Misin del programa: La formacin de profesionales qumicos que lideren el desarrollo, potencien la investigacin y apoyen el

aprovechamiento de los recursos naturales del entorno mediante procesos cientficos y tecnolgicos.

UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA

FACULTAD DE CIENCIAS, Escuela de Ciencias Qumicas
Laboratorio Electiva Interdisciplinar Principios en Fotoquimica y Fotobiologia

Anglica Mara Garca T

INTRODUCCIN A LA ESPECTROSCOPIA DE FLUORESCENCIA

(SIMULACIN VIRTUAL)
CONSULTA PREVIA A LA PRCTICA (preinforme)
1. Proponga objetivos tanto generales como especficos de la prctica a desarrollar
2. Descargue
el
programa
FluSpec
el
cual
se
encuentra
en
la
pgina:
http://stephenbigger.github.io/FluSpec/: una vez se encuentre en la pgina de click al link
https://github.com/stephenbigger/FluSpec/releases que se encuentra en la seccin de
Instalacin.
3. Abra el fichero y ejecute la accin: FluSpec.exe
3. Lea atentamente la ventana de teora sobre el fenmeno de la fluorescencia. A partir de su
lectura responda:
a. Defina estado singlete y estado triplete
b. A qu se refiere el trmino: relajacin vibracional? Y punto cero?
c. Qu define el principio de Franck-Condon?
d. Dibuje y explique los principales fenmenos que se recopilan en un Diagrama de Jablonski
e. Defina: regla de kasha, regla de la imagen especular y corrimiento de Stokes (para cada caso,
apyese en un dibujo)
f. Dibuje y explique los componentes principales de un fluormetro
g. Qu es el rendimiento cuntico de fluorescencia?
h. Dibuje las estructuras qumicas, espectros de absorcin y consulte los usos de: bisulfato de
quinina y de rodamina B.
i. En este laboratorio, no es necesario realizar diagrama de flujo ni ficha de seguridad.
PROCEDIMIENTO:
1. Realice el ejercicio 1 de la seccin Experimento (numerales 1-13 y el 16) utilizando como
Fluorforo la rodamina B. No olvide imprimir el espectro realizado as como los datos ms
relevantes de longitudes de emisin, excitacin y rango del scan. A partir de los resultados que
se obtuvieron en el numeral 16, qu es el scattering de Rayleigh?
2. Realice el ejercicio 1 ahora desde los numerales 14-15 utilizando como Fluorforo el bisulfato
de quinina.Tenga en cuenta realizar el espectro tanto en presencia como ausencia del apagador
o quencher (NaCl). No olvide que la quinina no absorbe en el mismo rango que la rodamina B
asi que realice los respectivos ajustes. Imprima los espectros obtenidos as como los datos ms
relevantes de longitudes de emisin, excitacin y rango del scan.
3. Realice el ejercicio 2.1 de la seccin Experimento. Tenga en cuenta que el numeral 5 propone
utilizar diferentes longitudes de onda de excitacin asi que para cada caso, imprima los
resultados obtenidos en los respectivos espectros.
4. Adicionalmente, para la rodamina B, utilice diferentes valores de concentracin (5) de la muestra
y realice los respectivos espectros de fluorescencia. Imprima los resultados obtenidos indicando
los valores de concentracin empleados.
5. Adicionalmente, para el bisulfato de quinina, utilice utilice diferentes valores de concentracin (5)
del apagador NaCl y realice los respectivos espectros de fluorescencia. Imprima los resultados
obtenidos indicando los valores de concentracin empleados.
6. Por qu el NaCl es una sustancia apagadora de fluorescencia?
7. Responda las preguntas que propone el ejercicio 2.1. Los subsiguientes ejercicios y preguntas del
programa de simulacin, NO deben ser desarrollados ni respondidos por usted.

8. Analice y discuta los resultados obtenidos. Presente sus resultados de la forma ms clara posible
apoyndose en el uso de tablas, grficos, No olvide el planteamiento de las conclusiones sobre la
prctica realizada.

BIBLIOGRAFA
BIGGER, S.W., BIGGER, A.S., GHIGGINO, K.P. 2014. FluSpec: A Simulated in Fluorescence
Spectroscopy. Journal of Chemical Education. 91, 1081-1083.
BIGGER,
S.W.
FluSpec:
A
Simulated
in
Fluorescence
http://stephenbigger.github.io/FluSpec/ (consultado el 22 de abril de 2015)

Spectroscopy.

En:

BIGGER, S.W., GHIGGINO, K.P., MEILAK, G.A., VERITY, B. 1992. Illustration of the Principles in
Fluorimetry: An Apparatus and Experiments Specially Designed for the Teaching Laboratory. Journal
of Chemical Education. 69, 8, 675-678.

Visin del programa: El programa de qumica de la UPTC para el ao 2019 se proyecta en el mbito nacional como uno de los lderes en
la gestin y desarrollo de procesos de investigacin, apropiacin, adaptacin e innovacin de ciencia y tecnologa en qumica.