UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN

MARCOS
(Universidad del Per, Decana de Amrica)

FACULTAD DE QUMICA E INGENIERA

QUMICA
E.A.P. INGENIERA AGROINDUSTRIAL

CURSO

:
LABORATORIO
INSTRUMENTAL

DE

ANLISIS

(DEMOSTRATIVA)
TEMA

: CROMATOGRAFA DE GASES

PROFESOR
:
AGUIRRE MEDRANO

QUIM.

ROSA

VIRGINIA

INTEGRANTE

Pampa Cntaro John

Rueda Pajuelo Nicols

CROMATOGRAFIA DE GASES
1.- Fundamento de la Cromatografa de Gases.
En cromatografa de gases la muestra se volatiliza y se inyecta en la
cabeza de una columna cromatogrfica. La elucin se produce por el
flujo de una fase mvil que es un gas inerte, y a diferencia de la mayora
de los tipos de cromatografa, la fase mvil no interacciona con las
molculas del analito; su nica funcin es la de transportar el analito a
travs de la columna.
Respecto a la cromatografa lquida, la cromatografa de gases tiene la
ventaja de disponer de detectores mucho ms universales (por ejemplo,
el de ionizacin de llama). Adems, para numerosas aplicaciones, los
mtodos son ms simples, ms rpidos y ms sensibles que los
correspondientes a la cromatografa lquida de alta resolucin. La
instrumentacin requerida para cromatografa de gases tambin es
mucho ms sencilla y econmica que la empleada en HPLC. Sin
embargo, en cromatografa de gases, la influencia de la temperatura
sobre la distribucin del equilibrio es considerable, a diferencia de la
cromatografa lquida. Por ello, la cromatografa de gases presenta
limitaciones en tres casos:

compuestos poco voltiles, generalmente los de peso molecular superior

a 300 u.m.a.
compuestos sensibles a una elevacin de la temperatura incluso
moderada (determinados compuestos de inters biolgico)
compuestos que se encuentran en forma inica (puesto que son e n
general poco voltiles)
Por esta razn, la cromatografa de gases se emplea cuando los
componentes de la mezcla problema son voltiles o semivoltiles y
trmicamente estables a temperaturas de hasta 350-400C. En cambio,
cuando los compuestos a analizar son poco voltiles y/o termolbiles, la
tcnica separativa adecuada suele ser la cromatografa lquida de alta
resolucin (HPLC).
A menudo la cromatografa de gases se emplea para confirmar de la
presencia o ausencia de un compuesto en una muestra determinada.
2.- Indicar del equipo utilizado:

Marca: SHIMADZU
Modelo: GC 2010 PLUS
Software: LAB solutions

3.- Describir los componentes de un Cromatgrafo de Gases

- Inyector
En esencia, los dispositivos de inyeccin de muestras para cromatografa
de gases tienen la misin de vaporizar la muestra a analizar e
incorporarla a la corriente de gas portador que se dirige hacia la
columna. La vaporizacin e introduccin de las muestras en el sistema,
debe realizarse cumpliendo una serie de requisitos:
1.- La vaporizacin de la muestra debe ser lo ms rpida posible.
2.- La vaporizacin debe realizarse sin discriminar ningn componente
de la muestra.
3.- La muestra debe llegar a la columna como una banda lo ms fina
posible.
Tipos de inyectores
a

Inyectores para columnas empaquetadas:

La inyeccin de muestras en columnas empaquetadas no presenta
problemas particulares; este tipo de columnas admiten cantidades
de muestra relativamente elevadas, y la inyeccin de unos cuantos
microlitros de muestra no conduce a una merma apreciable de la
eficacia de la columna.

Inyectores para columnas capilares:

La diferencia fundamental entre los sistemas que utilizan columnas
empaquetadas y los que utilizan columnas capilares, radica en que la
cantidad de muestra que estas ltimas pueden separar es mucho

menor que en el primer caso; por otra parte, las columnas capilares
son muy afectadas por los disolventes, de forma que los volmenes
que se pueden inyectar en ellas son extremadamente bajos. Dado
que no existen jeringas capaces de medir con precisin volmenes
inferiores a 0,1 l, los inyectores utilizados para trabajar con este
tipo de columnas, adems vaporizar la muestra y mezclarla con el
gas portador, debern ser capaces de introducir en la columna slo
una alcuota de la muestra total inyectada.

Modos de inyeccin
-

Inyeccin con divisin de muestra

Este tipo de inyeccin (ms conocida como inyeccin split), es el
ms sencillo de los que se utilizan en cromatografa capilar. El
inyector de split (figura 4), consta bsicamente de los mismos
elementos que un inyector normal, con la nica adicin de un sistema
de divisin de flujo a la salida de la cmara de mezcla. Por medio de
este tipo de inyector, el flujo de gas portador que pasa a travs del
inyector (y por lo tanto tambin la muestra vaporizada), se divide en
dos; una parte es introducida en la columna y la otra escapa fuera del
sistema a travs de una vlvula de aguja que permite regular la
proporcin de gas que es introducido en la columna.

Inyeccin splitless
En la tcnica de inyeccin splitless, la totalidad de la muestra
inyectada es dirigida hacia la columna, que se mantiene durante la
inyeccin a una temperatura inferior al punto de ebullicin del
componente ms voltil de la muestra. La totalidad de la muestra
inyectada, lgicamente condensa en la cabeza de la columna,
actuando en este caso el disolvente condensado en la columna a
modo de trampa donde se concentran los componentes a analizar
(efecto solvente). Transcurrido un tiempo adecuado, se abre en el
inyector una vlvula de purga con el fin de barrer a la atmsfera el
disolvente vaporizado que pudiera quedar en el inyector; al mismo
tiempo, se comienza un programa de calentamiento de la columna
para realizar el anlisis.

Inyeccin en columna
Los sistemas de inyeccin en columna (normalmente conocidos por
su nombre ingls de on-column), han sido diseados para posibilitar
la introduccin de muestras directamente en el interior de columnas
capilares.

Temperatura del inyector: 200-250 C

- Horno
El horno de un cromatgrafo de gases, tiene como misin el mantener la
columna termostatizada a una temperatura fijada con gran precisin
(dentro de unos lmites de 1 EC); por otro lado, es necesario que el
control de termostatizacin del horno permita incrementar la
temperatura de ste a una velocidad prefijada y constante (para trabajar
con tcnicas de temperatura programada). Evidentemente, el primer
requisito es fcil de cumplir, pero cuando se requiere trabajar con
temperatura programada, el horno debe cumplir una serie de requisitos
tales como tener escasa inercia trmica (particularmente si es necesario
realizar rampas de temperatura muy rpidas) y poseer un sistema de
control de temperatura muy sofisticado que incluya la posibilidad de
programar las posibles variaciones de temperatura del horno as como
los tiempos a los que han de realizarse.
- Columnas
Al igual que sucede en todas las tcnicas cromatogrficas, la columna es
el corazn del cromatgrafo de gases. Es necesario tener siempre
presente que la columna es el autntico elemento de separacin de los
componentes de la muestra; as, una mala eleccin de la columna, una
columna deteriorada o unas condiciones de trabajo inadecuadas, nunca
permitirn obtener buenos resultados aunque se disponga del mejor
equipo en el resto del cromatgrafo, siendo adems las causas citadas
las responsables de la inmensa mayor parte de los problemas que se
encuentran a la hora de realizar un anlisis por cromatografa de gases.
Una columna para cromatografa de gases, est formada por un tubo,
que puede ser de diversos materiales (preferiblemente inertes), dentro
del cual se encuentra la fase estacionaria. Esta puede ser un slido
activo (cromatografa gas slido), o con mayor frecuencia un lquido
depositado sobre las partculas de un slido portador (columnas
empaquetadas o de relleno) o sobre las propias paredes del tubo
(columnas tubulares abiertas).
Clases de columnas
- Columnas empaquetadas
Las columnas empaquetadas consisten, en un tubo (normalmente de
vidrio o acero inoxidable) con un dimetro interno que vara entre 2 y 5
mm y de una longitud que oscila entre 1 y 15 m, arrollado de una forma

adecuada para
cromatgrafo.

poderse

introducir

en

el

interior

del

horno

del

En el interior del tubo, se dispone la fase estacionaria bajo la forma de

un lquido soportado sobre un material adecuado finamente pulverizado;
el dimetro de las partculas del relleno debe ser, al menos, 10 veces
inferior al dimetro del tubo, con el fin de conseguir una buena
uniformidad en su distribucin. El relleno, se encuentra confinado en el
interior del tubo por medio de tapones del algn material poroso
(generalmente lana de vidrio o lana de cuarzo) situados en los extremos.

- Columnas tubulares abiertas

Las columnas tubulares abiertas (conocidas normalmente como
columnas capilares) fueron descritas inicialmente por Golay en 1957, y
se encuentran entre las ms ampliamente utilizadas debido a la gran
eficacia de separacin que proporcionan. Bsicamente, una columna
tubular est formada por un tubo (normalmente de vidrio o slice
fundida) de un dimetro comprendido entre 0,2 y 0,8 mm, en cuya pared
interna se dispone la fase estacionaria. Segn sea la forma en que se
dispone la fase estacionaria sobre la pared del tubo, se distinguen
bsicamente dos tipos de columnas:
a

Columnas WCOT (Wall Coated Open Tubular). En este tipo de columnas

(que son las de uso ms frecuente), la fase estacionaria se encuentra
depositada formando una pelcula lquida directamente sobre las paredes
del tubo.
b Columnas PLOT (Porous Layer Open Tubular. En estas columnas la
pared interna del tubo est recubierta por una capa de un soporte
adsorbente; si a su vez el soporte est impregnado con una fase
estacionaria lquida, las columnas son denominadas SCOT (Support
Coated Open Tubular.
Fase estacionaria
La fase estacionaria tiene en cromatografa de gases un papel
fundamental, ya que la fase mvil es cromatogrficamente inerte y las
separaciones son debidas exclusivamente a las interacciones especficas
que se dan entre los componentes de la muestra y la fase estacionaria.
Como en casi todos los casos, las propiedades deseables de una fase
estacionaria son con frecuencia contradictorias, por lo que no existe la
fase estacionaria ideal. Las propiedades que debera cumplir una fase
estacionaria son:

1.- Debera tener un rango de temperaturas de utilizacin lo ms amplio

posible (idealmente entre -60 y 400 EC).
2.- Debe tener una presin de vapor lo ms baja posible.
3.- Debe ser trmicamente estable.
4.- Debe ser qumicamente inerte.
5.- Debe tener baja viscosidad en las condiciones de trabajo.
6.- Debe mojar bien el soporte, presentando adems una adherencia
suficiente como para que no sea arrastrada por la fase mvil.

Las caractersticas de mayor inters a la hora de seleccionar una fase

estacionaria concreta son el rango de temperaturas de trabajo, la
viscosidad de la fase dentro de este rango y su capacidad para
interaccionar de forma selectiva con diferentes solutos. Como norma
general, la temperatura ms baja de utilizacin de una fase estacionaria
corresponde a su temperatura de fusin. El lmite superior de
temperatura de una fase estacionaria es la temperatura ms elevada a
la que puede mantenerse sin que se produzcan descomposiciones o
sangrados significativos. Muchas fases estacionarias polimricas
presentan una dispersin importante en su rango de pesos moleculares,
por lo que los oligmeros que puedan contener se evaporarn dejando la
columna con una proporcin de fase estacionaria mucho menor de lo
previsto; en estos casos, la mxima temperatura de uso se define como
aquella a la que se puede mantener la fase estacionaria durante 24
horas sin cambios apreciables en las caractersticas de retencin de la
columna
- Detector
Una vez que los componentes de la muestra han sido separados por la
columna, se hace preciso el disponer a la salida de sta de un sistema
de deteccin, capaz de sealar la elucin de un componente de la
muestra y ofrecer, al mismo tiempo, una seal proporcional a la cantidad
de substancia que pasa a travs de l.
Los detectores utilizados en cromatografa de gases son de tipo
diferencial, no ofrecen seal cuando pasa por ellos solamente el gas
portador y responden ante alguna propiedad que pueda variar cuando
ste se encuentra mezclado con alguna substancia eluida de la columna.
Detector FID

En cromatografa de gases, el detector de ionizacin de llama (FID) es

uno de los detectores ms extensamente utilizado y, por lo general, uno
de los ms aplicables. En un quemador, el efluente de la columna se
mezcla con hidrgeno y con aire para luego encenderse elctricamente.
Detector ECD
El detector de captura de electrones (ECD) opera casi de la misma forma
que un contador proporcional para la medida de radiacin X. En este
caso el efluente de la columna pasa sobre un emisor , como nquel-63 o
tritio (adsorbido sobre una lmina de platino o de titanio). Un electrn
del emisor provoca la ionizacin del gas portador (con frecuencia se trata
de nitrgeno) y la produccin de una rfaga de electrones. De este
proceso de ionizacin, en ausencia de especies orgnicas, resulta una
corriente constante entre un par de electrodos. Sin embargo, la corriente
disminuye en presencia de molculas orgnicas que tiendan a capturar
los electrones. La respuesta es poco lineal, a no ser que el potencial a
travs del detector se aplique en forma de impulsos.
Gas portador
El gas portador es bsicamente inerte en la separacin puede ser helio,
argn, nitrgeno o hidrogeno, por lo que la eleccin de uno u otro
depender en cada caso de las necesidades del equipo y, de forma
secundaria, de las necesidades de rapidez del anlisis.
4. Describir el procedimiento y ejemplos realizados.
La prctica de laboratorio consisti en el reconocimiento del equipo, donde los
estudiantes vimos las partes que forman un cromatgrafo de gases.
La figura 1. muestra las partes bsicas de un equipo de CG. El gas portador es
almacenado a alta presin en un cilindro apropiado conectado al equipo
mediante un regulador de presin. La muestra que contiene los analitos se
introduce en el sistema mediante jeringas, utilizando los inyectores. El inyector
est a una temperatura superior a la del punto de ebullicin del disolvente de
la muestra y normalmente, tambin superior al de los analitos; y es ah donde
se produce la necesaria volatilizacin.
La muestra se diluye con gas portador y solo una fraccin de la misma entra en
la columna capilar. Esta es la misin del divisor de muestra. En la columna se
realiza la separacin. Tras atravesar la columna, los analitos llegan a los
detectores, donde se produce una seal elctrica que es amplificada y enviada
a un sistema de almacenado de datos para ser analizado, observando los
cronogramas obtenidos y se comparndolos.

Figura 1.

5. Dar 6 ejemplos de aplicacin de esta tcnica en el rea

agroindustrial, mencionando el analito, matriz, columna utilizada, gas
portador y detector.
En la actualidad la cromatografa de gases es una tcnica analtica usada en
muchos laboratorios universitarios, de investigacin e industriales, debido a su
alta resolucin, sensibilidad y selectividad.
Adems de las aplicaciones tpicamente analticas, la cromatografa de gases
puede utilizarse a escala preparativa para la obtencin de compuestos de
elevada pureza, as como tambin es posible la obtencin de datos fsicoqumicos
Esta tcnica puede ser aplicada, principalmente en estudios:

Medioambientales: Anlisis de pesticidas y herbicidas, anlisis de

hidrocarburos, semivoltiles y voltiles, anlisis del aire
Alimentos y aromas: fragancias y aromas, aceites, bebidas, cidos
orgnicos, azcares, FAMES, steres metlicos, triglicridos, alcoholes
Qumica Industrial: alcoholes, cidos orgnicos, aminas, aldehdos y
cetonas, steres y glicoles, hidrocarburos, disolventes, anilinas, gases
inorgnicos
Bio-ciencia: drogas, frmacos, alcoholes y contaminantes en sangre,
disolventes residuales
Derivadas del petrleo: gas natural, gases permanentes, gas de
refinera, gasolinas, gasleos, parafinas.

EJEMPLOS:
a) identificacin de algunos componentes en el vino y el alcohol
Matriz: vino y alcohol
Analito: componentes (metanol, etanol y propanol)

Gas portador: aire, helio, hidrogeno

Columna: columna capilar restec-07248, stabilwax, longitud 100m
Detector: detector de ionizacin de llama
b) anlisis de hidrocarburos en calizas
Matriz: hidrocarburos en forma de asfaltos contenidos en poros de rocas
carbonatadas
Analito: hidrocarburos
Gas portador: helio
Columna: columna capilar de 30m x 0.25mm, modelo DB-5
Detector: detector de ionizacin de llama (FID)
c) Anlisis de un alimento para determinar su contenido de protenas
Matriz: combustin del alimento 700-800 C (cenizas)
Analito: nitrgeno
Gas portador
Columna: tipo capilar
Detector: detector de conductividad trmica
d) identificacin y cuantificacin de fitoesteroles en semillas de luffa cylindrica
Matriz: aceite de semillas de luffa cylindrica
Analito: 5 Colestano, Colestanol, Ergosterol, Estigmasterol, -sitoesterol
Gas portador: helio
Columna: columna MXT5, serie 508529G1, longitud 30m
Detector: tipo ionizacin de llama (FID)
e) Determinacin de etanol en cerveza
Matriz: cerveza
Analito: etanol
Gas portador: Helio
Columna: tipo capilar, longitud de 30 m, dimetro interno del tubo es de 0.5
m
Detector: ionizacin de llama (FID)
f) determinacin de plaguicidas en frutas y verduras (Calabacita, tomate verde,
jitomate saladette)
Matriz: extraccin solido-liquido de los vegetales con acetato de etilo
Analito: carbofurn, alfa-endosulfn, malatin y metamidofos
Gas portador: helio
Columna: tipo capilar
Detectores: espectrometra de masas

6. VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LA CROMATOGRAFA DE GASES

La cromatografa de gases es una de las tcnicas ms usadas, para anlisis de
hidrocarburos. Las ventajas que presenta, como alta sensibilidad, deteccin
selectiva, elevada eficiencia en la separacin, versatilidad, pequeo tamao
de muestra para efectuar el anlisis y sencillez, son ampliamente reconocidas
por toda la comunidad cientfica. Ninguna otra tcnica analtica puede
conseguir un poder de separacin y sensibilidad equivalente para compuestos
orgnicos voltiles.
Normalmente, el anlisis por cromatografa de gases tarda unos minutos;
muchas separaciones tiles se completan en 10 minutos. Con altas presiones
se han terminado anlisis completos en apenas unos segundos. Sin embargo,
en la mayora de los anlisis de laboratorio este ahorro en tiempo no reduce
apreciablemente el tiempo total involucrado en la toma de la muestra, el
anlisis cromatogrfico y el clculo de los resultados.
Una de las razones por la que se usa la cromatografa de gases en los anlisis
es la sensibilidad conseguida. El detector de conductividad trmica puede
fcilmente medir microgramos. El detector de ionizacin de llama fcilmente
mide nanogramos, y los detectores ms selectivos como el de captura de
electrones, y el detector fotomtrico de llama alcanzan los picogramos.
Debido a esta sensibilidad, la cromatografa de gases es un mtodo preferido
para el anlisis de trazas, particularmente de hidrocarburos, y dems
contaminantes orgnicos del aire y del agua. La muestra requerida es mnima,
para completar un anlisis bastan unos microlitros. Otra ventaja de la
cromatografa de gases es que permite obtener muy buenos resultados
cuantitativos. Se puede obtener buena exactitud en una amplia gama de
concentraciones de la muestra, desde miligramos hasta nanogramos.
Una de las limitaciones de la CG es que todas las muestras deben ser voltiles;
de lo contrario, no pasaran a travs de la columna. Con la CG es difcil tratar
compuestos inicos, compuestos de elevada polaridad, y compuestos de peso
molecular muy alto. Otra desventaja es que el mtodo cualitativo no es tan
eficiente. Por lo general, para identificar la muestra se compara el tiempo de
retencin de patrones y muestras conocidas. Por tanto muchas veces es difcil
confirmar la identidad de una muestra debido a que varios compuestos pueden
tener tiempos de retencin muy similares [36]. Estas desventajas no son gran
inconveniente para el anlisis de los hidrocarburos alifticos ya que ellos son
bastante voltiles, sus pesos moleculares no son grandes y tienen una
polaridad baja.

BIBLIOGRAFIA
Skoog D., Holler F. y Nieman T.; Principios de Anlisis instrumental; 5 a Ed. Mac
GRAW HILL, Espaa 2001; pg. 738, 739, 759, 765, 770, 771.
http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/cromatografia_de_gases.pdf
http://repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstream/handle/11059/3038/66028423A6
96.pdf?sequence=1