo, de esta
manera, el producto de inters se obtiene de manera continua.
Cultivo continuo: Los microorganismos nunca dejan de crecer, la masa microbiana est
siempre en crecimiento. Un microorganismo deja de crecer por dos razones, la escasez de
nutrientes o la acumulacin de sustancias txicas, de manera que si se necesita que no pare de
crecer hay que cambiar el medio de cultivo mediante un aparato denominado quimiostato. El
nutriente limitante es el primer nutriente que se va a acabar, si en el medio que hemos
cambiado, pongo el nutriente limitante podremos determinar la concentracin de
microorganismos y si recambiamos el medio, la bacteria seguir creciendo, la velocidad de
crecimiento se podr controlar con la velocidad de recambio del medio y la concentracin de
nutrientes limitantes servir para controlar la concentracin de microorganismos.
En la naturaleza los microorganismos no estn en cultivo puro y hay competencia entre
microorganismos para adquirir los nutrientes ya que los nutrientes son limitantes, escasean.
En la naturaleza, el crecimiento de los microorganismos es ms lento.
Nuestro intestino funciona como un quimiostato, eliminando medio y adquiriendo nutrientes.
En el cuerpo humano hay mayor nmero de clulas procariotas (bacterias) que eucariotas. El
conjunto de microorganismos que viven en nuestro organismo comportndose como un
quimiostato es lo que se denomina microbioma.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


TEMA 7

EFECTO DE LAS CONDICIONES AMBIENTALES SOBRE EL


CRECIMIENTO MICROBIANO
1. TEMPERATURA
En su conjunto, los microorganismos crecen en un rango de temperaturas. Cada
microorganismo necesita una temperatura para poder crecer.
Temperatura mnima de crecimiento: Temperatura mnima para que el
microorganismo crezca, a media que aumente de la mnima el microorganismo crece
ms rpido.
Temperatura mxima de crecimiento:
crecimiento Temperatura mxima para que el
microorganismo crezca.
Temperatura ptima: Temperatura a la cual la velocidad de crecimiento es ptima.

La fluidez de una membrana tambin depende de la temperatura del medio.. Una bicapa puede
pasar de estar en forma lquida y viscosa a una forma ms ordenada y cristalina, perdiendo
pues sus propiedades de movimiento. Si la temperatura es suficiente baja (fro),
(fro) la membrana
se solidifica y pierde su caracterstica de permeabilidad selectiva ya que las protenas dejan de
ser funcionales. En cambio, si la temperatura es muy alta,
alta las protenas pueden llegar a
desnaturalizarse.
El fro conserva, el calor destruye.
destruye
Si yo cultivo un microorganismo a una temperatura subptima,
subptima, este alcanzara la fase
logartmica o exponencial.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


Cada microorganismo tiene sus intervalos de temperatura:
Psicrfilos: Crecen a temperaturas bajas (4 C).
Si un alimento est contaminado por psicrfilos,
psicr
no hay que meterlo en el frigorfico porque
seguira creciendo.
Mesfilos: Crecen a temperatura ambiente (39 C).
Termfilos: Requiere temperaturas elevadas (60 C).
Hipertermfilos: Requieren temperaturas muy elevadas (88 C).

2. pH
Cada microorganismo tiene su rango de pH para poder crecer.
pH mnimo: pH por debajo del cual el microorganismo no crece.
pH mxima: pH por encima del cual el microorganismo no crece.
pH ptimo: pH donde la velocidad de crecimiento del microorganismo es ptima.
Podemos clasificar los microorganismos
microorganismo segn el pH al que crecen:
Neutrfilos: Crecen a pH neutros.
Acidfilos:: Crecen a pH cidos.
Basfilos:: Crecen a pH bsicos.
(No confundir estos trminos con los del sistema inmunitario)

3. PRESIN OSMTICA
La pared celular protege
tege a los microorganismos de los cambios de presin osmtica del medio
que la rodea.
Es un mtodo de conservacin de alimentos. Los alimentos con una gran cantidad de sal o de
azcar no se contaminan ya que si cae un microorganismo, este pierde agua y se deshidrata.
En cambio hay microorganismos que pueden crecer en condiciones salinas muy altas. Son los
halfilos y hay dos tipos:
Halfilos facultativos: Que
ue pueden crecer en condiciones
con
sin laa elevada concentracin salina.
See adaptan a ambas condiciones.
Halfilos estrictos: See han adaptado tan bien a vivir con altas concentraciones salinas que
nicamente pueden crecer en estas condiciones.
condiciones
Osmfilos: Microorganismos que prefieren
prefieren altas concentraciones de solutos orgnicos en el
exterior celular.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


4. OXGENO
Segn crece en presencia de oxgeno:
-Aerobios estrictos: Organismos que para poder crecer necesitan oxgeno, nicamente crecen
as. Hay algunas especies que siendo aerobios estrictos crecen a bajas concentraciones de
oxgeno (microaerfilos), crecen mejor as.
-Anaerobios estrictos: Es el caso contrario, para poder crecer necesitan ausencia total de
oxgeno. El oxgeno es txico para ellos.
-Anaerobios facultativos: Microorganismos que pueden crecer tanto en ausencia como en
presencia de oxgeno. El oxgeno no afecta a su crecimiento.

Segn su metabolismo:
-Aerobios estrictos: Respiracin aerobia.
-Anaerobios estrictos: Respiracin anaerobia.
-Anaerobios facultativos: Sin oxgeno es respiracin anaerobia o fermentacin, y con oxgeno
es respiracin aerobia.
Adaptan su metabolismo pero, Es posible que existan microorganismos que no tengan ni
catalasa ni superxido dismutasa, pero para ellos, el oxgeno es txico?
S que existen porque, para empezar no tienen ni H2O2 ni O2-, entonces no tienen cadena de
transporte de electrones, entonces aunque haya oxgeno nunca utilizan el oxgeno como
aceptor electrnico. Entonces son organismos que consiguen la energa por fermentacin. Se
les llaman anaerobios aerotolerantes: No adaptan su metabolismo, siempre fermentan.
El cultivo de organismos anaerobios estrictos hay que hacerlo en una atmsfera sin oxgeno,
adems de los dems parmetros que hay que tener en cuenta para hacer un cultivo
Hay tres mtodos, que se suelen combinar por lo menos dos.
El primer mtodo consiste en aadir a los medios de cultivo sustancias reductoras como la
cistena, el sulfuro de sodio (Na2S), el cido ascarbato, el tioglicolato, etc Disminuyen el
potencial redox bajo, como con sustancias reductoras el oxgeno se consume oxidando a las
molculas dichas anteriormente.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


El segundo mtodo es el ejemplo de jarras de anaerobios, es muy simple, se trata de un
recipiente de diferentes
ntes tamaos diseados para colocar dentro las placas petri; este
recipiente tiene un cierre hermtico, las atmsferas no estn en contacto pero tienen la misma
composicin. Inyectamos gas por un extremo y el gas desplaza la atmsfera normal, pero en la
prctica se utiliza muy poco. Lo que se hace realmente es provocar una reaccin qumica que
produzca la consumicin de oxgeno en la molcula mediante combustin.

El tercer mtodo es cubrir el medio con parafina que evita el contacto con la atmsfera.
La sequedad inhibe el crecimiento y mata a los microorganismos, unos son sensibles y mueren
enseguida, y otros aguantan un poco ms. Hay unos microorganismos que se llaman xerfilos
que son un poco ms resistentes a la sequedad.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


5. RADIACIONES
La luz UV tiene un efecto negativo sobre los microorganismos, esta luz proviene del Sol.
Sol La
capa de ozono
ono absorbe gran parte de la luz UV que llega a la Tierra. A dosis bajas,
baja induce
mutaciones y a dosis altas mata microorganismos.
microorganismos
La longitud de onda del UV
V es de 260 nm, es un efecto muy superficial, entonces la luz UV
U se
utiliza para tratar ambientes.
Las radiaciones X y Gamma ()
) tienen menor longitud de onda, por lo tanto emiten ms
radiacin y son ms letales no solo para los microorganismos, sino tambin para otras formas
de vida como los mamferos.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


TEMA 8

CONTROL DEL CRECIMIENTO DE LOS


MICROORGANISMOS
Hay que controlar la poblacin microbiana para evitar los efectos negativos que producen,
como la transmisin de las enfermedades o para que se curen los humanos que estn
enfermos. O a nivel de industria farmacutica hay que prevenir la contaminacin microbiana.
-Esterilizacin: La destruccin total de toda forma de vida microbiana. Es un trmino absoluto,
o todo o nada.
nada Un material puede estar estril o no estarlo. Las esporas
tambin se eliminan.
elimi
-Desinfeccin: Eliminacin de las formas vegetativas de los microorganismos pero no
necesariamente de las esporas.
esporas

1. EL CALOR
En el calor
alor o temperatura elevada:

Calor hmedo:: Aplicacin de temperaturas elevadas en presencia de humedad o


vapor de agua,, es ms eficaz a la hora de matar microorganismos, los microorganismos
se coagulan o se desnaturalizan sus protenas. Las esporas para destruirse necesitan
entre 120 C durante veinte minutos (uperizacin).
Calor Seco:: Aplicacin de temperaturas elevadas en ausencia de humedad. Mata al
microorganismo por otro mecanismo en el cual elimina el agua y lo oxida por
combustin.
Las formas no esporuladas de los microorganismos
microorganismos mueren calentndolos a 70-80C,
70
pero an as hay microorganismos que son resistentes al calor.

Parmetros que describen la resistencia de los microorganismos al calor:


El tiempo de muerte trmica: El periodo de tiempo ms corto, el mnimo que hace falta para
destruir completamente a una poblacin microbiana a una temperatura y en unas condiciones
cond
determinadas.
Tiempo de reduccin decimal: El tiempo necesario para reducir la poblacin microbiana a un
10 % a una temperatura y a unas condiciones
determinadas.
La poblacin disminuye exponencialmente
respecto al tiempo en la grfica de la cintica
cin
de la muerte.
La temperatura aumenta con la pendiente.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


Factores que afectan a la muerte de los microorganismos por accin del calor:
Temperatura: A mayor temperatura, ms rpidamente son destruidos.
Nmero de microorganismos: A ms microorganismos har falta ms tiempo para destruirlos.
La especie de microorganismo: Hay unas especies ms resistentes que otras.
Estado fisiolgico del microorganismo: Las bacterias que estn en crecimiento exponencial
son ms sensibles que los que estn en fase estacionaria. Las esporas son formas de
resistencia, y sobre todo, formas de termorresistencia.
La composicin del medio: No es lo mismo tener los microorganismos en una suspensin
acuosa que en un medio seco. Cuanto ms viscoso sea el medio y ms presencia de materia
orgnica exista, el microorganismo estar ms protegido del calor, entonces tardar ms en
morir.
pH: A pH neutro son ms resistentes y a medida que nos alejamos de la neutralidad se
vuelven ms sensibles al calor.
Mtodos que emplean el calor seco en la esterilizacin:

Aire caliente (horno Pasteur): Se dejan durante 3 horas a 180C. Por debajo de 140C.
En un principio las esporas son resistentes.
Limitacin: No se puede meter en el horno los medios lquidos porque sino hervira y
se secara todo. Solo sirve para materiales que no contengan agua como el material de
vidrio.
Incineracin o flameado: Se trata de quemar la muestra esterilizada. Esterilizacin
automtica: Se utiliza para eliminar restos biolgicos contaminados con patgenos
peligrosos. Un ejemplo es la esterilizacin del asa de siembra.

Mtodos que emplean el calor hmedo en la esterilizacin y desinfeccin:

Ebullicin: Mtodo de desinfeccin pero no de esterilizacin.


Tindalizacin: Esterilizacin fraccionada o discontinua que consista en destruir las
formas vegetativas a 100 C durante treinta minutos. Esto lo dejaban enfriar un da a
temperatura ambiente. Despus se haca otro calentamiento a 100C durante treinta
minutos, y luego se dejaba enfriar unas horas. Y luego se volva a repetir una tercera
vez. Este mtodo mataba a las esporas indirectamente.
Vapor a presin (autoclave): Mtodo ms habitual. A una atmsfera de presin el
agua hierve a 100 C, cuando la presin del vapor del lquido llega a la presin
atmosfrica.

MICROBIOLOGA Eric Borrs

Hay una variacin de la autoclave que es el vapor fluyente.. Cuando hay que estabilizar por
calor hmedo, se inyecta a los grandes equipos vapor a sobrepresin. Esto imita
mita el efecto de la
autoclave.

Pasteurizacin: Pasteur prob a calentar el vino para evitar que se hiciese malo.
Consiste en aplicar un calor moderado durante
durante un periodo no muy largo. La
L idea es
destruir a los microorganismos pero preservando intactas las caractersticas orgnicas
del producto, es decir, creando un equilibrio.
equilibrio Por ejemplo, a 80C,, durante quince
minutos, se destruyen los microorganismos vegetativamente pero no se destruyen las
esporas. Un calentamiento ms suave a mayor tiempo (60C durante treinta minutos)
puede llegar a eliminar todos los patgenos pero sin esterilizar el producto. La
pasteurizacin de la leche se realiza para eliminar la carga microbiana o por lo menos,
muchos microorganismos y no las esporas, garantizando la
la duracin del producto. La
pasteurizacin flash consiste en calentar la leche a 72 C sin esterilizarla, sin eliminar
sus esporas bacterianas.
Uperizacin: Este s que es un mtodo de esterilizacin,
esterilizacin, es un tratamiento a 120C
120
entre 1 y 20 minutos.. Como es tan rpido, no se altera mucho el producto. El problema
de este mtodo es que la industria que lo realiza debe tener un equipamiento
adecuado y costoso,, cosa que encarece un poco el proceso.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


2.

AGENTES FSICOS

Temperatura baja: No son mtodos de desinfeccin o esterilizacin, pero s de conservacin.


Desecacin: Consiste en la eliminacin del agua. La prdida de agua produce una inhibicin
del crecimiento microbiano. Es un buen mtodo de conservacin, ya que sin agua no proliferan
los microorganismos.
Presin osmtica: Elevada concentracin de NaCl o elevada concentracin de azcar provoca
una inhibicin de la proliferacin, y por tanto, del crecimiento. El agua sale de la clula, pierde
volumen y si la concentracin es elevada durante mucho tiempo, los microorganismos dejan
de ser viables.
Radiaciones electromagnticas: Longitudes de onda muy variadas, desde muy energticas
hasta muy poco energticas. A medida que disminuye la longitud de onda, la energa es mayor
y ms penetrante. Las ms energticas son los rayos Gamma (), los rayos X y los UV.

Radiacin ultravioleta: Abarca aproximadamente entre 15 y 390 nm. Si representamos


el poder microbiano frente a la longitud de onda, la longitud de onda que tiene mayor
capacidad para destruir microorganismos es a 260 nm. El ozono filtra la radiacin
ultravioleta pero deja pasar longitudes de onda que son bactericidas. La radiacin
ultravioleta tiene un efecto letal para los microorganismos, afecta a sus bases
nitrogenadas produciendo alteraciones en el ADN. La alteracin ms frecuente son los
dmeros de timina, que se forman cuando en la secuencia de ADN hay dos nucletidos
que tienen timinas uno despus de otro, estas timinas absorben la radiacin UV y
forman entre ellas un enlace covalente, entonces esto interfiere en la transcripcin y la
replicacin. Por lo tanto, esto tiene un efecto muy negativo sobre la viabilidad de los
microorganismos, y estos han evolucionado formando mecanismos para reparar
rpidamente el ADN. Uno de los mecanismos es el S.O.S. El S.O.S consiste en que una
endonucleasa elimina la parte daada (el dmero de timina), a continuacin, la ADNpolimerasa copia otra vez esa parte daada. La ADN-polimerasa es muy rpida pero
introduce muchos errores, con lo cual aumenta la frecuencia de mutacin.

La radiacin UV produce mutaciones en los microorganismos, se emplea como agente


mutgeno. A dosis elevadas las mutaciones llegan a acumularse y los microorganismos dejan
de ser viables. Es un buen mtodo para esterilizar pero es un mtodo poco penetrante. Solo
esteriliza ambientes o superficies.

Los rayos X: Son difciles de manipular, son letales para toda forma de vida.
Los rayos Gamma (): Son muy penetrantes, atraviesan grandes espesores. Se utilizan
para esterilizar paquetes con alimentos empaquetados.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


Las ondas snicas y ultrasnicas: Los ultrasonidos son ondas de elevada frecuencia. No los
podemos or pero cuando atraviesan un lquido con microorganismos en suspensin mata a la
mitad de la poblacin. No son tiles para esterilizar o desinfectar. S que se utilizan para
obtener extractos celulares.
MTODOS MECNICOS
-Filtracin: Mtodo de esterilizacin que se aplica con disoluciones con molculas con
actividad biolgica que no se pueden tratar ni con calor ni con radiacin para no desnaturalizar
las protenas que intervienen en la actividad biolgica. Se hace pasar la muestra por un filtro
que tiene millones de poros y se puede conocer las dimensiones del poro, puede haber poros
de 0,01 micrmetros en los que los virus o las partculas de microorganismos quedan
retenidos. Lo que pasa por el filtro se esteriliza. Los problemas que tiene este mtodo son
varios, uno de ellos es que es un proceso lento, para acelerar el paso del lquido hay que
aplicar una presin, positiva por arriba, o negativa por debajo. Hay que tener la siguiente
precaucin, el recipiente donde recojo el lquido tiene que estar estril. La solucin que se
filtra tiene que estar muy limpia porque si no, se obtura el filtro y entonces ya no pasara
lquido. Los filtros pueden ser en cuanto a su composicin, de porcelana, de celulosa, de
amianto (asbesto) o de vidrio poroso.
-Sedimentacin: Se basa en la densidad del microorganismo. En un liquido en reposo, si los
microorganismos son ms densos que el agua, sedimentan. En el laboratorio puede acelerarse
este proceso mediante la centrifugacin (a 1000c o 2000c durante 4 o 5 minutos). En el
laboratorio se utiliza para separar el medio de cultivo de los microorganismos, pero no se
utiliza para la esterilizacin ni para la desinfeccin.

3. AGENTES QUMICOS
Los agentes qumicos se emplean en desinfeccin y antisepsia, y tambin como conservantes
de alimentos, y para el tratamiento de enfermedades infecciosas (quimioterpicos).
Desinfeccin: Un desinfectante es una sustancia qumica que desinfecta, que destruye a los
microorganismos pero no siempre a las esporas. La ebullicin es un agente fsico que
desinfecta pero no esteriliza. Los desinfectantes son bastante txicos, ya que no distinguen
entre los microorganismos y nuestras clulas, por ese motivo, normalmente se aplican sobre
un material inerte o inanimado. Por eso se dice que no tienen toxicidad selectiva. Los
antispticos son un grupo de desinfectantes ms suaves, que se pueden colocar sobre la piel y
aplicar en las heridas. Evita que los microorganismos proliferen los tejidos, tienen toxicidad
selectiva.
Quimioterapia: Cura las enfermedades infecciosas mediante las sustancias qumicas. Los
quimioterpicos antimicrobianos son estas sustancias qumicas. Tienen que destruir al
microorganismo sin que afecte a nuestras clulas, tienen toxicidad selectiva.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


Conceptos:

Palabras acabadas en cida (matar): Microbicida, que mata microorganismos.


Bactericida, que mata bacterias. Virocida, que mata virus. Fungicida, que mata
hongos.
Palabras acabadas en sttico (que inhibe el crecimiento): Bacterosttico, inhibe el
crecimiento de las bacterias. Microbiosttico, inhibe el crecimiento de los microbios.
Antimicrobiano: Aquella sustancia que resulta perjudicial para los microorganismos.
Quimioesterilizantes: Sustancias qumicas muy concretas que son muy txicas para
todo tipo de clula y que matan a todo tipo de microorganismo, incluido a las esporas.
Sirven para desinfectar y esterilizar.

Los desinfectantes tienen muchas caractersticas, entre ellas destacan:

Eficaces ante una amplia variedad de agentes infecciosos.


Actan a baja concentracin y presencia de materia orgnica.
No son txicos para las personas, ni corrosivo para los materiales. No hay que quemar
el material a desinfectar.
Penetrante (baja tensin superficial, soluble en agua y lpidos). Capacidad de
atravesar distintos tipos de material, desinfeccin en profundidad.
Activos a temperatura corporal (en el caso de los antispticos, esto es importante)
No generan resistencia.

4. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ACCIN ANTIMICROBIANA DE LOS DESINFECTANTES

Relacionados con el desinfectante/sustancia qumica: Dependen de las caractersticas


del desinfectante (gas, polvo, soluble en agua, insoluble en agua).
Relacionados con el microorganismo:
La especie de microorganismo: Cada especie es ms o menos resistente a un
desinfectante. Algunos son ms efectivos para algunas especies y otros son
menos efectivos, o directamente no lo son.
El estado fisiolgico del microorganismo: Las bacterias en crecimiento activo
son ms sensibles al desinfectante que las que no crecen. Las esporas son
formas de resistencia a muchos desinfectantes.
El nmero de microorganismos: El desinfectante no destruye a los
microorganismos de forma igual, cuantos ms microorganismos haya en la
muestra, ms concentracin de desinfectante o ms tiempo se necesita para
eliminarlos.
Relacionados con las condiciones ambientales en las que se va a realizar la
desinfeccin
El tiempo de actuacin del desinfectante: Algunos son inestables, y su efecto
desinfectante se descompone enseguida. A mayor tiempo, mayor desinfeccin.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


La temperatura: A mayor temperatura, mayor capacidad desinfectante.
La naturaleza del material desinfectante: Es importante la ausencia de materia
orgnica (que protege a los microorganismos del poder del desinfectante).
El pH: A pH neutro, menor poder desinfectante. Y a pHs extremos, mayor
poder desinfectante.
5. EVALUACIN DEL PODER ANTIMICROBIANO DE UN DESINFECTANTE
Determinacin del coeficiente del fenol: CF es el coeficiente o la divisin de
la mayor dilucin del desinfectante problema que mata a un microorganismo
en diez minutos, pero no en cinco, entre la mayor dilucin de fenol que hace
lo mismo, mata a un microorganismo en diez minutos, no en cinco. Son
diluciones que deben de hacer lo mismo, pero una est 10 veces ms diluida
que la de abajo, por lo tanto al estar 10 veces ms diluido, es 10 veces ms
potente. Se hace en suspensiones acuosas, no ocurre en un medio de cultivo. Se preparan
distintas diluciones de la sustancia problema, y distintas diluciones de fenol en agua. A tiempo
0 inoculo el microorganismo en todos los tubos de ensayo, y a los cinco minutos saco una
muestra de cada tubo y lo paso a un medio de cultivo. Se hace un cultivo anotando los
resultados. Si no crece a los cinco minutos, ha muerto. Se hace con las bacterias Gram
positivas y Gram negativas.
Determinacin de la concentracin mnima inhibitoria: Se hace en medio de cultivo. Se
prepara una serie de tubos que contienen medio de cultivo, un tubo control sin desinfectante
y los dems con desinfectante, pero cada vez con ms concentracin. Se inocula el
microorganismo y se lleva a la estufa para que las bacterias crezcan. En el blanco crecen
mucho, y en los tubos cada vez que se aumenta la concentracin de desinfectante hasta un
tubo donde que no crece ms. Ser la concentracin mnima inhibitoria (CMI). Los problemas
que tiene este mtodo es que estamos trabajando con disoluciones concretas, y vamos a
saltos, entonces posiblemente no se tenga el tubo con la concentracin exacta en el que se
empieza a inhibir el crecimiento. Este problema se evita con el siguiente mtodo.
Mtodo de difusin en agar, o halos de inhibicin: Esta tcnica se utiliza para ver la
capacidad microbiana de los desinfectantes o para valorar la resistencia de los
microorganismos a los quimioterpicos. Consiste en hacer una suspensin de microorganismos
en una placa petri con medio de cultivo, no para aislar colonias, sino para sembrar
completamente la placa. Antes de incubar se coloca un papel de filtro que contiene una cierta
cantidad de sustancias (X) en medio de placa, entonces ya se lleva a una estufa a incubar. El
medio como es slido lleva agua, el desinfectante X empieza a difundir en todas direcciones y
diluyndose en el medio, entonces alrededor del disco se crea un gradiente de
concentraciones. A medida que nos acercamos al disco hay ms concentracin. Entonces el
microorganismo crecer a lo largo de toda la placa hasta un crculo que hay alrededor del
disco, en el cual no hay crecimiento del microorganismo, hay un halo de inhibicin. En un
punto del crculo debe haber una concentracin mnima inhibitoria. Es una medida indirecta
de la CMI. El halo es inversamente proporcional a la CMI, cuanto ms sensible es un
microorganismo, ms grande ser el halo.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


Cuanto ms resistente sea el microorganismo, ms pequeo ser el halo. Se puede hacer ms
de un disco. Los halos de inhibicin dependen de la cantidad de agente microbiano.
En el antibiograma: La pendiente es negativa, para cada antimicrobiano es diferente, pero son
todas de pendientes negativas. Cuando el halo es grande, la CMI es baja y viceversa.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


TEMA 9

CLASIFICACIN DE LOS PRINCIPALES AGENTES QUMICOS


DESINFECTANTES
Pregunta de examen: Cita dos o tres desinfectantes que se empleen como antispticos y cita su
forma de accin.
Atendiendo al criterio de modo de accin:

1. AGENTES QUE ALTERAN LA PERMEABILIDAD CELULAR (MEMBRANA PLASMTICA)


Muchos desinfectantes provocan que se pierdan iones o molculas de la membrana
plasmtica. Casi todos tienen actividad detergente, que fosforilan lpidos de membrana y la
destruyen.

Jabones naturales: Sales sdicas/potsicas de cidos grasos de cadena larga con una
base. El cido graso + la base forma agua con la cadena larga carbonada COO-Na. La
parte del cido graso con el grupo carboxilo negativo es la que tiene la actividad
detergente. Disuelven los lpidos de membrana, desinfectan y lavan. Estas molculas
tienen algunos inconvenientes, la actividad detergente (antimicrobiana) reside en el
anin, entonces cuando ocurre deben emplearse medios cidos. Los grupos carboxilos
que son cidos dbiles en medio cido cogen un protn y se desactivan, pierden su
actividad. O en aguas pesadas con calcio y magnesio tambin pierden sus propiedades.

Detergentes sintticos: Actan exactamente igual que los jabones pero son de origen
sinttico formado en el laboratorio. La parte que tiene actividad tensoactiva y de
detergente puede ser el anin o el catin. Desnaturalizan protenas, al alterar su
conformacin o inactivar enzimas.

Sales de amonio cuaternario: Son un grupo de detergentes sintticos catinicos que


tienen nitrgeno que forma un amonio ya que tiene cuatro grupos radicales con carga
positiva unido a un cloro (negativo). Su parte detergente la contiene el amonio con sus
radicales libres. Son antispticos.

cidos y bases fuertes: Se usan muy poco ya que son muy corrosivos. Causan la
hidrlisis de los enlaces celulares. No son antispticos y se usan a nivel de laboratorio.

MICROBIOLOGA Eric Borrs

2. AGENTES QUE DESNATURALIZAN PROTENAS (INACTIVAN ENZIMAS)

Alcoholes: Etanol o isopropanol son los nicos que se utilizan como desinfectantes. No
se utilizan alcoholes ms largos porque tienen problemas de solubilidad. Son efectivos
cuando estn en solucin acuosa en concentraciones de 70-80%. No destruyen las
esporas. Tambin disuelven lpidos. Son antispticos.

Fenoles y sus derivados: Es el desinfectante de referencia para determinar el CF.


Algunos pueden matar las esporas.

Halgenos y sus derivados:


Yodo y derivados: Tintura de yodo, mancha mucho. Antispticos ms
utilizados a nivel domstico u hospitalario.
Cloro gas y derivados: Cloraminas que cuando estn en presencia de
agua liberan oxgeno y oxidan componentes celulares inactivndolos.

Agentes oxidantes (agua oxigenada, permanganato, dicromato): Oxidan radicales SH


y NH2 de las protenas, desactivndolas. Actan como antispticos. El agua oxigenada
(perxido de hidrgeno) se puede utilizar vaporizada para tratar distintas instalaciones
(salas de operaciones, cabinas de seguridad biolgica, etc) al cabo del tiempo se
descompone en agua y oxgeno.

Metales pesados: La parte activa son los cationes. El mercurio, la plata y el cobre.
Desinfeccin de piscinas para la proliferacin de algas. El nitrato de plata tambin se
utiliza para la oftalmina gonococida geonatal, gonorrea..

Agentes alquilantes: Alquilan grupos reactivos de protenas y cidos nuclicos


(quimoesterilizantes: Esporicidas)
- Formaldehido: Solucin acuosa o alcohlica (poco penetrante, accin lenta y
txico/irritante). Vaporizaciones/fumigaciones.
- Glutaraldehido: 2% (bactericida, tuberculicida, viricida). Accin rpida.
Tratamiento de material quirrgico, instrumental mdico,
- Oxido de etileno: Esporicida. Explosivo (se diluye con gases inertes). Muy
penetrante (envoltorios plsticos). Se utiliza para la esterilizacin de material
plstico (placas de Petri, jeringuillas, etc...)
- Beta-propionolacatona: Ms rpida (eficaz) que el xido de etileno, pero
menos penetrante. Lquido a t ambiente. Se inactiva en pocas horas.
Carcingeno. Uso ocasional para tratar suero, vacunas, etc

La resistencia de los microorganismos a los antibacterianos tiene que ver con la


resistencia a los quimioterpicos.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


TEMA 10

AGENTES QUIMIOTERPICOS
La quimioterapia es el empleo de sustancias qumicas para el tratamiento de de las
enfermedades causadas por los microorganismos (enfermedades infecciosas).
Quimioterpico: Sustancia qumica que se suministra a personas para curar las enfermedades.
1. CLASIFICACIN DE LOS AGENTES QUIMIOTERPICOS
Segn su origen se clasifican en:

Naturales: De origen natural, puede provenir de las plantas como la quinina para
tratar la malaria. Tambin pueden provenir de fondos marinos para los productos
farmacuticos. Los ms importantes son los antibiticos, que es un grupo de
quimioterpicos naturales fabricados por los propios microorganismos, que tienen
actividad microbiana.
Sintticos: Molculas de sntesis qumica en el laboratorio. Estas sustancias entran en
nuestro cuerpo y tienen que cumplir muchos requisitos. Desde el punto de vista
microbiolgico el requisito ms importante es el de la toxicidad selectiva. Tienen que
ser txicos para los microorganismos e inculos para las personas (que no afecte a las
clulas eucariotas). La toxicidad selectiva se debe a que cada quimioterpico acta
sobre un microorganismo inhibindolo porque acta sobre una estructura o ruta
metablica tpica de los microorganismos, y este sitio por donde acta el
quimioterpico cuya diana est solo sobre los microorganismos y no sobre nuestras
clulas, a esto se le llama toxicidad selectiva. Por si las tiene sobre todas las clulas no
tendr toxicidad selectiva.
Si un antibitico acta sobre una estructura que solo est en microorganismos, tendr
toxicidad selectiva.

2. ESTRUCTURAS O PROCESOS QUE ESTN EN LAS BACTERIAS PERO NO EN NUESTRAS


CLULAS
La murena (todos los antibiticos o quimioterpicos que afecten a la murena tendrn
solo la diana en los microorganismos), los ribosomas (inhiben la sntesis proteica pero
solo afecta al ribosoma 70s, aunque nosotros tambin tenemos ribosomas 70s en las
mitocondrias)
En las infecciones causadas por los hongos, como nuestras clulas son similares (son
eucariotas), es ms difcil que existan antimicrobianos selectivos. Adems, los
antifngicos tienen los efectos secundarios ms importantes que los antimicrobianos.
Los virus tienen muy pocas dianas especficas. Hace unas dcadas haban muy pocos
antivricos, cada vez hay ms. La mayora de enfermedades vricas no se tratan.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


3. LA HISTORIA DE LA QUIMIOTERAPIA
A principios del siglo XX se empez a desarrollar, cuando se dieron cuenta de que los
microorganismos causaban las infecciones. Tambin es en esta poca cuando se dieron las
tinciones. Paul Erhcich pens que podran existir unas sustancias derivadas de colorantes.
Pens que podan existir algunas sustancias que intervinieran con las clulas microbiolgicas
en vez de con todas las clulas porque no tean las clulas humanas. Eran los primeros
compuestos sintetizados que se utilizaban en la curacin de las enfermedades infecciosas
causadas por protozoos y bacterias.
En 1909 se describi una sustancia llamada Salvarsn para el tratamiento de la sfilis.
En 1929 Fleming descubri la penicilina que se desarroll con la Segunda Guerra Mundial para
tratar heridas de los soldados
En 1935 Domagk descubri el primer quimioterpico de sntesis derivado de la sulfanilamida
que serva para tratar varias enfermedades.
Lo que realmente vence a las infecciones es nuestro sistema inmunitario, la quimioterapia
nicamente ayuda. Las personas inmunodeprimidas, aunque sean tratadas con quimioterapia,
son muy susceptibles a las enfermedades infecciosas.
El espectro de accin de un quimioterpico o un antibitico hace referencia al conjunto de
especies microbianas que son afectadas por ese quimioterpico. De amplio espectro y de
espectro reducido segn la cantidad de microorganismos a los que afecte. Depende de la
diana, de la cantidad de microorganismos con esa diana que sea accesible.
Existe el problema tambin de la resistencia de los antibiticos, cosa muy importante y
aparece con el abuso de los antibiticos, sustituyendo la poblacin sensible al microorganismo.
Existen tcnicas para el estudio de las resistencias de los microorganismos, teniendo en cuenta
la sensibilidad y la resistencia del microorganismo. Esto se denomina antibiograma.

4. EL ESPECTRO DE ACCIN
El espectro de accin de un antibitico es el conjunto de microorganismos que son afectados
por dicho antibitico. Un antibitico con un amplio espectro de accin acta sobre muchos
microorganismos y, si tiene un reducido espectro de accin acta frente a un reducido nmero
de microorganismos. El espectro de accin depende de la presencia de diana (para que un
antibitico acte ha de haber una diana) y la accesibilidad (que la diana sea accesible al
antibitico).

MICROBIOLOGA Eric Borrs


5. ASOCIACIN O COMBINACIN
COMBINA
DE QUIMIOTERPICOS
Puede ser bueno o malo el efecto combinado
Hay varias posibilidades:
-Relacin de indiferencia: No
o tiene ningn efecto el uno sobre el otro, realizan su funcin por
separado.
quimioterpicos se suma, el efecto conjunto es igual a la suma de
-Adicin: El efecto de los dos quimioterpicos
los dos efectos de los quimioterpicos, por separado.
-Sinergismo: Cuando
uando el efecto combinado de los dos quimioterpicos es superior a la suma de
cada uno de ellos separados, es decir, se potencia
potencia el efecto. Se aconseja la asociacin.
-Antagonismo: Cuando se neutralizan
neutraliza los dos efectos. Ell efecto conjunto de los dos
quimioterpicos es inferior al que tienen cada uno de ellos por separado.
Con difusin en agar empleando tiras, se puede ver el efecto
efecto combinante de los dos
quimioterpicos.
Una tira contiene el antibitico A, la bacteria crecer hasta que alcance la CMI, a partir de ah
se inhibir. Otra tira contiene el antibitico B, la bacteria crecer hasta que alcance la CMI.

Vemos una relacin de indiferencia entre el antibitico A y el antibitico B.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


6. GRUPOS DE QUIMIOTERPICOS DE SNTESIS QUMICA EN EL LABORATORIO

Sulfamidas: Son un conjunto de quimioterpicos que comparten una estructura en


comn. Tienen en comn que son derivados del compuesto sulfanilamida, entre ellas
se diferencian por el radical de la cadena lateral que lleva el nitrgeno. La
sulfanilamida es el primer quimioterpico que se investig. Lo que hacen las
sulfamidas es causar una inhibicin competitiva de la biosntesis del cido flico. En la
ruta del cido flico hay una serie de etapas que llevan al cido flico, en una de ellas
se incorpora un compuesto, el cido paraaminobenzoico (PABA). Es un metabolito,
molcula que est en la clula y que participa en la biosntesis del cido flico. Un
precursor se une al PABA y de ah entra en la ruta. Las sulfamidas son anlogas al
PABA. El enzima que cataliza esta reaccin es la dihidropteroato sintasa, que
incorpora el PABA y forma un precursor de la sntesis del cido flico. Si hay una
sulfamida, el enzima no lo distingue y lo incorpora, entonces se genera un compuesto
que no es precursor de la sntesis de cido flico y entonces no se forma. Es adems
una reaccin competitiva por el enzima entre estas dos molculas. El cido flico es un
cofactor de reacciones enzimticas de metilacin que participan en la biosntesis de
bases nitrogenadas y algunos aminocidos. Si no hay cido flico se bloquea esa
sntesis.
El folato es necesario para la replicacin del ADN. Por esto, la deficiencia de folato
dificulta la sntesis y divisin celular, afectando principalmente la mdula sea.

Derivados de las quinolonas: En funcin de los radicales hay derivados.


Las quinolonas actan a distintos niveles, inhiben especficamente a la DNA girasa
bacteriana. Esta inhibicin impide la replicacin.
Derivados de los azoles: Inhiben la biosntesis de ergosterol. Inhiben una de sus
etapas. El ergosterol es un lpido que pertenece al grupo de los esteroles que forman
parte de la membrana de los hongos, nosotros tenemos esteroles pero no es
ergosterol, es colesterol. Es un compuesto antifngico, no antibacteriano, ya que las
bacterias no tienen ergosterol.
Flucitosina o 5-flucitosina: La estructura es una base nitrogenada (citosina) con un
flor en el carbono 5. La forma activa, el metabolito que tiene el efecto microbiano es
el fluorouracilo. Para pasar de flucitosina a fluorouracilo, hay una enzima que aade
un grupo amino que lo convierte, esta enzima es la citosina deaminasa. Los enzimas
que sintetizan los nucletidos en vez de coger la base nitrogenada correcta cogen el
fluorouracilo, entonces se producen mutaciones y errores en la traduccin. Cuando en
la secuencia de ADN se incorporan anlogos a bases nitrogenadas, cuando se aparean
se aparean con bases distintas de las que se aparearan normalmente, cosa que induce
a las mutaciones. Es un antifngico.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


7. QUIMIOTERPICOS DE ORIGEN NATURAL O ANTIBITICOS
Los antibiticos son sustancias antimicrobianas producidas por los propios micoorganismos.
No solo las bacterias producen antibiticos, los hongos tambin los producen. Cada especie o
gnero produce un antibitico (especificidad)
Los gneros ms importantes son:
En las bacterias:

En los hongos:

-Gnero Streptomyces

-Gnero Penicillium:

-Gnero Micromonospora

-Gnero Cephalosporium

-Gnero Bacillus

8. PRINCIPALES GRUPOS DE ANTIBITICOS


Segn su modo de accin o dnde actan:

1. Antibiticos que inhiben la sntesis de murena


La biosntesis de la murena es un proceso complejo, las cadenas precursoras de la murena se
forman en el citosol. Luego tiene que atravesar la membrana plasmtica para salir fuera, lo
consiguen gracias a un lpido. Una vez fuera, se incorpora a la estructura de la murena,
unindose los aminocidos mediante la reaccin de transpeptidacin. Los antibiticos que
inhiben la murena son:
-Bacitracina: Afecta a nivel del lpido transportador que se encarga de translocar la cadena
nueva de murena.
-Vangonicida: Se une a los aminocidos del tetrapptido, inhibiendo la transpeptidacin.
-Las penicilinas y las cefalosporinas: Son producidas por hongos. Se llaman antibiticos lactmicos ya que en ambos casos tienen un anillo lactmico.
La estructura bsica de la que derivan todas las penicilinas es el cido aminopenicilnico. Se
diferencian en el radical que se une al NH. Eso les confiere distintas propiedades a las
penicilinas.
Las cefalosporinas derivan del cido aminocefalospornico.
El anillo -lactmico es fundamental para la accin de los antibiticos de las penicilinas y
cefalosporinas. Adems, hay bacterias que pueden romper estos anillos produciendo por ellas
mismas unas enzimas llamadas -lactamasas, entonces son resistentes a los -lactmicos.
Muchas son penicilinas naturales, y luego el qumico en el laboratorio las modifica, pasan a ser
penicilinas semisintticas para mejorar sus propiedades.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


Las propiedades que se mejoran de las penicilinas son:
Conseguir penicilinas resistentes a pH cido.
Ampliar el espectro de accin, modificando el anillo -lactmico.
Penicilinas resistentes a las -lactamasas.
Cambiar su hidrofobicidad para que atraviesen la membrana celular y puedan realizar su
efecto.
La penicilina para ser bactericida, la bacteria tiene que estar en crecimiento, sintetizando
murena porque, si no crece, la penicilina no tiene efecto. Entonces si no hay sntesis de
murena, la penicilina no sirve.

2. El ribosoma 70s acta de diana, interfiere en la funcin del ribosoma.


Provoca produccin de protenas anmalas.

Si actan sobre la subunidad pequea (30s): Los inhibidores son los aminoglucosdicos
(estreptomicina, neomicina, kanamicina) y tetraciclinas.
Si actan sobre la subunidad grande (50s): Los inhibidores son el cloramfenicol,
eritromicina (antibiticos macrlidos), lincomicina, etc

Estos antibiticos son txicos si entran en la mitocondria.


La mayora son bacteriostticos (excepto los aminoglucosdicos).

3. Actan sobre membranas biolgicas:


Son antibiticos ms txicos, actan modificando la permeabilidad selectiva de las
membranas biolgicas.

Si desorganizan la estructura de las membranas:


-Polinicos (anfotericina B y nistatina): Tienen afinidad por los esteroles de la
membrana plasmtica (los esteroles son caractersticos de las clulas eucariotas), y
concretamente, por el ergosterol (hongos) por eso se dice que se emplean como
antifngicos, en infecciones superficiales o internas, alterando la permeabilidad. Son
bastante txicos pero se utilizan en tratamientos infecciosos fngicos internos.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


-Polipeptdicos:: (Polimixinas, tirocidina) Los sintetizan las bacterias cuando
esporulan. Se llaman as porque su estructura deriva de la unin de varios
aminocidos. Tienen afinidad por los fosfolpidos de la membrana plasmtica,
plasmtica
desorganizndola y modificando su funcin.
f
Los fosfolpidos estn en todas las clulas,
por lo tanto, van a ser antibiticos muy txicos. Se emplean contra infecciones
infe
bacterianas y fungicidas.

Si alteran la permeabilidad de las membranas:


-Ionforos: Muy txicos no se emplean en clnica. Forman poros en la membrana
permitiendo
tiendo el paso de los cationes.

4. Antibiticos que actan sobre los cidos nuclicos

Si actan directamente sobre la estructura del ADN:


-Mitomicina
tomicina C o bleomicina: Son muy txicos, debido a que el ADN ess similar en todas
las clulas. No
o se deben emplear como antimicrobianos, pero algunos se emplean
como anticancerosos.
anticancerosos
Las clulas tumorales son ms sensibles, ya que crecen ms rpidamente que las no
tumorales (mayor
ayor nivel de sntesis de ADN).

Si actan sobre la sntesis de los cidos nuclicos:


Algunos son bastantes selectivos y se emplean en clnica como quimioterpicos
antibacterianos, sobre
bre todo frente a Gram positivos:
-Novobiocina: Inhibe la replicacin porque su diana
diana es la ADN girasa bacteriana.
-Rifampicina: Inhibe la ARN polimerasa bacteriana,
bacteriana, enzima encargada de la
transcripcin.

9. NUEVOS ANTIBITICOS ANTIFNGICOS: LAS EQUINOCANDINAS


Las equinocandinas
as son antibiticos antifngicos que se utilizan para tratar infecciones
fngicas. La glucansintasa es una enzima que est en la membrana plasmtica de los hongos, y
sintetiza glucano (polisacrido de la pared celular de muchos
muc
hongos). Son una alternativa a los
antibiticos que actan sobre las membranas biolgicas, como la anfotericina B.
Las equinocandinas inhiben la sntesis de glucano.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


10. RESISTENCIA A LOS ANTIBITICOS
Hay millones de microorganismos, y antibiticos tambin hay muchsimos, pero no todos los
antibiticos afectan de la misma forma a todos los microorganismos, hay unos ms sensibles
que otros. Hay dos tipos de resistencia:
-Resistencia intrnseca: El microorganismo es resistente debido a su propia estructura, no
requiere contacto previo con el antibitico. Puede ser por la ausencia de diana para el
antibitico, como los hongos, que resisten a la penicilina; o porque la diana sea una diana a la
que el antibitico no pueda llegar, es decir, que sea inaccesible para el antibitico. Algunas
bacterias Gram negativas son resistentes.
-Resistencia adquirida: Una poblacin bacteriana que inicialmente es sensible por el
antibitico pero tras el contacto con el antibitico se vuelve resistente. Se debe a que el
antibitico produce un efecto sobre la poblacin, pero si queda algn microorganismo con
alguna mutacin con la que no puede verse afectado, este prolifera y crea una nueva
poblacin resistente a dicho antibitico. Esta resistencia es la ms importante. Desde el punto
de vista clnico presenta un problema, hace que la industria farmacutica tenga que buscar
nuevos medicamentos.

A nivel gentico, la adquisicin de la resistencia se debe a:

Mutacin cromosmica: Algunas bacterias se hacen resistentes porque al gen que


codifica la diana le aparece una mutacin, entonces ya no es reconocida por el
antibitico. Las mutaciones son graves porque como afecta al cromosoma, pasa de la
clula madre a las clulas hijas.

Factores de resistencia (factores R): Genes que codifican las protenas responsables
de la resistencia, que se encuentran en plsmidos. Los plsmidos son molculas de
ADN circular independientes al ADN de la bacteria, y que tienen un origen de
replicacin propio. Los plsmidos se transfieren por conjugacin entre bacterias, eso
hace que la resistencia se transmita de una bacteria a otra y que no sea de forma
hereditaria.

MICROBIOLOGA Eric Borrs


11. MECANISMOS POR LOS CUALES UNA BACTERIA ES RESISTENTE A LOS
QUIMIOTERPICOS

Ausencia de diana (resistencia intrnseca).


Impermeabilidad (resistencia intrnseca).

Modificacin de la diana (resistencia adquirida).


Modificacin de la ruta metablica (resistencia adquirida): Ocurre cuando la diana es
una ruta metablica. Una bacteria que produzca niveles altos de cido
paraaminobenzoico (PABA) ser resistente.

Modificacin del antibitico (resistencia adquirida): Ocurre cuando las bacterias


tienen enzimas que modifican el antibitico, inactivndolo.